Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-07-23Bitstream added on 2014-06-13T18:40:42Z : No. of bitstreams: 1 delbon_mc_dr_jabo.pdf: 834697 bytes, checksum: 6317b60cd361aa6481592333ad402267 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Anestésicos são utilizados para anestesiar peixes para facilitar o manejo, evitar ferimentos e reduzir o estresse desses animais. Sabendo-se que a aplicação de eugenol em peixes resulta em baixos tempos de indução anestésica, objetivou-se, avaliar diferentes concentrações do fármaco e sua ação sucessiva sobre os estágios anestésicos; testar a eficácia do produto como mitigador dos parâmetros hematológicos, em alta concentração (aplicada para anestesia profunda) e em pequenas concentrações (aplicadas no transporte de peixes); otimizar e validar um método determinação de resíduos de eugenol em músculo, fígado e plasma; e avaliar os resíduos anestésicos dos peixes submetidos à concentrações de anestesia profunda e de transporte, ao longo de 24 horas de depuração. Para isso, utilizaram-se exemplares de tilápia do Nilo Oreochromis niloticus, provenientes do Pólo Regional da APTA do Vale do Ribeira, município de Pariquera-Açu/SP. A concentração de eugenol, considerada mínima necessária para produzir anestesia profunda, foi de 100 mg L-1. Em relação à ação sucessiva do fármaco, pode-se observar que não houve diferença significativa (p>0,05) entre os estágios anestésicos. O produto aplicado como anestésico não teve interferência sobre os parâmetros hematológicos de tilápia, em todas concentrações testadas. Para avaliar o residuos de eugenol em amostras biológicas, a técnica escolhida foi cromatografia em fase gasosa (CG) utilizando-se coluna capilar e detector de ionização de chama (DIC). Com esse instrumento, obtiveram-se picos cromatográficos com resolução apropriada e ampla faixa de linearidade, permitindo quantificar com segurança, desde baixas concentrações até níveis elevados do produto. A partir da concentração de 100 mg L-1 de anestésico, analisou-se resíduos em amostras de tilápia e, após 24 horas de depuração... / Not available

Orientador: Newton Nunes / Coorientação: Ana Paula Gering / Banca: Patrícia Cristina Ferro lopes / Banca; Paula Ferreira da Costa / Resumo: A manutenção da função respiratória adequada é essencial para realização de anestesia segura e eficiente. Sendo assim, são necessários estudos que avaliam métodos ventilatórios e seus empregos na rotina clínica. Neste estudo, foram comparadas a ventilação espontânea (VE), ventilação pressão controlada, ventilação pressão controlada associada à pressão positiva expiratória final e ventilação mandatória intermitente sincronizada (SIMV). As modalidades foram comparadas em quatro grupos de oito animais cada. Os coelhos foram anestesiados com isofluorano durante duas horas e posicionados em decúbito lateral direito, totalizando 32 animais. Variáveis cardiovasculares, ventilatórias e hemogasométricas foram registradas em cinco diferentes momentos, com intervalo de 30 minutos. Após, os resultados foram avaliados estatisticamente pelo método dos quadrados mínimos, seguido pelo teste Tukey - Kramer (p≤0,05). Com relação às variáveis cardiovasculares, as médias de pressão arterial média (PAM) e pressão arterial sistólica (PAS) permaneceram discretamente abaixo dos valores de normalidade em todos os grupos. Houve diminuição significativa da PAM e PAS no grupo ventilação ciclada à pressão associada à pressão positiva no final da expiração (GPP) ao longo do tempo anestésico. Quanto aos gases sanguíneos, a pressão parcial de dióxido de carbono arterial (PaCO2) foi maior no GPP quando comparado aos outros grupos, gerando acidemia respiratória após uma hora de procedimento. As médias altas d... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Maintaining adequate respiratory function is essential for safe and efficient anesthesia. Therefore, studies evaluating ventilatory methods and their use in the clinical routine are necessary. In this study, spontaneous ventilation, pressurecontrolled ventilation, pressure-controlled ventilation associated with positive endexpiratory pressure, and synchronized intermittent mandatory ventilation were compared. The modalities were compared in four groups of eight rabbits each. The rabbits were anesthetized with isofluorane for two hours and placed in the right lateral recumbency, totaling 32 animals. Cardiovascular, ventilatory and hemogasometric variables were recorded at five different moments, with an interval of 30 minutes each. Afterwards, the results were statistically evaluated by the least squares method, followed by the Tukey - Kramer test (p≤0.05). Regarding the cardiovascular variables, mean values of mean arterial pressure (MAP) and systolic blood pressure (SBP) remained slightly below normal values in all groups. There was a significant decrease in MAP and PAS in the group under pressure controlled ventilation associated with positive end-expiratory pressure (GPP) throughout the anesthetic time. As for blood gases, the partial pressure of arterial carbon dioxide was higher in GPP when compared to other groups, generating respiratory acidosis after one hour of procedure. High partial pressure of venous oxygen means suggest a higher supply associated with lower O2 co... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

As punções venosas e arteriais são procedimentos potencialmente dolorosos, praticados com muita freqüência nas unidades de neonatologia, sem que algum cuidado para aliviar ou evitar a dor seja tomado. Essa situação é decorrente do fato de que, até recentemente, considerava-se o recém-nascido incapaz de sentir dor. Sabe-se, atualmente, que o neonato apresenta todas as estruturas anatômicas, funcionais e químicas para a percepção de estímulos nociceptivos, respondendo a eles com alterações fisicas, comportamentais e hormonais. Em determinadas situações clínicas, essas respostas à dor podem levar, inclusive, a um aumento da morbidade e da mortalidade. Vários estudos têm demostrado alterações significativas na saturação transcutânea de oxigênio da hemoglobina, especialmente diminuição, em recém-nascidos expostos a procedimentos potencialmente dolorosos. Objetivo: Avaliar o efeito da mistura eutética de lidocaína e prilocaína (EMLA) sobre a saturação transcutânea de oxigênio da hemoglobina como parâmetro para avaliação indireta da dor em punções venosas ou arteriais em recém-nascidos a termo (entre 37 e 41 semanas de idade gestacional), adequados para a idade gestacional (AIG), que necessitem coleta sangüínea (primeira coleta) entre 24 e 72 horas de vida Metodologia: Foi conduzido ensaio clínico randomizado com 20 recém-nascidos, a termo, AIG, entre 24 e 72 horas de vida, submetidos à coleta sangüínea. Após randomização, oito pacientes foram alocados no grupo tratado com EMLA e 12, que constituíram o grupo placebo. O anestésico foi aplicado e, 60 minutos após, procedeu-se à coleta sangüínea por punção venosa ou arterial; 120 minutos após a aplicação do EMLA, foi realizada uma segunda coleta. Na oportunidade de cada uma das coletas verificou-se, imediatamente antes e logo após, a saturação da hemoglobina, e uma série de variáveis consideradas também marcadores indiretos da dor. Essas variáveis incluíram: a freqüência cardíaca, a mímica facial por meio de escores de acordo com a Escala Visual Análoga (VAS) Para Avaliação Subjetiva Da Dor Em Crianças Pequenas, de Maunuskela e Korpela, cortisol e insulina. Na ocasião da primeira coleta, realizou-se igualmente a dosagem de metemoglobina. Resultados: Na primeira coleta, os grupos EMLA e placebo apresentaram reduções na SatHb entre os momentos pré e pós punção. As reduções percentuais foram de -1,86% (p = 0,0277) e -2,01% (p = 0,0844), respectivamente. No que se refere à segunda coleta, o grupo EMLA manteve uma redução percentual entre os momentos pré e pós punção de -1,64% (p = 0,3454), enquanto que o grupo placebo sofreu uma diminuição da SatHb de -3,51% (p = 0,0129). Houve, na segunda coleta, um decréscimo (p = 0,0069) na freqüência cardíaca nos pacientes do grupo placebo. A avaliação da mímica facial da primeira coleta, mostrou modificações no grupo EMLA (p = 0,0679) e no grupo placebo (p = 0,0431) antes e após a coleta. Na segunda, não houve diferenças significativas. Não houve diferença entre os niveis de metemoglobina entre os grupos, e não houve manifestações clínicas de metemoglobinemia no grupo de pacientes anestesiados. Igualmente, não houve diferenças significativas nos níveis de cortisol e insulina entre as coletas e nem em cada uma delas, dentro e entre os grupos. Conclusões: Pode-se inferir que o procedimento de coleta sangüínea por venopunção ou punção arterial no recém-nascido provoca alterações na SatHb. Considerando-se a SatHb como marcador indireto da dor, pode-se portanto, concluir que o procedimento é doloroso. O neonato reage ao estímulo também com alterações na freqüência cardíaca e talvez da mímica facial. Essas respostas podem, em princípio, ser diminuídas, com a aplicação preventiva do EMLA, sem risco aumentado de metemoglobinemia. Os resultados obtidos neste trabalho foram derivados de um estudo com n pequeno, sugerindo-se, portanto, necessários estudos mais aprofundados. / Arterial and venous punctures are procedures potentially painful, which are perforrned very frequently in neonatology units, without any care in arder to prevent or alleviate the pain. This situation is a consequence of the fact that, until recently, it was considered that newborn was incapable o f feeling pain. Nowadays, it is known that the neonate has ali chemical, functional and anatornic structures for perceiving nociceptive stimuli, reacting to them with physical, behavioural and horrnonal alterations. In certain clinicai situations, these reactions to pain can lead to an increase in morbidity and mortality. Many studies have shown variations m hemoglobin saturation, specially fali, m newborns exposed to potentially painful procedures.Objectives: Study the effect of the eutectic mixture of local anesthetics (EMLA) in the hemoglobin saturation as a marker o f pain in newborn. Methodology: A randornized clinicai assay was made with 20 newborns, adequate for gestacional age, within 24 and 72 hours of life, which were subjected to a blood examination. After randornization, eight patients were allocated to the group treated with EMLA and the other 12 were a placebo group. The anesthetic was apllied and thereafter 60 minutes blood was collected by arterial or venous puncture for a first time; two hours after the anesthetic apllication a second blood collection was made. In each of these collections hemoglobin saturation was measured (just before and just after the actual puncture), as well as some indirect "markers"of the pain. These "markers" were: heart frequency, facial mirnic scores accordingly to the Analagous Visual Scale (AVS) For Subjective Evaluation ofPain in lnfants, by Maunuskela e Korpela, and cortisol and insulin leveis. At the time o f the first collection, determination o f metheglobin was also made. Results: In the first collection, both the EMLA and the placebo group showed HbSat reductions if we compare the pre-puncture with the post-puncture status. The percentage of reductions were, respectively, of -1.86% (p = 0,0277) e -2,01% (p = 0,0844). At the time of the second puncture, the EMLA group still showed a reduction between the pre and post pucture status: -1 ,64% (p = 0,3454). However, the placebo group showed a decrease in SatHb o f -3,51% (p = 0,0 129). In the second collection, it occurred a decrease (p = 0,0069) in the heart rate of the control group. The evaluation o f the facial mirnic at the time o f the first collection showed changes in the EMLA group (p = 0,0679) as well as the placebo group (p = 0,0431 ); no changes were perceived in the second blood collection. No differences in the metheglobin leveis were found between the two groups; no clinicai manifestations of increased metheglobin were seen in the anesthetized patients. Besides, no significant differences in the leveis of cortisol and insulin were found in the collections. Conclusions: 1t can be said that blood collection, venous or arterial, can provoke changes in HbSat in newborns. I f HbSat is to be considered an indirect "marker"of pain, a vessel puncture will show to be painful. Newborns react to the pain stimulus with a increasing heart rrequency and, possibly, with alteration in the facial mirnic. These responses may be alleviated with a preventive dosage o f EMLA, without any risk o f higher metheglobin leveis in the blood. Definitive conclusions are to be waited, since the studied group is small; an additional research is welcome.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-21Bitstream added on 2014-06-13T20:25:56Z : No. of bitstreams: 1 gabas_dt_dr_botfm.pdf: 757225 bytes, checksum: 677a131f18a6dc5bb3200cf95bed51ce (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Há controvérsia na literatura sobre a determinação do período exato que corresponde à classificação dos pacientes caninos em neonatos ou pediátricos. Contudo, sabe-se que até 6 semanas de idade estes animais apresentam imaturidade do sistema respiratório, cardiovascular, sistema nervoso central, hepático e renal. Tal imaturidade dos sistemas pode interferir na disponibilidade dos fármacos e na resposta destes à anestesia. Alguns fatores influenciam diretamente a concentração alveolar mínima (CAM) dos anestésicos inalatórios sendo a idade um destes. Há escassa literatura a respeito da influencia da idade na CAM dos anestésicos inalatórios. Desta maneira, este trabalho tem o objetivo de determinar a concentração alveolar mínima (CAM) do sevofluorano em cães jovens nas diferentes faixas etárias pré-determinadas pelos pesquisadores. Foram utilizados oito filhotes de cães, da raça Retriever do Labrador, submetidos à anestesia inalatória com sevofluorano aos 30, 45, 60 e 90 (± 2) dias de idade. A monitoração foi composta de freqüência cardíaca, freqüência respiratória, pressão arterial sistólica não-invasiva, oximetria de pulso, hemogasometria arterial e temperatura retal, concentração de sevofluorano (ETsev) e dióxido de carbono (ETco2) no final da expiração. A ETsev ao final da expiração foi mantida em 3% por no mínimo 15 minutos para a realização do estímulo supramáximo doloroso e determinação da CAM que constitiu-se em pinçamento de cauda durante 60 segundos ou menos, caso a resposta fosse positiva. Quando a resposta ao primeiro estímulo fosse negativa, a concentração de sevofluorano foi diminuída em 0,2% em relação a concentração inicial (3%) e o estímulo foi repetido após 15 minutos, para possibilitar a estabilização do circuito. Se, inicialmente... / In the literature we researched certain difficulty could be noted in the determination of the exact period for the classification of canine patients in neonates and pediatrics. However, it is anyway known that until 6 weeks of age these animals have very immature respiratory, cardiovascular, central nervous system, hepatic, and renal systems. Such immaturity of their organic systems may interfere in the drug disponibility and reaction, as well as in their reaction to the anaesthesic agent. Some factors interfere directly in the minimum alveolar concentration (MAC) of inhalant anaesthesics, and age is certainly one of them. There is a shortage of studies about age influence over MAC of inhalant anaesthesical agents. So, this work is aimed to determine the minimum alveolar concentration (MAC) of sevoflurane in young dogs, divided in different age groups by researchers. Eight Labrador Retriever baby dogs underwent inhalant anaesthesia with sevoflurane in the ages of 30, 45, 60 and 90 (+/-2) days. The checkup included heart and breath frequencies, non-invasive systolical blood pressure pulse oximetry, arterial blood gas and rectal temperature, sevoflurane (ETsev) and carbon dioxide (ETCO2) concentrations in the end of the expiration. ETsev in the end of expiration was kept at 3% for at least 15 minutes for the accomplishment of the pain stimulus and MAC determination. For that, dogs were stimulated with tail clamping during 60 seconds or less, whether reaction were positive. When the reaction to the first stimulation were negative, sevoflurane concentration was decreased in 80% of its initial concentration (1.5 MAC), as well as the stimulus was repeated after 15 minutes, in order to stabilise the circuit. Whether in the beginning the answer were positive, the anaesthesic concentration was then increased in 20% and after 15 minutes a new stimulation was tried. This scheming was repeated as many times as it was necessary to achieve the negative.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Biologia Molecular, 2016. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2016-06-15T13:26:00Z No. of bitstreams: 1 2016_JulianaMayumiHosoume.pdf: 49515490 bytes, checksum: 8ec5b49a63cce2ce425accf5a4c518b7 (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2016-07-30T11:23:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_JulianaMayumiHosoume.pdf: 49515490 bytes, checksum: 8ec5b49a63cce2ce425accf5a4c518b7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-30T11:23:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_JulianaMayumiHosoume.pdf: 49515490 bytes, checksum: 8ec5b49a63cce2ce425accf5a4c518b7 (MD5) / Anestésicos gerais são diariamente utilizados em uma miríade de procedimentos cirúrgicos. Todavia o intricado mecanismo molecular de ação desses compostos ainda é desconhecido. A hipótese mais creditada sugere uma ação de anestésicos em diferentes canais iônicos de tecidos neurais por interação em múltiplos sítios de ligação nessas proteínas de membrana. Estudos in vitro recentes mostram alteração na condução dos canais de potássio dependentes de voltagem pela ligação de anestésicos halogenados em múltiplas cavidades com distintas afinidades em diferentes conformações. Entre esses canais está o canal iônico dependente de voltagem de mamífero Kv1.2. Foi demonstrado que uma mutação pontual G329T nesse canal iônico confere maior sensibilidade ao anestésico geral sevoflurano. Nesse contexto, a investigação da interação envolve não somente a descoberta de regiões putativas de ligação, como também de que forma essa interação poderia alterar o equilíbrio entre as diferentes conformações do canal iônico. Contudo, a ligação do anestésico pode ser uma condição necessária, mas não suficiente para ter efeito modulatório. Sabese que o sevoflurano, um anestésico inalável, potencializa o canal Kv1.2, deslocando a curva de condutância-voltagem para voltagens mais negativas e aumentando a condutância máxima. Para tanto, foram realizadas simulações de dinâmica molecular do canal Kv1.2 selvagem e do canal Kv1.2 G329T em bicamada lipídica com solvente explícito, a fim de amostrar as flutuações estruturais das conformações aberta e fechada desta proteína. Uma ligeira diminuição da flutuação da cadeia do canal mutante foi conferida por análise de RMSD (Root Mean Square Deviation) e RMSF (Root Mean Square Fluctuation) ao longo das trajetórias. Dessas simulações, foram escolhidos ao acaso 120 frames de cada simulação para a realização de docking molecular por meio do AutoDock Vina, assim obtidos aproximadamente 2400 modos de interação. Após o agrupamento e análise das soluções, foram eleitos os centros das nuvens de soluções de quatro potenciais sítios distintos para estruturar o complexo anestésico-canal e, então, avaliar a afinidade do ligante sítio-específica por cálculos de energia livre baseados em simulações de dinâmica molecular. Pela utilização do método LIE (Linear Interaction Energy), percebeu-se grande afinidade pelo sítio próximo ao filtro de seletividade, de tal forma que este pode estar favorecendo a estabilização da conformação condutiva, logo aumentando a condutância do canal. Pela mutação estar associada com um aumento da constante de equilíbrio para um estado pré-aberto, é proposto que um conjunto de sítios podem estar desestabilizando esse estado. Como resposta ao resultado obtido e pelo desafio em conciliar os resultados microscópicos com o efeito na relação condutância voltagem por anestésico, é apresentado um esquema teórico para avaliar múltiplos estados de ligação. Aqui, é exposta uma perspectiva inicial para uso do modelo teórico apresentado. Ao considerar, por indisponibilidade da definição precisa das outras conformações, apenas as conformações aberta e fechada do canal, além das afinidades obtidas para múltiplos sítios, foi possível calcular as densidades de probabilidades para os estados ligados e, dessa forma, encontrar um deslocamento da curva condutância-voltagem com a mesma tendência ao experimental. Os presentes dados revelam importantes regiões de interação anestésico/proteína e permite a proposição de formas de análise do intricado mecanismo de modulação por ligantes, favorecendo assim futuros estudos experimentais dos mecanismos de ação na anestesia. _____________________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / General anesthetics are daily used in a myriad of surgical procedures worldwide. Nevertheless their molecular mechanism of action remains elusive. An accredited hypothesis suggests that anesthetics modulate distinct ion channels in neural tissue by interacting in multiple binding sites in these membrane proteins. New in vitro studies show that halogenated anesthetics modifies the conductance/voltage relation of voltage gated potassium channels by binding to multiple cavities with different affinities in a conformationdependent fashion. Within this context, the present investigation is focused not only on searching the putative binding sites, but also on discovering the manner by which the binding could modify the conformation energy landscape, since the binding of the anesthetic can be a necessary but not sufficient condition to have a modulatory effect. The mammal Kv1.2 channel stands as a potential target of inhalation anesthetics. Sevoflurane, a halogenated anesthetic, potentiates this channel, shifting the conductance/voltage relation leftward and increasing the maximum conductance. Recently, the G329 point mutation in this channel has been associated with an augmentation of the sensitivity to the general anesthetic sevoflurane. To explore this issue, molecular dynamics simulations of the Kv1.2 wild type and Kv1.2 G329T inserted in a phospholipidic membrane with explicit water treatment were performed. The sampling was performed to both open and closed conformations. A slightly reduction of fluctuation near the linker S4-S5 was noticed on the mutant by analysis of RMSF through the simulated trajectory. From these simulations, 120 frames were selected from each construction for running docking calculation. These approach was used in order to account for molecular flexibility of the protein. From the molecular docking applying AutoDock Vina, nearly 2400 binding modes were obtained. After clustering and analysis of solutions, four putative independent binding cavities were selected to construct the anesthetic/channel complex and then ligand site-specific affinities were estimated by free energy calculations based on molecular dynamics simulations. By employing the LIE (Linear Interaction Energy) method, a relative strong affinity by the site near the selectivity filter was noted. The interaction with this site could favor the stabilization of the conductive state, hence increasing the conductance of the channel. Since the G329T mutation is associated with an increased equilibrium constant of the pre-open state, it is proposed that a group of sites could destabilize this state. As an answer to the issue of conciliating the obtained binding affinities with the anesthetic effect on the conductance/voltage relation, it is presented here a theoretic model to evaluate multiple binding states. In an initial attempt to analyze the accuracy of the prediction by the model, considering only the conductive open and closed conformations, since the unavailability of a detailed structure of the other relevant states, besides the calculated binding affinities, it was possible to compute probability densities for the bound states, thus estimating a leftward shift on the conductance-voltage curve. The present data reveals putative anesthetic binding regions and potential binding free energies and allows proposition of a approach to rationalize the complex mechanism of modulation by multiple binding sites with multiple occupancies.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Departamento de Biologia Celular, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2018. / Submitted by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-07-17T18:50:27Z No. of bitstreams: 1 2018_LeonardoCirqueiraPimentel.pdf: 22698391 bytes, checksum: a84e79cda85f13261ade4ac2ccb02f4a (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-07-20T21:09:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2018_LeonardoCirqueiraPimentel.pdf: 22698391 bytes, checksum: a84e79cda85f13261ade4ac2ccb02f4a (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-20T21:09:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2018_LeonardoCirqueiraPimentel.pdf: 22698391 bytes, checksum: a84e79cda85f13261ade4ac2ccb02f4a (MD5) Previous issue date: 2018-08-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES), Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) e Fundação de Apoio a Pesquisa do Distrito Federal (FAPDF). / O uso de anestésicos gerais na medicina é datado em mais de 100 anos. Apesar da evolução da anestesiologia e do uso consolidado dessa classe de fármacos, o mecanismo molecular da anestesia geral ainda é desconhecido. Diversos estudos vêm mostrando que os canais iônicos são os principais alvos dos anestésicos, com um grande número de interações entre ligantes e receptores já caracterizados. Porém, está sendo mostrado que a interação é bastante complexa: existe a presença de múltiplos sítios de ligação, que sofrem influência tanto da concentração de anestésicos quanto da conformação do canal. O principal objetivo deste trabalho foi estudar a interação do anestésico geral sevoflurano com o canal iônico de potássio dependente de voltagem de mamíferos Kv1.2. Esse par é de muito interesse da medicina atual, pois o sevoflurano é um anestésico bastante utilizado e o Kv1.2 é expresso em neurônios do sistema nervoso central e em células cardíacas, com papel chave em diversos distúrbios. Experimentos de eletrofisiologia mostram que o sevoflurano leva à uma ativação mais precoce dos canais Kv1.2 e causa um aumento na corrente máxima. Muitos trabalhos vêm tentando clarificar quais são os sítios de ligação do Kv1.2, e estudos envolvendo ferramentas computacionais vêm sugerindo uma ligação do sevoflurano ao poro de condução da proteína. Esse sítio precisa ter sua existência validada, afinal a presença do anestésico nesse local pode atrapalhar a função do Kv1.2. Para investigar se a ligação é possível, em um primeiro estudo neste trabalho, foram caracterizadas diversos parâmetros físico-químicos de um segmento de membrana, e na sequência as propriedades da migração do sevoflurano da água para a bicamada lipídica. A energia livre de partição mostrou que o anestésico tem maior afinidade pela região anfifílica do interior da membrana, tornando possível o acesso do sevoflurano aos diversos sítios transmembrânicos sugeridos e reduzindo a probabilidade de acesso aos sítios mais hidratados. Descrições termodinâmicas juntamente com ferramentas computacionais de modelagem molecular permitiram o desenvolvimento de um experimento de competição em condições fisiológicas, que indicaram que a ligação do sevoflurano sob fluxo iônico é pouco provável. Além disso, simulações com voltagem mostraram que mesmo quando ligado ao poro central, o sevoflurano não atrapalha a condução iônica. Esses resultados são de grande importância ao mostrar que a ligação do sevoflurano ao sítio do poro central é uma ligação de pouca probabilidade, e que caso ocorra, o funcionamento do canal não é alterado. / The use of general anesthetics in medicine is dated to more than a hundred years. Despite the anesthesiology evolution and the well-established usage of this drug class, the molecular mechanism of general anesthesia is still unknown. Several studies have been showing that the ion channels are the main targets of anesthetics, with a huge and still growing number of characterized receptor-ligand interactions. However, these interactions are complex: there are multiple binding sites, which are influenced by the anesthetic concentration and the channel conformation. This work main goal was to study the interaction between sevoflurane and the mammal voltage dependant potassium channel Kv1.2. Nowadays medicine is very interested in this interaction pair because sevoflurane is widely used and Kv1.2 is expressed in central nervous system and in heart cells, with a key role in neuronal and cardiac disturbance. Eletrophysiology experiments show that sevoflurane induces an easier channel opening and an increase in Kv1.2 maximum currents. Some studies are trying to clarify what are the binding sites, and a site located in the main pore of the channel is being suggested. This site has to be validated, because the presence of sevoflurane at the main pore of the channel can alter Kv1.2 functioning. To check if binding is possible, in the first part of this work, there was a physico-chemical characterization of a membrane patch, and later a sevoflurane water-membrane migration free-energy description. The partition free-energy variation shows that the anesthetic has more affinity to the inner membrane amphiphilic region, making it possible for sevoflurane to acess several suggested transmembrane sites and reducing binding probabilites to hidrated sites. Thermodinamic descriptions joined with computational tools of molecular modeling allowed to develop a competition experiment under physiological conditions, which showed that sevoflurane binding to the central cavity is less probable. Furthermore, simulations in the presence of voltage showed that sevoflurane bound at the central cavity did not hinder ionic conduction across the channel. These results are very important, because they show that sevoflurane binding to the central pore is a low probability event, and when it occurs, the channel functioning is not altered.

Orientador: Norma Sueli Pinheiro Módolo / Banca: Eliana Marisa Ganem / Banca: Leandro Gobo Braz / Banca: Emília Aparecida Valinetti / Banca: José Fernando Amaral Meletti / Resumo: A agitação ao despertar tem sido descrita como um fenômeno comum em crianças anestesiadas com agentes inalatórios. Apesar do sevoflurano e do desflurano serem os agentes mais comumente associados a essa complicação, ainda não está claro se a incidência da agitação é menor com o emprego do isoflurano. Diferentes agentes têm sido empregados para reduzir a probabilidade de ocorrência da agitação ao despertar. A dexmedetomidina, um agente α2-agonista altamente seletivo, parece reduzir a incidência dessa complicação após anestesia com sevoflurano ou desflurano. No entanto, ainda não se avaliou os efeitos da administração desse agente em crianças submetidas à anestesia com isoflurano. O presente estudo teve como objetivo testar a hipótese de que a incidência de agitação ao despertar é maior em crianças anestesiadas com o sevoflurano quando comparada àquela observada após a anestesia com o isoflurano, segundo a aplicação de uma escala validada e com confiabilidade comprovada (Pediatric Anesthesia Emergence Delirium - PAED) aplicada na sala de recuperação pósanestésica (SRPA). Também foi avaliada a hipótese de que a administração da dexmedetomidina antes do fim da anestesia reduz a incidência dessa complicação. Realizou-se ensaio clínico, comparativo, randomizado, duplo cego e controlado. Foram estudadas 140 crianças, com idade entre 2 e 12 anos, submetidas à amigdalectomia, associada ou não à adenoidectomia, sob anestesia geral. As crianças foram distribuídas, de forma aleatória, em quatro grupos de estudo de acordo com o anestésico inalatório empregado para a manutenção da anestesia e pela administração ou não da dexmedetomidina no final da cirurgia: Grupo S (n=35) - Sevoflurano e solução fisiológica; Grupo SD (n=35) - Sevoflurano e dexmedetomidina 0,5 μg.kg-1; Grupo I (n=35) Isovoflurano e solução fisiológica; Grupo ID (n=35)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Agitation at awakening has been described as a common phenomenon in children anesthetized with inhaled agents. Although sevoflurane and desflurane have been more frequently associated with this complication, the incidence of agitation is lower when isoflurane is employed. Different agents have been used to reduce the probability of agitation at awakening occurrence. Dexmedetomidine, a highly selective α2-agonist, seems to decrease the incidence of this complication after anesthesia with sevoflurane or desflurane. However, the effects of this agent on children anesthetized with isoflurane remain unassessed. The purpose of this study was to test the hypothesis that the incidence of agitation at postanesthesia awakening is higher in children anesthetized with sevoflurane than in those receiving isoflurane by using a validated and proven reliable scale (Pediatric Anesthesia Emergence Delirium - PAED) applied in the post-anesthesia recovery room (PARR). In addition, the hypothesis that dexmedetomidine administration, before the end of anesthesia, reduces the incidence of this complication was also tested. This comparative, randomized, double-blinded, controlled clinical trial included 140 children (aged between 2 and 12 years) undergoing tonsillectomy with or without adenoidectomy under general anesthesia. The children were randomly allocated into four groups, according to the inhaled anesthetic used for anesthesia maintenance and the use or not of dexmedetomidine by the end of surgery: Group S (n=35) - Sevoflurane and saline solution; Group SD (n=35) - Sevoflurane and dexmedetomidine 5 μg.kg-1; Group I (n=35) Isoflurane and saline; Group ID (n=35) - Isovoflurane and dexmedetomidine 5 μg.kg-1. Anesthesia was induced with 50% O2/ N2O and sevoflurane via a face mask. Propofol, alfentanil and neuromuscular blockade were used according to the anesthesiologist's choice for tracheal... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Carlos Augusto Araújo Valadão / Banca: André Escobar / Banca: Paulo Sergio Patto dos Santos / Resumo: A aplicação de fármacos anestésicos ou analgésicos por via espinhal tem sido empregado como adjuvante da anestesia geral inalatória com o intuito de ampliar analgesia visceral e/ou somática, intra e pós-operatória. Os antagonistas dos receptores N-metil-D-aspartato têm sido utilizados, na atualidade, para a prevenção da dor induzida por procedimentos cirúrgicos, porém não se sabe se a instituição dessa medida terapêutica, mormente por via subaracnóidea, pode ser deletéria para a homeostase de equinos mantidos sob anestesia com sevofluorano. Dez equinos hígidos (317±27Kg), sem raça definida, foram alocados em três grupos e submetidos a indução anestésica com 60 mg/Kg/IV de éter gliceril guaiacol; 0,1 mg/Kg de midazolam e 3mg/Kg de propofol. Os animais foram submetidos à anestesia inalatória com sevofluorano, cuja concentração expirada final foi mantida em 2,8%. Após a estabilização nesta concentração foi aplicado pela via subaracnóide, através de um cateter previamente implantado, um dos três tratamentos, NaCl 0,9% (grupo S), cetamina 0,5mg/Kg (grupo KS) ou cetamina 0,5 mg/Kg associado ao ifenprodil 0,015 mg/Kg (grupo Ki). Os momentos avaliados após aplicação foram, MB (avaliação basal), Mind (oito minutos após indução), M1.2 (concentração alveolar de 2,8%), Mtrat (2,5 minutos após o tratamento) e nos momentos M5 até M60 (5, 10, 15, 20, 25, 30, 45 e 60 minutos após o tratamento). Foram avaliados os parâmetros cardiorrespiratórios e hemogasométricos, assim como escores de indução e recuperação anestésica. Os dados obtidos de cada grupo, bem como entre os grupos, foram submetidos à análise de variância com repetições múltiplas, seguida do teste de Student-Newman-Keuls. Para os escores de indução e recuperação utilizou-se o teste de Kruskal-Wallis. Para todas as análises, considerou-se o nível de significância de 5% (p˂0,05) ... / Abstract: The application of anesthetic or analgesic drugs through the spinal via has been employed as an adjunct to inhalational anesthesia with the aim of increasing visceral and/or somatic, intra-and postsurgical analgesia. The antagonists of N-methyl-D-aspartate receptors have been currently used for the prevention of pain induced by surgical procedures, but it is unknown whether the use of such therapeutics, especially through subarachnoid space may be deleterious to the homeostasis of horses kept under anesthesia with sevoflurane. Ten healthy horses (317 ± 27 kg) with no defined breed, were allotted into three groups and subjected to anesthesia induction with 60 mg/kg/IV of guaiacol glyceryl ether, 0.1 mg/kg of midazolam and 3mg/Kg of propofol. Animals were subjected to inhalation anesthesia with sevoflurane, whose final expiratory concentration was maintained at 2.8%. After reaching this concentration it was applied by subarachnoid via through a previously implanted catheter one of the following treatments: 0.9% NaCl (S group), 0.5 mg ketamine/kg (KS group) or 0.5 mg ketamine/kg associated with ifenprodil 0.015 mg/ kg (Ki group). The moments of evaluation after application were: MB (baseline evaluation), Mind (eight minutes after induction), M1.2 (alveolar concentration of 2.8%), Mtrat (2.5 min after treatment) and at moments M5 to M60 (5, 10, 15, 20, 25, 30, 45 and 60 minutes after treatment ). Cardiorespiratory and blood gas parameters, as well as anesthetic induction and recovery scores were evaluated. Data obtained from each group and between groups were subjected to variance analysis with multiple repetitions, followed by Newman-Keuls Student test. For induction and recovery scores analyzes the Kruskal-Wallis test was used. For all analyzes a p˂0.05 was considered as statistically significant. As for anesthetic induction 17% ( n = 3) of all animals received a score of 3 (acceptable) and ... / Mestre

As punções venosas e arteriais são procedimentos potencialmente dolorosos, praticados com muita freqüência nas unidades de neonatologia, sem que algum cuidado para aliviar ou evitar a dor seja tomado. Essa situação é decorrente do fato de que, até recentemente, considerava-se o recém-nascido incapaz de sentir dor. Sabe-se, atualmente, que o neonato apresenta todas as estruturas anatômicas, funcionais e químicas para a percepção de estímulos nociceptivos, respondendo a eles com alterações fisicas, comportamentais e hormonais. Em determinadas situações clínicas, essas respostas à dor podem levar, inclusive, a um aumento da morbidade e da mortalidade. Vários estudos têm demostrado alterações significativas na saturação transcutânea de oxigênio da hemoglobina, especialmente diminuição, em recém-nascidos expostos a procedimentos potencialmente dolorosos. Objetivo: Avaliar o efeito da mistura eutética de lidocaína e prilocaína (EMLA) sobre a saturação transcutânea de oxigênio da hemoglobina como parâmetro para avaliação indireta da dor em punções venosas ou arteriais em recém-nascidos a termo (entre 37 e 41 semanas de idade gestacional), adequados para a idade gestacional (AIG), que necessitem coleta sangüínea (primeira coleta) entre 24 e 72 horas de vida Metodologia: Foi conduzido ensaio clínico randomizado com 20 recém-nascidos, a termo, AIG, entre 24 e 72 horas de vida, submetidos à coleta sangüínea. Após randomização, oito pacientes foram alocados no grupo tratado com EMLA e 12, que constituíram o grupo placebo. O anestésico foi aplicado e, 60 minutos após, procedeu-se à coleta sangüínea por punção venosa ou arterial; 120 minutos após a aplicação do EMLA, foi realizada uma segunda coleta. Na oportunidade de cada uma das coletas verificou-se, imediatamente antes e logo após, a saturação da hemoglobina, e uma série de variáveis consideradas também marcadores indiretos da dor. Essas variáveis incluíram: a freqüência cardíaca, a mímica facial por meio de escores de acordo com a Escala Visual Análoga (VAS) Para Avaliação Subjetiva Da Dor Em Crianças Pequenas, de Maunuskela e Korpela, cortisol e insulina. Na ocasião da primeira coleta, realizou-se igualmente a dosagem de metemoglobina. Resultados: Na primeira coleta, os grupos EMLA e placebo apresentaram reduções na SatHb entre os momentos pré e pós punção. As reduções percentuais foram de -1,86% (p = 0,0277) e -2,01% (p = 0,0844), respectivamente. No que se refere à segunda coleta, o grupo EMLA manteve uma redução percentual entre os momentos pré e pós punção de -1,64% (p = 0,3454), enquanto que o grupo placebo sofreu uma diminuição da SatHb de -3,51% (p = 0,0129). Houve, na segunda coleta, um decréscimo (p = 0,0069) na freqüência cardíaca nos pacientes do grupo placebo. A avaliação da mímica facial da primeira coleta, mostrou modificações no grupo EMLA (p = 0,0679) e no grupo placebo (p = 0,0431) antes e após a coleta. Na segunda, não houve diferenças significativas. Não houve diferença entre os niveis de metemoglobina entre os grupos, e não houve manifestações clínicas de metemoglobinemia no grupo de pacientes anestesiados. Igualmente, não houve diferenças significativas nos níveis de cortisol e insulina entre as coletas e nem em cada uma delas, dentro e entre os grupos. Conclusões: Pode-se inferir que o procedimento de coleta sangüínea por venopunção ou punção arterial no recém-nascido provoca alterações na SatHb. Considerando-se a SatHb como marcador indireto da dor, pode-se portanto, concluir que o procedimento é doloroso. O neonato reage ao estímulo também com alterações na freqüência cardíaca e talvez da mímica facial. Essas respostas podem, em princípio, ser diminuídas, com a aplicação preventiva do EMLA, sem risco aumentado de metemoglobinemia. Os resultados obtidos neste trabalho foram derivados de um estudo com n pequeno, sugerindo-se, portanto, necessários estudos mais aprofundados. / Arterial and venous punctures are procedures potentially painful, which are perforrned very frequently in neonatology units, without any care in arder to prevent or alleviate the pain. This situation is a consequence of the fact that, until recently, it was considered that newborn was incapable o f feeling pain. Nowadays, it is known that the neonate has ali chemical, functional and anatornic structures for perceiving nociceptive stimuli, reacting to them with physical, behavioural and horrnonal alterations. In certain clinicai situations, these reactions to pain can lead to an increase in morbidity and mortality. Many studies have shown variations m hemoglobin saturation, specially fali, m newborns exposed to potentially painful procedures.Objectives: Study the effect of the eutectic mixture of local anesthetics (EMLA) in the hemoglobin saturation as a marker o f pain in newborn. Methodology: A randornized clinicai assay was made with 20 newborns, adequate for gestacional age, within 24 and 72 hours of life, which were subjected to a blood examination. After randornization, eight patients were allocated to the group treated with EMLA and the other 12 were a placebo group. The anesthetic was apllied and thereafter 60 minutes blood was collected by arterial or venous puncture for a first time; two hours after the anesthetic apllication a second blood collection was made. In each of these collections hemoglobin saturation was measured (just before and just after the actual puncture), as well as some indirect "markers"of the pain. These "markers" were: heart frequency, facial mirnic scores accordingly to the Analagous Visual Scale (AVS) For Subjective Evaluation ofPain in lnfants, by Maunuskela e Korpela, and cortisol and insulin leveis. At the time o f the first collection, determination o f metheglobin was also made. Results: In the first collection, both the EMLA and the placebo group showed HbSat reductions if we compare the pre-puncture with the post-puncture status. The percentage of reductions were, respectively, of -1.86% (p = 0,0277) e -2,01% (p = 0,0844). At the time of the second puncture, the EMLA group still showed a reduction between the pre and post pucture status: -1 ,64% (p = 0,3454). However, the placebo group showed a decrease in SatHb o f -3,51% (p = 0,0 129). In the second collection, it occurred a decrease (p = 0,0069) in the heart rate of the control group. The evaluation o f the facial mirnic at the time o f the first collection showed changes in the EMLA group (p = 0,0679) as well as the placebo group (p = 0,0431 ); no changes were perceived in the second blood collection. No differences in the metheglobin leveis were found between the two groups; no clinicai manifestations of increased metheglobin were seen in the anesthetized patients. Besides, no significant differences in the leveis of cortisol and insulin were found in the collections. Conclusions: 1t can be said that blood collection, venous or arterial, can provoke changes in HbSat in newborns. I f HbSat is to be considered an indirect "marker"of pain, a vessel puncture will show to be painful. Newborns react to the pain stimulus with a increasing heart rrequency and, possibly, with alteration in the facial mirnic. These responses may be alleviated with a preventive dosage o f EMLA, without any risk o f higher metheglobin leveis in the blood. Definitive conclusions are to be waited, since the studied group is small; an additional research is welcome.

Orientador: Wilter Ricardo Russiano Vicente / Coorientador: Marcus Antonio Rossi Feliciano / Banca: Leandro Zuccolotto Crivellenti / Banca: Rafael Ricardo Huppes / Banca: Márcia Rita Fernandes Machado / Banca: Roberto Thiesen / Resumo: Considerando a escassa informação disponível para a espécie Cuniculus paca que permita a adequação de um protocolo anestésico seguro para a aspiração folicular laparoscópica (LOPU) e a monitorização consciente dos parâmetros fisiológicos nestes pacientes, propôs-se avaliar a eficácia, os efeitos cardiorrespiratórios e sobre os constituintes celulares e bioquímicos sanguíneos, da associação de cetamina e midazolam para a contenção química, isofluorano para a manutenção anestésica e tramadol ou metadona para o controle da dor pós-operatória em pacas hígidas de cativeiro submetidas à LOPU. Oito animais foram submetidos a três protocolos experimentais com intervalo de 15 dias recebendo aleatoriamente 0,5 mg/kg de metadona, 5 mg/kg de tramadol ou placebo no período anestésico. Após contenção física, foi aplicada por via intramuscular a associação de 0,5 mg/kg de midazolam e 25 mg/kg de cetamina para contenção farmacológica (CF). Posteriormente, realizou-se indução e manutenção anestésica com isofluorano. Realizou-se exame eletrocardiográfico, análise de gases arteriais, dos constituintes celulares sanguíneos e das concentrações de proteínas plasmáticas (PPT), creatinina, alanina aminotransferase, sódio, potássio, cloreto e cálcio ionizado, após CF e ao final do procedimento cirúrgico. Os parâmetros frequência cardíaca (FC), e respiratória (fR), temperatura retal (TR), saturação da oxihemoglobina (SpO2), pressão de CO2 ao final da expiração (PE'CO2), concentração de isofluorano exp... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Given the limited information available in Cuniculus Paca that allows suitability and safe anesthetic protocol for laparoscopic ovum pick up (LOPU) and conscious physiological parameters monitoring in these patients, it was proposed to evaluate efficacy, cardiorespiratory, hematology and biochemical effects of ketamine/midazolam association chemical restraint, isoflurane anesthesia and tramadol or methadone for postoperative pain control in healthy, captivity pacas submitted to LOPU. Eight animals subjected to three experimental protocols with 15 days interval randomly receiving methadone 0.5 mg/kg, tramadol 5 mg/kg or placebo postinduction. After physical restraint midazolam 0.5 mg/kg plus ketamine 25 mg/kg was applied intramuscularly for pharmacological restraint (MFR). Anesthesia was induced and maintained with isoflurane. The electrocardiographic parameters, blood gas analysis, blood cell counts, plasma protein (PPT), creatinine, alanine aminotransferase, sodium, potassium, chloride and ionized calcium concentrations, were evaluated after MFR and at end of surgical procedure. Heart (HR), and respiratory rate (fR), rectal temperature (TR), oxyhemoglobin saturation (SpO2), End tidal CO2 (PE'CO2), isoflurane expiratory concentration (PE'ISO) and mean arterial pressure (MAP) were monitored from MFR and at LOPU stages. Pain intensity was evaluated for 24 hours after LOPU by visual analogic scale (VAS). The results were compared between treatments, moments and periods by Friedm... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor