A resposta imune desencadeada em pacientes com leishmaniose tegumentar Americana (LTA) é predominantemente celular. Assim, o estudo dos mecanismos imunológicos responsáveis pela formação, progressão e cura desta infecção é de grande importância, considerando a deformação que ela pode causar em indivíduos infectados. Este estudo investigou a expressão de mRNA de IFN-?, IL-10, IL-27, TNF-?, TGF-? e IL-6 em 40 biopsias de parafina (FFPE) fixadas em formalina de pacientes com diagnóstico clínico e laboratorial para LTA. Um grupo de 10 biópsias FFPE coletadas de pacientes com diagnóstico clínico de leishmaniose mucosa (LM) foi utilizado para o controle da evolução da infecção. Inicialmente, foi padronizado a extração de RNA, a síntese de cDNA e a escolha do gene endógeno em 9 biopsias frescas e 8 FFPE. Após essas padronizações, as moléculas de RNA de fragmentos de biopsias parafinadas, foram extraídas com kit específico, tratadas com DNase, quantificadas por fluorimetria e sintetizadas para cDNA. A expressão relativa de cada citocina foi determinada (em duplicata) por PCR em tempo real. As reações foram normalizadas frente ao padrão de expressão do gene endógeno GAPDH, que foi previamente padronizado. O padrão de expressão de cada gene alvo foram determinados segundo a fórmula do \"CT comparativo\" (2-??CT), na qual calcula-se quantas vezes mais ocorre a expressão do gene alvo em relação a indivíduos normais. Também incluído nesse estudo 5 amostras de biopsia de pele de indivíduos normais (grupo IV). Os resultados foram expressos em média de quantificação relativa, a análise estatística foi realizada utilizando foi determinada por Teste t não pareado e teste F para comparação de variâncias, onde três grupos de pacientes foram formados. Grupo I, 35 pacientes com LTA, cuja expressão relativa de IFN-? foi inferior a 100. Grupo II, 5 pacientes com LTA cuja expressão relativa de IFN-? foi superior a 100. Grupo III, 10 pacientes com leishmaniose mucosa. Os níveis de expressão para IFN-? foram 33,34; 214,1 e 129,6 vezes maiores para os Grupos I, II e III, respectivamente do que as amostras do controle normal. Para o TNF-? foram 11,22; 2,37 e 4,59 vezes superiores ao normal nos Grupos I, II e III, respectivamente. Para IL-10 foram 5,14; 11,54 e 2,51 vezes superiores aos valores normais nos Grupos I, II e III, respectivamente. Para IL-27 foram 15,81; 85,29 e 17,29 vezes superiores ao normal nos Grupos I, II e III, respectivamente. Para o TGF-? foram 5,38; 4,33 e 4,72 vezes superiores ao normal nos Grupos I, II e III, respectivamente. Para a IL-6 foram 5,92; 5,69 e 2,09 vezes superiores aos valores normais nos Grupos I, II e III, respectivamente. Estes resultados foram semelhantes a resultados de estudos que analisam a expressão de citocinas já sintetizadas. No geral, os resultados de expressão gênica das citocinas estudadas sugerem que a exacerbação da resposta imune do perfil Th1 (IFN-?) poderia levar ao surgimento de lesões mais graves nos pacientes dos Grupos II e III. Os níveis elevados de mRNA de IL-10, observado nos pacientes do Grupo II podem promover baixa ativação macrofágica, colaborando com a replicação do parasita e assim culminar com a progressão da doença. A expressão de mRNA de IL-27 não interferiu na expressão de mRNA de IFN-? nas células dos pacientes com leishmaiose tegumentar ou leishmaniose mucocutânea. Em conclusão, estes resultados podem sugerir que os pacientes do Grupo II podem desenvolver formas mais graves de LTA quando comparados aos do Grupo I. / The immune response triggered in patients with American cutaneous leishmaniasis (ACL) is predominantly cellular. Thus, the study of the immunological mechanisms responsible for the formation, progression and cure of this infection is of great importance, considering the deformation that it can cause in infected individuals. This study investigated the expression of IFN-?, IL-10, IL-27, TNF-?, TGF-? and IL-6 mRNA in 40 formalin-fixed paraffin-embedded paraffin biopsies (FFPE) from patients with clinical and laboratory diagnosis for LTA. A group of 10 FFPE biopsies collected from patients with clinical diagnosis of mucosal leishmaniasis (MCL) was used to control the evolution of the infection. Initially, RNA extraction, cDNA synthesis and the choice of the endogenous gene were standardized in 9 fresh biopsies and 8 FFPE. After these standardizations, the RNA molecules of fragments of paraffin-shaped biopsies were extracted with a specific kit, treated with DNase, quantified by fluorimetry and synthesized for cDNA. The relative expression of each cytokine was determined (in duplicate) by real-time PCR. Reactions were normalized against the expression pattern of the endogenous GAPDH gene, which was previously standardized. The expression pattern results for each target gene were determined by the \"comparative CT\" (2-??CT) formula, in which it is calculated how many times more the expression of the target gene occurs in relation to normal individuals. Also included in this study 5 skin biopsy samples from normal subjects (group IV). The results were expressed as mean relative quantification, statistical analysis was performed using was determined by unpaired t test and F test for comparison of variances, where three groups of patients were formed. Group I, 35 patients with ACL, whose relative expression of IFN-? was less than 100. Group II, 5 patients with ACL whose relative expression of IFN-? was greater than 100. Group III, 10 patients with mucosal leishmaniasis. The expression levels for IFN-? were 33,34; 214,1 and 129,6 times higher for Groups I, II and III, respectively than the samples from the normal control. For TNF-? were 11,22; 2,37 and 4,59 times higher than normal in Groups I, II and III, respectively. For IL-10 were 5,14; 11,54 and 2,51 times higher than the normal values in Groups I, II and III, respectively. For IL-27, 15,81; 85,29 and 17,29 times higher than normal in Groups I, II and III, respectively. For TGF-? were 5,38; 4,33 and 4,72 times higher than normal in Groups I, II and III, respectively. For IL-6 were 5,92; 5,69 and 2,09 times higher than the normal values in Groups I, II and III, respectively. These results were similar to the results of studies that analyze the expression of cytokines already synthesized. In general, the gene expression results of the cytokines studied suggest that the exacerbation of the Th1 profile (IFN-?) immune response could lead to more serious lesions in patients in Groups II and III. Elevated levels of IL-10 mRNA observed in Group II patients may promote low macrophage activation, assisting in the replication of the parasite and thus culminating in the progression of the disease. Expression of IL-27 mRNA did not interfere in the expression of IFN-? mRNA in the cells of patients with tegumentary leishmaiosis or mucocutaneous leishmaniasis. In conclusion, these results may suggest that patients in Group II may develop more severe forms of ACL when compared to those in Group I.

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:07:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Rogerio Costa.pdf: 772280 bytes, checksum: c5c3a8bf43a8c1ab73ea21b081845e9b (MD5) Previous issue date: 2008-11-27 / The objective of this experiment was to evaluate the histology of livers of castrated bitches during sequential periods of weight gain and loss, through analysis of samples obtained by ultrasound guided biopsies. The experimental groups were composed by 30 bitches submitted to overweight by using of hypercaloric ration, from these animals were selected 14 to be submitted to two differents weight loss programs with seven receiving hypocaloric ration and seven receiving normocaloric ration. Periodic ultrasonographic analysis was employed to evaluate liver structure during the initial, obesity and weight loss stages, and revealed that none of the animals displayed altered images and no lesions at any stages. Histological examination revealed that no animals showed (0%) fibrosis or fat degeneration, 13 animals (92,8%) presented mild inflammation and one animal (7,2%) had severe inflammation. Nine animals (64,2%) did not have any kind of necrosis, four animals (28,5%) had mild necrosis and one animal (7,2%) had moderate necrosis. At the end of obesity stage, no animal showed fibrosis or fat degeneration and all 14 animals had mild inflammation. Ten dogs (71,5%) showed no signs of necrosis and four animals (28,5%) with light necrosis. Finally, in both groups in the weight loss stage no one animal (0%) with fibrosis, fat degeneration or necrosis and 14 animals (100%) with light inflammation. The group 2 had no animal had fibrosis, fat degeneration or necrosis and all dogs showed light inflammation. The results allowed the establishment of comparative parameters between ultrasonographic liver images and histological hepatic analysis in different stages of obesity and weight loss. / Com este experimento objetivou-se avaliar microscopicamente o fígado de cadelas castradas durante o ganho e perda de peso, por meio de colheita de tecido hepático por biopsia guiada por ultra-som. Os grupos experimentais foram compostos por 30 cadelas submetidas a ganho de peso com o uso de ração hipercalórica, destas foram selecionadas 14 para serem submetidas a dois diferentes programas de perda de peso sendo sete com ração hipocalórica e sete normocalórica. Análises ultra-sonográficas periódicas permitiram avaliar a estrutura do fígado durante os estágios inicial, de obesidade e de perda de peso, e nenhum dos animais apresentou ecogenicidade que indicasse lesão hepática em nenhum dos estágios. A avaliação dos parâmetros histológicos no período inicial revelou que 13 animais (92,8%) apresentaram inflamação leve e um animal (7,2%) inflamação acentuada, enquanto sete animais (28,5%) apresentaram necrose leve e um animal (7,2%) necrose moderada. Ao final da engorda nenhum dos animais (0%) apresentou qualquer tipo de fibrose ou degeneração gordurosa, 14 animais (100%) apresentaram inflamação leve. Em 10 animais (71,5%) não foi detectado nenhum tipo de necrose e quatro animais (28,5%) apresentaram necrose leve. Finalmente, notou-se que em ambos os programas de perda de peso nenhum dos animais demonstrou qualquer tipo de fibrose, necrose ou degeneração gordurosa enquanto todos os animais (100%) apresentaram inflamação leve. Os resultados permitiram estabelecer parâmetros comparativos entre ecogenicidade ultra-sonográfica e análise histológica hepáticas em diferentes estágios de obesidade bem como na perda de peso.

Introdução:O papel das biopsias do miocárdio, tem tido relativa importância em cardiologia, sendo método diagnóstico fundamental em um pequeno número de patologias do coração como na doença por depósito de glicogênio, amiloidose, hemocromatose e nas miocardites. Ao longo dos anos, o desenvolvimento de diferentes procedimentos que possibilitam a obtenção de fragmentos do tecido cardíaco passou por diversos estágios e evoluída miocardiectomia a céu-aberto aos cateteres endovasculares, passando por procedimentos com agulhas de punção. Estes apesar de estar em desuso atualmente, têm particular importância por proporcional acesso ao miocárdio e a cavidade ventricular esquerda. Paralelamente, a terapia celular tem sido utilizada na recuperação e preservação da função cardíaca em coronariopatia crônica e na doença de chagas. As punções biópsias do coração ressurgem como possível método alternativo de acesso ao miocárdio e implante de material biológico para terapia celular. Objetivos:apresentar instrumento de punção, biopsia e injeção intramiocárdica de material biológico, padronizar a técnica e atestar a segurança do método.A adaptação consiste em um sistema de escarificação do miocárdio para permitir melhor fixação de células-tronco. O objetivo do presente trabalho visa apenas o desenvolvimento da agulha e testar histologicamente a qualidade das biópsias. Método: O instrumento para punção e injeção de material biológico é composto por uma agulha exterior (1), chamado de acoplamento de infusão, o qual contém na sua extremidade uma ponta romba (2) e vários orifícios de 0,5 mm de diâmetro (3). Internamente, está equipado com uma agulha com um mandril fechado, que quando introduzidas no exterior, pode ser mobilizada para dentro para encher os orifícios laterais ocluindo ou soltá-los. O procedimento para a produção de microlesões micro é feito através da troca do mandril de ponta romba (durante o procedimento) por um mandril escova (4), provido de microcerdas que são estruturalmente concebidas para preencher os orifícios com a exteriorização das pequenas cerdas (5). O instrumento está equipado com um mecanismo de bloqueio, que permite a sua mobilização perfeita como uma única unidade de microlesões ou, ainda pode ser utilizado somente como uma agulha externa, de modo que pode tornar-se um instrumento de injeção biológica. Resultado: A técnica já foi testada em modelo suíno vivo mostrando sua viabilidade e segurança. Como resultados são apresentados aspectos macroscópicos e microscópicos do coração (Corantes Hematoxilina eosina, Tricrômico Masson e Azul de Evans).Conclusão: No tocante a sua função o novo Instrumento de punção/infusão tem por característica principal o fato de ser multifuncional. Permite ao operador acessar a cavidade ventricular esquerda por via transtorácica sem risco de lesão (perfuração), das artérias coronárias. Permite penetrar o miocárdio sem laceração das fibras musculares pela divulsionamento das mesmas e escarificar o miocárdio. gerando micro-lesões musculares por intermédio de seu mandril com cerdas, promovendo a \"inflamação benéfica ao processo de transplante celular. / Introduction: The role of myocardial biopsy has had relative importance in cardiology, being fundamental diagnostic method in a small number of diseases of the heart as in glycogen deposit disease, amyloidosis, hemochromatosis and in miocardites. Over the years, the development of different procedures that allow obtaining cardiac tissue fragments went through several stages and evolved from open miocardiectomy to endovascular catheters, going through procedures with puncture needles. These despite being in disuse today, have particular importance for offering access to myocardium and left ventricular cavity. At the same time, the Cellular therapy has been used in the recovery and preservation of cardiac function in chronic coronary artery disease and Chagas disease. The puncture-heart biopsies to re-emerge as a possible alternative method of access to the myocardium and implantable biomaterial for cell therapy. Objectives: Objectives: to present puncture tool, biopsy and intramyocardial injection of biological material, standardizing the technical and certify the safety of the method. The adaptation allows in a myocardial scarification system for making possible a better stem cells fixation. The objective of this study covers only the development of needle and test, macroscopically and histologically the quality of biopsies. Methods: The instrument for puncturing and injection of biological material is composed of an external needle (1), called coupling infusion, which contains at its end a blunt tip (2) and multiple 0.5 mm diameter holes (3). Internally it is fitted with a blunt mandrill needle, which when introduced into the external, can be mobilized inside to fill the lateral holes occluding or releasing them. The procedure for producing micro lesions is done by exchanging the blunt mandrill (during the procedure) for a brush-mandrill (4), provided with micro bristles that are structurally designed to fill the holes with small exteriorization of bristles (5). The instrument is equipped with a locking mechanism, which allows its perfect mobilization as one single unit for micro lesions or it can be used only as an external needle so it can become a biological injection instrument.Result: The technique has been tested in vivo pig model showing its feasibility and safety. The results are presented through macroscopic and microscopic aspects of the heart (dyes hematoxylin eosin, Masson Masson and Evans blue).Conclusion: Regarding its function the new instrument is to be multifunctional main feature. It allows the operator to access the left ventricular cavity through transthoracic without risk of injury (perforation) of the coronary arteries. It allows penetrate the myocardial laceration of the muscle fibers by divulsionamento of them and rip the myocardium. generating muscle micro-injuries through its arbor with bristles, promoting \"inflammation beneficial to the cell transplant process.Key words: heart biopsy puncture, infusion of stem cells in the heart.

Abstract Magnetic resonance imaging (MRI) is a well-established imaging modality for disorders of the musculoskeletal system. The distinguishing advantages of MRI are absence of ionizing radiation, excellent tissue contrast and the ability to use any arbitrary imaging plane. MRI can also be used as a guidance method for various percutaneous procedures. The purpose of this study was to evaluate the feasibility of MRI guidance for musculoskeletal biopsies and therapeutic bone drillings. A 0.23 tesla open configuration MRI scanner with an interventional optical guidance system was used. 172 percutaneous biopsies performed using MRI guidance were reviewed to define the safety and accuracy of the guidance method. The value of fine needle aspiration biopsy (FNAB) as a supplementary diagnostic procedure for core biopsy was also evaluated. The overall diagnostic accuracy of MRI-guided biopsy was 0.95, sensitivity 0.91, and specificity 0.98. The diagnostic accuracy of histological biopsy alone was 0.93, sensitivity 0.89, and specificity 0.98, and accuracy for FNAB alone was 0.85, sensitivity 0.80, and specificity 0.90. MRI guidance was deemed feasible and accurate and fine needle biopsy a useful supplement. The feasibility and safety of MRI-guided retrograde drilling of osteochondritis dissecans of the knee were evaluated by analysing ten procedures. All the lesions were successfully located and reached without complications. All patients experienced pain alleviation and follow-up MRI showed ossification in all. The feasibility and safety of MRI-guided retrograde drilling of osteochondritis dissecans of the talus were assessed by evaluating four procedures. Technical success was achieved in all cases and no complications were reported. All patients experienced some clinical benefit, although the changes in the pathological imaging findings were subtle. The feasibility and safety of MRI-guided core decompression for avascular necrosis of the femoral head were assessed by analysing twelve such procedures. The patients quantified their symptoms before and after the procedure. All procedures were successful without complications. All patients with low-stage disease benefited from the procedure. MRI guidance seems accurate, safe and technically feasible for the therapeutic bone drillings studied. / Tiivistelmä Magneettikuvaus (MK) on vakiintunut tuki- ja liikuntaelimistön sairauksien kuvantamismenetelmä. Sen erityispiirteitä ovat ionisoivan säteilyn puuttuminen, erinomainen kudoskontrasti sekä mahdollisuus saada kuvia mielivaltaisesta leiketasosta. Magneettikuvausta voidaan myös käyttää ohjausmenetelmänä useiden perkutaanisten toimenpiteiden yhteydessä. Tämän tutkimuksen tarkoitus oli selvittää MK-ohjauksen käyttökelpoisuus tuki- ja liikuntaelimistön neulanäytteenottojen ja hoidollisten luuporausten ohjausmenetelmänä. Tutkimuksessa käytettiin 0.23 teslan avomagneettia, jossa oli lisäksi optinen ohjausjärjestelmä. MK-ohjauksen turvallisuuden ja tarkkuuden selvittämiseksi tutkittiin 172 perkutaanista MK-ohjattua neulanäytteenottoa. Myös paksuneulanäyteen yhteydessä otetun ohutneulanäytteen antama lisäarvo arvioitiin. MK-ohjatun neulanäytteenoton kokonaistarkkuus oli 0.95, herkkyys 0.91 ja spesifisyys 0.98. Pelkän histologisen näytteenoton vastaavat tunnusluvut olivat 0.93, 0.89 ja 0.90 ja pelkän ohutneulanäytteen tunnusluvut olivat 0.85, 0.80 ja 0.90. Magneettikuvaus todettiin käyttökelpoiseksi ja tarkaksi ohjausmenetelmäksi ja ohutneulanäyte hyödylliseksi lisätoimenpiteeksi. MK-ohjauksen turvallisuutta ja soveltuvuutta polven osteokondriitin poraushoitoon arvioitiin kymmenen toimenpiteen perusteella. Kaikkiin kohteisiin osuttiin, eikä komplikaatioita ilmennyt. Kaikkien potilaiden kipu helpottui ja seurantakuvauksissa nähtiin luutumista. MK-ohjauksen turvallisuutta ja soveltuvuutta telaluun osteokondriitin poraushoitoon arvioitiin neljän toimenpiteen perusteella. Toimenpide onnistui teknisesti kaikissa tapauksissa, eikä komplikaatioita esiintynyt. Kaikki potilaat hyötyivät jonkin verran, mutta poikkeava kuvalöydös muuttui vain vähän. MK-ohjatun reisiluun pään avaskulaarisen nekroosin poraushoidon turvallisuutta ja soveltuvuutta arvioitiin kahdentoista toimenpiteen perusteella. Potilaat määrittivät oireensa numeerisesti ennen ja jälkeen toimenpiteen. Kaikki toimenpiteet onnistuivat, eikä komplikaatioita esiintynyt. Toimenpiteestä hyötyivät kaikki potilaat, joilla oli varhaisvaiheen tauti. Magneettikuvaus vaikuttaa tarkalta, turvalliselta ja teknisesti soveltuvalta ohjausmenetelmältä tutkittujen terapeuttisten luuporausten yhteydessä.

Introducción El sistema Bethesda se utiliza para clasificar los resultados de la prueba de Papanicolaou. Entre los resultados se tienen a las células ASC-US (células escamosas atípicas de significancia indeterminada) y ASC-H (células escamosas atípicas que no pueden descartar lesión intraepitelial). Se ha relacionado a estas células con neoplasia de cuello uterino; sin embargo, su asociación no ha sido muy estudiada en Perú. Objetivos Calcular la probabilidad de displasia severa, carcinoma in situ y cáncer de células escamosas, en mujeres con hallazgo citológico de ASC-H y ASC-US. Métodos Estudio observacional, transversal realizado en un hospital nivel IV en Lima-Perú, entre el 2012 y 2013, en el cual se evaluaron a 1060 pacientes con resultado de la prueba de Papanicolaou, Se realizó análisis bivariado y regresión logística binomial múltiple para evaluar la asociación. Se usó Chi cuadrado y se consideró el valor de p <0,05 como significativo. Resultados Se analizaron 1060 pruebas de Papanicolaou. La edad media fue 46,4 (DE: 13,2) años y 64,9% fueron menores de 50 años. La prevalencia de ASC-US fue 3,45% y la de ASC-H 0,32%. De 175 biopsias, el 22,9% presentó displasia moderada a severa o carcinoma escamoso. Se encontró asociación entre el hallazgo de ASC- H y la presencia de displasia moderada/severa (NIC 2/3), carcinoma in situ y carcinoma de células escamosas, en el estudio histopatológico (PR=2,39; IC(95%):1,49-3,81). Conclusión Dada la asociación encontrada, las mujeres con hallazgo de ASC-H, deben ser estudiadas de manera más profunda, con el fin de buscar displasia moderada/severa (NIC 2/3) o carcinoma de células escamosas. / Background The Bethesda system is used to classify Pap smear results. Some of the results are ASC-US (atypical squamous cells of undetermined significance) and ASC- H cells (atypical squamous cells cannot exclude intraepithelial lesion). It has been found an association between these results with cervical neoplasia; however they have not been well studied in Peru. Objectives To calculate the probability of severe dysplasia in situ or squamous cell cancer in women with cytology results of ASC-H and ASC-US. Methods An observational, cross-sectional study was carried out in a reference higher complexity health establishment in Lima, Peru (4th level), from 2012 to 2013, in which 1060 data of patients was analyzed. Bivariate and multiple binomial logistic regression analysis were performed. Chi square test was used and p-value < 0.05 was considered as significant. Results 1060 Pap smears were evaluated. Mean age was 46,4 (SD: 13,2) years and 64,9% were under 50 years old. ASC-US prevalence was 3,45% and ASC-H 0,32%. Out of 175 biopsies, 22,9% had moderate to severe dysplasia, carcinoma in situ or squamous carcinoma. There was an association between ASC-H finding and the presence of moderate/severe dysplasia (CIN 2/3), carcinoma in situ and squamous cell carcinoma (PR=2,39; CI(95%):1,49-3,81). Conclusion Given the association found, women with ASC-H findings should be further and thoroughly studied in order to look for moderate/severe dysplasia (CIN2/3) or squamous cell carcinoma.

Orientador: Miriam Dambros Lorenzetti / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-28T00:11:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Souza_FelipeGoncalvesSchrodere_M.pdf: 1431848 bytes, checksum: df85a182625e0c75b33faa908d302d6c (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: Introdução: A neoplasia de próstata é a segunda mais prevalente entre os homens, com estimativa de cerca de 68 mil casos novos no Brasil em 2014. Além disso, é a segunda causa de morte no sexo masculino por neoplasias. O câncer de próstata raramente causa sintomas em seus estágios iniciais, por isso existe a necessidade do diagnóstico precoce. Atualmente a forma de rastreamento desta neoplasia ainda é controverso, porém quando realizado, baseia-se em exame digital retal da próstata e na mensuração sérica dos níveis do PSA. Estudos de rastreamento populacional mostraram uma diminuição de 41% no casos de neoplasia avançada de próstata e risco de diagnóstico de câncer 46% maior, quando comparados a grupos não submetidos a rastreamento. O PSA não é câncer específico, então, os refinamentos do PSA (relação do PSA livre/total, densidade do PSA e velocidade do PSA) aparecem como métodos para melhorar sua especificidade, na tentativa de diminuir o número de biópsias desnecessárias. Quando existe suspeita diagnóstica, é indicada uma biópsia guiada por ultrassonografia transretal, procedimento que não é isento de complicações, principalmente as infecciosas. Objetivos: Avaliar a positividade para adenocarcinoma de próstata em biópsias guiadas por ultrassonografia transretal, e estratificá-la de acordo com a idade, com o valor do PSA total, com a densidade do PSA e com a relação entre a fração livre do PSA e o PSA total. Materiais e Métodos: Analisamos retrospectivamente os resultados obtidos no serviço de urologia do Hospital Municipal Dr. Mário Gatti com relação à positividade das biópsias estratificadas pela idade, PSA total, percentual da fração livre do PSA e densidade do PSA, comparando-os com os dados descritos na literatura. Resultados: Foram realizadas 314 biópsias no período de janeiro de 2011 à novembro de 2012. A média de idade dos pacientes foi de 65,2 (± 8,32) anos e a positividade foi de 44,9%. A positividade das biópsias foi maior com o aumento da idade (p<0,001), com o aumento do PSA (p<0,001), com o aumento da densidade (p<0,001) e com a diminuição da relação do PSA (p=0,002) Conclusão: A neoplasia prostática correlacionou-se significativamente com o aumento da idade, do PSA total, da densidade do PSA, e com a diminuição da relação entre o PSA livre sobre o PSA total / Abstract: Introduction: Prostate neoplasia is the second most prevalent neoplasia in men and about 68 thousand new cases were estimated in 2014 in Brazil. In addition, it is the second most common cause of cancer related death in men. Prostate cancer rarely causes symptoms at an early stage, hence the need of an early diagnosis. Although there is still no consensus about how to screen this neoplasia, it is done through digital rectal examination and measurement of PSA levels. Population screening trials showed a decrease of 41% in new cases of advanced prostate neoplasia. The risk of a cancer diagnosis increased 46% when compared to the group who was not screened. PSA is not cancer specific. Therefore, PSA features (relation between free PSA and total PSA, PSA density, PSA velocity) are used to increase its specificity, attempting to reduce the number of unnecessary biopsies. Once there is a cancer suspicion, a biopsy guided by transrectal ultrasonography is indicated, which is not a complication free procedure, mainly infection. Objective: to assess the positiveness of prostatic adenocarcinoma in transrectal ultrasonography guided biopsies and to evaluate it according to age, total PSA value, PSA density, and the relation between free PSA and total PSA. Materials and Methods: This is a retrospective study with patients who underwent prostatic biopsy guided by transrectal ultrasonography done by the urology team from Hospital Municipal Dr. Mário Gatti. Collected data included patient¿s age, total PSA value, PSA density and the relation between free PSA and total PSA. Results: 314 prostatic biopsies guided by transrectal ultrasonography were analyzed between January 2011 and November 2012. Patient¿s mean age was 65.2 (+/-8.32) years. A positive biopsy to adenocarcinoma was found in 44.9% of the patients. The number of positive biopsies was higher among older patients (p<0.001). It was also higher the higher the PSA (p<0.001) and the higher the PSA density (p<0.001). It was inversely related to PSA relation (p=0.002). Conclusion: There is a direct correlation between prostatic neoplasia and age, value of PSA and PSA density. Additionally, prostatic neoplasia is inversely proportional to the relation of free PSA over total PSA / Mestrado / Fisiopatologia Cirúrgica / Mestre em Ciências da Cirurgia

A insuficiência cardíaca é uma síndrome clínica de alta morbimortalidade e em uma parcela expressiva de casos, sem etiologia definida, o papel de agentes infecciosos tem sido considerado. No entanto, muitas dúvidas existem neste contexto, além de incipiente participação da população nacional em estudos sobre o tema. O objetivo deste estudo foi determinar a frequência de agentes infecciosos pré-estabelecidos e de inflamação, em fragmentos de biopsia endomiocárdica de pacientes com miocardiopatia dilatada idiopática e miocardiopatias de outras etiologias específicas, em comparação a grupo controle sem evidência de cardiopatia. Entre julho de 2008 e agosto de 2011 foram estudados fragmentos de biopsia endomiocárdica de pacientes internados com miocardiopatia dilatada idiopática em avaliação para transplante cardíaco, doadores e corações explantados de diferentes miocardiopatias. Foram definidos 2 grupos: doadores (29 casos) e miocardiopatas (55 casos, incluindo, 32 idiopáticos, 9 chagásicos, 6 isquêmicos e 8 de outras etiologias específicas). Observamos que a inflamação por linfócitos T foi mais intensa nos miocardiopatas em relação aos doadores, não havendo diferença em relação à presença de macrófagos, expressão de HLA de classe II e de ICAM-I. Quando se comparou por etiologia, a inflamação na doença de Chagas foi preponderante. A pesquisa de microorganismos por imunohistoquímica demonstrou uma maior expressão de antígenos de enterovírus nos doadores, de borrelia e das hepatites B e C nos miocardiopatas. Por biologia molecular, em todos os grupos, a positividade para os microorganismos foi elevada, incluindo co-infecções, havendo uma maior positividade de adenovírus e HHV6 nos doadores em relação aos miocardiopatas. Os parâmetros de inflamação não se correlacionaram à presença de microorganismos, quer seja por imunohistoquímica ou por biologia molecular. Que seja do nosso conhecimento, este estudo foi pioneiro ao demonstrar a presença de vírus em tecido cardíaco de miocardiopatia chagásica e aumento da expressão de HLA de classe II, ICAM-I e do número de macrófagos em fragmentos de biopsia endomiocárdica de doadores, tal como nas miocardiopatias. Assim, podemos concluir que a presença de agentes infecciosos e inflamação no miocárdio de pacientes com miocardiopatia dilatada idiopática é frequente, e da mesma forma, em doadores de transplante cardíaco e miocardiopatias de outras etiologias. Com base em nosso estudo, a relação causal entre a presença de agentes infecciosos no tecido cardíaco e o desenvolvimento de miocardiopatia é controversa. Novos estudos envolvendo a quantificação de cópias de microorganismos, utilização de diferentes técnicas simultaneamente, sequenciamento de cepas patogênicas, simbiose entre agentes e o hospedeiro, produção de autoanticorpos mediada por microorganismos e predisposição genética do hospedeiro devem ser realizados visando estabelecer o real papel de agentes infecciosos no desenvolvimento das miocardiopatias / Heart failure is a clinical syndrome with high morbidity and mortality. In a significant portion of cases of unknown etiology, the role of infectious agents has been considered. However, there are many pitfalls in this context and incipient studies including national population. The aim of this study was to determine the frequency of predetermined infectious agents and inflammation in endomyocardial biopsy specimens from patients with idiopathic dilated cardiomyopathy and other specific etiologies, compared to the control group without heart disease. Between July 2008 and August 2011 were studied endomyocardial biopsy specimens from hospitalized patients with idiopathic dilated cardiomyopathy undergoing evaluation for heart transplantation, donors and explanted hearts from different cardiomyopathies. 2 groups were defined: donors (29 cases) and cardiomyopathy (55 cases, including 32 idiopathic, 9 chagasic, 6 ischemic and 8 other specific etiologies). We observed that inflammation by T lymphocytes was more intense in cardiomyopathy in relation to donors and no difference regarding the presence of macrophages, expression of class II HLA and ICAM-I. When comparing by etiology, inflammation in Chagas\' disease was predominant. The search of microorganisms by immunohistochemistry showed a higher expression of antigens of enteroviruses in donors, borrelia, hepatitis B and C in cardiomyopathy. In molecular biology, in all groups, the positivity was elevated to microorganisms, including co-infection, with a higher positivity to adenovirus and HHV6 in donors towards cardiomyopathy. The parameters of inflammation did not correlate with the presence of microorganisms, either by immunohistochemistry or by molecular biology. To our knowledge, this study was pioneer demonstrating the presence of virus in the heart tissue of chagasic cardiomyopathy and increased expression of class II HLA, ICAM-I and macrophages in endomyocardial biopsy specimens from donors, as in cardiomyopathies. Thus, we can conclude that the presence of infectious agents and inflammation in the myocardium of patients with idiopathic dilated cardiomyopathy is frequent, and similarly in heart transplant donors and cardiomyopathies of other etiologies. Based on our study, the causal relationship between the presence of infectious agents in cardiac tissue and the development of cardiomyopathy is controversial. Further studies involving the quantification of copies of microorganisms, simultaneous use of different techniques, sequencing of pathogenic strains, symbiosis between agents and the host, mediated autoantibody production by microorganisms and genetic predisposition of the host must be performed in order to determine the real role of infectious agents in the pathogenesis of cardiomyopathies

Nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) is a prevalent condition and frequently diagnosed in ultrasonography (US). Bidimensional ultrasonography steatosis grading is subjective and subject to interobserver and intraobserver variability. Hepatic biopsy is the standard diagnostic method, but its indication has some controversies. For clinical practice, noninvasive, objective and reproducible steatosis quantification is necessary. The aim of this study is to assess the performance of Doppler US indices of the three major hepatic vessels in steatosis diagnosis and grading, having histological study as reference. Doppler US was performed in 98 volunteers, including 49, with NAFLD who were submitted to liver biopsy. The other 49, without steatosis in US and without risk factors for NAFLD, were included as the healthy group and were not submitted to biopsy due to ethical reasons. Portal venous pulsatility index (PVI) was calculated by subtracting the minimal peak of portal velocity from the maximum peak and dividing the result by the maximum peak. Right hepatic vein waveform pattern (HVWP) was classified as monophasic, biphasic or triphasic. Hepatic artery resistance index (HARI) was calculated by subtracting end diastolic velocity from systolic peak velocity and dividing the result by systolic peak velocity. Hepatic artery pulsatility index (HAPI) was calculated subtracting end diastolic velocity from systolic peak velocity and dividing the result by mean velocity. Hepatic biopsy specimens were classified in mild steatosis (less than 33% of fatty hepatocytes), moderate (33 to 66%) and severe (more than 66%). Inflammation and fibrosis were classified according to intensity and localization in hepatic acini. PVI had inverse and significant correlation with steatosis presence in biopsy (r= - 0.69; p <0.0001). PVI media and standard deviation in healthy group was 0.35 ±0.08 and in steatosis group was 0.21±0.10 (p<0.0001). HVWP was predominantly triphasic in healthy group and in mild steatosis subgroup while monophasic pattern was the most frequent in moderate and severe steatosis. HARI and HAPI did not distinguish healthy from steatosis group. None of the indices significantly correlated with steatosis grading. Hemodynamic changes in portal and hepatic veins allow noninvasive steatosis diagnoses. In order to improve diagnostic capacity, a discriminant function was obtained using these two parameters, resulting in improvement of Doppler specificity, sensibility and accuracy for steatosis diagnostic. This is a simple and clinical applicable analysis. Doppler indices have limitations in quantifying steatosis as in diagnosing inflammation and fibrosis. / A doença hepática gordurosa não alcoólica (DHGNA) é prevalente e frequentemente diagnosticada à ultrassonografia (US). A gradação da esteatose pela US bidimensional é subjetiva e sujeita à variabilidade inter e intra-observador. A biópsia hepática é o método diagnóstico padrão, havendo, porém, controvérsias sobre sua indicação. É necessária, para a prática clínica, a quantificação não invasiva, objetiva e reprodutível da esteatose. O objetivo deste estudo foi avaliar o desempenho dos índices do Doppler hepático dos três principais vasos no diagnóstico e gradação da esteatose, comparando-se com análise histológica. US com Doppler foi realizada em 98 voluntários, entre os quais 49, com DHGNA, foram submetidos à biópsia. Os demais 49, sem esteatose à US e sem fatores risco para DHGNA foram incluídos como controles e não submetidos à biópsia por motivos éticos. O índice de pulsatilidade venosa portal (IVP) foi calculado subtraindo-se o pico mínimo de velocidade portal do pico máximo e dividindo-se pelo pico máximo. A onda de velocidade de fluxo (OVF) da veia hepática direita foi classificada em monofásica, bifásica e trifásica. O índice de resistividade (IR) da artéria hepática foi calculado subtraindo-se a velocidade diastólica final do pico de velocidade sistólica e dividindo-se pelo pico de velocidade sistólica. O índice de pulsatilidade (IP) da artéria hepática foi calculado subtraindo-se a velocidade diastólica final do pico de velocidade sistólica e dividindo-se pela velocidade média. Os espécimes obtidos por biópsia hepática por agulha foram classificados em esteatose discreta (até 33% dos hepatócitos infiltrados por gordura), moderada (de 33 a 66%) e acentuada (mais de 66%). A fibrose e a inflamação foram classificadas segundo sua intensidade e localização no ácino hepático. O IVP apresentou correlação inversa e significante com a presença de esteatose à biópsia (r= -0,69; p <0,0001). A distribuição do padrão da OVF da veia hepática direita foi predominantemente trifásico nos controles e no subgrupo com esteatose discreta enquanto o padrão monofásico foi mais frequente na esteatose moderada e acentuada. IR e IP da artéria hepática não distinguiram grupo controle do grupo com esteatose. Nenhum dos índices correlacionou-se significativamente com a gradação da esteatose. As alterações hemodinâmicas das veias porta e hepática permitem o diagnóstico não invasivo da esteatose. Para melhorar a capacidade diagnóstica obteve-se uma função discriminante com estes dois parâmetros, que aumentou especificidade, sensibilidade e acurácia do Doppler para o diagnóstico de esteatose, com uma análise de simples realização e passível de aplicabilidade clínica. Os parâmetros hemodinâmicos estudados mostraram limitações para diagnóstico de inflamação, fibrose e para a gradação da esteatose. / Mestre em Ciências da Saúde

A insuficiência cardíaca é uma síndrome clínica de alta morbimortalidade e em uma parcela expressiva de casos, sem etiologia definida, o papel de agentes infecciosos tem sido considerado. No entanto, muitas dúvidas existem neste contexto, além de incipiente participação da população nacional em estudos sobre o tema. O objetivo deste estudo foi determinar a frequência de agentes infecciosos pré-estabelecidos e de inflamação, em fragmentos de biopsia endomiocárdica de pacientes com miocardiopatia dilatada idiopática e miocardiopatias de outras etiologias específicas, em comparação a grupo controle sem evidência de cardiopatia. Entre julho de 2008 e agosto de 2011 foram estudados fragmentos de biopsia endomiocárdica de pacientes internados com miocardiopatia dilatada idiopática em avaliação para transplante cardíaco, doadores e corações explantados de diferentes miocardiopatias. Foram definidos 2 grupos: doadores (29 casos) e miocardiopatas (55 casos, incluindo, 32 idiopáticos, 9 chagásicos, 6 isquêmicos e 8 de outras etiologias específicas). Observamos que a inflamação por linfócitos T foi mais intensa nos miocardiopatas em relação aos doadores, não havendo diferença em relação à presença de macrófagos, expressão de HLA de classe II e de ICAM-I. Quando se comparou por etiologia, a inflamação na doença de Chagas foi preponderante. A pesquisa de microorganismos por imunohistoquímica demonstrou uma maior expressão de antígenos de enterovírus nos doadores, de borrelia e das hepatites B e C nos miocardiopatas. Por biologia molecular, em todos os grupos, a positividade para os microorganismos foi elevada, incluindo co-infecções, havendo uma maior positividade de adenovírus e HHV6 nos doadores em relação aos miocardiopatas. Os parâmetros de inflamação não se correlacionaram à presença de microorganismos, quer seja por imunohistoquímica ou por biologia molecular. Que seja do nosso conhecimento, este estudo foi pioneiro ao demonstrar a presença de vírus em tecido cardíaco de miocardiopatia chagásica e aumento da expressão de HLA de classe II, ICAM-I e do número de macrófagos em fragmentos de biopsia endomiocárdica de doadores, tal como nas miocardiopatias. Assim, podemos concluir que a presença de agentes infecciosos e inflamação no miocárdio de pacientes com miocardiopatia dilatada idiopática é frequente, e da mesma forma, em doadores de transplante cardíaco e miocardiopatias de outras etiologias. Com base em nosso estudo, a relação causal entre a presença de agentes infecciosos no tecido cardíaco e o desenvolvimento de miocardiopatia é controversa. Novos estudos envolvendo a quantificação de cópias de microorganismos, utilização de diferentes técnicas simultaneamente, sequenciamento de cepas patogênicas, simbiose entre agentes e o hospedeiro, produção de autoanticorpos mediada por microorganismos e predisposição genética do hospedeiro devem ser realizados visando estabelecer o real papel de agentes infecciosos no desenvolvimento das miocardiopatias / Heart failure is a clinical syndrome with high morbidity and mortality. In a significant portion of cases of unknown etiology, the role of infectious agents has been considered. However, there are many pitfalls in this context and incipient studies including national population. The aim of this study was to determine the frequency of predetermined infectious agents and inflammation in endomyocardial biopsy specimens from patients with idiopathic dilated cardiomyopathy and other specific etiologies, compared to the control group without heart disease. Between July 2008 and August 2011 were studied endomyocardial biopsy specimens from hospitalized patients with idiopathic dilated cardiomyopathy undergoing evaluation for heart transplantation, donors and explanted hearts from different cardiomyopathies. 2 groups were defined: donors (29 cases) and cardiomyopathy (55 cases, including 32 idiopathic, 9 chagasic, 6 ischemic and 8 other specific etiologies). We observed that inflammation by T lymphocytes was more intense in cardiomyopathy in relation to donors and no difference regarding the presence of macrophages, expression of class II HLA and ICAM-I. When comparing by etiology, inflammation in Chagas\' disease was predominant. The search of microorganisms by immunohistochemistry showed a higher expression of antigens of enteroviruses in donors, borrelia, hepatitis B and C in cardiomyopathy. In molecular biology, in all groups, the positivity was elevated to microorganisms, including co-infection, with a higher positivity to adenovirus and HHV6 in donors towards cardiomyopathy. The parameters of inflammation did not correlate with the presence of microorganisms, either by immunohistochemistry or by molecular biology. To our knowledge, this study was pioneer demonstrating the presence of virus in the heart tissue of chagasic cardiomyopathy and increased expression of class II HLA, ICAM-I and macrophages in endomyocardial biopsy specimens from donors, as in cardiomyopathies. Thus, we can conclude that the presence of infectious agents and inflammation in the myocardium of patients with idiopathic dilated cardiomyopathy is frequent, and similarly in heart transplant donors and cardiomyopathies of other etiologies. Based on our study, the causal relationship between the presence of infectious agents in cardiac tissue and the development of cardiomyopathy is controversial. Further studies involving the quantification of copies of microorganisms, simultaneous use of different techniques, sequencing of pathogenic strains, symbiosis between agents and the host, mediated autoantibody production by microorganisms and genetic predisposition of the host must be performed in order to determine the real role of infectious agents in the pathogenesis of cardiomyopathies

Orientadores: Luiz Roberto Lopes, Celso Dario Ramos / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-21T03:53:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alves_JoseRoberto_D.pdf: 4105947 bytes, checksum: af11b64c91070282e755c061d50774e9 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Introdução - Com os estudos de Gould et al. (1960), Cabanas (1977) e Morton et al. (1992), estabeleceu-se o conceito da pesquisa do linfonodo sentinela. Esse se baseia na teoria de que ao identificar a presença ou ausência de metástase no primeiro linfonodo que recebe a drenagem linfática a partir do tumor (sentinela), poderia representar o estado de acometimento dos outros linfonodos. Isto evitaria a realização desnecessária de linfadenectomias. Com o passar dos anos, foi consagrada para ser aplicada em casos de melanoma e câncer de mama. Nesta última década, tenta-se estender os princípios da utilização da pesquisa de linfonodo sentinela para os cânceres do aparelho digestivo. Entretanto, no caso do estômago, existem algumas dificuldades, como: presença de sistema de drenagem linfática multidirecional, ocorrência de metástases saltatórias e identificação de mais de um linfonodo sentinela por indivíduo. Objetivo - Criar e padronizar um modelo animal para o treinamento de pesquisa de linfonodos sentinelas em estômago. Método - Trinta e dois coelhos, saudáveis, foram submetidos à anestesia exclusivamente intramuscular. Por meio de laparotomia, foi injetado na subserosa da parede anterior do corpo gástrico, 0,1 ml de fitato marcado com tecnécio-99m (0,2 mCi), em seguida pelo mesmo orifício, de 0,2 ml de Azul Patente V® 2,5%. A cavidade abdominal foi avaliada, "in vivo", para pesquisa de suspeitas de linfonodos azuis (corados em azul) e com detector manual de radiação gamma aos 5, 10 e 20 minutos para detecção de suspeitas de linfonodos radioativos (radioatividade identificada superior a 10X o valor apresentado pelo fundo). Após 20 minutos, realizou-se ressecção e exérese total do estômago, baço e suspeitas de linfonodos, para posterior avaliação da radioatividade "ex vivo". A seguir, encaminharam-se as suspeitas de linfonodos para estudo histológico para identificação de tecido linfóide. Resultados - Foram identificados linfonodos em 30 coelhos (93,75%) com média de 2,2 por animal. Das 90 suspeitas de linfonodos detectadas, em 70 casos (77,77%) obteve-se confirmação histológica para tecido linfóide. Dessas, a maioria foi identificada e localizada na região entre o esôfago e o fundo gástrico durante a avaliação "in vivo" aos 5 minutos. Dois coelhos faleceram durante os experimentos (Taxa de mortalidade = 6,25%). Conclusão - O modelo experimental em coelhos para pesquisa de linfonodos sentinelas em estômago por métodos combinados foi factível, de fácil execução e baixa mortalidade, podendo ser usado para treinamento / Abstract: Introduction - The concept of sentinel lymph node was established by the studies of Gould et al. (1960), Cabanas (1977) and Morton et al. (1992). It is based on the theory that, whenever the presence or absence of metastasis is identified in the first lymph node that receives the lymphatic drainage from the tumor (sentinel) the status of involvement of other lymph nodes might be infered. This could avoid the performance of unnecessary lymphadenectomies. Over the years, its use was consecrated by its application in melanoma and breast cancer. In the last decade, attempts have been made to extend the principles of sentinel lymph node investigation to cancers of the digestive tract. In the case of stomach cancer, additional difficulties were found, such as multiple and aberrant lymphatic routes, the occurrence of skip metastasis and the possible identification of more than one sentinel lymph node in the same patient. Aim - To develop and evaluate an animal model for training sentinel lymph node navigation in the stomach. Methods - Thirtytwo healthy rabbits, were prepped and given intramuscular anesthesia. Through a formal laparotomy, they received a subserosal injection of 0.1 ml of phytate labeled with technetium-99m (0.2 mCi) in the anterior wall of the gastric corpus, followed by 0.2 ml of Blue Patent ® V 2.5%, through the same puncture site. Suspicious lymph nodes were searched in-vivo at 5, 10 and 20 minutes, both visually (Blue Patent stained lymph nodes) and with a manual gamma radiation detector (to detect suspected radioactive lymph nodes, displaying radioactivity levels over 10X the value displayed by the background). En-block resection of the stomach, spleen, visible limph nodes and local fat tissue was then performed and the specimen was assessed "ex vivo" for radioactivity. Suspected lymph nodes were sent for histological study to evaluate the presence of lymphoid tissue. Results - Radiolabeled or stained lymph nodes were identified in 30 rabbits (93.75%) with an average of 2.2 specimens per animal; of the 90 suspicious lymph nodes detected, histology confirmed lymphoid tissue in 70 cases (77.77%). Most lymph nodes were identified at the 5-minute in-vivo evaluation and their most common location was found to be in the region between the esophagus and the gastric fundus. Two rabbits died during the procedure resulting in a 6.25% mortality. Conclusion - The rabbit model proved adequate for training in sentinel node navigation in the stomach by combined methods (dye and radiocolloid) being easy to execute and associated with low mortality / Doutorado / Fisiopatologia Cirúrgica / Doutor em Ciências