Os micro-organismos endofíticos são aqueles que habitam o interior de um tecido vegetal, intra ou extracelularmente sem causar-lhe nenhum prejuízo. Eles possuem uma relação de simbiose (relação interespecífica de forma mutuamente vantajosa) com a planta e podem, por isto, sintetizar substâncias com alto potencial biotecnológico. Neste trabalho, objetivou-se a avaliação da capacidade dos fungos endofíticos isolados do mangue do litoral sul do estado de São Paulo, em produzirem compostos com atividade biológica: antimicrobiana, antiproliferativa, antioxidante e leishmanicida. Os extratos brutos de doze fungos endofíticos foram avaliados quanto a sua capacidade antimicrobiana contra uma bactéria Gram-positiva, uma bactéria Gram-negativa e uma levedura patogênica pelo método de microdiluição em placa. Três dos doze fungos endofíticos testados, Diaporthe phaseolorum 41.1(1), Diaporthe sp. 54(4) e Gibberella moniliformis 99(3), destacaram-se neste teste (CIM de 62,500 a 125,000µg/mL) e posteriormente, foram realizadas as demais avaliações de atividade biológica com eles. Verificou-se atividade antioxidante pelo método DPPH (1,1-difenil-2-picrilidrazil) abaixo dos valores encontrados para os padrões butil hidroxi tolueno (BHT) (66,310% ±0,019) e ácido ascórbico (96,047% ±0,005) para os extratos dos fungos testados: D. phaseolorum 41.1(1) (8,357% ±0,005), Diaporthe sp. 54(4) (8,747% ±0,018) e G. moniliformis 99(3) (29,640% ±0,011). Somente o extrato bruto do fungo Diaporthe sp. 54(4) apresentou atividade antiproliferativa contra as linhagens de células tumorais testadas. Foram necessários 2,700µg/mL para inibir 50% do crescimento de células de leucemia K562 e 7,200µg/mL para inibir a mesma porcentagem de células tumorais de glioma K51, sendo considerado um extrato com atividade moderada contra estas linhagens tumorais. O extrato do endófito D. phaseolorum 41.1(1) demonstrou melhor atividade leishmanicida, sendo que a concentração de 7,197µg/mL inibe o crescimento de cinquenta porcennto das formas promastigotas de Leishmania amazonensis. Estes resultados destacam a importância do estudo destes micro-organismos do mangue, pois eles podem ser uma fonte de várias substâncias com atividade de interesse farmacológico. / Endophytic microorganisms are those that inhabit the interior of plant tissues, intra-or extracellularly without causing any damages. They have a symbiotic relation with the plant and they can synthesize substances with high biotechnological potential. This study aimed to review the capacity of mangrove endophytic fungi isolated from the southern coast of São Paulo state in producing compounds with biological activity: antimicrobial, antiproliferative and antioxidant. Twelve endophytic fungi extracts were screened for their antimicrobial properties against Gram-positive bacteria, a Gram-negative bacteria and pathogenic yeast by microdilution plate method. Three of them, Diaporthe phaseolorum 41.1 (1), Diaporthe sp. 54 (4) and Gibberella moniliformis 99 (3), stood out in this test (MIC 62.500 to 125.000µg/mL) and then were held other biological activities assays with them. The scavenging capacity (average sequestrant capacity + standard deviation), at 90 ppm was measured by DPPH (1,1-diphenyl-2-picrilidrazyl) method and it was found values ​​found for BHT (butil hydroxi toluen) patterns (66.310% ± 0.019) and ascorbic acid (96.047% ± 0.005) and for the extracts of fungi tested which were below than the patterns: D. phaseolorum 41.1(1) (8.357%± 0.005), Diaporthe sp. 54(4) (8.747%± 0.018) and G.moniliformis 99(3) (29.640% ± 0.011). Only the Diaporthe sp. 54(4) crude extract presented antiproliferative activity against tumor cell lines tested wich 2.7µg/mL of the crude extract were required for 50% growth inhibition of leukemia cells K562 and 7.2µg/mL to inhibit the same percentage of K51 glioma tumor cells, this extract can be considered moderately active against these tumor cell lines. The extract of the endophytic D. phaseolorum 41.1 (1) showed better leishmanicidal activity, whereas the concentration of 7.197µg/mL inhibits 50% of the growth of Leishmania amazonensis promastigote forms.These results highlight the importance of these mangrove microrganisms study and show that they can be a source of various substances with pharmacological interest activity. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-10-04T13:17:52Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 965384 bytes, checksum: cce066996978b4b44c045fabe5b37455 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-04T13:17:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 965384 bytes, checksum: cce066996978b4b44c045fabe5b37455 (MD5) Previous issue date: 2003-07-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os produtos naturais têm sido importantes fontes para novos agroquímicos. Dessa forma, sintetizaram-se novos compostos análogos ao avenaciolídeo, um produto natural com atividade fungicida, presente em culturas de Aspergillus avenaceus. Foram sintetizados, a partir da diacetona-D-glicose, 24 compostos, sendo 18 deles inéditos. Destes, seis são hemiacetais e seis são bis-γ-lactonas, sendo os hemiacetais precursores sintéticos das bis-lactonas. A atividade fungicida de todos os compostos inéditos obtidos foi avaliada em testes in vitro, a fim de se determinar a importância da estrutura da bis-lactona, das duas carbonilas nas bis-lactonas e, ainda, da dupla ligação exocíclica das bis-γ-lactonas, identificando-se possíveis sítios ativos nas moléculas. Foi empregado como fungo-teste o Colletotrichum gloeosporioides, isolado de tecidos de fruto de mamão. Os ensaios foram realizados utilizando-se suspensões de esporos do fungo em concentrações conhecidas, e todas as substâncias foram testadas na concentração de 100 ppm. A toxicidade foi avaliada considerando-se o halo de inibição do crescimento fúngico, em comparação ao de um fungicida padrão (Benomyl). Apenas os compostos (1R,4R,5R)-4-pentil-6-metileno-3,8- dioxabiciclo[3.3.0]octano-2,7-diona dioxabiciclo[3.3.0]octano-2,7-diona [XIIa], [XIIb] (1R,4R,5R)-4-hexil-6-metileno-3,8- e (1R,4R,5R)-4-heptil-6-metileno-3,8- dioxabiciclo[3.3.0]octano-2,7-diona [XIIc] apresentaram atividade fungicida, apontando para a importância da estrutura bis-γ-lactônica com a dupla ligação exocíclica para a atividade verificada. As percentagens de inibição foram iguais a 38,7%, 40,0% e 46,0 % para os compostos [XIIa], [XIIb] e [XIIc], respectivamente, significando que houve um ligeiro aumento da atividade fungicida com o aumento da cadeia lateral. / The natural products have been important sources of new agroquimicals. From diacetone-D-glucose 24 compounds were prepared. Among them 18 are new compounds, six of them being hemiacetals and six bis-ã-lactones analogous to Avenaciolide, a natural product isolated from Aspergillus avenaceus, possessing antifungic activity. The antifungic activity of the novel compounds was tested in vitro in order to evaluate the importance of the bis-ã-lactonic structure, of the presence of the two carbonyl groups and of the exocyclic methylene group for the reported activity, identifying possible active sites in the molecules. Colletotrichum gloesporioids were isolated from papaya tissues and used for the biological testing. The essays were performed with a known concentration of the fungi and solutions of the substances at 100 ppm. The toxicity was evaluated by the measurement of the inhibition hale have relatively to a standard fungicide (Benomyl). Only the compounds (1R, 4R,5R)-4-pentyl-6-methylene-3,8-dioxabicycle[3.3.0]octan-2,7-dione [XIIa], (1R,4R,5R)-4- hexyl-6-methylene-3,8-dioxabicycle[3.3.0]octan-2,7-dione [XIIb] e (1R,4R,5R)-4-heptyl-6- methylene-3,8-dioxabicycle[3.3.0]octan-2,7-dione [XIIc] were active, indicating that the bis-ã-lactone structure containing the exocyclic double bond is essential for the observed activity. The percentagens of inhibition were 38,7%, 40,0% and 46,0 %, for compounds [XIIa], [XIIb] e [XIIc], respectively, showing a slight increase of the antifungic activity with the increase of the lateral aliphatic group.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-10-05T17:05:44Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2950208 bytes, checksum: 5451d1e74091b023241758a46d8b125d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-05T17:05:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2950208 bytes, checksum: 5451d1e74091b023241758a46d8b125d (MD5) Previous issue date: 2004-08-17 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Realizaram-se 4 ensaios biológicos e 1 in vitro com a finalidade de se avaliar as ações farmacológicas de flavonóides e corantes naturais sobre o metabolismo lipídico. Inicialmente, avaliou-se qual espécie animal, entre coelhos da variedade Nova Zelândia, ratos machos da variedade Wistar e Cobaias (Cavia porcellus), seriam melhores para a indução da hiperlipidemia, através da administração de ácido cólico e colesterol juntamente com a ração específica para cada espécie e água ad libitun. O sangue foi coletado aos 30 e 60 dias após o início do tratamento e analisados os teores de colesterol, colesterol-HDL, triacilgliceróis e glicose no soro desses animais. Após o término dos experimentos, foram coletadas amostras de fígado e arco aórtico dos animais, numa repetição de quatro amostras para cada grupo, escolhidos ao acaso, a fim de proceder à análise histopatológica. Neste ensaio, a indução mais eficiente em provocar a hiperlipidemia foi conseguida nos coelhos, mostrando níveis séricos extremamente altos em um curto intervalo de tempo, o que o faz ser um dos animais mais procurado atualmente para trabalhos com esta finalidade. Em posse dos resultados, montou-se o segundo ensaio biológico, optando-se então por utilizar coelhos da raça Nova Zelândia na determinação da melhor via de administração dos flavonóides e corantes naturais, que são utilizados atualmente no estudo de seus efeitos farmacológicos como agentes hipolipidêmicos. De acordo com o que foi observado e pela praticidade na administração, optou-se por administrar as substâncias a serem testadas, pela via oral, nos outros experimentos. Um terceiro ensaio biológico foi realizado no intuito de se determinar a melhor concentração na qual os flavonóides e corantes atuam como fármacos hipolipidêmicos. Os tratamentos foram constituídos por dois grupos controles, sendo um grupo alimentado só com ração e o outro com ração + colesterol + ácido cólico (RCA), e por outros 16 grupos que receberam as seguintes substâncias: quercetina, rutina, morina e naringenina, nas doses e 5 mg, 10 mg, 15 mg e 30 mg. A administração destas substâncias foi pela via oral, sendo ministradas em cápsulas tendo o talco farmacêutico como veículo. As melhores reduções conseguidas na diminuição do nível do colesterol total em relação ao grupo hiperlipidêmico foram observadas nos tratamentos com quercetina e rutina na dose de 5 mg e naringenina na dose de 10 mg, sendo estas variações de 56,42%, 55,00% e 54,04%, respectivamente, sendo significativo pelo teste de Dunnett. O melhor tratamento encontrado na redução dos níveis triglicêmicos foi o com quercetina a 10 mg, sendo que este tratamento abaixou o nível de triacilglicerol destes animais em 77,51% quando comparado com o grupo hipertriglicêmico. Em relação ao colesterol-HDL, foi considerada mais eficiente a substância que promoveu um maior aumento no nível deste constituinte no soro, que foi conseguido pelo tratamento com a morina nas dosagens de 10 e 15 mg, obtendo-se um aumento de 10,79% e 9,00%, respectivamente, em relação ao grupo hiperlipidêmico. Em um último ensaio biológico, comparou-se os efeitos dos flavonóides baicaleína, morina, naringenina, naringina, quercetina, rutina, crisina, luteolina e apigenina, os corantes naturais do extraídos do urucum norbixina e bixina e o medicamento comercial hipolipidêmico colestiramina na dosagem de 10 mg/Kg de peso corporal, por via oral, em cápsula, utilizando o talco como veículo. Sendo esta forma de mais fácil manejo, menos sacrificante para o animal e com uma maior garantia das concentrações ingeridas. A indução da hiperlipidemia foi através do ácido cólico e colesterol, colocados na ração diária dos animais. Esta forma de indução é mais próxima da real e menos sacrificante para o animal. Todas as substâncias reduziram os teores de colesterol no soro sanguíneo dos coelhos, sendo que as melhores reduções foram observadas nas substâncias naringenina, 54,04%, naringina, 49,26%, quercetina, 49,78%, rutina, 48,89%, crisina, 55,56%, luteolina, 52,58% e apigenina, 49,88. Todos os flavonóides estudados e o corante bixina reduziram os níveis de colesterol a valores inferiores ao do medicamento colestiramina e sua média foi estatisticamente diferente a médias deste medicamento, pelo teste de Tukey. Estes resultados mostram que as substâncias estudadas podem ser mais eficientes no combate a hipercolesterolemias dos que os medicamentos atualmente no mercado, com a vantagem de serem menos tóxicos que estes. Os melhores efeitos observados na redução do triacilglicerol plasmático foram conseguidos pelos flavonóides baicaleína, quercetina e crisina. A baicaleína e a rutina diminuíram os níveis de triacilglicerol a valores inferiores ao do grupo controle alimentado apenas com ração, sendo que os valores conseguidos pela baicaleína (-56,91%) foram estatisticamente diferente deste grupo controle pelo teste de Dunnett. A maior parte dos flavonóides aqui estudados teve um melhor efeito sobre o triacilglicerol do que o medicamento colestiramina. As substâncias que promoveram um maior aumento no nível de colesterol-HDL foram os flavonóides baicaleína, apigenina, morina e luteolina e o medicamento colestiramina. Estas substâncias tiveram um efeito hipercolesterolêmico para esta fração lipídica do colesterol, que foram de 122,21%, 281,63%, 10,79%, 21,14% e 37,26%, respectivamente. De uma maneira geral, pode-se observar que as substâncias estudadas apresentaram uma ação farmacológica bastante acentuada no metabolismo lipídico de coelhos hiperlipidêmicos sem, sobretudo, causar efeitos de toxicidade, aparentemente. No ensaio in vitro, procurou-se caracterizar o efeito das substâncias estudadas sobre a atividade da lipase, variando-se a concentração dos modificadores, sendo que todos eles aumentaram esta atividade. Este trabalho demonstrou os efeitos benéficos de alguns flavonóides e corantes naturais sob o metabolismo lipídico de coelhos, sendo que um dos mecanismos para explicar os níveis reduzidos de triacilgliceróis é o aumento da atividade da lipase por essas substâncias, porém, novas pesquisas devem ser realizadas para que estes compostos possam ser utilizados como medicamento e testados no homem. / Four biological assays were realized and 1 in vitro to evaluated the pharmacological action of flavonoids and natural coloring about the lipid metabolism. Initially, was evaluated which animal sort, between rabbits of the race New Zealand, male mouse of the race Wistar and guinea-pig (Cavia porcellus), would be better for the induction of the hyperglycemia, through of the administration of colic acid and cholesterol jointly with the feed specifies for each species and water ad libitun. The blood was collected 30 and 60 days after the beginning of the treatment and the levels of cholesterol, cholesterol – HDL, triacylglicerols and glucose in the serum of those animals were analyzed. After at the end of the experiments, were collected samples of liver and aortic arch of the animals, in a repetition of four samples for each group, choose at random, in order to proceed to the hystopatologic analysis. In this assays the induction more efficient in provoke to hyperlipidemia was obtained us rabbits, showing levels consecutives extremely loud in a short break of time, what is going to be one of the animals more found nowadays for works with this purpose. In possession of the results, was prepared the second biological assays, opting then by utilize rabbits of the race New Zealand in the determination of the best way of administration of the flavonoids and natural coloring, that are utilized nowadays in the study of her pharmacologicals effects how hypolipidemics agents. In agreement with what was observed in the administration, opted by administer the substances it will be tested, by the oral way, in the others experiments. In the third biological assay was realized in the intention of be determined the better concentration in the which the flavonoids and natural coloring like hypolipidemics pharmacs. The treatments were constituted by two groups of controls, being an alone group fed with feed and another with feed + cholesterol + colic acid (RCA), and by others 16 groups that received the following substances: quercetin, rutin, morin and naringenin, in the dose and 5 mg, 10 mg, 15mg and 30 mg. The administration of these substances was by oral way, being administered in capsule having the pharmaceutical talc as vehicle. The best reductions obtained in the diminution of the level of the total cholesterol regarding the group hyperlipidemic were observed us treatment with quercetin and rutin in the dose of 5 mg and naringenin in the dose of 10 mg, being this variation of 56,42%, 55,00% and 54,04%, respectively, being significant by the test of Dunnett. The best reduction found in the decrease of the levels triglycemics was with quercetin to 10 mg, being that this treatment lowered the level of triacylglicerol of these animals in 77,51% when was compared with the group hypertriglycemic. Regarding the cholesterol – HDL, was considered more efficient the substance that promoted the most greatest increase in the level of this constituent in the serum, that was obtained by thetreatment with the morin in the dosages of 10 and 15mg, obtaining itself an increase of 10,69% and 9,00%, respectively, regarding the group hyperlipidemic. In a last biological assays, compared the effects of the flavonoids baicalein, morin, naringenin, naringin, quercetin, rutin, cricin, luteolin and apigenin, the natural coloring extracted of the aurum norbixin and bixin and the commercial medicine hypolipidemic colestiramin in the dosage of 10mg/kg of corporal weight, by oral way, in capsule, utilizing the talc as vehicle. Being this forms of easier management, less sacrificial for the animal and with a bigger guarantee of the concentrations ingested. The induction of the hyperlipidemia was through of the colic acid and cholesterol, put in the daily feed of the animals. This form of induction is more near to the real one in less sacrificant for the animal. All the substances reduced the levels of cholesterol, in the blood serum of the rabbits, being that the best reductions were observed in the substances naringenin, 54,04%, naringin, 49,26%, quercetin, 49,78%, rutin, 48,89%, crisin, 55,56%, luteolin, 52,58% and apigenin, 49,88. All of the flavonoids studied and coloring bixin reduced the levels of cholesterol to lower values to the of the medicine colestiramin and his medium was statistics peculiar on average of this medicine, by test of Tukey. These results show that the substances studied can be more efficient in the combat to hypercholesterolemias than the medicines at present in the market, with the advantage of will be less toxic than these. The best effects observed in the reduction of the triacylglicerol plasmatic were obtained by the flavonoids baicalein, quercetin and crisin. The baicalein and to rutin diminished the levels of tryglicerids to lower values the of the group control feeding just with feed, being that the values obtained by the baicalein (- 56, 91%) were statistics unlike this control group by the test of Dunnett. Most of the flavonoids here studied had a better effect about the triacylglicerol than the medicine colestiramin. The substances that promoted a bigger increase in the level of cholesterol – HDL were the flavonoids baicailen, apigenin, morin and luteolin and the medicine colestiramin. These substances had the effect hypercholesterolemic for this part of the lipid of the cholesterol, that were of 122, 21%, 281,63%, 10,79%, 21,14% and 37,26% respectively. In general way, is able to be observed that the substances studied presented an pharmacological action enough accentuated in the lipid metabolism of rabbits hyperlipidemics without, above all, cause effects of toxicity, apparently. In assays in vitro, found be characterized the effect of the substances studied about the activity of the lipase, varying the concentration of the modifier, being that all they increased this activity. This presentation showed the beneficial effects of some flavonoids and natural coloring in the lipid metabolism of rabbits, being that one of the mechanisms for explain the limited levels of triacylglicerols and increase of the activity of the lipase by those substances, however, new researches should be realized for that these composed can be utilized like medicine and tested in the man. / Tese importada do Alexandria, autor sem CPF

Brazil is considered a holder country of a great biodiversity, which the popular use of medicinal plants contributes an important source to discovery the new active compounds. Plants of the family Bignoniaceae and Tabebuia genus are widely used in traditional medicine in several countries for the treatment of various diseases and have an excellent potential for scientific studies, which may result in the discovery of new compounds having therapeutic interest. In this context, evidence the need to assess the biological potential of Tabebuia aurea, investigate their cytotoxic, antimicrobial activity, antiradical, antiedematogenic and lead the phytochemical screening to identify classes of bioactive compounds. We evaluated two ethanolic extracts from flowers and leaves, both subject to cell viability assay Metiltetrazólio by the colorimetric method for assessing the presence of cytotoxicity. The antimicrobial activity was evaluated using the broth microdilution assay, which provided the minimum inhibitory concentration (MIC) of the extracts against microbial growth. We performed the test ear edema induced by capsaicin to determine the antiedematogenic action and the evaluation of antiradical activity, the test verifies that the scavenging capacity of free radical opposite to 2,2-difenil-1-picrilidazila (DPPH) radical. The cell viability assay showed that the leaves ethanolic extract showed no cytotoxicity, since the LC50 value was greater than the maximum concentration used (≥ 1,0 mg ml-1), while the flowers ethanolic extract had no cytotoxicity at concentrations ≤ 0,5 mg mL-1. The ethanol extracts of flowers and leaves of T. aurea showed antibacterial activity, especially toward those Gram-positive bacteria. The flowers ethanol extract proved to be active with bactericidal action against the strain of S. epidermidis at MIC of 0,06 mg mL-1 and the leaves ethanol extract moderately active against S. epidermidis (CIM: 0,25 mg ml-1) and S. aureus (MIC: 0,50 mg mL-1) with bacteriostatic action to both strains. Both extracts inhibited edema formation induced by capsaicin. Treatment with flowers ethanol extract showed a significant inhibition of edema of 40,50% and the ethanol extract of leaves of 41,73%. The ethanol extracts of T. aurea showed no antiradical activity against the DPPH radical. The plant species used was identified by the presence of organic acids, naphthoquinones, anthraquinones and saponins. These results scientifically prove the antiedematogenic potential of the species and its promising antibacterial activity, with no cytotoxicity. Representing security evidence on the therapeutic use of plant species in preclinical in vivo tests. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O Brasil é considerado um país detentor de uma grande biodiversidade, no qual o uso popular de plantas medicinais contribui como importante fonte para a descoberta de novos compostos ativos. As plantas da família Bignoniaceae e do gênero Tabebuia são amplamente utilizadas na medicina tradicional de vários países, para o tratamento de diversas doenças e possuem um excelente potencial para estudos científicos, que podem resultar na descoberta de novos compostos com interesse terapêutico. Nesse contexto, evidenciou-se a necessidade de avaliar o potencial biológico de Tabebuia aurea, investigando sua atividade citotóxica, antimicrobiana, antirradicalar, antiedematogênica e conduzindo a prospecção fitoquímica para identificar as classes de compostos bioativos. Foram avaliados dois extratos etanólicos, um proveniente de flores e outro de folhas, ambos submetidos ao ensaio de viabilidade celular pelo método colorimétrico de Metiltetrazólio, para avaliar a presença de citotoxicidade. O potencial antimicrobiano foi avaliado com o teste de microdiluição em caldo, o qual forneceu a concentração inibitória mínima (CIM) dos extratos frente ao crescimento microbiano. Para determinar a ação antiedematogênica, realizou-se o teste de edema de orelha induzido por capsaicina e para a avaliação da atividade antirradicalar, o ensaio que verifica a capacidade sequestradora de radicais livres frente ao radical 2,2-difenil- 1-picrilidazila (DPPH). O ensaio de viabilidade celular revelou que o extrato etanólico das folhas não evidenciou citotoxidade, uma vez que a CL50 foi superior a concentração máxima utilizada (≥ 1,0 mg mL-1), enquanto que o extrato etanólico de flores não teve citotoxidade nas concentrações ≤ 0,5 mg mL-1. Os extratos etanólicos de flores e de folhas de T. aurea apresentaram atividade antibacteriana, principalmente, frente às bactérias Gram-positivas. O extrato etanólico de flores demonstrou-se ativo, com ação bactericida, frente à linhagem de S. epidermidis na CIM de 0,06 mg mL-1 e o extrato etanólico de folhas moderadamente ativo frente a S. epidermidis (CIM: 0,25 mg mL-1) e S. aureus (CIM: 0,50 mg mL-1), com ação bacteriostática para ambas as linhagens. Ambos os extratos inibiram a formação do edema induzido por capsaicina. O tratamento com o extrato etanólico de flores apresentou uma porcentagem de inibição do edema de 40,50% e o extrato etanólico de folhas de 41,73%. Os extratos etanólicos de T. aurea não apresentaram atividade antirradicalar frente ao radical DPPH. Foram idenficados na espécie vegetal avaliada a presença de ácidos orgânicos, naftoquinonas, antraquinonas e saponinas. Esses resultados comprovam cientificamente o potencial antiedematogênico da espécie e sua promissora atividade antibacteriana, com ausência de citotoxidade. Representando indícios de segurança na utilização terapêutica da espécie vegetal nos testes pré-clínicos in vivo.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseTRA.pdf: 6023275 bytes, checksum: 87890c0b29cd99b76805b302af8bc9ac (MD5) Previous issue date: 2006-05-17 / This work involved the study of plant extracts of the Rutaceae species. Among 16 extracts tested in assays carried out with T. cruzi gGAPDH and L. tarentolae APRT enzymes and trypomastigote forms of T. cruzi, four showed significant activities at least in one of them. The petroleum ether extract of stems of Conchocarpus macrophyllus (CMCF) and the methanolic extract of leaves of Rauia sp (RFM) showed 94% and 75% of parasitic lyses on trypomastigote forms of T. cruzi. The methanolic extract of leaves of Rauia sp1 (RF1M) showed 74% of inhibition of gGAPDH enzyme and the dichloromethane extract of stems of Conchocarpus macrophyllus (CMCD) showed 74% of inhibition of APRT enzyme. The methanolic extract of leaves of Rauia sp1 (RF1M) showed 67,9% of inhibition on the APRT enzyme assay. The phytochemical study of Rauia sp allowed the isolation of 30 substances among them 4 are described for the first time, the coumarins 3-ethylrauianin and 5-methoxyrauianin and the alkaloids 7-hydroxy-8-methoxy-N-methylflindersine and 8- hydroxy-Nmethylflindersine that is described as a natural product at first time. Among them 26 have already been described in the literature the coumarins murranganone, 7- methoxy-8-(2-acetyloxy-3-methyl-1-oxobut-2-enyl)-coumarin, isomurranganone, murralongin, murrangatin, munomicrolin, murrangatin diacetate, rauianin, umbeliferone e isoescopoletin, the alkaloids N-methyl-4-methoxy-2-quinolone, mirtopsine, dictamine, γ-fagarine, skimmianine, Z-dimethylrhoifolinate, zantobungeanine, zantodioline and veprissine, the amides paprazine and N-transferuloyltyramine, the flavone 3,7,4 -trimethoxy-5-hydroxyflavone, the lignan siringaresinol, the fenolic coumpound vanilic acid and the steroids β-sitosterol and stigmasterol. The phytochemical study of Conchocarpus macrophyllus allowed the isolation of 4 substances the alkaloids arborinine and methylarborinine and the steroids β-sitosterol and stigmasterol. Among the substances tested in one or more assays none of them showed satisfactory results, leading to conclude that either the active compounds have not been isolated or their activity is related to the combination effects. / Este trabalho envolveu estudo fitoquímico de plantas pertencentes à família Rutaceae. Foram testados 16 extratos de plantas pertencentes à família Rutaceae em ensaios sobre as enzimas GAPDH de T. cruzi e APRT de L. tarentolae e sobre formas tripomastigotas de T. cruzi quatro apresentaram atividades satisfatórias em pelo menos um dos ensaios a que foram submetidos. O extrato em éter de petróleo do caule de Conchocarpus macrophyllus (CMCE) e o extrato metanólico das folhas de Rauia sp (RFM) apresentaram 94% e 75% de lise parasitária frente às formas tripomastigotas de T. cruzi. O extrato metanólico das folhas de Rauia sp1 (RF1M) apresentou 74% de inibição frente à enzima GAPDH e o extrato diclorometânico do caule de Conchocarpus macrophyllus (CMCD) apresentou 77% de inibição sobre a enzima APRT. O extrato metanólico das folhas de Rauia sp1 (RF1M) apresentou resultado próximo ao considerado satisfatório (67,9% de inibição) no ensaio sobre a enzima APRT. O estudo fitoquímico de Rauia sp resultou no isolamento de 30 substâncias. Destas, 4 são inéditas na literatura; as cumarinas 3-etilrauianina e 5-metoxirauianina e os alcalóides 7-hidroxi-8-metoxi-N-metilflindersina e 8-hidroxi-N-metilflindersina, este último não foi ainda relatado como produto natural e 26 já foram descritas na literatura; as cumarinas murranganona, 7-metoxi-8-(2-acetoxi-3-metil-1-oxobut-2- enil)-cumarina, isomurranganona, murralongina, murrangatina, munomicrolina, acetato de murrangatina, rauianina, umbeliferona e isoescopoletina, os alcalóides Nmetil- 4-metoxi-2-quinolona, mirtopsina, dictamina, γ-fagarina, esquimianina, Zrhoifolinato de dimetila, zantobungeanina, zantodiolina e veprissina, as amidas paprazina e N-trans-feruloiltiramina, a flavona 3,7,4 -trimetoxi-5-hidroxi flavona, a lignana siringaresinol, o composto fenólico ácido vanílico e a mistura dos esteróides sitosterol e estigmasterol. O estudo de Conchocarpus macrophyllus resultou no isolamento de 4 substâncias, os alcalóides acridônicos arborinina e metilarborinina e a mistura dos esteróides sitosterol e estigmasterol. Dentre as substâncias que tiveram o potencial biológico avaliado frente a um ou mais ensaios nenhuma apresentou resultado satisfatório.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 4393.pdf: 23560579 bytes, checksum: 0869152d96e7734e1dd6786fa23cb550 (MD5) Previous issue date: 2012-05-03 / Universidade Federal de Sao Carlos / The study of phytopathogenic fungi Alternaria alternata has improved the chemical of this micro-organism. The fungus was grown up in large scale incubated in rice medium for 26 days. After grown period was interrupted an extract of the microorganism was made and fractionated using several chromatographic techniques, obtaining 11 different classes of metabolites which are: alternariol monomethyl éter, alternariol, altertoxin, altenuen, altenusin, uridine, uracila, 5 -inosil, ergosterol, peróxido de ergosterol e triglycerides. Also, a study was made via LC-MS in order to identify some toxins produced by A. alternata like a pathogen of citrus, and it was possible to identify four of these. Other research via LC-MS was the study of co-cultivation of the fungus A. alternata, the causal agent of alternaria brown spot, and Guignardia citricarpa, the causal agent of citrus black spot. In this study was possible to observe the variation in concentration of alternariol and thenuazonic acid, mycotoxins produced by A. alternata when this fungus is in contact with G. citricarpa. The study identification of the volatiles produced by A. Alternaria in different ways contributed significantly to improve the knowledge of their chemistry. Once, the A. alternata is a pathogenic fungus of 'Murcott' a study was performed via scanning electron microscopy (ESEM). Thus it was possible to observe the penetration of this fungus by stomatal cavity of young leaves of citrus. In order to search for natural inhibitors to control the disease, were tested several classes of natural products against the A. alternata, and some alkaloids, a xxvi coumarin, a xanthyletin, and a flavonoid substances showed Higher inhibition of mycelial growth, spore germination and appressorium formation. With the aim to obtain information on natural inhibitors were tested metabolites produced by A. alternata opposite and G. citricarpa, the results indicated that alternariol monomethyl ether and alternariol were substances that had a potential fungistatic against the causal agent of citrus black spot. / O estudo do fungo fitopatógeno Alternaria alternata contribuiu com a química desse micro-organismo. O fungo foi cultivado em larga escala utilizando como meio de cultura arroz por um período de 26 dias. Após esse período o crescimento foi interrompido e foi feito um extrato do microorganismo o qual foi fracionado utilizando várias técnicas cromatográficas obtendo 11 metabólitos de distintas classes sendo eles: alternariol monometil éter, alternariol, altertoxina, altenueno, altenusina, uridina, uracila, 5 -inosil, ergosterol, peróxido de ergosterol e triglicerídeo. Além disso, foi feito um estudo via LC-MS buscando identificar algumas toxinas de citros produzidas por A. alternata, sendo que foi possível a identificação de quatro dessas. Outra pesquisa realizada via LC-MS foi o estudo de co-cultivo entre os fungos A. alternata, o agente causal da mancha marrom de alternaria, e Guignardia citricarpa, o agente causal da mancha preta de citros. Nesse estudo foi possível observar a variação de alternariol e ácido tenuazônico, micotoxinas produzidas por A. alternata, quando este fungo está em contato com outro fitopatógeno. O estudo de identificação dos voláteis produzidos por A. alternaria em diferentes meios contribuiu muito para um maior conhecimento de sua química. Sabendo que A. alternata é um fitopatógeno de tangor Murcott foi realizado um estudo via microscopia eletrônica de varredura (MEV) a qual foi possível observar a penetração desse fungo pela cavidade estomatal de folhas jovens desse citros. Visando a busca de inibidores naturais para o controle da doença, foram ensaiadas diversas classes de produtos naturais frente a A. alternata, sendo que alcalóides e uma cumarina, a xantiletina, foram as substâncias que apresentaram uma maior inibição no crescimento micelial, germinação de esporos e formação de apressórios. Pensando em inibidores naturais, foram ensaiados metabólitos produzidos pelo A. alternata frente ao G. citricarpa, e os resultados obtidos revelaram que alternariol monometil éter e alternariol foram as substâncias que apresentaram um potencial fungistático frente ao agente causal da mancha preta de citros.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissPVA.pdf: 9142806 bytes, checksum: 948d3cc5bc8ab3c444a18bb8a31d7d51 (MD5) Previous issue date: 2006-08-04 / This work describes sixteen substances isolated by C. limonia: xanthyletin, seselin, xanthoxyletin, trans-kellactone, trans-decursidinol, junosmarin, scopoletin, isoscopoletin, demethylsuberosin, xanthoarnol, clausarin, limonianin, 5,4 - dihydroxy-6-(3 -methyl-2 -buthenyl)-2 ,2 -dimethylpyrano(5 ,6 -7,8)flavanone, β- sitosterol, estigmasterol e campesterol. Three of them are especially important: 5,4 -dihydroxy-6-(3 -methyl-2 -buthenyl)-2 ,2 -dimethylpyrano(5 ,6 -7,8)flavanone that was unknown in the literacy, trans-kellactone and trans-decursidinol that weren t found previously in the Rutaceae family but at Apiaceae family. The chemical constituents isolated by the upper and low parts from the grafted plant (C. sinensis on C. limonia) and from ungrafted C. limonia were compared. It indicated that the grafted plant has a metabolic translocation process. The Minimum Inhibitory Concentration of many substances isolated from plants of Rutaceae family was related. The test was against the bacteria Xylella fastidiosa that causes Citrus Variegated Chlorosis. The successful classes the pyranocoumarins and flavones whose MIC was 1,0 mg/mL. We have studied the plant-insect interaction and discovered that the grafted plant (C. sinensis on C. limonia) undergoes chemical alteration of the volatile compounds and essential oils when it is in contact with the sharpshooter. The sharpshooters Oncometopia facialis belongs to the Cicadellidae family and carries the Xylella fastidiosa. This chemical alteration was greater in the volatile compounds than in the essential oils of the plants. Different amounts of Hesperidin were found in the grafted plant when different species of Citrus were analized: C. limonia without CVC, C. reticulata without CVC, C. sinensis on C. limonia with and without CVC. The C. limonia presented the lower amount of the secondary metabolic and the C. sinensis on C. limonia presents the higher amount. The higher amounts of Hesperidin were found in sick plants witch corresponds the metabolic alteration that occurs when the plant is infected by the bacteria. / Neste trabalho estão descritas dezesseis substâncias isoladas de C. limonia: xantiletina, seselina, xantoxiletina, trans-kelactona, trans-decursidinol, junosmarina escopoletina, isoescopoletina, demetilsuberosina, xantoarnol, clausarina, limonianina, 5,4 -diidróxi-6-(3 -metil-2 -butenil)-2 ,2 -dimetilpirano(5 ,6 -7,8) flavanona, β-sitosterol, estigmasterol e campesterol; sendo uma destacada, a 5,4 - diidróxi-6-(3 -metil-2 -butenil)-2 ,2 -dimetilpirano(5 ,6 -7,8) flavanona, por ser inédita na literatura; e duas, a trans-kelactona e trans-decursidinol, não isoladas anteriormente em plantas da família Rutaceae, apenas na família Apiaceae. Uma comparação entre os constituintes químicos isolados da parte superior e inferior da planta enxertada C. sinensis sobre C. limonia e do C. limonia não enxertado foi realizada, indicando que a planta enxertada possui um processo de translocação metabólita. São relatadas as Concentrações Mínimas Inibitórias de diversas substâncias, todas isoladas de plantas da família Rutaceae, contra a bactéria causal da Clorose Variegada dos Citros, Xylella fastidiosa. As classes promissoras foram as piranocumarinas e flavanonas, sendo a Xantiletina e a Catequina, com MIC igual a 1,0 mg/mL. Foi realizado um estudo de interação planta-inseto, o qual indicou que a planta enxertada C. sinensis sobre C. limonia apresenta uma alteração na composição química dos seus voláteis e em seus óleos essenciais quando em contato com as cigarrinhas Oncometopia facialis, pertencentes a família Cicadellidae, as quais são transmissores de Xylella fastidiosa, correspondendo a uma resposta da planta ao ataque. A modificação dos constituintes químicos e suas porcentagens foi mais perceptível nos voláteis do que nos óleos essenciais das plantas. A planta enxertada também sofreu uma alteração em um metabólito secundário, a Hesperidina, quando foi feita a análise do teor desta substância em diferentes espécies de Citrus, C. limonia sem CVC, C. reticulata sem CVC, C. sinensis sobre C. limonia com e sem CVC. O C. limonia foi a espécie que apresentou menor quantidade de Hesperidina e C. sinensis sobre C. limonia foi o que apresentou o maior teor. O estudo comparativo da quantidade de Hesperidina da planta enxertada com e sem sintomas de CVC indicou que esta possui uma maior quantidade da substância quando doente, correspondendo a uma alteração metabólita que ocorre na planta quando infectada pela bactéria.

Submitted by MARCOS LEANDRO TEIXEIRA DE OLIVEIRA (marcosteixeira@ufv.br) on 2018-10-10T11:36:36Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 5603203 bytes, checksum: f374970d2b0531ad42846e59902d9dc2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-10-10T11:36:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 5603203 bytes, checksum: f374970d2b0531ad42846e59902d9dc2 (MD5) Previous issue date: 2018-06-04 / Biocarvões ou biochars, materiais recalcitrantes e ricos em carbono, são obtidos a partir da pirólise de biomassa e têm sido objeto de estudos recentes em diferentes aplicações, dentre elas: melhoria das propriedades dos solos, remoção de contaminantes da água, gestão de resíduos, mitigação das mudanças climáticas e produção de energia. Os principais efeitos da aplicação dos biocarvões ao solo são o aumento do seu pH e a melhoria na produção das culturas. Biocarvões também têm demonstrado elevada capacidade de remoção de contaminantes da água, porém, devido a sua carga superficial predominantemente negativa, alterações químicas em sua superfície por meio de cátions têm sido avaliadas para possibilitar a adsorção de contaminantes aniônicos, como o fosfato. O fósforo (P), além de ser um potencial causador de eutrofização em corpos hídricos, é um nutriente para as plantas, sendo proveniente de uma fonte finita, em suas reservas naturais. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho foi desenvolver um biocarvão capaz de remover P de solução aquosa e reaproveitar esse material enriquecido com P na agricultura, fechando assim um ciclo sustentável da utilização deste nutriente. No primeiro capítulo desta tese são apresentadas a síntese e caracterização de um biocarvão proveniente de resíduos de cenoura (Daucus carota L.), pré tratada em uma solução contendo magnésio para adsorção de P. As técnicas de caracterização indicaram que após a adsorção de P pelo biocarvão ocorreu a formação do composto Mg(H 2 PO 4 ) 2 no material, que apresentou capacidade máxima de adsorção de P de 138 mg g -1 , conforme o modelo da Isoterma de Langmuir. No segundo capítulo, a reutilização do biocarvão enriquecido com P (B/Mg-P) como um fertilizante fosfatado foi avaliada comparativamente à utilização de superfosfato triplo (ST), fertilizante de uso comercial, na cultura do milho cultivada em casa de vegetação. Os resultados obtidos demonstraram que não houve diferença significativa, pelo teste de Tukey a 5%, no conteúdo de P exportado pelas plantas e na taxa de recuperação do P aplicado entre o B/Mg-P e o ST, indicando que o B/Mg-P pode ser aplicado ao solo com o objetivo de fornecer P para as plantas, sendo ainda capaz de garantir o uso sustentável de P na produção agrícola. Paralelamente, outro objetivo deste trabalho foi desenvolver um filme híbrido de polímero biodegradável e biocarvão capaz de remover P da água eutrofizada, apresentando a vantagem de ser facilmente coletado após a adsorção. Dessa forma, no terceiro capítulo é apresentada a síntese e a caracterização deste novo filme e, ainda, os estudos de adsorção de P. A capacidade de remoção de P conforme o modelo da Isoterma de Langmuir foi de, aproximadamente, 22 mg g -1 . Devido as características de adsorção e sua biodegradabilidade, esse filme apresenta potencial para ser aplicado na agricultura como fonte de P para as plantas. / Biochars, recalcitrant materials and rich in carbon are obtained from the pyrolysis of biomass and have been the subject of recent studies in different applications, among them: improvement of soil properties, removal of contaminants from water, waste management, mitigation of climate change and energy production. The main effects of the application of biochars to the soil are the increase of their pH and the improvement in crop production. Biochars have also shown a high capacity for the removal of contaminants from water, however, due to their predominantly negative surface charge chemical changes in their surface by cations have been evaluated to allow the adsorption of anionic contaminants, such as phosphate. Phosphorus (P), besides being a potential cause of eutrophication in water bodies, is a nutrient for the plants, coming from a finite source. In this sense, the objective of this work was to develop a biochar capable of removing P from aqueous solution and reuse this material enriched with P in agriculture closing a sustainable cycle of the use of this nutrient. In the first chapter of this thesis are presented the synthesis and characterization of a biochar from carrot residue (Daucus carota L.), pretreated in a solution containing magnesium for adsorption of P. Characterization techniques indicated that after adsorption of P by the formation of the compound Mg(H 2 PO 4 ) 2 in the material, which presented a maximum P adsorption capacity of 138 mg g -1 , according to the Langmuir Isotherm model. In the second chapter, the reuse of P-enriched biochar (B/Mg-P) as a phosphate fertilizer was evaluated in comparison to the use of triple superphosphate (TS), commercial fertilizer, in maize grown under greenhouse conditions. The results showed that there was no significant difference in the content of P exported by the plants and in the recovery rate of P applied between B/Mg-P and TS, indicating that B/Mg -P can be applied to the soil with the objective of providing P to the plants, and is still able to guarantee the sustainable use of P in agricultural production. In parallel, another objective of this work was to develop a hybrid film of biodegradable polymer and biochar capable of removing P from eutrophic water, with the advantage of being easily collected after adsorption. Thus, in the third chapter we present the synthesis and characterization of this new film and also the adsorption studies of P. The capacity of removal of P according to the Langmuir Isotherm model was approximately 22 mg g -1 . Due to the adsorption characteristics and its biodegradability, this film has potential to be applied in agriculture as a source of P for plants.

Submitted by Marcela Carvalho (marcelaalfaia@hotmail.com) on 2016-09-02T14:17:43Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese Ana Lucia Mendes dos santos.pdf: 2827118 bytes, checksum: 67095a1789840bc1538a1ada064d7ff6 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-09-15T16:11:35Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese Ana Lucia Mendes dos santos.pdf: 2827118 bytes, checksum: 67095a1789840bc1538a1ada064d7ff6 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-09-15T16:17:44Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese Ana Lucia Mendes dos santos.pdf: 2827118 bytes, checksum: 67095a1789840bc1538a1ada064d7ff6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-15T16:17:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese Ana Lucia Mendes dos santos.pdf: 2827118 bytes, checksum: 67095a1789840bc1538a1ada064d7ff6 (MD5) Previous issue date: 2014-06-16 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This work describes the isolation, identification structural of the chemical constituents of Cyperus rotundus, acclimatized in the Amazon, as well as seasonal variation of the essential oil extracted from the tubers collected at different times of the year, besides the ability to sequester radical DPPH, enzymatic assays as elastase, tyrosinase and α-glucosidase inhibitors, cytotoxic assay against Artemia salina larvae and colorimetric assay against promastigotes of Leishmania amazonensis. From the hexane extract obtained from the tubers was identified mixture of β-sitosterol and stigmasterol steroids, and the ester ethyl hexadecanoate. The ethyl acetate extract was identified a mixture of cyclic oxygenated sesquiterpenes characterized as α-cyperone and cyperotundone and the ferulic acid. Extract in methanol was isolated d-mannitol and ergosterol peroxide. From inflorescence hexane extract was identified mixture of β-sitosterol and stigmasterol steroids and in methanol extract was isolated luteolin. The essential oil composition was analyzed by a combination of GC- MS and GC-FID, the results reveal variation in the content of essential oil in the dry rainy, as well as qualitative variation of the main constituents depending on the time of year when tubers were collected. The major components of the essential oil were identified β-selineno (5.79 to 7.34%), caryophyllene oxide (from 4.68 to 7.47%), cipereno (10.64 to 18.62%), ciperotundona (13.78 to 24.72%) and α-ciperona (20.34 to 23.73%). In the quantitative assay of scavenging free radicals, the methanol extract of the inflorescence and luteolin showed strong antioxidant activity. In enzymatic assays against elastase and tyrosinase, the extracts and isolated compounds showed weak activity. In enzyme assay against α-glucosidase the hexane extracts (tubers and inflorescences) and the essential oil showed strong activity with IC50 = 2,75 ; 12.75 and 15.17 μg/mL , respectively. The result of the LD50 assay with Artemia salina shows low toxicity to the hexane extract and essential oil and moderate toxicity of the extract in ethyl acetate and methanol. In the evaluation of the antimicrobial activity hexane extract (tubers) and the essential oil showed strong inhibition against Gram positive bacteria and against yeast and methanol extract (inflorescence) and d-mannitol showed high activity against Candida albicans. In assessing the activity of inhibiting microbial adhesion and the essential oil d- mannitol reduced by about 50 % the capacity of biofilm formation with Enterococcus faecalis and Candida albicans, respectively. The results of the colorimetric assay performed in vitro directed the leishmanicidal action against promastigotes of Leishmania amazonensis revealed significant activity for hexane extract (IC = 3.65 μg/mL), ethyl acetate (IC = 4.29 μg/mL) and the essential oil (IC = 5.07 μ/mL). From the tubers were isolated and identified six genera of endophytic fungi, with the most frequent Colletotrichum. / O presente trabalho descreve o isolamento a identificação estrutural dos contituintes químicos de Cyperus rotundus, aclimatada no Amazonas, bem como, a avaliação sazonal do óleo essencial extraído dos tubérculos que foram coletados em diferentes épocas do ano, além das atividades de sequestro do radical DPPH, ensaios enzimáticos elastase, tirosinase e α-glucosidase, ensaio citotóxico contra larvas de Artemia salina e ensaio colorimétrico contra formas promastigotas de Leishmania amazonensis. A partit do extrato hexânico obtido dos tubérculos foram identificados uma mistura dos esteróides β-sitosterol e estigmasterol e o ester hexadecanoato de etila. Do extrato em acetato de etila foi identificada uma mistura binária de sesquiterpenos oxigenados cíclicos caracterizados como α-ciperona e ciperotundona e o ácido ferulico. Do extrato em metanol foi isolado o d-manitol e o peróxido de ergosterol. Do extrato hexânico obtido da inflorescência foi identificada a mistura de esteróides β-sistosterol e estigmasterol e do extrato em metanol foi isolada a luteolina. A composição do óleo essencial foi analisada por uma combinação de CGAR-EM e CG-DIC. Os resultados revelaram variação no teor do óleo essencial no período seco e chuvoso, bem como variação qualitativa dos principais constituintes em função da época do ano em que os tubérculos foram coletados. Os componentes majoritários do óleo essencial identificados foram β-selineno (5,79 a 7,34%), óxido de cariofileno (4,68 a 7,47%), cipereno (10,64 a 18,62%), ciperotundona (13,78 a 24,72%) e α-ciperona (20,34 a 23,73%). No ensaio quantitativo de sequestro de radicais livres, o extrato em metanol da inflorescência e a luteolina revelaram forte atividade antioxidante. Nos ensaios enzimáticos frente elastase e tirosinase, os extratos e substâncias isoladas apresentaram fraca atividade inibitória. No ensaio enzimático frente α-glucosidase os extratos hexânicos (tubérculos e inflorescência) e o óleo essencial apresentaram forte atividade inibitória com CI50 = 2,75; 12,75 e 15,17 μg/mL, respectivamente. O resultado da DL50 do ensaio realizado com Artemia salina L. revelou baixa toxicidade para o extrato em hexano e óleo essencial e moderada toxicidade do extrato em acetato de etila e em metanol. Na avaliação da atividade antimicrobiana o extrato hexânico (tubérculos) e o óleo essencial apresentaram forte inibição contra as bactérias Gram positivas e contra a levedura e o extrato metanólico (inflorescência) e o d-manitol apresentaram elevada atividade contra Candida albicans. Na avaliação da atividade de inibição de adesão microbiana o óleo essencial e d-manitol reduziram em cerca de 50% a capacidade de formação do biofilme com Enterococus faecalis e Candida albicans, respectivamente. Os resultados do teste colorimétrico realizados in vitro dirigidos à ação leishmanicida, contra formas promastigotas de Leishmania amazonensis, revelaram significativa atividade para o extrato hexânico (CI50 = 3,65 μg/mL), acetato de etila (CI50 = 4,29 μg/mL) e o óleo essencial (CI50 = 5,07 μg/mL). A partir dos tubérculos foram isolados e identificados seis gêneros de fungos endofíticos, sendo de maior ocorrência o Colletotrichum.

Três fungos endofíticos isolados de Viguiera robusta (Asteraceae) foram cultivados em três meios de cultivo distintos (Czapek, arroz e extrato de malte) e também em culturas binárias em extrato de malte. Para a extração dos cultivos em extrato de malte foi utilizada a resina diaion HP-20, que promove a adsorção dos metabólitos produzidos pelo fungo, aumentando o rendimento dos extratos. Os extratos e frações obtidos foram submetidos à análise química por meio de técnicas cromatográficas e RMN 1H e a ensaios diversos biológicos para a comparação de seus perfis. O estudo químico do extrato de Chaetomium globosum (VR-10), cultivado em arroz, levou a isolamento da substância S1 (chaetoglobosina E), que apresenta elevada atividade citotóxica e é uma ferramenta importante em biologia química. Também de C. globosum foi isolado a substância S2 (dimetil-tereftalato), o qual já foi identificado como metabólito de fungo endofítico e também de planta. De Pestalotiopsis guepini (VR-8), cultivado em Czapek, foi isolada a substância S3 (tirosol), relatado na literatura como molécula sinalizadora em Candida albicans. Do fungo Cladosporium sphaerospermum (VR-2), após cultivo em arroz, foram isoladas três substâncias: marcfortina A (S4), a marcfortina B (S5) e a marcfortina C (S6) e (S7), substâncias com pronunciada atividade antiparasitária. Foi desenvolvido um método via CLAE-DAD-MS/MS para identificação rápida de derivados de marcfortina, o qual possibilitiou a identificação da substância S7 (marcfortina D) no extrato bruto de C. sphaerospermum. A análise conformacional da marcfortina A (S4) foi realizada através de experimentos de NOE-diff e técnicas de modelagem molecular. Os resultados obtidos nos bioensaios após diferentes cultivos dos fungos endofíticos indicaram que estes são fontes promissoras de substâncias bioativas, constituindo ferramentas importantes na busca por novos compostos. / Three endophytic fungi isolated from Viguiera robusta (Asteraceae) were cultivated in three different culture media (Czapek, rice and malt extract) and also in mixed cultures in the malt extract medium. Diaion HP-20 resin was used for the malt extract cultures extraction increasing the yields of the extracts. Extracts and fractions have been submitted to chemical analyses by chromatographic techniques and 1H NMR, and also to several bioassays for the comparison of their chemical and biological profiles. Chemical study of the rice culture extract from Chaetomium globosum (VR-10) gave the citotoxic compound S1 (chaetoglobosin E), an important chemical biology tool. C. globosum also led to the isolation of compound S2 (dimethyl-terephthalate), previously isolated from an endophytic fungus and also from plants. Compound S3 (tyrosol) has been isolated from the Czapek culture extract of Pestalotiopsis guepini (VR-8). Tyrosol has been reported as a quorum sensing molecule in Candida albicans. Three compounds have been isolated from Cladosporium sphaerospermum (VR-2) rice cuture extract: marcfortine A (S4), marcfortine B (S5) and marcfortine C (S6). Marcfortines have been reported as potent antiparasitic compounds. A HPLC-DAD-MS/MS was developed for the rapid identification of marcfortine derivatives, which allowed the identification of compound S7 (marcfortine D) in the crude extract from C. sphaerospermum. The conformational analysis of marcfortine A (S4) was carried out by NOE-diff experiments and molecular modeling techniques. Bioassays results showed that the endophytic fungi should be considered as promising sources of novel and bioactive compounds.