Made available in DSpace on 2015-04-20T12:31:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Helenires Quiroz de Souza.pdf: 4253901 bytes, checksum: 8968bf2a9d9d6e181ad4528e0b805f1b (MD5) Previous issue date: 2006-05-31 / The Class Basidimycetes is formed by those fungi called mushroom ande ar-of-wood, beyond others groups less known. Due to the importance of this group of fungi, the biotechnological potential was investigated in this study. The mushroom were collected in forest areas of campus of University of Amazonas (UFAM), Bosque da Ciência and campus V8 (INPA), Reserva de Campina (INPA), located in BR 174, km 45, Manaus, Amazonas and Urucu (Coari/AM). After the isolation micelial, the fungi were evaluated as regards the growth at 280C, for 30 days in liquid cultures GPY and BD to determine the antimicrobial activity. The samples were filtered and the mycelium was dry to determine the biomass. The culture filtrates had been tested against Ralstonia solanacearum, agent of bacterial wilt of several vegetal species, Corynespora sp., Colletotrichum sp., Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus e Salmonella anatum. For an enzyme production study, the fungus had been cultivated in liquid culture and tested in solid medium for proteases, amylases, cellulases, pectinases and phenoloxidases. In another stage, the production of amylases and proteases in different nutritives sources was studied. Sixty samples of Basidiomycetes were collected from February to June 2003. The families Agaricaceae, Auriculariaceae, Cantharellaceae, Ganodermataceae, Hygrophoraceae, Polyporaceae, Russulaceae, Stereaceae, Tremellaceae e Tricholomataceae had been identified. The Reserva de Campina was the one that presented greater diversity of fungi. The results demonstrated inhibitory effect of culture filtrates against bacterial strains tested. The species E. coli, S. anatum and B. cereus, beyond inhibition halos, had presented halos of grown stimulus. It was not effect against the fungi Corynespora sp. and Colletotrichum sp.. The culture filtrate Trametes sp. presented greater activity of inhibition. The medium BD favored greater production of dry biomass. The production of protease an amylase was detected for all the isolated ones, four produced amylases, five produced phenoloxidases and one produced pectinase. For production of amylases, fungi cultivated in medium added of wheat bran had gotten biggest halos. For proteases, the biggest halos had been observed for the fungi grown in way with fish flour. / A classe Basidiomycetes é formada por aqueles fungos chamados de cogumelos e orelhas-depau, além de outros grupos menos conhecidos. Devido à importância deste grupo de fungos, o presente trabalho teve como objetivo investigar o seu potencial biotecnológico quanto à produção de antimicrobianos e enzimas. Os basidiomas dos fungos foram coletados em áreas de floresta do campus da UFAM, do Bosque da Ciência, Campus/V8 e Reserva de Campina do INPA, localizada na BR 174, km 45, Manaus/AM e Urucu em Coari/AM. Após o isolamento micelial, os fungos foram avaliados quanto ao crescimento radial em meio sólido. Para verificar a produção de antimicrobianos, os fungos foram cultivados em meio líquido BD e GPY durante 30 dias, em repouso a 28oC. Após esse período, o micélio foi seco para determinar a biomassa e os filtrados das culturas foram testados contra Ralstonia solanacearum, agente da murcha de várias espécies vegetais, Corynespora sp., Colletotrichum sp., Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus e Salmonella anatum. Quanto à produção de enzimas, os fungos foram cultivados em meio líquido e testados em meio sólido para proteases, amilases, celulases, pectinases e fenoloxidases. Em outra etapa, foi estudada a produção de amilases e proteases em diferentes fontes nutricionais. Foram coletados 60 fungos, de fevereiro a junho de 2003, e identificadas as famílias Agaricaceae, Auriculariaceae, Cantharellaceae, Ganodermataceae, Hygrophoraceae, Polyporaceae, Russulaceae, Stereaceae, Tremellaceae e Tricholomataceae. A Reserva de Campina foi a que apresentou maior diversidade de fungos. Todas as 18 amostras de filtrados de cultura dos Basidiomycetes, utilizadas nos bioensaios, apresentaram efeito inibitório contra um ou mais microrganismos-teste. As espécies E. coli, S. anatum e B. cereus, além de halos de inibição, apresentaram halos de estímulo de crescimento. Não foi observado efeito inibitório contra os fungos Corynespora sp. e Colletotrichum sp. O filtrado do fungo Trametes sp., cultivado em meio GPY, foi o que apresentou maior atividade de inibição. O meio de cultura BD favoreceu maior produção de biomassa seca. Dos dez fungos estudados, foi detectada a produção de proteases e celulases por todos os isolados, quatro produziram amilases, cinco fenoloxidases e um pectinase. Para a produção de amilases, os fungos cultivados em meio acrescido de farelo de trigo apresentaram os maiores halos. Para a produção de proteases, os maiores halos foram observados para os fungos crescidos em meio com farinha de peixe.

Philosophiae Doctor - PhD / Wastewater is normally composed of a mixture of pollutants. The type and composition of pollutants in a particular wastewater depend on the source of origin. The source and characteristics of a particular wastewater determine the ideal method of sewage treatment. Specific treatment techniques are effective in the removal of certain types of pollutants and may have no impact on the levels of other types of pollutants. Therefore, a combination of treatments and assessment of the quality of effluent before release into the environment is normally recommended. The assessment of effluent can be achieved by various techniques including chemical analysis and biological assays. Chemical analyses are commonly employed; however, they often pose detection problems and are considered to be uneconomical.

Este trabalho apresenta o processo para obtenção de partículas de sílica amino-funcionalizadas contendo complexos de TR3+ utilizando os métodos de Stöber e por micro-ondas. Os espectros de absorção no infravermelho das partículas TR-BTC-Si preparadas pelo método de micro-ondas exibiram bandas de absorção atribuídas aos modos vibracionais dos complexos TR-BTC e da rede de sílica, indicando a incorporação destes complexos na matriz SiO2. Por outro lado, os complexos Eu-(β-dicetonatos) preparados pelo método Stöber mostraram apenas as bandas atribuídas à estrutura da rede de sílica, devido à dupla camada de revestimento de sílica. As morfologias das partículas de sílica amino-funcionalizadas contendo complexos de TR3+ foram visualizadas usando a técnica MEV. As diferenças nas morfologias entre o complexo precursor e o material amino-funcionalizado pode ser atribuído a presença da sílica na superfície do material. Além do mais, o método da ninidrina indicou a presença de grupos amina (-NH2) na superfície destes materiais. Os espectros de emissão dos materiais funcionalizados com os complexos de Eu3+ e Tb3+ apresentaram as bandas de emissão da transição intraconfiguracional dos íons Eu3+ (5D0→7FJ, J = 0-6) e Tb3+ (5D4→7FJ, J = 6-0), exibindo cores características de emissão vermelha e verde, respectivamente. É observado um decréscimo nos valores dos parâmetros Ω2 dos materiais Eu-(β-dicetonato)-Si e Eu-BTC-Si comparados com os respectivos complexos, devido a diminuição da intensidade da transição 5D0→7F2, indicando um maior caráter centrossimétrico. Conseqüentemente, os íons Eu3+ nos materiais com sílica estão em um ambiente químico menos polarizável do que nos complexos, sugerindo uma menor contribuição do mecanismo de acoplamento dinâmico. Os altos valores dos Ω4 para os sistemas com sílica Eu-(&#946-dicetonato)-Si e Eu-BTC-Si comparados com os valores de Ω2 reflete a intensidade extremamente alta da transição 5D0→7F4 observada nos espectros de emissão. Este resultado corrobora com o maior caráter centrossimétrico e evidencia a incorporação dos complexos de Eu3+ na rede de sílica. Foi realizado um fluoroimunoensaio usando os compostos amino-funcionalizados, que mostraram uma luminescência e propriedades físico-químicas eficientes para atuarem como marcadores biológicos. O marcador óptico foi conjugado com o anticorpo anti-oxLDL, que se liga a um suporte específico com o antígeno oxLDL. Portanto, estes materiais são candidatos promissores para conjugação molecular em clínicas de diagnóstico. / This work presents the process to obtain amino-functionalized silica particles containing complexes of trivalent rare earth ions (RE3+) using Stöber and microwave methods. Infrared spectra of the TR-BTC-Si particles prepared by microwave method exhibited absorption bands assigned to the vibrational modes of the TR-BTC complexes and silica network, indicating that the complexes have been incorporated in the SiO2 matrix. However, due to double coating of the silica network, the IR spectra of the Eu-(β-diketonates) complexes prepared by Stöber method showed only bands assigned to the silica structure. The morphologies of the amino-functionalized silica particles containing RE3+ complexes were examined using SEM technique. The difference in morphology between the complex precursor and amino-functionalized material can be attributed to the silica network on the material surface. Besides, the ninhydrin method confirmed the presence of amine groups (-NH2) in the functionalized materials. The emission spectra of the functionalized materials containing Eu3+ and Tb3+ complexes showed the emission bands originated from the intraconfigurational transitions of the Eu3+ (5D0→7FJ, J = 0-4) and Tb3+ (5D4→7FJ, J = 6-0), exhibiting red and green color emission, respectively. It is observed decreasing values of experimental intensity parameters (Ω2) of the Eu-(β-diketonate)-Si and Eu-BTC-Si materials when compared with the complex precursors, owing to the decreased intensity of the 5D0→7F2 transition, indicating a higher centrosymmetric character. As a result, the Eu3+ ions in silica materials are located in a chemical environment less polarizable than in the complexes, suggesting a smaller contribution of dynamic coupling mechanism. On the other hand, an abnormally high intensity of the 5D0→7F4 transition was observed, which is reflected by the high values of Ω4 of the silica systems, Eu-(β-diketonate)-Si and Eu-BTC-Si, compared with the Ω2 ones. These spectroscopic data corroborate with a higher centrosymmetric character, indicating the incorporation of the Eu3+ complexes in the silica network. A fluoroimmunoassay was developed using the amino-functionalized compounds that exhibit efficient luminescence and physical and chemical properties suitable for optical label. The biolabel was then chemically conjugated to anti-oxLDL antibody, which is linked in a specific support with oxLDL antigen. The result showed that it is a promising candidate for molecular conjugation in clinical diagnosis.

Este trabalho apresenta o processo para obtenção de partículas de sílica amino-funcionalizadas contendo complexos de TR3+ utilizando os métodos de Stöber e por micro-ondas. Os espectros de absorção no infravermelho das partículas TR-BTC-Si preparadas pelo método de micro-ondas exibiram bandas de absorção atribuídas aos modos vibracionais dos complexos TR-BTC e da rede de sílica, indicando a incorporação destes complexos na matriz SiO2. Por outro lado, os complexos Eu-(β-dicetonatos) preparados pelo método Stöber mostraram apenas as bandas atribuídas à estrutura da rede de sílica, devido à dupla camada de revestimento de sílica. As morfologias das partículas de sílica amino-funcionalizadas contendo complexos de TR3+ foram visualizadas usando a técnica MEV. As diferenças nas morfologias entre o complexo precursor e o material amino-funcionalizado pode ser atribuído a presença da sílica na superfície do material. Além do mais, o método da ninidrina indicou a presença de grupos amina (-NH2) na superfície destes materiais. Os espectros de emissão dos materiais funcionalizados com os complexos de Eu3+ e Tb3+ apresentaram as bandas de emissão da transição intraconfiguracional dos íons Eu3+ (5D0→7FJ, J = 0-6) e Tb3+ (5D4→7FJ, J = 6-0), exibindo cores características de emissão vermelha e verde, respectivamente. É observado um decréscimo nos valores dos parâmetros Ω2 dos materiais Eu-(β-dicetonato)-Si e Eu-BTC-Si comparados com os respectivos complexos, devido a diminuição da intensidade da transição 5D0→7F2, indicando um maior caráter centrossimétrico. Conseqüentemente, os íons Eu3+ nos materiais com sílica estão em um ambiente químico menos polarizável do que nos complexos, sugerindo uma menor contribuição do mecanismo de acoplamento dinâmico. Os altos valores dos Ω4 para os sistemas com sílica Eu-(&#946-dicetonato)-Si e Eu-BTC-Si comparados com os valores de Ω2 reflete a intensidade extremamente alta da transição 5D0→7F4 observada nos espectros de emissão. Este resultado corrobora com o maior caráter centrossimétrico e evidencia a incorporação dos complexos de Eu3+ na rede de sílica. Foi realizado um fluoroimunoensaio usando os compostos amino-funcionalizados, que mostraram uma luminescência e propriedades físico-químicas eficientes para atuarem como marcadores biológicos. O marcador óptico foi conjugado com o anticorpo anti-oxLDL, que se liga a um suporte específico com o antígeno oxLDL. Portanto, estes materiais são candidatos promissores para conjugação molecular em clínicas de diagnóstico. / This work presents the process to obtain amino-functionalized silica particles containing complexes of trivalent rare earth ions (RE3+) using Stöber and microwave methods. Infrared spectra of the TR-BTC-Si particles prepared by microwave method exhibited absorption bands assigned to the vibrational modes of the TR-BTC complexes and silica network, indicating that the complexes have been incorporated in the SiO2 matrix. However, due to double coating of the silica network, the IR spectra of the Eu-(β-diketonates) complexes prepared by Stöber method showed only bands assigned to the silica structure. The morphologies of the amino-functionalized silica particles containing RE3+ complexes were examined using SEM technique. The difference in morphology between the complex precursor and amino-functionalized material can be attributed to the silica network on the material surface. Besides, the ninhydrin method confirmed the presence of amine groups (-NH2) in the functionalized materials. The emission spectra of the functionalized materials containing Eu3+ and Tb3+ complexes showed the emission bands originated from the intraconfigurational transitions of the Eu3+ (5D0→7FJ, J = 0-4) and Tb3+ (5D4→7FJ, J = 6-0), exhibiting red and green color emission, respectively. It is observed decreasing values of experimental intensity parameters (Ω2) of the Eu-(β-diketonate)-Si and Eu-BTC-Si materials when compared with the complex precursors, owing to the decreased intensity of the 5D0→7F2 transition, indicating a higher centrosymmetric character. As a result, the Eu3+ ions in silica materials are located in a chemical environment less polarizable than in the complexes, suggesting a smaller contribution of dynamic coupling mechanism. On the other hand, an abnormally high intensity of the 5D0→7F4 transition was observed, which is reflected by the high values of Ω4 of the silica systems, Eu-(β-diketonate)-Si and Eu-BTC-Si, compared with the Ω2 ones. These spectroscopic data corroborate with a higher centrosymmetric character, indicating the incorporation of the Eu3+ complexes in the silica network. A fluoroimmunoassay was developed using the amino-functionalized compounds that exhibit efficient luminescence and physical and chemical properties suitable for optical label. The biolabel was then chemically conjugated to anti-oxLDL antibody, which is linked in a specific support with oxLDL antigen. The result showed that it is a promising candidate for molecular conjugation in clinical diagnosis.

This thesis describes the synthesis and characterization of metal-encoded polystyrene microspheres with a narrow size distribution designed for mass cytometry-based immuno- and oligonucleotide-assays. These particles were prepared by multiple stage dispersion polymerization techniques using polyvinylpyrrolidone (PVP) as a steric stabilizer. As a cytometeric technique, mass cytometry necessitated metal-encoded microspheres to perform the same roles of fluorescent microspheres used in conventional flow cytometry. The first role of the microsphere was to be able to act as a platform (classifier microspheres) for bioassays. Secondly, the microspheres should be suitable for mass cytometry machine calibration as standards. To perform these roles, metal-encoded microspheres were required to have certain size, functionality and metal content criteria. Lanthanide elements were chosen as the metals for encoding the microspheres for their low natural abundance in biological systems and for their similar chemistry. My goal was to employ two-stage dispersion polymerization, of styrene in ethanol, to introduce the lanthanide salts along with excess acrylic acid in the second stage, one hour after the initiation. Acrylic acid deemed to serve as a ligand for the lanthanide ions, through its carbonyl group, so the lanthanide ions get incorporated into the microsphere while acrylic acid is copolymerizing with styrene. Using two-stage dispersion polymerization, I could synthesize lanthanide encoded microspheres with narrow size distribution and high lanthanide content. However the lanthanide content distributions were unexpectedly much broader than the size distribution obtained. In addition, I could not attach biomolecules to the surface of such particles. In an attempt to improve the characteristics of these microspheres, I employed modified versions of multiple stage dispersion polymerization and seeded emulsion polymerization to grow functional polymer shell on the surface of the particles prepared by dispersion polymerization. Moreover, I coated the lanthanide encoded microspheres with silica shell which enabled me to grow another layer of functional-silica. Consequently, I could use these particles as classifier microspheres for mass cytometry-based immunoassays as well as fluorescence-based oligonucleotide-assays.

This thesis describes the synthesis and characterization of metal-encoded polystyrene microspheres with a narrow size distribution designed for mass cytometry-based immuno- and oligonucleotide-assays. These particles were prepared by multiple stage dispersion polymerization techniques using polyvinylpyrrolidone (PVP) as a steric stabilizer. As a cytometeric technique, mass cytometry necessitated metal-encoded microspheres to perform the same roles of fluorescent microspheres used in conventional flow cytometry. The first role of the microsphere was to be able to act as a platform (classifier microspheres) for bioassays. Secondly, the microspheres should be suitable for mass cytometry machine calibration as standards. To perform these roles, metal-encoded microspheres were required to have certain size, functionality and metal content criteria. Lanthanide elements were chosen as the metals for encoding the microspheres for their low natural abundance in biological systems and for their similar chemistry. My goal was to employ two-stage dispersion polymerization, of styrene in ethanol, to introduce the lanthanide salts along with excess acrylic acid in the second stage, one hour after the initiation. Acrylic acid deemed to serve as a ligand for the lanthanide ions, through its carbonyl group, so the lanthanide ions get incorporated into the microsphere while acrylic acid is copolymerizing with styrene. Using two-stage dispersion polymerization, I could synthesize lanthanide encoded microspheres with narrow size distribution and high lanthanide content. However the lanthanide content distributions were unexpectedly much broader than the size distribution obtained. In addition, I could not attach biomolecules to the surface of such particles. In an attempt to improve the characteristics of these microspheres, I employed modified versions of multiple stage dispersion polymerization and seeded emulsion polymerization to grow functional polymer shell on the surface of the particles prepared by dispersion polymerization. Moreover, I coated the lanthanide encoded microspheres with silica shell which enabled me to grow another layer of functional-silica. Consequently, I could use these particles as classifier microspheres for mass cytometry-based immunoassays as well as fluorescence-based oligonucleotide-assays.

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:26:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:04:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 11715.pdf: 1156737 bytes, checksum: 41ad845cca81dbf4069b69b67a1aa3f3 (MD5) / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:26:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:04:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 11715.pdf: 1156737 bytes, checksum: 41ad845cca81dbf4069b69b67a1aa3f3 (MD5) / A Estação de Tratamento de Esgotos de Suzano, ETE Suzano, localizada em Suzano, recebe efluentes e esgotos domésticos de cinco municípios que concentram forte atividade industrial. A região merece estudos que visem à preservação do rio tendo em vista sua proximidade à nascente do mesmo, além da importância para o estado de São Paulo. O objetivo deste trabalho foi utilizar ensaios de toxicidade com organismos aquáticos de níveis tróficos distintos para avaliar a carga tóxica que chega na estação, a eficiência do tratamento biológico aplicado na mesma, bem como a influência da estação no seu entorno.Os resultados obtidos para os cinco locais amostrados indicaram que para o afluente a toxicidade foi bastante superior comparada aos demais locais e esse resultado se repetiu para todos os organismos testados, com valores de CE(I)50 variando entre 1,02% e 21,14% para V. fischeri, e entre 0,60 até 83,84% para D. similis . Com relação ao efluente tratado os resultados mais críticos foram determinados para a Ceriodaphnia dubia com valor crônico de 7,07%, em outubro de 2006. Nas demais campanhas os valores críticos do efluente tratado variaram entre 15,81% até 86,60%. Para Vibrio fischeri em todas as campanhas foi observada toxicidade para a amostra do afluente P2, sendo que a maior toxicidade foi verificada na primeira campanha. Ainda na primeira campanha o P4 apresentou toxicidade 2 vezes maior que em relação ao P1 mostrando que na água do P4 ainda existem contaminantes que prejudicam a vida aquática. Nas campanhas posteriores os valores verificados para P1 e P4 estiveram bem próximos, com moderada toxicidade. Para Daphnia similis foi constatada toxicidade nas 2ª e 3ª campanhas para o P4 enquanto que o P1 não apresentou toxicidade. Os resultados dos ensaios realizados com C. dubia visando ao potencial de efeito crônico demonstraram importante diferença entre natalidade obtida no ponto controle e os pontos do rio Tietê, jusante e montante. Ficou evidenciada que no entorno da estação comparativamente ao ponto controle a capacidade de reprodução desse organismo foi prejudicada. Da mesma forma alguns contaminantes orgânicos puderam ser determinados nesses locais e outro parâmetro crítico para a manutenção da vida aquática, o oxigênio dissolvido na água, resultou em valores entre 6,80ppm a 7,20 ppm no ponto controle (reservatório) enquanto que na água do rio esse parâmetro se manteve entre 0,5ppm e 0,7ppm , muito abaixo de 2,0 mg/L previsto pelo CONAMA. / Dissertacao (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Três fungos endofíticos isolados de Viguiera robusta (Asteraceae) foram cultivados em três meios de cultivo distintos (Czapek, arroz e extrato de malte) e também em culturas binárias em extrato de malte. Para a extração dos cultivos em extrato de malte foi utilizada a resina diaion HP-20, que promove a adsorção dos metabólitos produzidos pelo fungo, aumentando o rendimento dos extratos. Os extratos e frações obtidos foram submetidos à análise química por meio de técnicas cromatográficas e RMN 1H e a ensaios diversos biológicos para a comparação de seus perfis. O estudo químico do extrato de Chaetomium globosum (VR-10), cultivado em arroz, levou a isolamento da substância S1 (chaetoglobosina E), que apresenta elevada atividade citotóxica e é uma ferramenta importante em biologia química. Também de C. globosum foi isolado a substância S2 (dimetil-tereftalato), o qual já foi identificado como metabólito de fungo endofítico e também de planta. De Pestalotiopsis guepini (VR-8), cultivado em Czapek, foi isolada a substância S3 (tirosol), relatado na literatura como molécula sinalizadora em Candida albicans. Do fungo Cladosporium sphaerospermum (VR-2), após cultivo em arroz, foram isoladas três substâncias: marcfortina A (S4), a marcfortina B (S5) e a marcfortina C (S6) e (S7), substâncias com pronunciada atividade antiparasitária. Foi desenvolvido um método via CLAE-DAD-MS/MS para identificação rápida de derivados de marcfortina, o qual possibilitiou a identificação da substância S7 (marcfortina D) no extrato bruto de C. sphaerospermum. A análise conformacional da marcfortina A (S4) foi realizada através de experimentos de NOE-diff e técnicas de modelagem molecular. Os resultados obtidos nos bioensaios após diferentes cultivos dos fungos endofíticos indicaram que estes são fontes promissoras de substâncias bioativas, constituindo ferramentas importantes na busca por novos compostos. / Three endophytic fungi isolated from Viguiera robusta (Asteraceae) were cultivated in three different culture media (Czapek, rice and malt extract) and also in mixed cultures in the malt extract medium. Diaion HP-20 resin was used for the malt extract cultures extraction increasing the yields of the extracts. Extracts and fractions have been submitted to chemical analyses by chromatographic techniques and 1H NMR, and also to several bioassays for the comparison of their chemical and biological profiles. Chemical study of the rice culture extract from Chaetomium globosum (VR-10) gave the citotoxic compound S1 (chaetoglobosin E), an important chemical biology tool. C. globosum also led to the isolation of compound S2 (dimethyl-terephthalate), previously isolated from an endophytic fungus and also from plants. Compound S3 (tyrosol) has been isolated from the Czapek culture extract of Pestalotiopsis guepini (VR-8). Tyrosol has been reported as a quorum sensing molecule in Candida albicans. Three compounds have been isolated from Cladosporium sphaerospermum (VR-2) rice cuture extract: marcfortine A (S4), marcfortine B (S5) and marcfortine C (S6). Marcfortines have been reported as potent antiparasitic compounds. A HPLC-DAD-MS/MS was developed for the rapid identification of marcfortine derivatives, which allowed the identification of compound S7 (marcfortine D) in the crude extract from C. sphaerospermum. The conformational analysis of marcfortine A (S4) was carried out by NOE-diff experiments and molecular modeling techniques. Bioassays results showed that the endophytic fungi should be considered as promising sources of novel and bioactive compounds.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2017-05-05T18:36:49Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Luciana de Souza Barbosa - 2015.pdf: 4757688 bytes, checksum: fc96a42c90e69175023de9611123a61e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-05-09T15:24:36Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Luciana de Souza Barbosa - 2015.pdf: 4757688 bytes, checksum: fc96a42c90e69175023de9611123a61e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-09T15:24:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Luciana de Souza Barbosa - 2015.pdf: 4757688 bytes, checksum: fc96a42c90e69175023de9611123a61e (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-03-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Brazil has the greatest biodiversity in the world, and the plants are major sources of active molecules, having wide structural diversity. Among the domains found in Brazil, the Cerrado is a great source of medicinal plants with biological activities, and promising for the identifi-cation of bioactive molecules. In this context, studies on species of the Cerrado, can signifi-cantly contribute to the development and preservation of this biome. The species Kielmeyera coriacea (Calopyllaceae) is popularly known as pau-santo, being native to the Brazilian cen-tral plateau region. It is used in popular medicine, mainly for gastritis, anemia and leukemia, as reported in ethnobotanical interviews conducted in this study. The chemical study of K. coriacea leaves afforded the substances lupeol, lupenone, β-amyrin, cis and trans-p-coumaric acid and flavonoid quercetin, which was evaluated against the cathepsin V (CatV) and has a high inhibitory potential, had its IC50 assessed, with a value of 2.2 μM. The leaves extract (LE) and fractions originating from the liquid-liquid partition K. coriacea were also tested against cathepsins, and the LE showed the most satisfactory results against CatV, inhibiting the activity by 98%; LE was also tested against the ulcerogenic action, with concentrations of 200 and 300 mg.kg-1, and showed significant inhibition of ulcerative lesions. For antimicrobi-al evaluation, LE showed antimicrobial activity against the fungi Candida albicans, C. tropi-calis and C. glabrata (MIC of 31,25 μg/mL, 62,5 μg/mL e 7,81 μg/mL). Therefore, this re-search made possible the correlation ethnobotanical and scientific data, and contributed with relevant information of chemical-biological character of K. coriacea. / O Brasil possui a maior biodiversidade do mundo, e as plantas são fontes importantes de mo-léculas ativas, possuindo ampla diversidade estrutural. Dentre os domínios encontrados no Brasil, o Cerrado apresenta uma grande fonte de plantas medicinais com atividades biológi-cas, sendo promissor para a identificação de moléculas bioativas. Neste contexto, estudos so-bre espécies pertencentes ao Cerrado podem contribuir significativamente para a valorização e conservação deste domínio. A espécie Kielmeyera coriacea (Calopyllaceae) é conhecida po-pularmente como pau-santo, sendo nativa da região do planalto central brasileiro. É uma es-pécie muito utilizada na medicina popular, majoritariamente para gastrite, anemia e leucemia, conforme relatado nas entrevistas etnobotânicas realizadas neste estudo. Com a realização do estudo químico das folhas de K. coriacea, identificou-se as substâncias lupeol, lupenona, β-amirina, os ácidos cis e trans-p-cumárico e o flavonoide quercetina, o qual foi avaliado frente à catepsina V (CatV) e por apresentar um potencial inibitório elevado, teve seu IC50 avaliado, apresentando um valor de 2,2 μM. O extrato etanólico das folhas (EF) e frações oriundas da partição líquido-líquido de K. coriacea também foram avaliados frente às catepsinas, e o re-sultado mais expressivo para EF foi frente à CatV, inibindo a atividade da mesma em 98%; EF também foi testado frente à ação ulcerogênica, apresentando, nas concentrações de 200 e 300 mg.kg-1, uma inibição significativa das lesões ulcerativas. Em relação à avaliação antimi-crobiana, EF apresentou atividade antimicrobiana frente aos fungos Candida albicans, C. tro-picalis e C. glabrata (CIM de 31,25 μg/mL, 62,5 μg/mL e 7,81 μg/mL). Portanto, a realização deste trabalho tornou possível a correlação de dados etnobotânicos com científicos, além de contribuir com informações relevantes de caráter químico-biológico sobre K. coriacea.