No / We describe a series of experiments designed to investigate the conformational transition that highly-branched polymers with ligands undergo when interacting with bacteria, a process that may provide a new sensing mechanism for bacterial detection. Fluorescent highly-branched poly(N-isopropyl acrylamide)s (HB-PNIPAM) were prepared by sequential self-condensing radical copolymerizations, using anthrylmethyl methacrylate (AMMA) and fluorescein-O-acrylate (FA) as fluorescent comonomers and 4-vinylbenzyl pyrrole carbodithioate as a branch forming monomer. Differences in reactivity necessitated to first copolymerize AMMA then react with FA in a separate sequential monomer feed step. Modifications of the chain ends produced vancomycin-functional derivatives (HB-PNIPAM-Van). The AMMA and FA labels allow probing of the conformational behaviour of the polymers in solution via Forster resonance energy transfer experiments. It was shown that interaction of this polymer's end groups with Staphylococcus aureus induced a macromolecular collapse. The data thus provide conclusive evidence for a conformational transition that is driven by binding to a bacterium.

O objetivo deste trabalho foi avaliar, por meio de estudo in vitro, o efeito de soluções químicas de higienização quanto à ação antimicrobiana e os efeitos sobre as propriedades da resina acrílica termicamente ativada. Para a ação antimicrobiana, corpos de prova circulares (15mm x 3mm) foram esterilizados por radiação em forno micro-ondas e contaminados com suspensão de 106 UFC/mL dos microrganismos: Candida albicans, Candida glabrata e Streptococcus mutans e incubados a 37ºC por 48hs. Em seguida, os espécimes foram imersos nas seguintes soluções: Grupo I - PBS (controle); Grupo II - Solução à base de Ricinus communis a 6,25%; Grupo III - Hipoclorito de sódio 0,20%; durante 20 minutos, e, Grupo IV - Peróxido Alcalino Efferdent® Power Clean Crystals, durante 3 minutos, e lavadas (PBS) e imersas em meio Letheen. A suspensão resultante foi diluída (100 e 10-3) em solução salina estéril e alíquotas foram semeadas em meio específico. Após incubação (37ºC por 24hs), as colônias foram contadas para o cálculo de UFC/mL. Para análise das propriedades da resina acrílica, corpos de prova circulares (15mm x 3 mm) e retangulares (65mm x 10mm x 3,3 mm) foram imersos nas soluções, simulando 05 anos de imersões curtas. Antes e após as imersões, foram submetidos a análise de cor (Colorímetro Color Guide 45/0) e NBS (NBS=&Delta;E* x 0,92); de dureza Knoop (microdurômetro Microhardness Tester Shimadzu); de rugosidade de superfície (rugosímetro Surftest SJ - 201P, Mitutoyo Corporation; microscópio confocal a laser 3D Olympus LEXT OLS4000®, Japão); de morfologia de superfície (microscópio eletrônico de varredura EVO 10 - MEV, Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Alemanha); e de resistência à flexão (Máquina Universal de Ensaios DL 2000, EMIC). Os dados com distribuição normal foram analisados por ANOVA, seguido pelo teste de Tukey; os dados com distribuição não-normal, foram analisados pelos testes de Kruskal-Wallis e Dunn (&alpha;=0,05). Os resultados mostraram que o hipoclorito reduziu a zero a contagem de UFC dos três micro-organismos, os grupos do Ricinus communis e do peróxido Efferdent tiveram ação moderada frente Candida glabrata (p<0,001) e S. mutans (p=0,001), respectivamente. Quanto as propriedades da resina, a solução de Ricinus communis causou leve alteração de cor (p=0,030), segundo NBS; maiores alterações de dureza (p<0,001), rugosidade superficial em rugosímetro (p=0,006) e microscópio 3D (p=0,040) e da resistência à flexão (p<0,001). A maior alteração da morfologia de superfície (MEV) foi observada no grupo do peróxido Efferdent. Pode-se concluir que a solução de hipoclorito de sódio a 0,20% foi a mais efetiva, uma vez que apresentou ação antimicrobiana frente aos três micro-organismos avaliados; as soluções de Candida glabrata e Streptococcus mutans, respectivamente. Quanto à análise das propriedades da resina acrílica, nenhuma das soluções causou alteração clinicamente significante nas propriedades avaliadas / The purpose of this in vitro study was to evaluate the antimicrobial action and adverse effects of denture cleansers on a heat-polymerized acrylic resin. The antimicrobial action was evaluated by samples fabricated on a metallic circular matrix (15mm x 3mm), which were sterilized by microwave (650W, for 6 minutes) and inoculated with a 106 CFU/ml of microorganisms´suspension: Candida albicans, Candida glabrata, and Streptococcus mutans. After contamination, the specimens were incubated at 37ºC for 48hs and then immersed on the following solutions: Group I - Saline (control); Group II - Ricinus communis 6.25% solution based; Group III - Sodium hypochlorite 0.2%; Group IV - Alkaline Peroxide Efferdent® Power Clean Crystals. The samples were then washed (PBS) and immersed in the Letheen medium. The resulting solution was diluted (100 and 10-3) in sterile saline, and aliquots were cultured in the specific medium. After incubation (37ºC for 24hs), according to with characteristic morphology, the number of colonies was measured and the number of CFU / mL calculated. For the adverse effects, circular (15 x 3 mm) and rectangular (65 x 10 x 3.3 mm) test specimens of heat-polymerized acrylic resin were immersed in the solutions, simulating 05 years of short immersions per sanitation period. Before and after the immersions, the samples were evaluated for color alteration (Color Guide Color Guide 45/0) and correlation of the data according to NBS units (NBS = &Delta;E * x 0,92); Knoop hardness (Microhardness Microhardness Tester Shimadzu). Analysis of surface roughness (Surftest SJ-201P rugosimeter, Mitutoyo Corporation; Olympus LEXT OLS4000® 3D laser confocal microscope, Japan), surface morphology (scanning electron microscope EVO 10 - MEV, Carl Zeiss Microscopy GmbH, Jena, Germany); and flexural strength (Universal Testing Machine DL 2000, EMIC) was done. The data that presented normal distribution were analyzed by ANOVA and post-hoc Tukey test; Data that presented non-normal distribution were analyzed by the Kruskal-Wallis and Dunn test (&alpha;= 0.05). The results showed that hypochlorite reduced the CFU of the three microorganisms to zero, the solution of Ricinus communis and Efferdent peroxide had an average action against Candida glabrata (p <0.001) and Streptococcus mutans (p = 0.001), respectively. The solution of Ricinus communis showed color changes (p = 0.030), classified as &ldquo;light&rdquo; according to NBS; (p <0.001), and higher values of surface roughness, when analyzed by the rugosimeter (p = 0.006) and 3D microscope (p = 0.040), and flexural strength (p <0.001). The major change in surface morphology (SEM) was found in the Efferdent peroxide group. It can be concluded that the 0.20% sodium hypochlorite solution was the most effective denture cleanser since it presented antimicrobial action against the three micro-organisms evaluated Candida albicans, Candida glabrata, and Streptococcus mutans, and did not cause clinically significant changes on the heat-polymerized acrylic resin

Este estudo propôs diferentes métodos de incorporação do vanadato de prata nanoestruturado (AgVO3) em uma resina acrílica e avaliou o padrão de incorporação promovido, a capacidade antimicrobiana, o desempenho mecânico, a taxa de liberação de íons prata (Ag) e vanádio (V) e a citotoxicidade. O AgVO3 foi incorporado nas frações de 0-5%, por meio de duas metodologias, (I) Espatulação a Vácuo e (II) Técnica do Filme Polimérico. A caracterização dos espécimes foi realizada por Microscopia eletrônica de varredura e microanálise (MEV/EDS) e Difração de raios X (DRX). A capacidade antimicrobiana foi avaliada por pirosequenciamento genético e o desempenho mecânico por ensaios de resistência à flexão e ao impacto. A taxa de liberação de Ag e V foi analisada por espectrometria de massa com plasma acoplado indutivamente (ICP-MS) e a citotoxicidade, pelo método do MTT. Análise estatística descritiva foi realizada para o teste microbiológico. Os dados das análises mecânicas foram analisados por ANOVA de 2 fatores com múltiplas comparações com ajustes de Bonferroni e os demais por Kruskal-Wallis seguido pelo pós teste de Dunn, e pelo Teste de Mann-Whitney. O nível de significância adotado foi de &alpha;=0,05. Houve diferença no padrão de dispersão promovido pelos dois métodos. O método de incorporação teve pouca influência na microbiota entretanto, o tempo de incubação e a presença de AgVO3 promoveram alterações no perfil taxonômico ao nível de filo e gênero. A adição de AgVO3 reduziu a resistência à flexão e ao impacto das resinas (p<0,001) e a técnica do filme polimérico promoveu melhor resistência à flexão (p<0,001). Maior liberação de Ag e V foi observada no grupo com 5% de AgVO3 (p<0,05). De maneira geral, não houve influência da concentração de AgVO3 e do método de incorporação na viabilidade do fibroblasto gengival humano (p>0,05) porém, o tempo de contato com os materiais foi inversamente proporcional à viabilidade (p<0,05). Conclui-se que foi possível incorporar o AgVO3 na resina acrílica por meio das duas metodologias propostas, havendo diferença no padrão de distribuição. Há diferenças na diversidade do biofilme oral inicial e maduro formado na superfície das resinas e os resultados sugerem que a incorporação de AgVO3 influencia a microbiota colonizadora. A redução das propriedades mecânicas pode ser clinicamente aceitável e os resultados da liberação elementar e da citotoxicidade não inviabilizam o uso dos materiais obtidos, embora outros testes são recomendados / This study proposed different methods of incorporating nanostructured silver vanadate (AgVO3) into an acrylic resin and evaluated the pattern of incorporation promoted, antimicrobial capacity, mechanical performance, the rate of release of silver ions (Ag) and vanadium (V) and cytotoxity. AgVO3 was incorporated in the fractions of 0-5%, by means of two methodologies, (I) Vacuum Spatulation and (II) Polymeric Film Technique. The characterization of the specimens was performed by scanning electron microscopy and microanalysis (SEM / EDS) and X-ray diffraction (XRD). The antimicrobial capacity was evaluated by genetic pyrosequencing and the mechanical performance by flexural strength and impact tests. The release rate of Ag and V was analyzed by inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS) and cytotoxity by the MTT method. Descriptive statistical analysis was performed for the microbiological test. Data from the mechanical analyzes were analyzed by 2-way ANOVA with multiple comparisons with Bonferroni adjustments and the other by Kruskal-Wallis followed by Dunn\'s post-test and the Mann-Whitney test. The level of significance was &alpha;=0.05. There was a difference in the dispersion pattern promoted by the two methods. The incorporation method had little influence on the microbiota however, the incubation time and the presence of AgVO3 promoted changes in the taxonomic profile at the level of filo and genus. The addition of AgVO3 reduced the flexural and impact strength of the resins (p<0.001) and the polymeric film technique promoted better flexural strength (p<0.001). Greater release of Ag and V was observed in the group with 5% of AgVO3 (p<0.05). In general, there was no influence of AgVO3 concentration and incorporation method on the viability of human gingival fibroblasts (p>0.05), but the time of contact with the materials was inversely proportional to the viability (p<0.05). It was concluded that it was possible to incorporate AgVO3 into the acrylic resin by means of the two methodologies proposed, with sifference in the distribution pattern. There are differences in the diversity of the initial and mature oral biofilm formed on the surface of the resins and the results suggest that the incorporation of AgVO3 influences the colonizing microbiota. The reduction of mechanical properties may be clinically acceptable and the results of elemental release and cytotoxicity do not preclude the use of the materials obtained, although other tests are recommended

A resina acrílica para base de próteses removíveis é capaz de aderir Candida spp. sobre sua superfície, possibilitando o aparecimento das estomatites protéticas. Um fator importante para essa aderência é a hidrofobicidade do polímero. Assim, a adição de radicais hidrofílicos à resina acrílica tem potencial de torná-la menos suscetível à formação de biofilmes, e merece ser investigado. O objetivo deste projeto foi avaliar os efeitos da copolimerização do ácido metacrílico sobre aderência microbiana e propriedades físicas em um material à base de polimetil metacrilato para base de próteses removíveis. Para os ensaios com a resina acrílica, espécimes de diferentes formatos foram divididos em grupos, conforme a concentração do ácido metacrílico, em volume, na porção líquida da resina (A: 0%; B: 10%; C: 20%, D:50%). A aderência de Candida albicans foi avaliada por meio da contagem de unidades formadoras de colônia (UFC) aderidas sobre os espécimes mantidos em caldo de cultura. Também foi estudadas a dureza Vickers, a resistência flexural, a rugosidade e a estabilidade de cor. Os grupos foram descritos por média ± desvios padrão e comparados, dentro de cada variável, por meio de ANOVA, com &alpha; = 0,05. No caso da aderência de C. albicans, transformação em log10 foi realizada antes da análise. Como resultado desse estudo, não foi possível observar diferenças na aderência de C. albicans com a adição do ácido metacrílico à resina acrílica (A: 5,0 ± 0.4, B: 5,0 ± 0.4, C: 5.2 ± 0.6 e D: 5.2 ± 0.3 log10(UFC)). Redução significante foi encontrada para os valores de dureza, onde os valores (em VHN) foram A: 19,0 ± 1,4A, B: 19,6 ± 1,3A, C: 19,6 ± 0,9A e D: 14,2 ± 0,6B. Não houve diferença significante para o teste de resistência flexural (A: 96,32 ± 8,25, B: 97,65 ± 6,11, C: 102,43 ± 8,61 e D: 106,34 ± 13,69 MPa); no entanto foi observada redução na rugosidade superficial com o aumento da concentração do ácido (A: 0,26 ± 0,05A, B: 0,17 ± 0,01B, C: 0,18 ± 0,03B e D: 0,13 ± 0,03C &micro;m). Conclui-se que a copolimerização do ácido metacrílico em resina para base protética proporcionou mudanças nas propriedades físicas do material, com melhora na rugosidade, porém menor dureza. A aderência de C. albicans não sofreu interferência; futuros testes com outras espécies e na presença de proteínas salivares devem ser realizados a fim de determinar se a adição do ácido realmente possui potencial clínico. / Acrylic resins for denture base play an important role as reservoirs of micro-organisms, by increasing the risk of Candida ssp. colonization which is implicated in the pathogenesis of associated stomatitis. An important factor for this adherence is the polymer hydrophobicity. Thus, incorporation of polar radicals in the polymer could increase its hydrophylia, reducing this adherence. The main purpose of the present study was to investigate the antifungal activity of a denture base resin incorporating the methacrylic acid (MA) against Candida albicans by the counting of adherent cells and its effect on hardness, roughness and flexural strength of the material. 32 circular (14x4mm), 40 rectangular (65x10x3.3mm) and 40 square-shaped (10x10x3mm) specimens were divided into four groups, according to the concentration of MA substituted into the monomer component of a heat-polymerized acrylic resin (Lucitone 550), as follows: 0% (Control), 10%, 20% and 50% (v/v). Hardness was assessed by a hardness tester equipped with a Vickers diamond penetrator. A surface roughness tester was used to measure the surface roughness of the specimens, and a flexural strength testing was carried out on a universal testing machine. Variables were analyzed by ANOVA/Tukey\'s test (&alpha;=.05). Colonies were counted for each plated specimen and the colony-forming units per milliliter (CFU/mL) were then calculated. CFU/mL values for each concentration were compared by means of ANOVA/Tukey test after logarithmic (log 10) transformation (&alpha;=.05). A significant difference was found for hardness values (19.0±1.4A, 19.6±1.3A, 19.6±0.9A, 14.2±0.6B) VHN. Surface roughness values decreased with MA concentration increase (0.26±0.05A, 0.17±0.01AB, 0.18±0.03AB, 0.13±0.03B &micro;m). No significant difference was found for flexural strengh (96.3±8.3A, 97.7±6.1A, 102.4±8.6A, 106.3±13.7A MPa) and among the four groups for the adherence assay (A: 5,0 ± 0.4, B: 5,0 ± 0.4, C: 5.2 ± 0.6 e D: 5.2 ± 0.3 log10 (CFU). For the tested acrylic resin, the addition of MA in the concentration of 50% reduced its hardness. Thus, the presence of MA around this concentration inside the monomer may compromise the tested material structure. Although MA didnt lower the flexural strength, regardless of the concentration, the values for surface roughness reduced as MA concentration increased, suggesting that MA addition may improve the acrylic resin texture, leading to less biofilm accumulation. The adherence of C. albicans was not influenced by the presence of MA. Future tests with other microorganisms and salivary proteins should be carried out to determine if this incorporation has a clinical potencial to be used.

A resina acrílica para base de próteses removíveis é capaz de acumular biofilme e assim favorecer o aparecimento de diversos problemas na cavidade bucal dos usuários de próteses. A imobilização de um agente antisséptico na matriz polimérica tem potencial preventivo frente a esse acúmulo, mas necessita de maior investigação. O objetivo deste estudo foi avaliar as propriedades biológicas do brometo de metacriloiloxiundecilpiridínio (MUPB), um composto antisséptico capaz de copolimerizar-se com as resinas acrílicas. Foram determinadas as concentrações inibitória e fungicida/bactericida mínimas (CIM, CFM/CBM) do MUPB frente às espécies Candida albicans, Candida dubliniensis, Candida glabrata, Lactobacillus casei, Staphylococcus aureus e Streptococcus mutans, em comparação ao cloreto de cetilpiridínio (CCP). A seguir, investigou-se a citotoxicidade do MUPB em fibroblastos, comparando-o com o metil metacrilato (MMA). A avaliação da atividade antimicrobiana de diferentes concentrações do MUPB em massa (0, 0,3% e 0,6%) incorporado em uma resina acrílica termopolimerizável para base de próteses foi realizada por meio de testes de difusão em disco e quantificação de unidades formadoras de colônia (UFC) aderidas à resina após contato com suspensões de cada micro-organismo. A adesão microbiana também foi avaliada por microscopia eletrônica de varredura. Comparações entre o MUPB e as demais substâncias, bem como entre as concentrações incorporadas na resina, foram realizadas com &alpha;=0,05. O MUPB apresentou CIM inferior ao CCP para C. dublinienses e S. mutans (P=0,046 e 0,043, respectivamente). Para as demais espécies, as diferenças não foram significantes. Para a CFM/CBM, só foi encontrada diferença significante para C. albicans (P=0,046). O MUPB não polimerizado mostrou-se em torno de 20 vezes mais citotóxico que o MMA. Independente da concentração incorporada e da espécie, não houve formação de halo de inibição em torno dos espécimes. A incorporação do MUPB só influenciou na adesão de C. albicans (P=0,003), com menores contagens de UFC para o grupo com 0,6%. Conclui-se que o MUPB não polimerizado tem capacidade antimicrobiana próxima à do CCP, e alta citotoxicidade, se comparado ao MMA. A atividade antimicrobiana, após incorporação em uma resina acrílica para base de prótese, não depende de sua eluição, porém apresentou-se restrita à C. albicans. / Acrylic resins for removable denture base are capable of accumulating biofilm and thus favor the appearance of various problems in the edentulous oral cavity. An antiseptic agent immobilized within the polymeric matrix has a preventive potential against this accumulation, but requires further investigation. The aim of this study was to evaluate the biological properties of methacryloyloxyundecylpyridinium bromide (MUPB), an antiseptic monomer capable of copolymerizing with acrylic resins. The minimum inhibitory and fungicidal/bactericidal concentrations (MIC, MFC/MBC) of MUPB were determined against the species Candida albicans, Candida dubliniensis, Candida glabrata, Lactobacillus casei, Staphylococcus aureus and Streptococcus mutans, in comparison with cetylpyridinium chloride (CCP). After this, the cytotoxicity of MUPB was investigated in fibroblasts, compared with methyl methacrylate (MMA). The antimicrobial activity of different concentrations of MUPB (0, 0.3% and 0.6% w/w) incorporated into a heat polymerized denture base acrylic resin was evaluated by means of disk diffusion tests, and the CFUs adhered to the resin after contact with suspensions of each microorganism were quantified. Microbial adhesion was also evaluated by scanning electron microscopy. Comparisons were made between MUPB and the other substances, as well as between the concentrations incorporated into the resin (&alpha;=.05). MUPB presented a lower MIC than CCP for C. dubliniensis and S. mutans (P=.046 and .043, respectively). For the other species, the differences were not significant. For MFC or MBC, significant difference was found only for C. albicans (P=.046). Non polymerized MUPB was shown to be 20 times more cytotoxic than MMA. Irrespective of the concentration incorporated and the species, there was no growth of inhibition halo around the specimens. The incorporation of MUPB only influenced the adhesion of C. albicans (P=.003), with lower CFU counts for the group with the concentration of 0.6%. It was concluded that non polymerized MUPB has an antimicrobial capacity close to that of CCP, and high cytotoxicity when compared with MMA. The antimicrobial activity after incorporation within a denture base acrylic resin did not depend on its elution, but was shown to be restricted to C. albicans.

A resina acrílica para base de próteses removíveis é capaz de acumular biofilme e assim favorecer o aparecimento de diversos problemas na cavidade bucal dos usuários de próteses. A imobilização de um agente antisséptico na matriz polimérica tem potencial preventivo frente a esse acúmulo, mas necessita de maior investigação. O objetivo deste estudo foi avaliar as propriedades biológicas do brometo de metacriloiloxiundecilpiridínio (MUPB), um composto antisséptico capaz de copolimerizar-se com as resinas acrílicas. Foram determinadas as concentrações inibitória e fungicida/bactericida mínimas (CIM, CFM/CBM) do MUPB frente às espécies Candida albicans, Candida dubliniensis, Candida glabrata, Lactobacillus casei, Staphylococcus aureus e Streptococcus mutans, em comparação ao cloreto de cetilpiridínio (CCP). A seguir, investigou-se a citotoxicidade do MUPB em fibroblastos, comparando-o com o metil metacrilato (MMA). A avaliação da atividade antimicrobiana de diferentes concentrações do MUPB em massa (0, 0,3% e 0,6%) incorporado em uma resina acrílica termopolimerizável para base de próteses foi realizada por meio de testes de difusão em disco e quantificação de unidades formadoras de colônia (UFC) aderidas à resina após contato com suspensões de cada micro-organismo. A adesão microbiana também foi avaliada por microscopia eletrônica de varredura. Comparações entre o MUPB e as demais substâncias, bem como entre as concentrações incorporadas na resina, foram realizadas com &alpha;=0,05. O MUPB apresentou CIM inferior ao CCP para C. dublinienses e S. mutans (P=0,046 e 0,043, respectivamente). Para as demais espécies, as diferenças não foram significantes. Para a CFM/CBM, só foi encontrada diferença significante para C. albicans (P=0,046). O MUPB não polimerizado mostrou-se em torno de 20 vezes mais citotóxico que o MMA. Independente da concentração incorporada e da espécie, não houve formação de halo de inibição em torno dos espécimes. A incorporação do MUPB só influenciou na adesão de C. albicans (P=0,003), com menores contagens de UFC para o grupo com 0,6%. Conclui-se que o MUPB não polimerizado tem capacidade antimicrobiana próxima à do CCP, e alta citotoxicidade, se comparado ao MMA. A atividade antimicrobiana, após incorporação em uma resina acrílica para base de prótese, não depende de sua eluição, porém apresentou-se restrita à C. albicans. / Acrylic resins for removable denture base are capable of accumulating biofilm and thus favor the appearance of various problems in the edentulous oral cavity. An antiseptic agent immobilized within the polymeric matrix has a preventive potential against this accumulation, but requires further investigation. The aim of this study was to evaluate the biological properties of methacryloyloxyundecylpyridinium bromide (MUPB), an antiseptic monomer capable of copolymerizing with acrylic resins. The minimum inhibitory and fungicidal/bactericidal concentrations (MIC, MFC/MBC) of MUPB were determined against the species Candida albicans, Candida dubliniensis, Candida glabrata, Lactobacillus casei, Staphylococcus aureus and Streptococcus mutans, in comparison with cetylpyridinium chloride (CCP). After this, the cytotoxicity of MUPB was investigated in fibroblasts, compared with methyl methacrylate (MMA). The antimicrobial activity of different concentrations of MUPB (0, 0.3% and 0.6% w/w) incorporated into a heat polymerized denture base acrylic resin was evaluated by means of disk diffusion tests, and the CFUs adhered to the resin after contact with suspensions of each microorganism were quantified. Microbial adhesion was also evaluated by scanning electron microscopy. Comparisons were made between MUPB and the other substances, as well as between the concentrations incorporated into the resin (&alpha;=.05). MUPB presented a lower MIC than CCP for C. dubliniensis and S. mutans (P=.046 and .043, respectively). For the other species, the differences were not significant. For MFC or MBC, significant difference was found only for C. albicans (P=.046). Non polymerized MUPB was shown to be 20 times more cytotoxic than MMA. Irrespective of the concentration incorporated and the species, there was no growth of inhibition halo around the specimens. The incorporation of MUPB only influenced the adhesion of C. albicans (P=.003), with lower CFU counts for the group with the concentration of 0.6%. It was concluded that non polymerized MUPB has an antimicrobial capacity close to that of CCP, and high cytotoxicity when compared with MMA. The antimicrobial activity after incorporation within a denture base acrylic resin did not depend on its elution, but was shown to be restricted to C. albicans.

A resina acrílica para base de próteses removíveis é capaz de aderir Candida spp. sobre sua superfície, possibilitando o aparecimento das estomatites protéticas. Um fator importante para essa aderência é a hidrofobicidade do polímero. Assim, a adição de radicais hidrofílicos à resina acrílica tem potencial de torná-la menos suscetível à formação de biofilmes, e merece ser investigado. O objetivo deste projeto foi avaliar os efeitos da copolimerização do ácido metacrílico sobre aderência microbiana e propriedades físicas em um material à base de polimetil metacrilato para base de próteses removíveis. Para os ensaios com a resina acrílica, espécimes de diferentes formatos foram divididos em grupos, conforme a concentração do ácido metacrílico, em volume, na porção líquida da resina (A: 0%; B: 10%; C: 20%, D:50%). A aderência de Candida albicans foi avaliada por meio da contagem de unidades formadoras de colônia (UFC) aderidas sobre os espécimes mantidos em caldo de cultura. Também foi estudadas a dureza Vickers, a resistência flexural, a rugosidade e a estabilidade de cor. Os grupos foram descritos por média ± desvios padrão e comparados, dentro de cada variável, por meio de ANOVA, com &alpha; = 0,05. No caso da aderência de C. albicans, transformação em log10 foi realizada antes da análise. Como resultado desse estudo, não foi possível observar diferenças na aderência de C. albicans com a adição do ácido metacrílico à resina acrílica (A: 5,0 ± 0.4, B: 5,0 ± 0.4, C: 5.2 ± 0.6 e D: 5.2 ± 0.3 log10(UFC)). Redução significante foi encontrada para os valores de dureza, onde os valores (em VHN) foram A: 19,0 ± 1,4A, B: 19,6 ± 1,3A, C: 19,6 ± 0,9A e D: 14,2 ± 0,6B. Não houve diferença significante para o teste de resistência flexural (A: 96,32 ± 8,25, B: 97,65 ± 6,11, C: 102,43 ± 8,61 e D: 106,34 ± 13,69 MPa); no entanto foi observada redução na rugosidade superficial com o aumento da concentração do ácido (A: 0,26 ± 0,05A, B: 0,17 ± 0,01B, C: 0,18 ± 0,03B e D: 0,13 ± 0,03C &micro;m). Conclui-se que a copolimerização do ácido metacrílico em resina para base protética proporcionou mudanças nas propriedades físicas do material, com melhora na rugosidade, porém menor dureza. A aderência de C. albicans não sofreu interferência; futuros testes com outras espécies e na presença de proteínas salivares devem ser realizados a fim de determinar se a adição do ácido realmente possui potencial clínico. / Acrylic resins for denture base play an important role as reservoirs of micro-organisms, by increasing the risk of Candida ssp. colonization which is implicated in the pathogenesis of associated stomatitis. An important factor for this adherence is the polymer hydrophobicity. Thus, incorporation of polar radicals in the polymer could increase its hydrophylia, reducing this adherence. The main purpose of the present study was to investigate the antifungal activity of a denture base resin incorporating the methacrylic acid (MA) against Candida albicans by the counting of adherent cells and its effect on hardness, roughness and flexural strength of the material. 32 circular (14x4mm), 40 rectangular (65x10x3.3mm) and 40 square-shaped (10x10x3mm) specimens were divided into four groups, according to the concentration of MA substituted into the monomer component of a heat-polymerized acrylic resin (Lucitone 550), as follows: 0% (Control), 10%, 20% and 50% (v/v). Hardness was assessed by a hardness tester equipped with a Vickers diamond penetrator. A surface roughness tester was used to measure the surface roughness of the specimens, and a flexural strength testing was carried out on a universal testing machine. Variables were analyzed by ANOVA/Tukey\'s test (&alpha;=.05). Colonies were counted for each plated specimen and the colony-forming units per milliliter (CFU/mL) were then calculated. CFU/mL values for each concentration were compared by means of ANOVA/Tukey test after logarithmic (log 10) transformation (&alpha;=.05). A significant difference was found for hardness values (19.0±1.4A, 19.6±1.3A, 19.6±0.9A, 14.2±0.6B) VHN. Surface roughness values decreased with MA concentration increase (0.26±0.05A, 0.17±0.01AB, 0.18±0.03AB, 0.13±0.03B &micro;m). No significant difference was found for flexural strengh (96.3±8.3A, 97.7±6.1A, 102.4±8.6A, 106.3±13.7A MPa) and among the four groups for the adherence assay (A: 5,0 ± 0.4, B: 5,0 ± 0.4, C: 5.2 ± 0.6 e D: 5.2 ± 0.3 log10 (CFU). For the tested acrylic resin, the addition of MA in the concentration of 50% reduced its hardness. Thus, the presence of MA around this concentration inside the monomer may compromise the tested material structure. Although MA didnt lower the flexural strength, regardless of the concentration, the values for surface roughness reduced as MA concentration increased, suggesting that MA addition may improve the acrylic resin texture, leading to less biofilm accumulation. The adherence of C. albicans was not influenced by the presence of MA. Future tests with other microorganisms and salivary proteins should be carried out to determine if this incorporation has a clinical potencial to be used.

Orientador: Carlos Eduardo Vergani / Banca: Eunice Teresinha Giampaolo / Banca: Cláudia Helena Lovato da Silva / Resumo: A Candida albicans tem sido considerada o principal agente etiológico da estomatite protética, uma das infecções mais comumente observadas em pacientes usuários de próteses removíveis. A adesão de C. albicans à superfície das próteses é o primeiro passo para o desenvolvimento da estomatite protética. Assim, uma adequada higienização das próteses é essencial para prevenir a formação de biofilme microbiano sobre a superfície protética e, conseqüentemente, o início e propagação desta infecção. O objetivo deste estudo foi avaliar a efetividade da escovação com diferentes soluções (água destilada, dentifrício, digluconato de clorexidina a 2%, hipoclorito de sódio a 1% e Polident fresh cleanse®) na redução da viabilidade de um biofilme maduro de C. albicans, desenvolvido sobre uma resina termopolimerizável para base de prótese. Para isso, 90 corpos-de-prova circulares foram confeccionados, esterilizados e inoculados com uma suspensão de 107 células/mL de C. albicans. Para a formação do biofilme, todos os corpos-de-prova foram incubados por 48 h a 37 °C sob agitação. A seguir, os corpos-de-prova foram aleatoriamente divididos (n=9) e individualmente submetidos à escovação ou exposição por 90 s nas diferentes soluções avaliadas. Os espécimes imersos em água destilada pelo mesmo período de tempo foram utilizados como controle positivo. Para verificar a efetividade da escovação e dos agentes de limpeza, os corpos-de-prova foram submetidos à avaliação da atividade metabólica das células não removidas de C. albicans por meio do teste do XTT. Os resultados obtidos foram analisados estatisticamente pelos testes de Mann-Whitney e Kruskal-Wallis (α=0.05). A escovação com todos os agentes de limpeza apresentou redução significativamente superior (p<0,0001) na viabilidade do biofilme quando comparada à exposição dos corpos-de-prova... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The adhesion of C. albicans to surfaces is the prerequisite for occurrence of denture stomatitis, a common disease diagnosed among denture wearers. Therefore, a strict routine of denture cleansing is essential to prevent biofilm formation on the acrylic denture surface and the onset of this infection. Thus, the aim of the current study was to investigate the effectiveness of combining toothbrushing and cleansing agents (dentifrice, 2% chlorhexidine gluconate, 1% sodium hypochlorite, and Polident fresh cleanse®) in inactivating C. albicans biofilm. Circular specimens (10 x 2 mm) of acrylic resin denture base material were made, sterilized, and individually inoculated with C. albicans (1x107 colony-forming units/mL). After incubation (37 °C/48 h), the specimens were divided into 10 experimental groups (n=9): 5 subjected to toothbrushing with different cleansing agents and 4 exposed to the cleansing agents without toothbrushing. Non-cleansed specimens were used as positive controls. The viability of cells was evaluated by XTT reduction method. Mann-Whitney and Kruskal-Wallis tests were used for comparative analysis between the two methods of cleansing and the cleansing agents, respectively (α=0.05). Toothbrushing with all agents was significantly more effective (p<0.0001) in reducing biofilm viability than exposure to the cleansing agents only. Exposure to all cleansing agents reduced significantly (p<0.0001) the biofilm viability, with 2% chlorhexidine gluconate being most effective (p<0.0001). Toothbrushing with 2% chlorhexidine gluconate and 1% sodium hypochlorite resulted in 100% inactivation of the biofilm. The use of cleansing agents as an adjunct to toothbrushing is an effective method to reduce C. albicans biofilm viability on denture base resins. / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-03-25Bitstream added on 2014-06-13T18:58:04Z : No. of bitstreams: 1 pellizzaro_d_me_arafo.pdf: 501665 bytes, checksum: 45c7da463c0ecbc1bda09d0615a81f92 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A Candida albicans tem sido considerada o principal agente etiológico da estomatite protética, uma das infecções mais comumente observadas em pacientes usuários de próteses removíveis. A adesão de C. albicans à superfície das próteses é o primeiro passo para o desenvolvimento da estomatite protética. Assim, uma adequada higienização das próteses é essencial para prevenir a formação de biofilme microbiano sobre a superfície protética e, conseqüentemente, o início e propagação desta infecção. O objetivo deste estudo foi avaliar a efetividade da escovação com diferentes soluções (água destilada, dentifrício, digluconato de clorexidina a 2%, hipoclorito de sódio a 1% e Polident fresh cleanse®) na redução da viabilidade de um biofilme maduro de C. albicans, desenvolvido sobre uma resina termopolimerizável para base de prótese. Para isso, 90 corpos-de-prova circulares foram confeccionados, esterilizados e inoculados com uma suspensão de 107 células/mL de C. albicans. Para a formação do biofilme, todos os corpos-de-prova foram incubados por 48 h a 37 °C sob agitação. A seguir, os corpos-de-prova foram aleatoriamente divididos (n=9) e individualmente submetidos à escovação ou exposição por 90 s nas diferentes soluções avaliadas. Os espécimes imersos em água destilada pelo mesmo período de tempo foram utilizados como controle positivo. Para verificar a efetividade da escovação e dos agentes de limpeza, os corpos-de-prova foram submetidos à avaliação da atividade metabólica das células não removidas de C. albicans por meio do teste do XTT. Os resultados obtidos foram analisados estatisticamente pelos testes de Mann-Whitney e Kruskal-Wallis (α=0.05). A escovação com todos os agentes de limpeza apresentou redução significativamente superior (p<0,0001) na viabilidade do biofilme quando comparada à exposição dos corpos-de-prova... / The adhesion of C. albicans to surfaces is the prerequisite for occurrence of denture stomatitis, a common disease diagnosed among denture wearers. Therefore, a strict routine of denture cleansing is essential to prevent biofilm formation on the acrylic denture surface and the onset of this infection. Thus, the aim of the current study was to investigate the effectiveness of combining toothbrushing and cleansing agents (dentifrice, 2% chlorhexidine gluconate, 1% sodium hypochlorite, and Polident fresh cleanse®) in inactivating C. albicans biofilm. Circular specimens (10 x 2 mm) of acrylic resin denture base material were made, sterilized, and individually inoculated with C. albicans (1x107 colony-forming units/mL). After incubation (37 °C/48 h), the specimens were divided into 10 experimental groups (n=9): 5 subjected to toothbrushing with different cleansing agents and 4 exposed to the cleansing agents without toothbrushing. Non–cleansed specimens were used as positive controls. The viability of cells was evaluated by XTT reduction method. Mann-Whitney and Kruskal-Wallis tests were used for comparative analysis between the two methods of cleansing and the cleansing agents, respectively (α=0.05). Toothbrushing with all agents was significantly more effective (p<0.0001) in reducing biofilm viability than exposure to the cleansing agents only. Exposure to all cleansing agents reduced significantly (p<0.0001) the biofilm viability, with 2% chlorhexidine gluconate being most effective (p<0.0001). Toothbrushing with 2% chlorhexidine gluconate and 1% sodium hypochlorite resulted in 100% inactivation of the biofilm. The use of cleansing agents as an adjunct to toothbrushing is an effective method to reduce C. albicans biofilm viability on denture base resins.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-12-07Bitstream added on 2014-06-13T20:37:53Z : No. of bitstreams: 1 zequetto_mm_me_araca.pdf: 764308 bytes, checksum: f9f1ab6ade3df1b1023440b60d0137eb (MD5) / Pro-Line Servicos Produtos Odontologicos Ortopedicos Ltda. / O presente trabalho avaliou a desadaptação marginal de infra-estruturas metálicas de coroas metalo-cerâmicas obtidas com técnicas de fundição convencional (T1) e rápida (T2), utilizando para inclusão os revestimentos: aglutinado por fosfato Termocast (R1) e a base de cerâmica granulada Micro Fine 1700 (R2), confeccionando padrões em cera escultura Galileo (P1) e padrões em resina acrílica Duralay (P2), com n=56, sobre um troquel metálico. Para a construção dos padrões, utilizou-se uma matriz de silicone e realizou-se a fundição com liga de Ni-Cr. Verificou-se a desadaptação marginal por meio de um microscópio comparador digital Mitutoyo em 12 diferentes pontos de cada infra-estrutura. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e teste de Tukey com p<0.05, demonstrando os menores valores de desadaptação marginal e, estatisticamente similares (p<0.05), em ordem crescente, para os grupos: P2R2T2 (55,4æm), P2R1T2 (55,6æm), P2R1T1 (57,4æm), P1R2T2 (59,4æm), P1R2T1 (86æm), P1R1T1(104,4æm); e os maiores valores para P1R1T2 (166,9æm) e P2R2T1 (185,3æm). Os resultados obtidos permitiram concluir que as infra-estruturas metálicas obtidas com padrões, tanto de cera quanto de resina acrílica, apresentaram valores aceitáveis em ambas as técnicas de fundição realizadas, desde que as interações e recomendações dos fabricantes dos revestimentos sejam respeitadas. / The present study evaluated the marginal unfit of metallic infrastructures of metallic-ceramic crowns obtained through the conventional (T1) and accelerated (T2) casting techniques, using for investing the investments: agglutinated by phosphate Termocast (R1) and the base of granulated ceramic Micro Fine 1700 (R2), making patterns in sculpture wax Galileo (P1) and patterns in acrylic resin Duralay (P2), with n=56, on a metallic die with shoulder in chamfer. For the construction of the patterns, a matrix of silicone was used and the casting was made with Ni-Cr alloy. The marginal unfit was verified through the comparing microscope Mitutoyo in 12 different points of each infrastructure. The values obtained were submitted to analysis of variance (ANOVA) and Tukey s test with p<0.05, showed smaller values and statistically similar, in increasing order, for the groups: P2R2T2 (55,4ìm), P2R1T2 (55,6ìm), P2R1T1 (57,4ìm), P1R2T2 (59,4ìm), P1R2T1 (86ìm), P1R1T1(104,4ìm); and the largest values for P1R1T2 (166,9ìm) and P2R2T1 (185,3ìm). Taking obtained results into account, it was possible to conclude that the metallic infrastructures obtained from patterns, of wax as well as of acrylic resin, presented acceptable values of marginal fit in both casting techniques, providing the interactions and the recommendations of the investments manufacturers are respected.