Orientador: Noeme Sousa Rocha / Banca: Alessandre Hataka / Banca: Ana Maria Barros Soares / Banca: Mirela Tinucci Costa / Banca: Julio Lopes Sequeira / Resumo: Foram analisados 132 casos de tumor venéreo transmissível (TVT) de ocorrência natural, atendidos no Hospital Veterinário de Botucatu, considerando aspectos clínicos e epidemiológicos. Os pacientes eram, em sua maioria, sem raça definida e com idade variando entre um e 18 anos, com maior freqüência na idade de quatro anos. A localização mais freqüente foi a genital, seguida pela nasal; 25% dos pacientes apresentavam metástases. Estas ocorreram mais freqüentemente na pele (31% das metástases), seguida pela localização mamária, em fêmeas, e em linfonodos, nos machos. Foram colhidas amostras de 188 tumores para avaliação citológica por microscopia ótica, microscopia eletrônica de transmissão, imunofenotipagem e estimação de danos no DNA pelo teste do cometa. As massas foram avaliadas de acordo com a localização, em genitais ou extragenitais, com o comportamento biológico, em primárias e não primárias (metastáticas ou recorrentes) e, ainda, de acordo com o tamanho e tempo de evolução clínica. A avaliação citológica incluiu a classificação de acordo com o padrão morfológico predominante, em linfocitóide (18,4%), plasmocitóide (52,5%) ou misto (29,1%). As amostras extragenitais e não primárias foram predominantemente do padrão plasmocitóide. Foram observadas as características de malignidade gerais, citoplasmáticas, nucleares e nucleolares apresentadas. Anisocitose, anisocariose e macrocariose foram observadas em todos os padrões citomorfológicos, assim como a presença de vacúolos citoplasmáticos, basofilia e eosinofilia citoplasmáticas e corpúsculos linfoglandulares. As características citoplasmáticas de malignidade observadas com maior freqüência foram projeções citoplasmáticas e espessamento... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: A hundred and thirty-two dogs with naturally transplanted transmissible venereal tumor (TVT) from ambulatory service of the Veterinary Hospital UNESP, Botucatu, were analyzed for epidemiological and clinical aspects. The animals were predominantly mongrel dogs, with age range between one and eighteen years, and mean of four years. The most usual location was genital, followed by nasal; 25% presents metastasis, the cutaneous location being the most frequent, followed by lymph nodes, in males, and mammary, in females. A sample of 188 tumors were collected for cytologic evaluation in optical microscopy, transmission electron microscopy, immunophenotyping and measure of DNA damage by the Comet test. The masses were classified by location as genital or extragenital, by biological behavior as primary or non-primary (metastastatic or recurrent), and by size and time of clinical evolution. The cytologic evaluation included cytomorphological classification in lymphocyte-like (18.4%), plasma-cell-like (52.5%) and mixed pattern (29.1%). Extragenital and non-primary tumors were essentially plasma cell-like. Malignancy features were noted as general, cytoplasmatic, nuclear and nucleolar. Anisocytosis, anisocariosis and macrocariosis were present in all cytomorphological patterns, as well as cytoplasmatic vacuoles, basophilic and eosinophilic tintorial properties, and lymphoglandular bodies. Cytoplasmatic malignancy criteria most frequently observed were cytoplasmatic projections and cellular membrane thickness. Cells resembling a racket were related to lymphocyte-like pattern. Nuclear buds, perinuclear halos, hyperchromatic nuclei, pseudoinclusions, nuclear membrane thickness and mitosis (normal and abnormal), binucleation, and nuclear lobulations (pleomorphic nuclei) were the most frequents nuclear malignancy criteria. The lymphocyte-like pattern was less related... (Complete abstract click electronic address below) / Doutor

Orientador: Hélio Langoni / Coorientador: Rodrigo Costa da Silva / Banca: Simone Baldini Lucheis / Banca: Cassiano Victoria / Banca: Virgínia Bodelão Richini Pereira / Resumo: A leishmaniose visceral canina (LVC), conhecida como leishmaniose visceral americana (LVA) ou calazar é uma antropozoonose, causada pelo protozoário flagelado do gênero Leishmania, com ampla distribuição mundial. No Brasil, o agente responsável pela doença é a Leishmania (Leishmania) chagasi, transmitida pela picada da fêmea do flebotomínio da espécie Lutzomyia longipalpis, e o principal reservatório doméstico é o cão. É uma doença sistêmica grave, de curso lento e crônico, de diagnóstico complexo. Entre as estratégias de controle da LVC está o inquérito sorológico canino, com a eliminação dos cães reagentes, sendo que diferentes técnicas podem ser utilizadas para o diagnóstico desta enfermidade. Muitos avanços têm ocorrido nos últimos anos, mas a respeito dos testes disponíveis para o seu diagnóstico, nenhum apresenta 100% de sensibilidade e especificidade. Neste contexto, o presente projeto teve como objetivos determinar a prevalência de anticorpos para L. chagasi, em 164 cães capturados pelo CCZ de Bauru, SP, área epidêmica para LVC, comparar as técnicas de imunofluorescência indireta, ensaio imunoenzimático (ELISA) e aglutinação direta (DAT); determinar a carga parasitária pela técnica de PCR em tempo real, a partir da punção de linfonodo poplíteo e de medula óssea; e identificar possíveis variantes genotípicas de Leishmania. spp a partir do sequenciamento e genotipagem, a fim de contribuir para o diagnóstico da leishmaniose visceral canina, a partir da análise obtida nos diferentes testes, bem como pela avaliação dos sintomas apresentados pelos animais. A sensibilidade apresentada pelas provas DAT e ELISA tendo a RIFI como padrão-ouro foi respectivamente, de 94% e 87%, enquanto a especificidade foi de 28% e 93%. Do total de amostras de sangue, linfonodo e medula óssea submetidas a PCR gênero e espécie- específica, 20 foram positivas somente para gênero, e estas foram sequenciadas ... / Abstract: The canine visceral leishmaniasis (LCV), known as American visceral leishmaniasis (LVA) or kala-azar is a anthropozoonosis caused by the flagellate protozoan of the genus Leishmania, with worldwide distribution. In Brazil, the agent responsible for the disease is Leishmania (Leishmania) chagasi, transmitted by the bite of the female of the species Lutzomyia longipalpis, and the main reservoir is the domestic dog. It is a severe systemic disease, with chronic and slow course and complex diagnostic. Among the strategies for control of LVC are the canine serological survey, with the elimination of reagents dogs and different techniques can be used to diagnose this disease. Many advances have occurred in recent years, but about the tests available for diagnosis, none had 100% sensitivity and specificity. In this context, this project aimed to determine the prevalence of antibodies to L. chagasi in 164 dogs captured by the CCZ, Bauru, SP, epidemic area for LVC, to compare the techniques of indirect immunofluorescence, enzyme immunoassay (ELISA) and direct agglutination (DAT) to determine the parasite burden by PCR in real time from peripheral blood puncture, popliteal lymph node and bone marrow of animals serologically positive, and identify potential genotypic variants of Leishmania. spp. from the sequencing in order to contribute to the diagnosis of canine visceral leishmaniasis, from the analysis obtained for the different tests as well as for assessment of symptoms presented by the animals. The sensitivity shown by DAT and ELISA with IFA as the gold standard were respectively, 94% and 87%, while specificity was 28% and 93%. Of the total sample of blood, lymph node and bone marrow subjected to PCR genus and species-specific, 20 were positive only for gender, and these were sequenced and characterized, yielding cleavage bands profile and common sequences belonging to the species L.donovani complex / Mestre

Orientador: Noeme Souza Rocha / Resumo: No presente trabalho foram avaliadas 152 massas neoplásicas de tumor venéreo transmissível procedentes do Hospital Veterinário da FMVZ-UNESP e do Biotério central da UNESP (campus Botucatu), no período de março de 2002 a setembro de 2004. As preparações citológicas foram coradas pelo método de Giemsa e, segundo critérios estabelecidos, foram divididos em três tipos citomorfológicos: linfocitóide, misto e plasmocitóide. Posteriormente, foram reagrupadas de acordo com comportamento biológico em primárias e não primárias. O objetivo foi identificar e comparar anormalidades nucleares (binucleação, multinucleação, brotamento, lobulação e micronucleação), avaliar parâmetros citomorfométricos através da técnica da CEC (concentração eletrolítica critica), determinar a taxa de proliferação mediante a imunomarcação com o Ki-67 (MIB-1) e com a quantificação das AgNORs, observar a expressão da glicoproteína-p, avaliar a resposta clínica à quimioterapia, bem como, relacionar esta resposta com a expressão de glicoproteína-p. Foi observada maior freqüência das lobulações nucleares no tipo plasmocitóide. A área do nucléolo e a relação nucléolo/núcleo foram maiores nas massas primárias. O Ki-67 (MBI-1) apresentou maior taxa de marcação (positividade) no tipo plasmocitóide e nas neoplasias não primárias. A média de pontos das AgNORs foi maior no tipo linfocitóide em relação aos outros dois tipos. O tipo plasmocitóide e o grupo das neoplasias não primárias tiveram um percentual de marcação da glicoproteína-p maior em relação aos outros grupos. Os tumores do grupo plasmocitóide tiveram um maior percentual de resposta parcial à terapia do que os outros grupos, enquanto os tipos linfocitóde tiveram um maior percentual de resposta completa. Os casos com resposta clínica parcial à quimioterapia apresentaram um... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: In this study were evaluated 137 neoplastic masses of transmissible venereal tumor from clinical attendance at the Veterinary Hospital and Central biotery of UNESP (Botucatu campus), between March 2002 and September 2004. The cytological samples were stained by the Giemsa method and, by preestablished criteria, divided into three cytomorphological patterns: lymphocyte-like, plasma cell-like and mixed. Then, They were regrouped by biological behavior as primary or non-primary (metastatic or recurrent). The aim of the present work was to identify and compare nuclear abnormalities occurrence (binucleation, multinucleation, nuclear buds, nuclear lobulation and micronucleation), to evaluate cytomorphometric parameters by the critical electrolyte concentration (CEC) technique, to determinate proliferation ratio by immunoreaction with Ki-67 (MIB-1) antibody and AgNOR quantification. Additionally, the immunolabelling with p-glycoprotein antibody, and the clinical response to chemotherapy, were evaluated and correlated. The results showed a higher frequency of nuclear lobulation in the plasma-cell-like pattern. The nucleolus area and nucleolus: nucleus ratio were greater in primary masses. The proliferative index measured by Ki-67 immunocytochemistry was most elevated in the plasma-cell-like and not primary tumors. The AgNOR point average was highest in lymphocyte-like patterns. The expression of p-glycoprotein was highest in plasma-cell-like and non-primary masses than in the others. Similarly, the plasma-cell-like group showed a larger partial response to chemotherapy than the other two patterns, although the lymphocyte-like group presented the largest percentage of complete response. The association between p-glycoprotein expression and clinical response revealed that with the partial response had greater p-glycoprotein expressions than the total response... (Complete abstract, click electronic address below). / Doutor

Orientador: Rosemeri de Oliveira Vasconcelos / Coorientador: Flávia Lombardi Lopes / Banca: Paulo Ricardo Dell'Armelina Rocha / Banca: Geórgia Modé Magalhães / Banca: Marcos Rogério André / Banca: Rosangela Zacarias Machado / Resumo: A resposta imune de cães com Leishmaniose Visceral (LV) pode apresentar um perfil variado de citocinas, com predominância de citocinas pró-inflamatórias (resistência) ou antiinflamatórias (susceptibilidade), dificultando ou favorecendo a multiplicação do protozoário Leishmania infantum chagasi nos tecidos do hospedeiro. Nesses animais existe um desequilíbrio entre os perfis das respostas imunes Th1 e Th2. A avaliação da resposta imunológica destes cães com diferentes manifestações clínicas de LV é de fundamental importância para a compreensão da patogenia da doença. O objetivo geral deste estudo foi avaliar o perfil de citocinas Th1, Th2 e regulatórias, fatores de transcrição (T-bet e GATA-3) e carga parasitária em cães com LV e controle, no fígado, baço e linfonodos poplíteo e pré-escapular, para verificar possíveis diferenças na resposta imune compartimentalizada. Neste estudo foram utilizados 28 cães de área endêmica para a LV e cinco cães de área não endêmica (controle). Os cães infectados foram separados em grupos sintomático (n=16) e assintomático (n=12). A quantificação da expressão dos genes das citocinas (IFN- γ, TGF-β, IL-10, IL-4, IL-12 e MIF), da carga parasitária tecidual e dos fatores de transcrição foi feita por meio da técnica de PCR quantitativo em tempo real, em amostras de tecidos dos diferentes órgãos. O baço e os linfonodos poplíteo e pré-escapular foram os órgãos que apresentaram maior número de cópias do DNA da Leishmania infantum chagasi. Os resultados da expressão dos genes de citocinas mostraram que houve um aumento da expressão de citocinas pró-inflamatórias (TNF-α, IFN-γ, MIF, IL-12), anti-inflamatórias (IL-4) e regulatórias (IL-10, TGF-β) nos grupos de cães infectados, algumas com diferenças significativas do grupo controle (P<0,05). Enquanto o fator de transcrição T-bet teve níveis mais elevados nos animais assintomáticos. Em conclusão ... / Abstract: The immune response of dogs with visceral leishmaniasis (VL) may present a varied profile of cytokines, predominantly proinflammatory (resistance) or anti-inflammatory (susceptibility) cytokines, hindering or favoring the multiplication of the protozoan Leishmania infantum chagasi in the host tissues. In these animals there is an imbalance between the profiles of Th1 and Th2 immune response. The evaluation of the immune response of these dogs with different clinical manifestations of VL is crucial for understanding the pathogenesis of the disease. The aim of this study was to evaluate the profile of Th1, Th2 and regulatory cytokines, transcription factors (T-bet and GATA-3) and parasite load in dogs with VL and control, in the liver, spleen and popliteal and prescapular lymph nodes to verify possible differences in compartmentalized immune response. In this study 28 dogs from an endemic area for VL and five dogs from non-endemic area (control) were used. The infected dogs were divided into symptomatic (n = 16) and asymptomatic (n = 12) groups of dogs. The quantification of the gene expression of cytokines (IFN-γ, TGF-β, IL-10, IL-4, IL-12 and MIF) and tissue parasitic load of the transcription factors was done using the technique of quantitative PCR in real time, tissue samples from different organs. The spleen and popliteal and pre-scapular lymph nodes were the organs that showed a higher number of copies of the DNA of Leishmania infantum chagasi. The results of the expression of cytokine genes showed that there was an increased expression of pro-inflammatory (TNF-α, IFN-γ, MIF, IL-12), anti-inflammatory (IL-4) and regulatory cytokines (IL-10 , TGF-β) in groups of infected dogs, with some significant differences from the control group (P <0.05). While the transcription factor T-bet had higher levels in asymptomatic animals. In conclusion GATA-3 was less expressed in the group of infected dogs suggesting that there other mechanisms ... / Doutor

Orientador: Áureo Evangelista Santana / Coorientador: Paola Castro Moraes / Banca: José Luiz Laus / Banca: Mirela Tinucci Costa / Banca: Márcio Antônio Brunetto / Banca: Rodrigo Cardoso Rabelo / Resumo: A sepse é uma síndrome de caráter multifatorial e com consequências graves para sobrevida e para os custos de tratamento em cães. Neste contexto a gastroenterite é um representante importante desta síndrome inflamatória de associação infecciosa no campo das urgências veterinárias. Este estudo unicêntrico, prospectivo e de coorte apresentou como objetivo fundamental identificar as variáveis prognósticas associadas com a sobrevivência a curto e médio prazo de 56 cães com gastroenterite, atendidos como urgências e hospitalizados para cuidados intensivos. Foram coletados dados fisiológicos e laboratoriais no momento da admissão de urgência dos pacientes (T0) e 24 horas depois (T24). Desta forma, foram encontradas as relações destes parâmetros com a sobrevivência ou a mortalidade em 24 horas, e aos 7, 30 e 60 dias pós ingresso. Com os resultados obtidos, foram criadas árvores de decisão empregadas na estratificação, previsão e identificação de todas as interações possíveis. A gravidade do quadro clínico, laboratorial e dos antecedentes históricos prediz a mortalidade de pacientes caninos com gastroenterite; e os doentes diagnosticados com parvovirose ou gastroenterite hemorrágica, classificados em sepse grave ou em choque séptico, possuem maior mortalidade tanto às 24 horas quanto aos 7, 30 e 60 dias após atendimento. A queda do potencial de transporte de oxigênio, do potencial oncótico e a alteração metabólica em nível celular foram determinantes no prognóstico dos pacientes, representados respectivamente pelo alto poder prognóstico das variações em 24 horas do hematócrito, das proteínas totais e do lactato sérico, bem como a presença de vasoconstrição periférica grave 24 horas após o início do tratamento, demonstrada pelo maior escore de vasoconstrição. Deste modo, pretendeu-se com este estudo, possibilitar o conhecimento aos Médicos Veterinários de ... / Abstract: Sepsis is a multifactorial syndrome with serious consequences for survival and costs of treatment in dogs. In this context gastroenteritis is an important representative of this inflammatory syndrome infectious association in the veterinary emergencies area. This single-center, prospective cohort study presented as a fundamental objective to identify the prognostic variables associated with survival in the short and medium term of 56 dogs with gastroenteritis treated in emergency and critical care hospital. Physiological and laboratory datas were collected on admission of emergency patients ( T0 ) and 24 hours later ( T24 ). Thus, the relationship between these parameters and the survival or mortality in 24 hours, and at 7, 30 and 60 days after admission were found. With the results, decision trees used in the stratification, prediction and identification of all possible interactions were created. The severity of the clinical, laboratory findings and historical background predicts mortality in canine patients with gastroenteritis , and patients diagnosed with parvovirus or hemorrhagic gastroenteritis, ranked in severe sepsis or septic shock, have higher mortality both at 24 hours as at 7, 30 and 60 days after treatment. The fall of potential oxygen transport, the oncotic potential and metabolic changes at the cellular level were determining the prognosis of patients, respectively represented by the high prognostic power of variations within 24 hours of hematocrit, total protein and lactate as well as presence of severe peripheral vasoconstriction 24 hours after initiation of treatment, as demonstrated by scores greater vasoconstriction. Thus, it is intended with this study, getting familiar to veterinarians to predict survival in dogs with gastroenteritis based on simple parameters, low cost and easy implementation / Doutor

Orientador: Gilson Hélio Toniollo / Coorientador: Silvia Regina Rogatto / Banca: Paola Castro Moraes / Banca: Luís Gustavo Gosuen Gonçalves Dias / Banca: Carolina Franchi João / Banca: Fabiana Ferreira de Souza / Resumo: O processo degenerativo progressivo em consequência a resposta exagerada do endométrio à exposição crônica de progesterona e estrógeno, endógeno ou exógeno, resulta em hiperplasia endometrial cística (HEC) na maioria das cadelas idosas, e consequente degeneração tecidual, distensão glandular e acúmulo de secreções, que pode resultar em contaminação bacteriana, inflamação supurativa e degenerativa do endométrio, com acúmulo de exsudato nas glândulas endometriais e lúmen uterino, bacteremia, afecção hepatorenal e toxemia. A análise oligoarrays tem sido aplicada com sucesso no estudo da expressão gênica do endométrio; o único tecido com capacidade dinâmica de sofrer remodelação em resposta a variações cíclicas de hormônios esteróides e fatores locais autócrinos e parácrinos. Objetivou-se com este estudo identificar os genes diferencialmente expressos responsáveis pela proliferação e hiperplasia no endométrio de fêmeas caninas acometidas por HEC, mucometra e piometra, comparado com o tecido endometrial normal de fêmeas caninas na fase de diestro. Foi utilizado teste estatístico SAM (Significance Analysis Of Microarray), do programa TMeV v.4.5, por meio de teste estatístico paramétrico (teste t), p<0,05 e ajuste pelo teste de Bonferroni, considerando apenas os conjuntos de genes que com False Discovery Rate iguais ou inferiores a zero, e fold-change > ou < que 3,0. O grupo HEC apresentou 33 genes com expressão aumentada (upregulated) e 45 genes com expressão diminuída (downregulated) em relação ao grupo diestro, com 15 moléculas envolvidas no desenvolvimento, crescimento e proliferação celular e morfologia tumoral. O grupo mucometra apresentou 189 genes upregulated e 150 genes downregulated em relação ao grupo diestro, sendo 26 moléculas associadas ao desevolvimento embrionário e 21 moléculas envolvidas com movimentação celular, desenvolvimento e funcionamento do sistema ... / Abstract: Hyperplasic and cystic alteration of the canine endometrium compromise reproduction and fertility and may lead to a degenerative inflammation and infection of endometrium. The progressive process usually proposed as the initiating lesion, is mediated by progesterone and potentially aggravated by estrogens. A separate process caused by local uterine irritation to trophoblastic reaction and bacterial proliferation has been recently proposed as an alternate mechanism leading to pyometra. In order to identify molecular similarity and potential targets for therapeutic intervention and biomarkers for endometrium proliferative conditions in humans and dogs, gene expression profiles were performed in fifteen endometrial biopsy samples from female dogs during luteal phase (diestrus), fifteen affected by endometrial cystic hyperplasia, fifteen by mucometra and fifteen by pyometra, and processed on Affymetrix Canine 1.0 ST array. The transcriptome analysis revealed expression of 115, 23 and 284 significantly genes (p<0,05) altered in the hyperplasic compared with normal endometrium, hyperplasic and aseptic secretory compared with hyperplasic endometrium, and infected compared to hyperplasic and aseptic secretory endometrium, respectively. Gene ontology enrichment analysis revealed genes associated with the cell development, growth, proliferation, function and maintenance, and cell-to-cell signaling and interaction were altered in the hyperplasic and proliferative lesion, and also in aseptic secretory endometrium, such as elevated expression of CYR61, EGR1, FOS, GALNT14, IGKC, SLC47A2, IGFBP3, and low expression of ESR2, SOCS3 and MCOLN3. The proliferative to secretory transition revealed genes associated with immune cell trafficking, and cell-mediated immune response, such as FOSB, MAL, CCL4 and SLPI. The infected endometrium due to bacterial infection revealed elevated expression of chemokines (CCL2, CCL3, CXCS), cytokines (IL8, IL6), proteases ... / Doutor

Resumo: A leishmaniose visceral americana (LVA) ou calazar é uma antropozoonose causada pelo protozoário Leishmania (L.) chagasi, transmitida através do repasto sanguíneo de flebotomíneos. O cão é o principal reservatório e fonte de infecção para o ser humano e outros cães. Os objetivos deste trabalho foram: determinar a distribuição espacial da leishmaniose visceral canina (LVC) e da LVA no Município de Birigui (SP) no período de 1998 a 2003, localizar, espacialmente, os casos de LVC e LVA; e avaliar a relação espacial da ocorrência da LVC com a LVA. Foi realizada uma busca por dados epidemiológicos dos cães e seres humanos junto à Secretaria Municipal de Saúde. Os dados sobre a ocorrência da LVA e LVC foram distribuídos espacialmente no mapa do município, subdivido em 16 setores, seguindo o critério do Programa Nacional de Combate à Dengue. Foi utilizado o teste de correlação de Pearson para a associação das variáveis. Com relação aos resultados, verificou-se 1.384 cães positivos para pesquisa de anticorpos anti-Leishmania e 13 seres humanos com LVA. Dos cães com LVC, 51,8% eram machos, 65,5% sem raça definida, 67,3% de porte médio e 29,6% tinha idade entre 7 e 12 meses. O tempo médio de espera do diagnóstico laboratorial da Leishmaniose Visceral Canina foi de 49,7 dias e a taxa de ocorrênciade LVC no município foi de 2,97%, com presença da enfermidade em 15 dos 16 setores. Dos seres humanos com LVA, 76,9% eram do gênero masculino e a idade variou de 1 a 76 anos. A incidência no período estudado foi de 13,8/100.000 hab. e taxa de letalidade de 30,8%. Observou-se que em dez setores do município ocorreram casos de LVA. Houve correlação positiva (r=0,963) entre os casos de Leishmaniose Visceral Canina e Leishmaniose Visceral Americana e baixa correlação (r=0,033) entre a taxa de ocorrência de LVC e o coeficiente... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: American Visceral Leishmaniasis (AVL) or Kalazar, is one antropozoonosis caused by the protozoan Leishmania (L.) chagasi, it is transmitted by the bites of phlebotomous mosquitoes. The dog is the main reservoir to humans and other dogs. The objectives of this work was: to determine the canine visceral leishmaniasis (CVL) and AVL spatial distribution in the City of Birigui, São Paulo State, Brazil, during 1998 thru 2003; to locate, spacially, the CVL and AVL cases; and to evaluate the spatial relation between CVL and AVL occurrence. An epidemiological data search was carried through for the dogs and human in the City Department of Health. The AVL and CVL occurrence data was spacially distributed in the city map, subdivide in 16 sectors, following the Dengue National Combat Program criteria. The Pearsonþs correlation test was used for the variable association. About the results, was verified 1,384 positive dogs for anti-Leishmania antibodies tests, and 13 human with AVL. The dogs with CVL, 51.8% were male, 65.5% without defined race, 67.3% of medium size and 29.6% had age between 7 and 12 months. The average of time to wait the laboratorial diagnosis on CVL was of 49,7 days and the CVL occurrence rate 2,97%, with disease presence in 15 of the 16 sectors. About the human with AVL, 76.9% they were male and the age varied of 1 thru 76 years. The incidence rate in the period was 13,8/100.000 hab. And the lethality was 30,8%. It was observed that in ten sectors of the city had occurred AVL cases. It had positive correlation (r=0,963) between the CVL cases and AVL, and low correlation (r=0,033) between the CVL occurrence and the AVL incidence. It was concluded that the AVL and CVL cases are spacially distributed in all city. The same model, applied in this study, can be used by other cities that has occurrence of AVL and CVL, to assist in the strategies for the control of this important zoonosis. / Orientador: Antonio Carlos Paes / Coorientador: José Rafael Modolo / Mestre

Resumo: No homem e no cão, as lesões displásicas são a neoplasia intra-epitelial prostática (PIN) e a atrofia inflamatória proliferativa (PIA), as quais vêm sendo estudadas devido seu potencial pré-maligno. Diversos fatores, bem como o processo inflamatório, estão relacionados à carcinogênese prostática. A cicloxigenase-2 (COX-2) apresenta papel fundamental na resposta inflamatória e apresenta relação com o desenvolvimento do câncer de próstata. Este trabalho teve por objetivos caracterizar a proliferação e morte celular (apoptose) das células basais e secretoras do tecido prostático normal e atípico (PIA, PIN e carcinoma) dos cães, avaliar a integridade da camada de células basais por meio do anticorpo p63 e, analisar a expressão gênica de COX-2 nos diferentes componentes teciduais da PIA canina por qRT-PCR. Avaliaram-se, pela técnica de dupla marcação imunoistoquímica, os índices de proliferação e apoptose com os marcadores Ki-67 e caspase-3, respectivamente, das células secretoras (PSA positivas) e das células basais (34âE12 positivas). Para isso, foram estudadas 130 próstatas de cães adultos, inteiros e sem histórico de lesão prostática. Observou-se aumento da proliferação e diminuição da apoptose das células secretoras da PIA e do carcinoma, entretanto, as células basais apresentaram maior índice proliferativo e menor taxa de apoptose apenas nos focos de PIA. Na PIN, a proliferação celular mostrou-se mais evidente em relação à morte celular. Maior quantidade de células basais que expressaram p63 foi constatada na PIA e no carcinoma. Os focos de PIA apresentaram maior expressão gênica de COX-2 no estroma em relação às células epiteliais. Conclui-se que os compartimentos secretor e basal exibem maior proliferação celular e menor taxa apoptótica na PIA. O aumento da marcação de p63 na PIA e no carcinoma sugere participação das ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Dysplastic lesions in human and dogs are prostatic intraepithelial neoplasia (PIN) and proliferative inflammatory atrophy (PIA), which have been investigated because of their premalignant potential. Inflammatory process is related to prostate carcinogenesis. Cyclooxygenase-2 (COX-2) plays a role in the inflammatory response and is correlated with the development of prostate cancer. This study aimed to characterize the proliferation and apoptosis of basal and secretory cells of normal and atypical prostate tissue (PIA, PIN and carcinoma) of dogs, to assess the integrity of the basal cell layer through the p63 immunohistochemistry. In addition, we analyzed the gene expression of COX-2 in different tissue components of canine PIA by qRT-PCR. Immunohistochemical double staining technique was performed using Ki-67 and caspase-3 antibodies to asses cellular proliferation and apoptosis, respectively. PSA was used to characterize the secretory cells and 34âE12 to characterize the basal cells. Were analyzed 130 prostates of adult dogs with or without history of prostatic lesion. Increased proliferation and decreased apoptosis of the secretory cells of the PIA and the carcinoma was observed, however, the basal cells showed higher proliferative index and lower rate of apoptosis only in foci of PIA. PIA and carcinomas showed high expression of p63. It was observed higher gene expression of COX-2 in PIN stroma compared to epithelial cells. We conclude that basal and secretory compartments exhibit higher proliferative and lower apoptotic rate in PIA. The higher expression of p63 in PIA and carcinomas suggests involvement of the basal cells in atypical lesions of the prostate. Furthermore, the expression of COX-2 in PIA is higher in the stromal compartment, revealing important role of this enzyme in the canine prostate carcinogenesis / Orientador: Renée Laufer Amorim / Coorientador: Sérgio Luis Felisbino / Banca: Veridiana Maria Brianezi Dignani De Moura / Banca: Gilson Hélio Toniollo / Banca: Maria Aparecida Custódio Domingues / Banca: Sandra Aparecida Drigo Linde / Doutor

Resumo: A leishmaniose visceral (LV) é uma enfermidade infecciosa de caráter zoonótico, endêmica em algumas áreas do Brasil, causada pela L. chagasi. A maior dificuldade encontrada para controlar a doença está relacionada ao seu diagnóstico, que apresenta limitações quanto aos seus resultados. Desta maneira, o estudo comparou duas provas sorológicas, a reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e o ensaio imunoenzimático (ELISA); o exame parasitológico direto bem como a reação em cadeia pela polimerase (PCR), ambos de aspirado de linfonodo. Foram utilizados os iniciadores gênero-específicos LINR4 e LIN19 e os iniciadores RV1 e RV2 espécie-específicos para identificar a L. chagasi. Foram coletadas amostras de 100 cães sorologicamente positivos, provenientes do Centro de Controle de Zoonoses (CCZ) de Bauru, região endêmica, e de 100 cães provenientes do CCZ de Botucatu-SP, área não-endêmica para a enfermidade. A RIFI, o parasitológico e a PCR apresentaram especificidade de 100% e o ELISA de 99%. As sensibilidades foram 97,77%; 93,33% e 91,11%, para RIFI, ELISA e PCR respectivamente. A proporção de concordância entre as provas foi satisfatória, apresentando valores de P sempre menores que 0,05. Pode-se concluir que além do exame sorológico, pode-se utilizar também a PCR de linfonodo no diagnóstico da LVC, pois a associação de técnicas melhorou a detecção de cães infectados, contribuindo para o melhor controle desta zoonose. / Abstract: The visceral leishmaniasis (VL) is a zoonotic infectious disease, endemic in some areas from Brazil, caused by L. chagasi. The greatest difficulty to control the disease is related to its diagnosis, which present limitations related with the results. Thus, the study compared two serologic methods, the indirect fluorescent antibody test (IFAT) and the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA); the parasitological direct examination and the polymerase chain reaction (PCR), both drawn from the lymph node. The initiators used were gender-specific LINR4 and LIN19 and the initiators species-specific RV1 and RV2 to identify L. chagasi. The samples were collected from 100 dogs serologically positive, from the Center for Zoonoses Control (CZC) of Bauru, endemic region, and 100 dogs from the CZC of Botucatu-SP, an area considered non-endemic to the disease. The IFAT, the parasitological and the PCR showed 100% of specificity and ELISA 99%. The sensitivities were 97.77%, 93.33% and 91.11% for IFAT, ELISA and PCR respectively. The proportion of agreement between the methods was satisfactory, showing values of P always smaller than 0,05. It was concluded that in addition to the serologic methods, PCR of lymph node can also be used for CVL diagnosis, and that the combination of techniques improved the detection of infected dogs, contributing for better control of this zoonosis. / Orientador: Helio Langoni / Coorientador: Simone Baldini Lucheis / Banca: Antonio Carlos Paes / Banca: Paulo Eduardo Martins Ribolla. / Mestre

Orientador: Flávio Quaresma Moutinho / Banca: Luiz Henrique de Araújo Machado / Banca: Carlos Artur Lopes Leite / Resumo: A otite externa sempre foi um problema para cães, especialmente na presença de quadros de malasseziose. As leveduras do gênero Ma/assezia são patógenos oportunistas em potencial no microambiente ótico, podendo agravar um quadro de otite externa quando as condições assim o permitirem. O controle da população desses fungos normalmente é realizado com drogas de custo razoável e por um período relativamente longo, podendo trazer efeitos colaterais ao paciente. É nesse ponto que a medicina natural se faz relevante. A própolis, um produto oriundo do processamento do pólen por abelhas da espécie Apis me/ifera, possui notáveis efeitos sobre diversos microrganismos, incluindo fungos leveduriformes. Por ser uma substância complexa e composta por diversas frações antimicrobianas, é possível que sua ação também se estenda às Ma/assezia spp. O objetivo desse trabalho foi verificar a eficácia de soluções aquosa e alcoólica de própolis sobre Ma/assezia spp isoladas do ambiente ótico de cães. Quarenta amostras de Ma/assezia spp foram avaliadas frente ao teste de diluição em meio sólido, verificando-se o diâmetro dos halos de inibição e correlacionando-os com um efeito inibitório sobre o crescimento. Conclui-se que as soluções de própolis possuem efeito inibidor do crescimento in vitro de Ma/assezia spp oriundas do conduto auditivo de cães, sendo esta ação mínima no extrato aquoso e maior em extrato alcoólico. Pode-se inferir, também, que o álcool etílico 96° isoladamente possui efeito inibidor do crescimento in vitro de Ma/assezia spp oriundas do conduto auditivo de cães. / Abstract: The externa I otitis has always been a problem for dogs, especially in the presence of malasseziasis. The yeast of the genus Ma/assezia is a potential opportunistic pathogen in the optical microenvironment and may aggravate the external otitis when conditions so permit. The control of the population of these fungi is usually done with reasonable cost of drugs, has a relatively long time and may bring side effects to the patient. This is where natural medicine is relevant. The propolis, a product comes from the processing of pollen by the bee Apis me/itera, has remarkable effects on different organisms, inciuding yeast fungi. As a substance composed of diverse and complex antimicrobial fractions, it is possible that its action also extends to Ma/assezia spp. The aim of this study was to assess the effectiveness of alcohol and aqueous so\utions of propolis on Ma/assezia spp isolated from the aural environment of dogs. Forty samples of Ma/assezia spp were evaluated facing the test of agar dilution, whilst the diameter of halos of inhibition and correlating them with an inhibitory effect on growth. It was concluded that propolis extracts have inhibitory effect of the in vitro growth of Ma/assezia spp from the canine ear conduct, with minimal action by the aqueous extract and more accentuated action by alcohol extract. It is possible to infer also that the ethyl alcohol 96° alone has inhibitory effect on the in vitro growth of Ma/assezia spp from the canine ear conduct. / Mestre