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Caracterização funcional das isoformas citosólicas e peroxissomais de ascorbato peroxidase em arroz (Oryza sativa L.) / Functional characterization of cytosolic and peroxisomal isoforms of ascorbate peroxidase in rice (Oryza sativa L.)Rosa, Sílvia Barcellos January 2007 (has links)
As espécies reativas de oxigênio (ERO) são produzidas constantemente pelo metabolismo aeróbico. Em situações de estresse biótico ou abiótico, a produção é aumentada e a toxicidade das ERO pode conduzir a diversos danos celulares. As ERO atuam também como moléculas sinalizadoras regulando a expressão de genes de defesa a estresses, senescência, morte programada da célula, crescimento e desenvolvimento da planta, entre outros processos metabólicos. Uma vez que as ERO são tóxicas e também participam de eventos de sinalização, as células vegetais requerem mecanismos que regulem finamente a concentração intracelular destas moléculas. A ascorbato peroxidase (APx) é uma enzima fundamental do metabolismo antioxidante, catalisando a decomposição do H2O2. Em arroz, a APx é codificada por oito genes, cujas isoformas são caracterizadas por sua localização subcelular: citosólica, peroxissomal, mitocondrial ou cloroplástica. O objetivo deste trabalho foi caracterizar funcionalmente as APx citosólicas (OsAPx1 e OsAPx2) e peroxissomais (OsAPx3 e OsAPx4). A estratégia utilizada foi o silenciamento pós-transcricional por RNA de interferência (RNAi) dos genes individualmente e de ambos os genes codificantes de isoformas do mesmo compartimento subcelular. A redução da expressão de cada gene, assim como de ambos os genes de um compartimento, resultou na produção de diferentes sinais. As plantas RNAi mostraram diferentes fenótipos e padrões de expressão transcricional dos genes da família OsAPx. Analisando as plantas silenciadas para os genes OsAPx1 e OsAPx2 sob estresse com radiação UV e altas doses de alumínio, foi observada compensação por outras enzimas antioxidantes e aclimatação, possivelmente sinalizados pelos níveis mais elevados de H2O2. Estes resultados indicam que cada isoforma de OsAPx pode apresentar funções específicas na célula. / Reactive Oxygen Species (ROS) are continually produced by aerobic metabolism. Under biotic and abiotic stresses, the production is enhanced and the ROS toxicity can lead to cell damage. ROS act also as signalling molecules and are able to regulate the expression of resistance genes, senescence, programmed cell death, plant growth and development, among other metabolic processes. By the fact that ROS are cytotoxic and make part of signalling events, plant cells need mechanisms to tightly regulate the intracellular concentration of these molecules. Ascorbate peroxidase (APx) is a fundamental enzyme of the antioxidant metabolism, it catalyses the H2O2 decomposition. In rice, APx are encoded by a small multigene family, and the different isoforms are classified according to their subcellular localization: cytosolic, peroxisomal, mithocondrial or chloroplastic. The present work aimed to characterize the function of cytosolic (OsAPx1 and OsAPx2) and peroxisomal (OsAPx3 and OsAPx4) APx isoforms. The strategy was the post-transcription silencing by interference RNA (RNAi) of single genes and both genes of the same subcellular localization. The reduced expression of each gene or both genes from the same compartment resulted in the development of different signals. RNAi plants showed changes in the phenotype and in the transcriptional expression of the OsAPx gene family. The analyses of OsAPx1 and OsAPx2 silenced plants under stresses with UV radiation and aluminum revealed that the lack of APx was compensated by other antioxidant enzymes and the acclimation could be signaled by the increased level of H2O2. These results indicate that each isoform of APx should have specific functions in the cell.
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Detecção de Chlamydia trachomatis em amostras de urina masculina por reação em cadeia da polimeraseAquino, Alzira Resende do Carmo January 2005 (has links)
Infecções por Chlamydia trachomatis estão entre as mais freqüentes doenças sexualmente transmissíveis (DST) em todo o mundo, apresentando grande importância epidemiológica. A identificação deste patógeno pode ser difícil e um método de detecção baseado na amplificação de ácidos nucleicos é altamente desejável, por sua acurácia e rapidez. O presente estudo avaliou a acurácia, sensibilidade e especificidade de uma reação em cadeia da polimerase (PCR) in “house” em amostras de urina de homens com e sem sintomas de DST comparados a um teste comercial, o COBAS Amplicor CT/NG (Roche, Suiça). Foram utilizados primers específicos para amplificar um segmento do plasmídio críptico de C. trachomatis gerando um fragmento de 201 pb, cuja seqüência foi confirmada por clivagem enzimática e seqüenciamento automático. A especificidade analítica dos primers foi confirmada frente ao DNA de diferentes microrganismos patogênicos e não patogênicos da microbiota urogenital masculina. A detecção limite do DNA clamidial pela PCR in house após hibridização (Southern blot), foi de 1 pg. O COBAS Amplicor CT/NG foi considerado o teste de referência por ser automatizado e conter um programa de controle interno da reação para identificar inibição da DNA polimerase. Entre as 37 amostras testadas positivas para C. trachomatis pelo COBAS Amplicor, 33 foram confirmadas positivas pela PCR in house. Foram detectados inibidores da reação nas 4 amostras que apresentaram resultados falso-negativos, utilizando-se a técnica de contaminação da reação com o DNA clamidial (spiked) e um controle interno da reação com primers que amplificam a β-globina do DNA humano. Após congelamento e descongelamento para eliminar prováveis substâncias inibidoras lábeis, as 4 amostras foram re-testadas, resultando na positividade de mais 2 amostras, completando 35 amostras positivas pela PCR in house. Entre as 74 amostras testadas negativas para C. trachomatis pelo COBAS Amplicor, 72 foram confirmadas negativas pela PCR in house. Das 2 amostras prováveis falso-positivas, apenas 1 permaneceu positiva, após re-teste. Dos 111 pacientes analisados, 108 apresentaram resultados idênticos nos dois testes, o equivalente a uma acurácia = 97,3%, sensibilidade = 94,6% e especificidade = 98,6%. A alta sensibilidade e especificidade apresentada pela PCR in house, demonstra a possibilidade de triar e diagnosticar C. trachomatis em urina de homens, importante reservatório da infecção clamidial para as mulheres. / Chlamydia trachomatis infections are among the most commum sexually transmitted diseases and of great epidemiological importance world-wide. Identification of this pathogen can be difficult, and it is highly desirable to have a rapid and accurate nucleic acid amplification based detection method. The present study was designe to evaluate the accuracy, sensitivity and specificity of a in house plasmid-based polymerase chain reaction (PCR) and hybridization on first void urine specimens from symptomatic and asymptomatic men, compared with a commercial test the PCR COBAS Amplicor CT/NG (Roche, Switzerland), for detection of C. trachomatis (CT). Specific primers for the cryptic plasmid of C. trachomatis were designed to amplify a 201 bp fragment confirmed by enzymatic cleavage and automatic sequencing. The analytic specificity was determined by submitting to the intended protocol, the DNA of normal and pathogenic urogenital microbiota, the specific primers anneling was confirmed. The detection limit of the PCR and the Southern blot hibridization, was mesured in 1 pg of chlamydial DNA. The COBAS Amplicor CT/NG was considered the reference test, it contains a internal control (IC) programme to identify DNA polymerase inhibition. Among 37 positive specimens tested by COBAS Amplicor, 33 were confirmed positive by in house PCR and inhibitors of PCR were demonstrated in the 4 possibly false-negative samples performing DNA chlamydial spiking experiments and using a positive internal control of human β-globin DNA. The specimens were freezedthowed and re-tested to remove labile inhibitors, but 2 samples remained negative. Among 74 negative specimens by COBAS Amplicor, 72 were confirmed negative by in house PCR. The 2 problaby false-positive samples were re-tested and just one remained positive. The final results of the two tests were identical for 108 of the 111 pacients, accuracy = 97,3% ; sensitivity = 94,6% and specificity = 98,6%. This study shows that the in house plasmid-based PCR is fasible for detection of Chlamydia trachomatis in male urine specimens. This test presented high accuracy, sensitivity and specificity, offering great potencial for the screening of men, an important reservoir of infection chlamydial for women.
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Papel do alcalóide braquicerina na resposta ao estresse por radiação ultravioleta e dano mecânico em Psychotria brachyceras Müll ArgPorto, Diogo Denardi January 2009 (has links)
As plantas superiores sintetizam uma ampla variedade de compostos, denominados classicamente metabólitos secundários, que as ajudam a se adaptar ao seu ambiente. Um subconjunto de metabólitos secundários são os alcalóides. Essas substâncias nitrogenadas de baixo peso molecular desempenham funções variadas nas plantas, podendo apresentar propriedades antibióticas, repelentes de herbívoros ou alelopáticas. O alcalóide monoterpeno indólico braquicerina, de estrutura inédita, foi extraído da planta arbustiva Psychotria brachyceras (Rubiaceae). Esse composto revelou ação específica como antiinflamatório em testes de quimiotaxia, possuindo, portanto, potencial valor farmacológico. Trabalhos anteriores revelaram que a molécula possui significativas propriedades antioxidantes e antimutagênicas, e que a concentração foliar desse alcalóide é induzida por dano mecânico e radiação ultravioleta (UV). Neste trabalho, demonstramos os resultados de uma série de experimentos desenvolvidos com o objetivo de entender o papel de braquicerina em P. brachyceras frente a esses estresses. Uma parte dos experimentos foi desenvolvida paralelamente com amostras de Psychotria carthagenensis da mesma região, que não acumula alcalóides e é mais sensível a UV do que P. brachyceras, além de ser alvo significativo de herbívoros em seu ambiente natural. O comportamento de algumas classes de metabólitos secundários reconhecidas como importantes na resposta a ferimento e radiação UV é descrito em amostras de P. brachyceras submetidas a esses tratamentos. A aplicação de dano mecânico e de radiação ultravioleta não alterou os níveis de compostos fenólicos e flavonóides totais, respectivamente. A única classe de metabólitos que sofreu regulação nessas condições foram antocianinas, que tiveram sua concentração induzida em experimentos de exposição à UV; porém, os teores induzidos em P. brachyceras foram muito menores do que àqueles basais em P. carthagenensis. Os dados sugerem um papel predominante do alcalóide frente a esses estresses. O potencial tóxico/repelente da braquicerina foi testado em bioensaios que utilizaram herbívoros generalistas. O alcalóide isolado não foi capaz de inibir o consumo das amostras pelos animais, o mesmo ocorrendo com extratos de P. brachyceras. Porém, extratos de P. carthagenensis inibiram a alimentação do molusco Helix aspersa, provavelmente pela presença de taninos. A atividade protetora do alcalóide foi testada em discos foliares de P. carthagenensis expostos à UV. A aplicação de braquicerina diminuiu a degradação de clorofilas causada pela radiação. Ensaios de atividade antioxidante in vitro e in vivo demostraram que o alcalóide é ativo em relação ao ânion superóxido e ao peróxido de hidrogênio, espécies ativas de oxigênio importantes no estresse por ultravioleta e dano mecânico, respectivamente. Além disso, foi verificado que epidermes foliares acumulam braquicerina. Os dados sugerem uma atividade predominantemente antioxidante ou moduladora de estresse oxidativo para o alcalóide. Essa atividade de detoxificação pode fazer parte de uma estratégia de tolerância da planta tanto em relação ao ultravioleta quanto ao ferimento/herbivoria e pode ser importante em outras condições adversas. / Higher plants synthesize a wide range of compounds, classically known as secondary metabolites, which help plants adapt to their environment. A class of secondary metabolites are the alkaloids. These nitrogen-containing low molecular weight substances play several roles in plants as antimicrobial, herbivore deterrents or allelopathic agents. The monoterpene indole alkaloid brachycerine, which has a unique structure, was extracted from the shrub Psychotria brachyceras (Rubiaceae). This compound showed antinflamatory activity in chemotaxis assays, indicative of pharmacological potential. Previous work described antioxidant and antimutagenic effects for brachycerine, and the regulation of its leaf tissue concentration upon ultraviolet (UV) radiation exposure and mechanical damage stress. In this thesis, we report the data from a series of experiments in an attempt to understand the roles of brachycerine in P. brachyceras with regard to wounding and UV stresses. Some experiments were carried on using samples from Psychotria carthagenensis shrubs of the same region, a plant devoid of detectable alkaloids. P. carthagenensis leaves are UV-sensitive if compared to P. brachyceras and are often found damaged by herbivores in field-grown plants. The contents of secondary metabolites with known functions in wounding and UV responses are described from experiments in which P. brachyceras samples were submitted to these treatments. The only group of secondary metabolites regulated by these stresses was that of anthocyanins in UV treated samples; however, induced content of these metabolites were always much lower than the basal ones in P. carthagenensis. The data indicated a major role for brachycerine in UV and wound responses. Toxic/deterrent properties of brachycerine were tested in bioassays with generalist herbivores. The alkaloid failed to deter herbivore feeding, however, samples treated with P. carthagenensis extracts were less consumed by the snail Helix aspersa, and this may be due to the presence of tannins. UV-protecting activity was tested in brachycerine-treated P. carthagenensis leaf disks exposed to UV radiation. Brachycerine treatment protected disk samples from UV-driven chlorophyll loss. In vitro and in vivo assays detected antioxidant activity of brachycerine towards superoxide anion and hydrogen peroxide, reactive oxygen species related to UV and wounding stress, respectively. In addition, it was shown that leaf epidermal layers accumulate brachycerin. The results suggest an antioxidant or oxidative stress modulator role for brachycerine in P. brachyceras. This detoxifying activity may be part of a tolerance strategy in relation to UV and wounding stresses, and perhaps to other environmental pressures.
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Aproveitamento do soro de queijo para a produção de lactase por kluyveromyces marxianusRech, Rosane January 1998 (has links)
Neste trabalho foram desenvolvidos, em escala laboratorial, processos para o aproveitamento do soro de queijo como meio de cultura para as leveduras Kluyveromyces marxianus CBS 712 e Kluyveromyces marxianus CBS 6556 , objetivando a produção de lactase. A primeira etapa dos experimentos foi realizada em incubadora rotatória para determinar-se as condições ideais de crescimento microbiano (pH, meio de cultura e temperatura). Os resultados desta etapa definem que o pH e a temperatura ideais de crescimento são 5,5 e 37oC, respectivamente. Quanto ao meio de cultura, definiu-se soro de queijo in natura (7% w/v) para a cepa CBS 6556 e soro suplementado com extrato de levedura (1% w/v) para a cepa CBS 712. A segunda etapa dos experimentos foi realizada em biorreator aerado, utilizando-se as condições de crescimento determinadas na etapa anterior, com o objetivo de determinar a melhor cepa produtora de lactase. Ambas linhagens produziram quantidades equivalentes da enzima, sendo então escolhida, para os testes posteriores de otimização do processo e caracterização enzimática parcial, a levedura Kluyveromyces marxianus CBS 6556, por utilizar um meio de cultura mais simples e barato. Testou-se, então, o crescimento em soro de queijo concentrado (21% w/v), que resultou em uma maior produtividade específica de lactase pela levedura, contudo apresentou, também, maior produção de etanol, tóxico à célula. A caracterização enzimática mostrou que a lactase produzida possui atividade enzimática máxima em torno de 37oC e que possui pouca estabilidade à temperatura ambiente (30oC) e ao armazenamento à 4oC. Durante o armazenamento nas temperaturas de -4oC e -18oC a enzima conservou sua estabilidade durante as nove semanas.
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Dinâmica tecnológica no agronegócio brasileiro : uma análise de alguns indicadores de capacitação tecnológica de empresas privadas de sementesMoura, Débora de January 2003 (has links)
A indústria de sementes vem ao longo do tempo tornando-se um fator de grande importância para o desempenho da agricultura. Nos últimos anos, a importância do setor pode ser percebida pela nova dinâmica da indústria de sementes, a partir das mudanças cada vez mais constantes e profundas tanto no plano econômico, como no tecnológico. A emergência da biotecnologia agrícola está muito imbricada com as fusões e aquisições recentes, envolvendo a indústria de sementes, mas também o setor agroquímico, o novo aliado estratégico das empresas de sementes. A importância do mercado brasileiro de sementes é evidente. O Brasil detém a sexta posição no mercado para o consumo de sementes –estimado em US$ 1.200 milhões, o que se traduz em 4% do mercado mundial, que movimenta aproximadamente US$ 30 bilhões ao ano. Esta importância justifica este trabalho, que faz uma análise exploratória da capacitação tecnológica das empresas privadas de sementes no Brasil, sob a luz da teoria neoschumpeteriana. Metodologicamente os dados foram coletados junto às principais empresas privadas (de capital nacional e estrangeiro) produtoras de sementes básicas. As informações foram obtidas através de entrevistas com os diretores de P&D, referentes ao período de 1999-2002. Dentre os principais resultados obtidos pode se destacar o uso da biotecnologia no desenvolvimento de sementes geneticamente modificadas, ou seja, a produção de sementes transgênicas, a busca constante de técnicas de aperfeiçoamento do melhoramento genético de plantas, o desenvolvimento de sementes cada vez mais resistentes a pragas e doenças, e as crescentes parcerias na condução das atividades tecnológicas. Foi possível também concluir que tecnologicamente os dois tipos de empresas são similares em termos de capacitação de recursos humanos (qualificação e número de pesquisadores). A aquisição e a disponibilidade de recursos financeiros é a diferença mais relevante entre os dois tipos de empresas. Também se concluiu que a extensão e o potencial agrícola torna o Brasil um país atrativo tanto para o desenvolvimento de novas técnicas utilizadas no desenvolvimento de novas sementes, quanto na instalação de empresas multinacionais como ponto de partida para a atuação das mesmas em todo o mercado latino-americano. / Across the time, the industry of seeds is turning into a factor of great importance for the agriculture performance. In the last years, the importance of this sector could be percieved by the new dynamics of the seeds’ industry, from the increasingly deep changes both in the economic plan and in the technology plan. The emergency of the agricultural biotechnology is mixed with the recent movement of mergers and acquisitions (involving the seeds’ industry), but also with the agro-chemical sector (the new strategical ally of the seeds’ companies). The importance of the Brazilian seeds market is evident. Brazil withholds the sixth position in the market for the consumption of seeds – estimated in USS 1,200 million – which represents 4% of the world market that envolves approximately USS 30 billion a year. Such importance justifies this work, which makes an exploratory analysis of the technological qualification of the private seed companies in Brazil, under the light of the neo-chumpeterian theory. Metodologically, the data had been collected in the main privaties companies (with national and foreign capital) that produce basic seeds. The information had been gotten through interviews with R&D directors, concerning the period between 1999-2002. Amongst the main results, it can be highlighted the use of the biotechnology in the development of genetically modified seeds, the constant search for techniques to enhance plants’ genetic improvement, the development of more resistant seeds (to herbs and illnesses), and the increasing partnerships in the conduction of technological activities. It was also possible to conclude that, tecnologically, the two types of companies are similar in terms of human resources qualification (qualification and number of researchers). The acquisition and the availability of financial resources are the most relevant differences between the two types of companies. It was also concluded that the extension and potential of Brazilian agricultural make it an attractive country both for the development of new techniques used in the development of new seeds and for the installation of multinational companies, as the starting point for their performance in all Latin American market.
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Indução de múltiplas ovulações utilizando baixa dose de GnRH (deslorelina) em éguasAZEVEDO, Márlon de Vasconcelos 20 February 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-02-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This study was aimed to induce multiples ovulations in mares using low doses of GnRH at a fixed time and determinate its impact on reprodutive efficiency and economic results in a commercial program for embryo transfer, in northeastern Brazil. In the experiment 01 was used 15 embryo donor mares, 10 were Quarter Horse Breed and 5 were Magalarga Machador Breed, aged between 8 and 20 years. After being monitored and inseminated during estrus and performed the embryo collection constituting the G1, it was applied 7.5mg of dinoprost-tromethamine the G2 consisting of the sames mares of G1, experiment was started wilh examinations twice a day to detect the highest follicle with 23to 25 mm and the second > 18 mm, ideal moment to start the treatment, with 100 μg of deslorelin acetate, with an interval of 12h, until the largest follicle reaches 33 to 35 mm in diameter, when the ovulation induction was realized with 1mg of deslorelin acetate associated IM to 1000 UI of hCG IV. In the experimente 02 were used 7 donors, 4 were Quarter Horse Breed and 3 were Magalarga Machador Breed, aged between 8 and 20 years. The groups G1 and G2 are equal to the experimente 01, being increased the G3 that begins after the reapplication of 7.5 mg of dinoprosttromethamine after the G2 collection, after 48h the treatment is started with 100 μg (1ml) of deslorelin adetate, bib, until the lasgest follicle reaches 34±1 mm in diameter or 6 days of application. In the experiment 01 the mares percentage with multiple ovulations in the control cycle (G1), experimental cycle (G2) were (2/15) 13.33% and (13/15) 86.66%, respectively (P<0.05). It was also obsorved an increase in the embryos recovered numbers being in the control group only 9 when in the experimental group were 16 embryos (P<0.05), with an embryos/mares average of 0.6±0.48 in the control group and 1.066±0.497 in the experimental group (P>0.05); with an embryo recovery rate of 60% G1 and 80% in G2 (P<0.05). It was observed an increase in the number of recovered embryos being in G1 3, G2 6 and G3 0 (P<0.05), with an embryo/mare recovery average of 0.4 3± 0.53 in G1, 0.86 ± 0.38 in G2 and 0 in G3 (P>0.05); with an embryo recovery rate of 43% G1, 85.71% in G2 and 0% in G3 (P<0.05).It can be conclude from the results that the administration of GnRh low-dose in embryo donors, interfered positively in the growth of the dominat follicle and second dominant follicle, increasing the incidence of multiple ovulations, incrementing the embryo recovery rate per cycle, improving the reproductive efficiency of treated donors and that the treatment when started early, with follicles < 25 mm, presents below-expected results, it is not efficient to induce double ovulation. / Objetivou-se com este trabalho induzir ovulações múltiplas em éguas utilizando baixas doses de GnRH (deslorelina) em tempo fixo e determinar seu impacto sobre a eficiência reprodutiva e resultados econômicos em um programa comercial de transferência de embriões, no agreste pernambucano. No experimento 01 foram utilizadas quinze éguas doadoras de embrião sendo dez da Raça Quarto de Milha e cinco da raça Mangalarga Machador, com idade entre oito e vinte anos. O grupo 1 (G1) iniciou-se com o monitoramento do ciclo estral, inseminação atrificial durante o estro e colheita de embriões no oitavo dia pós ovulação. O Grupo 2 (G2) constituido pelas mesmas éguas do G1, tendo início com a aplicação de 7,5 mg de dinoprost-trometamina, o monitoramento dos ovários através do ultarassom, duas vezes ao dia até a detecção do maior folículo com diâmetro de 23 a 25 mm e o segundo > 18 mm, momento inicial do tratamento superovulatório, com 100 μg de acetato de deslorelina, com intervalo de 12 h, até quando o maior folículo atingisse o diâmetro de 33 a 35 mm, quando foi realizado a indução da ovulação atravez da aplicação de 1000 μg de acetato de deslorelina IM associado a 1000 UI de hCG IV. No experimento 02 foram utilizadas sete éguas doadoras, sendo quatro da Raça Quarto de Milha e três da raça Mangalarga Machador, com idade entre oito a vinte anos. Os grupos G1 e G2 são iguais ao experimento 01, sendo acrescido do G3 que se iniciou após a reaplicação de 7,5 mg de dinoprosttrometamina após a colheita do G2, 48 h após é iniciado o tratamento com 100 μg (1ml) de acetato de deslorelina, com intervalo de 12h, até que o maior folículo atingisse 34±1 mm de diâmetro ou 6 dias de aplicação, quando foi feita a indução de ovulação com o mesmo protocolo do G2 . No experimento 01 o percentual de éguas com múltiplas ovulações no G1 e G2 foi de (2/15) 13,33% e de (13/15) 86,66%, respectivamente (P<0,005). Também foi observado um incremento no número de embriões recuperados, sendo no G1 apenas nove, enquanto no G2 foram de dezesseis embriões (P<0,005), com uma média de recuperação de 0,6±0,48 no G1 e de 1,066±0,497 no G2 (P>0,005); e o percentual de recuperação embrionária foi de 60% G1 e de 80% no G2 (P<0,005). No experimento 02 o percentual de éguas com múltiplas ovulações no G1, G2 e G3 foi de 14,28% (1/7), 100,00% (7/7) e 0% (0/7) respectivamente (P<0,005). Foi observado um incremento no número de embriões recuperados sendo no G1 três, G2 seis e G3 zero (P<0,005), com uma média de recuperação embrionária de 0,43 ± 0,53 no G1, de 0,86 ± 0,38 no G2 e 0 G3 (P>0,005); com um percentual de recuperação embrionária de 43% G1, de 85,71% no G2 e 0% no G3 (P<0,005). Os resultados obtidos nestes experimentos permitem concluir que a administração de GnRH (deslorelina) em baixa dose em éguas doadoras de embriões, interferiu positivamente no crescimento do folículo dominante e do segundo folículo, aumentando a incidência de ovulações múltiplas. Incrementando a taxa de recuperação embrionária por ciclo, melhorando a eficiência reprodutiva das doadoras tratadas e que o tratamento quando iniciado precocemente (48h), com folículos < 25 mm, apresenta resultados abaixo do esperado, não sendo eficiente para induzir ovulação dupla.
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Linguagem científica e tecnológica no jornalismo da Embrapa: anotações sobre discursos no relise difusionistaSILVA, Dalmo Oliveira da January 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007 / Esta dissertação analisa a linguagem e os caminhos discursivos adotados e desenvolvidos em relises produzidos por jornalistas da assessoria de imprensa da Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (Embrapa). O objetivo geral da pesquisa é investigar como ocorre a construção do discurso sobre biotecnologia nos relises selecionados e, de maneira mais detalhada, identificar estratégias discursivo-textuais utilizadas nessa construção discursiva. Metodologicamente a pesquisa se enquadra na linha que investiga a linguagem dos meios, a partir de bases teóricas da Análise do Discurso, recorrendo, principalmente às conceituações de Norman Fairclough (2001); Orlandi (1987, 2001, 2003) e Coracini (1991). O estudo se apropria ainda de conceitos propostos por Mikhail Bakhtin (1988) e de aspectos metodológicos da Sociologia do Conhecimento, Estudos de mídia e teorias do jornalismo. A análise foi realizada a partir de um corpus coletado, via internet, do site da Embrapa, tendo como determinante discursivo os enunciados relativos à biotecnologia. A metodologia de pesquisa é pensada tomando por base duas preocupações básicas: 1) as condições de produção dos relises analisados; e 2) a conjuntura histórico-social e tecnológica que envolve o discurso desses relises. O corpus ampliado da pesquisa foi formado por uma coleção de 51 relises, que foram agrupados em três categorias: i - relise de cobertura de eventos; ii - relise institucional e iii - relise científico ou tecnológico. O estudo mostra a influência do difusionismo na construção enunciativa dos relises disponibilizados na internet e enviados à imprensa; analisa a busca de hegemonia do discurso econômico nesse tipo de noticiário e observa ainda a interferência do discurso publicitário e do marketing na constituição de um modelo enunciativo específico chamado Jornalismo Científico
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Engenharia evolutiva de Saccharomyces cerevisiae e Zymomonas mobilis para utilização na produção de etanol de segunda geraçãoSILVA, Maria da Glória Conceição da 29 April 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-04-29 / CNPQ / A presente dissertação teve como objetivo obter linhagens etanologênicas robustas por
engenharia evolutiva para produção de etanol de segunda geração. As duas linhagens
utilizadas neste trabalho, Saccharomyces cerevisiae UFPEDA 1238 e Zymomonas
mobilis UFPEDA 205, foram selecionadas em trabalho anterior por suas características
de fermentação em meio de glicose, na presença e/ou na ausência de hidrolisado
hemicelulósico de bagaço de cana-de-açúcar. Para a evolução das duas linhagens,
foram realizadas transferências em tubos de ensaio contendo meios de fermentação
com concentrações crescentes de hidrolisado, com a finalidade de aumentar a
tolerância aos inibidores presentes no hidrolisado. O hidrolisado hemicelulósico foi
obtido por tratamento hidrotérmico (195°C, 10 minutos, 10% carga de sólidos) em um
reator descontínuo de 20 L (Regmed AU/E-20). Z. mobilis não cresceu em presença de
hidrolisado com concentração acima de 25 % (v/v). A população procedente de S.
cerevisiae UFPEDA 1238 cresceu em meio com até 75% (v/v) de hidrolisado. Dessa
população, foram isoladas 2 linhagens, L1 e L2. A linhagem L2 foi escolhida para
comparação com a linhagem parental por apresentar melhores resultados em
produtividade celular e produtividade de etanol em fermentações com o hidrolisado. As
fermentações foram realizadas em biorreator de bancada instrumentado de 2 L, com
pH, agitação e temperatura controlados em 5, 500 rpm e 35°C, respectivamente. Em
meio de fermentação com glicose, sem hidrolisado hemicelulósico, S. cerevisiae
UFPEDA 1238 e S. cerevisiae L2 apresentaram, respectivamente, rendimentos de
etanol iguais a 0,37 g g-1 e 0,38 g g-1 e produtividades de etanol 2,42 g L-1 h-1 e 1,75 g L-
1 h-1. UFPEDA 1238 e L2, em meio de fermentação com glicose e hidrolisado, exibiram,
respectivamente, rendimentos de etanol iguais a 0,07 g g-1 e 0,20 g g-1 e produtividades
de etanol iguais a 0,05 g L-1 h-1 e 0,16 g L-1 h-1. Através de engenharia evolutiva, foi,
portanto, possível se obter uma linhagem de S. cerevisiae que apresentou um melhor
desempenho fermentativo em hidrolisado de bagaço de cana-de-açúcar em
comparação com a linhagem parental. / The aim of this work was obtaining robust ethanologenic microorganisms by evolutionary
engineering for second generation ethanol production. The two strains used in this study,
Saccharomyces cerevisiae UFPEDA 1238 and Zymomonas mobilis UFPEDA 205, were
selected in previous work for their fermentation characteristics in glucose media, in the
presence and/or absence of sugarcane bagasse hemicellulosic hydrolysate. For the
evolution of the two strains, aiming the increase of tolerance to inhibitors present in the
hydrolysate, transfers were made in test tubes containing fermentation media with
increasing concentrations of the hydrolysate. The hemicellulosic hydrolysate was
obtained by hydrothermal treatment (195 ° C, 10 min) in a 20 L batch reactor (Regmed
AU/E-20). Z. mobilis ZAP was not capable of growing in the presence of 25% (v/v)
hydrolysate concentration. The population originating from S. cerevisiae UFPEDA 1238
grew in media containing up to 75% (v/v) hydrolysate. From this population, two strains,
L1 and L2, were isolated. L2 was chosen for comparison with the parental strain for
showing best results in cell productivity and yield of ethanol after fermentation in
hydrolysate. The fermentations were carried out in an instrumented 2 L bioreactor, with
pH, agitation and temperature controlled at 5, 500 rpm and 35 °C, respectively. In
glucose medium without hydrolysate, S. cerevisiae UFPEDA 1238 and S. cerevisiae L2
showed, respectively, ethanol yields of 0.37 g g-1 and 0.38 g g-1 and ethanol
productivities of 2.42 g L-1 h-1 and 1.75 g L-1 h-1. In glucose medium with hemicellulosic
hydrolyzed, UFPEDA 1238 and L2 exhibited, respectively, ethanol yields of 0.07 g g-1
and 0.20 g g-1 and ethanol productivities of 0.05 g L-1 h-1 and 0.16 g L-1 h-1. Through
evolutionary engineering it was thus possible to obtain a strain of S. cerevisiae with
better fermentation performance in sugarcane bagasse hydrolyzate compared to the
parental strain.
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Uso de consórcio microbiano facultativo no estudo da biodegradação e geração de biogás de resíduos sólidos urbanos envelhecidos em aterrosHOLANDA, Sávio Henrique de Barros 31 August 2016 (has links)
Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-05-02T20:13:26Z
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Previous issue date: 2016-08-31 / CAPES / CNPQ / Atividade bastante praticada no exterior, a mineração de aterros de resíduos sólidos ainda é desconhecida da sociedade brasileira. Dentre as várias alternativas de tratamento dos resíduos sólidos urbanos minerados, o processo biodegradativo da digestão anaeróbia evidencia-se, sobretudo, devido ao baixo custo aliado a um balanço energético favorável. Nesse contexto, visando a associar e a viabilizar a biodegradação de resíduos minerados, fazendo-se uso da digestão anaeróbia em diferentes biodigestores, aplicou-se uma técnica biotecnológica ao processo, no qual se utilizou, como substrato, o resíduo minerado, e como inóculos, o lodo de esgoto anaeróbio e um consórcio microbiano hidrolítico facultativo. Após um período de biodigestão de, aproximadamente, 70 dias, em cada fase do estudo, com monitoramento diário da sobrepressão interna dos biodigestores, verificou-se um comportamento destacado, nos biorreatores contendo “RSU+Lodo+CM”, na 1ª fase, e “Lodo+CM”, na 2ª fase, bastante superior ao comportamento das demais combinações estudadas, cujos potenciais de biogás e metano, em biorreatores tradicionais, foram 38,40 NmL/g MS e 24,68 NmLCH4/g MS, para “RSU+Lodo+CM”, e 35,57 NmL/g MS e 47,85 NmLCH4/g MS, para “Lodo+CM”, respectivamente; e referente aos mesmos cenário, porém, em biorreatores inox, registraram-se potenciais de biogás e metano de 41,03 NmL/g MS e 21,36 NmLCH4/g MS, para “RSU+Lodo+CM”, e 40,40 NmL/g MS e 60,52 NmLCH4/g MS, para “Lodo+CM”, nessa ordem. Já no AMPTS II, obtiveram-se resultados de potencial de metano, para os mesmo cenários, de 11,46 NmLCH4/g MS (“RSU+Lodo+CM”) e de 42,91 NmLCH4/g MS (“Lodo+CM”). Diante destes cenários de potenciais de biogás e metano, torna-se imprescindível evidenciar e valorizar a prática da biotecnologia associada à recuperação de resíduos aterrados. / As it is a very practiced activity worldwide, mining of landfill solid residues is still unknown by Brazilian society. Among the several alternatives of mined urban solid residue treatments, the biodegradable process of anaerobic digestion stands out, mainly, due to the low cost allied to a favorable energetic balance. In this context, aiming to associate and enable the feasibility of the biodegradation of mined residues, making use of anaerobic digestion in different biodigestors, a biotechnological technique was applied to the process, in which a mined residue was used as a substrate, and as inoculants, a slurry from an anaerobic sewer together with an optional hydrolytic microbial consortium was used. After a biodigestion period of, approximately, 70 days, in each phase of the study, while monitoring the internal overpressure in a daily basis, the following behavior was verified, in the bioreactors containing “RSU+Slurry+CM”, in phase 1, and “Slurry+CM”, in phase 2, presented behavior higher than the other studied combinations, whose potentials of methane and biogas, in traditional bioractors were 38.4 NmL/g MS and 24.68 NmLCH4/g MS, for RSE+Slurry+CM, and 35.57 NmL/g MS and 47.85 NmLCH4/g MS, for Slurry+CM, respectively; regarding the same scenarios, however, in stainless steel bioreactors, potentials of biogas and methane of 41.03NmL/g MS and 21.36 NmLCH4/g MS, for RSU+Slurry+CM, and 40.40 NmL/g MS and 60.52 NmLCH4/g MS, for Slurry+CM were registered, in this order. In the AMPTS II, the results of methane potential of 11.46 NmLCH4/g MS (RSU+Slurry+CM) and 42.91 NmLCH4/g MS (Slurry+CM) were obtained, for the same scenarios. Given these scenarios of biogas and methane potentials, it is indispensable to evidence and value the practice of biotechnology associated to the recovery of landfill residues.
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Tratamento de efluente oleoso de biodiesel por extrato bruto de lipase fúngicaSILVA, Thiago Cavalcanti da 03 March 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-03-03 / O biodiesel é produzido a partir de óleos vegetais ou gorduras animais, álcool e um catalisador. O processo mais utilizado para a síntese do biodiesel é a transesterificação, gerando ésteres monoalquílicos. Durante a produção do biodiesel, há o surgimento de coprodutos indesejáveis e a presença de residuais de matérias primas não processadas que se encontram dissolvidas ao final da reação. Com isso, se faz necessário que ocorra um processo de tratamento dessas impurezas, constituídas por glicerol livre, sabão, além de conter álcool, catalisador e óleo emulsionado que não foram reagidos durante a produção do biodiesel. Este trabalho visa caracterizar o efluente gerado pelo processo de purificação do biodiesel, além de avaliar alternativas de tratamento deste efluente oleoso utilizando um método biotecnológico. O efluente foi caracterizado pelos parâmetros: pH, turbidez, condutividade, DQO, DBO₅, sólidos totais (fixos, voláteis), sólidos dissolvidos totais, temperatura e teor de óleos e graxas. A lipase utilizada no tratamento do efluente foi produzida originalmente a partir de otimização dos dados obtidos na literatura. O fungo utilizado para a produção da lipase foi o Rhizopus oryzae e os melhores resultados experimentais foram modelados com o emprego do planejamento fatorial, que conteve fonte de carbono (glicerina residual), fonte de nitrogênio (peptona e NaNO₃) e Tween 20 como variáveis do estudo estatístico. A etapa seguinte da pesquisa foi a realização de um novo planejamento fatorial destinado à aplicação dessa lipase visando o tratamento do efluente de biodiesel. Nesse processo, utilizaram-se pH, concentração de goma arábica (solução a 7% m/V) e concentração da lipase como variáveis deste estudo estatístico. Ressalta-se que a remoção do teor de óleos e graxas e DQO do efluente foram avaliadas nesta modelagem estatística. Experimentalmente, foi observado que o efluente coletado apresentava elevado teor de óleos e graxas, DQO e carga orgânica. O planejamento fatorial de produção da lipase constatou que todas as variáveis utilizadas no modelo foram significativas, entretanto, a fonte de carbono foi a que se mostrou a mais importante dentre as demais. A atividade enzimática máxima da lipase obtida foi de 389,62 U.L⁻¹. Com relação ao resultado obtido no planejamento fatorial de aplicação da lipase no tratamento do efluente, foi possível verificar que todas as variáveis foram significativas, porém o volume de solução de goma arábica aplicada foi o mais evidenciado, pelo fato de os ensaios que utilizaram a maior aplicação dessa variável terem obtido os menores resultados de TOG e de DQO em comparação a todo o planejamento, 60 mg.L⁻¹ e 207.783,6 mg.L⁻¹ respectivamente. A melhor condição obtida com o tratamento enzimático no efluente de biodiesel resultou numa eficiência de remoção de DQO e de TOG em 29,4% e 99,2% respectivamente. Esses resultados indicam que o tratamento proposto mesmo obtendo remoções consideráveis de DQO e TOG, ainda não permite o descarte deste efluente tratados no meio ambiente, de acordo com a resolução CONAMA 357/2005. / Biodiesel is produced from vegetable oils or animal fats, alcohol and a catalyst. The most used process for the synthesis of biodiesel is the transesterification, generating monoalkyl esters. During the production of biodiesel, occur the appearance of undesirable coproducts and the presence of residuals of raw materials that are dissolved with the product at the end of the reaction. Therefore, it is necessary to have a process of treatment of these impurities, constituted by free glycerol, soap, besides containing alcohol, catalyst and emulsified oil that were not reacted during the biodiesel production. This work aims to characterize the effluent generated by the biodiesel purification process, besides evaluating alternatives for treatment of this oily effluent using a biotechnological method. The effluent was characterized by: pH, turbidity, conductivity, COD, BOD5, total solids (fixed, volatile), total dissolved solids, temperature and content of oils and greases. The lipase used in the treatment of the effluent was originally produced from optimization of data obtained in the literature. The fungus used to produce lipase was Rhizopus oryzae and the best experimental results were modeled using DOE, using carbon source (residual glycerin), nitrogen source (peptone and NaNO3) and Tween 20 as variables for the Statistical study. The next stage of the research was the realization of a new experimental design for the application of this lipase for the treatment of the biodiesel effluent. In this process, pH, gum arabic concentration (7% w / v solution) and lipase concentration were used as variables in this Statistical study. It should be noted that the removal of the oils and grease content and COD of the effluent were evaluated in this statistical modeling. Experimentally, it was observed that the collected effluent presented high content of oils and greases, COD and organic load. The factorial design of lipase production found that all the variables used in the model were significant, however, the carbon source was the most important of the others. The maximum enzymatic activity of lipase obtained was 389.62 U.L⁻¹. Regarding the results obtained in the factorial design of lipase application in the treatment of the effluent, it was possible to verify that all the variables were significant, but the volume of solution of gum arabic applied was the most evidenced, since the tests that used the largest Application of this variable obtained the lowest TOG and COD results compared to the whole planning, 60 mg.L⁻¹ and 207,783.6 mg.L⁻¹, respectively. The best condition obtained with the enzymatic treatment in the biodiesel effluent resulted in a COD removal and TOG removal efficiency of 29.4% and 99.2%, respectively. These results indicate that the proposed treatment, even obtaining considerable removals of COD and TOG, still does not allow the disposal of this effluent treated in the environment, according to CONAMA Resolution 357/2005.
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