Orientadores : Ricardo Sadir e Waldemiro Sgarbieri / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-14T03:37:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Balseca_EduardoRoman_M.pdf: 3722827 bytes, checksum: d8c9cbc57624cc4a97814a71a036c657 (MD5) Previous issue date: 1972 / Resumo: A presença da biotina, vitamina do complexo B, em correntes a quânticas e a dificuldade de obter biotina com atividades biológicas pela síntese química, motivaram a busca de novos métodos. Atualmente se obtém biotina por fermentação, aproveitando a faculdade de biossíntese do Esporoboromyces. Nesta investigação bibliográfica se analisa a possibilidade de produzir biotina em lagoas facultativos que recebem os resíduos de indústrias de batatas que são estabilizados por oxidação biológica e utilizados como meios nutrientes. O grupo E. Coli, e em especial Aerobacter aerogenes, tem a faculdade de sintetizar biotina. Nesse processo estão associadas às algas (Chlorella vulgaris) responsáveis pela fotossíntese o as bactérias (Tiocapsa floridana) que consomem o armazenam biotina e, além disso, permitem o desenvolvimento das algas. O tratamento é feito principalmente em lagoas facultativas em que se desenvolvem organismos tanto aeróbios e anaeróbios. Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital. / Abstract: The presence of biotin in lakes, rivers and sea and the difficulty in obtaining biologically active biotin by chemical synthesis motivated the search for new methods of synthesis. At present biotin can be obtained by fermentation with Esporoboromyces. In this bibliographic investigation the possibility of production of biotin in facultative lagoons receiving potatoes industrial waste is considered. The wastes are first stabilized by oxidation and then fermented by various microorganisms with production of biotin and other vitamins of the B complex. The Escherichia Coli group and specially Aerobacter aerogenes produce biotin and in this process they arc in association with the alga Chlorella vulgaris and the purple sulfur bacterium Tiocapsa floridana that stores most of the vitamin (biotin) produced in their cells. Note: The complete abstract is available with the full electronic document. / Mestrado / Mestre em Tecnologia de Alimentos

Orientador: Vanderlei Peres Canhos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-16T20:15:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_Neuselyda_M.pdf: 4891090 bytes, checksum: 6bd92a8c05afc48a43b0accf24b77b8a (MD5) Previous issue date: 1988 / Resumo: Amostras de caldo de cana clarificado, pasteurizado e pré-resfriado foram coletadas na entrada e saída de uma torre de resfriamento (Modelo PV/INS 155 - Alpina S/A Ind.e Comércio) da Usina MODELO de Piracicaba - SP, no final da safra de cana de 1985. Contagens de aeróbios em placas evidenciaram uma significativa variação no número de contaminantes do caldo durante a passagem pela torre, com elevações médias de 33 vezes nas contagens em PCA e 18 vezes nas contagens em MRS, acompanhadas de um decréscimo nos valores de pH das amostras (média de 0,35). Da população de contaminantes foram selecionadas 217 colônias, caracterizadas utilizando-se o método de replicação em placas e tubos. A microbiota do caldo mostrou-se predominantemente bacteriana (88%) e Gram positiva (87%), sendo Lactobacillus o contaminante mais frequente (38%), seguido de cepas pertencentes à família Micrococcaceae (23%), aos gêneros Leuconostoc 12%) e Bacillus (3%) e à família Enterobacteriaceae (1%). As cepas de Lactobacillus foram classificadas como L. ferroentum (33%), L.confusus (18%), L.viridescens (11%) e L. plantarum (2%). As dentais ficaram com a identidade provável entre L. fermentutt/L. reuteri (15%), L.brevis/L.buchneri (4%) L. fermentum/L.reuteri/L.brevis/L.buchneri (7%) e 10% não foram identificadas. As cepas de Leuconostoc foram classificadas como L. senteroides sbsp.mesenteroids (50%), L.paramesenteroides (27%) e L.mesenteroides subsp.dextranicum (23%). Foi observado que a passagem do caldo pela torre de resfriamento provocou uma elevação significativa no numero de cepas de Leuconostoc nas amostras (46%) / Abstract: Samples of clarified, pasteurized and pre-cooled sugar cane Juice were collected at the entry and outlet of a cooling tower (Model PV/INS 155 - Alpina S/A Ind.e Comercio) at the MODELO Sugar Mill, Piracicaba - SP, during the end of sugar season of 1985. Aerobic plate counts showed a significant variation in the number of contaminants in the cane juice after its passage through the cooling tower, with an average increase of 33 times in PCA and 18 times in MRS counts. The pH of samples decreased 0,35 with the increase of contaminants. Colonies (217) of the contaminating population were selected and characterised using the replica-plating method. It was found that the microbial population was predominantely bacterial (88%) and Gram positive (87%). Lactobacillus spp were the major contaminant (38%) followed by strains of the Micrococcaceae family (23%), Leuconostoc spp (12%), Bacilllus spp (3%) and strains of the Enterobacteriaceae family (1%). The Lactobacillus strains were classified as L.fermentum (33%), L.confusus (18%), L.virideecens (11%) and L.plantarum (2%). The remaining strains were tentatively classified as L. fernentum/L.reuteri (15%), L.brevis/L.buchnerl (4%), L.fermentum/L.reuter i/L.brevis/L.buchneri (7%) and 10% could not be identified. The Leuconostoc strains were identified as L, mesenteroides subsp.mesenteroides (50%), L. paramesenteroides (27%) and L, mesenteroides subsp.dextranicum (23%). It was found that the passage of the cane Juice through the cooling tower caused an increase in the number of Leuconostoc strains (46%) / Mestrado / Mestre em Ciência de Alimentos

Orientador : João Lucio de Azevedo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-17T14:22:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_JoseCarlosda_M.pdf: 1672929 bytes, checksum: e76fae08bfa6b9fd52e8a22a074db432 (MD5) Previous issue date: 1977 / Resumo: o presente trabalho foi conduzido com a f1nali-dade de se estudar através do método de Foster, a seleçao de Aspergillus niger, para produção de ácidos, utilizando radiação gama.Também foi estudada a produção de ácidos em meio líquido para confirmação do método de Foster na seleção de melhores produtores.Por fim, procurou-se conhecer possível efeito da radiação gama sobre a instabilidade da linhagem utilizada. Para isso, foi empregada uma linhagem industrial, usada na produção de ácido cítrico. Foram feitos três ciclos de seleção, sendo que cada população foi analisada quant1tativamente quanto ao caráter produção de ácidos, através do fator índice ácido. Dos experimentos realizados, os seguintes resultados a conclusões foram obtidos: a) - Com uma dose de radiação gama de 80 Kr obteve-se 1,61% de sobreviventes. A curva de sobrevivência indicou a existência de conídios binucleados e conídios não irradiados apresentaram porcentagem de sobrevivência inferior a 100%. Por esses resulta-dos foi possível concluir-se que a dose acima citada se presta bem a indução de mutações em A. niger e que a baixa sobrevivência nos conídios pode ser atribuída a existência de mutação letal em um dos núcleos conídiais. b) - Foi encontrada uma correlação negativa entre o índice Ac1do e o diâmetro das colônias em todas as populações irradiadas, o que permitiu concluir que a seleção para produção de ácidos através de altos índices ácidos pode-se selecionar também colônias de crescimento menor. c) - Houve uma diferença estatisticamente significante entre colônias produzidas a partir de conídios irradiados quando comparados com colônias vindas de conídios não irradiados com relação ao índice ácido. A média obtida para o índice ácido aumentou após cada irradiação sendo que o maior valor foi obtido após a terceira irradiação. Os resultados permitiram concluir que a radiação gama como esperado provocou efeitos provavelmente genéticos na linhagem empregada. A população irradiada mostrou maior variabilidade do que a população não irradiada com relação ao Índice ácido, mostrando que irradiação é um efetivo processo de aumento de variabilidade, indispensável para posterior seleção. Conclui-se também através do progresso obtido pela seleção de isolados mais produtivos com relação ao Índice ácido, que o método de seleção empregado foi eficiente. Finalmente o aumento geral no valor de Índice ácido após irradiação foi atribuído a existência de conídios heterocarióticos contendo um núcleo normal e outro contendo um recessivo letal. d) - Não houve correlação entre os valores de Índice ácido em meio de Foster e os resultados obtidos em meio líquido de fermentação. Esses resultados permitem concluir que seleção para Índice ácido em meio de Foster não é condição Sine qua non para que alinhagem tenha alta produtividade em condições industriais. e) - Ensaio de estabilidade das linhagens irradiadas através do número de setores, revelou que a linha-gem que sofreu a primeira irradiação mostrou-se mais estável do que as com segunda e terceira irradiação. Concluiu-se portanto que a obtenção de linhagens estáveis e portanto de interesse industrial poderá ser facilmente conseguida com doses menores de radiação, do que com múltiplas irradiações ou mesmo altas doses do irradiação, embora a explica-ção do fenômeno ainda permaneça obscura / Mestrado / Mestre em Biologia

Orientador: Francisco Maugeri Filho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-18T04:29:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Curralero_IsabelCristinaBaddini_M.pdf: 4433878 bytes, checksum: 48fdad6d2e18843264780ad57ae74e38 (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: A produção de dextrana de baixo peso molecular através da reação enzimática com dextrana-sacarase bruta de Leuconostoc mesenteroides NRRL B-512 F foi estudada, utilizando várias concentrações de sacarose e maltose como aceptor. Na ausência de maltose, o aumento da concentração de sacarose levou à formação de polissacarideos de baixo peso molecular, além da dextrana nativa. O produto de reação nestes casos é bastante heterogêneo, havendo ainda redução do rendimento de dextranas totais com o aumento da concentração inicial de sacarose. Com a utilização de maltose foi detectado um aumento na produção das dextranas de baixo peso molecular, proporcional ao aumento do coeficiente R ([maltose]/[sacarose]) e da concentração de sacarose, com rendimentos em dextranas totais superiores àqueles obtidos na ausência de maltose. O melhor resultado foi obtido com concentração de sacarose de 300 g/l e de maltose de 6 g/l (R = 0,02). O rendimento alcançado foi de 77% em dextranas totais, com 86% destas correspondendo a uma espécie com peso molecular médio em torno de 4.000 daltons. / Abstract: The production of low molecular weight dextran during enzimatic reaction with raw dextransucrase from Leuconostoc mesenteroides NRRL B-512 F in different concentrations of sucrose and maltose as acceptor was studied. In the absence of maltose, the increase of sucrose concentration resulted both low molecular weight polysaccharide and native dextran formation. The product was very heterogeneous and with the increase of sucrose concentration, the yields of total dextrans decreased. Using maltose as acceptor, it was observed an increase in the production of low molecular weight dextran, proportionally to the increase of the R ratio ([maltose]/[sucrose]) and sucrose concentration. The yields of total dextrans was higher than that obtained in the absence of maltose. The best result was obtained with a sucrose concentration of 300 g/l and 6 g/l of maltose (R = 0,02). The dextran yield was 77%, with 86% of the product misture corresponding to a low molecular weight dextran with an average molecular weight near to 4.000 daltons. / Mestrado / Mestre em Engenharia de Alimentos

Orientador: Nora Marcela Haun Quiros / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-19T11:56:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Milagres_AdrianeMariaFerreira_D.pdf: 12688997 bytes, checksum: 8efdd97a43f2fb8a7a34a2dea35f113e (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: Neste estudo investigou ¿ se a possibilidade de utilização de um hidrolisado hemicelulósico, obtido a partir da hidrólise ácida branda do bagaço de cana-de-açúcar, como meio de cultura para crescimento de fungo Penicillium janthinellum e para produção de xilanases. As condições ótimas para crescimento do fungo e produção de xilanases em incubadoras com movimento rotatório foram: temperatura de 30ºC, pH inicial entre 5,0 e 6,0 e agitação 60 rpm.Sob essas condições, o crescimento celular esteve associado à síntese das enzimas b-xilosidades, b-glaucosidades, endoglucanases e exoglucanases foram pequenos. A produção de xilanases foi também realizada em fermentador de 4 l agitado mecanicamente em meio à base de hidrolisado hemicelulósico, tendo a atividade das xilanases assim produzidas se mostrado menor que a das obtidas em incubadora com movimento rotatório. Uma endoxilanase e uma b-xilosidase foram purificadas do fluido de cultivo do fungo. O estudo da influência do pH revelou um pH ótimo de 5,5 para a atividade da endoxilanase e de 6,0 para a b-xilosidase. Os valores ótimos de temperatura foram 50ºC e 60ºC para endoxilanase e b-xilosidase, respectivamente. Os principais produtos da hidrólise de xilana pela endoxilanase foram xilose, xilobiose e xilotriose. Os pesos moleculares da endoxilanas e b-xilosidade, determinados pó SDS-PAGE, foram 54 kDa e 74,3 kDa, respectivamente... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: This work investigates the possibility of utilizing a hemicellullosic hydrolysate obtained from mild acid hydrolysis of sugar cane bagasse as a culture medium for growing the fungus Penicillium janthinellum and for producing xylanases. The optimum conditions for the growth of fungus and the production of xylanases in a rotary incubator were: temperature of 30ºC, initial pH between 5.0 and 6.0 and agitation at 60 rpm. Under these conditions, cell growth was associated with the induction levels of the enzymes b-xylosidadses, b-glucosidases, endoglucanases and exoglucanases werw small. Xylanase production was also carried out in a 4 L mechanically agitated fermentor, using a hemicellulosic hidrolysate-based medium. The activity of the xylanases produced in this manner was lower than that of the xylanases pçoduced in the rotary incubator. An endoxylanase and a b-xylosidase were purified from the culture filtrate of the fungus. The study of the pH influence revealed an optimum pH 5.5 for endoxylanase activity and 6.0 for b-xylosidase. The optimum values of temperature were 50ºC and 60ºC for endoxylanase and b-xylosidase, respectively. The main products of xylan hydrolysis by endoxylanase were xylose, xylobiose and xylotriose... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Ciências Biológicas

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-10-22Bitstream added on 2014-06-13T21:02:03Z : No. of bitstreams: 1 dini_cm_dr_sjrp.pdf: 2530340 bytes, checksum: 59c3324738ac340007790baaae0b46b0 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Proteases coagulantes microbianas catalisam a coagulação do leite, podendo substituir o coalho de bezerro. O objetivo deste trabalho foi estudar a protease do extrato enzimático do fungo Thermomucor indicae-seudaticae N31, obtido por fermentação em estado sólido (FES), e avaliar sua aplicação na fabricação de queijo maturado. Para avaliar a biomassa do fungo T. indicae-seudaticae N31 na FES foi utilizado o ergosterol como biomarcador. A biomassa, variou de 21,92 a 48,63 mg/g meio sólido na fermentação com farelo de trigo e de 30,18 a 81,67 mg/g meio sólido na fermentação com farelo de trigo e caseína. A condição de FES que resultou num extrato enzimático com alta atividade coagulante (AC) e baixa atividade proteolítica (AP) foi em 24 horas utilizando farelo de trigo como substrato. A AC deste extrato foi máxima em pH 5,7 e a 70°C; permaneceu estável na faixa de pH de 3,5 a 4,5 e foi termoestável até 45°C por 1 hora. A AP foi máxima em pH 5,5 e a 65°C, manteve aproximadamente 70% de estabilidade na faixa de pH de 5,0 a 7,0 e foi termoestável até 45°C por 1 hora. Dentre os inibidores de protease, o composto que mais afetou as atividades foi Pepstatin A. O extrato enzimático bruto foi concentrado por precipitação com álcool e foi cromatografado em resinas de filtração em gel (Sephadex G75) e troca iônica (Q Sepharose). AC e AP foram purificadas 43 e 16 vezes e exibiram recuperação de 1,3 e 0,5% das atividades iniciais, respectivamente. A AC da enzima purificada foi máxima em pH 5,3 e a 75°C, permaneceu estável na faixa de pH de 3,5 a 4,5 e foi termoestável até 60°C por 1 hora. Os íons cobre e níquel causaram maior perda de AC com 40 e 65% de inibição, respectivamente. As atividades foram novamente mais afetadas pela Pepstatin A. A AP da enzima purificada foi máxima... / Microbial coagulant proteases catalyze milk clotting, and so they can substitute rennet. The aim of this work was to study the proteolytic activity of the enzymatic extract from the fungus Thermomucor indicae-seudaticae N31, obtained through solid state fermentation (SSF), and evaluate its application in the production of ripened cheese. To evaluate microbial biomass in SSF ergosterol was used as a biomarker. Biomass of the fungus T. indicaeseudaticae N31, varied between 21.92 to 48.63 mg/g solid medium in fermentation with wheat bran and between 30.18 to 81.67 mg/g solid medium in fermentation with wheat bran and casein. The condition for FES that resulted in an enzymatic extract with high milkclotting activity (MCA) and low proteolytic activity (PA) was in 24 hours using wheat bran as substrate. MCA in this extract was maximum at pH 5.7, at 70°C, remained stable in pH range of 3.5 to 4.5, was thermostable up to 45°C for 1 hour. PA was maximum at pH 5.5 and at 65°C, kept approximately 70% of stability in the pH range of 5.0 to 7.0 and was thermostable up to 45°C for 1 hour. Among the protease inhibitors tested, the one that most affected the activities was Pepstatin A. The crude enzymatic extract was purified through precipitation with alcohol followed by gel filtration (Sephadex G75) and ion exchange (Q Sepharose) cromatographies. MCA and PA were purified 43 and 16-fold and exhibited 1.3 and 0.5% recovery of initial activities, respectively. MCA of the purified enzyme was maximum at pH 5.3 and at 75°C, remained stable in pH range of 3.5 to 4.5 and revealed high thermostability up to 60°C for 1 hour. Ions copper and nickel caused most loss of MCA with 40 and 65% of inhibition, respectively. The activities were again most affected by Pepstatin A. PA of purified enzyme was maximum at pH 5.5 and at 65°C... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Roberto da Silva / Banca: Mirna Lucia Gigante / Banca: Elza Iouko Ida / Banca: Hamilton Cabral / Banca: Arni Raghuvir Krishnaswamy / Resumo: Proteases coagulantes microbianas catalisam a coagulação do leite, podendo substituir o coalho de bezerro. O objetivo deste trabalho foi estudar a protease do extrato enzimático do fungo Thermomucor indicae-seudaticae N31, obtido por fermentação em estado sólido (FES), e avaliar sua aplicação na fabricação de queijo maturado. Para avaliar a biomassa do fungo T. indicae-seudaticae N31 na FES foi utilizado o ergosterol como biomarcador. A biomassa, variou de 21,92 a 48,63 mg/g meio sólido na fermentação com farelo de trigo e de 30,18 a 81,67 mg/g meio sólido na fermentação com farelo de trigo e caseína. A condição de FES que resultou num extrato enzimático com alta atividade coagulante (AC) e baixa atividade proteolítica (AP) foi em 24 horas utilizando farelo de trigo como substrato. A AC deste extrato foi máxima em pH 5,7 e a 70°C; permaneceu estável na faixa de pH de 3,5 a 4,5 e foi termoestável até 45°C por 1 hora. A AP foi máxima em pH 5,5 e a 65°C, manteve aproximadamente 70% de estabilidade na faixa de pH de 5,0 a 7,0 e foi termoestável até 45°C por 1 hora. Dentre os inibidores de protease, o composto que mais afetou as atividades foi Pepstatin A. O extrato enzimático bruto foi concentrado por precipitação com álcool e foi cromatografado em resinas de filtração em gel (Sephadex G75) e troca iônica (Q Sepharose). AC e AP foram purificadas 43 e 16 vezes e exibiram recuperação de 1,3 e 0,5% das atividades iniciais, respectivamente. A AC da enzima purificada foi máxima em pH 5,3 e a 75°C, permaneceu estável na faixa de pH de 3,5 a 4,5 e foi termoestável até 60°C por 1 hora. Os íons cobre e níquel causaram maior perda de AC com 40 e 65% de inibição, respectivamente. As atividades foram novamente mais afetadas pela Pepstatin A. A AP da enzima purificada foi máxima... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Microbial coagulant proteases catalyze milk clotting, and so they can substitute rennet. The aim of this work was to study the proteolytic activity of the enzymatic extract from the fungus Thermomucor indicae-seudaticae N31, obtained through solid state fermentation (SSF), and evaluate its application in the production of ripened cheese. To evaluate microbial biomass in SSF ergosterol was used as a biomarker. Biomass of the fungus T. indicaeseudaticae N31, varied between 21.92 to 48.63 mg/g solid medium in fermentation with wheat bran and between 30.18 to 81.67 mg/g solid medium in fermentation with wheat bran and casein. The condition for FES that resulted in an enzymatic extract with high milkclotting activity (MCA) and low proteolytic activity (PA) was in 24 hours using wheat bran as substrate. MCA in this extract was maximum at pH 5.7, at 70°C, remained stable in pH range of 3.5 to 4.5, was thermostable up to 45°C for 1 hour. PA was maximum at pH 5.5 and at 65°C, kept approximately 70% of stability in the pH range of 5.0 to 7.0 and was thermostable up to 45°C for 1 hour. Among the protease inhibitors tested, the one that most affected the activities was Pepstatin A. The crude enzymatic extract was purified through precipitation with alcohol followed by gel filtration (Sephadex G75) and ion exchange (Q Sepharose) cromatographies. MCA and PA were purified 43 and 16-fold and exhibited 1.3 and 0.5% recovery of initial activities, respectively. MCA of the purified enzyme was maximum at pH 5.3 and at 75°C, remained stable in pH range of 3.5 to 4.5 and revealed high thermostability up to 60°C for 1 hour. Ions copper and nickel caused most loss of MCA with 40 and 65% of inhibition, respectively. The activities were again most affected by Pepstatin A. PA of purified enzyme was maximum at pH 5.5 and at 65°C... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-23Bitstream added on 2014-06-13T18:50:37Z : No. of bitstreams: 1 merheb_cw_me_sjrp.pdf: 779308 bytes, checksum: 56b2af8c47fcea8212c7f1e3701d897d (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Proteases constituem um dos grupos mais importantes de enzimas industriais, sendo o setor alimentício um dos que mais as utilizam, pois atuam sobre proteínas. Este trabalho teve como objetivo produzir, purificar e caracterizar a protease do fungo termofílico Thermoascus aurantiacus. A produção foi em fermentação em estado sólido e o extrato enzimático bruto foi caracterizado. A atividade de protease, no extrato enzimático bruto, foi inibida por ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) (60,61%) e por fluoreto fenimetilsulfonil (PMSF) (56,37%) e foi levemente estimulada por Ca2+. Seu padrão de ação hidrolítico sobre a caseína foi estudado por UREA-PAGE, mostrando diferença significativa em relação a uma renina microbiana recombinante. O extrato enzimático bruto foi purificado através de precipitação com álcool a 72% seguido de cromatografias em resinas Sephadex G75 e Sephacryl S100. Apresentou rendimento de 0,4% e um fator de purificação de 80 vezes. A massa molecular de 24,5 KDa foi estimada por SDS-PAGE. A protease pura apresentou inibição somente por EDTA (96,70%) e ativação por sulfato ferroso, revelando-se uma metaloprotease ativada por ferro. O pH ótimo foi 5,5; a temperatura ótima foi 75°C e foi termoestável a 65°C por 1 hora retendo mais de 70% de atividade original. Apresentou aumento de 151,0% de atividade na presença de Tween-20 e, através dos estudos de cinética enzimática, hidrolisou melhor a caseína do que a azocaseína. / Proteases are a very important group of industrial enzymes, and are most employed in the food segment due to their action on proteins. This work had the aim to produce, purify and characterize the protease from the thermophilic Thermoascus aurantiacus. The production was carried out in solid state fermentation and the crude enzymatic extract was characterized. The proteolytic activity, in the crude extract, was inhibited by ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) (60.61%) and by phenylmethylsulphonyl fluoride (PMSF) (56.37%) and was slightly stimulated by Ca2+. Its hydrolytic action profile on casein was studied by UREA-PAGE, showing significant difference when compared to a recombinant microbial rennet. The crude enzymatic extract was purified through precipitation with ethanol at 72% followed by cromatographies in columns of Sephadex G75 and Sephacryl S100. It was purified 80-fold and exhibited recovery of total activity of 0.4%. SDS-PAGE analysis indicated an estimated molecular mass of 24.5 KDa. The purified protease was only inhibited by EDTA (96.70%) and stimulated by Fe2+ revealing to be a metalloprotease activated by iron. The optimum pH was 5.5, optimum temperature was 75°C and it was thermostable at 65°C for 1 hour maintaining more then 70% of original activity. It showed increase of 151.0% in activity in the presence of Tween-20 and, through enzyme kinetics studies, better hydrolyzed casein than azocasein.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciencias Agrarias / Made available in DSpace on 2012-10-16T10:23:26Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Como o doce em massa necessita alcançar uma textura adequada tal, que ao esfriar gelatinize, dependendo do equilíbrio entre açúcar, acidez e pectina, e ser esta última, difícil de aquisição por produtores rurais, pretende-se neste trabalho, substituir a pectina industrial por gelatina. O experimento foi conduzido objetivando substituir a pectina industrial por gelatina, sem alterar acentuadamente a composição dos mesmos no que diz respeito às características físico-químicas de pH, sólidos, solúveis, textura e sensorial (aparência, cor, aroma, sabor e textura). Os tratamentos foram realizados com adição de 1% e 2% de gelatina, sem adição de geleificante e 1% de pectina industrial (padrão). Utilizando-se as frutas banana Musa paradisiaca, goiaba psidium guayava, e pêssego Prunus persica, as quais, possuem diferentes percentuais de pectina. Os doces foram processados, buscando o máximo de similaridade em todos os passos. O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, com 4 tratamentos e 5 repetições. Analisando o efeito dos tratamentos da bananada, na análise fisico-química a pectina industrial poderia ser substituída pela gelatina. Na análise sensorial, somente para a característica cor, o tratamento com gelatina não conseguiu acompanhar a performance da pectina industrial. Para a goiabada, a pectina industrial poderia ser substituída pela gelatina, porém não havendo necessidade, pois o efeito de ambas foi equivalente ao tratamento sem adição de geleificante. Na pessegada a adição da gelatina, com exceção da variável sensorial textura. foi viável para as demais.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-07-28Bitstream added on 2014-06-13T20:50:19Z : No. of bitstreams: 1 carneiro_aaj_me_sjrp.pdf: 580507 bytes, checksum: 4c1dad8d17aa4960b07b2f4da681cd4c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A ciclodextrina glicosiltransferase (CGTase) é uma enzima microbiana que converte o amido em ciclodextrinas (CDs). Estes compostos são moléculas cíclicas, formadas por monômeros de D-glicoses unidas por ligações glicosídicas do tipo a-1,4. As CDs podem ser uma alternativa para controlar o escurecimento de batatas e frutas devido a sua capacidade de formar complexo de inclusão com substratos da reação de escurecimento. Alimentos contendo amido, quando adicionados da CGTase são também, potencialmente capazes de sofrer a ação da enzima formando CD localmente. Esse trabalho teve por finalidade estudar a aplicação direta da enzima CGTase em batatas e a aplicação de ciclodextrina comercial em batatas, maçãs, bananas e pêras visando controlar as reações de escurecimento enzimático ou não enzimático, destes alimentos. A formação de complexos com ciclodextrina foi determinada por calorimetria diferencial de varredura (DSC). Este trabalho mostrou pela primeira vez que tanto a CGTase produzida por Bacillus clausii E16 quanto a CGTase comercial (Toruzyme., Novozymes), foram capazes de controlar o escurecimento químico de batata e enzimático de batata e maçã. A utilização da CD mostrou efeito similar a ação das CGTases para batata e maçã, reduzindo dessa forma o escurecimento enzimático causado pela enzima polifenoloxidase. Pode-se inferir que ocorreu a produção da CD pela ação da CGTase em presença do substrato natural (amido de batata e maçã) e por conseqüência sua ação complexante junto aos agentes responsáveis pelo escurecimento, inibindo assim a efetivação das reações. Essa possível encapsulação foi demonstrada pela análise de DSC referente à diminuição do pico da amostra de batata tratada com CGTase. / The cyclodextrin glycosyltransferase (CGTase) is a microbial enzyme that converts starch to cyclodextrins (CDs). These compounds are cyclical molecules, formed by D-glucose monomers linked by a-1,4-glycosidic linkages type. The CDs can be an alternative to control the potato and fruits browning due its capacity to form complexes of inclusion with substrate of the browning reaction. Foods containing starch, when added of the CGTase are also potentially able to the action from the enzyme, then forming CD. This work had the purpose to study the direct application of the CGTase enzyme in potatoes and the commercial cyclodextrin application in potatoes, apples, bananas and pears aiming to control the browning enzymatic or no enzymatic reactions of these foods. The cyclodextrin complexes formation was determined by differential scanning calorimetry (DSC). This work showed for the first time that as the CGTase produced for Bacillus clausii E16 as the commercial CGTase (Toruzyme., Novozymes), were capable to control the chemical browning of potato and enzymatic browning of potato and apple. The use of the CD showed to similar effect to the action of CGTases for potato and apple, reducing in both the enzymatic browning caused by polyphenoloxidase enzyme. It can be concluded that the production of CD occurred by CGTase action in presence of the natural substrate (starch of potato and apple) and for consequence it s action to form complexes next to the responsible agents for the browning, thus inhibiting effectively the reactions. This possible encapsulation was demonstrated by analysis of DSC referring to the reduction of the peak of the potato sample treated with CGTase.