Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-09-16T16:51:21Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Camila Aline Romano - 2016.pdf: 2294372 bytes, checksum: 22472a4dda24eb23fb2d77597b2c79b6 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Rejected by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com), reason: para mudança do pdf on 2016-09-16T16:56:12Z (GMT) / Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-09-16T17:00:34Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Camila Aline Romano - 2016.pdf: 3593245 bytes, checksum: 4ac0ac1b7255308f6f228897ada26b03 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-09-19T11:15:53Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Camila Aline Romano - 2016.pdf: 3593245 bytes, checksum: 4ac0ac1b7255308f6f228897ada26b03 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-19T11:15:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Camila Aline Romano - 2016.pdf: 3593245 bytes, checksum: 4ac0ac1b7255308f6f228897ada26b03 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-04-07 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Aedes aegypti is the major vector of dengue, chikungunya and zika fever. Currently, with the lack of specific therapeutic and prophylactic measures, the main way to prevent these arboviruses is vector control. This control is performed mainly with the application of insecticides, but continuous use of these substances favored the emergence of resistant populations, making it necessary to develop alternative strategies for vector control. An example is the survey of vegetable substances which may interfere with the development of the mosquito. In this sense, the Cerrado plants the may be a promising way. In this study, was investigated the insecticidal activity of Cashew Nut Shell Liquid (CNSL) produced by the species Anacardium humile on Aedes aegypti, the dengue vector, Chikungunya and Zika virus. Fruits of A. humile were collected and kept in greenhouse of forced ventilation at 40º Celsius during seven days for the extraction of CNSL. Were performed mortality tests of third instar larvae (L3), pupa and adult, besides the observation of the oviposition behavior of females and viability of eggs and observation of the residual effect of solution. The CNSL was diluted in decreasing gradual concentrations from 1000 to 3ppm, to obtain the Lethal Concentrations (LC). In oviposition the LC99 was used for larvae. The tests of residual effect and oviposition were given in two stages, a pilot test of 100ppm and a test with the LC99. Was obtained LC50 and LC90, respectively, 6.63 and 11.23ppm for larvae; 276 and 728.62ppm for pupae, not being observed mortality in adults. The residual effect of the solution was seven days in the pilot test and five days in the LC99. In the pilot test for oviposition was observed repellent effect of CNSL on females with a significant reduction of eggs number (p = 0.0001 and p=0.0348) and change in standards of stratification of the eggs on oviposition substrate. The larval hatching rate of the eggs exposed to moistened substrate with CNSL was significantly lower (p = 0.0102) when compared to the control. The results presented evidence the insecticidal activity of the CNSL of A. humile, indicating it as a promising product in the research for new botanical insecticides. This way, further studies should be conducted in order to verify possible toxicity of the liquid to other animals. / Aedes aegypti é o principal vetor do dengue e das febres chikungunya e zika. Até o momento, devido à inexistência de medidas terapêuticas e profiláticas específicas, a principal forma de prevenção dessas arboviroses é o controle do vetor. Esse controle é realizado principalmente com aplicação de inseticidas, porém o uso contínuo dessas substâncias favoreceu o aparecimento de populações resistentes, tornando necessário o desenvolvimento de estratégias alternativas para o controle vetorial. Um exemplo é a pesquisa de substâncias vegetais que possam interferir no desenvolvimento do mosquito. Nesse sentido, as plantas do Cerrado podem ser um caminho promissor. Este trabalho investigou a atividade inseticida do líquido da castanha de caju (LCC) extraído da espécie Anacardium humile, planta nativa do Cerrado. Frutos de A. humile foram coletados e mantidos em estufa de ventilação forçada a 40ºC por sete dias para a extração do LCC. Foram realizados testes de mortalidade de larvas de terceiro estádio (L3), pupa e adulto. Além disso, observou-se o comportamento de oviposição das fêmeas, viabilidade dos ovos e o efeito residual da solução sobre L3. O LCC foi diluído em concentrações gradativas decrescentes de 1000 a 3ppm, para obtenção das concentrações letais (CL). Na oviposição foi empregada a CL99 para larvas. Os testes de efeito residual e oviposição se deram em duas etapas, um teste-piloto a 100ppm e um teste com a CL99. Obtiveram-se as CL50 e CL90 respectivamente, 6,63 e 11,23ppm para larvas; 276 e 728,62ppm para pupas. Não foi observada a mortalidade em adultos. O efeito residual da solução foi de sete dias no teste piloto e cinco dias na CL99. No teste piloto para oviposição observou-se efeito repelente do LCC sobre as fêmeas havendo redução significativa do número de ovos (p=0,0001 e p=0,0348) e mudança nos padrões de estratificação dos ovos no substrato de oviposição. Contudo, a taxa de eclosão larval dos ovos expostos ao substrato umedecido com LCC foi significativamente menor (p=0,0102) quando comparada ao controle. Os resultados apresentados evidenciam a atividade inseticida do LCC de A. humile, sugerindo-o como produto promissor na pesquisa por novos inseticidas botânicos. Dessa forma, mais estudos devem ser realizados a fim de verificar possível toxicidade do líquido para outros animais.

Os envenenamentos ofídicos constituem um problema relevante de saúde pública em diversas regiões do mundo, particularmente em países da zona tropical e neotropical. A fisiopatologia do acidente ofídico é constituída por uma série de eventos complexos tanto a nível local quanto sistêmico, e o soro antiofídico é o único tratamento utilizado. No entanto, os efeitos tóxicos locais induzidos durante o envenenamento por serpentes, principalmente do gênero Bothrops, não são eficientemente neutralizados pela soroterapia tradicional. Por esta razão, procuram-se alternativas complementares, como as plantas medicinais antiofídicas que são usadas por comunidades que não têm acesso a soroterapia. A flora brasileira possui uma ampla variedade de plantas medicinais com potencial antiofídico, as quais têm sido pouco estudadas cientificamente. Neste estudo foram realizados ensaios in vitro e in vivo de neutralização de peçonhas ofídicas com o extrato aquoso das entrecascas de Anacardium humile (EAAh), e, o isolamento e a caracterização fitoquímica de um inibidor de miotoxinas, o ácido gálico (AG). Para os ensaios de inibição, foram utilizadas soluções contendo peçonha bruta ou toxina isolada misturadas com diferentes quantidades de extrato vegetal que foram previamente incubadas por 30 min a 37°C. Também foi realizada administração do extrato após o envenenamento em diferentes intervalos de tempo para os testes de inibição da miotoxicidade. Observou-se que EAAh tem atividade inibitória sobre os efeitos tóxicos (letalidade, miotoxicidade, e hemorragia) e farmacológicos/enzimáticos (edema, atividade fosfolipásica e coagulante) induzidos pelas peçonhas de serpentes dos gêneros Bothrops, Crotalus, Lachesis e das toxinas isoladas. O extrato vegetal inibiu 100% a letalidade induzida pela peçonha de C. d. terrificus e sua principal neurotoxina, a crotoxina. O EAAh foi submetido a fracionamento cromatográfico analítico, e em condições polares foi possível identificar e isolar o ácido gálico, o qual demonstrou tempo de retenção e espectros de ressonância magnética nucleares similares ao padrão comercial e a dados de literatura deste mesmo composto, respectivamente. O ácido gálico isolado foi capaz de inibir a atividade miotóxica induzida pela peçonha bruta de B. jararacussu e sua principal miotoxina, a bothropstoxina-I, uma PLA2-símile Lys49. A análise dos espectros de dicroísmo circular e os estudos de interação por modelagem molecular sugerem que o ácido gálico forma um complexo com a BthTX-I de B. jararacussu em seu sítio ativo, inibindo sua atividade tóxica. A ligação do ácido gálico com as miotoxinas não modificou nem a forma e nem a intensidade dos espectros de dicroísmo circular, não induzindo alterações significativas na porcentagem dos diversos domínios que constituem a estrutura secundária destas proteínas. O ácido gálico assim como outros taninos, tem revelado-se um bom inibidor das ações tóxicas de peçonhas de serpentes e está relacionado com a ação inibitória do extrato de Anacardium humile. / Ophidian envenomations are a significant problem of public health in several regions of the world, particularly in tropical and neotropical countries. The pathophysiology of snakebite accidents is constituted by a complex series of events both locally and systemically, and the antivenom serum is the only treatment used. However, local toxic effects induced during envenomation by snakes, especially from the genus Bothrops, are not effectively neutralized by the traditional serum therapy. For this reason, additional alternatives are made necessary, such as the use of medicinal plants that are used by communities with no access to serum therapy. The Brazilian flora possesses a wide variety of medicinal plants with antiophidian potential, which have been little-studied scientifically. In the present study, we performed in vitro and in vivo neutralization of snake venoms with the aqueous extract of inner bark of Anacardium humile (EAAh), and the isolation and phytochemical characterization of an inhibitor of myotoxins, the gallic acid (GA). For the inhibition assays, we used solutions containing crude venom or isolated toxin mixed with different amounts of plant extracts that were previously incubated for 30 min at 37°C. Administration of the extract after envenomation was also performed at different time intervals for myotoxicity inhibition assays. It was observed that EAAh has inhibitory activity against the toxic (lethality, myotoxicity and hemorrhage) and pharmacological/enzymatic effects (edema-inducing, coagulant and phospholipase activities) induced by snake venoms of the genera Bothrops, Crotalus, Lachesis and isolated toxins. The plant extract inhibited 100% of the lethality induced by C. d. terrificus venom and its major neurotoxin, crotoxin. The EAAh was subjected to analytical chromatographic separation, and in polar conditions, it was possible to identify and isolate the gallic acid, which showed retention time and nuclear magnetic resonance spectra similar to the commercial standard and to literature data of this same compound, respectively. Gallic acid alone was able to inhibit the myotoxic activity induced by crude venom of B. jararacussu and its main myotoxin, BthTX-I, a Lys49 PLA2-like enzyme. The analysis of circular dichroism spectra and interaction studies by molecular modeling suggest that gallic acid forms a complex with BthTX-I in its active site, which inhibits its toxic activity. The binding of gallic acid to myotoxins did not change neither the form nor the intensity of circular dichroism spectra, not inducing significant changes in the percentage of the various domains that form the secondary structure of these proteins. The gallic acid and other tannins have been showed to be good inhibitors of the toxic effects of snake venoms, and our study showed that this acid is related to the inhibitory action of the Anacardium humile extract.

Os envenenamentos ofídicos constituem um problema relevante de saúde pública em diversas regiões do mundo, particularmente em países da zona tropical e neotropical. A fisiopatologia do acidente ofídico é constituída por uma série de eventos complexos tanto a nível local quanto sistêmico, e o soro antiofídico é o único tratamento utilizado. No entanto, os efeitos tóxicos locais induzidos durante o envenenamento por serpentes, principalmente do gênero Bothrops, não são eficientemente neutralizados pela soroterapia tradicional. Por esta razão, procuram-se alternativas complementares, como as plantas medicinais antiofídicas que são usadas por comunidades que não têm acesso a soroterapia. A flora brasileira possui uma ampla variedade de plantas medicinais com potencial antiofídico, as quais têm sido pouco estudadas cientificamente. Neste estudo foram realizados ensaios in vitro e in vivo de neutralização de peçonhas ofídicas com o extrato aquoso das entrecascas de Anacardium humile (EAAh), e, o isolamento e a caracterização fitoquímica de um inibidor de miotoxinas, o ácido gálico (AG). Para os ensaios de inibição, foram utilizadas soluções contendo peçonha bruta ou toxina isolada misturadas com diferentes quantidades de extrato vegetal que foram previamente incubadas por 30 min a 37°C. Também foi realizada administração do extrato após o envenenamento em diferentes intervalos de tempo para os testes de inibição da miotoxicidade. Observou-se que EAAh tem atividade inibitória sobre os efeitos tóxicos (letalidade, miotoxicidade, e hemorragia) e farmacológicos/enzimáticos (edema, atividade fosfolipásica e coagulante) induzidos pelas peçonhas de serpentes dos gêneros Bothrops, Crotalus, Lachesis e das toxinas isoladas. O extrato vegetal inibiu 100% a letalidade induzida pela peçonha de C. d. terrificus e sua principal neurotoxina, a crotoxina. O EAAh foi submetido a fracionamento cromatográfico analítico, e em condições polares foi possível identificar e isolar o ácido gálico, o qual demonstrou tempo de retenção e espectros de ressonância magnética nucleares similares ao padrão comercial e a dados de literatura deste mesmo composto, respectivamente. O ácido gálico isolado foi capaz de inibir a atividade miotóxica induzida pela peçonha bruta de B. jararacussu e sua principal miotoxina, a bothropstoxina-I, uma PLA2-símile Lys49. A análise dos espectros de dicroísmo circular e os estudos de interação por modelagem molecular sugerem que o ácido gálico forma um complexo com a BthTX-I de B. jararacussu em seu sítio ativo, inibindo sua atividade tóxica. A ligação do ácido gálico com as miotoxinas não modificou nem a forma e nem a intensidade dos espectros de dicroísmo circular, não induzindo alterações significativas na porcentagem dos diversos domínios que constituem a estrutura secundária destas proteínas. O ácido gálico assim como outros taninos, tem revelado-se um bom inibidor das ações tóxicas de peçonhas de serpentes e está relacionado com a ação inibitória do extrato de Anacardium humile. / Ophidian envenomations are a significant problem of public health in several regions of the world, particularly in tropical and neotropical countries. The pathophysiology of snakebite accidents is constituted by a complex series of events both locally and systemically, and the antivenom serum is the only treatment used. However, local toxic effects induced during envenomation by snakes, especially from the genus Bothrops, are not effectively neutralized by the traditional serum therapy. For this reason, additional alternatives are made necessary, such as the use of medicinal plants that are used by communities with no access to serum therapy. The Brazilian flora possesses a wide variety of medicinal plants with antiophidian potential, which have been little-studied scientifically. In the present study, we performed in vitro and in vivo neutralization of snake venoms with the aqueous extract of inner bark of Anacardium humile (EAAh), and the isolation and phytochemical characterization of an inhibitor of myotoxins, the gallic acid (GA). For the inhibition assays, we used solutions containing crude venom or isolated toxin mixed with different amounts of plant extracts that were previously incubated for 30 min at 37°C. Administration of the extract after envenomation was also performed at different time intervals for myotoxicity inhibition assays. It was observed that EAAh has inhibitory activity against the toxic (lethality, myotoxicity and hemorrhage) and pharmacological/enzymatic effects (edema-inducing, coagulant and phospholipase activities) induced by snake venoms of the genera Bothrops, Crotalus, Lachesis and isolated toxins. The plant extract inhibited 100% of the lethality induced by C. d. terrificus venom and its major neurotoxin, crotoxin. The EAAh was subjected to analytical chromatographic separation, and in polar conditions, it was possible to identify and isolate the gallic acid, which showed retention time and nuclear magnetic resonance spectra similar to the commercial standard and to literature data of this same compound, respectively. Gallic acid alone was able to inhibit the myotoxic activity induced by crude venom of B. jararacussu and its main myotoxin, BthTX-I, a Lys49 PLA2-like enzyme. The analysis of circular dichroism spectra and interaction studies by molecular modeling suggest that gallic acid forms a complex with BthTX-I in its active site, which inhibits its toxic activity. The binding of gallic acid to myotoxins did not change neither the form nor the intensity of circular dichroism spectra, not inducing significant changes in the percentage of the various domains that form the secondary structure of these proteins. The gallic acid and other tannins have been showed to be good inhibitors of the toxic effects of snake venoms, and our study showed that this acid is related to the inhibitory action of the Anacardium humile extract.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:31:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissFP.pdf: 4035388 bytes, checksum: 1dddd38b762636f6a68b29c9fa402e8c (MD5) Previous issue date: 2003-09-11 / Universidade Federal de Sao Carlos / Observações em campo, nas áreas de reserva de Cerrado da Universidade Federal de São Carlos e da Represa do Lobo (Itirapina), indicam que as duas espécies estudadas neste trabalho, Andira humilis Mart. Ex Benth. e Anacardium humile Mart., desenvolvem-se formando espaços entre elas e outras espécies que se desenvolvem ao seu redor. Resultados obtidos em testes preliminares, utilizando-se extratos aquosos de caules e folhas de ambas espécies, demonstraram efeitos inibitórios na germinação de sementes e no desenvolvimento de plântulas de alface (Lactuca sativa L.), confirmando a hipótese da presença de agentes alelopáticos. No presente trabalho, foram estudados os efeitos alelopáticos de extratos aquosos de caules e de folhas de Andira humilis e de Anacardium humile na germinação de sementes e no crescimento plântulas de Raphanus sativus L. (rabanete) e Lactuca sativa L. (alface), ambas utilizadas como bioindicadores. Efetuou-se, também, a análise dos princípios ativos responsáveis pelos efeitos alelopáticos ocasionados por folhas de Andira humilis, procurando-se definir a(s) classes(s) química(s) a que pertencem. Os extratos a 50,75 e 100% de caules e folhas de Andira humilis, em sementes de alface e rabanete, produziram redução significativa na velocidade de germinação e, a 100% de caules, a porcentagem de germinação foi significativamente reduzida. Em Anacardium humile, a porcentagem de germinação foi reduzida significativamente, apenas em semente de rabanete, por ação do extrato de folhas em concentração de 50%. Sementes de alface sofreram redução significativa na velocidade de germinação na presença de extratos de folhas de Anacardium humile em todas as concentrações. Entretanto, a velocidade de germinação em sementes de rabanete foi reduzida significativamente, pela ação dos extratos de caules na concentração de 50% e de folhas, nas concentrações 50, 75, 100%. Plântulas de alface e rabanete sofreram inibição significativa, em seu comprimento, pelos extratos de Andira humilis, exceto os extratos de folhas a 25 e 75%, os quais não causaram inibição em rabanete. Extrattos de caules de Anacardium humile inibiram significativamente o comprimento de plântulas de alface e rabanete, porém os extratos de folhas a 25 e 75% não inibiram o crescimento de plântulas de alface. A interferência dos extratos aquosos, de ambas espécies de Cerrado estudadas, na germinação e no crescimento em alface e rabanete, foi desassociada de qualquer efeito do potencial osmótico e do pH, indicando, portanto, atividade alelopática. Os resultados obtidos na identificação da classe química do(s) composto(s) responsável(is) pela atividade alelopática ocorrida, apontam que as moléculas do metabolismo secundário presentes nas folhas de Andira humilis, responsáveis por tais efeitos alelopáticos na germinação de sementes e no crescimento de plântulas de alface e de rabanete, pertençam à classe dos taninos.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Anacardium humile St. Hill. (Anacardiaceae), a native species from Brazilian Savanna is used in feeding and as medical plant. Popularly, all the plant parts are utilized: the nut oil is used to cauterize skin injuries, the leaves and stem peel are indicated against diarrhea and as expectorant, the pseudo fruit is reported as antisyphilis medication, the flowers are employed against cough and to lower the blood glucose. This work has tested the antimicrobial and antioxidant activities and the mutagenic potential of the aqueous extract from A. humile leaves. The cavity method in dishes was utilized to test the antimicrobial activity against Gram positive and Gram negative bacteria and yeast. The results were negative for all concentrations used. To test the antioxidant activity, the methods DPPH , iron chelating activity and deoxyribose assay were utilized. The most favorable values were found at DPPH and iron chelating activity tests, showing that aqueous extract of A. humile is composed by antioxidants that may kidnap free radicals in vitro, suggesting that there are different mechanisms responsible for this activity. The mutagenic potential was tested utilizing the Ames Test only in the absence of metabolization factor (S9 fraction) using TA98 and TA100 strains, and in these conditions, the extract didn t present mutagenicity. / Anacardium humile St. Hill. (Anacardiaceae), espécie nativa do Cerrado brasileiro é utilizada na alimentação e como planta medicinal. Popularmente são utilizadas todas as suas partes: o óleo da castanha é usado como cautério para afecções da pele, as folhas e a casca do caule são indicadas contra diarréia e como expectorante, o pseudofruto é referido como anti-sífilitico, as inflorescências são empregadas contra tosse e para baixar a glicose sanguínea. Este trabalho testou a atividade antimicrobiana, antioxidante e fez uma análise preliminar do potencial mutagênico do extrato aquoso das folhas de A. humile. Utilizou-se o método cavidade em placa para atividade antimicrobiana sobre bactérias Gram positivas, Gram negativas e fungos leveduriformes. Os resultados foram negativos em todas as concentrações testadas. Para a atividade antioxidante, foram usados os métodos do DPPH , atividade quelante de ferro e ensaio da desoxiribose. Os valores mais significativos foram encontrados nos testes do DPPH e na atividade quelante de ferro, demonstrando que o extrato aquoso de A. humile contém componentes antioxidantes que podem sequestrar radicais livres em condições in vitro, sugerindo que existem diferentes mecanismos responsáveis por esta atividade. O potencial mutagênico foi testado utilizando o Teste de Ames apenas na ausência do sistema de metabolização exógeno (fração S9), utilizando as linhagens TA98 e TA100 e, nestas condições, o extrato não apresentou mutagenicidade. / Mestre em Genética e Bioquímica

Submitted by Franciele Moreira (francielemoreyra@gmail.com) on 2018-08-14T13:14:02Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Laísse Danielle Pereira - 2018.pdf: 1521237 bytes, checksum: 35c856d7e5b093781126cf1fbc858e2c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-08-16T11:22:48Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Laísse Danielle Pereira - 2018.pdf: 1521237 bytes, checksum: 35c856d7e5b093781126cf1fbc858e2c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-16T11:22:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Laísse Danielle Pereira - 2018.pdf: 1521237 bytes, checksum: 35c856d7e5b093781126cf1fbc858e2c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-07-03 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Aiming to characterize and evaluate the genetic diversity of cajuzinho-do-cerrado, in the 2016 harvest, three studies were conducted based on flowering characteristics and physical and chemical characteristics of cashew nuts and cashew apples. The works were conducted in the "ex situ" biological collection of Anacardium humile A. St.-Hil. and in the laboratory of genetics and molecular biology, both at the Universidade Federal de Goiás – Regional Jataí. For the first study, flowering characteristics of the accessions of the collection were evaluated. The results were submitted to the descriptive and multivariate analysis of the genetic diversity. For the second and third study, physical and chemical characteristics of cashew apples and cashew nuts (from 5 to 15 per access) were evaluated. In the second, the results were submitted to the descriptive analysis for each access and Pearson correlation among the variables measured. In the third, besides the descriptive analysis for the variables, the results were submitted to the multivariate analysis. Diversity was observed with bases on the attributes of flowering and fruiting, where the UPGMA dendrogram and Tocher method were efficient to demonstrate this diversity. The accessions from Serranópolis presented high values of number of flowers and percentage of flowering acess. Access 1 presented higher values for cashew nut size and higher access and vitamin C content of cashew apple, with vitamin C being significantly correlated with epidermal and pulp tonality, soluble solids content and cashew nut length. / Objetivando-se caracterizar e avaliar a diversidade genética de Cajuzinho-do-cerrado, na safra de 2016, foram conduzidos três estudos. Estes foram conduzidos na coleção biológica “ex situ” de Anacardium humile A. St.- Hil. e no Laboratório de Genética e Biologia Molecular, ambos na Universidade Federal de Goiás - Regional Jataí. Para o primeiro estudo foram avaliadas características da floração dos acessos da coleção. Os resultados foram submetidos à análise descritiva e multivariada. Para o segundo e terceiro estudos foram avaliadas características físicas e químicas dos pseudofrutos e frutos (de 5 a 15 por acesso). No segundo os resultados foram submetidos à análise descritiva para cada acesso e correlação de Pearson entre as variáveis mensuradas. No terceiro estudo, além da análise descritiva para as variáveis, os resultados foram submetidos à análise multivariada. Observou-se existência diversidade com bases nos atributos do florescimento e frutificação, onde, o dendrograma UPGMA e Método de Otimização de Tocher foram eficientes para demonstrar essa diversidade. Os acessos procedentes de Serranópolis apresentaram valores elevados de número de flores e percentual de acessos floridos. O acesso 1 apresentou valores superiores para as dimensões do fruto e o acesso 3 maior e teor de vitamina C do pseudofruto, sendo que a vitamina C obteve correlação significativa com a tonalidade da epiderme e da polpa, teor de sólidos solúveis e comprimento do fruto.

Orientadores: João Ernesto de Carvalho, Mary Ann Foglio / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-08T07:39:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sacoman_JulianaLessa_M.pdf: 21702719 bytes, checksum: 1522ff705d917fd77eec5e23216a58ea (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Os primeiros registros históricos da humanidade já relatavam o uso.de plantas para tratamento de diversos males e, com o aprimoramento dos estudos e técnicas de purificação, isolamento e identificação dos princípios ativos, foi possível o desenvolvimento de medicamentos para utilização em diversas patologias, inclusive na quimioterapia do câncer. Este trabalho teve como objetivo avaliar a atividade anticâncer de duas espécies da flora brasileira, Anacardium humile St. Hil. e Pothomorphe umbellata (L.) Miquel, de uso medicinal popular. Os extratos brutos diclorometânico (EBD) e etanólico (EBE) das folhas dessas espécies foram avaliados em ensaio de citotoxicidade in vitro em cultura de células tumorais humanas. Como o EBD de P. umbellata apresentou o melhor perfil de atividade in vitro, foi selecionado para avaliação em modelo de câncer murino, o tumor ascítico de Ehrlich. Nesse modelo, esse extrato apresentou atividade anti-tumoral dose dependente e, com isso, a identificação dos princípios responsáveis por essa atividade tomou-se fundamental. Desse modo, o EBD foi submetido a diversos procedimentos cromatográficos, sendo as frações obtidas biomonitoradas pelo teste de citotoxicidade. Esse procedimento permitiu a identificação de duas frações com elevada potência e seletividade anticâncer, sendo que na primeira fração (A) foram identificados derivados do ácido oxálico e na segunda (C), esteróides e triterpenos. A indução de morte celular por apoptose, avaliada por imunocitoquímica, foi significativa nas células UACC-62, OVCAR-3 e NCIADR/ RES quando tratadas pela fração A e nas células UACC-62, OVCAR-3 e 786-0, quando tratadas pela fração C. Uma outra fração (B), constituída principalmente do composto 4-nerolidilcatecol, não apresentou atividade anticâncer significativa. Esses resultados estimulam a continuidade dos estudos com a P. umbellata, com o objetivo de identificar os princípios ativos, determinar o mecanismo de ação anticâncer e comprovar sua atividade em modelos experimentais de câncer in vivo / Abstract: Plants are used in folk medicine since old times of human history, and improvements in techonology, research, purification techniques, isolation and identification of active principIes have allowed the discovery and development of new molecules as drugs for terapheutics of many diseases, such as cancer. This work aimed the evaluation of the anticancer activity of two Brazilian species, Anacardium humile St. Hil. and Pothomorphe umbellata (L.) Miquel, used in folk medicine. Dichlorometanic (DCE) and ethanolic (ECE) crude extracts obtained from leaves of both species were tested in an in vitro citotoxicity assay against human cancer celllines. As long as P. umbellata's DCE showed the best anticancer activity profile, it was also evaluated in a murine cancer model, the Ehrlich Ascite Tumor (EAT). In this experiment, DCE also demonstrated a dose response relationship anticancer activity; therefore the isolation and identification of the active principIe responsible for that activity became the major focus of this work. As a result, DCE was submitted to many cromatographic procedures which were bioguided by the anticancer assay in vitro. This chromatographic purifications permitted identification of two main fractions with high potency and selectivity: fraction A consitituted by oxalic acid derivatives, and fraction C by steroids and triterpenes. The quantification of apoptosis induction by immuncytochemical analysis were significant for UACC-62, OVCAR-3 and NCI-ADR/ RES celllines treated with fraction A, whereas UACC-62, OVCAR-3 and 786- o cells lines went to apoptosis when exposed to fraction C. A third fraction, denominated fraction B, was rich in 4-nerolidylcathecol, widely knowm for this plant specie, and did not show any significative anticancer activity. These results encouraged following up on studies with P. umbellata, priorizing the identification of active principIes, the determination of anticancer mechanism of action and to prove the anticancer activity in experimental cancer models in vivo / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Alba Regina Monteiro Souza Brito / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-09-11T21:15:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_AnaCristinaAlvesde_M.pdf: 3771923 bytes, checksum: 63b52a8cc139a96b9964ce588a5f9f06 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Anacardium humile, popularmente conhecida como cajuzinho-do-cerrado, é utilizada na medicina tradicional para o tratamento de diversas inflamações. Extratos e frações de suas folhas apresentam compostos fenólicos e significativa atividade anti-úlcera. Nesse trabalho, avaliou-se possíveis mecanismos antioxidantes na gastroproteção conferida pela fração acetato de etila das folhas de A. humile (AHFAc). AHFAc é rica em compostos fenólicos, há mais de 30% de fenólicos solúveis nessa fração, segundo resultados do ensaio de Folin-Ciocalteu. AHFAc apresenta atividade redutora em ensaio de redução de 1,1-difenil-1-picril-hidrazila (DPPH), o que representa ação sequestradora de radicais livres em potencial. Foram registrados o perfil cromatográfico de AHFAc, em cromatografia líquida de alta eficiência e o espectro de massas com ionização por electrospray, que indicam a presença de ácido gálico e/ou derivados, quercetina, kaempferol e amentoflavona (um biflavonóide).A atividade farmacológica de AHFAc foi analisada em modelos de indução de úlcera gástrica por isquemia e reperfusão e por etanol absoluto. Ratos Unib: WH foram tratados com o veículo Tween 80® 12% (10 ml.kg-1) ou AHFAc (25, 50 e 100 mg.kg-1) e submetidos à isquemia (30 minutos) e reperfusão (60 minutos) do estômago ou à administração de 1 ml de etanol absoluto. Um grupo SHAM foi formado por animais não tratados, expostos aos procedimentos experimentais, mas sem efetiva indução de úlcera. Após a realização dos modelos de indução de úlcera gástrica, o estômago dos animais foi removido, a área de lesão ulcerativa determinada, uma porção do estômago foi fixada para análises histológicas (colorações hematoxilina-eosina e ácido periódico de Schiff) e imunohistoquímicas (reação para mieloperoxidase e superóxido dismutase) e o restante da porção glandular do estômago foi raspado e homogeneizado para ensaios bioquímicos. Foram dosados os níveis de grupamentos sulfidrila (G-SH), fragmentação de DNA, atividade das enzimas mieloperoxidase (MPO), glutationa peroxidase (GPx), glutationa redutase (GR) e superóxido dismutase (SOD). O pré-tratamento com AHFAc (50 mg.kg-1) apresenta efeito gastroprotetor nos dois modelos experimentais de úlcera gástrica analisados, com manutenção da integridade da mucosa e tendência de aumento dos níveis de muco. AHFAc evitou o aumento da atividade de MPO na mucosa gástrica de ratos submetidos aos dois modelos experimentais investigados, o que indica menor infiltração de neutrófilos no estômago dos animais tratados com a fração. Além disso, a administração de AHFAc também foi eficaz em manter os níveis normais de G-SH e fragmentação de DNA bem como da atividade da SOD e GPx na mucosa gástrica exposta à ação lesiva do etanol absoluto. A ação antiulcerogênica de AHFAc deve envolver atividade antioxidante, garantida pela sua composição fenólica, aliada a outros mecanismos de ação. Uma vez que não foi observada modulação na atividade das enzimas antioxidantes, e por apresentar capacidade redutora do DPPH, a atividade antioxidante de AHFAc provavelmente envolve sequestro de radicais livres. / Abstract: Anacardium humile, popularly known as "cajuzinho-do-cerrado", is used in traditional medicine for the treatment of various inflammatory diseases. Extracts and fractions of leaves of A. humile present phenolic compounds and significant antiulcer activity. In this study, we evaluated the possible antioxidant mechanisms in the antiulcerogenic activity conferred by the ethyl acetate fraction of leaves of A. humile (AHFAc). AHFAc is rich in phenolic compounds; there are more than 30% of soluble phenolic compounds in this fraction, according to results from the Folin Ciocalteu assay. AHFAc shows antioxidant activity in the 1, 1-diphenyl-1-picryl picrylhydrazyl (DPPH) assay, which represents a potential free radical scavenging action. There have been recorded the chromatographic profile AHFAc in high performance liquid chromatography and the mass spectrum by electrospray ionization mass spectrometry, which indicate the presence of gallic acid and derivatives, quercetin, kaempferol and amentoflavone (biflavonoid).The pharmacological activity of AHFAc was examined in ischemia and reperfusion induced and absolute ethanol-induced gastric ulcer models. Unib: WH rats were treated with the vehicle Tween 80 12% (10 ml.kg-1) or AHFAc (25, 50 and 100 mg.kg-1) and underwent ischemia (30 minutes) and reperfusion (60 minutes) of stomach or the administration of 1 ml of absolute ethanol. SHAM group was formed by untreated animals exposed to experimental procedures, but without effective induction of ulcer. After experimental models, the stomach of the animals was removed, the ulcerative lesion area (ULA) determined, a portion of the stomach was fixed for histological analysis (hematoxylin-eosin staining and periodic acid Schiff staining) and immunohistochemistry analysis (myeloperoxidase and superoxide dismutase), the remaining portion of the glandular stomach was scraped and homogenized for biochemical assays. We measured the levels of sulfhydryl groups (G-SH), DNA fragmentation, activity of myeloperoxidase (MPO), glutathione peroxidase (GPx), glutathione reductase (GR) and superoxide dismutase (SOD) enzymes. The pre-treatment with AHFAc (50 mg.kg-1) showed gastroprotective effect in both experimental models of gastric ulcer, while maintaining the integrity of the mucosa and a tendency for increased levels of mucus. The administration of AHFAc was also effective in maintaining normal levels of G-SH and fragmentation of DNA, SOD and GPx activities in the gastric mucosa exposed to the harmful effect of absolute ethanol. In addition, AHFAc prevented the increase of MPO activity in gastric mucosa of rats subjected to the experimental models investigated, indicating less infiltration of neutrophils in the stomach of animals treated with the fraction. The anti-ulcer action of AHFAc must involve antioxidant activity, due to its phenolic composition, combined with other mechanisms of action. Since there was no modulation in the activity of antioxidant enzymes, and for presenting reduction capacity of DPPH, the antioxidant activity of AHFAc probably involves scavenger activity of free radicals. / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

O desenvolvimento de cepas bacterianas multirresistentes tornou-se uma preocupação global. As plantas medicinais têm sido exploradas como uma fonte potencial terapêutica para o tratamento de várias doenças e para o desenvolvimento de medicamentos mais eficazes contra infecções bacterianas. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antibacteriana do extrato de cascas e folhas de Anacardium humile (St.) Hil, extrato de cascas de Davilla nítida (Vahl.) Kubitski, e extrato de folhas de Kalanchoe pinnata (Lam.) Pers. contra bactérias resistentes a múltiplos fármacos isoladas de infecções do pé diabético, e também contra cepas de referência da American Type Culture Collection (ATCC). A atividade antibacteriana foi avaliada pelos métodos de Ágar Disco-Difusão (DD), Microdiluição em Caldo (MC), Ensaio “Checkerboard” e Ensaio “Time-Kill”. O extrato das cascas de Davilla nitida (Vahl.) Kubitski mostrou atividade antibacteriana expressiva contra todos os grupos de bactérias testadas. O método de microdiluição em caldo foi mais sensível que o método disco-difusão para determinar a atividade antibacteriana presente no extrato das cascas. O extrato de cascas inibiu o crescimento de bactérias com altos níveis de resistência aos antibióticos, como Pseudomonas spp. (100,00%), Enterobacter spp. (88,89%), Staphylococcus aureus (54,55%), Streptococcus pneumoniae (75,00%), Staphylococcus saprophyticus (92,86%). A combinação do extrato das cascas com antibióticos resultou em efeito aditivo contra a maioria das cepas testadas. O perfil cinético de tempo de morte do extrato de cascas mostrou propriedades bactericidas tempo-dependentes. Nossos resultados sugerem a presença de compostos bioativos nesta planta que podem ser utilizados para o desenvolvimento de novos agentes antibacterianos. O extrato de folhas de Kalanchoe pinnata (Lam.) Pers. mostrou atividade antibacteriana contra Citrobacter spp. (100,00%), Citrobacter youngae (ATCC-29935) (100,00%), Enterobacter spp. (33,33%), Pseumodonas spp. (66,67%), Pseudomonas aeruginosa (ATCC-27853) (100,00%). O extrato de folhas quando associado com antibiótico amoxicilina/ácido clavulânico ou cefoxitina não evidenciou qualquer potencialização da atividade antibacteriana contra as bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, sugerindo que extrato e antibióticos possuem mecanismos independentes relacionados à inibição do crescimento bacteriano. Nossos resultados mostraram que o extrato etanólico das folhas de Kalanchoe pinnata (Lam.) Pers. teve uma boa atividade antimicrobiana contra algumas bactérias resistentes a múltiplos fármacos. Entretanto, estudos adicionais e mais específicos são recomendados para determinar a eficácia deste extrato no tratamento de infecções bacterianas. O extrato das cascas e folhas de Anacardium humile (St.) Hil, tanto no método Disco-difusão quanto em microdiluição em caldo, inibiu significantemente o crescimento das bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, como também o crescimento das bactérias comumente encontradas em lesões de pés diabéticos. Pelo método “Checkerboard”, a combinação do extrato das cascas (35,00%) e folhas (40,00%) sobre as bactérias Gram-negativas apresentaram efeitos sinérgicos semelhantes, enquanto que para as bactérias Gram-positivas, os extratos das folhas (45,00%) apresentaram um efeito sinérgico mais efetivo do que os extratos das cascas (17,50%). O perfil cinético “Time-Kill” apresentou atividade bactericida com propriedades dose e tempo dependente, sugerindo que os extratos das cascas e folhas podem potencializar os efeitos dos antibióticos, o que sugere que os extratos de Anacardium humile (St.) Hil podem ser usados com uma fonte alternativa de pesquisa para agentes antibacterianos com ação em bactérias Gram-positivas e Gram-negativas resistentes a multidrogas. No entanto, o isolamento dos compostos bioativos e estudos adicionais devem ser realizados para entender os mecanismos de ação bactericida, para definir a real eficácia e os efeitos tóxicos. / Development of multidrug resistant bacterial strains has become a global concern. Medicinal plants have been explored as a source of molecules with therapeutic potential for the treatment of various diseases and to the development of better drug against bacterial infections. Thus, the aim of this study was to evaluate the antibacterial activity of the bark and leaves extracts of Anacardium humile (St.) Hil, bark extract of Davilla nitida (Vahl.) kubitski, of leaf extract of Kalanchoe pinnata (Lam.) Pers. and against multidrug resistant bacteria isolated from diabetic foot infections, and also of reference strains from the American Type Culture Collection (ATCC). Antibacterial activity of the bark extract was evaluated by agar Disk-Diffusion (DD), Broth Dilution (BD), “Checkerboard” and “Time-Kill” methods. The bark extract of Davilla nitida (Vahl.) kubistki showed a significant antibacterial activity against all groups of bacteria tested. Broth dilution was more sensitive for determining the antibacterial activity of the bark extract than the Disk-Difusion method. The bark extract inhibited the growth of bacteria with high-levels of antibiotic-resistance, such as Pseudomonas spp. (100,00%), Enterobacer spp. (88,89%), Staphylococcus aureus (54,55%), Streptococcus pneumoniae (75,00%), Staphylococcus saprophyticus (92,86%). The combination of extract with antibiotics resulted in an additive effect against most of the strains tested. “Time-Kill” kinetics profiles of bark extract showed bactericidal and time-dependent properties. Our results suggest the presence of bioactive compounds in this plant that could be useful for the development of new antibacterial agents. The leaf extract of Kalanchoe pinnata (Lam.) Pers. showed antibacterial activity against Citrobacter spp. (100,00%), Citrobacter youngae (ATCC-29935) (100,00%), Enterobacer spp. (33.33%), Pseumodonas spp. (66.67%), Pseudomonas aeruginosa (ATCC-27853) (100.00%). Extract of leaf associated with amoxicillin/clavulanic acid or cefoxitin antibiotics did not show any potentiation of antibacterial activity against both Gram-positive and Gram-negative bacteria, suggesting that extract and antibiotics have independent mechanisms related to inhibition of bacterial growth. Our results showed that the ethanolic leaf extract of Kalanchoe pinnata (Lam.) Pers. had a good antimicrobial activity against some multidrug resistant bacteria. However, further and more specific studies, are recommended to determine the efficacy of this extract in the treatment of bacterial infections. Barks and leaves extracts of Anacardium humile (St.) Hil, both in the Disk-Difusion and Broth Dilution methods, inhibited the growth of Gram-positive and Gram-negative bacteria, as well as the growth of bacteria commonly found in diabetic foot lesions. By the “Checkerboard” method, the combination of bark extract (35,00%) and leaves (40,00%) on Gram-negative bacteria had similar synergistic effects, while for Gram-positive bacteria, leaf extracts (45,00%) presented a synergistic effect more effective than the bark extracts (17,50%). The “Time-Kill” kinetic profile showed bactericidal activity with dose and time-dependent properties, suggesting that bark and leaf extracts may potentiate the effects of antibiotics, suggesting that Anacardium humile (St.) Hil extracts can be used with an alternative source of research for antibacterial agents acting on multidrug resistant Gram- positive and Gram- negative bacteria. However, the isolation of bioactive compounds and additional studies should be performed to understand the mechanisms of bactericidal action, to define real efficacy and toxic effects.