CHAVES, Edna Maria Camelo. Ação ansiolítica e anticonvulsivante da 6-[(E)-esteril-piran-2-ona] de Aniba panurensis em camundongos : possível mecanismo de ação. 2012. 182 f. Tese (Doutorado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2012. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2013-03-08T12:44:06Z No. of bitstreams: 1 2012_tese_emcchaves.pdf: 2294210 bytes, checksum: 1e91bce302745c1573c20011363f7868 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes(erikaleitefernandes@gmail.com) on 2013-03-12T14:08:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_tese_emcchaves.pdf: 2294210 bytes, checksum: 1e91bce302745c1573c20011363f7868 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-03-12T14:08:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_tese_emcchaves.pdf: 2294210 bytes, checksum: 1e91bce302745c1573c20011363f7868 (MD5) Previous issue date: 2012 / The genus Aniba stands out for its pharmacological properties, such as anxiolytic, antidepressant and vasorelaxant. Of the Aniba panurensis fruits popularly known as ―louro amarelo‖ a natural pyrone, 6-[(E)-styryl-pyran-2-one], was identified. The objective of this study was to verify the neuropharmacological effects of 6-[(E)-styryl-pyran-2-one] (STY), obtained from Aniba panurensis, in mice through behavioral tests (spontaneous locomotor activity (SLA), rearing and grooming), tests of chemically induced seizures and neurochemical dosages of amino acids (glutamate (GLU), aspartate (ASP), γ-aminobutyric acid (GABA), glycine (GLY), taurine (Tau), histidine (HIS) in the prefrontal cortex (PFC), hippocampus (HC) and striatum (ST). We used Swiss mice, male, with an average weight of 28 grams. The animals were treated with a single dose of STY (1, 5, 10 or 20 mg) by intraperitoneal injection. Thirty minutes after administration, the animals were subjected to behavioral tests of chemically induced seizures by pentylenetetrazol (PTZ), strychnine, bicuculline and pilocarpine. Immediately after the tests, the animals were sacrificed and the brain areas of interest were dissected to estimate the amino acid concentration via HPLC (High Performance Liquid Chromatography). In the SLA test the STY at 10 or 20 mg/kg dose increased locomotor activity when compared to the control group. In the elevated plus-maze and hole-board tests, the STY in all doses proved its anxiolytic effect, because it increased all parameters analyzed. In the dosage of amino acid neurotransmitters after behavioral test there was an increase in inhibitory amino acid concentrations (GABA, GLY, TAU, HIS) and excitatory (ASP, GLU) in PFC, HC and ST. After pretreatment with STY, the animals were tested for seizures induced by PTZ (85 mg/kg) or Bicuculline (12 mg/kg), we observed an increase in the latency of seizures and death in surviving animals at the highest dose. During the strychnine-induced seizures test (20 mg/kg) there was an increase in seizure latency (STY-10: 50.42 ± 7.20; STY-20: 65.99 ± 3.22) and latency to death (STY-1: 20 ± 1.72; STY-10: 19.17 ± 1.87; STY-20: 23.83 ± 1.55) in all animals pretreated with STY. In the pilocarpine-induced seizures there was a decrease in the latency to death. After testing the animals, we conducted the dosage of amino acid concentrations (ASP, GLU, GLY, TAU and GABA). PFC increased ASP, TAU and GABA. HC increased GLU, ASP, GLY and GABA. In the strychnine-induced seizure in PFC there was an increase in ASP, TAU and GABA, while the HC increased ASP, GLY, TAU and GABA. In the bicuculline-induced seizure in PFC there was an increase in ASP, GLU, GLY, TAU and GABA, while the HC increased ASP, GLU, GLY, TAU and GABA. In the pilocarpine-induced seizure in PFC there was an increase in ASP, GABA, GLY, while the HC increased only ASP. We concluded that STY presents an anxiolytic effect in behavioral tests and a protective effect in tests of induced seizures by PTZ, strychnine and bicuculline. After the dosage of the amino acids we can demonstrate the involvement of glutamatergic, GABAergic and glycinergic systems. / O gênero Aniba destaca-se por suas propriedades farmacológicas, tais como ansiolítica, antidepressiva e vasorelaxante. Dos frutos de Aniba panurensis conhecida popularmente por “louro amarelo” foi identificada uma pirona natural, a 6-[(E)-esteril-piran-2-ona]. O objetivo do presente trabalho foi verificar os efeitos neurofarmacológicos da 6-[(E)-esteril-piran-2-ona (STY) obtida da Aniba parusinensi em camundongos através de testes comportamentais (atividade locomotora espontânea (ALE), rearing e grooming), testes de indução de convulsão química e dosagens neuroquímicas de aminoácidos (glutamato (GLU), aspartato (ASP), ácido γ-aminobutírico (GABA), glicina (GLI), taurina (TAU), histidina (HIS) em córtex pré-frontal (CPF), hipocampo (HC) e corpo estriado (CE). Foram utilizados camundongos Swiss, machos, com peso médio de 28 gramas. Os animais foram tratados com dose única de STY (1, 5, 10 ou 20 mg) por via intraperitoneal. Trinta minutos após administração os animais foram submetidos aos testes comportamentais e teste de convulsão induzidas por pentilenotetrazol (PTZ), estricnina, bicuculina e pilocarpina. Imediatamente após os testes os animais foram sacrificados e as áreas cerebrais de interesse dissecadas para a dosagem da concentração de aminoácidos através de HPLC (High Perfomance Liquid Chromatography). No teste de ALE a STY na dose de 10 ou 20 mg/kg aumentou atividade locomotora quando comparada ao grupo controle. No Labirinto em cruz elevada e o teste da placa perfurada, a STY em todas as doses comprovou seu efeito ansiolítico, pois aumentou todos os parâmetros analisados. Na dosagem de aminoácidos neurotransmissores após o teste de comportamento houve aumento nas concentrações dos aminoácidos inibitórios (GABA, GLI, TAU, HIS) e excitatórios (ASP, GLU) no CPF, HC e CE. Após o pré-tratamento com STY os animais foram submetidos ao teste de indução de convulsão por PTZ (85 mg/kg) ou Bicuculina (12 mg/kg) foram observados aumentos na latência de convulsão e morte, com animais sobreviventes na maior dose. No teste com a indução de convulsão por estricnina (20 mg/kg/ ocorreu o aumento na latência de convulsão (STY-10: 50,42 ± 7,20; STY-20: 65,99 ± 3,22) e latência de morte (STY-1: 20 ± 1,72; STY-10: 19,17 ± 1,87; STY-20: 23,83 ± 1,55) em todos os animais pré-tratados com STY. Na indução de convulsão por pilocarpina ocorreu uma diminuição da latência de morte. Após os testes os animais realizou-se a dosagem da concentração dos aminoácidos (ASP, GLU, GLI, TAU e GABA). No CPF aumentaram ASP, TAU, GABA. Já no HC o aumentou GLU, ASP, GLI e GABA. Na indução de convulsão com estricnina no CPF ocorreu o aumento no ASP, TAU, GABA, enquanto no HC aumentou ASP, GLI, TAU, GABA. No modelo de indução com bicuculina no CPF aumentou o ASP, GLU, GLI, TAU, GABA, enquanto no HC aumentou ASP, GLU, GLI, TAU, GABA. No modelo de indução com pilocarpina no CPF aumentou ASP, GABA, GLI, enquanto no HC aumentou apenas o ASP. Conclui-se que a STY apresenta um efeito ansiolítico nos testes de comportamento, efeito protetor nos teste de indução de convulsão por PTZ, estricnina e bicuculina. Após o doseamento dos aminoácidos pode-se demonstrar a participação dos sistemas glutamatérgico, GABAérgico e glinérgico.

ALMEIDA, Alysson Chaves. Caracterização estrutural e biológica de uma lectina de sementes de centrolobium tomentosum guill. ex benth. 2016. 107 f. Tese (Doutorado em Bioquímica)-Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-07-20T17:06:21Z No. of bitstreams: 1 2016_tese_acalmeida.pdf: 4372580 bytes, checksum: a98ca6bfca18608263cd629ebf62b1be (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-07-20T17:08:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_tese_acalmeida.pdf: 4372580 bytes, checksum: a98ca6bfca18608263cd629ebf62b1be (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-20T17:08:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_tese_acalmeida.pdf: 4372580 bytes, checksum: a98ca6bfca18608263cd629ebf62b1be (MD5) Previous issue date: 2016 / A glycosylated lectin (CTL) with specificity for mannose and glucose has been detected and purified from seeds of Centrolobium tomentosum, a legume plant from the Dalbergieae tribe. CTL was isolated by mannose-Sepharose affinity chromatography. The primary structure was determined by tandem mass spectrometry and consists of 245 amino acids and one N-glycosylation site, possessing high similarity with the lectin Platypodium elegans (PELa) and Pterocarpus angolensis (PAL) derived from the same tribe. Two crystal structures of CTL, with monoclinic and tetragonal forms, both complexed with methyl dimanosídeo has been solved at 2.25 and 1.9 Å, respectively, with high similarity. The lectin adopts a typical canonical dimeric organization of legume lectins. The carbohydrate recognition domain (CRD), metal binding site, and glycosylation site have been characterized and the structural basis for interaction with carbohydrate been elucidated. CTL showed acute inflammatory effect in a paw edema model. The protein structure was subjected to ligand screening (dimannosides and trimannoside) by molecular docking, revealing a higher affinity for trimannosides and their interactions were compared with similar lectins, which have the same binding specificity. This is the first report of a crystal structure of a native mannose lectin / specific glucose Dalbergieae tribe with pro-inflammatory activity / Uma lectina glicosilada (CTL) com especificidade a manose e glucose foi detectada e purificada a partir de sementes de Centrolobium Tomentosum, uma leguminosa pertencente à tribo Dalbergieae. CTL foi isolada por cromatografia de afinidade de Sepharose-Manose. A estrutura primária foi determinada por espectrometria de massas e consiste em 245 aminoácidos e um sitio de ¬N¬-glicosilação, demonstrando similaridade com a lectina de Platypodium elegans (PELa), Pterocarpus angolensis (PAL), dentre outras, oriundas da mesma tribo. Duas estruturas cristalinas de CTL, de formas monoclínica e tetragonal, ambas complexadas com metil-dimanosídeo, foram resolvidas a 2,25 e 1,9 Å, respectivamente, apresentando alta similaridade entre si. A lectina mostrou adotar uma organização dimérica canônica típica de lectinas de leguminosas. O domínio de reconhecimento de carboidratos (CRD), local de ligação do metal e local de glicosilação foram caracterizados e a base estrutural para a interação com carboidratos foi elucidado. CTL mostrou efeito inflamatório agudo em um modelo de edema de pata. A estrutura da proteína foi submetida a uma análise de interações com dimanosídeos e trimanosídeos por Docking Molecular, revelando sua maior afinidade por trimanosídeos e suas interações foram comparadas com lectinas similares que possuam a mesma especificidade de ligação. Esse é o primeiro relato de estrutura cristalina de uma lectina nativa manose/glucose específica da tribo Dalbergieae com atividade pró-inflamatória

LUCETTI, Elaine Cristina Pereira. Efeitos centrais da cumarina (1,2-Benzopirona) : estudo comportamental e neuroquímico em córtex pré-frontal e hipocampo de camundongos. 2010. 89 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-03-22T13:24:12Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_ecplucetti.pdf: 985949 bytes, checksum: 88be39ae0cff3c3a1205c75b792d1e83 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-03-22T13:45:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_ecplucetti.pdf: 985949 bytes, checksum: 88be39ae0cff3c3a1205c75b792d1e83 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-03-22T13:45:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_dis_ecplucetti.pdf: 985949 bytes, checksum: 88be39ae0cff3c3a1205c75b792d1e83 (MD5) Previous issue date: 2010 / Coumarin (1,2-benzopyrone) is an aromatic compound found in many plant species. This study proposed to evaluate the coumarin actions in behavioral models of anxiety, depression and sedation activity, such as the open field, rota rod, elevated plus maze (EPM), hole board and tail suspension, still looking to clarify mechanisms by which this compound acts, through amino acids determination studies in mice prefrontal cortex and hippocampus by HPLC (High Performance Liquid Chomatography). The coumarin (CUM) was administered acutely in all tests, at doses of 5, 20 or 40 mg/kg, by intraperitoneal route. The results show that CUM, in all used doses, decreased the locomotor activity, the number of rearing and grooming in open field test, suggesting a possible sedative action. In the rota rod the coumarin did not alter the motor coordination or caused muscular deficit in animals. This suggests that the depressant effect of coumarin should not be exercised by peripheral neuromuscular blockade, but possibly the effects must involve neurons that control the central depressive activity. In the EPM and hole board test, coumarin proved its anxiogenic effect, as it reduced all examined parameters in the EPM, as NEOA, PEOA, TPOA and PTOA, as well as the number of head dips in the hole board. This opposite effect to diazepam was not reversed by flumazenil (benzodiazepine antagonist). This suggests that coumarin does not act in a similar manner to benzodiazepines. Still aiming to clarify the changes in animals locomotor activity, it was administered levodope + carbidope (L-DOPA), which led to a small increase in the locomotor activity, compared to CUM group. When associated to haloperidol (HALO) - dopaminergic antagonist, L-DOPA had its effects reversed. HALO + CUM caused greater interference in locomotion, as a synergic effect. The coumarin did not show antidepressant effect in the tail suspension test, because it increased the immobility time of animals. Imipramine (antidepressant) decreased this parameter. In the determination of amino acids neurotransmitters it was observed an increase in the GABA levels in the prefrontal cortex, similar to diazepam, which may partly explain the decrease in locomotor activity. The levels of glutamate, glycine and taurine also increased in the group treated with coumarin 20 mg/kg. In the hippocampus, significant changes occurred in levels of glutamate, which were reduced. It follows, therefore, that the CUM has sedative, anxiogenic and depressant activities. These actions can be linked to an increase or decrease of excitatory and inhibitory amino acids levels and dopaminergic involvement. The anxiogenic effect of coumarin seems to involve the dopamine participation on striatum. Increased levels of taurine leads to a balance in the glutamate levels, which may explain the anxiogenic effect and possible neuroprotective of coumarin. The coumarin demonstrate sedative and anxiogenic action in CNS probably caused by dopaminergic antagonism modulated by gabaergic system, mainly glutamatergic in the prefrontal cortex. / A cumarina (1,2-benzopirona) é um composto aromático encontrado em várias espécies vegetais. Este trabalho objetivou avaliar as ações da cumarina em modelos comportamentais de ansiedade, depressão e sedação, tais como, campo aberto, rota rod, labirinto em cruz elevado (LCE), placa perfurada e suspensão da cauda, procurando esclarecer os mecanismos através de doseamento de aminoácidos em córtex pré-frontal e hipocampo de camundongos através de HPLC (High Perfomance Liquid Chomatography). Foram utilizados camundongos albinos, variedade Swiss Webster, adultos, machos, pesando entre 25-30 g, provenientes do Biotério do Departamento de Fisiologia e Farmacologia da UFC. A cumarina (CUM) foi administrada de forma aguda por via intraperitoneal nas doses de 5, 20 ou 40 mg/kg. Os resultados mostram que a CUM, em todas as doses utilizadas, diminuiu a atividade locomotora, o número de rearing e grooming no teste do campo aberto, sugerindo uma possível ação sedativa. No rota rod não alterou a coordenação motora ou causou déficit muscular nos animais, sugerindo que seus efeitos não se devem ao bloqueio neuromuscular periférico. No LCE e no teste da placa perfurada, a cumarina mostrou seu efeito ansiogênico, pois reduziu todos os parâmetros analisados no LCE, como o número de entradas nos braços abertos (NEBA), percentagem de entrada nos braços abertos (PEBA), Tempo de permanência nos braços abertos (TPBA) e percentagem do tempo de permanência nos braços abertos (PTBA), assim como o número de head dips na placa perfurada. Ainda com o intuito de esclarecer as alterações ocorridas na atividade locomotora dos animais, foi administrada a levodopa + carbidopa (L-DOPA), que levou a um pequeno aumento na atividade locomotora, em relação ao grupo da CUM. Quando associada ao haloperidol (HALO) - antagonista dopaminérgico, o efeito da L-DOPA foi revertido. HALO + CUM causou uma maior interferência na locomoção, como um efeito sinérgico. A cumarina não apresentou efeito antidepressivo no teste da suspensão da cauda, pois aumentou o tempo de imobilidade dos animais. A imipramina (antidepressivo) diminuiu este parâmetro. No doseamento de aminoácidos neurotransmissores houve aumento nos níveis de GABA no córtex pré-frontal, de maneira semelhante ao diazepam, podendo explicar em parte a diminuição da atividade locomotora. Também aumentaram glutamato, glicina e taurina no grupo tratado com 20 mg/kg de cumarina. No hipocampo os níveis de glutamato foram significativamente reduzidos. Estas ações podem estar ligadas ao aumento ou diminuição nos níveis de aminoácidos excitatórios e inibitórios e envolvimento dopaminérgico. O efeito ansiogênico da cumarina parece envolver a participação da dopamina sobre o estriado. O aumento dos níveis de taurina leva a um balanço nos níveis de glutamato, o que pode explicar o efeito ansiogênico e possivelmente neuroprotetor da cumarina. A cumarina demonstrou ação sedativa e ansiogênica sobre o SNC provavelmente devido atuação como antagonista dopaminérgico. Esse mecanismo pode ter sido modulado pelos sistemas gabaérgico e, principalmente, glutamatérgico no córtex pré-frontal.

Orientador: Prof. Dr. Luiz Cláudio Fernandes / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Educação Física. Defesa: Curitiba, 2004 / Inclui bibliografia / Resumo: Este estudo teve como objetivos analisar as respostas imunitárias da proliferação dos linfócitos obtidos dos linfonodos mesentéricos, as respostas fagocíticas, a produção do ânion superóxido e o volume lisossomal dos macrófagos peritoneais, retirados de ratos Wistar, machos, 60 a 90 dias de vida, divididos nos seguintes grupos: CTL - não treinados; GLN - não treinados e suplementados com L- glutamina; EX - treinados e, EX/GLN - treinados e suplementados com L- glutamina. Os ratos foram suplementados com L-glutamina (0,125g/kg de peso corporal) por gavagem, e nos não suplementados receberam água destilada. Os ratos EX e EX/GLN foram submetidos ao treinamento de natação de 6 semanas, em piscinas individuais com água aquecida a 32°C, com sobrecarga de chumbo colocada no dorso do animal, na carga de 6% da massa corporal do animal. Na primeira semana, os animais nadaram sem sobrecarga, para ambientação ao meio aquático. Nas outras semanas nadaram com sobrecarga, começando com 30 minutos de duração, e chegando ao final da sexta semana a nadar 1h30 minutos, sem intervalo. Dois dias após o último dia de treinamento, os animais foram ortotanasiados por deslocamento cervical e retirou-se o sangue, os linfonodos mesentéricos e os macrófagos peritoneais para análise. A glicemia e a glutaminemia não foram diferentes, p>0,05, entre os grupos. Aumento significativo (p<0,05), na proliferação linfocitária, na fagocitose, na produção do ânion superóxido e no volume lisossomal foram observados no grupo EX/GLN, comparados com o grupo EX. Portanto, nossos resultados sugerem que a suplementação de L-glutamina foi eficaz em reverter o papel imunossupressor do exercício físico de longa duração e alta intensidade / Abstract: This study aimed to investigate the immunitary response of lymphocytes from mesenteric limphonodes, phagocytosis, production of anion superoxide and lysosome volume from peritoneal macrophages, withdrawn from male Wistar rats, 60 - 90 days old, set up as follow: CTL - non exercised; GLN - non exercised and supplemented with L-glutamine; EX - exercised and EX/GLN - exercised and supplemented with L-glutamine. The rats received by gavage L-glutamine (0.125g/kg b.w.) and the controls distilled water. Rats from EX and EX/GLN groups trained during 6 weeks, in single swimming pools with warm water (32°C), bearing load of 6% of body weigth. In the first week they swan with no load for adaptation. Then, they swan with the load starting with 30 minutes long and at the enf of the 6 th week swan for 1hour and 30 minutes, no break. Two days later the animals were killed by cervical dislocation and blood, limphonodes e peritoneal macrophages were withdrawn. Glycemia and glutaminemia were not different (p>0.05) between the groups. In the EX/GLN group there was a significant increase (p<0,05), in the rate of lymphocyte proliferation, phagocytosis, production of anion superoxide and lysosome volume. Thus, our results suggest that supplementation with L- glutamine to these animals was able to reverse the immunosuppression effect of long term and high intensity exercise.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Química, Programa de Pós-Graduação em Química, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2013-11-13T14:03:47Z No. of bitstreams: 1 2013_SauloMarquesdaCunha.pdf: 5424545 bytes, checksum: 70f8ae81d705e8d41b709943a346aa31 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-02-03T12:20:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_SauloMarquesdaCunha.pdf: 5424545 bytes, checksum: 70f8ae81d705e8d41b709943a346aa31 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-03T12:20:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_SauloMarquesdaCunha.pdf: 5424545 bytes, checksum: 70f8ae81d705e8d41b709943a346aa31 (MD5) / Compostos heterocíclicos sempre foram foco de estudo em síntese orgânica, tanto por serem utilizados como precursores de estruturas mais complexas, quanto por muitas vezes, estarem presentes em moléculas com potencial biológico. Nos últimos anos, a julocrotina, um alcaloide glutarimida, vem sendo reportada em uma série de publicações devido a sua potencialidade biológica, principalmente seu efeito leishmanicida. Atualmente, existem três diferentes rotas sintéticas descritas na literatura para esta molécula, e apenas uma delas retrata a síntese de análogos. Neste trabalho, foram sintetizados uma série de moléculas estruturalmente análogas à julocrotina empregando derivados succinimídicos, ao invés do anel glutarimida usual, via redução do tamanho do anel imídico formados a partir dos diácidos quirais (S)-málico e (R,R)-tartárico. Dentre as modificações destaca-se, a substituição do átomo de nitrogênio do grupo acila ligado ao anel imídico por oxigênio, resultando na formação de ésteres. Outra modificação envolveu a substituição da cadeia acila lateral por aminoácidos naturais N-Boc protegidos. Além disso, foram testadas duas diferentes metodologias para gerar o substrato imídico (S)-3-amino-1-fenetilpirrolidina-2,5-diona. Ao todo, foram sintetizadas 14 diferentes moléculas inéditas, com rendimentos que variaram de 54-94%, todas caracterizadas por espectroscopia de infravermelho e RMN de 1H e 13C e apresentando. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Heterocyclic compounds were always focus of study in organic synthesis, for both use as precursors to more complex structures and by often taking part in molecules with biological potential. In recent years, the glutarimide alkaloid julocrotine has been reported in a number of publications due to its biological potential effect as leishmanicidal. Currently, there are three different synthetic routes described in the literature for this molecule, only one described the synthesis of its analogues. In this work, we synthesized a serial of julocrotine analogous using succiniminics derived from diacids chiral (S)-malic acid and (R,R)-tartaric acid instead of the usual glutarimide ring. Replacement of the nitrogen atom of the acyl group bonded to the imidic ring by oxygen resulted in the formation of esters. Another modification involved the replacement of the acyl side chain for natural amino acids N-Boc protected. Also, two different methods were tested to generate the imidic substrate (S)-3-amino-1-phenethylpyrrolidine-2,5-dione. Altogether, 14 different molecules previously unreleased were synthesized in yields range from 54-94%, all of the were characterized by infrared spectroscopy and 1H and 13C NMR.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós-graduação em Patologia Molecular, 2008. / Submitted by Suelen Silva dos Santos (suelenunb@yahoo.com.br) on 2011-05-02T18:17:45Z No. of bitstreams: 1 2008_AlessandraMenezesCampos.pdf: 1238572 bytes, checksum: dab07da7d1c9342e2084f202e412302b (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2011-05-13T14:45:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_AlessandraMenezesCampos.pdf: 1238572 bytes, checksum: dab07da7d1c9342e2084f202e412302b (MD5) / Made available in DSpace on 2011-05-13T14:45:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_AlessandraMenezesCampos.pdf: 1238572 bytes, checksum: dab07da7d1c9342e2084f202e412302b (MD5) Previous issue date: 2008 / A renina é uma aspartil protease sintetizada in vivo pela remoção proteolítica do pró-segmento amino-terminal de seu precursor, a pró-renina. A catepsina B, uma tiol protease, tem sido sugerida como candidata à enzima conversora de pró-renina devido à sua co-localização com a renina nos grânulos secretórios e também pela sua capacidade de processar a pró-renina em renina in vitro e em cultura de células. Vetores de expressão de pró-renina selvagem (WT) e mutantes foram co-transfectados com catepsina B em células hipofisárias de ratos GH4C1, que naturalmente não converte pró-renina em renina. Mutações pontuais foram utilizadas para identificar quais aminoácidos presentes no sítio de clivagem da pró-renina são reconhecidos pela catepsina B. Experimentos de pulse-chase foram realizados para rastrear se a pró-renina radiomarcada é capaz de seguir para os grânulos secretórios das células GH4C1. Para investigar se a pró-renina humana poderia ativar o promotor do Peptídeo Natriurético Cerebral (BNP) em cardiomiócitos de ratos neonatos, essas células foram co-transfectadas com o plasmídeo repórter BNP-luciferase com (ou sem) angiotensinogênio humano. Os cardiomiócitos foram co-incubados com as células não-aderentes U937 transfectadas com pró-renina humana WT ou mutantes (-1-2 ou +5). Os cardiomiócitos foram lisados 96 horas após a eletroporação para a análise de geração de luciferase. Células não-transfectadas U937 foram usadas como grupo controle. Captopril e Losartan (10-7 M) foram usados para testar a participação da enzima conversora de angiotensina (ECA) e dos receptores AT1. Os resultados demonstraram que mutações pontuais na metionina -3(M/A), lisina -2(K/A) e leucina +2(L/A) reduzem o processamento da pró-renina pela catepsina B. Além disso, a remoção da cadeia glicosídica na asparagina +5 aumenta a conversão de pró-renina, sugerindo que a glicosilação poderia impedir o processamento enzimático da pró-renina. Nos experimentos de pulse-chase, a pró-renina não foi direcionada aos grânulos secretórios e a presença de catepsina B não alterou esse resultado, indicando que o processamento de pró-renina provavelmente ocorre fora dessas organelas. A pró-renina WT secretada pelas células U937 é capaz de ativar o promotor do BNP em cardiomiócitos de ratos transfectados com angiotensinogênio humano. O par de aminoácidos básicos arginina-lisina e a cadeia glicosídica +5 parecem ser tão importantes quanto a atividade enzimática da ECA e os receptores AT1 para a ativação do promotor do BNP em cardiomiócitos de ratos neonatos. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Renin is an aspartyl protease synthesized in vivo by proteolytic removal of amino-terminal prosegment of its precursor, prorenin. Cathepsin B, a thiol protease, has been proposed to be a good candidate for prorenin processing enzyme because of its co-localization with renin in secretory granules and also by its ability to activate prorenin in vitro and in cell culture. It was co-transfected vectors expressing wild type and mutant prorenins with cathepsin B in rat pituitary GH4C1 cells, which normally do not activate prorenin into renin unless cotransfected with a prorenin processing enzyme. Scanning mutagenesis was used to identify which amino acids at prorenin cleavage site are specifically recognized by cathepsin B. Pulsechase experiments were performed to follow whether radiolabeled prorenin is sorted to secretory granules. To investigate whether human prorenin could activate the Brain Natriuretic Peptide promoter (BNP) in neonatal rat cardiomyocytes, these cells were cotransfected with a reporter gene BNP-luciferase associated or not with a human angiotensinogen. The cardiomyocytes were co-incubated with no adherent U937 cells transfected with human prorenin wild type (WT) or mutants (-1-2 or +5). Cardiomyocytes were lysated 96 hours after electroporation for luciferase generation analysis. No transfected U937 cells were used as a control group. Captopril and Losartan at 10-7 M were used to test angiotensin converting enzyme (ACE) and AT1 receptors participation in this process. The results demonstrated that single mutations at - 3 methionine (M/A), -2 lysine (K/A) and +3 leucine (L/A) reduced prorenin processing by cathepsin B. Moreover, removal of N-linked oligosaccharides at +5 asparagine enhanced prorenin conversion by cathepsin B, showing that glycosylation seems impair enzymatic prorenin processing. In pulse-chase experiments, prorenin was not targeted to secretory granules and cathepsin B co-transfection did not changed this sorting, indicating that prorenin processing probably occurs outside these organelles. These findings suggest that cathepsin B removes prorenin prosegment at correct cleavage site and this proteolysis occurs outside the dense core granules. Prorenin WT secreted by U937 cells could activate the BNP promoter in rat cardiomyocytes transfected with human angiotensinogen. Dibasic arginine-lisine prorenin amino acids and N-linked glycosilation seems to be important as well as ACE enzymatic activity and AT1 receptors for BNP promoter activation.

Made available in DSpace on 2018-08-01T22:56:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_7256_Thamírys Vianelli Maurício.pdf: 591545 bytes, checksum: 752a10c38843897f9e52bc5236ccc993 (MD5) Previous issue date: 2015-07-17 / Com o objetivo de avaliar diferentes níveis de arginina e lisina digestível em dietas para codornas japonesas em postura, bem como analisar o efeito antagônico entre esses aminoácidos, foram utilizadas 880 codornas com peso médio inicial de 180g aos 140 dias de idade. Distribuídas nas unidades experimentais em delineamento inteiramente casualizado. O estudo contou com dois ensaios, no primeiro foram utilizados cinco níveis crescentes de arginina digestível (1,148; 1,256; 1,364; 1,472; 1,580%) sob um nível fixo de lisina digestível de 1,083%, correspondendo à relação arginina: lisina digestível de 1,06; 1,16; 1,26; 1,36 e 1,46, o segundo ensaio foi caracterizado por um esquema fatorial (3x2), composto por três níveis de lisina digestível (1,083; 1,183; 1,283%) e dois níveis de arginina digestível (1,472 e 1,580%). Portanto, o primeiro ensaio foi composto por cinco tratamentos e o segundo de seis, ambos com dez repetições cada. No primeiro ensaio não foi verificado efeito significativo (P>0,05) dos níveis de arginina e lisina digestível a exceção da variável ovos comercializáveis (OC), em que, foi verificado efeito linear decrescente (P=0,009) de acordo com a equação: &#374; = -3,4444X + 103,1342, r²= 0,94, sendo o melhor nível de arginina observado o de 1,148%. No segundo ensaio nenhuma das características em análise foram afetadas (P>0,05) pelos níveis de lisina e arginina digestíveis em estudo. Concluiu-se que o nível de arginina digestível que proporciona os melhores índices produtivos é o de 1,148% e que a melhor relação de lisina e arginina digestível para os parâmetros analisados foi 1,36:1,00.

Orientador: RIcardo Antunes de Azevedo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T00:01:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Argueso_CristianaMorgadodosGuimaraesTeixeira_M.pdf: 7441540 bytes, checksum: 47e2d4385d38c27ba690c5c89a9ab5e0 (MD5) Previous issue date: 1997 / Mestrado / Genetica de Plantas / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Jaime Amaya-Farfan / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-26T05:47:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 BarruetoGonzalez_NorkaBeatriz_M.pdf: 15126378 bytes, checksum: 71db104b3929b709decc2b0507cf631c (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Misturas complexas de aminoácidos e outros compostos nitrogenados, obtidos por síntese inespecífica, oriundas das sínteses prebióticas, estão sendo atualmente produzidas em pequena escala industrial no Brasil para uso na agricultura. Embora quimicamente não bem caracterizado, foi demonstrado que tais produtos, na sua forma bruta, são razoavelmente utilizados por microrganismos e plantas, aparentemente por possuírem aminoácidos de fácil absorção. O presente trabalho objetivou estudar algumas das características químicas composicionais de uma mistura aminoacídica bruta (MAB), contendo aminoácidos livres e condensados, assim como também avaliar o seu possível valor nutricional como substituto parcial da proteína em dietas padrão para o rato. Os resultados obtidos das análises químicas do produto indicaram um teor elevado de nitrogênio, 13,7%, o qual não refletiu necessariamente um teor equivalente de "proteína", já que grande parte do nitrogênio correspondeu a uréia (219 mg/g). Mesmo assim, a mistura de aminoácidos liberada pela hidrólise do produto mostrou um perfil incomum, sendo rica em tirosina, treonina, fenilalanina e ácido aspártico (15,2, 14,4, 13,3 e 20,2% da composição interna, respectivamente). A partir da estimativa do "valor protéico do produto" e da caseína comercial, elaboraram-se seis dietas experimentais que utilizaram como fonte de proteína a combinação MAB-caseína (MAB/CAS) em diferentes proporções do primeiro (MAB 1, 5, 10, 30 e 50% do nitrogênio total), duas dietas controle e uma aprotéica, seguindo as recomendações da AIN-93G. As dietas foram ministradas aos animais para obtenção dos índices nutricionais de balanço nitrogenado (BN) e quociente de eficiência protéica (PER). Os Aminogramas destas formulações mostraram que o uso da mistura MAB/CAS alterou significativamente o perfil de aminoácidos das dietas quando comparadas com o perfil da formulação controle e do requerimento nutricional para o rato Wistar. A presença do MAB nas formulações proporcionou também quantidades significativas de nitrogênio não protéico na forma de uréia. Durante todo o período do ensaio biológico, a inclinação da curva de crescimento dos grupos experimentais diminuiu em proporção à quantidade de MAB recebida, porém sem ser observado balanço negativo em qualquer momento. Este achado demonstrou que substituição parcial da caseína pela mistura aminoacídica não desencadeou qualquer processo catabólico nos animais. Todas as formulações experimentais apresentaram valores de "digestibilidade aparente" (Da) acima de 96%, ou seja, condizentes com a digestibilidade da caseína pura. As dietas com até 5% do produto sintético proporcionaram resultados aceitáveis de "valor biológico aparente" (VBa), "utilização líquida da proteína" (NPU) e "quociente de eficiência líquida da proteína" (NPR). Para as formulações MAB 10, MAB 30 e MAB 50, estes índices nutricionais apresentaram queda percentual aproximada de 15 a 26%, com relação aos controles. Com exceção do MAB 50, os resultados de PER para todos os grupos experimentais foram, no mínimo, semelhantes aos controles. Não foram observadas alterações nos níveis séricos de albumina, fosfatase alcalina e proteínas séricas totais após trinta dias de ensaio 'biológico, bem como alterações morfológicas no tecido jejuno-íleo do intestino delgado dos animais que receberam os níveis mais elevados de MAB. Pode ser concluído que o uso do produto sintético MAB como fonte protéica parcial das formulações promoveu crescimento e manutenção de peso satisfatórios em substituição de até 30% do nitrogênio da ração. / Abstract: Complex amino acid mixtures obtained through unspecific syntheses reminiscent of those of prebiotic earth are being produced in Brazil at the small industrial scale as agricultural fertilizers. Although not yet chemically characterized, one such product has been shown to be reasonably well utilized by plants and microorganisms in the raw state, apparently due to the presence of bioavailable amino acids. The present work was therefore aimed at investigating some compositional characteristics of a raw mixture of both free and condensed amino acids, henceforth designated as MAB ("Mistura Aminoacídica Bruta"). Chemical analyses revealed a high (13.7%) nitrogen content for the product, which corresponded to a high urea (219 mglg) and a modest amino-acid content. The amino acid fraction released upon acid hydrolysis showed an unusual profile, with predominance of tyrosine, threonine, phenylalanine, and aspartic acid (15.2, 14.4, 13.3 e 20.2% of the internal composition, respectively). From an estimated "protein value" of the product and that of the commercial casein, six experimental diets were formulated which contained MAB in combinations with casein (MAB/CAS), accounting for 1, 5, 10, 30 and 50% of the total nitrogen, but otherwise following the recommendations of the AIN-93G. Two additional control and one protein-free diets were also prepared. The nitrogen balances (NB) and protein efficiency ratios (PER) were determined as nutritional indices of the biological quality of the mixtures. Amino acid analysis of the diets showed that introduction of the MAB significantly altered the profiles of the MAB/CAS mixtures, both in relation to the controls (100% casein) and the requirements of the Wistar rat. It was also ascertained that the MAB contributed significant amounts of non-specific nitrogen, particularly in the form of urea. During the nitrogen balance assay, the slopes of the growth curves for each experimental group diminished proportionately to the amount of added MAB, but in no case were the animaIs seen to enter negative balance. This finding demonstrated that partial replacement of casein by the MAB did not induce any catabolic process in the animaIs. The apparent Digestibilities of the experimental protein mixtures, in turn, were not visibly affected by the presence of the MAB (Da = 96% or higher). The two diets containing up to 5% MAB exhibited apparent Biological Values (BVa), Net Protein Utilization (NPU) and Net Protein Ratios (NPR) which were considered acceptable. For the diets MAB1O, 30 and 50 these indices were approximately 15 to 26% lower than in the controls, whereas the PER's were equal or better than those of the controls, with the exception of MAB50. At the end of the 30-day biological assays, no abnormalities were observed with respect to the serum biochemical parameters of albumin, total proteins or alkaline phosphatase. Neither were any morphological alterations found in histological preparations of the jejunal-illial region of the small intestine in the animaIs receiving the higher MAB formulations. It could be concluded that substitution of up to 30% of the diet's nitrogen by the MAB resulted in normal or near normal values for growth and body weight maintenance, while not causing any apparent toxic effects to the rat. / Mestrado / Mestre em Ciência da Nutrição

Orientador: Paulo Mazzafera / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-26T19:43:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Shimizu_MiltonMassao_M.pdf: 4555303 bytes, checksum: 2c9e0de9b0f431cb45100094367d945d (MD5) Previous issue date: 2000 / Mestrado / Mestre em Biologia Vegetal