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Caracterización de genes rsf implicados en el control del ciclo celular en levaduraQueralt Badia, Ethel 25 July 2003 (has links)
En S. cerevisiae, al igual que en células de mamífero, el principal control durante el ciclo celular está situado al final de la fase G1, en un punto llamado START (Cross 1995). En START se coordina el crecimiento con la división celular la célula solo entrará en un nuevo ciclo celular si ha alcanzado un tamaño crítico y las condiciones medioambientales son apropiadas. Un proceso clave en START es la activación de un programa de transcripción específico de la fase G1 tardía. Dos factores de transcripción similares, SBF y MBF, son los responsables de esta regulación de la expresión génica. Con el objeto de un mejor conocimiento de los mecanismos moleculares que controlan START y la transición G1/S en el ciclo celular, se inició una estrategia de rastreo genético diseñada para identificar genes cuya mutación sea letal en combinación con una deleción en el gen SWI4 (Igual et al. 1996). De dicho rastreo se aislaron 14 mutantes rsf ("requiring SWI four"). La caracterización preliminar de estos mutantes puso de manifiesto que Swi4p interviene en muchas y variadas funciones además, e independientemente, de la regulación de las ciclinas CLN1,2 (Igual et al. 1997). Durante el presente trabajo se han caracterizado dos de estos mutantes rsf. En el caso del mutante clb5swi4, se ha demostrado la conexión funcional de la ciclina Clb5p, de la ruta PKC y del factor de transcripción SBF en procesos de metabolismo del DNA y en el mantenimiento de la integridad celular. También se ha demostrado que la inactivación del gen CLB5 provoca defectos en la integridad celular siendo un mutante clb5 sensible al tratamiento con SDS, CFW, latrunculina B, cafeína o a la digestión con enzimas que degradan la pared celular como la zimoliasa. Estos resultados indican que la ciclina Clb5p está implicada en el metabolismo de la pared celular y en el mantenimiento de la integridad celular. Por otro lado, se ha descrito que el gen ROT1, al cual se le había relacionado con la ruta PKC por estudios de interacciones genéticas, participa en la salida de mitosis y en citoquinesis. Se ha demostrado que Rot1p presenta funciones antagónicas a la ciclina Clb2p en el control de la salida de mitosis y participa en la regulación del citoesqueleto de actina. En el segundo caso, la caracterización del mutante msn5swi4 realizada durante los últimos años ha permitido identificar una relación funcional entre el factor de transcripción de ciclo celular SBF y la carioferina Msn5p. También se ha demostrado que Msn5p participa en el control de Start regulando la transcripción dependiente de SBF y no la de MBF. Msn5p es una carioferina que se requiere para la exportación de Swi6p al citoplasma en la transición G2/M del ciclo celular. Este mecanismo de exportación de Swi6p al citosol es esencial para su funcionalidad y es un proceso de regulación que actúa en cada ciclo celular. Nuestros resultados son un buen ejemplo de la importancia de la regulación espacial en el control del ciclo celular. En el caso de Swi6p el concepto de regulación espacial va más allá en el sentido de que un interruptor funcional de la proteína se acopla a cambios en la localización subcelular. En el curso del trabajo se observaron algunas diferencias funcionales entre las ciclinas Cln1p y Cln2p. Estas ciclinas son proteínas muy similares, su niveles se regulan por los mismos mecanismos moleculares y la actividad quinasa asociada fluctúa con la misma periodicidad. Además, numerosos estudios han puesto de manifiesto el solapamiento funcional entre estas dos ciclinas lo cual ha conducido a considerarlas como proteínas equivalentes. Sin embargo, diversas observaciones nos han permitido esclarecer el diferente papel que para la célula de levadura juegan Cln1p y Cln2p en la progresión en la transición G1/S del ciclo celular, concretamente en el proceso de gemación. / In S. cerevisiae, similarly with mammals cells, the major control point during cell cycle appears at late G1 phase, in a process called Start. In that moment cells decide to initiate or not a new round of cell division. In Start, when enviromental conditions are appropiate and cells reach a critical size, different processes begin such as DNA replication, bud emergence and spindle pole body duplication. One of the mechanisms contributing to cell cycle regulation is the control of transcription. In the budding yeast expression of some 250 genes is thougt to fluctuate throug the cell cycle. The transcription factors responsible for the periodic gene expression in late G1 phase are SBF (Swi4p-Swi6p) and MBF (Mbp1-Swi6p). To further understand Swi4p function, we step up a synthetic lethal screen for genes interacting with SWI4 (Igual et al. 1996). Fourteen conditional mutations which resulted in lethality only in the absence of SWI4 have been isolated. Two of these mutants, rsf12 and msn5swi4, were characterized in details in that work. In rsf12 mutant we were demonstrated a functional link between cyclin Clb5p, PKC pathway and SBF transcription factor in DNA metabolism and cell integrity. Moreover, we were characterized that ROT1 gen is functionally linked to the PKC pathway and is required for proper mitotic exit. In msn5swi4 mutant, we were identified that Msn5p is involved in control of Start, being required specifically for SBF activity but is not affecting MBF function. The karyopherin Msn5p is essential for the export of Swi6p to the cytoplasm during G2-M phases and this regulatory mechanism is acting in every cell cycle.
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Relações biogeográficas entre a avifauna de florestas de altitude no Nordeste do BrasilMariano, Erich de Freitas 21 November 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-11-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / A extensa área da região Nordeste do Brasil (1.540.827 km2) apresenta
grandes variações no relevo, com altitudes inferiores aos 300 m na Depressão
Sertaneja até áreas acima dos 1000m, como no Planalto da Borborema (Araujo et al.
1998). Essa variedade altitudinal é refletida na complexidade climática e
conseqüentemente na variabilidade de seus tipos vegetacionais. Algumas dessas
formações são áreas florestais, que cobrem desde porções litorâneas até áreas altas
incluídas no domínio florístico-vegetacional da Caatinga. Os ambientes florestais de
altitude encontrados na área da Caatinga podem estar relacionadas aos domínios da
Floresta Atlântica, nos chamados Brejos de Altitude (Andrade-Lima, 1982), ou ainda
das Florestas Neotropicais Estacionais Secas (FNES).
As FNES são ecossistemas essencialmente dominados por árvores, com copa
contínua ou quase contínua e na superfície do solo as ervas são os elementos de
menor quantidade, quando comparadas a vegetação de savanas (Monney et al. 1995,
Pennington et al. 2006). Segundo Gentry (1995) e Graham & Dilcher (1995), essas
florestas secas ocorrem onde a precipitação é menor que 1600 mm/ano, com um
período de no mínimo 5-6 meses recebendo menos que 100 mm.
Rodal et al. (2008) demonstraram que, no nordeste do Brasil, as florestas secas
estacionais estão localizadas onde o limite máximo de precipitação é 1000 mm e, no
mínimo, oito meses do ano recebem menos 100 mm. Essas formações podem ser
encontradas atualmente em margens de rios, como as matas secas do rio São
Francisco e em áreas serranas, constituindo florestas de altitude em meio à vegetação
arbustiva circundante, no domínio das caatingas. Nos estados de Pernambuco e
Paraíba, o planalto da Borborema propicia a formação de microclimas com temperaturas mais baixas e maior precipitação que nas áreas adjacentes (Andrade-
Lima, 1982).
Os enclaves florestas em meio a Caatinga são considerados refúgios atuais de
espécies dos ambientes florestais que teriam dominado o centro da região Nordeste
em um período geológico mais úmido que o atual (Andrade-Lima, 1982). A teoria de
refúgios pleistocênicos foi apresentada ainda nas décadas de 1960-1970 (eg. Haffer,
1969; Vanzolini & Williams, 1970; Brown e Ab Sáber, 1979) e estudos com a fauna
mésica desses ambientes corroboraram com esta proposta (e.g. Mares et al. 1985). No
entanto, análises de distribuição de táxons realizadas mais recentemente (eg. Santos et
al. 2007, Roda et al. 2008, Carvalho 2013), bem como filogenias moleculares de
alguns táxons relacionados a essas florestas, estão disponíveis apenas na última
década e, portanto, outros sinais históricos que podem suportar, refutar ou
complementar as histórias clássicas são possíveis de ser averiguados.
Estudos comparativos da composição da avifauna associada aos ambientes
florestais e estudos filogeográficos de espécies que ocorrem nas florestas de altitude
no nordeste podem contribuir para explicar relações entre essas formações florestais.
Visando testar a hipótese de múltiplas origens para as florestas de altitude
utilizaremos três ferramentas: (1) análises da composição de comunidades de aves
dependentes de ambientes florestais que ocorrem em diferentes florestas de altitude
através de métodos cladísticos; (2) Análise do padrão de distribuição de espécies com
ocorrência em florestas de altitude no nordeste setentrional, discutindo seus padrões
de distribuição e histórias filogenéticas de taxa a elas relacionados; (3) e estudo
filogeográfico de uma espécie de ave Passeriforme que ocorre nessas florestas.
Para isso pretende-se nesse projeto: (a) verificar a composição da avifauna de
florestas de altitude no nordeste brasileiro, através de amostragens de campo, visitas a museus e recuperação de dados publicados; (b) comparar a composição da avifauna,
utilizando um misto da Análise de Parcimônia e Endemismo (PAE) e da Análise
Cladística de Distribuição e Endemismo (CADE), e (c) obter filogegrafia de Arremon
taciturnus, espécies de ave Passeriforme associada a tais ambientes florestados.
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Etnobotânica da exploração de espécies vegetais para confecção do cerca-fixo na região do Parque Estadual Ilha do Cardoso, SPOliveira, Flávia Camargo de January 2007 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biologia Vegetal / Made available in DSpace on 2012-10-23T14:19:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Efeito neuroprotetor do flavanoide rutina em modelos de excitotoxicidade induzida por glutamatoFerreira, Rafael Short 27 October 2016 (has links)
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Dissertação Rafael Short Ferreira_PMBqBM-UFBA.pdf: 1518060 bytes, checksum: cccc6bd7647121b1ae8a81b5c9c1943a (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-07-03T15:02:04Z (GMT) No. of bitstreams: 1
Dissertação Rafael Short Ferreira_PMBqBM-UFBA.pdf: 1518060 bytes, checksum: cccc6bd7647121b1ae8a81b5c9c1943a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-03T15:02:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Dissertação Rafael Short Ferreira_PMBqBM-UFBA.pdf: 1518060 bytes, checksum: cccc6bd7647121b1ae8a81b5c9c1943a (MD5) / FAPESB / Rutina é um flavonoide glicosilado que apresenta diversas atividades biológicas
incluindo anti-inflamatória, antitumoral e efeitos farmacológicos promissores no
sistema nervoso central (SNC). A morte neuronal induzida por excitotoxicidade
glutamatérgica está presente em diversas doenças e envolve diversas alterações
celulares, incluindo danos mitocondriais. Para prevenir a excitotoxicidade, o
glutamato é removido pelos astrócitos e convertido em L-glutamina, através da ação
da glutamina sintetase (GS). O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos
neuroprotetores da rutina com vistas na proteção mitocondrial e modulação de
proteínas envolvidas na detoxificação do excedente de glutamato pelos astrócitos..
Estudos de efeitos neuroprotetores foram realizados em dois modelos de estudo do
SNC: culturas organotípicas de cérebro de ratos Wistar neonatos (P8) expostas ao
glutamato (60 mM) por 24 h, concomitantemente a tratamento com rutina (0.5 – 1μM) e culturas primárias mistas de células isoladas do cerebelo de ratos Wistar (P8) expostas ao glutamato (10 mM) por 24 h e iniciado 4 h antes do tratamento com
rutina (0,5 μM). A viabilidade celular e os níveis de expressão de GS, de GLAST e
de GLT1 em cultura organotípica cortical foram avaliados por captação de Iodeto de
Propídio (IP) e Western blotting, respectivamente. A viabilidade neuronal em culturas primárias de cerebelo foi avaliada por coloração com Fluoro-Jade B. Além disso, a
proteção mitocondrial pela rutina foi avaliada através do potencial de membrana e análise de produção ERO, usando safranina O e Amplex Red como sondas, respectivamente, em mitocôndrias isoladas a partir do encéfalo de ratos Wistar
adultos expostas à rotenona. Na cultura organotípica, os nossos resultados
mostraram que o glutamato (60 mM) induziu o aumento da intensidade de fluorescência relativa ao IP incorporado, que foram reduzidos em tratamentos com
0,5 μM e 1 μM de rutina. Ainda, foi demonstrado que rutina induziu aumento na
expressão de GS e GLAST em tratamentos concomitantes com glutamato. Em
culturas primárias de cerebelo, os nossos resultados mostraram que o glutamato (10
mM) induziu o aumento no número de células Fluoro-Jade B positivas, que não foi
reduzido por pós-tratamento com rutina (0,5 μM). Em mitocôndrias isoladas
observamos que a rutina (10 μM) reduziu a dissipação do potencial de membrana e
reduziu a produção de ERO. Conclui-se que a rutina é um agente neuroprotetor com
potencial para prevenir a excitotoxicidade induzida por glutamato e sugere-se que
esse efeito envolve proteção mitocondrial e regulação do metabolismo do glutamato
por astrócitos. No entanto, mais estudos são cruciais, a fim de elucidar o mecanismo molecular de neuroproteção induzida por rutina contra danos causados por
glutamato e compreender o papel das células gliais, especialmente astrócitos na bioatividade de rutina.
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Relação do tecido adiposo e das adipocinas com os parâmetros bioquímicos e imunológicos na leishmaniose visceral expreimentalSousa, Adenilma Duranes 26 October 2016 (has links)
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Dissertação Adenilma Duranes Sousa_PMBqBM-UFBA.pdf: 2663510 bytes, checksum: fba19cb0e919e73195f00b46394234aa (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-07-28T14:01:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1
Dissertação Adenilma Duranes Sousa_PMBqBM-UFBA.pdf: 2663510 bytes, checksum: fba19cb0e919e73195f00b46394234aa (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-28T14:01:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Dissertação Adenilma Duranes Sousa_PMBqBM-UFBA.pdf: 2663510 bytes, checksum: fba19cb0e919e73195f00b46394234aa (MD5) / As leishmanioses são infecções causadas pelo tripanosomatídeo Leishmania sp.
Estima-se que 350 milhões de pessoas estão sob o risco de contrair leishmaniose, em
todo mundo. A Leishmaniose visceral (LV) é a forma clínica mais grave da doença.
Os principais sintomas apresentados são febre prolongada, hepatomegalia,
esplenomegalia, hipergamaglobulinemia, pancitopenia, perda de peso, e em casos
não tratados, óbito. Algumas alterações bioquímicas e metabólicas são observadas
na VL, principalmente aumento das concentrações plasmáticas de triglicerídeos,
colesterol e LDL. O tecido adiposo e as adipocinas, podem participar da regulação da
resposta imune em processos inflamatórios e em diversas infecções. O objetivo geral
desse trabalho foi investigar a relação do tecido adiposo e das adipocinas com
parâmetros bioquímicos e imunológicos observados na leishmaniose visceral
experimental. Foram utilizados 41 hamsters dourados (Mesocricetus auratus) machos
adultos, com peso médio de 132 gramas. Os animais foram infectados com 1X105
promastigota de L. infantum na derme da orelha. A eutanásia ocorreu 4 e 8
meses após a infecção. O Tecido adiposo, o baço e o fígado foram coletados, pesados
e acondicionados em solução de conservação. A carga parasitária do baço e fígado,
foi avaliada por meio da técnica de diluição limitante. A expressão das citocinas no
baço foi avaliada por meio da realização do qRT-PRC. Os parâmetros bioquímicos e
as adipocinas foram dosadas no soro. Foi realizada a análise histopatológica e a
morfometria do tecido adiposo corado por HE. As análises estatísticas foram
realizadas usando o Software GraphPad Prism 5.0. Os animais infectados
apresentaram perda de peso e esplenomegalia no oitavo mês de infecção. Os animais
apresentaram carga parasitária moderada, tanto no baço, quanto no fígado. Não
houve diferença na expressão das citocinas, nem na concentração sérica dos
parâmetros bioquímicos e das adipocinas. A carga parasitária do baço e do fígado
apresenta correlação negativa com os níveis de albumina. A carga parasitária do baço
apresentou correlação negativa com os níveis de colesterol total. A Análise de
correlação das adipocinas, mostrou que a adiponectina está correlacionada
negativamente com as concentrações de glicose e albumina dos animais controles. E
a leptina apresentou correlação negativa com o peso relativo do baço no grupo dos
animais controle e correlação positiva com as concentrações séricas de triglicérides e
VLDL, em ambos os grupos. Adicionalmente, a leptina apresentou correlação positiva
com a carga parasitária do baço e com o peso relativo do tecido adiposo epididimal e
retroperitoneal. Já as concentrações de HDL estão correlacionadas negativamente
com os níveis de leptina, em hamster infectados com L. infantum. As análises de
correlação mostraram que leptina tem relação com o estabelecimento da LV em
hamsters.
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Estratégias nutricionais para a otimização da produção de exopolissacarídeos pela cepa Enterobacteramnigenus LABEMMoreira, Roseane Vieira 28 July 2016 (has links)
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Dissertação Final- Roseane Vieira.pdf: 1667496 bytes, checksum: 33e7b129ca1046278a4c54de04972385 (MD5) / Approved for entry into archive by Edvaldo Souza (edvaldosouza@ufba.br) on 2017-09-19T18:55:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1
Dissertação Final- Roseane Vieira.pdf: 1667496 bytes, checksum: 33e7b129ca1046278a4c54de04972385 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-19T18:55:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Dissertação Final- Roseane Vieira.pdf: 1667496 bytes, checksum: 33e7b129ca1046278a4c54de04972385 (MD5) / Capes / A meta desse trabalho é testar fatores do processo de cultivo que podem diretamente influenciar no rendimento da produção de exopolissacarídeos (EPS) por uma cepa de Enterobacter amnigenus LABEM em meio salino. A produção de EPS em meio salino foi pensada para dar suporte a um potencial processo de reutilização in situ de água de produção que é gerada durante a recuperação de petróleo em poços maduros situados em plataformas marinhas. Dessa forma o EPS produzido poderia ser utilizado para suplementar a água de injeção, que é também utilizada no processo de recuperação de petróleo. A base do meio, portanto, é a água de produção salina suplementada com uma fonte adicional de carbono para ajudar a sustentar o crescimento microbiano. O glicerol foi testado em um trabalho anterior por ser uma substância de baixo custo e facilmente disponível na indústria do petróleo e de biocombustível. Essa pesquisa dá prosseguimento ao trabalho mencionado e os testes de otimização foram baseados em informações de literatura. Foram escolhidos 6 fatores nutricionais com potencial para influenciar o aumento da produção de EPS: (i) adição de biosurfactante, (ii) adição de etanol, (iii) combinação de etanol e biosurfactante, (iv) complementos de substâncias nitrogenadas orgânicas e inorgânicas como: ácido casamínico, L-aspargina e nitrato de amônio, respectivamente, (v) adição de substância estressante/estimulante como o ácido bórico e (vi) mudanças na relação C:N. Os três primeiros fatores foram testados através da experimentação estatística de “Superfície de Resposta”. Os complementos nutricionais foram testados de acordo com concentrações sugeridas em literatura. A melhor produção de EPS (4,8 g.L-1) aconteceu nas condições de 240 rpm, 35°C e com a suplementação de 0,015% de surfactante e 2% de etanol em pH 7. Esse valor foi 3 vezes maior do que o controle (1,49 g.L-1). As suplementações com ácido bórico, ácido casamínico, L-aspargina e nitrato de amônio apresentaram uma produção média de 2,21; 2,94; 2,46 e 2,63 g.L-1, respectivamente. Portanto, conclui-se que a adição do surfactante e etanol aumentaram significativamente a produção de EPS pela cepa Enterobacter amnigenus LABEM em meio salino
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Caracterização do folículo piloso como nicho de células progenitoras neurais e epidermais em camundongosPereira, Ricardo Mueller Cesario January 2011 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T06:06:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1
295105.pdf: 2193083 bytes, checksum: 9a0cebe808795e41f914d26e96e95c19 (MD5) / Células tronco são células com capacidade de auto renovação, e de diferenciação em diversos tipos celulares. Nos últimos anos, muitos estudos têm se dedicado à identificação de células tronco em tecidos adultos como modo de desenvolver estratégias para regeneração e reparo tecidual. A crista neural é uma estrutura embrionária de vertebrados, originada na parte dorsal do tubo neural em fechamento, durante o processo de neurulação. Estas células possuem uma característica migratória, que é iniciada com o fechamento do tubo neural, e são distribuídas pelo embrião contribuindo para o desenvolvimento de vários tecidos. O folículo piloso é uma estrutura exclusiva de mamíferos, e é considerado um anexo do tecido epitelial. Esta estrutura possui uma composição complexa, que inclui glândula sebácea, a saliência do bulge, eixo do cabelo (que se projeta externamente da epiderme), e a papila dermal. Assim como outros tecidos adultos o folículo piloso dispõe de células tronco residentes, presentes no bulge, que é um discreto microambiente, também conhecido como saliência do folículo piloso. As células tronco epidermais encontradas no bulge são identificadas principalmente pela expressão das citoqueratinas 15 e 19 (KRT 15 e 19). Em contrapartida, também são encontradas no bulge, células que apresentam as citoqueratinas 5 e 14 (KRT15 e 14), que caracterizam células no estágio final de diferenciação da linhagem epidermal. Com isso, nosso trabalho focou em analisar o folículo piloso de vibrissas de camundongos como potencial nicho de células tronco com características epidermais e de crista neural, avaliando diferentes condições de cultivo. Utilizamos camundongos com idade entre 8 e 10 semanas, dos quais eram isoladas as vibrissas, o folículo piloso dissecado, e o bulge cultivado como explante. As culturas de explante do bulge eram realizadas em placas de 24 poços sobre colágeno tipo I. Após 7 ou 14 dias estas eram fixadas para realização de imunoflorescência indireta ou extração de mRNA e realização do RT-PCR. Os marcadores celulares testados foram KRT14, P75, Nestina e TRP2. . Avaliamos a ação dos meios simples, simples com EE e complexo, além de verificar os efeitos da adição do morfógeno sonic headhog (SHH, 10nM e 100nm) ao meio complexo e também medimos o halo de migração/crescimento em volta do explante. Observamos que as células iniciam sua migração do explante para a placa de cultura por volta do 4o dia de cultivo e representam uma população heterogênea com grandes variações nas mesmas condições testadas. Estas células apresentam características epidermais (TRP2 e KRT14, marcadores de melanócitos e queratinócitos, respectivamente) e também de crista neural (Nestina e P75). A expressão dos marcadores de crista neural foi mais expressiva nas culturas de 14 dias. O meio complexo também se mostrou mais eficiente que os demais, em relação a migração das células KRT14 do folículo piloso para a placa de cultura e diferenciação para queratinócitos. Em conjunto, nossos resultados demonstram que o folículo piloso corresponde a um nicho com populações de células progenitoras com características epidermais e de crista neural e com importante potencial terapêutico e biotecnológico. / Stem cells are cells with self-renewal ability and differentiation into various cellular types. In recent years, many studies have been dedicated to the identification of stem cells in adult tissues as a way to develop strategies for regeneration and tissue repair. The neural crest is an embryonic structure of vertebrates, originated at the dorsal neural tube closure, during the process of neurulation. These cells have a migratory feature, which starts with the closure of the neural tube, and are distributed by embryo contributing to the development of various tissues. The hair follicle is a unique structure to mammals, and is considered an attachment of epidermal tissue. This structure has a complex composition, which includes sebaceous gland, the bulge salience, the hair shaft (that falls outside of the epidermis), and the dermal papilla. As well as other adult tissues has the follicle stem cells residents in the bulge, which is a discreet microenviroment, also known as salience of the follicle. The epidermal stem cells found in the bulge are identified mainly by the expression of cytoqueratins 15 and 19 (KRT 15 and 19). In contrast, are also found in the bulge, cells that have the cytokeratins 5 and 14 (KRT15 and 14), that characterize cells in the final stage of epidermal lineage. With this, our work focused on analyzing the follicle pits of mice as potential stem cell niche with epidermal features and neural crest, evaluating different cultivation conditions. We use mice aged between 8 and 10 weeks of which were isolated from the whiskers, the follicle dissected, and the bulge cultivated as explants. Explants cultures of the bulge were realized in 24 wells plate dishes, on type I collagen. After 7 or 14 days these cultures were fixed for achievement of indirect immunofluorescence or mRNA extraction and realization of RT-PCR. This cells markers was tested were KRT14, P75, Nestin and TRP2. . Evaluate the action simple medium, simple medium with EE and complex medium, and check the effects of addition of morfogen sonic headhog (SHH, 10nM to 100nm) in the complex medium and also measure the migration/border around the explants growth. We note that the cells start their migration from explants culture card around the day 4 of cultivation and represent a heterogeneous population with large variations in the same conditions tested. These cells presents epidermal characteristics (TRP2 and KRT14, markers of melanocytes and keratinocytes, respectively) and also of neural crest (Nestina and P75). The expression of neural crest markers was more expressive with 14 days. The complex also proved more efficient than the other, in relation to the cells migration KRT14 follicle to the culture and differentiation to keratinocytes. Together, our results show that the follicle is a niche with populations of progenitor cells with epidermal characteristics and neural crest and important potential therapeutic biotechnology.
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Caracterização florística e fitossociológica da vegetação arbustivo-arbórea colonizadora de uma área degradada por mineração de caulim, no município de Brás Pires, MG / Floristic and phytosociology characterization of shrub and tree vegetation colonizing an area degraded by kaolin mining in municipal district of Brás Pires, MGAraújo, Fernanda Sguizzatto de 21 February 2005 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-02-16T11:54:55Z
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Previous issue date: 2005-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Este estudo teve por objetivo caracterizar a composição florística e a estrutura fitossociológica da vegetação arbustivo-arbórea colonizadora e o solo, de uma área degradada por mineração de caulim, em Brás Pires, MG. A atividade minerária foi iniciada em 1980 e finalizada em 1985. Nos 20 anos subseqüentes, a encosta onde foi depositado o estéril, anteriormente utilizada como pastagem, foi isolada e um processo de regeneração natural iniciou-se, estando atualmente ocupada por uma vegetação florestal secundária. O levantamento fitossociológico abrangeu uma área de 0,5 ha subdividida em 50 parcelas contíguas de 10 m X 10 m. Foram incluídos todos os indivíduos com CAP igual ou maior a 10 cm. A composição florística foi o resultado desse levantamento, acrescida de coletas fora da área de amostragem. As espécies amostradas foram classificadas quanto à categoria sucessional e síndrome de dispersão e os indivíduos foram agrupados em classes de diâmetro. Fez-se uma comparação com 9 levantamentos realizados em florestas da região e um do estado de São Paulo, em estádios sucessionais distintos, para a verificação da similaridade florística entre as áreas. Para a caracterização do substrato foram amostrados três perfis ao longo da encosta. As amostras de cada horizonte foram submetidas a análises químicas e físicas. A amostragem fitossociológica resultou em 1010 indivíduos, pertencentes a 47 espécies distribuídas em 40 gêneros e 25 famílias. Destacaram-se em valor de importância as espécies Piptadenia gonoacantha, Luehea grandiflora, Anadenanthera peregrina, Cecropia glaziovi, Cecropia hololeuca e Xylopia brasiliensis. A florística totalizou 64 espécies, distribuídas em 50 gêneros e 30 famílias. As famílias com maior número de espécies foram Leguminosae (11), Annonaceae (5), Lauraceae e Melastomataceae (4), enquanto o gênero de maior riqueza específica foi Machaerium com 3 espécies. A maior similaridade florística ocorreu com um fragmento em Cruzeiro, SP, estando ambas as áreas em início de sucessão. Na distribuição das espécies em categorias sucessionais, as secundárias inicias ocuparam a primeira posição, seguidas das pioneiras, perfazendo juntas, 80% do total das espécies amostradas. A maioria das espécies (62%) foi dispersa por animais, enquanto que a maioria dos indivíduos (68%), foi dispersa pelo vento. Isso sugere que a colonização da área foi iniciada por espécies anemocóricas, destacando a importância de indivíduos remanescentes, além da proximidade de fragmentos e sua fauna associada. A análise da distribuição dos diâmetros revelou uma comunidade em plena regeneração, com representação em todas as classes diamétricas. O substrato, nas condições em que se encontra, não impede o estabelecimento da vegetação. Há uma diferenciação clara entre o material de origem do solo (horizonte C), a camada de estéril e o solo original (soterrado). Os solos são predominantemente arenosos, principalmente com relação à camada de depósito e o horizonte C. Todos os horizontes foram classificados como franco arenosos, com exceção dos horizontes do solo soterrado. O solo demonstrou baixa fertilidade natural, baixa CTC e saturação de bases. No geral, os valores de saturação de alumínio foram altos, assim como o carbono orgânico. O pH e a acidez potencial (H+Al) foram considerados médios. A camada de estéril apresentou os maiores valores para a maioria das variáveis medidas, sendo os valores encontrados para as outras camadas mais baixos. Assim, pode-se inferir que o papel da ciclagem de nutrientes nesse sistema tem sido fundamental para a manutenção da vegetação, assim como sua capacidade de retenção de água, permitindo um adequado suprimento de umidade. / This research aimed to characterize the floristic composition and the phytosociology structure of shrub and tree vegetation colonizing and the soil of an area degraded by kaolin mining, in Brás Pires, MG. The mining activity begun in 1980 and it concluded in 1985. In the 20 subsequent years, the hillside where the mine spoil was deposited previously used as pasture was isolated and a process of natural regeneration began, being now colonized for secondary forest vegetation. The phytosociological survey utilized a grid plots containing 50 plots 10 m X 10 m each totalizing 0,5 hectare. All individuals with a trunk circumference of 10 cm at 1,30 m from the soil level were sampled. The floristic composition is the result of the sampled area plus species collected outside of it. The species sampled were grouped in sucessional category and dispersion syndrome, and the individuals were grouped in diameter classes. The floristic similarity was made with 9 surveys accomplished in forests of the area and one in SP. For the substratum characterization three profiles along the hillside were sampled. The samples of each horizon were submitted the chemical and physical analyses. A total of 1010 individuals were sampled belonging to 47 species distributed in 40 genus and 25 families. The greater importance value was obtained for Piptadenia gonoacantha, Luehea grandiflora, Anadenanthera, Cecropia glaziovi, Cecropia hololeuca and Xylopia brasiliensis. The floristic totalized 64 species, distributed in 50 genus and 30 families. The families with the greater number of species were Leguminosae (11), Annonaceae (5), Lauraceae and Melastomataceae (4). The richest genus was Machaerium with 3 species. The greatest floristic similarity occurred in Cruzeiro, SP, being both areas in beginning succession. In the distribution of the species in sucessionais categories, the initials secondary species occupied the first position, followed by the pioneers both 80% of the total of the species sampled. The majority of species (62%) was vertebrate dispersed but the majority of individuals (68%) was wind dispersed species. These suggest that initial vegetation was start by anemochorous species, showing the importance of remnant individuals, surroundings forest fragments and its fauna. Trunk diameter distribution analysis revealed that the community was in stage of full regeneration, with individuals distributed over all diameter classes. The soil analysis reveled that it will not interfere in the vegetation colonization. There is a clear differentiation among the material of origin of the soil (horizon C), the layer of mine spoil and the original soil (buried). The soils are predominantly sandy, mainly the deposit layer and the horizon C. All the horizons were classified as franc-sandy, except for the horizons of the buried soil. The soil demonstrates low fertility, low CEC and saturation of bases. In the general, the values of saturation of aluminum were high, as well as the organic matter and the carbon. The pH and the potential acidity (H+Al) were considered medium. The layer of mine spoil, presented the largest values for most of the measured variables, being the lowest values found for the other layers. Then, it can be inferred that the role of the nutrient cycling in that system has been fundamental for the maintenance of the vegetation, as well as your capacity of water retention, allowing an appropriate humidity supply.
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Efeito de estresses hídrico e salino sobre algumas especies nativas da restinga / Effects of water and salt stresses under some native species of restingaKuki, Kacilda Naomi 19 September 1996 (has links)
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Previous issue date: 1996-09-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES, Brasil / O presente trabalho teve como objetivo verificar o efeito dos estresses hídrico e salino sobre espécies nativas da restinga. Num primeiro experimento foi monitorado o potencial osmótico das espécies Jacquinia brasiliensis, Guapira pernambucensis e Canavalia obtusifolia, que cresciam em campo. Mensalmente, coletou-se, em blocos aleatórios, a primeira folha mais jovem totalmente expandida de cada espécie e extraiu-se o suco celular, utilizado para a leitura do potencial osmótico no microsmômetro de precisão. Verificou-se que o potencial osmótico das três espécies variou de acordo com o índice pluviométrico, apresentando elevada correlação linear negativa. Num segundo experimento verificou-se o efeito da simulação do estresse hídrico cíclico e do aerosol salino sobre C. obtusifolia, em quatro tratamentos, sem estresse (SE), estresse com aerosol salino (ES), estresse hídrico cíclico (EH) e estresse hídrico cíclico mais aerosol salino (EHES). O delineamento foi de parcelas subdivididas em fatorial 2x2, dispostas em blocos casualizados. Os tratamentos com estresse hídrico constaram da suspensão da irrigação dos vasos até que o potencial hídrico do solo atingisse o valor irrigação era aproximado de -1,5 MPa, quando a retomada até elevar o potencial hídrico a -0,03 MPa. Nos tratamentos com aerosol salino foi aplicada uma solução de NaCl, a 450 mM, sobre as folhas. No total foram oito semanas de estresses hídrico e salino e, no final de cada semana, as plantas eram expostas à simulação de chuva. A cada duas semanas, foram realizadas avaliações fisiológicas e de crescimento. O aerosol salino e o estresse hídrico provocaram redução significativa nos potenciais osmótico e de pressão das folhas, enquanto o potencial hídrico das mesmas não variou. Os tratamentos com estresses induziram a um ajuste osmótico nas folhas em relação ao tratamento SE. O tratamento EH provocou incremento no conteúdo de prolina. A suculência foliar foi incrementada pelo aerosol salino. A resistência estomática incrementou, enquanto a transpiração e a taxa fotossintética decresceram, nos tratamentos com estresses hídrico e salino. As eficiências no uso da água e fotoquímica não foram afetadas pelos estresses. O crescimento, tanto em extensão quanto em ganho de matéria seca, não foi severamente reduzido por nenhum dos tratamentos. / The present work objected to verify the effects of water and salt stresses under native species of restinga. In the first experiment the osmotic potential of the species Jacquinia brasiliensis, Guapira pernambucensis and Canavalia obtusifolia, in the field condition, was monitoreded. During one year, every month the first yuong totally expandet leave of each specie was randomized colected. The celular sap of these leaves were colected and their osmotic potential determined by microsmometer. It was verified that the osmotic potential of those species changed with the amount of the rain falled in the month, showing high negative linear correlation. In the second experiment were verified the effects of the water cyclic stress and salt spray on C. obtusifolia cultivated in pots under glasshouse conditions. Four treatments were applied on this specie : no stress (SE), salt spray stress (ES), water cyclic stress (EH) and water cyclic stress plus salt spray stress (EHES). The statistical delimiation adopted was the subdivided parcel in fatorial 2x2 distributed in randomized blocks. In the treatments with water stress, the irrigation was cut until the water potential of the soil had reached -1,5 MPa, when the irrigation was retook to rise the soil potential to -0,03 MPa. In the treatments with salt spray, the plants were treated with a solution of 450 mM of NaCl daily sprayed on their leaves. The treatments were applied during eight weeks and on the end of each week, the plants were submeted to a rain fall simulation. Each two weeks were carried out physiologial and growth analysis. The salt spray and the water stresses reduced the osmotic and the pressure potential of the leaves, while the water potential did not changed. The three treatments with stresses induced to an osmotic adjustement of the leaves in relation to the treatment SE. The treatment EH increased the proline content. The leave`s succulence was improved by salt spray. The stomatal resistence was improved, while the transpiration and photossyntetic rates were reduced by both stresses. The water and photochimical efficiences did not change. The growth of the plants was not reduced severaly on nome of the treatments.
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Peroxidação de lipídios em membranas e tecidos de dois cultivares de sorgo (Sorghum bicolor (L.) Moench) com tolerância diferencial ao alumínio / Lipids peroxidation in membranes and tissues of two sorghum cultivars (Sorghum bicolor (L.) Moench) with differential tolerance to aluminumPeixoto, Paulo Henrique Pereira 23 September 1997 (has links)
Submitted by Gustavo Caixeta (gucaixeta@gmail.com) on 2017-02-22T16:31:07Z
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Previous issue date: 1997-09-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES, Brasil / Neste trabalho, estudaram-se os efeitos do alumínio (Al) em nível tóxico sobre os sistemas metabólicos que controlam a produção e a eliminação de radicais livres e, consequentemente, a peroxidação dos lipídios em plantas de dois cultivares de sorgo, um sensível (BR007A) e outro tolerante (BR006R) ao Al, cultivadas durante 10 dias em solução nutritiva, pH 4,0, na presença (0,185 mM) e na ausência do Al. Na presença do Al, a atividade da H + -ATPase reduziu no sistema radicular das plantas, mas, principalmente nas membranas plasmáticas provenientes dos ápices das raízes do cultivar tolerante. Dentre as principais modificações verificadas sobre a composição de ácidos graxos das membranas na presença do Al, as mais importantes foram observadas nos ápices das raízes, onde a relação ácidos graxos insaturados/ácidos graxos saturados e, principalmente, o índice de ligações duplas para ácidos graxos com dezoito carbonos foram bastante reduzidos no cultivar sensível. Na presença do Al, a concentração do ácido linolênico reduziu nas membranas provenientes dos ápices das raízes do cultivar sensível, mas, de modo contrário, aumentou muito no tolerante. A atividade enzimática nos tecidos das plantas foi bastante alterada na presença do Al. A atividade das peroxidases aumentou nas raízes e nas folhas dos dois cultivares, principalmente no sensível. De modo contrário, a atividade das peroxidases do ascorbato e das catalases reduziu nesses tecidos, exceto nas raízes do cultivar sensível, onde o aumento da atividade das peroxidases do ascorbato foi observado. A atividade das dismutases do superóxido e das oxidases dos polifenóis aumentou, respectivamente, apenas nas folhas do cultivar tolerante e nas raízes do sensível. A atividade das lipoxigenases aumentou nas folhas em maior intensidade no cultivar tolerante, mas, de modo contrário, reduziu nas raízes em maior intensidade no cultivar sensível. Nas raízes das plantas, a atividade das amônia liases da fenilalanina reduziu nos dois cultivares, mas em maior intensidade no tolerante. A atividade das desidrogenases dos álcoois cinamílicos aumentou nas raízes do cultivar tolerante, mas reduziu no sensível. Na presença do Al, o teor de lignina aumentou nas raízes de ambos os cultivares, porém em maior intensidade no tolerante. O teor de compostos fenólicos solúveis aumentou na presença do Al nas raízes e nas folhas dos dois cultivares, principalmente no sensível. Todos os resultados sugerem que, na presença do Al, o cultivar tolerante produza menores quantidades de radicais de oxigênio livres ou, então, possua mecanismos enzimáticos de remoção, de imobilização e, ou, de neutralização desses radicais mais eficientes que no cultivar sensível, o que, aparentemente, resultou na menor intensidade de peroxidação dos lipídios nos tecidos das raízes e da parte aérea e, especificamente, nas membranas provenientes dos ápices das raízes das plantas do cultivar tolerante. / In this work, the effects of aluminum (Al) at toxic level upon the metabolic systems that control the formation and scavenging of free radicals and, consequently, the lipid peroxidation in plants were examined. The plants were grown for 10 days in nutrient solution, pH 4.0, in the presence (0.185 mM) and absence of Al. The H + -ATPase activity was reduced in the root system of both cultivars, specially in the membranes from the root tips of the tolerant cultivar. Among the main changes observed in the composition of membrane fatty acids in the presence of Al, the more important ones occurred in the root tips. In this case, the ratio of unsaturated fatty acids to saturated fatty acids, and specially the double bond index for 18 carbon fatty acids were quite reduced in the sensitive cultivar. The concentration of linolenic acid was reduced in root tip membranes of the sensitive cultivar in the presence of Al, while a great increase was obtained in the tolerant one. The enzymatic activity in plant tissues was greatly altered by the presence of Al. Peroxidases activity was increased in roots and leaves of both cultivars, but mostly in the sensitive one. On the other hand, ascorbate peroxidases and catalases activities were reduced in these tissues, except in the roots of the sensitive cultivar in which an increase in ascorbate peroxidases was observed. Superoxide dismutases and polyphenol oxidases activities were increased only in the leaves of the tolerant cultivar, and in the roots of the sensitive one. Lipoxygenases activities were increased in the leaves, but were reduced in the roots of both cultivars. The increase and reduction of lipoxygenases activities was greater in the leaves of tolerant and in the roots of the sensitive cultivar, respectively. In the roots, the phenylalanine ammonia-lyase activity was reduced in both cultivars, but mostly in the tolerant one. The activity of cinnamyl alcohol dehydrogenases was increased in the roots of the tolerant cultivar, and was reduced in those of the sensitive one. Lignin content raised in the roots of both cultivars in the presence of Al, but the increase was greater in the tolerant one. Aluminum increased the content of soluble phenolic compounds in the root and leaves of both cultivars, but mostly in the sensitive one. All the results suggest that in the presence of Al, the tolerant cultivar produces less oxygen free radicals or that it has more efficient enzymatic mechanisms of removing, neutralizing and/or scavenging them than those of the sensitive cultivar. This apparently led to a lower lipid peroxidation in the tissues of roots and leaves, and specifically, in the root tip membranes from the tolerant cultivar.
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