Orientador: Douglas Soares Galvão / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Fisica Gleb Wataghin / Made available in DSpace on 2018-08-09T13:13:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_RaimundoNonatoPereirada_M.pdf: 1961662 bytes, checksum: c76c13d8b6707d17ff50eb0c0fe25a21 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: A descoberta de tratamentos eficazes contra o câncer é um dos maiores desafios da ciência. No Brasil o câncer se tornou a segunda maior causa de morte. As estimativas para o ano de 2005 apontam que ocorrerão 467.440 casos novos de câncer. O investimento para o desenvolvimento de uma droga moderna é de U$850milhões e o tratamento com estas variam de U$4000 a U$17000 por mês. Estudos de relação atividade-estrutura (SAR) quantitativa têm um importante papel no design de drogas. Neste trabalho foi aplicado a Metodologia de Índices Eletrônicos (MIE) para estudar a correlação da atividade antineoplásica de 36 moléculas derivadas das carboquinonas. A MIE é baseada nos conceitos de densidade local de estado, da qual se extrai o índice D, e na diferença de energia dos estados de fronteira, índice h , obtidos por cálculo de mecânica quântica ab initio ou semi-empírico. Os cálculos foram efetuados utilizando o método PM3 (Parametric Method 3) disponível no pacote computacional MOPAC. Os resultados demonstram que a MIE consegue diferenciar com uma precisão de 92% os compostos mais ativos biologicamente. A Análise de Principal Componente (PCA), utilizando-se os parâmetros da MIE, resultou em 100% de acerto na diferenciação da atividade biológica, enquanto com o método de análise hierárquica de grupo (HCA) obteve-se padrão de agrupamento com 94% de acerto. Concluímos que o uso dos índices D e h pode ser uma eficaz ferramenta para estudos de relação atividade-estrutura qualitativa das carboquinonas e para o desenvolvimento e aprimoramento de novas drogas / Abstract: The discovery of efficient treatments against cancer is one of the great challenges of science. In Brazil the cancer became the second greatest cause of death. For the year 2005 467,440 new cases of cancer are expected. The investment for the development of a modern drug is about U$ 850 millions and the treatment with those drugs varies from U$ 4,000 to U$ 17,000 per month. Structure-Activity Relationship (SAR) studies play an important role in design of drugs. In this work the Methodology of Electronic Indices was applied (MEI) to the study of anticancer activity of 36 molecules derived from carboquinones. The MEI is based on the concepts of local density of states, from which the index D is extracted, and in the difference of energy of the frontier orbitals, which defines the other MEI parameter h. The geometrical and electronic aspects for the carboquinone set were obtained using the semi-empirical PM3 (Parametric Method 3) available in computational package MOPAC. Our results show that the MEI is able to classify (with an accuracy of 92%) active and inactive compounds. More standards statistical methods such Principal Component Analysis (PCA) and Hierarchic Cluster Analysis (HCA) were also used also producing results of identifying active/inactive molecules with high accuracy (100 and 94%, respectively). We conclude that the use of the MEI indices D and h can be an efficient tool for studies of qualitative SAR studies of carboquinones, as well as, to be used for the development and improvement of new drugs / Mestrado / Estrutura, Conformação e Estereoquimica / Mestre em Física

A enzima L-asparaginase (L-asparagina amino hidrolase, E.C. 3.5.1.1) é uma das drogas mais utilizadas no tratamento da leucemia linfoblástica aguda. A enzima catalisa a hidrólise do aminoácido asparagina em ácido aspártico e amônia. Algumas linhagens de células tumorais não são capazes de produzir asparagina, dependendo do aminoácido presente no plasma para a síntese proteica. A redução dos níveis plasmáticos de asparagina inibe a síntese de proteínas e depois a síntese de RNA e DNA das células leucêmicas levando-as a morte por apoptose. A cepa de Aspergillus terreus (PC-1.7.A) utilizada nesse trabalho foi isolada de solo e produziu altas concentrações de L-asparaginase. O objetivo do presente trabalho foi purificar, caracterizar, conjugar a enzima e avaliar sua atividade citotóxica em linhagens de células tumorais in vitro. Para a purificação da enzima foram utilizados métodos cromatográficos de interação por troca iônica (DEAE Sepharose) e por gel filtração em diferentes fluxos (Sephacryl S-200HR). A enzima pura foi conjugada com metóxi polietilenoglicol e manteve 93% da atividade inicial. A enzima presente no fluido da cultura dialisado e concentrado manteve sua atividade por até 90 dias a 5ºC. Composta por uma subunidade com massa molecular de 125 kDa a L-asparaginase purificada de A. terreus apresentou atividade catalítica ótima em pH 9,5 e 40ºC e foi estável nessa temperatura por pelo menos 120 minutos. A enzima pura e pura-conjugada apresentou valores de Km de 2,42 e 2,51 mmol/L e Vmax de 11,91 e 12,08 umol.min-1.mg-1, respectivamente. A enzima pura-conjugada perdeu metade de sua atividade em trinta minutos quando incubada com enzimas proteolíticas, enquanto que a enzima pura perdeu metade de sua atividade em cinco minutos sob as mesmas condições. A L-asparaginase pura na concentração de 200 ug/mL reduziu em 50% as células viáveis das linhagens tumorais HL-60 e RS4;11 nos tempos de incubação de 72 e 96 horas, respectivamente, sob as mesmas condições a enzima pura não apresentou atividade citotóxica contra a linhagem controle (PBMC). / The enzyme L-asparaginase (L-asparagin amino hydrolase, E.C. 3.5.1.1) is one of the most commonly used drugs in the treatment of acute lymphoblastic leukaemia. This enzyme catalyzes a hydrolysis of amino acid asparagine into aspartic acid and ammonia. Some tumour cell lines are unable to produce asparagine depending on the amino acid in plasma for protein synthesis. Reduced levels of plasma asparagine inhibit protein synthesis and later synthesis of RNA and DNA in leukemic cells causing them to die by apoptosis. The strain of Aspergillus terreus (PC-1.7.A) in this work was isolated from soil and produced high concentrations of L-asparaginase. The aim of this study was to purify, characterize, conjugate the enzyme and to evaluate its cytotoxic activity in tumour cell lines in vitro. Enzyme purification was achieved by applying chromatography methods of ion exchange (DEAE Sepharose) and gel filtration (Sephacryl S-200HR) at different flows. The pure enzyme was conjugated with methoxy polyethylene glycol and kept 93% of initial activity. The enzyme present in dialysed and concentrated culture fluid maintained its activity for up to 90 days at 5°C. Composed of a subunit with molecular mass of 125 kDa, L-asparaginase purified from A. terreus showed optimum catalytic activity at pH 9.5 and 40°C and was stable at this temperature for at least 120 minutes. The pure and pure-conjugated enzymes showed Km values of 2.42 and 2.51 mmol/L and Vmax of 11.91 and 12.08 umol.min-1.mg-1 respectively. The pure-conjugated enzyme lost half of its activity in thirty minutes when incubated with proteolytic enzymes, while pure enzyme lost half of its activity in five minutes under same conditions. Pure L-asparaginase at a concentration of 200 ug/mL reduced by 50% number a viable cells in tumour cell lines HL-60 and RS4;11 in incubation times of 72 and 96 hours, respectively. Under same conditions pure enzyme showed no cytotoxic activity against control cell line.

Orientador: Sonia Marta Moriguchi / Resumo: O câncer de mama é o tipo mais comum entre as mulheres no Brasil e no mundo, com 28% de novos casos a cada ano. O diagnóstico tardio pode identificar carcinoma de mama localmente avançado (CMLA) que necessita tratamento sistêmico quimioterápico pré-operatório que visam reduzir o tamanho do tumor e da carga tumoral. A quimiorresistência pode estar relacionada à expressão de glicoproteína P (GpP), que promove o efluxo celular da droga, diminuindo o tempo de permanência da droga na célula e, consequentemente a apoptose celular. O sestamibi-99mTc utilizado na realização da cintilografia de mamas (CM) é um substrato dessas proteínas, similar às drogas quimioterápicas, sendo o único método de imagem a representar o tempo de permanência dessa droga. O índice preditor da resposta quimioterápica por cintilografia tem sido utilizado para prever o tempo de permanência dessas drogas nessas células. O objetivo desse estudo foi verificar se o índice preditor de resposta quimioterápica neoadjuvante obtido por cintilografia de mamas com sestamibi-99mTc proposto por Alonso e cols. relacionou-se com resposta quimioterápica do estudo anatomopatológico da mama pós-cirurgia (AP), considerado padrão ouro, analisando-se os índices isolados: índice precoce (IP) e índice tardio (IT) e associados (IP+IT). Tratou-se de estudo transversal, observacional e descritivo, com coleta retrospectiva de dados de prontuários de portadores de CMLA atendidas nessa Instituição no período de 2012-2017, que foram subm... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Breast cancer is the most common cancer among women, both in Brazil and globally, with 28% of cases each year being new. Delayed diagnosis can identify locally advanced breast carcinoma (LABC), which requires preoperative systemic chemotherapy that aims to reduce the size and load of the tumor. The chemo-resistance may be related to expression of glycoprotein P (GpP) that promotes cellular efflux of the drug, diminishing not only its time within the cell but consequently cellular apoptosis. Sestamibi99mTc, utilized in performing scintimammography (SMM), is a substrate of these proteins, similar to chemotherapeutic drugs, being the only imaging method to represent the permanence time of this drug. The predictive index of chemotherapeutic response by SMM has been utilized to predict the permanence time of chemotherapeutic drugs into these cells. This study aimed to verify whether the predictive index of neoadjuvant chemotherapeutic response, obtained by SMM with sestamibi99mTc proposed by Alonso and colleagues, is related to the chemotherapeutic response, as shown by postoperative anatomopathological study of the breasts (AP), considered the gold standard, analyzing the isolated indices, early index (EI) and late index (LI), and associated index (EI+LI). This was a transversal, observational and descriptive study, with retrospective data collected from charts of patients who were carriers of LABC attended at this Institution in the period from 2012 to 2017, that were submitted ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

A enzima L-asparaginase (L-asparagina amino hidrolase, E.C. 3.5.1.1) é uma das drogas mais utilizadas no tratamento da leucemia linfoblástica aguda. A enzima catalisa a hidrólise do aminoácido asparagina em ácido aspártico e amônia. Algumas linhagens de células tumorais não são capazes de produzir asparagina, dependendo do aminoácido presente no plasma para a síntese proteica. A redução dos níveis plasmáticos de asparagina inibe a síntese de proteínas e depois a síntese de RNA e DNA das células leucêmicas levando-as a morte por apoptose. A cepa de Aspergillus terreus (PC-1.7.A) utilizada nesse trabalho foi isolada de solo e produziu altas concentrações de L-asparaginase. O objetivo do presente trabalho foi purificar, caracterizar, conjugar a enzima e avaliar sua atividade citotóxica em linhagens de células tumorais in vitro. Para a purificação da enzima foram utilizados métodos cromatográficos de interação por troca iônica (DEAE Sepharose) e por gel filtração em diferentes fluxos (Sephacryl S-200HR). A enzima pura foi conjugada com metóxi polietilenoglicol e manteve 93% da atividade inicial. A enzima presente no fluido da cultura dialisado e concentrado manteve sua atividade por até 90 dias a 5ºC. Composta por uma subunidade com massa molecular de 125 kDa a L-asparaginase purificada de A. terreus apresentou atividade catalítica ótima em pH 9,5 e 40ºC e foi estável nessa temperatura por pelo menos 120 minutos. A enzima pura e pura-conjugada apresentou valores de Km de 2,42 e 2,51 mmol/L e Vmax de 11,91 e 12,08 umol.min-1.mg-1, respectivamente. A enzima pura-conjugada perdeu metade de sua atividade em trinta minutos quando incubada com enzimas proteolíticas, enquanto que a enzima pura perdeu metade de sua atividade em cinco minutos sob as mesmas condições. A L-asparaginase pura na concentração de 200 ug/mL reduziu em 50% as células viáveis das linhagens tumorais HL-60 e RS4;11 nos tempos de incubação de 72 e 96 horas, respectivamente, sob as mesmas condições a enzima pura não apresentou atividade citotóxica contra a linhagem controle (PBMC). / The enzyme L-asparaginase (L-asparagin amino hydrolase, E.C. 3.5.1.1) is one of the most commonly used drugs in the treatment of acute lymphoblastic leukaemia. This enzyme catalyzes a hydrolysis of amino acid asparagine into aspartic acid and ammonia. Some tumour cell lines are unable to produce asparagine depending on the amino acid in plasma for protein synthesis. Reduced levels of plasma asparagine inhibit protein synthesis and later synthesis of RNA and DNA in leukemic cells causing them to die by apoptosis. The strain of Aspergillus terreus (PC-1.7.A) in this work was isolated from soil and produced high concentrations of L-asparaginase. The aim of this study was to purify, characterize, conjugate the enzyme and to evaluate its cytotoxic activity in tumour cell lines in vitro. Enzyme purification was achieved by applying chromatography methods of ion exchange (DEAE Sepharose) and gel filtration (Sephacryl S-200HR) at different flows. The pure enzyme was conjugated with methoxy polyethylene glycol and kept 93% of initial activity. The enzyme present in dialysed and concentrated culture fluid maintained its activity for up to 90 days at 5°C. Composed of a subunit with molecular mass of 125 kDa, L-asparaginase purified from A. terreus showed optimum catalytic activity at pH 9.5 and 40°C and was stable at this temperature for at least 120 minutes. The pure and pure-conjugated enzymes showed Km values of 2.42 and 2.51 mmol/L and Vmax of 11.91 and 12.08 umol.min-1.mg-1 respectively. The pure-conjugated enzyme lost half of its activity in thirty minutes when incubated with proteolytic enzymes, while pure enzyme lost half of its activity in five minutes under same conditions. Pure L-asparaginase at a concentration of 200 ug/mL reduced by 50% number a viable cells in tumour cell lines HL-60 and RS4;11 in incubation times of 72 and 96 hours, respectively. Under same conditions pure enzyme showed no cytotoxic activity against control cell line.

Introdução: A manipulação de medicamentos antineoplásicos em Serviços de Saúde expõem os profissionais aos riscos químicos desses agentes, assim é fundamental monitorar e prevenir a exposição ocupacional. A utilização de dispositivos de Segurança no preparo de medicamentos tem sido recomendada por diversos órgãos internacionais de boas práticas no manuseio de medicamentos citotóxicos. Objetivo: Comparar, através da técnica de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência com detector Ultravioleta (CLAE-UV), as taxas de contaminação de superfícies de trabalho, com a Gencitabina, utilizando Dispositivos de Segurança em Sistema Fechado em relação à técnica de preparo padrão com agulha. Métodos: A coleta de amostras foi realizada na farmácia de manipulação pela técnica de wipe test e posterior extração. As amostras foram analisadas com CLAE-UV, com leitura de detecção de 268 nm. Resultados: De um total de 303 amostras coletadas para análise da Gencitabina, 272 compararam a técnica com dispositivo de sistema fechado com a técnica padrão, apresentando percentuais de contaminação em quase 50% dos frascos coletados em cada técnica. Os resultados encontrados nos frascos, campo de preparo e seringas apresentaram média de quantidade de resíduos inferiores na técnica com dispositivos de segurança. Nos frascos intactos retirados da caixa original de Gencitabina, foram encontrados resíduos em 16,1%. Conclusões: A técnica utilizada foi adequada para identificar a presença de Gencitabina em materiais e Equipamentos de Proteção Individual – EPI na manipulação de medicamentos, demonstrando dessa forma o risco de exposição aos profissionais e a importância da utilização da do sistema fechado para diminuir os aerossóis e quantidades de resíduos eliminados durante a manipulação. / Introduction: Health professionals who handle antineoplastic agents are exposed to several chemical hazards. Therefore, their occupational exposure must be carefully monitored and prevented. The use of closed-system devices in drug preparation has been recommended by several international guidelines for the handling of cytotoxic drugs. Objective: To compare the contamination of work surfaces with gemcitabine following closed-system preparation versus standard needle techniques, using high-performance liquid chromatography-ultraviolet (HPLC-UV). Method: Wipe test samples were collected from a drug handling facility, then extracted and analyzed by HPLC-UV. Readings were taken at 268 nm. Resultados: Of the 303 samples collected, 31 were obtained from intact vials, while 272 were used to compare gemcitabine contamination levels following conventional versus closed-system preparation. Approximately 50% of samples obtained following each procedure tested positive for the contaminant. The amount of contamination on vials, sterile fields and syringes was lower when closed-system devices were used for drug manipulation. A total of 16.1% of the intact vials removed from their original packaging were also contaminated. Conclusion: The method used in the present study was effective in detecting gemcitabine in the devices and individual protective equipment involved in drug manipulation. These findings demonstrate the exposure risk of health professionals who handle these substances, and the importance of closed-system devices in reducing aerosol formation and contamination during handling.

Introdução: A manipulação de medicamentos antineoplásicos em Serviços de Saúde expõem os profissionais aos riscos químicos desses agentes, assim é fundamental monitorar e prevenir a exposição ocupacional. A utilização de dispositivos de Segurança no preparo de medicamentos tem sido recomendada por diversos órgãos internacionais de boas práticas no manuseio de medicamentos citotóxicos. Objetivo: Comparar, através da técnica de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência com detector Ultravioleta (CLAE-UV), as taxas de contaminação de superfícies de trabalho, com a Gencitabina, utilizando Dispositivos de Segurança em Sistema Fechado em relação à técnica de preparo padrão com agulha. Métodos: A coleta de amostras foi realizada na farmácia de manipulação pela técnica de wipe test e posterior extração. As amostras foram analisadas com CLAE-UV, com leitura de detecção de 268 nm. Resultados: De um total de 303 amostras coletadas para análise da Gencitabina, 272 compararam a técnica com dispositivo de sistema fechado com a técnica padrão, apresentando percentuais de contaminação em quase 50% dos frascos coletados em cada técnica. Os resultados encontrados nos frascos, campo de preparo e seringas apresentaram média de quantidade de resíduos inferiores na técnica com dispositivos de segurança. Nos frascos intactos retirados da caixa original de Gencitabina, foram encontrados resíduos em 16,1%. Conclusões: A técnica utilizada foi adequada para identificar a presença de Gencitabina em materiais e Equipamentos de Proteção Individual – EPI na manipulação de medicamentos, demonstrando dessa forma o risco de exposição aos profissionais e a importância da utilização da do sistema fechado para diminuir os aerossóis e quantidades de resíduos eliminados durante a manipulação. / Introduction: Health professionals who handle antineoplastic agents are exposed to several chemical hazards. Therefore, their occupational exposure must be carefully monitored and prevented. The use of closed-system devices in drug preparation has been recommended by several international guidelines for the handling of cytotoxic drugs. Objective: To compare the contamination of work surfaces with gemcitabine following closed-system preparation versus standard needle techniques, using high-performance liquid chromatography-ultraviolet (HPLC-UV). Method: Wipe test samples were collected from a drug handling facility, then extracted and analyzed by HPLC-UV. Readings were taken at 268 nm. Resultados: Of the 303 samples collected, 31 were obtained from intact vials, while 272 were used to compare gemcitabine contamination levels following conventional versus closed-system preparation. Approximately 50% of samples obtained following each procedure tested positive for the contaminant. The amount of contamination on vials, sterile fields and syringes was lower when closed-system devices were used for drug manipulation. A total of 16.1% of the intact vials removed from their original packaging were also contaminated. Conclusion: The method used in the present study was effective in detecting gemcitabine in the devices and individual protective equipment involved in drug manipulation. These findings demonstrate the exposure risk of health professionals who handle these substances, and the importance of closed-system devices in reducing aerosol formation and contamination during handling.

Introdução: A manipulação de medicamentos antineoplásicos em Serviços de Saúde expõem os profissionais aos riscos químicos desses agentes, assim é fundamental monitorar e prevenir a exposição ocupacional. A utilização de dispositivos de Segurança no preparo de medicamentos tem sido recomendada por diversos órgãos internacionais de boas práticas no manuseio de medicamentos citotóxicos. Objetivo: Comparar, através da técnica de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência com detector Ultravioleta (CLAE-UV), as taxas de contaminação de superfícies de trabalho, com a Gencitabina, utilizando Dispositivos de Segurança em Sistema Fechado em relação à técnica de preparo padrão com agulha. Métodos: A coleta de amostras foi realizada na farmácia de manipulação pela técnica de wipe test e posterior extração. As amostras foram analisadas com CLAE-UV, com leitura de detecção de 268 nm. Resultados: De um total de 303 amostras coletadas para análise da Gencitabina, 272 compararam a técnica com dispositivo de sistema fechado com a técnica padrão, apresentando percentuais de contaminação em quase 50% dos frascos coletados em cada técnica. Os resultados encontrados nos frascos, campo de preparo e seringas apresentaram média de quantidade de resíduos inferiores na técnica com dispositivos de segurança. Nos frascos intactos retirados da caixa original de Gencitabina, foram encontrados resíduos em 16,1%. Conclusões: A técnica utilizada foi adequada para identificar a presença de Gencitabina em materiais e Equipamentos de Proteção Individual – EPI na manipulação de medicamentos, demonstrando dessa forma o risco de exposição aos profissionais e a importância da utilização da do sistema fechado para diminuir os aerossóis e quantidades de resíduos eliminados durante a manipulação. / Introduction: Health professionals who handle antineoplastic agents are exposed to several chemical hazards. Therefore, their occupational exposure must be carefully monitored and prevented. The use of closed-system devices in drug preparation has been recommended by several international guidelines for the handling of cytotoxic drugs. Objective: To compare the contamination of work surfaces with gemcitabine following closed-system preparation versus standard needle techniques, using high-performance liquid chromatography-ultraviolet (HPLC-UV). Method: Wipe test samples were collected from a drug handling facility, then extracted and analyzed by HPLC-UV. Readings were taken at 268 nm. Resultados: Of the 303 samples collected, 31 were obtained from intact vials, while 272 were used to compare gemcitabine contamination levels following conventional versus closed-system preparation. Approximately 50% of samples obtained following each procedure tested positive for the contaminant. The amount of contamination on vials, sterile fields and syringes was lower when closed-system devices were used for drug manipulation. A total of 16.1% of the intact vials removed from their original packaging were also contaminated. Conclusion: The method used in the present study was effective in detecting gemcitabine in the devices and individual protective equipment involved in drug manipulation. These findings demonstrate the exposure risk of health professionals who handle these substances, and the importance of closed-system devices in reducing aerosol formation and contamination during handling.

Orientadores: Pedro Paulo Corbi, André Luiz Barboza Formiga / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química / Made available in DSpace on 2018-08-24T12:00:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Abbehausen_Camilla_D.pdf: 19393479 bytes, checksum: 3e6aaec4c411ad2e24a5f26226d19220 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Complexos metálicos inéditos de paládio, platina, ouro e prata com diferentes classes de ligantes foram desenvolvidos. Dentre os ligantes selecionados estão a L-aliina (ali) e a N-acetil-L-cisteína (nac) que compreendem a classe dos aminoácidos, a 2-mercaptotiazolina (mtz), dentro da classe das tiazolidinas, a sulfadoxina (sfx), representante da classe das sulfonamidas, e ligantes N-heterociclos, piridino derivados com diferentes valores de pKa. Complexos de Pd(II) com L-aliina ([Pd(C6H11NO3S)2]), Ag(I) com N-acetil-L-cisteína ([Ag(C5H9NO3S)]), Ag(I) com sulfadoxina ([Ag(C12H13N4O4S)]), Au(I) com 2-mercaptotiazolina ([Au(CN)(C3H5NS2)]) e uma série de complexos trifenilfosfinoouro(I) com ligantes N-heterociclos ([Au(PPh3)L]+) foram sintetizados e caracterizados por um conjunto de análises químicas e espectroscópicas. Estudos in vitro das sua atividades antibacterianas e antitumorais foram também reali-zados. Atividades antibacterianas e antitumorais significativas foram encontradas para o complexo de Pd(II) com ali e o DNA se mostrou um alvo provável. O complexo Au(I) com mtz apresentou atividade antitumoral e antibacteriana bastante expressiva e uma investigação preliminar de seus mecanismos de ação também demonstrou que o DNA não parece ser o alvo destes compostos nas células. Os complexos de Ag(I) com nac e sfx apresentaram atividades antibacterianas significativas sobre cepas Gram-positivas e Gram-negativas. Os ligantes N-heterociclos 4-picolina (pic), 2-amino-4-picolina (NH2pic) e dimetilaminopriridina (DMAP) possuem valores de pKa crescentes, e foram selecionados para investigar o efeito do pKa na atividade biológica de complexos trife-nilfosfinoouro(I) do tipo [Au(PPh3)L]+, onde L = N-heterocíclico. Esta investigação foi realizada por avaliações in vitro de suas atividades antitumorais, além de estudos do acúmulo celular, do bloqueio do ciclo celular e por interações com biomoléculas como o DNA e proteínas dedos de zinco (zinc fingers, ZF). A atividade antitumoral foi expressiva e os estudos de suas interações com os ZF mostraram que a inibição pode ser modulada com a variação do tipo de proteína e do ligante N-heterociclo selecionado / Abstract: Novel palladium, platinum, gold and silver complexes with different classes of ligands were designed. The selected ligands were L-alliin (ali) and N-acetyl-L-cysteine (nac) which are aminoacids, 2-mercaptothiazoline (mtz), which belongs to the class of thiazolidines, sulfadoxine that represents the class of sulfonamides and N-heterocyclic pyridine derivatives, with different values of pKa. Complexes of Pd(II) with L-alliin ([Pd(C6H11NO3S)2]), Ag(I) with N-acetyl-L-cysteine ([Ag(C5H9NO3S)]), Ag(I) with sulfa-doxine ([Ag(C12H13N4O4S)]), Au(I) with 2-mercaptotiazoline [(Au(CN)(C3H5NS2)]) and a series of complexes of triphenylphosphinegold(I) with N-heterocyclic ligands ([Au(PPh3)L]+) were synthesized and characterized by a set of chemical and spectroscopic analyses. Antibacterial and antitumor activities in vitro were also studied. Significant antibacterial and antitumor activities were found for Pd(II) with ali, and the DNA is the probable biological target. The Au(I) with mtz complex presented noteworthy antitumor and antibacterial activities, and preliminary investigations of its biological mechanism showed that, the DNA is probable not a target of this complex in the cells. The silver complexes with nac and sfx presented significant antibacterial activities. The series of N-heterocyclic ligands 4-picoline (pic), 2-amino-4-picoline (NH2pic) and dimethylaminopyridine (DMAP) shows crescent pKa values and they were selected to investigate the pKa effect in the biological activity of the complexes triphenylphosphinegold(I) [Au(PPh3)L]+, which L = N-heterocyclic. This investigation was performed by evaluation of its antitumor activities in vitro, and also by studies of cell uptake, cell cycle arrest and by interactions with biomolecules as DNA and zinc finger proteins (ZF). The antitumor activity was expressive and the studies with ZF showed that the inhibition is dependent of the kind of protein and of the N-heterocyclic ligand / Doutorado / Quimica Inorganica / Doutora em Ciências

Made available in DSpace on 2014-07-29T16:11:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Iara.pdf: 1398731 bytes, checksum: 09725a515b6fb603a60d85a3604b669e (MD5) Previous issue date: 2008-03-11 / Synadenium umbellatum Pax is a vegetable belonging to Euphorbiaceae, popularly known as cola-nota , milagrosa , and cancerola , is empirically used as a natural remedy for fighting cancer. In this study we assessed the antitumoral and antiangiogenic activity in vitro and in vivo of ethanolic crude extract and hexanic and chloroformic fractions of S. umbellatum. Citotoxicity assessment tests in vitro were carried out through MTT reduction and Trypan blue exclusion methods, by using Ehrlich ascitic tumor cells and K-562 lineage. Antitumoral and antiangiogenic activity in vivo essays were carried out through Ehrlich ascitic tumor experimental model in Swiss mice. Ethanolic crude extract was tested in 5, 10 and 25 mg/kg/day doses, whereas chloroformic fraction was tested in 1.2; 2.3 and 5.8 mg/kg/day doses, and hexanic fraction in 0.4; 0.8; and 1.9 mg/kg/day doses, for 10 days. The results showed concentration-dependent citotoxic activity, presenting through MTT method the inhibitory concentrations of 50% (Cl 50) 0.4, 0.1, and 0.08 mg/ml for ethanolic crude extract, chloroformic and hexanic fractions, respectively. And in the Trypan blue exclusion test, cell inhibition was 75%, 68%, and 80%, and 95%, 58%, and 64% for Ehrlich ascitic tumor cells and K-562 lineage, respectively. Ethanolic crude extract in the 25mg/kg/day dose increased the animals survival rate, parallely with the reduction of the amount of tumoral cells, beyond present activity on the tumor angiogenesis, and reduce vascular endothelial growth factor levels. Chloroformic and hexanic fractions, in in vivo essays, did not present significant outcomes. Thus, can conclude in the condition this study, that S. umbellatum shows antitumoral and antiangiogenic activity / Synadenium umbellatum Pax é uma planta pertencente à família Euphorbiaceae, conhecida popularmente como cola-nota , milagrosa e cancerola . É usado empiricamente como remédio natural para o combate ao câncer. Neste trabalho avaliou-se a atividade antitumoral e antiangiogênica in vitro e in vivo do extrato bruto etanólico e das frações clorofórmica e hexânica de S. umbellatum. Testes in vitro de avaliação de citotoxicidade foram realizados, usando os métodos de redução do MTT e de exclusão do azul de Tripano, utililizando células do tumor ascítico de Ehrlich e da linhagem K-562. Ensaios in vivo de atividade antitumoral e antiangiogênica foram realizados usando o modelo experimental do tumor ascítico de Ehrlich, em camundongos Swiss. O extrato bruto etanólico foi testado nas doses 5, 10 e 25 mg/kg/dia, enquanto a fração clorofórmica foi testada nas doses 1,2; 2,3 e 5,8 mg/kg/dia e a fração hexânica nas doses de 0,4; 0,8 e 1,9 mg/kg/dia, por 10 dias. Os resultados obtidos mostraram atividade citotóxica de forma concentraçãodependente, apresentando pelo método de MTT as concentrações inibitórias 50% (CI50) 0,4; 0,1 e 0,08 mg/ml para o extrato bruto etanólico, fração clorofórmica e fração hexânica, respectivamente. Já no teste de exclusão do azul de Tripano, a inibição celular foi de 75, 68 e 80% e 95, 58 e 64% para as células do tumor ascítico de Erlich e linhagem K-562, respectivamente. O extrato bruto etanólico na dose de 25 mg/kg/dia aumentou a sobrevida dos animais paralelamente com a redução do número de células tumorais, além de apresentar atividade sobre a angiogênese do tumor e reduzir os níveis de fator de crescimento endotelial vascular. As frações clorofórmica e hexânica, nos ensaios in vivo, não apresentaram resultados significativos. Assim, pode-se concluir nas condições deste estudo, que o S. umbellatum apresenta atividade antitumoral e antiangiogênica