Submitted by Cláudia Bueno (claudiamoura18@gmail.com) on 2016-06-02T20:29:26Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Allana Souza Pereira - 2015.pdf: 1763326 bytes, checksum: 42ca3d39923194187444a08c3a9a330c (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-06-03T12:46:29Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Allana Souza Pereira - 2015.pdf: 1763326 bytes, checksum: 42ca3d39923194187444a08c3a9a330c (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-03T12:46:29Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Allana Souza Pereira - 2015.pdf: 1763326 bytes, checksum: 42ca3d39923194187444a08c3a9a330c (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-11-13 / The use of plants is a bequest from popular culture and perpetuated from generation to the present day, the population uses plants with a possible activity in order to treat several infectious and metabolic diseases and it is dated since the Antiquity. The use of plants and natural products has been replaced by the use of synthetic sybstances through the years, but the use of natural products is returning daily with a use of plants in the form of teas and potions especially among the population with less access to terapeutic wherewithal. The Synadenium umbellatum is used in Brazil by the by the possible antitumor, antiinflammatory, antimicrobial, antiviral and antiparasitic activities from your latex. There are few studies to investigate the possible bioactivity from this plant, and no studies have investigate its compounds. The present study performed analysis by chromatographic methods in order to elucidate the composition of the S. umbellatum latex, by dividing it into Ethyl Acetate, Ethanolic, Chloroform and Hexanic fractions and evaluating the potential antiparasitic activity of this fractions in promastigotes and amastigotes of Leishmania amazonensis, and its interference the release of Nitric Oxide by infected macrophages infected in vitro. The latex was collected and referred to lyophilization to obtain drying and stabilization from the products to avoid enzymatic degradation. The lyophilized material was fractionated based on their polarity, obtaining the Ethyl Acetate, Etanolic, Chotoform and Hexanic fractions. The polar fractions weres analyzed by High Performance Liquid Chromatography and the apolar fractions were analyzed by Gas Chromatography with Mass Spectrometry. The chromatographic analyzes analyzed by software and compared to the available literature demonstrated unpublished profiles of the four fractions, suggesting the presence of novel compounds. In analyzing the antileishmanicidal activity, it was observed a ability in reduces the leishmanial’s viability at 48 hours at the 250; 125; 62.5; 31.25; 15.62; and 7,81μg / mL concentrations, standing out the leishmanicidal activity of the Ethyl Acetate fraction. When evaluating the leishmanicidal activity in amastigotes, only the polar fraction Ethyl Acetate showed antileishmanial activity at 250 and 125 μg/ml concentration, suggesting that Ethanol, Chloroform and Hexane fractions are not able to permeate into the macrophages. The Ethyl Acetate fraction activity is independent of NO’s release from infected macrophages, suggesting that it is ROS release’s dependent. In conclusion, the antiparasitic activity credited to S. umbellatum latex is from compounds presents in the polar fraction Ethyl Acetate. / O uso de plantas com possível bioatividade para tratamento ou cura de enfermidades metabólicas e infecciosas é datado desde a Antiguidade de modo que a cultura do uso de produtos naturais a fim de tratar doenças e/ou sintomas perpetuou dentre gerações até os dias atuais. Embora o uso de produtos naturais tenha sido substituído pelo uso de substâncias sintéticas, a cultura popular disseminou-se e o uso de plantas em forma de garrafadas ou chás está presente na atualidade principalmente dentre a população com menor acesso aos recursos terapêuticos. Dentre as plantas utilizadas no Brasil, destaca-se o uso do látex da planta Synadenium umbellatum pelas possíveis atividades antitumoral, antiinflamatória, antimicrobiana, antiviral e antiparasitária. Atualmente, há poucos estudos sobre este espécime, e apenas as partes aéreas são utilizadas como objeto de estudo, porém o uso popular é realizado com o látex exsudado do caule da planta. Esta pesquisa analisou por métodos cromatográficos a composição do látex da planta S. umbellatum, fracionando-o em frações Acetato de Etila, Etanólica, Clorofórmica e Hexânica e avaliando a possível atividade antiparasitária das frações em promastígotas e amastígotas de Leishmania amazonensis, bem como sua interferência na liberação de NO por macrófagos infectados in vitro. O látex foi liofilizado para estabilização e secagem, evitando degradações enzimáticas e oxidação, e fracionado. A frações Acetato de Etila e Etanólica foram analisadas pela Cromatografia Líquida de Alta Eficiência, enquanto as frações Clorofórmica e Hexânica foram analisadas por Cromatografia Gasosa Acoplada à Espectrometria de Massas. As análises cromatográficas foram analisadas por softwares e comparadas à bibliografia disponível e demonstraram perfis inéditos das quatro frações, sugerindo a presença de compostos inéditos. A análise de atividade leishmanicida em 48h revelou a capacidade de as quatro frações agirem de maneira tóxica nas concentrações de 250; 125; 62,5; 31,25; 15,62; e 7,81μg/mL, onde destacou-se a atividade leishmanicida da fração Acetato de Etila. Na análise de atividade leishmanicida sobre amastígotas, apenas a fração Acetato de Etila demonstrou atividade leishmanicida nas concentrações de 250 e 125μg/mL, sugerindo que as frações Etanólica, Clorofórmica e Hexânica não são capazes de adentrar aos macrófagos. A atividade da fração Acetato de Etila é independente da liberação de NO, sugerindo que seja dependente de mecanismos de liberação de ROS. Conclui-se que a atividade antiparasitária creditada ao látex da planta S.umbellatum seja de compostos inéditos presentes na fração Acetato de Etila.

Made available in DSpace on 2014-07-29T16:11:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Iara.pdf: 1398731 bytes, checksum: 09725a515b6fb603a60d85a3604b669e (MD5) Previous issue date: 2008-03-11 / Synadenium umbellatum Pax is a vegetable belonging to Euphorbiaceae, popularly known as cola-nota , milagrosa , and cancerola , is empirically used as a natural remedy for fighting cancer. In this study we assessed the antitumoral and antiangiogenic activity in vitro and in vivo of ethanolic crude extract and hexanic and chloroformic fractions of S. umbellatum. Citotoxicity assessment tests in vitro were carried out through MTT reduction and Trypan blue exclusion methods, by using Ehrlich ascitic tumor cells and K-562 lineage. Antitumoral and antiangiogenic activity in vivo essays were carried out through Ehrlich ascitic tumor experimental model in Swiss mice. Ethanolic crude extract was tested in 5, 10 and 25 mg/kg/day doses, whereas chloroformic fraction was tested in 1.2; 2.3 and 5.8 mg/kg/day doses, and hexanic fraction in 0.4; 0.8; and 1.9 mg/kg/day doses, for 10 days. The results showed concentration-dependent citotoxic activity, presenting through MTT method the inhibitory concentrations of 50% (Cl 50) 0.4, 0.1, and 0.08 mg/ml for ethanolic crude extract, chloroformic and hexanic fractions, respectively. And in the Trypan blue exclusion test, cell inhibition was 75%, 68%, and 80%, and 95%, 58%, and 64% for Ehrlich ascitic tumor cells and K-562 lineage, respectively. Ethanolic crude extract in the 25mg/kg/day dose increased the animals survival rate, parallely with the reduction of the amount of tumoral cells, beyond present activity on the tumor angiogenesis, and reduce vascular endothelial growth factor levels. Chloroformic and hexanic fractions, in in vivo essays, did not present significant outcomes. Thus, can conclude in the condition this study, that S. umbellatum shows antitumoral and antiangiogenic activity / Synadenium umbellatum Pax é uma planta pertencente à família Euphorbiaceae, conhecida popularmente como cola-nota , milagrosa e cancerola . É usado empiricamente como remédio natural para o combate ao câncer. Neste trabalho avaliou-se a atividade antitumoral e antiangiogênica in vitro e in vivo do extrato bruto etanólico e das frações clorofórmica e hexânica de S. umbellatum. Testes in vitro de avaliação de citotoxicidade foram realizados, usando os métodos de redução do MTT e de exclusão do azul de Tripano, utililizando células do tumor ascítico de Ehrlich e da linhagem K-562. Ensaios in vivo de atividade antitumoral e antiangiogênica foram realizados usando o modelo experimental do tumor ascítico de Ehrlich, em camundongos Swiss. O extrato bruto etanólico foi testado nas doses 5, 10 e 25 mg/kg/dia, enquanto a fração clorofórmica foi testada nas doses 1,2; 2,3 e 5,8 mg/kg/dia e a fração hexânica nas doses de 0,4; 0,8 e 1,9 mg/kg/dia, por 10 dias. Os resultados obtidos mostraram atividade citotóxica de forma concentraçãodependente, apresentando pelo método de MTT as concentrações inibitórias 50% (CI50) 0,4; 0,1 e 0,08 mg/ml para o extrato bruto etanólico, fração clorofórmica e fração hexânica, respectivamente. Já no teste de exclusão do azul de Tripano, a inibição celular foi de 75, 68 e 80% e 95, 58 e 64% para as células do tumor ascítico de Erlich e linhagem K-562, respectivamente. O extrato bruto etanólico na dose de 25 mg/kg/dia aumentou a sobrevida dos animais paralelamente com a redução do número de células tumorais, além de apresentar atividade sobre a angiogênese do tumor e reduzir os níveis de fator de crescimento endotelial vascular. As frações clorofórmica e hexânica, nos ensaios in vivo, não apresentaram resultados significativos. Assim, pode-se concluir nas condições deste estudo, que o S. umbellatum apresenta atividade antitumoral e antiangiogênica

Made available in DSpace on 2014-07-29T16:11:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 mariana mota.pdf: 5250493 bytes, checksum: f500835835d88733c77f12bd10fa8a80 (MD5) Previous issue date: 2010-03-03 / In search of new antineoplasic agents natural products have played an important role, given that about 40% of available medicines in current treatments have been developed from natural sources, 25% approximately of plants. Synadenium umbellatum belongs to Euphorbiaceae family and is popularly known as "cola-nota", "avelós," "milagrosa", "cancerola", and the latex is empirically used in Brazil for the treatment of cancer. Preliminary studies have shown that the crude extract of the leaves of S. umbellatum has significant antitumor and antiangiogenic activity in vivo. In this study, we investigated the cytotoxicity and the mechanisms of apoptosis induction of S. umbellatum in Ehrlich ascitic tumor (EAT) cells, and the myelotoxic potential of this plant. The cytotoxicity studies were carried out by trypan blue exclusion and reduction of tetrazolium (MTT) tests. The mechanisms of apoptosis induction were investigated by light and fluorescence microscopy, immunocytochemistry and flow cytometry. Investigation of the myelotoxic potential was performed by clonogenic assay of colony forming units of granulocyte-macrophage (CFU-GM). The data were analyzed by analysis of variance (ANOVA) and a posteriori Tukey test (myelotoxicity) and by t test for all other assays. The means were considered statistically significant when P < 0.05. S. umbellatum was cytotoxic to EAT cells and the morphological analysis of these cells indicated that the plant extract treatment induced cell death by apoptosis. Apoptosis was also observed by increase on reactive oxygen species generation and in the concentration of intracellular Ca2+, alterations in mitochondrial membrane potential, phosphatydylserine externalization and activation of caspases 3, 8, and 9. S. umbellatum presented myelotoxicity to normal bone marrow cells in a concentrationdependent fashion. However, this toxicity was 8-fold lower than to tumor cells. The presented data showed that S. umbellatum had cytotoxic activity to EAT cells and induced these cells to apoptosis. / Na busca de novos agentes antineoplásicos os produtos de origem natural têm desempenhado um papel de destaque, uma vez que cerca de 40% dos medicamentos disponíveis na terapêutica atual foram desenvolvidos de fontes naturais, sendo 25%, aproximadamente, de plantas. Synadenium umbellatum pertence à família Euphorbiaceae e é conhecido popularmente como cola-nota , avelós , milagrosa , cancerola , sendo o látex empiricamente utilizado no Brasil para o tratamento do câncer. Estudos preliminares demonstraram que o extrato bruto das folhas de S. umbellatum possui importante atividade antitumoral e antiangiogênica in vivo. Neste trabalho foram investigados a citotoxicidade e os mecanismos de indução de apoptose de S. umbellatum sobre células do Tumor Ascítico de Ehrlich (TAE), bem como o potencial mielotóxico da planta. Os estudos de citotoxicidade foram realizados por meio dos ensaios de exclusão do azul de tripano e redução do tetrazolium (MTT). Os mecanismos de indução de apoptose celular foram investigados por microscopia de luz e de fluorescência, imunocitoquímica e citometria de fluxo e a investigação do potencial mielotóxico foi feita por ensaio clonogênico de unidades formadoras de colônias de granulócitos e macrófagos (CFU-GM). Os dados foram analisados por Análise de Variância (ANOVA) e teste a posteriori de Tukey (mielotoxicidade) e teste de t para os demais ensaios. As médias foram consideradas estatisticamente significativas quando P < 0,05. S. umbellatum foi citotóxico para as células do TAE e a análise morfológica destas células indicou que o tratamento com o extrato da planta induziu morte celular por apoptose. A apoptose foi constatada também pelo aumento na geração de espécies de oxigênio reativas e da concentração de Ca2+ intracelular, pela alteração no potencial de membrana mitocondrial, pela externalização da fosfatidilserina e pela ativação das caspases 3, 8 e 9. Os dados obtidos permitiram concluir que S. umbellatum apresentou mielotoxicidade para células normais de medula óssea de forma concentraçãodependente. Porém, essa toxicidade foi 8 vezes menor que para as células tumorais. A partir da análise dos resultados foi possível concluir que S. umbellatum apresenta atividade citotóxica e indutora de apoptose em células de TAE.

Made available in DSpace on 2014-07-29T16:11:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Flaubertt 1iniciais.pdf: 86457 bytes, checksum: 527b584507a695284399e78f10a55608 (MD5) Previous issue date: 2008-03-12 / O uso de plantas medicinais tem sido muito significativo nos últimos anos, sendo incentivado pela Organização Mundial de Saúde (OMS). Synadenium umbellatum Pax, Euphorbiacea (vulgo cola-nota, cancerola, milagrosa) tem o látex usado empiricamente como anti-tumoral e antiinflamatório. Por existir espécies tóxicas nesta família e visando à segurança no uso de extratos vegetais, tal estudo avaliou a toxicidade pré-clinica do látex e do extrato etanólico das folhas (EEF) de S. umbellatum, por via oral, em ratas Wistar. O estudo seguiu diretrizes da OECD (Organisation for Economic Cooperation and Development) para teste de toxicidade aguda (Guideline 423) e de toxicidade subaguda (Guideline 407). Na toxicidade aguda do látex e do EEF, não se observou, na dose de 2000 mg/kg, alterações fisiológicas e comportamentais, e nem a morte dos animais. No entanto, o látex ocasionou congestão e infiltrado leucocitário nos rins, fígado e pulmões, efeitos não observados com o EEF. Na toxicidade subaguda, doses de 50, 100 e 200 mg/kg de EEF não produziram alterações dose-dependentes significativas nos parâmetros laboratoriais e nem alterações fisiológicas, macroscópicas e histopatológicas dos órgãos. O EEF da S. umbellatum é praticamente atóxico em exposição aguda, já o látex pode ocasionar alterações histopatológicas no fígado e pulmões. O uso crônico da planta S. umbellatium merece mais estudos.