Made available in DSpace on 2014-08-20T13:59:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_clarissa_borges.pdf: 436353 bytes, checksum: cba9f3b4393e08d9df227be30ebf2887 (MD5) Previous issue date: 2010-11-23 / The carqueja-gaucha is an endemic species of Rio Grande do Sul, poorly explored and needs further research in micropropagation. In recent years, increased interest in using the technique of micropropagation of medicinal and aromatic plants, which provides a large-scale production. The objective was to evaluate the effect of different concentrations of sucrose, salts of MS medium, nitrogen and different growth regulators on in vitro cultivation of gorse. The explants were nodal segments with two axillary buds from plants already established in vitro. In the 1st experiment were tested with different concentrations of sucrose in MS medium (1% 3% 5% and 7%). In the 2nd experiment tested whether variations in concentrations of salts (macro and micronutrients) of the MS (MS / 3, MS / 2, MS; 2MS). In the 3rd experiment tested changes in the concentrations of nitrogen (N, N / 2 N / 3 N / 4) in MS medium. In the 4th experiment evaluated different concentrations (BAP): M1 (MS), M2 (MS +0 +0.05 GA3 BAP), M3 (MS +0.10 +0.05 GA3 BAP), M4 (MS + BAP +0.30 GA3 0.05 mg L-1). The pH was adjusted to 5.8 before adding agar at a concentration of 8 g L-1 and subsequently autoclaved at 121 º C for 20 minutes. The experimental design was completely randomized design with four replicates of five explants per flask. We evaluated the numbers of leaves, shoots and roots and callus formed at 15 and 30 days of cultivation. In a second experiment, one can observe a greater number of leaves in a medium containing 5% sucrose and within 30 days. But the basic MS medium with normal concentration of sucrose 3% showed a lower number of leaves at 30 days of cultivation. The highest number of shoots was observed in medium with 1% sucrose for 30 days. With increasing concentration decrease in the production of shoots. In the 2nd experiment, it was found that the number of leaves was stimulated by increasing the salt concentration of MS medium, media containing 100% and 200% of the MS culture medium, can also be observed an increase in root presence over time and not for the variations of salts in MS medium. In the 3rd experiment leaf number was greater in medium containing the lowest concentration of nitrogen and over time there was an increase in their number, the number of shoots was lower in the usual concentration of nitrogen and 30 days was an increase of shoots. In the 4th experiment all doses tested BAP promoted an increase in shoots of carqueja-gaucha and 30 days showed a higher number of shoots. In the medium with growth regulators had an increase in the production of callus at the base of the explant with increasing time in culture. / A carqueja-gaúcha é uma espécie endêmica do Rio Grande do Sul pouco explorada e carece de pesquisas na área de micropropagação. Nos últimos anos, aumentou o interesse da utilização da técnica de micropropagação em plantas aromáticas e medicinais, o que proporciona uma produção em larga escala. O objetivo do trabalho foi avaliar o efeito de diferentes concentrações de: sacarose, sais do meio MS, nitrogênio e diferentes reguladores de crescimento no cultivo in vitro de carqueja. Como explantes foram utilizados segmentos nodais com duas gemas axilares, oriundos de plantas já estabelecidas in vitro. No 1º experimento foram testadas as diferentes concentrações de sacarose no meio MS (1%, 3% 5% e 7%). No 2º experimento testou-se as variações das concentrações de sais (macro e micronutrientes) do meio MS (MS/3; MS/2; MS; 2MS). No 3º experimento foram testadas variações nas concentrações de nitrogênio (N, N/2, N/3, N/4) no meio MS. No 4ª experimento foram avaliadas diferentes concentrações de BAP (Benzilaminopurina): M1 (MS); M2 (MS+0BAP+0,05GA3);M3(MS+0,10BAP+0,05GA3); M4 (MS+0,30BAP+0,05GA3 mg L-1). O pH foi ajustado para 5,8 antes da adição do ágar na concentração de 8 g L-1 e posteriormente autoclavado a 121 ºC por 20 minutos. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com quatro repetições de cinco explantes por frasco. Foram avaliados os números de folhas, brotos e calos e raízes formadas aos 15 e 30 dias de cultivo. No 1º experimento, pode-se observar um maior número de folhas no meio contendo 5% de sacarose, no período de 30 dias. Já o meio MS básico com concentração usual de sacarose 3% apresentou um menor número de folhas aos 30 dias de cultivo. O maior número de brotos foi observado no meio com 1% de sacarose aos 30 dias. Com o aumento da concentração houve decréscimo na produção de brotos. No 2º experimento, verificou-se que o número de folhas foi estimulado pelo aumento da concentração de sais do meio MS, nos meios contendo 100% e 200% dos sais do meio MS; também pode-se observar um aumento da presença de raízes com o passar do tempo e não em relação às variações de sais no meio MS. No 3º experimento, o número de folhas foi maior no meio contendo a menor concentração de nitrogênio e, com o passar do tempo, houve um aumento de número das mesmas, o número de brotações foi menor na concentração usual de nitrogênio e aos 30 dias observou-se aumento de brotações. No 4º experimento, todas as doses de BAP testadas promoveram um aumento de brotações de carqueja-gaúcha e aos 30 dias apresentou um maior número de brotações. Nos meios com presença de reguladores de crescimento houve um aumento na produção de calos na base do explante com o aumento do tempo em cultivo.

Methods for rapid, safe and effective detection of unmapped buried ordnance are vital to the protection of humans and environmental quality throughout the world. This study aimed to investigate the use of phytosensing and to understand the physiological response of woody plants to 2,4,6-trinitrotoluene (TNT) contamination. Baccharis halimifolia were potted in soils containing various concentrations of TNT and physiological responses were observed over a 9-week experimental period. Measurements included the collection of remotely sensed data, such as hyperspectral reflectance and chlorophyll fluorescence, and traditional plant-level physiological data. In accordance with the hypothesis, low levels of TNT improved physiological response in plants due to the slight increase in nitrogen, while high levels of TNT induced stress. Key markers in stress responses were identified, specifically with reflectance indices and derivatives, which may separate TNT-contaminated plants from naturally stressed plants and would allow for accurate detection of buried ordnance at the landscape level.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Este trabalho descreve a investigaÃÃo quÃmica de plantas da famÃlia Asteraceae nativas da flora cearense, pertencentes aos gÃneros Baccharis, Eupatorium, Pectis, Verbesina e Vernonia. Eupatorium ballotaefolium H.B.K. e E. betonicaeforme Baker foram selecionados para o estudo da composiÃÃo quÃmica volÃtil e nÃo-volÃtil, enquanto Baccharis trinervis (Lam.) Pers., E. pauciflorum Kunth, Pectis apodocephala Baker, P. oligocephala Baker, Verbesina diversifolia D.C., Vernonia chalybaea Mart. e V. scorpioides (Lam.) Pers, tiveram exclusivamente a composiÃÃo quÃmica dos Ãleos essenciais determinados. O potencial antimicrobiano, larvicida e nematicida de alguns Ãleos foi avaliado. O Ãleo essencial de B. trinervis apresentou moderada atividade antimicrobiana, enquanto os Ãleos essenciais de P. apodocephala, P. oligocephala e E. betonicaeforme, incluindo dois de seus principais constituintes, 2,2-dimetil-6-vinilcroman-4-ona e 2-senecioil-4-vinilfenol, apresentaram significativa atividade larvicida contra larvas do Aedes aegypti. Os Ãleos essenciais das Pectis acima mencionadas, tambÃm apresentaram propriedades nematicida contra o fito-nematÃide Meloidogyne incognita. Neste trabalho investigou-se ainda, a composiÃÃo dos Ãcidos graxos contidos nas fraÃÃes apolares dos extratos hexÃnicos da parte aÃrea de E. ballotaefolium e E. betonicaeforme. Foram identificados um total de 13 Ãcidos graxos, sendo o Ãcido hexadecanÃico (C16:0) o constituinte majoritÃrio para ambas as espÃcies. A prospecÃÃo quÃmica relativa Ãs duas espÃcies de Eupatorium resultou no isolamento e identificaÃÃo de 11 substÃncias para E. ballotaefolium e 17 substÃncias para E. betonicaeforme. Do extrato hexÃnico da parte aÃrea de E. ballotaefolium isolou-se, em mistura, os fitoesterÃides β- sitosterol e estigmasterol e os triterpenos acetato de taraxasterila e taraxasterol, enquanto do extrato etanÃlico, foram isolados e caracterizados os flavonÃides nepetina e quercetina na forma glicosilada e as formas glicosÃdicas do sitostetol e estigmasterol. Do extrato hexÃnico das raÃzes foram isolados os triterpenos epifriedelanol e dammara-20,24-dien-3β-ol e do extrato etanÃlico foi obtida a cumarina 11-hidroxi-11,12-di-hidroobliquina. Do extrato hexÃnico das flores de E. betonicaeforme foram isolados uma lactona sesquiterpÃnica, 8β- angeloiloxi-9β,10β-di-hidroxi-1-oxo-germacra-4E,11(13)dien-12,6α-olido, uma lactona de cadeia longa, 3β-hidroxieicosan-1,5β-olido, os diterpenos Ãcido grandiflÃrico e Ãcido 15α- decanoiloxi-caur-16-en-19-Ãico, o esterÃide espinasterol e o Ãcido hexacosanÃico, enquanto do extrato etanÃlico, foram isolados o triterpeno acetato de taraxasterila e os flavonÃides, nepetina, canferol e ramnocitrina. Do extrato hexÃnico das raÃzes, isolou-se em mistura, os xxiv esterÃides β-sitosterol e estigmasterol, enquanto do extrato etanÃlico isolou-se a cromona 6,6- acetil-2,2-dimetilcroman-4-ona e o flavonÃide nepetina. Do extrato hexÃnico da parte aÃrea isolou-se a mistura binÃria dos triterpenos α- e β-amirina, alÃm do acetato de taraxasterila. De acordo com o levantamento bibliogrÃfico, o diterpeno denominado Ãcido 15α-decanoiloxicaur- 16-en-19-Ãico, ainda nÃo havia sido registrado na literatura e os constituintes 8β- angeloiloxi-9β,10β-di-hidroxi-1-oxo-germacra-4E,11(13)dien-12,6α-olido, 3β- hidroxieicosan-1,5β-olido, 2,2-dimetil-6-vinil-croman-4-ona, 6-acetil -2,2-dimetil-croman-4- ona, 2-senecioil-4-vinilfenol e damara-20,24-dien-3β-ol, estÃo sendo registrados pela primeira vez no gÃnero. A lactona 8β-angeloiloxi-9β,10β-di-hidroxi-1-oxo-germacra-4E,11(13)dien- 12,6α-olido e o flavonÃide nepetina apresentaram moderado potencial citotÃxico quando testados frente a um painel de cÃlulas tumorais, apresentando IC50 nas faixas de 1,27-7,16 e 5,48-15,12 μg/mL, respectivamente. A determinaÃÃo estrutural dos metabÃlitos secundÃrios isolados neste trabalho envolveu o uso de tÃcnicas espectromÃtricas como infravermelho (IV), espectrometria de massa (EM) e ressonÃncia magnÃtica nuclear de hidrogÃnio (RMN 1H) e carbono-13 (RMN 13C), incluindo tÃcnicas bidimensionais como COSY, HMQC, HMBC e NOESY, bem como comparaÃÃo com dados descritos na literatura. / This work describes the chemical investigation of native plants of the Asteraceae family from Cearà State flora, belonging to the genera Baccharis, Eupatorium, Pectis, Verbesina and Vernonia. Eupatorium ballotaefolium H.B.K. and E. betonicaeforme Baker were selected to study their volatile and non-volatile chemical composition, while for Baccharis trinervis (Lam.) Pers., E. pauciflorum Kunth, Pectis apodocephala Baker, P. oligocephala Baker, Verbesina diversifolia D.C., Vernonia chalybaea Mart. and V. scorpioides (Lam.) Pers only the chemical composition of the essential oils, was determined. The antimicrobial, larvicidal and nematicidal potential of some of the oils were evaluated. The essential oil of B. trinervis showed moderate antimicrobial activity, while the essential oils of P. apodocephala, P. oligocephala and E. betonicaeforme, including two of their major constituents, 2,2-dimethyl-6-vinylchroman-4-one and 2-senecioyl-4-vinylphenol, showed significant larvicidal activity against the Aedes aegypti larvae. The essential oils from the above mentioned Pectis species also showed nematicidal properties against the nematode Meloidogyne incognita. The fatty acid composition of the apolar fractions from the hexane extracts of the aerial parts of E. ballotaefolium and E. betonicaeforme was also examined. A total of 13 fatty acids were identified, being hexadecanoic acid (C16:0) the major compound for both species. The chemical analysis of both Eupatorium species resulted in the isolation and characterization of 11 substances for E. ballotaefolium and 17 substances for E. betonicaeforme. From the hexane extract of the aerial parts of E. ballotaefolium was isolated a mixture of β-sitosterol and stigmasterol, the triterpenes taraxasteryl acetate and taraxasterol, while the flavonoids nepetin and quercetin-3-O-glucoside and a binary misture of sitosterol and stigmasterol glucosilated, were isolated from the ethanol extract. From the hexane extract of the roots were isolated the tritepenes epifriedelanol and dammara-20,24-dien-3β-ol and from the ethanol extract was obtained the coumarin 11-hydroxy-11,12-di-hydroobliquine. From the hexane extract of E. betonicaeforme flowers a sesquiterpene lactone, 8β- angeloyloxy-9β,10β-dihydroxy-1-oxo-germacra-4E,11(13)dien-12,6α-olide, a long chain lactone 3β-hydroxiicosan-1,5β-olide, the diterpenes grandifloric and 15α-decanoyloxy-kaur- 16-en-19-oic acids, the steroid spinasterol and hexacosanoic acid were isolated. From the ethanol extract were isolated taraxasteril acetate, nepetin, kaempferol and ramnocitrin. From the hexane extract of the roots were isolated the mixture of β-sitosterol and stigmasterol, while from the ethanol extract were isolated 6,6-acetyl-2,2-dimethylcroman-4-one and nepetin. The hexane extract of the aerial parts were obtained the binary mixture of α- and β- amyrin, and taraxasteryl acetate. To the best of our knowledge the diterpene characterized as 15α-decanoyloxy-kaur-16-en-19-oic acid is a new substance while the compounds 8β- angeloyloxy-9β,10β-dihydroxy-1-oxo-germacra-4E,11(13)dien-12,6α-olide, 3β- hydroxyeicosan-1,5β-olide, 2,2-dimethyl-6-vinyl-chroman-4-one, 6-acetyl-2,2-dimethylchroman- 4-one, 2-senecioyl-4-vinylphenol and dammara-20,24-dien-3β-ol are being reported for the first time to the genus. The lactone 8β-angeloyloxy-9β,10β-dihydroxy-1-oxogermacra- 4E,11(13)dien-12,6α-olide and the flavonoid nepetin showed moderated cytotoxic activity against a panel of five cell lines with IC50 in the range of 1,27-7,16 e 5,48-15,12 μg/mL, respectively. The structures of all secondary metabolites were established using spectrometric data such as IR, MS, 1H and 13C NMR, including bidimensional techniques (COSY, HMQC, HMBC and NOESY), and comparison with from the literature data.

ALBUQUERQUE, M. R. J. R.; PESSOA, O. D. L. Estudo químico de asteráceas do Ceará: Baccharis trinervis, Eupatorium ballotaefolium, Eupatorium betonicaeforme, Eupatorium pauciflorum, Pectis apodocephala, Pectis oligocephala, Verbesina diversifolia, Vernonia chalybaea e Vernonia scorpioides, 2006. 436 f. Tese (Doutorado em Química Orgânica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2006. / Submitted by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2014-10-10T20:02:26Z No. of bitstreams: 1 2006_tese_mrjralbuquerque.pdf: 8995931 bytes, checksum: 69c7e8b9ff64d113f97db77209bc46b0 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2015-10-22T23:05:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_tese_mrjralbuquerque.pdf: 8995931 bytes, checksum: 69c7e8b9ff64d113f97db77209bc46b0 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-22T23:05:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_tese_mrjralbuquerque.pdf: 8995931 bytes, checksum: 69c7e8b9ff64d113f97db77209bc46b0 (MD5) Previous issue date: 2006 / This work describes the chemical investigation of native plants of the Asteraceae family from Ceará State flora, belonging to the genera Baccharis, Eupatorium, Pectis, Verbesina and Vernonia. Eupatorium ballotaefolium H.B.K. and E. betonicaeforme Baker were selected to study their volatile and non-volatile chemical composition, while for Baccharis trinervis (Lam.) Pers., E. pauciflorum Kunth, Pectis apodocephala Baker, P. oligocephala Baker, Verbesina diversifolia D.C., Vernonia chalybaea Mart. and V. scorpioides (Lam.) Pers only the chemical composition of the essential oils, was determined. The antimicrobial, larvicidal and nematicidal potential of some of the oils were evaluated. The essential oil of B. trinervis showed moderate antimicrobial activity, while the essential oils of P. apodocephala, P. oligocephala and E. betonicaeforme, including two of their major constituents, 2,2-dimethyl-6-vinylchroman-4-one and 2-senecioyl-4-vinylphenol, showed significant larvicidal activity against the Aedes aegypti larvae. The essential oils from the above mentioned Pectis species also showed nematicidal properties against the nematode Meloidogyne incognita. The fatty acid composition of the apolar fractions from the hexane extracts of the aerial parts of E. ballotaefolium and E. betonicaeforme was also examined. A total of 13 fatty acids were identified, being hexadecanoic acid (C16:0) the major compound for both species. The chemical analysis of both Eupatorium species resulted in the isolation and characterization of 11 substances for E. ballotaefolium and 17 substances for E. betonicaeforme. From the hexane extract of the aerial parts of E. ballotaefolium was isolated a mixture of β-sitosterol and stigmasterol, the triterpenes taraxasteryl acetate and taraxasterol, while the flavonoids nepetin and quercetin-3-O-glucoside and a binary misture of sitosterol and stigmasterol glucosilated, were isolated from the ethanol extract. From the hexane extract of the roots were isolated the tritepenes epifriedelanol and dammara-20,24-dien-3β-ol and from the ethanol extract was obtained the coumarin 11-hydroxy-11,12-di-hydroobliquine. From the hexane extract of E. betonicaeforme flowers a sesquiterpene lactone, 8β- angeloyloxy-9β,10β-dihydroxy-1-oxo-germacra-4E,11(13)dien-12,6α-olide, a long chain lactone 3β-hydroxiicosan-1,5β-olide, the diterpenes grandifloric and 15α-decanoyloxy-kaur- 16-en-19-oic acids, the steroid spinasterol and hexacosanoic acid were isolated. From the ethanol extract were isolated taraxasteril acetate, nepetin, kaempferol and ramnocitrin. From the hexane extract of the roots were isolated the mixture of β-sitosterol and stigmasterol, while from the ethanol extract were isolated 6,6-acetyl-2,2-dimethylcroman-4-one and nepetin. The hexane extract of the aerial parts were obtained the binary mixture of α- and β- amyrin, and taraxasteryl acetate. To the best of our knowledge the diterpene characterized as 15α-decanoyloxy-kaur-16-en-19-oic acid is a new substance while the compounds 8β- angeloyloxy-9β,10β-dihydroxy-1-oxo-germacra-4E,11(13)dien-12,6α-olide, 3β- hydroxyeicosan-1,5β-olide, 2,2-dimethyl-6-vinyl-chroman-4-one, 6-acetyl-2,2-dimethylchroman- 4-one, 2-senecioyl-4-vinylphenol and dammara-20,24-dien-3β-ol are being reported for the first time to the genus. The lactone 8β-angeloyloxy-9β,10β-dihydroxy-1-oxogermacra- 4E,11(13)dien-12,6α-olide and the flavonoid nepetin showed moderated cytotoxic activity against a panel of five cell lines with IC50 in the range of 1,27-7,16 e 5,48-15,12 μg/mL, respectively. The structures of all secondary metabolites were established using spectrometric data such as IR, MS, 1H and 13C NMR, including bidimensional techniques (COSY, HMQC, HMBC and NOESY), and comparison with from the literature data. / Este trabalho descreve a investigação química de plantas da família Asteraceae nativas da flora cearense, pertencentes aos gêneros Baccharis, Eupatorium, Pectis, Verbesina e Vernonia. Eupatorium ballotaefolium H.B.K. e E. betonicaeforme Baker foram selecionados para o estudo da composição química volátil e não-volátil, enquanto Baccharis trinervis (Lam.) Pers., E. pauciflorum Kunth, Pectis apodocephala Baker, P. oligocephala Baker, Verbesina diversifolia D.C., Vernonia chalybaea Mart. e V. scorpioides (Lam.) Pers, tiveram exclusivamente a composição química dos óleos essenciais determinados. O potencial antimicrobiano, larvicida e nematicida de alguns óleos foi avaliado. O óleo essencial de B. trinervis apresentou moderada atividade antimicrobiana, enquanto os óleos essenciais de P. apodocephala, P. oligocephala e E. betonicaeforme, incluindo dois de seus principais constituintes, 2,2-dimetil-6-vinilcroman-4-ona e 2-senecioil-4-vinilfenol, apresentaram significativa atividade larvicida contra larvas do Aedes aegypti. Os óleos essenciais das Pectis acima mencionadas, também apresentaram propriedades nematicida contra o fito-nematóide Meloidogyne incognita. Neste trabalho investigou-se ainda, a composição dos ácidos graxos contidos nas frações apolares dos extratos hexânicos da parte aérea de E. ballotaefolium e E. betonicaeforme. Foram identificados um total de 13 ácidos graxos, sendo o ácido hexadecanóico (C16:0) o constituinte majoritário para ambas as espécies. A prospecção química relativa às duas espécies de Eupatorium resultou no isolamento e identificação de 11 substâncias para E. ballotaefolium e 17 substâncias para E. betonicaeforme. Do extrato hexânico da parte aérea de E. ballotaefolium isolou-se, em mistura, os fitoesteróides β- sitosterol e estigmasterol e os triterpenos acetato de taraxasterila e taraxasterol, enquanto do extrato etanólico, foram isolados e caracterizados os flavonóides nepetina e quercetina na forma glicosilada e as formas glicosídicas do sitostetol e estigmasterol. Do extrato hexânico das raízes foram isolados os triterpenos epifriedelanol e dammara-20,24-dien-3β-ol e do extrato etanólico foi obtida a cumarina 11-hidroxi-11,12-di-hidroobliquina. Do extrato hexânico das flores de E. betonicaeforme foram isolados uma lactona sesquiterpênica, 8β- angeloiloxi-9β,10β-di-hidroxi-1-oxo-germacra-4E,11(13)dien-12,6α-olido, uma lactona de cadeia longa, 3β-hidroxieicosan-1,5β-olido, os diterpenos ácido grandiflórico e ácido 15α- decanoiloxi-caur-16-en-19-óico, o esteróide espinasterol e o ácido hexacosanóico, enquanto do extrato etanólico, foram isolados o triterpeno acetato de taraxasterila e os flavonóides, nepetina, canferol e ramnocitrina. Do extrato hexânico das raízes, isolou-se em mistura, os xxiv esteróides β-sitosterol e estigmasterol, enquanto do extrato etanólico isolou-se a cromona 6,6- acetil-2,2-dimetilcroman-4-ona e o flavonóide nepetina. Do extrato hexânico da parte aérea isolou-se a mistura binária dos triterpenos α- e β-amirina, além do acetato de taraxasterila. De acordo com o levantamento bibliográfico, o diterpeno denominado ácido 15α-decanoiloxicaur- 16-en-19-óico, ainda não havia sido registrado na literatura e os constituintes 8β- angeloiloxi-9β,10β-di-hidroxi-1-oxo-germacra-4E,11(13)dien-12,6α-olido, 3β- hidroxieicosan-1,5β-olido, 2,2-dimetil-6-vinil-croman-4-ona, 6-acetil -2,2-dimetil-croman-4- ona, 2-senecioil-4-vinilfenol e damara-20,24-dien-3β-ol, estão sendo registrados pela primeira vez no gênero. A lactona 8β-angeloiloxi-9β,10β-di-hidroxi-1-oxo-germacra-4E,11(13)dien- 12,6α-olido e o flavonóide nepetina apresentaram moderado potencial citotóxico quando testados frente a um painel de células tumorais, apresentando IC50 nas faixas de 1,27-7,16 e 5,48-15,12 μg/mL, respectivamente. A determinação estrutural dos metabólitos secundários isolados neste trabalho envolveu o uso de técnicas espectrométricas como infravermelho (IV), espectrometria de massa (EM) e ressonância magnética nuclear de hidrogênio (RMN 1H) e carbono-13 (RMN 13C), incluindo técnicas bidimensionais como COSY, HMQC, HMBC e NOESY, bem como comparação com dados descritos na literatura.

Submitted by Isabela Jacob Moro null (isabela.jm87@gmail.com) on 2016-07-22T18:18:24Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao de Isabela Jacob Moro_corrigida.pdf: 4133116 bytes, checksum: e046f271d663b557edcdc98a5fc6eb8f (MD5) / Rejected by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo a orientação abaixo: O arquivo submetido não contém a folha de aprovação e está sem a ficha catalográfica. A versão submetida por você é considerada a versão final da dissertação/tese, portanto não poderá ocorrer qualquer alteração em seu conteúdo após a aprovação. Corrija esta informação e realize uma nova submissão contendo o arquivo correto. Agradecemos a compreensão. on 2016-07-22T20:15:50Z (GMT) / Submitted by Isabela Jacob Moro null (isabela.jm87@gmail.com) on 2016-07-22T20:54:52Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao de Isabela Jacob Moro_corrigida.pdf: 4201818 bytes, checksum: 6037a407d0b6213632ec0c0218c59ecc (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-07-28T19:24:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 moro_ij_me_arafcf.pdf: 4201818 bytes, checksum: 6037a407d0b6213632ec0c0218c59ecc (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-28T19:24:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 moro_ij_me_arafcf.pdf: 4201818 bytes, checksum: 6037a407d0b6213632ec0c0218c59ecc (MD5) Previous issue date: 2016-06-23 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Produtos derivados de fontes vegetais tem demonstrado seu potencial no combate a diversas doenças, inclusive o câncer, à exemplo dos alcaloides derivados de Catharantus roseus (L.)G. Don, vincristina e vimblastina. A diversidade estrutural das moléculas encontradas em espécies vegetais concebem perspectivas de uso in natura bem como servem de inspiração para o desenvolvimento de outras entidades químicas que serão destinadas ao combate de doenças. O material de estudo pertence a espécie Baccharis trimera (Less.) DC, popularmente conhecida como carqueja e com amplo uso tradicional, principalmente para o alívio de afecções digestivas. O estudo teve por objetivo o fracionamento cromatográfico de derivados vegetais de partes aéreas de B. trimera e a avaliação da citotoxicidade e estudo de morte em linhagens de células humanas normal e tumorais tratadas com o OE, suas frações e componentes, além da flavona eupatorina isolada do extrato acetato de etila. O potencial citotóxico foi avaliado através do método da sulforrodamina B e os estudos de morte através de ensaios de Anexina-V, Hoechst/iodeto de propídeo e ativação de caspase-3. As linhagens celulares humanas utilizadas foram de câncer de mama (MCF-7), hepatocarcinoma (HepG2) e a linhagem de mama normal (MCF-10). As amostras avaliadas foram o óleo essencial, suas frações e componentes (α-humuleno, trans-cariofileno e óxido de cariofileno), além da eupatorina. Os constituintes majoritários do óleo essencial identificados por CG-EM foram: trans-cariofileno(18,9 %), biciclogermacreno (15,6 %), germacreno D (10,5 %) e δ-cadineno (6,6 %); α-humuleno (2,3 %) e óxido de cariofileno (2,9 %) também foram identificados. As frações do óleo essencial foram obtidas por cromatografia em coluna (sílica gel) e analisadas por CG-DIC e CG-EM, tendo apresentado composições químicas distintas. A flavona eupatorina (pureza em 250 nm de 96 % m/m) foi isolada a partir do extrato acetato de etila utilizando cromatografia em camada delgada preparativa (sílica gel) e identificada por técnicas espectrométricas (EM, UV, RMN de 1H e 13C). Verificou-se o maior potencial de redução de sobrevida com o OE em HepG2 (CI50= 10,40 μg/mL), α-humuleno e trans-cariofileno em MCF7 (CI50 de 7,59 e 11,52 μg/mL, respectivamente) enquanto que a eupatorina mostrou-se mais citotóxica em MCF10A com valor de CI50 pouco distante do encontrado para MCF7 (5,08 e 6,73 μg/mL, respectivamente). Grande parte das frações do OE foi citotóxica às linhagens e foram necessárias concentrações mais altas para atingir o CI50. As amostras apresentaram morte mista em todas as linhagens ocorrendo tanto apoptose quanto necrose. Não houve significância estatística no ensaio de ativação da via de apoptose por caspase-3. Constatou-se a eficiência das técnicas cromatográficas no tocante à identificação e separação de constituintes químicos, das técnicas espectrométricas para a identificação e determinação estrutural da substância eupatorina, bem como o potencial de morte celular, e até mesmo antitumoral, de amostras analisadas neste trabalho. / Natural products diversity is an important source to find potential treatments against various diseases, including cancer. Vincristine and vimblastine, alkaloids derived from Catharantus roseus (L.) L. Don, are some of the examples. The structural diversity of molecules from plant species allow the in natura usage and also the development of other chemical entities that will be used to diseases control. Baccharis trimera (Less.) DC., popularly known as carqueja, has an extensive traditional use, especially for digestive disorders. The aims of this study were the chromatographic fractionation of aerial parts from carqueja, in vitro evaluation of the cytotoxic potential through sulforhodamine B assay and cellular death by Annexin-V assay, Hoechst/propidium iodide method and caspase-3 activation, in normal and tumor cell lines treated with essential oil, its fractions and components, and the flavone eupatorin isolated from ethyl acetate extract. The cell lines used were human breast cancer (MCF-7), hepatocellular carcinoma (HepG2) and normal breast line (MCF-10a). The evaluated samples were: essential oil, its fractions and components (α-humulene, β- caryophyllene and caryophyllene oxide) and eupatorin. The major constituents of the essential oil identified by GC-MS were: β-caryophyllene (18.9%), bicyclogermacrene (15.6%), germacrene D (10.5%), δ-cadinene (6.6%). Other components of the essential oil, such as α-humulene (2.3%) and caryophyllene oxide (2.9%) were also identified. The essential oil fractions were obtained by column chromatography (silica gel) and analyzed by GC-FID and GC-MS, presenting different chemical compositions. The flavone eupatorin (96% purity in 250 nm; w/w) was isolated from ethyl acetate extract using preparative thin layer chromatography (silica gel) and identified by spectrometric methods (MS, UV, 1H and 13C NMR). The largest decrease in cell viability for HepG2 was observed with essential oil (IC50 = 10.40 μg / mL); α-humulene and trans-caryophyllene for MCF7 cells (IC50 7.59 and 11.52 μg / mL, respectively) and eupatorin for MCF10A (IC50= 5.08 μg / mL). IC50 for eupatorin in MCF7 cells was 6.73 μg / mL. Most of the essential oils fractions were cytotoxic to the cell lines and higher concentrations were required to achieve IC50. There was not a cell death standard since apoptosis and necrosis occurred as well. Statistical significance was not found in caspase-3 assay. Chromatographic techniques were efficient for compounds identification and separation, and spectrometry techniques for structural determination of eupatorin. The results from this research shown therapeutic potential against cancer for the studied samples. / FAPESP: 2014/10552-3

Orientador: Luis Vítor Silva do Sacramento / Banca: Dirceu Maximino Fernandes / Banca: José Roberto Pinto de Souza / Resumo: A espécie Baccharis trimera conhecida como carqueja, está inserida no Bioma pertencente à Mata Atlântica, uma das florestas tropicais com maior diversidade biológica do planeta. Por esse motivo, intervenções científicas que busquem sua preservação e diminuição do extrativismo tornam-se necessárias. Com o intuito de melhorar a qualidade da matéria prima para fitoterápicos, na produção de carqueja sugere-se a adoção de práticas de manejo sustentável e cultivo de plantas selecionadas. A introdução de espécies silvestres no cultivo sistematizado requer estudos fitotécnicos para sondagem do desempenho das mesmas frente a esta condição. Portanto, este trabalho objetivou avaliar a produtividade de três acessos de B. trimera, cultivados sob adubação organo-mineral em casa de vegetação, visto que esta espécie é nativa, de uso medicinal e obtida por extrativismo. Os acessos foram obtidos de plantas procedentes de Botucatu-SP e Campos do Jordão-SP. O experimento foi instalado em esquema fatorial em delineamento de blocos ao acaso (6 tratamentos de adubação x 3 acessos) com 4 repetições. O cultivo foi conduzido em casa de vegetação do Setor de Horticultura do DPV/FCA/UNESP. Os tratamentos constaram de: condição natural do solo (testemunha); adubação orgânica (esterco bovino curtido 30t.ha-1); adubação mineral 1 (NPK-20;80;85kg.ha-1) adubação mineral 2 (NPK-35;120;150kg.ha-1); adubação organo-mineral 1 (esterco bovino curtido 30t.ha-1 + NPK-20;80;85kg.ha-1) e adubação organo-mineral 2 (esterco bovino curtido 30t.ha-1 + NPK-35;120;150kg.ha-1). A adubação foi realizada no transplantio. Após 120 e 240 dias de cultivo, avaliaram-se os seguintes aspectos fitométricos: acúmulo de matéria fresca e seca, largura média das alas caulinares, número de ramificações, altura das plantas ...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Baccharis trimera specie known as carqueja, Atlantic Forest is inserted inside of biom belong, one of the tropical forests of bigger biological diversity of all the planet. For this reason, scientific interventions that search its preservation, they become necessary. With intention to improve the quality of the substance cousin for phytoterapic, in the production of carqueja suggests it adoption of practical of sustainable handling and culture of selecteds plants. The introduction of wild species in the systemize culture requires phytotechnics studies for sounding of the performance of same the front to this condition. Therefore, this work objectified to evaluate the productivity of three accesses of B. trimera, cultivated under fertilization organic-mineral in greenhouse, since this species is native, of use medicinal and gotten by extractivism. The accesses had been gotten of plants originating Botucatu-SP and fields of the Jordão-SP. The experiment was installed in factorial project in delineation of randomized blocks (the 6 treatments of fertilization x 3 accesses) and 4 repetitions. The culture was lead in greenhouse of the Horticulture Sector of the DPV/FCA/UNESP. The treatments had consisted of: natural condition of the ground (witness); organic fertilization (30t.ha-1 farm yard manure); mineral fertilization 1 (NPK-20;80;85kg.ha-1) mineral fertilization 2 (NPK-35;120;150kg. ha-1); fertilization organic-mineral 1 (30t.ha-1 farm yard manure + NPK-20;80;85 kg.ha-1) and fertilization organic-mineral 2 (60t.ha-1 farm yard manure + NPK-35;120;150kg.ha-1). The fertilization was carried through in the plantation. After 120 and 240 days of culture, the phytometrics aspects of the aerial part had been evaluated: cool substance and dries, average width of the sections stems, number of ramifications, height of the plants and texts of nitrogen (N), phosphorus (P) and potassium (K)...(Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This study aimed to investigate the suitability of plant species for biotechnical management of slopes in oxisol soils. The studies began in March 2009, in the region of Cruz Alta-RS, South Brazil (28°23 28,14 S e 53°22 25,61 W), and it included a survey of the problems occurring in the embankments, establishing criteria for the selection of plant species, the search and selection of plant species with desirable traits, field testing the four selected species and observation of key environmental aspects. The main problems found were: laminar and furrow erosion and lack of slope stability, caused mainly by the lack of vegetation cover, excessive slope of the ramp, excessive runoff, desiccation, use and maintenance of inadequate techniques. The criteria for species selection involved biotechnical, biological, ecological and socioeconomic aspects, prioritized according to the needs of each case. The species Ipomea cairica, Pyrostegia venusta, Hedera canariensis, Mikania glomerata, Baccharis trimera, Petunia integrifolia, Rhynchosia corylifolia, Acanthospermun australe, Sambucus australis, Ateleia glazioviana, Hibiscus rosa-sinensis and Lagerstroemia indica, for their occurrences, frequencies, forms and growths, showed potential for use in the biotechnical management of slopes. The slopes can vary in fertility, temperature and humidity at levels that can impair the development of natural or cultivated revegetation. The geographic orientation of the slope and the occurrence of trees can significantly influence these factors. Ateleia glazioveana, Baccharis trimera, Pyrostegia venusta e Cynodom plectostachyus, exhibited characteristics that make them suitable for uses in the biotechnical management of slopes in oxisol soils. According to the conditions under which the trials were conducted, it can be concluded that: the results confirmed the hypothesis that there are species in southern Brazil suitable for biotechnical management and restoration of degraded areas and slopes that are not conventionally used. For growing plants on the slope, it is recommended the use of seedlings, soil fertilization and planting in periods less stringent, as important practices to ensure good survival, accelerate vegetative growth and optimize the protective effects during early development. Further studies on the biotechnical management of these species in slopes, especially on the efficiency of different methods of propagation, and the best ways of deployment and use are suggested. / Este trabalho teve como objetivo geral investigar a aptidão de espécies de plantas para o manejo biotécnico de taludes em latossolo. Os estudos iniciaram em março de 2009, na região de Cruz Alta-RS, Sul do Brasil (28°23 28,14 S e 53°22 25,61 O), incluindo o levantamento dos problemas ocorrentes nos taludes, a fixação de critérios para a escolha de espécies vegetais, a busca e seleção de espécies vegetais com características desejáveis, o teste a campo de quatro espécies selecionadas e a observação de aspectos ambientais relevantes. Os principais tipos de problemas encontrados foram: erosão laminar e por sulcos e falta de estabilidade do talude, causados principalmente pela falta de cobertura vegetal, inclinação excessiva da rampa, escoamento de águas de montante, dessecação, uso e manutenção de técnicas deficientes. Os critérios de seleção de espécies envolveram aspectos biotécnicos, biológicos, ecológicos e socioeconômicos, priorizados de acordo com as necessidades de cada caso. As espécies Ipomea cairica, Pyrostegia venusta, Hedera canariensis, Mikania glomerata, Baccharis trimera, Petunia integrifolia, Rhynchosia corylifolia, Acanthospermun australe, Sambucus australis, Ateleia glazioviana, Hibiscus rosasinensis e Lagerstroemia indica, pelas suas ocorrências, freqüências, formas e crescimentos, apresentaram potencial de uso no manejo biotécnico de taludes. Os taludes podem apresentar variações de fertilidade, temperatura e umidade em níveis capazes de comprometer o desenvolvimento da revegetação natural ou cultivada. A orientação geográfica do talude e a ocorrência de arborização podem influenciar significativamente estes fatores. Ateleia glazioveana, Baccharis trimera, Pyrostegia venusta e Cynodom plectostachyus, apresentaram características que as tornam aptas para o emprego no manejo biotécnico de taludes em latossolo. De acordo com as condições em que os estudos foram realizados, pode-se concluir que os resultados obtidos permitem confirmar a hipótese de que há espécies vegetais no sul do Brasil aptas para o manejo biotécnico e recuperação de áreas degradadas em taludes e que ainda não são convencionalmente utilizadas; para o cultivo de plantas em talude, recomenda-se o emprego de mudas, a fertilização do solo e o plantio nos períodos menos rigorosos, como práticas importantes para garantir boa sobrevivência, acelerar o crescimento vegetativo e otimizar os efeitos protetores, durante o período inicial de desenvolvimento. Sugerem-se maiores estudos sobre o manejo biotécnico destas espécies em taludes, principalmente quanto à eficiência dos diferentes métodos de propagação e das melhores formas de implantação e utilização.