Neste estudo 60 cepas de Aeromonas, 15 A. hydrophila, 15 A. caviae, 15 A. sobria e 15 A. jandaei, isoladas de 5 diferentes pontos do reservatório de Guarapiranga, São Paulo, e previamente testada quanto à produção de fatores de virulência, acúmulo de fluído em alça ligada e hemólise em ágar sangue, foram submetidas a ribotipagem e a análise do perfil plasmidial. Cada cepa apresentou um perfil de ribotipagem diferente tendo-se observado para as espécies A. hydrophila e A. caviae a diferenciação em 3 agrupamentos, e A. sobria e A. jandaei dois agrupamentos cada. A análise do perfil plasmidial demonstrou que 13,4 por cento das A. hydrophila apresentaram um ou no máximo 2 plasmídios, enquanto 33,3 por cento das A. sobria e 53,3 por cento das A. jandaei apresentaram de 1 a 6 plasmídios para cada espécie; A. caviae não apresentou cepas contendo plasmídios. Não foi observada correlação entre a presença de plasmídios e a produção de fatores de virulência pelas cepas estudadas. A ribotipagem demonstrou haver um polimorfismo genômico dentro de uma mesma espécie de Aeromollas e, ainda, diferenciou cepas isoladas de um mesmo ponto de amostragem. Estas metodologias, ribotipagem e análise do perfil plasmidial, apresentam em geral características que são complementares, demonstrando ser ferramentas importantes a serem empregadas, tanto em estudos epidemiológicos como ecológicos. / In this work 60 Aeromonas strains, 15 A. hydrophila, 15 A. caviae, 15 A. sobria and 15 A. jandaei isolated from 5 different points of Guarapiranga Dam, São Paulo, and previously tested for virulence factors production (ileal loop assay and hemolysis on blood agar) were submitted to ribotyping and plasmidial profiles analysis. Each strain showed a different ribopattern and there were observed that for A. hydrophila and A. caviae each specie were grouped in 3 ribotypes, A. sobria and A. jandaei in 2 ribotype each. Plasmidial profiles analysis demonstrated that 13,4 per cent af A. hydrophila had at least one but no more than 2 plasmids, 33,3 per cent of A. sobria and 53,3 per cent af A. jandaei had from one to 6 plasmids each, and A. caviae didn\'t show to have any plasmids. There were not observed correlation between presence of plasmids and virulence factor production. Ribotyping showed that there are genomic polymorphism within the same Aeromonas specie and differentiate strains that were isolated from the same sample point, indicating that those methodologies have in general characteristics that are complementary and are important tools to be used either in epidemiological or ecological studies.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-10-09Bitstream added on 2014-06-13T20:24:14Z : No. of bitstreams: 1 cereser_nd_dr_jabo.pdf: 358846 bytes, checksum: ee8da61d01c78fb987929f7e2aeffa3a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Com o objetivo de estabelecer, durante o processamento do queijo Minas Frescal e Colonial os possíveis pontos de contaminação e a forma de disseminação de bactérias do gênero Aeromonas, foram analisados, quanto à presença do microrganismo, diferentes produtos e pontos do fluxograma de produção. Para o Queijo Minas Frescal, aeromonas foram isoladas no leite cru, leite pasteurizado, ambiente e nas mãos dos manipuladores. A. caviae foi a espécie mais frequentemente identificada, sendo também isoladas A. sobria e A. schubertii. Durante o processamento do queijo Colonial, as espécies A. hydrophila, A. caviae, A. sobria, A. veronii e A. jandaei foram isoladas a partir da água, mãos dos manipuladores, utensílios, leite cru e após tratamento térmico e de massa coagulada. Os resultados demonstram que o gênero Aeromonas encontra-se disseminado nas diferentes etapas do processamento de queijos, destacando-se o leite cru como principal fonte de contaminação para o processamento industrial e artesanal. Ressalta-se o perfil de resistência dos isolados de Aeromonas sp. que revelaram resistência múltipla aos antimicrobianos de uso na medicina humana e animal, caracterizando assim, risco à saúde pública. / With the purpose to establish the possible points of contamination and the form of disseminating of Aeromonas bacteria genus during Minas Frescal cheese processing and Colonial cheese, different products and points of the production process were analyzed, as for the presence of the microorganism. In Minas Frescal cheese, Aeromonas were isolated in raw milk, pasteurized milk, in the ambient and in the manipulators' hands. A. caviae was the most frequently identified species, being also isolated A. sobria and A. schubertii. During the processing of Colonial cheese, the species A. hydrophila, A. caviae, A. sobria, A. veronii and A. jandaei were isolated from the water, the manipulators' hands, utensils, raw milk and after thermal treatment and coagulated mass. The results showed that the genus Aeromonas is disseminated in the different stages of cheeses processing, standing out the raw milk as main source of contamination for the industrial and handmade processing. The profile of resistance of the isolated of Aeromonas sp. is pointed out that they revealed multiple resistance to the antibiotics used in human and animal medicine, characterizing, therefore, risk for public health.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-04-22Bitstream added on 2014-06-13T19:03:31Z : No. of bitstreams: 1 silva_rml_dr_jabo.pdf: 986300 bytes, checksum: 4a3600af533a0403550481d53c48eaae (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Dentre os agentes bacterianos amplamente distribuídos no ecossistema aquático, destacam-se as famílias Aeromonadaceae e Enterobactereaceae. Os peixes são importantes veículos de infecções humanas causadas por essas bactérias. Com este enfoque, o estudo foi realizado com o objetivo de verificar a ocorrência de Aeromonas sp., coliformes termotolerantes e bactérias heterotróficas mesófilas em pisciculturas da Região da Baixada Ocidental Maranhense. Para tal, foram selecionadas no período de outubro de 2008 a março de 2009, doze propriedades nos municípios de Pinheiro, Palmeirândia e Perimirim e colhidas amostras de água dos viveiros e peixes de cada piscicultura, totalizando 96 amostras. Em 100% das amostras analisadas foi confirmada a presença de Aeromonas sp., classificadas em quatro espécies, A. hydrophila (87,03%), A. caviae (8,02%), A. veronii sobria (3,70%), A. schubertii (1,23%). Essas ainda apresentaram elevados percentuais de resistência e multiresistência a 12 antimicrobianos testados. As populações de bactérias heterotróficas mesófilas nas pisciculturas variaram de 102 UFC/mL a 104 UFC/mL de água. Das pisciculturas avaliadas, sete apresentaram pelo menos uma amostra em desacordo com o padrão para coliformes termotolerantes. As amostras analisadas revelaram - se como possíveis vias de transmissão de aeromonas potencialmente patogênicas para peixes e ser humano, representando risco para a saúde da população consumidora dos organismos cultivados nessas propriedades / Among widely distributed agents in the aquatic ecosystem can be outstanding the families Aeromonadaceae and Enterobacteriaceae. The fishs are very important vehicles of human infections caused for these bacteria. With the approach the study intended to verify the occurrence of Aeromonas sp., thermotolerant coliforms and heterotrophic mesophilic bacteria in fish farms located in Occidental Baixada Maranhense Region. Twelve properties in the Pinheiro, Palmeirândia and Perimirim’ s cities were selected in the period from October of 2008 to March of 2009, and harvested water pond and fish samples of each fish farm, with the total of 96 samples. Aeromonas sp. was confirmed in 100% of samples, classified in four species, A. hydrophila (87,03%), A. caviae (8,02%), A. veronii sobria (3,70%), A.schubertii (1,23%). These bacteria showed high resistance and multiple resistance to the 12 antibiotics tested. The populations of heterotrophic mesophilic bacteria varied between 1,4 x 102 UFC/mL to 7,2 x 103 UFC/mL/. Seven fish farms showed at least one sample in disagreement with the standard to termotholerant coliforms. The samples of water and fish revealed the possible sources of potentially pathogenic contamination of aeromonas for fish and human being representing risk for health of the population healthy that consume the organisms cultivated in these properties

Made available in DSpace on 2015-06-01T19:28:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 520.pdf: 2031351 bytes, checksum: 2899314c9f4b140c9fd13eebe3fea1e6 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / Diante da alta frequência com que Aeromonas spp foram isoladas de fezes de pacientes durante um surto de diarréia em São Bento do Una, PE, e tendo em vista que seu papel na etiologia de infecções intestinais ainda não tenha sido comprovado, o potencial patogênicodessas bactérias foi avaliado através da pesquisa de possíveis genes de virulência, da sua capacidade de aderir em células animais e de formar biofilme. Também foi pesquisada a região intergênica espaçadora (ISR) 16S-23S na tentativa de encontrar um perfil clonal entre essas bactérias, além do gene 16S. Diante da dificuldade na identificação laboratorial do gênero Aeromonas, foi desenvolvida e padronizada uma duplex-PCR. Dentre os 106 isolados clínicos e 19 ambientais, os genes lip, exu, gcat e flaA/B foram encontrados respectivamente em 84,9 por cento e 100 por cento, 85,8 por cento e 94,7 por cento, 100 por cento e 100 por cento e 84 por cento e 89,5 por cento das amostras. O gene aerA foi encontrado em menor frequência tanto nos isolados clínicos como nos ambientais (47,2 por cento/36,8 por cento). As cepas de Aeromonas testadas apresentaram aderência difusa em células HEp-2 mas não foram capazes de formar biofilme em placa. A ISR 16S-23S dessas bactérias revelou nove perfis diferentes, enquanto a análise do gene 16S mostrou o mesmo perfil para os diferentes ribotipos encontrados. A duplex-PCR foi reprodutível e específica para o gênero Aeromonas e após sua validação poderá ser utilizada como diagnóstico complementar dessas bactérias. Embora tenham apresentado um alto potencial patogênico, as cepas de Aeromonas isoladas durante o surto de diarréia ocorrido em São Bento do Una, não provêm de um mesmo clone e, portanto, não podem ser responsabilizadas como a causa do surto, sugerindo que essas bactérias eram parte da microbiota intestinal transitória dos indivíduos infectados. Por outro lado, e tendo em vista a preocupação que a comunidade científica tem demonstrado a respeito de Aeromonas, considerada patógeno emergente, são necessários outros estudos para tentar definir o papel desses microrganismos em processos diarréicos

Aeromonas spp. são bactérias Gram negativas capazes de causar doenças intestinais e extra-intestinais. A virulência de algumas espécies do gênero já foi associada a diversos fatores, como a expressão de flagelos e conseqüente mobilidade bacteriana. Aeromonas caviae apresenta dois distintos sistemas flagelares, um deles responsável pela natação em meio líquido (swimming) onde está envolvido o flagelo polar, e outro associado ao deslizamento em superfícies sólidas ou viscosas (swarming), o qual participam flagelos laterais. A fim de avaliar a contribuição de ambos os flagelos no contexto da formação de biofilme em superfície plástica e aderência à linhagem celular HEp-2, foram estudadas 76 cepas de A. caviae isoladas de diferentes origens. Os resultados obtidos em nosso estudo demonstraram que a detecção do gene flaA (flagelina polar) foi mais freqüente (94%) que a do gene lafA (flagelina lateral) (71%) e, aparentemente, a presença deste último parece estar condicionada à do primeiro. Todas as cepas que apresentaram o genótipo flaA-lafA-, foram incapazes de formar biofilme, bem como 76% das cepas flaA+lafA-. As cepas provenientes de água foram as que exibiram menor percentual de positividade para o gene da flagelina lateral (57%) e aquelas onde se observou maior incapacidade de formação de biofilme (71%). Além disso, 95% das cepas flaA+lafA+ formaram biofilme e todas as cepas que apresentaram, quantitativamente, um biofilme forte, albergavam ambos os genes. A aderência à HEp-2 se mostrou eficiente em todos os casos onde ao menos um dos flagelos estava presente e em dois casos onde ambos estavam ausentes, com prevalência do padrão agregativo. Em contrapartida, não foi notado uma interferência exclusiva dos flagelos laterais nesse processo. Todas as três cepas que não aderiram ao modelo celular utilizado, ou o fizeram muito discretamente, não exibiram nem o gene flaA, tampouco lafA. Em conclusão aos dados observados, apontamos que uma plena atividade de ambos os flagelos, geralmente, é requerida nos processos de aderência às superfícies abióticas e bióticas. Contudo, trabalhos adicionais sobre a contribuição dessas estruturas na patogênese de A. caviae necessitam ser realizados. / Aeromonas spp. are bacteria Gram-negative able to cause intestinal and extraintestinal diseases. The virulence of some species of this genus has already been associated to several aspects, such as the expression of flagellum and following bacterium mobility. Aeromonas caviae presents two distinct flagellar systems, one of which is responsible for mobility in liquid environments (swimming) at where the polar flagellum is involved, and the other is associated to sliding in solid or viscous surfaces (swarming), in which lateral flagella take part. In order to evaluate the contribution of both flagella in the biofilm formation in plastic surfaces and its adherence to cell line HEp-2, 76 strains of isolated A. caviae from distinct sources were analyzed. The results from our studies showed that detection of gene flaA (polar flagellin) was more frequent (94%) than gene lafA (lateral flagellin) (71%), and apparently, the presence of the last one seems to be conditioned to the first one (the gene flaA). All the strains that presented the genotype flaA-lafA- were unable to form biofilm, such as 76% of strains flaA+lafA-. The aquatic strains were those who showed lesser percentage of positivity for the lateral flagellin gene (57%), and higher incapacity of biofilm formation (71%). Moreover, 95% of the flaA+lafA+ strains formed biofilm, and all strains that quantitatively showed a strong biofilm, contained both genes. The adherence to HEp-2 proved to be efficient in all cases where at least one of the two flagella was present at, and in two cases where both were absent, with prevalence of the aggregative pattern. However, an exclusive interference from the lateral flagella was not perceived in this process. All of the three strains that did not adhere to the cell model used, or that adhered in a very discrete way, did not show neither gene flaA nor gene lafA. In conclusion, we suggest that the complete function of both flagella usually is a requirement in the adherence processes to biotic and abiotic surfaces. However, additional studies on the contribution of these structures in the pathogenesis of A. caviae need to be carried out.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-09Bitstream added on 2014-06-13T21:05:06Z : No. of bitstreams: 1 martineli_tm_dr_jabo.pdf: 880688 bytes, checksum: 67253abaf98ac4939615f0fa6dfaf21a (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O gênero Aeromonas compreende espécies consideradas importantes patógenos para os seres humanos sendo as gastrenterites as infecções mais comumente atribuídas a estas bactérias. Tendo em vista sua importância como patógeno de origem alimentar, a ocorrência de Aeromonas sp. foi estudada em carcaças bovinas e ambiente do abatedouro em uma indústria do estado de São Paulo. Foram colhidas 285 amostras de 19 locais. Foi realizada a contagem direta por semeadura em meio seletivo, pesquisa e caracterização de espécies após enriquecimento seletivo, teste de susceptibilidade a antimicrobianos e caracterização molecular dos isolados pelas técnicas de REP e ERIC-PCR. A contagem direta permitiu a quantificação destas bactérias em apenas 12 amostras, variando de 0,5 a 9,2 x 100 UFC/cm2, sendo cinco delas de ambiente, com populações que variaram de 1,0 x 100 a 3,0 x 100 UFC/placa. Entretanto, após o enriquecimento seletivo, aeromonas foram isoladas de 38 amostras. A caracterização bioquímica das espécies permitiu verificar a ocorrência de A. caviae, A. schubertii, A. trota e A. sobria. Os testes com antimicrobianos revelaram resistência de todas as cepas a ampicilina e cefalotina, e para os demais antimicrobianos esta foi variável. A resistência da totalidade dos cultivos a determinados princípios indica que os antimicrobianos devem ser utilizados criteriosamente com a finalidade de evitar o surgimento precoce de cepas de Aeromonas sp. resistentes. As técnicas moleculares não possibilitaram a identificação precisa da origem das bactérias na indústria, mas possibilitaram identificar os manipuladores como disseminadores das mesmas. Ainda, a maior prevalência de A. caviae deve ser considerada relevante, pois trata-se de uma das espécies causadoras de gastrenterite em humanos. / The genus Aeromonas comprises important human pathogens and the gastroenteritis are the most common infections attributed to these microorganisms. Considering their importance as foodborne pathogens, the occurrence of Aeromonas sp. was studied on bovine carcasses and environment in an industry in São Paulo State. From 19 location were collected 285 samples. It was done the direct count by seeding on selective medium and biochemical characterization of the species after selective enrichment, antimicrobial susceptibility test and molecular characterization of the isolates by REP and ERICPCR. The direct count permitted bacteria quantification only in 12 samples ranging from 0.5 to 9.2 x 100 CFU/cm2 and five of then were from environment, ranging from 1,0 x 100 a 3,0 x 100 CFU/plate. However after selective enrichment, aeromonas were isolated from 38 samples. Biochemical characterization permitted to verify the occurrence of 59 samples of A. caviae, one of A. schubertii, one of A. trota and one of A. sobria. Antimicrobial test revealed all isolates were resistant to ampicillin and cephalotin, while the results for the other antimicrobials were variable. Resistance of all isolates to some principles indicates that antimicrobials must be used critically to avoid early development of resistant Aeromonas sp. Molecular techniques did not identify precisely the origin of the contamination into the industry, but identified handlers as agent of spreading the bacteria. Also, the greatest prevalence of A. caviae must be considered relevant because it is one of the human gastrenteritis causative species.

Resumo: Dentre os agentes bacterianos amplamente distribuídos no ecossistema aquático, destacam-se as famílias Aeromonadaceae e Enterobactereaceae. Os peixes são importantes veículos de infecções humanas causadas por essas bactérias. Com este enfoque, o estudo foi realizado com o objetivo de verificar a ocorrência de Aeromonas sp., coliformes termotolerantes e bactérias heterotróficas mesófilas em pisciculturas da Região da Baixada Ocidental Maranhense. Para tal, foram selecionadas no período de outubro de 2008 a março de 2009, doze propriedades nos municípios de Pinheiro, Palmeirândia e Perimirim e colhidas amostras de água dos viveiros e peixes de cada piscicultura, totalizando 96 amostras. Em 100% das amostras analisadas foi confirmada a presença de Aeromonas sp., classificadas em quatro espécies, A. hydrophila (87,03%), A. caviae (8,02%), A. veronii sobria (3,70%), A. schubertii (1,23%). Essas ainda apresentaram elevados percentuais de resistência e multiresistência a 12 antimicrobianos testados. As populações de bactérias heterotróficas mesófilas nas pisciculturas variaram de 102 UFC/mL a 104 UFC/mL de água. Das pisciculturas avaliadas, sete apresentaram pelo menos uma amostra em desacordo com o padrão para coliformes termotolerantes. As amostras analisadas revelaram - se como possíveis vias de transmissão de aeromonas potencialmente patogênicas para peixes e ser humano, representando risco para a saúde da população consumidora dos organismos cultivados nessas propriedades / Abstract: Among widely distributed agents in the aquatic ecosystem can be outstanding the families Aeromonadaceae and Enterobacteriaceae. The fishs are very important vehicles of human infections caused for these bacteria. With the approach the study intended to verify the occurrence of Aeromonas sp., thermotolerant coliforms and heterotrophic mesophilic bacteria in fish farms located in Occidental Baixada Maranhense Region. Twelve properties in the Pinheiro, Palmeirândia and Perimirim' s cities were selected in the period from October of 2008 to March of 2009, and harvested water pond and fish samples of each fish farm, with the total of 96 samples. Aeromonas sp. was confirmed in 100% of samples, classified in four species, A. hydrophila (87,03%), A. caviae (8,02%), A. veronii sobria (3,70%), A.schubertii (1,23%). These bacteria showed high resistance and multiple resistance to the 12 antibiotics tested. The populations of heterotrophic mesophilic bacteria varied between 1,4 x 102 UFC/mL to 7,2 x 103 UFC/mL/. Seven fish farms showed at least one sample in disagreement with the standard to termotholerant coliforms. The samples of water and fish revealed the possible sources of potentially pathogenic contamination of aeromonas for fish and human being representing risk for health of the population healthy that consume the organisms cultivated in these properties / Orientador: Oswaldo Durival Rossi Junior / Coorientadora: Francisca Neide Costa / Banca: Henrique Cesar Pereira Figueiredo / Banca: Naiá Carla Marchi de Rezende Lago / Banca: Fabiana Pilarski / Banca: Luiz Augusto do Amaral / Doutor

Orientador: Oswaldo Durival Rossi Júnior / Banca: Germano Francisco Biondi / Banca: Luiz Francisco Zafalon / Banca: Angela Cleusa de Fátima Banzato de Carvalho / Banca: Antonio Nader Filho / Resumo: Com o objetivo de estabelecer, durante o processamento do queijo Minas Frescal e Colonial os possíveis pontos de contaminação e a forma de disseminação de bactérias do gênero Aeromonas, foram analisados, quanto à presença do microrganismo, diferentes produtos e pontos do fluxograma de produção. Para o Queijo Minas Frescal, aeromonas foram isoladas no leite cru, leite pasteurizado, ambiente e nas mãos dos manipuladores. A. caviae foi a espécie mais frequentemente identificada, sendo também isoladas A. sobria e A. schubertii. Durante o processamento do queijo Colonial, as espécies A. hydrophila, A. caviae, A. sobria, A. veronii e A. jandaei foram isoladas a partir da água, mãos dos manipuladores, utensílios, leite cru e após tratamento térmico e de massa coagulada. Os resultados demonstram que o gênero Aeromonas encontra-se disseminado nas diferentes etapas do processamento de queijos, destacando-se o leite cru como principal fonte de contaminação para o processamento industrial e artesanal. Ressalta-se o perfil de resistência dos isolados de Aeromonas sp. que revelaram resistência múltipla aos antimicrobianos de uso na medicina humana e animal, caracterizando assim, risco à saúde pública. / Abstract: With the purpose to establish the possible points of contamination and the form of disseminating of Aeromonas bacteria genus during Minas Frescal cheese processing and Colonial cheese, different products and points of the production process were analyzed, as for the presence of the microorganism. In Minas Frescal cheese, Aeromonas were isolated in raw milk, pasteurized milk, in the ambient and in the manipulators' hands. A. caviae was the most frequently identified species, being also isolated A. sobria and A. schubertii. During the processing of Colonial cheese, the species A. hydrophila, A. caviae, A. sobria, A. veronii and A. jandaei were isolated from the water, the manipulators' hands, utensils, raw milk and after thermal treatment and coagulated mass. The results showed that the genus Aeromonas is disseminated in the different stages of cheeses processing, standing out the raw milk as main source of contamination for the industrial and handmade processing. The profile of resistance of the isolated of Aeromonas sp. is pointed out that they revealed multiple resistance to the antibiotics used in human and animal medicine, characterizing, therefore, risk for public health. / Doutor

Orientador: Oswaldo Durival Rossi Júnior / Banca: Naiá Carla Marchi de Rezende Lago / Banca: José Paes de Almeida Nogueira Pinto / Banca: Luiz Augusto do Amaral / Banca: Angela Cleusa de Fátima Banzatto de Carvalho / Resumo: O gênero Aeromonas compreende espécies consideradas importantes patógenos para os seres humanos sendo as gastrenterites as infecções mais comumente atribuídas a estas bactérias. Tendo em vista sua importância como patógeno de origem alimentar, a ocorrência de Aeromonas sp. foi estudada em carcaças bovinas e ambiente do abatedouro em uma indústria do estado de São Paulo. Foram colhidas 285 amostras de 19 locais. Foi realizada a contagem direta por semeadura em meio seletivo, pesquisa e caracterização de espécies após enriquecimento seletivo, teste de susceptibilidade a antimicrobianos e caracterização molecular dos isolados pelas técnicas de REP e ERIC-PCR. A contagem direta permitiu a quantificação destas bactérias em apenas 12 amostras, variando de 0,5 a 9,2 x 100 UFC/cm2, sendo cinco delas de ambiente, com populações que variaram de 1,0 x 100 a 3,0 x 100 UFC/placa. Entretanto, após o enriquecimento seletivo, aeromonas foram isoladas de 38 amostras. A caracterização bioquímica das espécies permitiu verificar a ocorrência de A. caviae, A. schubertii, A. trota e A. sobria. Os testes com antimicrobianos revelaram resistência de todas as cepas a ampicilina e cefalotina, e para os demais antimicrobianos esta foi variável. A resistência da totalidade dos cultivos a determinados princípios indica que os antimicrobianos devem ser utilizados criteriosamente com a finalidade de evitar o surgimento precoce de cepas de Aeromonas sp. resistentes. As técnicas moleculares não possibilitaram a identificação precisa da origem das bactérias na indústria, mas possibilitaram identificar os manipuladores como disseminadores das mesmas. Ainda, a maior prevalência de A. caviae deve ser considerada relevante, pois trata-se de uma das espécies causadoras de gastrenterite em humanos. / Abstract: The genus Aeromonas comprises important human pathogens and the gastroenteritis are the most common infections attributed to these microorganisms. Considering their importance as foodborne pathogens, the occurrence of Aeromonas sp. was studied on bovine carcasses and environment in an industry in São Paulo State. From 19 location were collected 285 samples. It was done the direct count by seeding on selective medium and biochemical characterization of the species after selective enrichment, antimicrobial susceptibility test and molecular characterization of the isolates by REP and ERICPCR. The direct count permitted bacteria quantification only in 12 samples ranging from 0.5 to 9.2 x 100 CFU/cm2 and five of then were from environment, ranging from 1,0 x 100 a 3,0 x 100 CFU/plate. However after selective enrichment, aeromonas were isolated from 38 samples. Biochemical characterization permitted to verify the occurrence of 59 samples of A. caviae, one of A. schubertii, one of A. trota and one of A. sobria. Antimicrobial test revealed all isolates were resistant to ampicillin and cephalotin, while the results for the other antimicrobials were variable. Resistance of all isolates to some principles indicates that antimicrobials must be used critically to avoid early development of resistant Aeromonas sp. Molecular techniques did not identify precisely the origin of the contamination into the industry, but identified handlers as agent of spreading the bacteria. Also, the greatest prevalence of A. caviae must be considered relevant because it is one of the human gastrenteritis causative species. / Doutor

Aeromonas spp. são bactérias Gram negativas capazes de causar doenças intestinais e extra-intestinais. A virulência de algumas espécies do gênero já foi associada a diversos fatores, como a expressão de flagelos e conseqüente mobilidade bacteriana. Aeromonas caviae apresenta dois distintos sistemas flagelares, um deles responsável pela natação em meio líquido (swimming) onde está envolvido o flagelo polar, e outro associado ao deslizamento em superfícies sólidas ou viscosas (swarming), o qual participam flagelos laterais. A fim de avaliar a contribuição de ambos os flagelos no contexto da formação de biofilme em superfície plástica e aderência à linhagem celular HEp-2, foram estudadas 76 cepas de A. caviae isoladas de diferentes origens. Os resultados obtidos em nosso estudo demonstraram que a detecção do gene flaA (flagelina polar) foi mais freqüente (94%) que a do gene lafA (flagelina lateral) (71%) e, aparentemente, a presença deste último parece estar condicionada à do primeiro. Todas as cepas que apresentaram o genótipo flaA-lafA-, foram incapazes de formar biofilme, bem como 76% das cepas flaA+lafA-. As cepas provenientes de água foram as que exibiram menor percentual de positividade para o gene da flagelina lateral (57%) e aquelas onde se observou maior incapacidade de formação de biofilme (71%). Além disso, 95% das cepas flaA+lafA+ formaram biofilme e todas as cepas que apresentaram, quantitativamente, um biofilme forte, albergavam ambos os genes. A aderência à HEp-2 se mostrou eficiente em todos os casos onde ao menos um dos flagelos estava presente e em dois casos onde ambos estavam ausentes, com prevalência do padrão agregativo. Em contrapartida, não foi notado uma interferência exclusiva dos flagelos laterais nesse processo. Todas as três cepas que não aderiram ao modelo celular utilizado, ou o fizeram muito discretamente, não exibiram nem o gene flaA, tampouco lafA. Em conclusão aos dados observados, apontamos que uma plena atividade de ambos os flagelos, geralmente, é requerida nos processos de aderência às superfícies abióticas e bióticas. Contudo, trabalhos adicionais sobre a contribuição dessas estruturas na patogênese de A. caviae necessitam ser realizados. / Aeromonas spp. are bacteria Gram-negative able to cause intestinal and extraintestinal diseases. The virulence of some species of this genus has already been associated to several aspects, such as the expression of flagellum and following bacterium mobility. Aeromonas caviae presents two distinct flagellar systems, one of which is responsible for mobility in liquid environments (swimming) at where the polar flagellum is involved, and the other is associated to sliding in solid or viscous surfaces (swarming), in which lateral flagella take part. In order to evaluate the contribution of both flagella in the biofilm formation in plastic surfaces and its adherence to cell line HEp-2, 76 strains of isolated A. caviae from distinct sources were analyzed. The results from our studies showed that detection of gene flaA (polar flagellin) was more frequent (94%) than gene lafA (lateral flagellin) (71%), and apparently, the presence of the last one seems to be conditioned to the first one (the gene flaA). All the strains that presented the genotype flaA-lafA- were unable to form biofilm, such as 76% of strains flaA+lafA-. The aquatic strains were those who showed lesser percentage of positivity for the lateral flagellin gene (57%), and higher incapacity of biofilm formation (71%). Moreover, 95% of the flaA+lafA+ strains formed biofilm, and all strains that quantitatively showed a strong biofilm, contained both genes. The adherence to HEp-2 proved to be efficient in all cases where at least one of the two flagella was present at, and in two cases where both were absent, with prevalence of the aggregative pattern. However, an exclusive interference from the lateral flagella was not perceived in this process. All of the three strains that did not adhere to the cell model used, or that adhered in a very discrete way, did not show neither gene flaA nor gene lafA. In conclusion, we suggest that the complete function of both flagella usually is a requirement in the adherence processes to biotic and abiotic surfaces. However, additional studies on the contribution of these structures in the pathogenesis of A. caviae need to be carried out.