Orientador: Paula Schmidt Azevedo Gaiolla / Coorientador: Marcos Ferreira Minicucci / Banca: Meliza Goi Roscani / Banca: Bertha Furlan Polegato / Banca: Paula Felippe Martinez / Resumo: Os mecanismos envolvidos na remodelação cardíaca por sobrecarga de volume e o momento que a hipertrofia excêntrica apresenta prejuízo da função cardíaca são pouco conhecidos. Objetivos: a) Comparar alterações morfofuncionais, celulares (hipertrofia) e intersticiais (fibrose) em diferentes momentos da evolução da insuficiência aórtica; b) Verificar quais dos seguintes mecanismos estão envolvidos na remodelação cardíaca induzida pela IAo e em qual momento esta alteração acontece: alteração na metaloprotease 2 (MMP2) e do inibidor tecidual de metaloprotease 1 (TIMP1), alterações dos RNAs mensageiros específicos para a codificação das proteínas envolvidas na homeostase do cálcio (Fosfolambam, Ryr e Serca2a), alterações da expressão de proteínas fosfolambam e Serca2a do trânsito de cálcio. Casuística e Métodos: Estudo experimental com 64 ratos Wistar machos, 32 animais submetidos à insuficiência aórtica aguda (grupo IAo) e 32 animais a procedimento simulado (grupo Controle). Todos os animais foram seguidos com 1, 4, 8 e 12 semanas através de ecocardiogramas seriados e, após eutanásia, foram analisada morfometria do tecido cardíaco, atividade da MMP2 e TIMP-1, expressão gênica por Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real das proteínas do trânsito de cálcio, expressão das proteínas Serca2a e fosfolambam pela técnica Western Blot. A análise estatística foi efetuada pela ANOVA de dois fatores; o pós teste de Holm Sidak; teste t grupo a grupo; Anova de 1 via, complementada por Tukey; correção por Bonferroni; teste de correlação de Spearman e teste de correlação de Pearson. Em todos os casos, o nível de significância adotado foi p<0,05. Resultados: Observou-se, na primeira semana, que o peso do VE e a pressão diastólica foi maior no grupo IAo. Na quarta semana, MMP2, TIMP-1, iMVE e fração de colágeno foram maiores no grupo IAo. A área do miócito e DDVE foram maiores... / Abstract: The mechanisms that are involved in cardiac remodeling by volume overload and the moment the eccentric hypertrophy has impaired cardiac function are largely unknown. Objectives: a) to compare morphological, cell (hypertrophy) and interstitial (fibrosis) changes at different times of the evolution of aortic regurgitation (AR); b) to analyze which of the following mechanisms are involved in cardiac remodeling induced by aortic failure and at what moment this change takes place: change in the metalloprotease 2 (MMP 2) and tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP1); changes of messenger RNAs to code proteins involved in calcium homeostasis (phospholamban, Ryr and SERCA2a), changes in expression of phospholamban and SERCA2a in the calcium transit. Methods: Experimental study with 64 male Wistar rats, 32 animals submitted to acute aortic regurgitation (AR group) and 32 animals sham procedure (Sham group). All animals were followed with 1, 4, 8 and 12 weeks by serial echocardiography and after euthanasia, were analyzed morphometry of cardiac tissue, the activity of MMP2 and TIMP-1, gene expression by RT-PCR of calcium homeostasis protein, SERCA2a and phospholamban expression by Western Blotting. Statistical analysis was performed by two-way ANOVA; the Holm Sidak post test; t test group to group; Anova one way, complemented by Tukey; Bonferroni correction; Spearman correlation test and Pearson's correlation test. In all cases, the significance level was set at p <0.05. Results: In the first week it was observed that weight of the LV and diastolic blood pressure were higher in the AR group. In the fourth week, MMP 2, TIMP-1, and collagen fraction were higher in the AR group. The myocyte area and left ventricle diastolic diameter (LVDD) were higher in the AR group compared to the sham group, from the eighth week. At weeks 8 and 12, the wall thickness (WT) was higher in the AR group than the... / Doutor

Orientador: Carmelinda Schmidt Unterkircher / Banca: Caio Cezar Randi Ferraz / Banca: Marcia Carneiro Valera Garakis / Resumo: A parede celular das bactérias Gram-negativas é constituída principalmente por endotoxinas, que são complexos de lipopolissacarídeos com potente ação citotóxica, liberadas durante a duplicação ou morte celular destas bactérias. Assim, mesmo após o preparo biomecânico do canal, a endotoxina pode permanecer e contribuir para a manutenção da lesão periapical, impedindo o sucesso do tratamento endodôntico. Com isso, a proposta desta pesquisa foi avaliar a efetividade de curativos intracanal na eliminação das endotoxinas presentes nos canais radiculares. Para tanto, foram utilizados 75 dentes humanos unirradiculados, que tiveram suas coroas seccionadas e o ápice cortado em 3mm, padronizando o tamanho dos espécimes em 14mm. Os dentes foram preparados biomecanicamente, seus ápices radiculares vedados com resina fotopolimerizável e as raízes impermeabillzadas externamente com um adesivo epóxi (Araldite). A seguir, os espécimes foram esterilizados e foi inoculada, no interior de sessenta canais radiculares, uma solução contendo endotoxina de Escherichia coli. Os dentes foram então divididos em 5 grupos experimentais, com 15 dentes cada. O grupo 1 recebeu como medicamento intracanal a pasta de hidróxido de cálcio, o grupo 2 recebeu uma solução contendo Polimixina B pura, o grupo 3 recebeu uma solução contendo Polimixina B associada ao sulfato de neomicina e hidrocortisona, o grupo 4 (controle positivo) não recebeu nenhum medicamento e no grupo 5 (controle negativo) não foi inoculada endotoxina. Os dentes foram mantidos em estufa a uma temperatura de 37±1°C e umidade relativa 100% durante 7 dias. Após este período, a neutralização da endotoxina foi verificada utilizando-se o método do lisado de amebócito de Limulus (Sigma) e a produção de anticorpos em cultura de linfócitos B. Os resultados obtidos com o lisado de Limulus foram submetidos à análise estatística usando o teste de... / Abstract: The cell walls of Gram-negatives bacteria contain a lipopolysaccharide complex, also called endotoxin, which may be released into the environment as blebs during bacterial cell growth or as large pieces of membrane upon cell death. Endotoxins are potent agents capable of initiating various biological responses, which include initiation of osteoclastic activity and subsequent bane resorption. The purpose of this study was to evaluate the effectiveness of intracanal medicaments in the elimination of the endotoxins in the root canal. Seventy-fivefreshly extracted, single-rooted, straight human anterior teeth were used in the study. The crowns were removed and the apex cut in 3mm, standardizing the size of the specimens in 14mm. The root canals of the teeth were instrumented, and the roots apex hindered with light-cure resin. The specimens were sterilized and it was inoculated endotoxin of Escherichia coli inside sixty root canals. The teeth were divided in 5 experimental groups (15 teeth). The group 1 received as intracanal medicament the paste of calcium hydroxide, the group 2 received a solution contends Polymyxin B pure, the group 3 received a solution contends Polymyxin 8, neomycin sulfate and hydrocortisone, the group 4 (control positive) didn't receive any medicament and in the group 5 (controls negative) the endotoxin was not inoculated. The teeth were maintained in stove to a temperature of 37±1ºC and relative humidity 100% for 7 days. Alter this period, the neutralization of the endotoxin was verified being used Limulus lisate and the production of antibodies in lymphocyte B culture. The results obtained with the Limulus lisate were submitted to the statistical analysis using the test of MannWhitney and was verified that the treatments with the calcium hydroxide and with the Polymyxin B pure went effective in to neutralization of the endotoxin in the root canals. The results obtained in the lymphocyte... / Mestre

O café é a bebida mais consumida após a água no Brasil, já o cálcio é um micronutriente de fundamental importância ao corpo humano, sendo assim, o objetivo deste trabalho foi a escolha do café torrado e moído com sal de cálcio, sua quantificação e avaliação sensorial, além da escolha coador para preparo. Seis sais solúveis em água foram utilizados para selecionar a melhor bebida com cálcio, sendo que um deles foi testado em escala industrial. Para escolha da melhor bebida, foi considerada a opinião de dois especialistas de café, os quais definiram três amostras de maior similaridade ao café tradicional, contendo citrato malato de cálcio, carbonato de cálcio e fosfato de cálcio. Também foi verificado com os especialistas se o preparo com coador de tecido era diferente do preparo com coador de papel. A quantificação de cálcio foi realizada nas três bebidas de melhores resultados, por absorção atômica de chama. As mesmas amostras foram submetidas ao teste sensorial, a fim de verificar a aceitabilidade de 50 julgadores não treinados, os quais continham as seguintes características: 66% mulheres, apenas 4% do total não gostam de café e 13% não possuem o hábito de consumi-lo. Não houve diferença entre as formas de preparo com os coadores, segundo os especialistas. Entre os julgadores não treinados, não houve diferença significativa entre as amostras (p=0,13), mostrando que a aceitação entre as amostras foram muito similares (em torno de 6 correspondente a gostei ligeiramente). No entanto, as opiniões destes julgadores foram divergentes (p<0,001). Na quantificação, o sal citrato malato de cálcio obteve uma maior concentração na bebida, o qual apresentou maior solubilidade em água se comparado aos demais sais de cálcio. Em comparação com a bebida de café tradicional preparadas com coador de papel, o café preparado com o citrato malato de cálcio apresentou 77,5%, o café com sal fosfato de cálcio apresentou 61,8% e o café com o sal carbonato de cálcio obteve 62,0%, a mais de cálcio na bebida. / Since coffee is one of the most consumed beverages in Brazil and calcium is a fundamentally important micronutrient for humans, current research focused on the enrichment of coffee with calcium, and on its quantification and sensorial evaluation, and also choose the filter to prepare. Six water-soluble salts were used to select the best beverage with calcium. The opinion of two coffee experts, who defined three samples highly similar to traditional coffee featuring calcium citrate malate, calcium phosphate and calcium carbonate was taken into consideration. The amount of calcium was determined by atomic absorption spectrometry for three beverages with the best results. The samples also underwent a sensorial test to verify acceptability by 50 non-trained coffee tasters. The latter comprised 66% females 4% did not like coffee and 13% did not usually drink it. There was no difference between the preparations with the filters tested. Analysis of Variance showed no significant difference among the three samples (p=0.13) with approximately 6, which corresponded to I somewhat liked it. However, tasters´ opinions were divergent (p<0.001). Calcium citrate malate salt showed highest calcium amount in the beverage and therefore the highest solubility in water when compared to that of other calcium salts. Coffee types had calcium rates higher by 77.5%, 61.8% and 62.0% respectively for salts calcium citrate malate, calcium phosphate and calcium carbonate, when compared to traditional coffee beverage.

O café é a bebida mais consumida após a água no Brasil, já o cálcio é um micronutriente de fundamental importância ao corpo humano, sendo assim, o objetivo deste trabalho foi a escolha do café torrado e moído com sal de cálcio, sua quantificação e avaliação sensorial, além da escolha coador para preparo. Seis sais solúveis em água foram utilizados para selecionar a melhor bebida com cálcio, sendo que um deles foi testado em escala industrial. Para escolha da melhor bebida, foi considerada a opinião de dois especialistas de café, os quais definiram três amostras de maior similaridade ao café tradicional, contendo citrato malato de cálcio, carbonato de cálcio e fosfato de cálcio. Também foi verificado com os especialistas se o preparo com coador de tecido era diferente do preparo com coador de papel. A quantificação de cálcio foi realizada nas três bebidas de melhores resultados, por absorção atômica de chama. As mesmas amostras foram submetidas ao teste sensorial, a fim de verificar a aceitabilidade de 50 julgadores não treinados, os quais continham as seguintes características: 66% mulheres, apenas 4% do total não gostam de café e 13% não possuem o hábito de consumi-lo. Não houve diferença entre as formas de preparo com os coadores, segundo os especialistas. Entre os julgadores não treinados, não houve diferença significativa entre as amostras (p=0,13), mostrando que a aceitação entre as amostras foram muito similares (em torno de 6 correspondente a gostei ligeiramente). No entanto, as opiniões destes julgadores foram divergentes (p<0,001). Na quantificação, o sal citrato malato de cálcio obteve uma maior concentração na bebida, o qual apresentou maior solubilidade em água se comparado aos demais sais de cálcio. Em comparação com a bebida de café tradicional preparadas com coador de papel, o café preparado com o citrato malato de cálcio apresentou 77,5%, o café com sal fosfato de cálcio apresentou 61,8% e o café com o sal carbonato de cálcio obteve 62,0%, a mais de cálcio na bebida. / Since coffee is one of the most consumed beverages in Brazil and calcium is a fundamentally important micronutrient for humans, current research focused on the enrichment of coffee with calcium, and on its quantification and sensorial evaluation, and also choose the filter to prepare. Six water-soluble salts were used to select the best beverage with calcium. The opinion of two coffee experts, who defined three samples highly similar to traditional coffee featuring calcium citrate malate, calcium phosphate and calcium carbonate was taken into consideration. The amount of calcium was determined by atomic absorption spectrometry for three beverages with the best results. The samples also underwent a sensorial test to verify acceptability by 50 non-trained coffee tasters. The latter comprised 66% females 4% did not like coffee and 13% did not usually drink it. There was no difference between the preparations with the filters tested. Analysis of Variance showed no significant difference among the three samples (p=0.13) with approximately 6, which corresponded to I somewhat liked it. However, tasters´ opinions were divergent (p<0.001). Calcium citrate malate salt showed highest calcium amount in the beverage and therefore the highest solubility in water when compared to that of other calcium salts. Coffee types had calcium rates higher by 77.5%, 61.8% and 62.0% respectively for salts calcium citrate malate, calcium phosphate and calcium carbonate, when compared to traditional coffee beverage.

Made available in DSpace on 2011-12-27T14:14:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 000425706-0.pdf: 3229059 bytes, checksum: 45284ea4f41049f07baee7ea1b986c3f (MD5) license.txt: 581 bytes, checksum: 44ea52f0b7567232681c6e3d72285adc (MD5) / This present work has analyzes the integration level of onlay bone grafts of the skull in rats’ mandibular region, combined or not with calcium phosphate cement (Norian ). For this, histology, morphometry, and biomechanical test of traction force have been evaluated. Twenty seven male Wistar rats were subjected to removal of bicortical grafts of the skullcap and fixed in the mandibular angles. The animals were divided into 6 groups: C21d – graft fixation (control – death after 21 days); I21d – graft fixation with Norian powder between the graft and recipient bed (death after 21 days), B21d - graft fixation and placement with Norian , acting as a barrier on the edges of the bone graft (death after 21 days) C55D - graft fixation (control - 55 days after death); I55d - graft fixation with Norian powder between the graft and the recepient bed (death after 55 days); B55d - graft fixation and placement with Norian , acting as a barrier on the edges of the graft (death after 55 days). The hemi-jaws on the left side were taken to the histology and histometric exam and hemi-jaws of the right to a traction force test.There was no infection in none of the cases or postoperative complications. Histological and histometric analysis – Norian ’s remnants were seen in both 21 and in 55 days, showing a gradual replacement by vascularized bone tissue; a higher bone formation was observed in the graft / bone interface receptor (GBIR) on the left side in the groups using the calcium phosphate (B21d, B55d and I55d in relation to C21d) (p = 0. 043); a better result was also observed in regard to the total newly formed bone on the left side interface of these same groups (p = 0. 08); the I55d group presented superior results than the control groups (C21d and C55d) and the group B21d concerning the GBIR bone formation on the right side (p = 0. 045); about the item on the horizontally newly formed bone on the left side, the group C21d had no significant difference in comparison to C55d, however, it presented less bone formation than the other groups that used the calcium phosphate (p = 0. 018). The traction force test - different devices have been developed to achieve an effective fixation of the specimens during the mechanical test, such as the EMIC DL-200 machine and the MTest 3. 0 version program to obtain the strength necessary to remove the grafts measured in Newton (N).The traction test demostrated that the C21d group’s results were significantly lower than other groups (p = 0. 08), furthermore, in two specimens from this group, one graft was not integrated and the other was weakly attached to the bone receptor. Comparing the control groups (21d and 55d), over time, there was a significant increase of the strenght required for the removal of the graft (p = 0. 032). The study showed good results in the use of onlay grafts associated with Norian , presenting higher levels of bone formation, even when dealing with a region of constant muscle stress. Furthermore, there was a better biomechanic integration, especially in the initial and most critical part of healing. / O presente trabalho analisou o nível de integração de enxertos ósseos onlay de calota craniana de ratos, em região mandibular, associados ou não ao cimento de fosfato de cálcio (Norian®). Para isso, foram realizadas avaliações histológicas, histométricas, além de teste biomecânico de força de tração. Vinte e sete ratos Wistar, machos, foram submetidos à remoção de enxertos bicorticais da calota craniana e fixados nos ângulos mandibulares. Os animais foram divididos em 6 grupos: C21 d - fixação do enxerto (controle - morte após 21 dias); 121 d - fixação do enxerto com o pó do Norian® entre o enxerto e o leito receptor (morte após 21 dias); B21 d - fixação do enxerto e colocação de Norian®, atuando como barreira, sobre as bordas do enxerto (morte após 21 dias); C55d - fixação do enxerto (controle - morte após 55 dias); 155d - fixação do enxerto com o pó do Norian entre o enxerto e o leito receptor (morte após 55 dias); B55d - fixação do enxerto e colocação de Norian, atuando como barreira, sobre as bordas do enxerto (morte após 55 dias). As hemimandíbulas do lado esquerdo foram destinadas ao exame histológico e histométrico e as hemi-mandíbulas do lado direito ao teste de força de tração. Em nenhum dos casos ocorreu infecção ou complicações pós-operatórias.Análise histológica e histométrica - resquícios do Norian foram vistos tanto em 21 quanto em 55 dias, demonstrando uma gradual substituição por tecido ósseo vascularizado; foi observada uma maior formação óssea na interface enxerto/osso receptor (TEOR) do lado esquerdo nos grupos que utilizaram o fosfato de cálcio (B21d, B55d e 155d em relação ao C21 d) (p= 0,043); um melhor resultado também foi observado em relação ao osso total neoformado na interface do lado esquerdo, nesses mesmos grupos W-0,08); o grupo 155d apresentou resultados superiores aos grupos controle (C21d e C55d) e ao grupo B21d na formação de osso na IEOR do lado direito (p= 0. 045): no item osso neoformado horizontalmente do lado esquerdo, o grupo C21d não apresentou diferença significativa em relação ao C55d, contudo, demonstrou haver formado menos osso que os demais grupos que utilizaram o fosfato de cálcio (p= 0,018). Teste de força de tração - diferentes dispositivos foram desenvolvidos para conseguir uma fixação eficaz dos espécimes durante o ensaio mecânico, sendo utilizada a máquina EMIC® DL-200 e o programa MTest versão 3. 0 para obtenção das forças de remoção dos enxertos em Newton (N). O teste de tração demonstrou que o grupo C21d apresentou resultados significativamente inferiores aos demais grupos (p= 0,08), além disso, em dois espécimes deste grupo, um enxerto não estava integrado e o outro estava fracamente aderido ao osso receptor. Comparando-se os grupos Controle (21d e 55d), ao longo do tempo, houve um aumento significativo na força necessária para a remoção dos enxertos (p= 0,032). O estudo demostrou bons resultados na utilização dos enxertos onlay associados ao Norian®, apresentando maior nível de formação óssea, mesmo se tratando de uma região de constante estresse muscular. Além disso, houve uma melhor integração biomecânica, principalmente na fase inicial e mais crítica da cicatrização.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:57:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000448876-Texto+Completo-0.pdf: 2695639 bytes, checksum: a3bbbe4d7e909726487f750267010636 (MD5) Previous issue date: 2013 / Introduction : In menopause occur a loss of bone mass sharper that is due to several factors, among them, low dietary intake of calcium. Proper nutrition is vital to preserve bone health and thus prevent falls and fractures. Objective : Evaluate food intake and calcium supplementation in women during the menopause and postmenopause. Methods : Cross-sectional study involving women during the climacteric and postmenopausal users of climacteric and menopause clinic of the Hospital São Lucas da PUC in Porto Alegre, Brazil. A structured questionnaire was applied with socioeconomic, anthropometric and health data. To assess dietary intake, we used the 24-hour food recall (R24) and the Food Frequency Questionnaire (FFQ). For the analysis we used the Mann-Whitney and Kruskal Wallys (post hoc Dunn). The significance level was 5%.Results : The sample consisted of 63 women aged 55. 7 ± 7. 2 years, where 49. 2% are in group 50 to 59 years. Mean BMI was 29. 6 ± 5. 8 kg / m². Menopause was present in 74. 6%. The use of calcium supplements, with or without vitamin D has occurred in 25. 4% of the sample. The average intake was higher in the group of women who consumed skimmed over those who did not (900. 6 ± 245. 4 mg and 587. 5 ± 352. 7 mg, p <0. 001), semi skimmed milk (847, 8 mg ± 459. 8 and 618. 3 ± 315. 3 mg, p <0. 05), yogurt (766. 9 ± 377. 2 mg and 566. 7 ± 308. 9 mg, p <0. 05) mines and cheese (839. 1 ± 354. 3 mg and 537. 7 ± 302. 0 mg, p <0. 001). There was no difference in the daily intake of calcium and age. Conclusion : Women consuming skimmed milk, semi skimmed milk, yogurt and cheese mines ingest more calcium daily than those who do not use. However, both groups ingest insufficient quantity of calcium recommended by Dietary Reference Intakes. / Introdução : Na menopausa ocorre uma perda mais acentuada da massa óssea a qual se deve a vários fatores, entre eles, a baixa ingestão alimentar de cálcio. A nutrição adequada é fundamental para preservar a saúde óssea e consequentemente prevenir quedas e fraturas. Objetivo : Avaliar a ingestão alimentar e a suplementação de cálcio em mulheres no período do climatério e pós-menopausa. Metodologia : Estudo transversal envolvendo mulheres no período do climatério e pós-menopausa usuárias do ambulatório de climatério e menopausa do Hospital São Lucas da PUC em Porto Alegre, Brasil. Foi aplicado questionário estruturado com dados socioeconômicos, antropométricos e de saúde. Para avaliar a ingestão alimentar foi utilizado o Recordatório alimentar de 24 horas (R24) e o Questionário de Frequência Alimentar (QFA). Para a análise foi utilizado o teste de Mann Whitney e Kruskal Wallys (post hoc Dunn). Foi adotado nível de significância de 5%.Resultados : A amostra foi de 63 mulheres com idade de 55,7±7,2 anos, onde 49,2% são do grupo de 50 a 59 anos. O IMC médio foi de 29,6±5,8 kg/m². A menopausa estava presente em 74,6%. O uso de suplementação de cálcio, com ou sem vitamina D, ocorreu em 25,4% da amostra. A média de ingestão foi mais elevada no grupo de mulheres que consumiu leite desnatado em relação aos que não utilizavam (900,6±245,4 mg e 587,5±352,7 mg; p<0,001), leite semi desnatado (847,8±459,8 mg e 618,3±315,3 mg; p<0,05), iogurte (766,9±377,2 mg e 566,7±308,9 mg; p<0,05) e queijo minas (839,1±354,3 mg e 537,7±302,0 mg; p<0,001). Não houve diferença em relação à quantidade ingerida de cálcio diário e a faixa etária. Conclusão : Mulheres consumidoras de leite desnatado, leite semi desnatado, iogurte e queijo minas ingerem mais cálcio diário em relação às que não utilizam. No entanto, ambos os grupos ingerem quantidade insuficiente de cálcio segundo as recomendações da Dietary Reference Intakes.

Este estudo teve como objetivo avaliar, em microscopia confocal à laser (CLSM), a ação antimicrobiana do Neo MTA Plus, do Biodentine e do MTA Angelus, utilizando um modelo de biofilme multi-espécies microcosmo, e descrever a morfologia dos microrganismos encontrados no biofilme, através da análise em microscópio eletrônico de varredura (MEV). Cinquenta e seis blocos de dentina, confeccionados a partir de raízes de dentes humanos, foram cortados em dimensões de 5 x 4 x 4 mm, limpos e esterilizados. Dois blocos foram utilizados para o controle do processo de esterilização. Os demais 54 foram fixados em placas de Hawley confeccionadas para 6 voluntários. Cada voluntário utilizou uma placa por 72 horas. Após esse período, os blocos foram mantidos em poços de cultura celular, contendo BHI, em estufa à 37ºC, por um período de 21 dias. Ao final do processo de maturação do biofilme, as amostras foram divididas aleatoriamente em 5 grupos, conforme os cimentos a serem testados e o método de análise: Neo MTA Plus (n=12), Biodentine (n=12), MTA Angelus (n=12), controle negativo (n=12) e grupo para análise em MEV (n=6). A seguir, os cimentos foram colocados em contato com o biofilme dos blocos dos grupos-teste e os conjuntos (bloco + cimento) ou os blocos do grupo controle e para análise em MEV foram recolocados em poços de cultura contendo BHI, onde permaneceram por 7 dias à 37ºC. A análise em CLSM foi realizada nos blocos de dentina e nos cimentos, separadamente. A analise em MEV foi realizada nas seis amostras do grupo correspondente. Todos os grupos apresentaram mais de 50% de bactérias viáveis. O Neo MTA Plus foi o único material a apresentar diferença significativa quando comparado ao grupo controle negativo (P=.0379). A análise em MEV mostrou um biofilme composto por bactérias de forma circular e de bastonetes, circundadas por matriz extra-celular. Em conclusão, todos os grupos apresentaram bactérias viáveis e o Neo MTA Plus teve a maior ação antimicrobiana. / This study aimed to assess, by confocal laser scanning microscopy (CLSM), the antimicrobial effect of Neo MTA Plus, Biodentine and MTA Angelus, using a microcosmo biofilm model, and to describe the microrganisms morphology, by SEM. Fifty-six dentin blocks were made from human teeth roots, cut in a size 5 x 4 x 4 mm, cleaned and sterelized. Two blocks were used to sterelization control. The others 54 blocks were fixed in Hawley retainers made for 6 volunteers that used it for 72h. After this period, they were placed in wells with BHI for 21 days, at 37ºC. At the end of the biofilm growth, the samples were randomly divided in 5 groups: Neo MTA Plus (n=12), Biodentine (n=12), MTA Angelus (n=12), negative control (n=12), and SEM analysis (n=6). The cements were placed in contact with the blocks of the tested groups. All samples were replaced in wells with BHI by 7 days at 37ºC. CLSM analysis evaluated the dentin blocks and cements isolated. SEM observation were performed in the six samples of the respective group. All groups presented a level of viable bacteria higher than 50%. Neo MTA Plus was the only one that showed significant difference from the negative control group (P=.0379). SEM analysis showed a biofilm composed of spherical and rod-shaped bacteria surrounded by extracellular matrix. All groups presented viable bacteria and Neo MTA Plus had the highest antimicrobial effect.

Quando íons rápidos e pesados incidem em um alvo, eles depositam energia através de excitação eletrônica e induzem a ejeção de partículas da superfície da amostra, fenômeno conhecido como sputtering eletrônico. Quando cristais como o CaF2 são irradiados com íons pesados, a emissão de aglomerados tem uma componente do tipo jato normal à superfície do alvo. A emissão do tipo jato é provavelmente devido a ejeção de nanopartículas (NPs), porém a origem deste efeito jato ainda não é bem conhecida. Neste trabalho, nanopartículas de CaF2 depositadas sobre silício, através da técnica de sputtering eletrônico, foram caracterizadas com a técnica de Espalhamento de Íons com Energia Intermediária (MEIS). MEIS é uma poderosa técnica de caracterização bem conhecida para a análise de superfícies e filmes finos. Resultados de Microscopia Eletrônica de Transmissão (TEM) e MEIS concordam muito bem em respeito ao tamanho e distribuição de tamanho das nanopartículas. Neste trabalho determinou-se a geometria, o tamanho e a densidade de nanopartículas de CaF2 ejetadas sobre Si. A geometria com o melhor ajuste foi a de uma esfera, enquanto que os tamanhos e densidades encontrados foram de 5,0 nm, 4,0 nm e 4,5 nm de raio e 0,0015, 0,00125 e 0,00045 NPs/cm2 para as amostras dos ângulos 11°, 33° e 55° respectivamente. / When swift heavy ions penetrate in a solid, they deposit energy by electronic excitation processes and induce the ejection of particles from the sample's surface, which is known as electronic sputtering. For ionic crystals such as CaF2, the emission has a jet-like component normal to the target surface. The jet-like emission is probably due to the ejection of nanoparticles (NPs), but the origin of this jet-like e ect is not well understood. In this work, we characterize the CaF2 nanoparticles deposited on silicon samples through Medium Energy Ion Scattering technique (MEIS). MEIS is a well-established technique to analyze surfaces and thin lms. The TEM and MEIS data agree well with respect to size and size distribution of the nanoparticles. In this work we determined the geometry, the size and the density of CaF2 nanoparticles sputtered on Si. The geometry of the nanoparticles is compatible with a sphere with radii and densities of 5.0 nm, 4.0 nm, 4.5 nm and 0.0015 NPs/cm2, 0.00125 NPs/cm2 and 0.00045 NPs/cm2 for the samples at 11° , 33° and 55° angles respectively.

Introdução: O objetivo do presente estudo foi analisar a citotoxicidade e biocompatibilidade de soluções de hipoclorito de cálcio (Ca(OCl)2) comparadas a soluções de hipoclorito de sódio (NaOCl) in vitro em cultura de fibroblastos 3T3 e in vivo em ratos. Metodologia: Culturas de fibroblastos 3T3 foram expostas a diferentes concentrações de hipoclorito de cálcio e sódio e foi realizado um ensaio de “scratch”. Além disso, a taxa de viabilidade foi analisada utilizando o teste Azul de Trypan. As soluções a 1 e 2,5% foram, também, injetadas no tecido conjuntivo de 18 ratos Wistar de 18 semanas de idade. A reação inflamatória tecidual foi avaliada em 2h, 24h e 14 dias após as injeções e as amostras foram qualitativamente analisadas em microscópio óptico. Análise estatística foi realizada utilizando teste ANOVA e post hoc de Tukey para testes in vitro e Kruskal‐Wallis e post hoc de Dunn para o teste in vivo (α=.05). Resultados: No ensaio de “scratch”, Ca(OCl)2 não apresentou diferença estatística em relação ao controle no período de 24h (p<0.05). NaOCl e Ca(OCl)2 a 0.0075% e 0.005% apresentaram resultados de viabilidade similar ao grupo controle positivo (p > 0.05) no ensaio Azul de Trypan. No teste in vivo, Ca(OCl)2 1% mostrou uma diminuição significativa de neutrófilos entre 2h e 24h (p=0.041) e entre 2h e 14d (p=0.017). Não houve diferença estatística entre os grupos para linfócitos/plasmócitos e macrófagos. Conclusão: Ca(OCl)2 mostrou resultados favoráveis de viabilidade e induziu um baixo nível de resposta inflamatória tecidual, apresentando, assim, citotoxicidade e biocompatibilidade aceitáveis para uma solução irrigadora. / Introduction: The aim of the present study was to analyze cytotoxicity in vitro on cultured 3T3 fibroblasts and inflammatory tissue reaction in vivo on rats to calcium hypochlorite (Ca(OCl)2) solutions compared with sodium hypochlorite (NaOCl) solutions. Methods: Cultured 3T3 fibroblasts were exposed to different concentrations of calcium and sodium hypochlorite and a scratch assay was performed. The viability rate was analyzed with Trypan Blue assay. A. The 1 and 2.5% solutions were still injected into the subcutaneous tissues of eighteen male Wistar rats aged 18 weeks. Inflammatory tissue reaction was evaluated at 2h, 24h and 14 days after the injections and the samples were qualitatively analyzed through a light microscope. Statistical analysis was assessed by ANOVA and Tukey post hoc test for in vitro assays and by Kruskal-­‐Wallis and Dunn post hoc test for in vivo assay (α=.05). Results: In scratch assay, Ca(OCl)2 showed no statistically significant difference to control group at 24h (p<0.05). 0.0075% and 0.005% NaOCl and Ca(OCl)2 presented results similar to positive control group (p > 0.05) on Trypan Blue assay. In in vivo assay, 1% calcium hypochlorite group showed a significant decrease of neutrophils at 2h and 24h (p=0.041) and 2h and 14d (p=0.017). There was no statistically significant difference for lymphocytes/plasmocytes and macrophages among groups. Conclusions: Ca(OCl)2 showed favorable results of viability and induced an low level of inflammatory response, thus presenting an acceptable cytotoxicity and biocompatibility for an irrigant solution.

O hormônio folículo-estimulante (FSH) produz um efeito dual sobre o potencial de membrana das células de Sertoli, com uma fase inicial rápida, que compreende uma hiperpolarização, por um período de segundos e uma fase de despolarização, que ocorre mais lentamente, por um período de minutos. A fase de despolarização envolve um mecanismo relacionado à entrada de cálcio estimulada pelo FSH. O Isoproterenol, um agonista de receptores β-adrenérgicos, induz uma hiperpolarização imediata e prolongada na membrana de células de Sertoli de ratos imaturos. Este efeito é provavelmente resultante da queda de [ATP]i a qual libera a inibição exercida pelo nucleotídeo sobre o canal de K+ATP. Dessa forma, objetivou-se estudar a ação do Isoproterenol sobre o potencial de membrana das células de Sertoli para melhor avaliar o componente hiperpolarizante produzido por FSH nas células de Sertoli, além de estudar a captação de Ca2+ estimulada pelo FSH e pelo isoproterenol. O potencial de membrana foi registrado utilizando túbulos seminíferos isolados de testículos de ratos Wistar machos de 15 dias de idade. O registro intracelular da célula de Sertoli foi realizado utilizando microcapilares preenchidos com KCl 3mmol/L acoplados a um eletrômetro. Foi realizada a aplicação tópica isolada de FSH (4mU/mL) e Isoproterenol (2μM). Depois, em experimentos individuais, foram aplicados topicamente, FSH e isoproterenol, 5 minutos após a aplicação tópica da Tolbutamida (10μM) e Glibenclamida (10μM), sulfonilureias de ação hipoglicemiante, que exercem efeito de fechamento dos canais de K+ATP. A Tolbutamida (10μM), ainda, foi perfundida 15 minutos antes da aplicação do Isoproterenol, a fim de testar se esta sulfoniluréia impediria de forma mais significativa a ação deste. Na técnica de captação de Ca2+, utilizou-se FSH e isoproterenol com toxina pertussis (PTX), bloqueador da subunidade Gi da proteína G para avaliar o seu envolvimento na captação de Ca2+ nas células de Sertoli de ratos imaturos. Utilizou-se a toxina colérica, estimulador da proteína Gs, para avaliar o envolvimento do AMPc na captação de Ca2+ nas células de Sertoli de ratos imaturos. Fez-se uso de SQ22536, inibidor da enzima adenilato ciclase, para avaliar o envolvimento dessa enzima na ação estimulante do FSH nas células de Sertoli de ratos imaturos. Os resultados foram dados como média ± SEM. Os dados da variação do potencial de membrana foram analisados pelo teste ANOVA para medidas repetidas com o pós-teste de Bonferroni. O FSH teve sua hiperpolarização inibida quando foi aplicado tolbutamida (10μM) anteriormente. O SQ22536 também aboliu a hiperpolarização causada pelo FSH. O Isoproterenol, quando aplicado isoladamente produziu uma resposta hiperpolarizante sobre o potencial de membrana, alterando de – 32,4mV ± 1,32 mV para -40,0 ± 0,78 mv, aos 60 segundos após a sua aplicação (*p<0,001) (n=6 células de Sertoli). A aplicação tópica de Tolbutamida (10 μM) bloqueou a ação do Isoproterenol (2μM), causando uma despolarização de –41,0± 0,47mV variou até -39,0 ± 2,02mV, aos 120 segundos após a aplicação do Isoproterenol (p>0,05) (n=6 células de Sertoli). A perfusão com Tolbutamida foi mais eficaz no bloqueio da resposta beta-adrenérgica, causando uma despolarização de -41,6 ±1,21 mV para -35,4 ± 0,98 mV, aos 120 segundos após a aplicação tópica do Isoproterenol (p>0,05) (n=9 células de Sertoli). A aplicação tópica de Glibenclamida (10μM), a qual é um inibidor do canal de k +ATP, bloqueou a ação do Isoproterenol (2μM), causando despolarização, demonstrando que a hiperpolarização do isoproterenol está relacionada com a abertura desses canais. A tolbutamida (10μM), quando aplicada topicamente, impediu a fase de hiperpolarização característica causada pelo FSH (4mU/mL), causando despolarização do potencial de membrana das células de Sertoli de ratos imaturos. O Isoproterenol apresentou uma resposta hiperpolarizante rápida sobre o potencial de membrana, causada, provavelmente, por uma abertura dos canais de K+ATP na membrana das células de Sertoli de testículos de ratos imaturos. PTX quando aplicada topicamente e anteriormente à aplicação de isoproterenol não impediu a hiperpolarização característica causada por isoproterenol. A ação hiperpolarizante de isoproterenol independe de proteína Gi. PTX não impede a captação de 45Ca2+ estimulada pelo isoproterenol. A toxina colérica, que estimula proteína Gs, não estimula a captação de 45Ca2+ nas células de Sertoli de ratos imaturos. / Follicle-stimulating hormone (FSH) produces a dual effect on the membrane potential of Sertoli cells, with an initial rapid phase, which comprises a hyperpolarization for a period of seconds and a depolarization phase, wich occurs more slowly, within minutes. The depolarization phase involves calcium entry stimulated by FSH. Isoproterenol, an agonist of β-adrenergic receptors, induces an immediate and prolonged hyperpolarization on the membrane of Sertoli cells from immature rats. The aim of this work is to study the involvement of K+ATP channels in the hiperpolarization effect of isoproterenol on the membrane of Sertoli cells. This work also aimed to study the action of Isoproterenol on the membrane potential of Sertoli cells to better understanding the hyperpolarizing component produced by FSH in Sertoli cells, in addition to study the Ca2+ uptake stimulated by FSH and by isoproterenol. Membrane potential was recorded using isolated seminiferous tubules of testes of 15 days-old rats. The record of intracellular Sertoli cell was performed using microcapillary filled with KCl3 mmol/L coupled to an electrometer. We performed a single topical application of FSH(4mU/mL) and Isoproterenol (2μM). Then, inindividual experiments were applied topically, FSH and isoproterenol, 5 minutes after topical application of Tolbutamide (10μM) and glibenclamide(10μM), sulfonylurea a hypoglycemicaction, exercising effect closing of K+ channels ATP. The Tolbutamide (10μM) also was infused 15 minutes before application of Isoproterenol in order totest whether this would prevents ulfonylurea most significantly to the action of isoproterenol. In the technique of 45Ca2+ uptake, we used FSH and isoproterenol with pertussis toxin (PTX), blocking the G protein subunit Gi to evaluate its involvementon Ca2+ uptake in Sertoli cells from immature rats. We used the cholera toxin, a stimulator of Gs protein, to evaluate the involvement of AMPc on Ca2+ uptake in Sertoli cells from immature rats. SQ22536, an inhibitor of the enzyme adenylate cyclase, was used to evaluate the involvement this enzyme in the stimulatory action of FSH in Sertoli cells from immature rats. The results were given as mean ± SEM. The data of the change in membrane potential were analyzed by ANOVA for repeated measures with Bonferroni post-test. The hyperpolarization produced by FSH was inhibited when tolbutamide was applied (10μM). The SQ22536 also abolished the hyperpolarization caused by FSH. The Isoproterenol when used alone produced a hyperpolarizing response on the membrane potential , changing from -32.4mV±1.32 mV to -40.0±0.78 mV at 60 seconds after its application (*p<0.001) (n=6Sertoli cells). Topical application of Tolbutamide (10μM) blocked the action of Isoproterenol (2μM), causing a depolarization of -41.0±0.47 mV ranged up to-39.0± 2.02 mV at 120 seconds after application of Isoproterenol (p>0.05) (n=6Sertoli cells). The Tolbutamide infusion was more effective inblocking beta-adrenergic response, causing a depolarization of -41,6 ±1,21 mV to -35,4 ± 0,98 mV at 120seconds after the topical application of Isoproterenol (p>0.05) (n=9Sertoli cells). Isoproterenol produces a rapid hyperpolarization on membrane potential of Sertoli cells. This effect was blocked by tolbutamide, indicating that the activation of beta-adrenergic receptors involves opening of K+ATP channels in the membrane of Sertoli cells from immature rat testes. PTX,when applied topically prior to application of isoproterenol did not prevent the characteristic hyperpolarization caused by isoproterenol. The hyperpolarizing action of isoproterenol is independent of Gi protein. PTX does not prevent the uptake of 45Ca2+ stimulated by isoproterenol. The cholera toxin, which stimulates Gs protein, does not stimulate 45Ca2+ uptake in Sertoli cells from immature rats.