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Obtenção de bioinseticida de Bacillus thuringiensis a partir de resíduo da fabricação de biodiesel / Obtainment of bioinsecticides from Bacillus thuringiensis by the waste of biodiesel productionRossi, Adriana Andreia 13 April 2012 (has links)
A crescente demanda por combustíveis provenientes de fontes renováveis, em função de questões ambientais e possível escassez dos derivados de petróleo, juntamente com a obrigatoriedade de sua adição no óleo diesel empregado atualmente, levou a uma \"explosão\" do número de empresas que produzem biodiesel. Este produto é obtido pela transesterificação de gorduras animais e óleos vegetais na presença de catalisador, processo que resulta um único sub-produto, a glicerina, a qual teve um aumento de produção na medida do aumento de produção do biodiesel. Uma forma de contribuir para diminuir os problemas advindos do acúmulo da glicerina é utilizá-la como base para formular meios de fermentação e obter produtos de interesse sócio-econômico. Um exemplo é o bioinseticida produzido pela bactéria Bacillus thuringiensis para o controle do mosquito transmissor do vírus da dengue. Este produto apresenta várias vantagens quando comparado aos inseticidas químicos, pois impede que os insetos adquiram resistência, não polui e é seletivo, não oferecendo riscos de intoxicação para os insetos benéficos e animais vertebrados. Cabe salientar que as toxinas produzidas por esta bactéria são letais também para larvas dos mosquitos transmissores da malária e da elefantíase. Assim, no presente trabalho propõe-se obter um bioinseticida com princípio ativo produzido por Bacillus thuringiensis var. israelensis, empregando o resíduo da fabricação de biodiesel a partir de óleo vegetal. Para tanto, o trabalho compreendeu três fases: 1. Definição de um tratamento para o resíduo que proporcionasse o crescimento da bactéria e a produção de toxina. 2- Estudo do processo fermentativo com o objetivo aumentar a atividade larvicida do meio fermentado em frascos (definição da composição do meio e de condições de fermentação) e 3. Estudo da transferância de oxigênio em diferentes fases do desenvolvimento da bactéria, em biorreator. O estudo em frasco foi realizado em Erlenmeyer de 1.000 mL, provido ou não de chicanas, com 200 mL de meio. O estudo da transferência de oxigênio foi realizado em fermentador Bioflo III, (New Brunswick Sci. Co.) de 1,25 L. Com os resultados obtidos, foi possível concluir que o melhor tratamento para o resíduo em estudo, consistiu do abaixamento do pH até 4 com ácido fosfórico, seguido de decantação por 24 horas. Com este tratamento foi possível obter uma fonte de carbono mais viável enocomicamente e, pelos estudos de otimização de processo, foi possível determinar a melhor composição de meio de cultura (10 g/L de glicerina tratada, 6 g/L de extrato de levedura, 3 g/L de (NH4)2SO4, 0,12 g/L de CaCl2.2H2O, 1,5 g/L de MgSO4.72H2O, 0,09 g/L de MnSO4, 1,5 g/L de K2HPO4 e 1,5 g/L de KH2PO4) e a melhor condição de aeração (manter a concentração de oxigênio dissolvido em 45% da saturação durante todas as fases do desenvolvimento da bactéria). Desta forma, foi possível produzir um meio fermentado 583 vezes mais potente que o ensaio controle empregando glicerol PA. / The increasing demand for fuels originated from renewable sources, due to environmental issues and possible scarce of petroleum products, together with the mandatory of its inclusion in diesel oil currently used, generated a significant increase in the number of biodiesel producting companies. This product is obtained through transesterification reaction of animal fat and vegetable oils in the presence of a catalyzer, process that results in a single by-product, the glycerin, which had an increase of its production as biodiesel production increases. A way to contribute for the reduction of problems generated by the excess of glycerin is to use it in the composition of fermentation medium and obtain products that are demanded by society. An example is the bioinsecticides produced by the bacteria named Bacillus thuringiensis, used in the controlling of mosquito vectors of the dengue viruses. This product presents several advantages when compared to chemical insecticides because it prevents insects resistance, it does not pollute the environment and it is selective, which means it does not create risks of intoxication for other insects and vertebrate animals. It is important to mention that toxins produced by these bacteria are lethal as well to the larvae of malaria and elephantiasis mosquito vectors. Thus, in this work it is intended to obtain a bioinsecticide containing active ingredient from Bacillus thuringiensis var. israelensis by using the biodiesel production waste from vegetable oils. In order to achieve that, this work consisted of three steps: 1. Definition of a treatment for the waste of biodiesel to provide the growth of Bacillus thuringiensis and its toxin production; 2. Study of the fermentative process to increase larvicidal activity of the fermentation broth in flasks (definition of the medium composition and the fermentative conditions) and 3. Study of the oxygen transference in bioreactor in diferent development phases of the bacteria. The study in flask was made in a 1000 mL Erlenmeyer flask, with and without baffles, and 200 mL of medium. The study of oxygen transference was realized in a 1,25 L bench fermentor (New Brunswick Sci. Co./Bioflo III). With the results obtained it was possible to conclude that the best treatment to the waste of biodiesel consisted of decreasing pH until 4 with phophoric acid, followed by 24 hours of decantation. With this treatment it was possible to obtain a promising carbon source more and, by the process optimization studies, it was possible to determine the best composition of culture medium (10 g/L of treated glycerin; 6 g/L of yeast extract; 3 g/L of (NH4)2SO4; 0,12 g/L of CaCl2.2H2O; 1,5 g/L of MgSO4.7H2O; 0,09 g/L of MnSO4; 1,5 g/L of K2HPO4 and 1,5 g/L of KH2PO4) and the best aeration condition (mantaining the oxygen concentration at 45% of saturation during all phases of bacterial development). So, it was possible to obtain a fermented broth 583 times more potent than the control test using pure glycerol.
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Metabólitos secundários de Annonaceae: triagem, fracionamento biomonitorado e bioatividade frente a Spodoptera frugiperda (J. E. Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae) / Secondary metabolites from Annonaceae: screening, bioguided fractionation and bioactivity against Spodoptera frugiperda (J. E. Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae)Ansante, Thiago Felipe 15 April 2014 (has links)
Visando detectar alternativas de manejo para a lagarta-do-cartucho-do-milho, Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae), realizou-se, primeiramente, uma triagem em extratos etanólicos preparados das estruturas (folhas, ramos e sementes) de diferentes espécies de Annonaceae (Annona cacans, A. montana, A. mucosa, A. reticulata, A. sylvatica e Duguetia lanceolata). Com base nessa etapa inicial, constatou-se que o extrato etanólico das sementes de A. mucosa (ESAM) foi o mais promissor, causando significativa toxicidade aguda (CL50 e CL90 de 842,97 e 1.882,00 mg kg-1, respectivamente) e pronunciada inibição do desenvolvimento larval (toxicidade crônica), após sete dias de exposição a dietas tratadas. Na CL50, o ESAM reduziu as viabilidades larval e pupal e o peso de pupas com 24 horas, e aumentou a duração da fase larval. No entanto, o ESAM não ocasionou efeito fagodeterrente para larvas de quarto ínstar de S. frugiperda, embora tenha reduzido o consumo ao longo do tempo. Feito isso, a eficácia de ESAM foi comparada com inseticidas comerciais de origem natural (Azamax® 1,2 EC) e sintética (Premio® SC). Nessa comparação, o ESAM (na CL90) apresentou eficácia similar (equitóxico) aos dois produtos comerciais (utilizados na dose registrada para o controle do inseto-praga). A seguir, foi realizado o fracionamento biomonitorado através de diferentes técnicas cromatográficas que conduziu ao isolamento da acetogenina roliniastatina-1, identificada (com base em técnicas espectroscópicas) como componente majoritário da fração mais ativa do extrato etanólico de A. mucosa. Roliniastatina-1 foi então novamente ensaiada frente a larvas de S. frugiperda e ocasionou significativos efeitos agudos (mortalidade larval) e crônicos (redução do desevolvimento larval). Por fim, investigou-se a bioatividade de uma formulação à base de acetogeninas (Anosom® 1 EC) recentemente registrada, tanto isoladamente quanto em mistura com uma formulação à base de limonoides (Azamax® 1,2 EC). Anosom® 1 EC, testado na CL90 estimada (2.959,00 mg kg-1) e Azamax® 1,2 EC, testado na concentração registrada para o controle do inseto-praga (4.000,00 mg kg-1), causaram significativa mortalidade larval, sem ocorrer diferença entre os tratamentos tanto quando testados isoladamente como em mistura binária. Anosom® 1 EC (na CL50) provocou ainda aumento significativo das mortalidades larval e pupal e da duração da fase larval, bem como redução do peso pupal do inseto. Dessa forma, derivados de Annonaceae podem constituir um componente útil para o manejo integrado de S. frugiperda em condições de campo. / A screening with ethanolic extracts prepared from structures (leaves, branches and seeds) from different species of Annonaceae (Annona cacans, A. montana, A. mucosa, A. reticulate, A. sylvatica and Duguetia lanceolata) aiming to detect management alternatives for Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae) was done. Based on this initial phase, it was verified that the ethanolic extract from seeds of A. mucosa (AMSE) was the most promising one, causing significant acute toxicity (LC50 and LC90 of 842.97 and 1,822.00 mg kg-1, respectively) and pronounced inhibition of larval development (chronic toxicity) after a 7-day exposition to treated diets. At LC50, AMSE decreased larval and pupal viabilities and also the pupal weight at 24 hours, and increased the larval phase duration. However, AMSE didn\'t cause antifeedant effect for 4-instar S. frugiperda larvae, though it decreased consumption throughout the time. After that, AMSE efficacy was compared to commercial pesticides from natural (Azamax® 1.2 EC) and synthetic (Premio® SC) origin. In this confrontation, AMSE (at LC90) showed efficacy similar to that of commercial products (used at registered dose for S. frugiperda control). Then, the bioguided fractionation using different chromatographic techniques which led to isolation of acetogenin rolliniastatin-1 identified as the majoritary compound of the most active ethanolic extract from A. mucosa. After that, rolliniastatin-1 was again tested against S. frugiperda larvae and caused significant acute (larval mortality) and chronic (decrease of larval development) effects. Finally, the bioactivity of a newly-registered acetogenin-based (Anosom® 1 EC) formulation was investigated, both separately and mixed with a limonoid-based formulation (Azamax® 1.2 EC). Anosom® 1 EC, tested at estimated LC90 (2,959.00 mg kg-1) and Azamax® 1.2 EC, tested at registered dose for S. frugiperda (4,000.00 mg kg-1) led to significant larval mortality, without happening any differences between treatments either tested separately or in a binary mixture. Anosom® 1 EC (at LC50) also led to significant increase of larval and pupal mortality and larval phase, as well as insect pupal weight decrease. Thus, Annonaceae derivates can be a useful component for S. frugiperda integrated management under field conditions.
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Avalia??o do potencial inseticida de extratos de Caryocar brasiliense (Caryocaraceae) sobre Lutzomyia longipalpis (Diptera: Psychodidae)Baracho, Amanda de Oliveira 26 April 2018 (has links)
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Previous issue date: 2018 / Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM) / A leishmaniose visceral ? uma doen?a parasit?ria de transmiss?o vetorial causada por protozo?rios do g?nero Leishmania, com elevado grau de letalidade e que atinge milh?es de pessoas no mundo. A busca por produtos alternativos para a elimina??o do vetor tem como objetivo minimizar os impactos causados pelos inseticidas qu?micos sint?ticos utilizados pelos programas de controle, sendo cada vez mais frequente a pesquisa em produtos de origem bot?nica com atividade inseticida. Organismos vegetais s?o capazes de produzir compostos org?nicos de comprovada toxicidade frente aos insetos e, diante disto, avaliou-se neste trabalho a atividade inseticida de extratos de Caryocar brasiliense, planta nativa do Cerrado popularmente conhecida como ?pequi?, sobre flebotom?neos da esp?cie Lutzomyia longipalpis, principal transmissora da leishmaniose visceral. Extratos hidroetan?licos, etan?licos e ciclohex?nicos de folhas e cascas de C. brasiliense foram preparados e dilu?dos em solu??o de Tween 80 a 3% para a obten??o de concentra??es a 50, 100, 200 e 400 mg.mL-1, para a realiza??o dos ensaios biol?gicos. Os flebotom?neos foram coletados em uma localidade rural do munic?pio de Diamantina/MG. Um n?mero amostral de 30 flebotom?neos foi posto em contato com os extratos e a mortalidade foi avaliada ap?s 1, 2, 4, 16, 24 48 e 72 horas de exposi??o, bem como grupos controle negativos (?gua destilada e Tween) e positivo (cipermetrina). A identifica??o dos constituintes qu?micos dos extratos tamb?m foi avaliada. Ap?s 72h de experimento, foram registradas mortalidades de 93,3% pelo extrato hidroetan?lico da casca a 400 mg.mL-1, 66,3% pelo etan?lico da casca a 50 mg.mL-1 e 81,1% pelo ciclohex?nico de folhas a 200 mg.mL-1. Os extratos hidroetan?licos da casca mostraram-se estatisticamente semelhantes ? a??o da cipermetrina em 72h de experimento, indicando que este extrato foi o mais eficiente quanto ? atividade inseticida. Foram identificados triterpenos, esteroides, taninos, flavonoides, alcaloides e saponinas nos extratos. Os resultados obtidos sugerem que os extratos hidroetan?licos de C. brasiliense, sobretudo das cascas, s?o promissores na busca por compostos naturais com atividade inseticida sobre Lu. longipalpis. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-gradua??o em Biologia Animal, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2018. / Visceral leishmaniasis is a vector-borne disease caused by a protozoan of the genus Leishmania with high lethality rate that reaches millions of people worldwide. The impacts caused by synthetic insecticides used in control programs are well known. In this context, research on alternative products for vector control, especially products of botanical origin, has been frequent in order to minimize the impacts of synthetic ones. Plants are capable to produce organic compounds with insect toxicity. Here, the insecticidal activity of Caryocar brasiliense extracts, a native plant of Brazilian savannah, popularly known as "pequi", on Lutzomyia longipalpis, the main vector of visceral leishmaniasis, was tested. Hydroethanolic, ethanolic and cyclohexanic extracts of leaves and barks of C. brasiliense were prepared and diluted in Tween 80 (3%) to obtain concentrations of 50, 100, 200 and 400 mg.mL-1 for the biological tests. Phlebotomine sandflies were collected in a rural locality of Diamantina (Minas Gerais state, Brazil). Thirty sand flies were exposed to the extracts and mortality was evaluated after 1, 2, 4, 16, 24 48 and 72 hours of exposure, as well as negative control groups (distilled water and Tween) and positive (cypermethrin). Chemical compounds of the extracts were also evaluated. Mortalities rates of 93.3% were observed for the hydroethanolic extract of the bark at 400 mg.mL-1, 66.3% for the ethanolic bark at 50 mg.mL-1 and 81.1% for the cyclohexane of leaves at 200 mg.mL-1. The hydroethanolic extracts of the bark showed to be statistically similar to the action of cypermethrin in 72h of the experiment, indicating that this extract was the most efficient as an insecticide. Triterpenes, steroids, tannins, flavonoids, alkaloids and saponins were identified in the extracts. The results obtained suggest that the hydroethanolic extracts of C. brasiliense, especially of the bark, are promising for the use of natural compounds to control Lu. longipalpis.
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Obtenção de bioinseticida de Bacillus thuringiensis a partir de resíduo da fabricação de biodiesel / Obtainment of bioinsecticides from Bacillus thuringiensis by the waste of biodiesel productionAdriana Andreia Rossi 13 April 2012 (has links)
A crescente demanda por combustíveis provenientes de fontes renováveis, em função de questões ambientais e possível escassez dos derivados de petróleo, juntamente com a obrigatoriedade de sua adição no óleo diesel empregado atualmente, levou a uma \"explosão\" do número de empresas que produzem biodiesel. Este produto é obtido pela transesterificação de gorduras animais e óleos vegetais na presença de catalisador, processo que resulta um único sub-produto, a glicerina, a qual teve um aumento de produção na medida do aumento de produção do biodiesel. Uma forma de contribuir para diminuir os problemas advindos do acúmulo da glicerina é utilizá-la como base para formular meios de fermentação e obter produtos de interesse sócio-econômico. Um exemplo é o bioinseticida produzido pela bactéria Bacillus thuringiensis para o controle do mosquito transmissor do vírus da dengue. Este produto apresenta várias vantagens quando comparado aos inseticidas químicos, pois impede que os insetos adquiram resistência, não polui e é seletivo, não oferecendo riscos de intoxicação para os insetos benéficos e animais vertebrados. Cabe salientar que as toxinas produzidas por esta bactéria são letais também para larvas dos mosquitos transmissores da malária e da elefantíase. Assim, no presente trabalho propõe-se obter um bioinseticida com princípio ativo produzido por Bacillus thuringiensis var. israelensis, empregando o resíduo da fabricação de biodiesel a partir de óleo vegetal. Para tanto, o trabalho compreendeu três fases: 1. Definição de um tratamento para o resíduo que proporcionasse o crescimento da bactéria e a produção de toxina. 2- Estudo do processo fermentativo com o objetivo aumentar a atividade larvicida do meio fermentado em frascos (definição da composição do meio e de condições de fermentação) e 3. Estudo da transferância de oxigênio em diferentes fases do desenvolvimento da bactéria, em biorreator. O estudo em frasco foi realizado em Erlenmeyer de 1.000 mL, provido ou não de chicanas, com 200 mL de meio. O estudo da transferência de oxigênio foi realizado em fermentador Bioflo III, (New Brunswick Sci. Co.) de 1,25 L. Com os resultados obtidos, foi possível concluir que o melhor tratamento para o resíduo em estudo, consistiu do abaixamento do pH até 4 com ácido fosfórico, seguido de decantação por 24 horas. Com este tratamento foi possível obter uma fonte de carbono mais viável enocomicamente e, pelos estudos de otimização de processo, foi possível determinar a melhor composição de meio de cultura (10 g/L de glicerina tratada, 6 g/L de extrato de levedura, 3 g/L de (NH4)2SO4, 0,12 g/L de CaCl2.2H2O, 1,5 g/L de MgSO4.72H2O, 0,09 g/L de MnSO4, 1,5 g/L de K2HPO4 e 1,5 g/L de KH2PO4) e a melhor condição de aeração (manter a concentração de oxigênio dissolvido em 45% da saturação durante todas as fases do desenvolvimento da bactéria). Desta forma, foi possível produzir um meio fermentado 583 vezes mais potente que o ensaio controle empregando glicerol PA. / The increasing demand for fuels originated from renewable sources, due to environmental issues and possible scarce of petroleum products, together with the mandatory of its inclusion in diesel oil currently used, generated a significant increase in the number of biodiesel producting companies. This product is obtained through transesterification reaction of animal fat and vegetable oils in the presence of a catalyzer, process that results in a single by-product, the glycerin, which had an increase of its production as biodiesel production increases. A way to contribute for the reduction of problems generated by the excess of glycerin is to use it in the composition of fermentation medium and obtain products that are demanded by society. An example is the bioinsecticides produced by the bacteria named Bacillus thuringiensis, used in the controlling of mosquito vectors of the dengue viruses. This product presents several advantages when compared to chemical insecticides because it prevents insects resistance, it does not pollute the environment and it is selective, which means it does not create risks of intoxication for other insects and vertebrate animals. It is important to mention that toxins produced by these bacteria are lethal as well to the larvae of malaria and elephantiasis mosquito vectors. Thus, in this work it is intended to obtain a bioinsecticide containing active ingredient from Bacillus thuringiensis var. israelensis by using the biodiesel production waste from vegetable oils. In order to achieve that, this work consisted of three steps: 1. Definition of a treatment for the waste of biodiesel to provide the growth of Bacillus thuringiensis and its toxin production; 2. Study of the fermentative process to increase larvicidal activity of the fermentation broth in flasks (definition of the medium composition and the fermentative conditions) and 3. Study of the oxygen transference in bioreactor in diferent development phases of the bacteria. The study in flask was made in a 1000 mL Erlenmeyer flask, with and without baffles, and 200 mL of medium. The study of oxygen transference was realized in a 1,25 L bench fermentor (New Brunswick Sci. Co./Bioflo III). With the results obtained it was possible to conclude that the best treatment to the waste of biodiesel consisted of decreasing pH until 4 with phophoric acid, followed by 24 hours of decantation. With this treatment it was possible to obtain a promising carbon source more and, by the process optimization studies, it was possible to determine the best composition of culture medium (10 g/L of treated glycerin; 6 g/L of yeast extract; 3 g/L of (NH4)2SO4; 0,12 g/L of CaCl2.2H2O; 1,5 g/L of MgSO4.7H2O; 0,09 g/L of MnSO4; 1,5 g/L of K2HPO4 and 1,5 g/L of KH2PO4) and the best aeration condition (mantaining the oxygen concentration at 45% of saturation during all phases of bacterial development). So, it was possible to obtain a fermented broth 583 times more potent than the control test using pure glycerol.
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Atividade inseticida do líquido da castanha de anacardium humile (anacardiaceae) sobre aedes aegypti / Insecticidal activity of nut shell liquid anacardium humile (anacardiaceae) against aedes aegyptiRomano, Camila Aline 07 April 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-04-07 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Aedes aegypti is the major vector of dengue, chikungunya and zika fever.
Currently, with the lack of specific therapeutic and prophylactic measures, the
main way to prevent these arboviruses is vector control. This control is
performed mainly with the application of insecticides, but continuous use of
these substances favored the emergence of resistant populations, making it
necessary to develop alternative strategies for vector control. An example is
the survey of vegetable substances which may interfere with the
development of the mosquito. In this sense, the Cerrado plants the may be a
promising way. In this study, was investigated the insecticidal activity of
Cashew Nut Shell Liquid (CNSL) produced by the species Anacardium
humile on Aedes aegypti, the dengue vector, Chikungunya and Zika virus.
Fruits of A. humile were collected and kept in greenhouse of forced
ventilation at 40º Celsius during seven days for the extraction of CNSL. Were
performed mortality tests of third instar larvae (L3), pupa and adult, besides
the observation of the oviposition behavior of females and viability of eggs
and observation of the residual effect of solution. The CNSL was diluted in
decreasing gradual concentrations from 1000 to 3ppm, to obtain the Lethal
Concentrations (LC). In oviposition the LC99 was used for larvae. The tests of
residual effect and oviposition were given in two stages, a pilot test of
100ppm and a test with the LC99. Was obtained LC50 and LC90, respectively,
6.63 and 11.23ppm for larvae; 276 and 728.62ppm for pupae, not being
observed mortality in adults. The residual effect of the solution was seven
days in the pilot test and five days in the LC99. In the pilot test for oviposition
was observed repellent effect of CNSL on females with a significant reduction
of eggs number (p = 0.0001 and p=0.0348) and change in standards of
stratification of the eggs on oviposition substrate. The larval hatching rate of
the eggs exposed to moistened substrate with CNSL was significantly lower
(p = 0.0102) when compared to the control. The results presented evidence
the insecticidal activity of the CNSL of A. humile, indicating it as a promising
product in the research for new botanical insecticides. This way, further
studies should be conducted in order to verify possible toxicity of the liquid to
other animals. / Aedes aegypti é o principal vetor do dengue e das febres chikungunya e
zika. Até o momento, devido à inexistência de medidas terapêuticas e
profiláticas específicas, a principal forma de prevenção dessas arboviroses é
o controle do vetor. Esse controle é realizado principalmente com aplicação
de inseticidas, porém o uso contínuo dessas substâncias favoreceu o
aparecimento de populações resistentes, tornando necessário o
desenvolvimento de estratégias alternativas para o controle vetorial. Um
exemplo é a pesquisa de substâncias vegetais que possam interferir no
desenvolvimento do mosquito. Nesse sentido, as plantas do Cerrado podem ser um caminho promissor. Este trabalho investigou a atividade inseticida do
líquido da castanha de caju (LCC) extraído da espécie Anacardium humile,
planta nativa do Cerrado. Frutos de A. humile foram coletados e mantidos
em estufa de ventilação forçada a 40ºC por sete dias para a extração do
LCC. Foram realizados testes de mortalidade de larvas de terceiro estádio
(L3), pupa e adulto. Além disso, observou-se o comportamento de oviposição
das fêmeas, viabilidade dos ovos e o efeito residual da solução sobre L3. O
LCC foi diluído em concentrações gradativas decrescentes de 1000 a 3ppm,
para obtenção das concentrações letais (CL). Na oviposição foi empregada a
CL99 para larvas. Os testes de efeito residual e oviposição se deram em duas
etapas, um teste-piloto a 100ppm e um teste com a CL99. Obtiveram-se as
CL50 e CL90 respectivamente, 6,63 e 11,23ppm para larvas; 276 e
728,62ppm para pupas. Não foi observada a mortalidade em adultos. O
efeito residual da solução foi de sete dias no teste piloto e cinco dias na
CL99. No teste piloto para oviposição observou-se efeito repelente do LCC
sobre as fêmeas havendo redução significativa do número de ovos
(p=0,0001 e p=0,0348) e mudança nos padrões de estratificação dos ovos
no substrato de oviposição. Contudo, a taxa de eclosão larval dos ovos
expostos ao substrato umedecido com LCC foi significativamente menor
(p=0,0102) quando comparada ao controle. Os resultados apresentados
evidenciam a atividade inseticida do LCC de A. humile, sugerindo-o como
produto promissor na pesquisa por novos inseticidas botânicos. Dessa
forma, mais estudos devem ser realizados a fim de verificar possível
toxicidade do líquido para outros animais.
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Metabólitos secundários de Annonaceae: triagem, fracionamento biomonitorado e bioatividade frente a Spodoptera frugiperda (J. E. Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae) / Secondary metabolites from Annonaceae: screening, bioguided fractionation and bioactivity against Spodoptera frugiperda (J. E. Smith, 1797) (Lepidoptera: Noctuidae)Thiago Felipe Ansante 15 April 2014 (has links)
Visando detectar alternativas de manejo para a lagarta-do-cartucho-do-milho, Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae), realizou-se, primeiramente, uma triagem em extratos etanólicos preparados das estruturas (folhas, ramos e sementes) de diferentes espécies de Annonaceae (Annona cacans, A. montana, A. mucosa, A. reticulata, A. sylvatica e Duguetia lanceolata). Com base nessa etapa inicial, constatou-se que o extrato etanólico das sementes de A. mucosa (ESAM) foi o mais promissor, causando significativa toxicidade aguda (CL50 e CL90 de 842,97 e 1.882,00 mg kg-1, respectivamente) e pronunciada inibição do desenvolvimento larval (toxicidade crônica), após sete dias de exposição a dietas tratadas. Na CL50, o ESAM reduziu as viabilidades larval e pupal e o peso de pupas com 24 horas, e aumentou a duração da fase larval. No entanto, o ESAM não ocasionou efeito fagodeterrente para larvas de quarto ínstar de S. frugiperda, embora tenha reduzido o consumo ao longo do tempo. Feito isso, a eficácia de ESAM foi comparada com inseticidas comerciais de origem natural (Azamax® 1,2 EC) e sintética (Premio® SC). Nessa comparação, o ESAM (na CL90) apresentou eficácia similar (equitóxico) aos dois produtos comerciais (utilizados na dose registrada para o controle do inseto-praga). A seguir, foi realizado o fracionamento biomonitorado através de diferentes técnicas cromatográficas que conduziu ao isolamento da acetogenina roliniastatina-1, identificada (com base em técnicas espectroscópicas) como componente majoritário da fração mais ativa do extrato etanólico de A. mucosa. Roliniastatina-1 foi então novamente ensaiada frente a larvas de S. frugiperda e ocasionou significativos efeitos agudos (mortalidade larval) e crônicos (redução do desevolvimento larval). Por fim, investigou-se a bioatividade de uma formulação à base de acetogeninas (Anosom® 1 EC) recentemente registrada, tanto isoladamente quanto em mistura com uma formulação à base de limonoides (Azamax® 1,2 EC). Anosom® 1 EC, testado na CL90 estimada (2.959,00 mg kg-1) e Azamax® 1,2 EC, testado na concentração registrada para o controle do inseto-praga (4.000,00 mg kg-1), causaram significativa mortalidade larval, sem ocorrer diferença entre os tratamentos tanto quando testados isoladamente como em mistura binária. Anosom® 1 EC (na CL50) provocou ainda aumento significativo das mortalidades larval e pupal e da duração da fase larval, bem como redução do peso pupal do inseto. Dessa forma, derivados de Annonaceae podem constituir um componente útil para o manejo integrado de S. frugiperda em condições de campo. / A screening with ethanolic extracts prepared from structures (leaves, branches and seeds) from different species of Annonaceae (Annona cacans, A. montana, A. mucosa, A. reticulate, A. sylvatica and Duguetia lanceolata) aiming to detect management alternatives for Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae) was done. Based on this initial phase, it was verified that the ethanolic extract from seeds of A. mucosa (AMSE) was the most promising one, causing significant acute toxicity (LC50 and LC90 of 842.97 and 1,822.00 mg kg-1, respectively) and pronounced inhibition of larval development (chronic toxicity) after a 7-day exposition to treated diets. At LC50, AMSE decreased larval and pupal viabilities and also the pupal weight at 24 hours, and increased the larval phase duration. However, AMSE didn\'t cause antifeedant effect for 4-instar S. frugiperda larvae, though it decreased consumption throughout the time. After that, AMSE efficacy was compared to commercial pesticides from natural (Azamax® 1.2 EC) and synthetic (Premio® SC) origin. In this confrontation, AMSE (at LC90) showed efficacy similar to that of commercial products (used at registered dose for S. frugiperda control). Then, the bioguided fractionation using different chromatographic techniques which led to isolation of acetogenin rolliniastatin-1 identified as the majoritary compound of the most active ethanolic extract from A. mucosa. After that, rolliniastatin-1 was again tested against S. frugiperda larvae and caused significant acute (larval mortality) and chronic (decrease of larval development) effects. Finally, the bioactivity of a newly-registered acetogenin-based (Anosom® 1 EC) formulation was investigated, both separately and mixed with a limonoid-based formulation (Azamax® 1.2 EC). Anosom® 1 EC, tested at estimated LC90 (2,959.00 mg kg-1) and Azamax® 1.2 EC, tested at registered dose for S. frugiperda (4,000.00 mg kg-1) led to significant larval mortality, without happening any differences between treatments either tested separately or in a binary mixture. Anosom® 1 EC (at LC50) also led to significant increase of larval and pupal mortality and larval phase, as well as insect pupal weight decrease. Thus, Annonaceae derivates can be a useful component for S. frugiperda integrated management under field conditions.
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Caracteriza??o qu?mica e atividade inseticida dos ?leos essenciais de plantas arom?ticas procedentes do Brasil e de Cuba sobre o desenvolvimento p?s-embrion?rio de d?pteros muscoides.PINTO, Zeneida Teixeira 10 February 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-02-10 / CAPES / The muscoid flies have important public health because it acts as a mechanical vector of pathogens (bacteria, viruses, helminth eggs) and cause secondary myiasis in humans and animals. Chemical insecticides have been of great importance in the control of synanthropic flies, but have great persistence and a broad spectrum of action, causing a prolonged impact on the environment. An alternative way to this type of control are secondary metabolites of plants, which are considered the active principle of natural insecticides. This study was divided into two chapters that approached the the theme of natural control. The first chapter is related to the essential oil chemical composition of Cymbopogon citratus collected d in Brazil and Cuba, and evaluation of oil and its major component citral against the post-embryonic development of Musca domestica, Chrysomya putoria, C. megacephala and Lucilia cuprina. The chemical analysis of the essential oils allowed the identification of 13 and 12 chemical components, respectively, and in both the major components were the isomers Neral (35.21% ? Cuba) (36.37% - Brazil) and Geranial (53.2% - Brazil) (51.14% - Cuba) and, Myrcene (6.52%), in a smaller proportion, was only found in Cuban oil. The results show that there were no differences between the activity of Cuban oil and Brazilian. The post-embryonic period of L. cuprina, M. domestica and C. megacephala elongated with the treatment with both oils, but it shortened the larval and neolarva to adult periods for C. putoria. All groups presented morphological alterations. The results of the the test showed that C. megacephala was the most sensitive species killing 73% in larval stage and 77% in newly-hatched larvae to adult and less sensitive was C. putoria with 40% mortality in the larval stage and 57% in newly-hatched larvae to adult. Citral shortened post-embryonic development period (larval, pupal and newly hatched larvae to adult) of M. domestica, L. cuprina and C. megacephala but C. putoria was delayed. In the second chapter, the aim was to analyze the chemical composition and insecticidal effect of the essential oils extracted from leaves of Pinus caribaea Morelet collected in Brazil and Cuba and the terpene Caryophyllene, on the post- embryonic development of the species Musca domestica, Chrysomya megacephala, C. putoria e Lucilia cuprina. Twelve components were identified in the essential oil of P. cariabea collected in Brazil, and ? Phellandrene and Germacren D and (E) Caryophyllene were the major components, with relative areas of 39.57, 26.57 and 16.85% respectively. In comparison, 20 components were identified from the essential oil of the same species originated from Cuba with the major components, Germacrene D (48.25%), o ?-Phellandrene (12.10%) and Caryophyllene Oxide (12.41%). Caryophyllene was more toxic to M. domestica with an 87% of mortality for the newly hatched larvae to adult, the less affected species were L. cuprina and C. megacephala with 83% of mortality and for C. putoria the mortality was 63%. The post-embryonic development period was shortened in the species M. domestica, L. cuprina and C. megacephala and prolonged in C. putoria. The pupal weight was reduced in most species except in C. putoria that it had increased; there was no change in the sex ratio in the species in the study. / Os d?pteros muscoides apresentam import?ncia em sa?de p?blica, pois atua como vetor mec?nico de pat?genos (bact?rias, v?rus, ovos de helmintos), al?m de causar mi?ases secund?rias no homem e nos animais. Os inseticidas qu?micos t?m sido de grande import?ncia no controle de d?pteros sinantr?picos, mas apresentam grande persist?ncia e um amplo espectro de a??o, causando um impacto prolongado ao ambiente. Uma forma alternativa a este tipo de controle s?o os metab?litos secund?rios de plantas, que s?o considerados o princ?pio ativo dos inseticidas naturais. O presente estudo foi dividido em dois cap?tulos que abordam o tema do controle natural. O primeiro cap?tulo foi relativo a analise da composi??o qu?mica do ?leo essencial de Cymbopogon citratus coletado no Brasil e Cuba, e da avalia??o do ?leo e do seu componente majorit?rio citral sob o desenvolvimento p?s-embrion?rio de Musca domestica, Chrysomya putoria, C. megacephala e Lucilia cuprina. A an?lise da composi?ao qu?mica dos ?leos essenciais (Brasil/Cuba), por Cromatografia Gasosa acoplada ao espectr?metro de massa (GC-EM), permitiu a identifica?ao de 13 e 12 componentes principais, respectivamente; nove deles comuns aos dois. Em ambos os ?leos, os principais componentes foram os is?meros geranial e neral, que, juntos, formam o composto citral. Esse corresponde a um total de 97,92%/Brasil e 97,69%/Cuba dos compostos identificados. O monoterpeno mirceno, observado na amostra cubana, apresentou grande abund?ncia relativa (6,52%). Os d?pteros foram submetidos a diferentes concentra??es do ?leo de C. citratus (5, 10, 25, 75 e 100%) (Brasil/Cuba). As subst?ncias foram aplicadas topicamente nas neolarvas (1?L/larva). N?o houve grandes diferen?as entre a atividade do ?leo cubano e brasileiro. As esp?cies L. cuprina, M. domestica, C. megacephala tiveram o seu per?odo p?s-embrion?rio aumentado pelos dois ?leos (Brasil/Cuba), por?m em C. putoria ela apresentou um encurtamento no per?odo larval e no per?odo de neolarva a adulto. Todos os grupos tratados apresentaram deformidades. Os resultados do teste com o monoterpeno Citral mostraram que C. megacephala foi a esp?cie mais sens?vel matando 73% no per?odo larval e 77% no per?odo de neolarva a adulto e a esp?cie menos sens?vel foi C. putoria que apresentou 40% de mortalidade no per?odo larval e 57% no per?odo de neolarva a adulto. O Citral encurtou o per?odo p?s-embrion?rio das esp?cies M. domestica, L. cuprina e C. megacephala, por?m na esp?cie C. putoria ele atrasou. No segundo cap?tulo objetivou analisar a composi??o qu?mica do ?leo essencial de Pinus caribaea coletado no Brasil e Cuba, e avaliar a sua a??o e a do seu componente cariofileno sob o desenvolvimento p?s-embrion?rio analise da composi??o qu?mica do ?leo essencial de Cymbopogon citratus coletado no Brasil e Cuba, e da avalia??o do ?leo e do seu componente majorit?rio citral sob o desenvolvimento p?s-embrion?rio de Musca domestica, Chrysomya putoria, C. megacephala e Lucilia cuprina. Para o ?leo essencial obtido das folhas de P. caribaea coletadas no Brasil foram identificadas 12 subst?ncias qu?micas, sendo o ?-Felandreno (39,57%), Germacreno D (26,57%) e (E) Cariofileno (16,85%) os majorit?rios. A an?lise do ?leo das folhas de P. cariabea provenientes de Cuba resultou na identifica??o de 20 subst?ncias, sendo o Germacreno D (48,25%), ?xido de Cariofileno (12,41%) e ? Felandreno (12,10%) Germacreno D (48,25%) os constituintes majorit?rios. O Cariofileno mostrou ser mais t?xico para M. domestica com uma mortalidade de 87% na fase de neolarva a adulto e as esp?cies menos afetadas foram L. cuprina e C. megacephala com 83% de mortalidade e para C. putoria a mortalidade observada foi de 63%. O per?odo p?s- embrion?rio foi encurtado nas esp?cies M. domestica, L. cuprina e C. megacephala e aumentado em C. putoria. O peso pupal foi reduzido na maioria das esp?cies com exce??o de C. putoria que teve ele aumentado e n?o houve altera??o na propor??o sexual nas esp?cies estudadas.
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Biologia de Califor?deos (Diptera): fotoresposta, parasitismo e controle / Calliphorids Biology (Diptera): photoresponse, parasitism and biological controlMELLO, Renata da Silva 20 March 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-03-20 / CAPES / Calliphorids are insects of medical-sanitary i and forensic entomology, contributing mainly to estimate the minimum post mortem interval. Therefore, studies on population dynamics under different abiotic conditions, as well as investigations on diperan control are very important. This study was divided into four chapters that approached the subject from different perspectives. The first two chapters are related to post-embryonic development of Chrysomya megacephala and Chrysomya albiceps submitted to different photoperiods (L0:D24, L12:D12, L16:D8, L24:D0). These species responded differently, however both species had a faster development for the different stages and their viabilities were higher in the 24h scotophase ( 24 hours of darkness) when compared to the other photoperiods. There was a trend for deceleration of the development as the photophase increased and it was evident for the larval stage of the both species. However, in C. albiceps was more pronouced for newly- larvae hatched to adult period, presenting a difference of up to four days between the shorter photophase (L0:D24) and the longer photophase (L24:D0). The total period of development of C. megacephala was shorter when the 24hscotophase was compared to the others. Therefore, it was possible to infer that the different photoperiods presented a circadian rhythm of emergence with distinct daily emergence rate, suggesting that this phenomenon was primarily regulated by an endogenous circadian clock, even if they presented modulations by photophases. In the third chapter, the aim was to investigate the biological aspects of Nasonia vitripennis (Pteromalidae) when the female explored hosts buried at different depths ranging from 0.0 to 5.0 cm at 0.5 cm intervals, for two periods of exposition: 24 and 48h. It was observed that two factors, period of exposition and pupation depths, caused differences in the parasitoid progeny and had a relation of dependence. For the group exposed for 48h, the pupae were parasitized only when buried up to 2.0 cm depth, however, for the group exposed for 72h, the parasitic capacity of parasitoids reached pupae buried up to 3.0 cm deep. The group exposed for 48h had a decreasing number of female emerged per pupae as the depth increased. This trend was not observed for the group exposed for 72h. The number of male emerged per pupae did not differ among the depths and periods of expositions. The sex deviation was higher for female for both exposure periods and for all depths. In the fourth chapter was the effect of a cornoside extracte from Parahancornia amapa (Apocynaceae) on post-embryonic development of Chrysomya putoria and progeny of N. vitripennis was investigated. The larval weigh and post-embryonic developmental period of C. putoria were not affected, with exception for the pupal development that was slower with the treatment with 5% cornosideo when compared to the control (distilled water). The newly-hatched larvae to adult period presented a viability of around 60 % for boths treatments. In relation to to the effect of the cornosideo on progeny of the parasitoids the following parameters were analysed: number of parasitoids emerged per pupae, sex ratio and developmental period. None of these were affected in comparison to the control group. The lack of effect of 5% cornoside on calliphorid flies may be a negative aspect when control is being concerned. However the lack of effect on the parasitoid, used as natural controllers of calliphoridas, is a / Califor?deos apresentam import?ncia m?dica-sanit?ria e tamb?m na entomologia forense, pois auxiliam a data??o do intervalo p?s-morte. Desta forma, estudos relativos ? din?mica populacional em diferentes condi??es abi?ticas, bem como investiga??es sobre m?todos de controle destes d?pteros s?o de suma import?ncia. O presente estudo foi dividido em quatro cap?tulos que abordaram o tema por diferentes perspectivas. Os dois primeiros cap?tulos foram relativos ao desenvolvimento de Chrysomya megacephala e Chrysomya albiceps submetidas a diferentes fotoper?odos (L0:E24, L12:E12, L16:E8, L24:E0). Estas esp?cies responderam distintamente, no entanto ambas as esp?cies submetidas ?s 24h de escotofase tiveram desenvolvimento mais acelerado em suas diferentes fases imaturas e as viabilidades foram maiores em rela??o aos demais fotoper?odos. Houve uma tend?ncia para desacelara??o do desenvolvimento ? medida que a fotofase foi aumentada, isto foi bem evidente para a fase larval em ambas as esp?cies. Embora, em C. albiceps foi mais pronunciado no per?odo de neolarva a adulto, havendo uma diferen?a de at? quatro dias entre a menor (L0:E24) e a maior fotofase (L24:E0). Em C. megacephala houve diferen?a somente quando o grupo submetido ?s 24h de escotofase foi comparado aos demais fotoper?odos, tendo o desenvolvimento mais acelerado. Foi poss?vel inferir que o ritmo de emerg?ncia teve periodicidade circadiana, embora com taxas di?rias de emerg?ncia distintas nos diferentes fotoper?odos. No terceiro cap?tulo objetivou-se investigar aspectos biol?gicos de Nasonia vitripennis (Pteromalidae) quando expostas aos hospedeiros enterrados em diferentes profundidades, variando de 0,0 a 5,0 cm, a cada 0,5 cm, por dois per?odos, 24h e 48h. Observou-se que a explora??o do pup?rio foi influenciada pelos dois fatores, tempo e profundidade, havendo uma rela??o de depend?ncia entre eles. Em 48h de exposi??o foram observados pup?rios parasitados somente at? a profundidade de 2,0 cm, por?m em 72h a capacidade parasit?ria foi at? 3,0 cm. Houve um decr?scimo do n?mero de f?meas emergidas por pupa com o aumento das profundidades em 48h, no entanto esta tend?ncia n?o foi observada em 72h. O n?mero de machos por pupa n?o diferenciou entre as profundidades e nem entre os dois tempos de exposi??o. Houve um desvio da raz?o sexual para f?meas em ambos os tempos de exposi??o e em todas as profundidades. No quarto cap?tulo foi investigada a a??o do cornos?deo, a fra??o metan?lica do l?tex de Parahancornia amapa (Apocynaceae), sobre o desenvolvimento de Chrysomya putoria e sobre a prog?nie de N. vitripennis. Foi observado que o peso larval e o tempo de desenvolvimento p?s-embrion?rio de C. putoria n?o foram alterados, com exce??o do per?odo pupal que foi mais lento no tratamento com cornos?deo a 5% quando comparado ao grupo controle (?gua destilada). A viabilidade de neolarva a adulto foi em torno de 60% para ambos os tratamentos. Quanto ? influ?ncia do cornos?deo sobre a prog?nie dos parasit?ides, o n?mero de parasit?ides, raz?o sexual e tempo de desenvolvimento n?o foram alterados quando comparados ao controle. P?de se dizer que o cornos?deo a 5% n?o exerceu efeito sobre os califor?deos, aspecto negativo para o controle, e nem tampouco em seus controladores naturais, aspecto positivo.
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Avaliação de produtos comerciais de fungos entomopatogênicos no controle do psilídeo-de-concha glycaspis brimblecombei (hemiptera: psyllidae)Dal Pogetto, Mário Henrique Ferreira do Amaral [UNESP] 13 February 2008 (has links) (PDF)
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Previous issue date: 2008-02-13Bitstream added on 2014-06-13T19:37:23Z : No. of bitstreams: 1
dalpogetto_mhfa_me_botfca.pdf: 18196299 bytes, checksum: ea89d33ee01e71be451e6bab9eb9abe0 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Este trabalho teve como objetivo avaliar o potencial de controle de alguns produtos comerciais de fungos entomopatogênicos disponíveis no mercado, bem como o desenvolvimento dos fungos Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae e Lecanicillium longisporum sobre ninfas de Glycaspis brimblecombei (Hemiptera: Psyllidae). Para tanto, foram realizados ensaios em laboratório com pulverização de suspensões fúngicas de 1 x 104, 1 x 105, 1 x 106, 1 x 107 e 1 x 108 conídios/mL dos bioinseticidas Boveril WP, Toyobo e Mycotrol (B. bassiana), Metarril WP e Toyobo (M. anisopliae) e Vertirril WP (L. longisporum) nas ninfas do inseto. Nos bioensaios de semicampo estes produtos foram aplicados na forma pulverizada e polvilhada sobre mudas infestadas por ninfas de G. brimblecombei. As avaliações para o bioensaio de laboratório foram realizadas aos um, três, cinco e sete dias após a pulverização, enquanto no ensaio de semicampo as avaliações foram realizadas apenas sete dias após a aplicação dos produtos. O desenvolvimento dos fungos sobre os insetos foi avaliado mediante a observação dos insetos em microscópio óptico a 0, 24, 48, 72 e 148 horas após a aplicação dos fungos. No bioensaio de laboratório os produtos que apresentaram as maiores mortalidades na maior concentração foram L. longisporum (Vertirril WP), B. bassiana (Mycotrol e Boveril WP) e M. anisopliae (Metarril WP), com mortalidades acima de 70%. As maiores porcentagens de mortalidade confirmada foram observadas para os tratamentos com maior porcentual de mortalidade total, destacando-se o produto Mycotrol que obteve 70% dos indivíduos esporulados nas concentrações de 1 x 106, 1 x 107 e 1 x 108 conídios/mL. Em semicampo os produtos M. anisopliae (Metarril WP) aplicado em pulverização e M. anisopliae e B. bassiana (Toyobo) aplicados em polvilhamento apresentaram eficiência em torno de 70%. Na avaliação do ciclo... / This study aimed to evaluate the potential control of some commercial entomopathogenic fungi products available in the market and the development of Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae and Lecanicillium longisporum on nymphs of Glycaspis brimblecombei. The insecticides Boveril WP, Toyobo and Mycotrol (B. bassiana), Metarril and Toyobo WP (M. anisopliae) and Vertirril WP (L. longisporum) were tested in laboratory spraying fungal suspensions with 1 x 104, 1 x 105, 1 x 106, 1 x 107 and 1 x 108 conidia/mL on insect nymphs. In the semi field bioassays, these products were used in dust and sprayed forms on plants infested by nymphs of G. brimblecombei. The evaluations in laboratory bioassay were made at one, tree, five and seven days after spraying, and semi field test the assessments were carried out seven days after products application. The fungi development on insects was evaluated by observing of nymphs in optical microscope at 0, 24, 48, 72 and 148 hours after application. In laboratory bioassay the bioinsecticides had highest mortality in highest concentration were L. longisporum (Vertirril WP), B. bassiana (Mycotrol and Boveril WP) and M. anisopliae (Metarril WP), with mortality rates above 70%. The highest percentages of confirmed mortality were obtained in most effective treatments, especially to Mycotrol which obtained 70% of individuals sporulated at concentrations of 1 x 106, 1 x 107 and 1 x 108 conidia/mL. In semi field bioassay, M. anisopliae (Metarril WP) applied in spraying and M. anisopliae and B. bassiana (Toyobo) applied... (Complete abstract click electronic access below)
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Caracterização molecular e atividade de isolados de Bacillus thuringiensis (Berliner) para as brocas da cana-de-açúcar Diatraea saccharalis (Fabr.) e Diatraea flavipennella (Box) (Lepidoptera: Crambidae) / Activity and molecular characterization of Bacillus thuringiensis (Berliner) isolates to the sugarcane borers Diatraea saccharalis (Fabr.) and Diatraea flavipennella (Box) (Lepidoptera: Crambidae)SILVA, Liliane Marques da 04 February 2013 (has links)
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Liliane Marques da Silva.pdf: 566459 bytes, checksum: 54839b1e8470b48f9d90167ceb6a2716 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-28T12:13:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2013-02-04 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The bacterium Bacillus thuringiensis (Berliner) presents remarkable aspects for the control of insect pests, such as its mode of action, specificity and selectivity. Thus, this study aimed to evaluate the toxic activity of B. thuringiensis isolates in larvae of Diatraea saccharalis (Fabr.) and Diatraea flavipennella (Box) and determine the toxin gene contents for the very active isolates. The insects were maintained on artificial diet. Twenty four isolates were used, which were preserved in LB medium, 15% glycerol and 0.02% SDS and kept at -80 ° C. General and specific primers were used to survey for toxin genes. In pathogenicity tests with D. saccharalis and D. flavipennella, 16 and 18 isolates showed activity toward borers, respectively. The LC50 values among isolates for the population of D. saccharalis ranged from 0.08 x 105 (LIIT-0105) and 4104 x 105 (LIIT-2707) crystals + spores/mL. The isolated LIIT-0105 was 4,382 and 18.59 times more toxic than Btk and Btt, respectively. For D. flavipennella, the LC50 values between isolates ranged from 0.40 x 105 (LIIT-2707) and 542.75 x 105 (LIIT-2109) crystals + spores/mL. The isolate LIIT-2707 was 1,137 and 11.52 times more toxic than Btk and Btt, respectively. The isolate LIIT-0105 presented the lowest LC50 for D. saccharalis that harbored the genes cry1, cry2, cry8 cry9, cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1B, cry1C, cry1D, cry1F, cry1I, cry2A, cry2Aa1, cry2Ab2, cry9C. For the borer D. flavipennella, the isolated LIIT-2707 presented the lowest LC50 and the following genes cry1, cry2, cry9, cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1B, cry1D, cry1F, cry1I, cry2A, cry2Aa1 and cry2Ab2 were amplified. The results suggest that B. thuringiensis isolates present a great variability of genes for bioprospection, and thus potential for developing new products and insertion on plants to express Bt genes for the control of D. saccharalis and D. flavipennella. / A bactéria Bacillus thuringiensis (Berliner) apresenta características essenciais no controle de insetos-praga, tais como seu modo de ação, especificidade e seletividade. Dessa forma, esta pesquisa objetivou avaliar a atividade tóxica de isolados de B. thuringiensis em larvas de Diatraea saccharalis (Fabr.) e Diatraea flavipennella (Box) e caracterizar quanto à presença de gene de toxinas os isolados tóxicos. Estas pragas foram mantidas em dieta artificial. Foram utilizados 24 isolados, preservados em meio LB, glicerol a 15% e SDS a 0,02% e mantidos a -80ºC. Para caracterização molecular foram utilizados iniciadores gerais e específicos. Nos testes de patogenicidade com D. saccharalis e D. flavipennella, 16 e 18 isolados mostraram-se ativos, respectivamente. Os valores de CL50 entre os isolados para a população de D. saccharalis variaram entre 0,08 x 105 (LIIT-0105) e 4104 x 105 (LIIT-2707) esporos + cristais/mL. O isolado LIIT-0105 foi 18,59 e 4382 vezes mais tóxico que o Btk e Btt, respectivamente. Para D. flavipennella, os valores de CL50 entre os isolados variaram entre 0,40 x 105 (LIIT-2707) e 542,75 x 105 (LIIT-2109) esporos + cristais/mL. O isolado LIIT-2707 foi 11,52 e 1137 vezes mais tóxico que o Btk e Btt, respectivamente. O isolado LIIT-0105 que teve a menor CL50 para D. saccharalis apresentou os genes cry1, cry2, cry8, cry9, cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1B, cry1C, cry1D, cry1F, cry1I, cry2A, cry2Aa1, cry2Ab2 e cry9C e para D. flavipennella o isolado LIIT-2707 apresentou a menor CL50 amplificando para os genes cry1, cry2, cry9, cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1B, cry1D, cry1F, cry1I, cry2A, cry2Aa1 e cry2Ab2. Os resultados sugerem que isolados de B. thuringiensis apresentam grande potencial e variabilidade para bioprospecção desta bactéria, para o desenvolvimento de produtos ou transformação de plantas que expressem genes de Bt para o controle de D. saccharalis e D. flavipennella.
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