En el presente estudio se evaluó el efecto del tiempo de almacenaje en la calidad de damascos var. Robada, en un estado de madurez, de un color de fondo verde amarillento y Castlebrite en dos estados de madurez, de un color de fondo verde amarillento (M1) y amarillo (M2), respectivamente. La fruta fue almacenada a 0ºC y 90% de HR, por 0, 14, 21 y 28 días. Las evaluaciones se realizaron después de retirada la fruta de la cámara de frío más un período variable a 20ºC, hasta que la firmeza de la pulpa alcanzó entre 2 y 4 lb-f. Los parámetros de calidad evaluados fueron: concentración de sólidos solubles, acidez titulable, firmeza de pulpa (ambas caras) y color (epidermis y pulpa). Por medio del análisis sensorial se evaluó dulzor, gusto ácido, jugosidad, sabor, aroma, textura y aceptabilidad. Los frutos de la variedad Robada presentaron una ligera disminución de la aceptabilidad con respecto al primer día de evaluación (día 0), lo que coincidió con la tendencia que presentó textura, sabor y aroma durante el período en estudio. A pesar de ello siempre se encontraron en la zona de aceptación. Para los frutos de “Castlebrite”, la aceptabilidad del estado de madurez menos avanzado se ubicó en la zona de rechazo en todo el período en almacenaje, en cambio el estado de madurez más avanzado se ubicó siempre en la zona de indiferencia. La baja calificación de esta variedad se explica por su alta acidez y bajo contenido de sólidos solubles, lo que fue indicado por los jueces al evaluar dulzor y gusto ácido. Es posible almacenar ambas variedades y sus respectivos estados de madurez por 28 días sin presentar grandes diferencias en sus atributos de calidad, lo que se refleja en una aceptabilidad estable en postcosecha. / In the present study the effect of storage time on the quality of apricot fruit was evaluated in Robada cv. at a single maturity stage, of a yellowish green ground color, and in Castlebrite cv. at two maturity stages, of a yellowish green (M1) and yellow (M2) ground color, respectively. Fruit was stored at 0ºC and 90% RH for 0, 14, 21 and 28 days. The evaluations were made after removing the fruit from the cold storage chamber plus a variable period at 20ºC, until the pulp firmness reached between 2 and 4 lb-f. The evaluated quality parameters were: soluble solids concentration, titratable acidity, pulp firmness (both faces) and color (epidermis and pulp). By means of sensory analysis, sweetness, acid taste, juiciness, flavor, aroma, texture and acceptability were evaluated. ‘Robada’ apricot fruit presented a slight diminution of acceptability with respect to the first evaluation day (day 0), which agreed with the tendency shown by texture, flavor and aroma during the period under study. In spite of it, these parameters always remained in the acceptance zone. For ‘Castlebrite’ fruit, the acceptability of the least advanced maturity stage was found in the rejection zone throughout all the storage period, whereas the most advanced maturity stage was always found in the indifference zone. The low assessment of this variety resulted from its high acidity and low soluble solids content, which was indicated by the judges when evaluating sweetness and acid taste. Both cultivars can be cold stored at the maturity stages tested here for 28 days without presenting great differences in their quality attributes, which is reflected in a stable acceptability at postharvest.

Memoria para optar al título profesional de: Ingeniero Agrónomo Mención: Fruticultura

Memoria para optar al Título Profesional de I ngeniero Agrónomo Mención: Economía agraria

Memoria para optar al título profesio nal de Ingeniero Agrónomo. Mención: Producción Animal

Memoria para o ptar al título profesional de: Ingeniero Agrónomo Mención: Manejo de suelos y aguas

Memoria para optar al título profesional de: Ingeniero Agrónomo Mención: Manejo de Suelo y Aguas

En el sur de la provincia de Buenos Aires se encuentra el Valle Bonaerense del Río Colorado (VBRC). Esta región es la principal productora de cebolla en el país. En el área se descartan anualmente entre 12.000 y 20.000 toneladas de cebollas por problemas de calidad y sanidad. Estos residuos suelen ser abandonados en el lugar de producción, trasladados a rellenos sanitarios o incorporados en terrenos cercanos a las plantas de empaque, convirtiéndose en una fuente de contaminación. La biometanización es la degradación anaeróbica de la materia orgánica a biogás (70 % metano y 30 % dióxido de carbono) por un consorcio de arqueas metanogénicas y bacterias facultativas y anaeróbicas que actúan en forma secuencial y sinérgica. La producción de biogás a partir del residuo de la producción de cebolla podría resolver el grave problema medioambiental que causa actualmente. Sin embargo, el residuo de cebolla no es un sustrato convencional para la biometanización, sumado a ello, este residuo presenta características que pueden influenciar negativamente su degradación anaeróbica. Una alteración de la interacción entre las comunidades procarióticas involucradas en la degradación anaeróbica tiene como resultado una producción de biogás reducida, pudiendo provocar la interrupción del proceso. Ante la falta de información específica, en esta Tesis se decidió abordar simultáneamente los estudios de la microbiota nativa y de la factibilidad de la biometanización del residuo. Se recolectaron muestras de residuo de cebolla de diferentes localidades y en distinto estado de degradación y se aislaron bacterias nativas. Se desarrolló un medio de cultivo, a partir de los nutrientes de la cebolla, con el que se caracterizaron los aislamientos. Las cepas con mejor performance en la degradación aeróbica de las hojas internas de la cebolla se identificaron filogenéticamente, destacándose Bacillus subtilis subsp. subtilis MB2-62 y Pseudomonas poae VE-74. Además se obtuvieron cultivos mixtos con actividad hidrolítica en anaerobiosis y se seleccionaron aquellos con alta capacidad de degradar la catáfila externa. Posteriormente, fueron aisladas e identificadas las bacterias integrantes de los cultivos degradadores. Todas las cepas pertenecieron al phylum Firmicutes, entre ellas, Desulfotomaculum guttoideum fue la especie más frecuente en la degradación anaeróbica de cebolla. Se realizaron distintos experimentos que permitieron determinar que las condiciones más adecuadas para optimizar la biodegradación anaeróbica del residuo de cebolla fueron incorporar urea e inocular con barros de anteriores digestiones. También se detectó que el residuo de cebolla contiene todos los grupos funcionales necesarios para la etapa hidrolítica-acetogénica de la biometanización. Sin embargo, para lograr la producción de metano, es necesario incorporar en el reactor otro sustrato que aporte arqueas metanogénicas. En conclusión, a partir de los estudios realizados en esta Tesis, fue posible determinar las condiciones para emplear el residuo de la producción de cebolla del VBRC como sustrato en la biometanización. Estas condiciones son incorporarlo en el biorreactor en partes iguales con barro activado a partir de estiércol vacuno en condiciones mesofílicas. En consecuencia, se logró establecer una alternativa de reutilización viable para estos residuos. / Colorado River Bonaerense Valley (VBRC) is located in south Buenos Aires province and is the major onion producing region of Argentina. The production of onion in this region generates annually 12,000 to 20,000 tons of discarded onion bulbs on account of their shape, size or sanitary conditions. Generally, this waste is thrown away in fields nearby packhouses, disposed in landfills or left in growing areas, turning into a contamination source. Biomethanation is the anaerobic degradation of organic matter to biogas (70 % methane and 30 % carbon dioxide) by a consortium of facultative anaerobic and strictly anaerobic bacteria and methanogenic archaea that work sequentially and synergistically. Biogas production from onion waste could be a valuable alternative in order to solve the environmental problem it causes today. However, onion waste is an unconventional substrate for biogas production. In addition, it has characteristics that may negatively influence the anaerobic degradation. If the interaction between the prokaryotic communities involved in the anaerobic degradation is disrupted, biogas production decreases and the digestion process could be interrupted. To our knowledge, there is no specific information available about de anaerobic digestion of this type of onion waste. As a consequence, this thesis addresses simultaneously studies about the native microbiota and the feasibility of onion waste to be used as a substrate for biomethanation. We isolated bacterial strains from onion waste in different degradation stages and from different localities. In order to characterize the isolates we developed a culture medium prepared with onion juice as the main source of nutrients. The most remarkable strains in the aerobic degradation of onion inner fleshy leaves were identified by 16S rRNA gene sequencing and Bacillus subtilis subsp. subtilis MB2-62 and Pseudomonas poae VE-74 were the most outstanding. In addition, mixed-cultures with anaerobic hydrolytic activity were also obtained from onion waste. We selected those with high efficiency to anaerobically degrade onion outer leaves. Then, we isolated and identified the members of each culture. All the strains belonged to phylum Firmicutes, among them, Desulfotomaculum guttoideum was frequently detected. Several experiments allowed us to determine the most appropriate conditions for onion waste anaerobic biodegradation, namely, addition of urea and inoculation with sludge from previous digestions. It was also detected that onion waste contains all the functional groups needed for the hydrolytic-acetogenic stage of biomethanation. However, in order to produce methane it is necessary to load other substrate in the reactor as source of methanogenic archaea. In conclusion, based on the studies performed in this thesis, it was possible to determine the conditions for using the onion waste of VBRC as substrate for biomethanation. These conditions are loading the reactor with the same ratio of onion waste and activated sludge from manure in mesophilic conditions. Consequently, a possible alternative for onion waste reutilization was established.

La necesidad de aumentar la producción de alimentos para satisfacer las demandas alimentarías de la población mundial, implica la utilización de prácticas como la fertilización inorgánica, que pueden provocar la acumulación de sustancias potencialmente tóxicas como ser nitratos en las hortalizas de hoja. Las hortalizas producidas en forma ecológica, utilizando enmiendas orgánicas para satisfacer las necesidades nutricionales de los cultivos, podrían reducir los riesgos de acumulación de nitrato. Asimismo, la producción orgánica incrementaría las propiedades nutricionales de los alimentos vegetales, con un aumento de vitaminas y minerales. En el presente trabajo se estudió la respuesta productiva y la calidad de la espinaca producida en invernadero en forma orgánica, en los ciclos productivos otoño – invierno y primavera, entre 2007 y 2009, en la región del Valle Inferior del Río Negro. Se utilizaron diversos abonos con diferentes dosis, incluyendo estiércol vacuno compostado, compost de cebolla- estiércol y un fertilizante orgánico comercial. Se evaluó el rendimiento del cultivo en cada ciclo, el contenido mineral y la acumulación de nitrato en hojas y pecíolos. Se relacionó la concentración de NO3- con la temperatura y radiación solar incidente. En el momento de la cosecha, se determinó además la calidad higiénico-sanitaria de la espinaca, mediante análisis microbiológicos y el contenido de hierro y de vitaminas A y C. Los resultados obtenidos indican que en esta región es factible la producción orgánica de espinaca en invernadero, en ambos ciclos de cultivo, con buenos rendimientos, manteniendo el contenido de nitrato por debajo de los límites establecidos internacionalmente. Asimismo, se verificó su aptitud para el consumo humano en función de la calidad higiénico – sanitaria obtenida, cumpliendo con la reglamentación vigente. Además se verificó un contenido superior de algunos minerales en comparación con los valores de referencia de espinaca producida en forma convencional. / The need to increase food production to meet the food demands of the world’s population, involves the use of practices such as inorganic fertilizer, which can cause the accumulation of potentially toxic substances such as nitrate in leafy vegetables. The vegetables produced organically, using organic amendments to meet the nutritional needs of crops, could reduce the risk of nitrate accumulation. Furthermore, the organic production would increase the nutritional properties of plant foods, with an increase of vitamins and minerals. In this work, it was studied the production and quality response of organic spinach produced in greenhouse during the production cycles of fall - winter and spring, between 2007 and 2009, in the region of the Valle Inferior del Río Negro. Various fertilizers were used at different doses, including composted cow manure, compost manure-onion and a commercial organic fertilizer. The crop yield at each cycle, the mineral content and the accumulation of nitrate in leaves and petioles were evaluated. The NO3- concentration was related to the temperature and solar radiation. At the time of the harvest, the hygienic quality of spinach by microbiological analysis and the content of iron and vitamins A and C were established. The results indicate that in this region the spinach organic production in greenhouse is feasible in both crop cycles, with good yields, keeping the nitrate below the internationally established limits. Its fitness for human consumption according to the quality hygienic - sanitary obtained was also checked complying with regulations. Furthermore, there was a higher content of some ores compared to the reference values of conventionally produced spinach.

La producción de haploides y haploides duplicados es una herramienta empleada en una gran cantidad de especies que permitiría acortar sustancialmente el tiempo requerido para la obtención de nuevos individuos homocigotas. El desarrollo y la optimización de nuevas tecnologías en este sentido es de gran interés para el avance en investigación básica así como para acelerar programas de mejoramiento genético vegetal. En el presente trabajo se evaluó la producción de plantas potencialmente haploides de maíz (Zea mays L.) para su utilización en programas de mejoramiento e investigación genética. Se trabajó con la técnica de inducción de potencialmente haploides in vivo mediante el empleo de polinizadores inductores de haploidía. Estos polinizadores se destacan por su aptitud de generar un número significativo de granos potencialmente haploides al fecundar distintos parentales femeninos. Se utilizaron cinco polinizadores y se evaluó su capacidad para la inducción de granos potencialmente haploides in vivo en porcentaje. La capacidad de inducción de plantas potencialmente haploides de los diferentes polinizadores fue cuantificada en diferentes ambientes de cultivo de los parentales y utilizando diferente germoplasma como progenitor femenino. Los experimentos se realizaron en 4 ambientes, a saber, Venado Tuerto, en dos fechas de siembra (VT1, VT2), Balcarce y Rancagua (Chile). La detección de granos potencialmente haploides se basó en la expresión de un gen marcador de color, R-nj (Rojo navajo), tanto en endosperma como en embrión. Dicho marcador permite seleccionar aquellos embriones en los cuales la fecundación no tuvo lugar. La ausencia de coloración en el embrión indica la ausencia de fecundación, evidenciando la condición haploide materna de dicho individuo. No obstante la presencia de inhibidores de color estaría afectando dicha expresión en algunos de los germoplasmas evaluados en este trabajo. Se lograron identificar polinizadores inductores de haploidía con comportamiento estadísticamente superior. Dicha capacidad fue corroborada en diferentes ambientes sin encontrarse interacción entre los mismos. Los polinizadores inductores HIND 2 (X1-B1/G3-64) y HIND 4 (M4-B3/G3-64) presentaron porcentajes de inducción de haploides potenciales superiores al 8%. En este estudio los valores más elevados de inducción fueron registrados en el ambiente de Balcarce (13,8%). El ambiente en el cual se realiza la polinización es una fuente de variabilidad que debe considerarse en el momento de implementar la técnica de obtención de individuos potencialmente haploides. La técnica de obtención de haploides de maíz in vivo optimizada en esta tesis permite la obtención de estimativamente 10 granos potencialmente haploides a ser duplicados por cada 100 granos obtenidos en el cruzamiento de inducción. Esta relación permite una aplicación directa en programas de mejoramiento de maíz comerciales. / The production of haploids and double haploids is a widely used strategy in many species allowing the reduction of the time to the generation of a complete homocigous individual. The development and optimization of new technologies is of mayor interest for the basic research and to hasten processes in breeding programs. In the present work maize (Zea mays L.) haploid plants production for breeding and research purposes was evaluated. The in vivo haploid induction technique was performed by using male haploid inducers. Five haploid inducers were tested in their ability to generate haploid kernels. The inducer pollinators were selected for their ability to generate a significant number of haploid kernels over different females pollinated. The induction of haploid plants was tested for the different pollinators as affected by parental growing environment and female germplasm. Female parental material and inducers were planted in Venado Tuerto, two sowing dates (VT1, VT2), Balcarce and Rancagua (Chile). Haploid kernels detection was based on the expression of color markers, R-nj, in endosperm and embryo. Such marker allows the selection of embryos in which fertilization was not effective. The lack of color on embryo is an evidence for incomplete fecundation, leading to a putative maternal haploid kernel. However the presence of color inhibitors in some of the female germplasms evaluated in this work may be affecting the expression of the markers. It was possible to identify haploid inducers with statistically superior performance. There was no interaction between inducers and the environments tested in this work. The maternal haploid inducers HIND 2 (X1-B1/G3-64) and HIND 4 (M4-B3/G3-64) presented haploid induction rates over 8%. In the present evaluation the highest induction rates were obtained in Balcarce environment (13.8 %). The environmental condition in which pollination takes place is a source of variability that must be taken into consideration while developing the in vivo haploid induction technique. This maize haploid in vivo process produces c.a. 10 haploids to be doubled per 100 kernels obtained in the crossing between the inducers and the female parents. This efficiency rate is large enough for a direct application in commercial maize breeding programs.

La apomixis es una forma de reproducción clonal, donde no ocurre ni meiosis ni fecundación para la formación de la semilla. Existe una estrecha relación entre la apomixis y el nivel de ploidía, dado que en la mayoría de las especies que presentan el carácter los genotipos diploides son sexuales y los poliploides son apomícticos y con un grado variable de sexualidad (facultativos). Aunque se sabe que el carácter es regulado por una o más regiones del genoma, se han hallado numerosas evidencias de mecanismos epigenéticos que regulan su expresión. Conocer los factores que determinan la apomixis tendría un gran impacto en la agricultura. Eragrostis curvula (“pasto llorón”) es una gramínea forrajera originaria de Sudáfrica, que incluye genotipos con diferentes niveles de ploidía (2X hasta 8X, con X = 10), que pueden ser sexuales o apomícticos (facultativos u obligados). Nuestro grupo de trabajo realizó numerosos estudios, sobre todo en el carácter apomixis, tanto a nivel de genética estructural como funcional. El objetivo de esta tesis fue contribuir a la dilucidación de las bases genéticas y epigenéticas que regulan uno de los componentes de la apomixis (apomeiosis) en E. curvula. Se desarrolló una población de mapeo segregante para el carácter apomixis a partir del cruzamiento entre dos genotipos tetraploides, uno sexual (OTA-S) y otro apomíctico facultativo (Don Walter). La genotipificación se realizó con marcadores DArT-SNP y el fenotipado mediante citoembriología y un marcador molecular dominante. El mapa de ligamiento quedó conformado por 20 grupos de ligamiento (GL), con el posicionamiento del APO locus en el GL1, donde también se ubicaron tres marcadores SNP 100 % ligados al carácter apomeiosis. La secuencia de los SNP 100 % ligados tienen homología con proteínas anotadas en bases de datos, que podrían estar relacionadas al modo reproductivo. Se realizó un análisis de sintenia entre los GLs del mapa consenso y el genoma de referencia de la especie (cv. Victoria) que permitió asociar todos los GLs a alguno de los contigs y hallar los GLs que corresponderían potencialmente a cada uno de los genomas del alotetraploide (homeólogos). Para la validación de los marcadores se diseñaron y evaluaron cinco primers KASP que permitieron discriminar entre los alelos de los individuos sexuales y apomícticos. En el segundo capítulo se analizaron diferentes resultados obtenidos por el grupo de trabajo que evidencian la influencia de la epigenética sobre el carácter apomixis en plantas de E. curvula. Para analizar la participación de mecanismos de metilación del ADN en la regulación de la apomixis bajo condiciones de estrés hídrico, se realizó un ensayo en el cual muestras de ADN de inflorescencias fueron evaluadas mediante la “Estimación del contenido de metilación por doble corte con enzimas de restricción sensibles” (MCSeEd). En las regiones diferencialmente metiladas se lograron encontrar genes vinculados al modo reproductivo, como BABYBOOM, ubiquitinas, FBox y subtilisinas. Podría afirmarse que tanto el estrés interno como externo ejerce una gran influencia sobre el modo reproductivo de E. curvula, modificando la expresión del carácter apomixis en plantas apomícticas facultativas. / Apomixis is a type of clonal reproduction, where neither meiosis nor fertilization occurs in seed formation. There is a close relationship between apomixis and ploidy level, since in most of the apomictic species diploid genotypes are sexuals and polyploids are apomictics. Usually, apomictic plants are facultative, being some of the seeds sexuals in origin. Although it is known that this trait is regulated by one or more genomic regions, numerous evidences of epigenetic mechanisms that regulate its expression have been found. Knowing the factors that determine apomixis could have a great impact on agriculture. Eragrostis curvula, commonly known as weeping lovegrass, is a forage grass native to southern Africa, which includes genotypes with different ploidy levels (from 2X to 8X, with X = 10) and that can be sexuals or apomictics (facultative or obligate). Our work group carried out several studies on this model species, especially related with the apomixis character, both at the structural and functional genetic level. The objective of this thesis was to contribute to the elucidation of the genetic and epigenetic bases that regulate one of the components of apomixis (apomeiosis) in E. curvula. A segregating mapping population was generated for the apomixis trait from the cross between two tetraploid genotypes, one sexual (OTA-S) and the other one facultative apomictic (Don Walter). Genotyping was performed with DArT-SNP markers and phenotyping using cytoembryological techniques and a dominant molecular marker. The linkage map was made up of 20 linkage groups (LGs), with the apomeisis locus (APO locus) located on GL1, where three SNP markers 100 % linked to the APO locus were also located. All of this 100 % linked SNPs have homology with proteins, two of these annotated in databases. A synteny analysis was performed between the GLs of the consensus map and the E. curvula reference genome (cv. Victoria), which allowed all the GLs to be associated to any of the contigs and to find the GLs that would potentially correspond to each allotetraploid genome (homeologs). For the validation of the markers, five KASP primers were design and performed, allowing to discriminate between the sexual or apomictic alleles of the ndividuals of the mapping population. Furthermore, in a second chapter, several results obtained by the work group were evaluated, demonstrating an influence of epigenetic regulation on the apomixis trait in E. curvula. To analyze the involvement of DNA methylation mechanisms in the regulation of apomixis under water stress conditions, DNA samples of inflorescences under different stress conditions were evaluated, using the “Methylation content sensitive enzime double-digest restriction-site-associated DNA” (MCSeEd) method. Some of the genes identified in the differentially methylated regions were found to be related to the reproductive mode, such as BABYBOOM, ubiquitin, F-box and subtilisin genes. It could be proposed that stress, both internal and external, has a significant influence in the reproductive mode of E. curvula, modifying the expression of the trait in facultative apomicts.