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Estratégias nutracêuticas no período de transição em bovinos leiteiros e seus efeitos sobre parâmetros metabólicos e fertilidade / Nutraceutical strategies during the transition period in dairy cattle and the effects on metabolic parameters and fertilityAcosta, Diego Andres Velasco 12 January 2016 (has links)
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Previous issue date: 2016-01-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / O balanço energético negativo (BEN) está associado com alterações na fertilidade de vacas leiteiras, portanto diferentes estratégias nutricionais e farmacológicas vêm sendo utilizadas para minimizar os efeitos negativos do BEN, visando aumentar a fertilidade. A aplicação pré-parto de somatotropina recombinante bovina (rbST) pode levar a uma redução da concentração sérica dos ácidos graxos não esterificados (AGNE) e β-hidroxibutirato (BHBA) no período pós-parto. Além disso têm sido demonstrado efeito significativo no desenvolvimento folicular ovariano pós-parto. Da mesma forma, estratégias nutricionais e o manejo da alimentação durante o período pré e pós-parto têm um impacto na saúde, produtividade e fertilidade da vaca leiteira. Estudos recentes mostram que a adição de aminoácidos na dieta durante o período de transição de vacas leiteiras pode ter efeitos benéficos no metabolismo, contribuindo para melhorar a performance reprodutiva. Diante desta problemática, esta tese apresenta três artigos, cujos objetivos foram: 1) determinar o efeito da administração pré-parto de somatotropina em novilhas leiteiras sobre marcadores do BEN, retomada da atividade ovariana e produção de leite. 2) Determinar o efeito da suplementação de metionina e colina protegidas da degradação ruminal, isoladas e em combinação, sobre o potencial esteroidogenico do folículo dominante da primeira onda folicular pós-parto de vacas leiteiras. 3) Determinar o efeito da suplementação de metionina e colina protegidas da degradação ruminal, isoladas e em combinação, sobre o desenvolvimento embrionário e nível de metilação global de DNA do embrião. O tratamento com somatotropina pré-parto em novilhas leiteiras aumentou a concentração de IGF-I intrafolicular e a expressão do receptor de LH e da proteína reguladora aguda da esteroidegênese em células foliculares do folículo dominante da primeira onda pós-parto. Essas mudanças foram associadas a um aumento da concentração de estradiol sérica e intrafolicular, o que pode, potencialmente, aumentar a chance de ovulação da primeira onda folicular pós-parto. Entretanto, somatotropina não afetou outros parâmetros metabólicos e produtivos no período pós-parto recente. A suplementação com metionina, colina ou ambas durante o período de transição parece não ter efeito sobre o desenvolvimento folicular pós-parto da primeira onda em vacas da raça Holandês. No entanto, a suplementação apenas com metionina durante o período de transição aumenta a expressão de 3β-HSD nas células foliculares. Além disso, a suplementação com metionina e colina induziu a uma down regulation dos genes pró-inflamatórios, indicando um menor processo inflamatório nas células foliculares. Em relação ao desenvolvimento embrionário, a suplementação com metionina durante o período de transição reduziu a metilação global do DNA e aumentou o acúmulo de lipídios nos embriões. A utilização de estratégias nutracêuticas durante o período de transição aumentaram o potencial esteroidogenico do folículo dominante da primeira onda folicular pós-parto e aumentou a expressão de genes relacionados a esteroidogenese, assim como uma redução na expressão de genes pró inflamatórios, indicando efeitos benéficos na fertilidade de bovinos leiteiros. Além disso, a suplementação de metionina parece aumentar a capacidade de sobrevivência dos embriões, desde que há fortes indícios de que as reservas lipídicas endógenas servem como um substrato energético. / The negative energy balance (NEB) is associated with changes in the fertility of dairy cows, therefore different nutritional and pharmacological strategies are being used to minimize the negative effects of the NEB in order to increase fertility. Pre-partum recombinant bovine somatotropin (rbST) administration can lead to a reduction in serum non-esterified fatty acids (NEFA) and β-hydroxybutyrate (BHBA) in the postpartum period, in addition to improving postpartum ovarian follicular development. Similarly nutritional strategies during the pre and postpartum period have a positive impact on health, productivity and fertility of dairy cows. Recent studies show that the use of amino acids in the diet during the transition period may have beneficial effects in metabolism. Faced with this problem, this thesis presents three papers whosethe objectives were: 1) Determine the effect of pre-partum administration of somatotropin in dairy heifers on the markers of NEB, resumption of ovarian activity and milk production. 2) Determine the effect of methionine, choline supplementation isolated and in combination on esteroidogenic potential of the fist postpartum dominant follicle. 3) Determine the effect of methionine, choline supplementation isolated and in combination on embryo development and global DNA methylation. Pre-partum somatotropin treatment in dairy heifers increased intrafollicular IGF-I and mRNA expression of LH receptor and steroidogenic acute regulatory protein in follicular cells of the first postpartum dominant follicle. These changes were associated to increased intrafollicular and serum estradiol concentration, which can potentially increase the chance of ovulation of the first postpartum follicular wave. Despite that, somatotropin did not affect other metabolic and productive parameters in the early postpartum period. Supplementing methionine, choline or both during the transition period seemed to have no effect on postpartum follicular development of the first postpartum wave in Holstein cows. However, supplementing methionine, during the transition period increased follicular cells 3β-HSD expression, methionine and choline supplementation also induced a down regulation of pro-inflammatory genes, indicating a lower inflammatory processes in follicular cells. Regarding to embryo development, supplementation of methionine, only during the transition period reduce global DNA methylation, moreover, supplemented methionine increase lipid accumulation in preimplantation embryos. The use of nutraceutical strategies during the transition period increased the steroidogenic potential of the first postpartum dominant follicle and increase the expression of genes related steroidogenesis also a down regulation of proinflammatory genes indicating beneficial effects on fertility in dairy cattle. Moreover, the methionine supplementation seems to impact the preimplantation embryo in a way that enhances its capacity for survival since there is strong evidence that endogenous lipid reserves serve as an energy substrate.
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Modelo de exposição intermitente ao etanol altera parâmetros do sistema colinérgico, estresso oxidativo e comportamento em peixe-zebraBernardo, Henrique Teza January 2017 (has links)
Dissertação de Mestrado apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, da Universidade do Extremo Sul Catarinense - UNESC, para obtenção do título de Mestre em Ciências da Saúde. / O álcool é capaz de causar uma série de danos em tecidos e órgãos, destacando os seus efeitos nocivos ao cérebro ao modular uma série de mecanismos e vias, como alterações nos sistemas de neurotransmissão, ativação de vias pró-oxidantes e indução do sistema pró-inflamatório. Dentre os padrões de consumo de bebidas alcóolicas, um padrão se destaca, o binge alcóolico. Esse comportamento de consumo é caracterizado pela ingestão de altas doses de álcool em um único episódio, seguido de um período sem a ingestão de bebidas alcóolicas. Por ser um comportamento de consumo pouco estudado, a compressão
dos efeitos do etanol sobre o cérebro nesse padrão de consumo é de grande importância. Neste contexto, o propósito do presente estudo foi avaliar os efeitos de um modelo que mimetiza o comportamento de consumo binge alcoólico (weekly-binge) sobre a sinalização colinérgica, resposta oxidativa e inflamatória em cérebro de peixe-zebra. Também avaliamos alterações comportamentais locomotoras e exploratórias nos animais submetidos ao mesmo modelo de exposição. O modelo consistiu em três exposições ao etanol (1,4%v/v) por 30 minutos. Os grupos foram divididos conforme o tempo de análise após a terceira e última exposição ao etanol, sendo eles: WB-I (analisado imediatamente após a última exposição), WB-2 (após 2 dias) e WB-9 (após 9 dias). Parte dos animais de cada grupo sofreu eutanásia e tiveram o cérebro total dissecado para as análises bioquímicas, sendo que o restante foi utilizado no teste comportamental. Para verificação de estresse
oxidativo, foram avaliados os níveis de espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBA-RS), a oxidação de diclorofluoresceína (DCFH) e a atividade das enzimas superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT). Parâmetros relacionados a eventos inflamatórios foram avaliados através da análise da expressão dos genes relacionados às citocinas IL-1β, IL-10 e TNF-α. Do sistema colinérgico, foram avaliadas as atividades das enzimas colina acetiltransferase (ChAT) e acetilcolinesterase (AChE). Na análise comportamental, utilizou-se o teste Novel tank. Ao analisar os parâmetros de estresse oxidativo foi verificado aumento nos níveis de
TBA-RS e aumento da oxidação de DCFH apenas no grupo WB-I. Sobre as enzimas antioxidantes, alterações foram observadas nos grupos WB-2 e WB-9, caracterizado pela diminuição de CAT nesses grupos. O weekly-binge não foi capaz de promover alterações da expressão gênica para IL-1β, IL-10 e TNF-α. Sobre o sistema colinérgico, o modelo de exposição foi capaz de aumentar a atividade de ChAT no grupo WB-I enquanto no grupo WB-9 uma diminuição de atividade foi percebida. A atividade de AChE apresentou diminuição nos grupos WB-2 e WB-9. No teste comportamental Novel tank, o weekly-binge foi capaz de promover um efeito ansiolítico no grupo WB-I e WB-2 ao alterar o comportamento exploratório dos animais. Diante os resultados obtidos nos parâmetros do estresse oxidativo e sistema colinérgico, podemos sugerir que vias pró-oxidantes podem alterar a transmissão colinérgica, bem como a alteração comportamental pode ser uma resposta da alteração nesse sistema de neurotransmissão. Estes resultados contribuem para uma melhor compreensão dos mecanismos patológicos envolvidos no consumo intermitente do etanol.
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Community Centers: Identity GeneratorRoman Fuentes, Julian a. 24 September 2018 (has links)
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Finland's Education: A Methodology for DesignOrtiz Perez, Mariela 21 September 2018 (has links)
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Largo Viaje en Breve. La Minificción de Max Aub, María Luisa Elío y José de la Colina en el ExilioHernández-Baptista, Gonzalo 01 January 2015 (has links)
A pesar del interés que suscita, la minificción del exilio republicano español en México ha sido mayormente ignorada por la crítica y, cuando se ha reparado en ella, su acercamiento descontextualizado ha provocado inexactitudes que se reflejan en el canon minificcional propuesto para la Península. Por ello, examino algunas vías de contacto entre el exterior y el interior de España y propongo una primera aproximación a un corpus de autores en exilio, entre los que destacan Max Aub, María Luisa Elío y José de la Colina.
Además, el estudio de estos tres autores revela una minificción que no está ubicada ni aquí ni allí, tampoco instalada en un pasado ni en un presente, y menos aún alojada en la voz de un narrador monolítico, sino polifónico. A este grupo lo denomino minificción de intersticio, es decir, aquélla que manifiesta un distanciamiento y, a veces, oscilación de los grandes centros deícticos (espacio, tiempo y voz). Dicha poética del intersticio se ve reflejada en varios recursos, como la representación del extrañamiento (ostranenie), una fuente de enunciación inusual, la ucronía, la mise en abyme, la parodia y la ecfrasis, entre otros.
El conjunto de estas estrategias desrealizadoras expresa una narrativa híbrida y ex-céntrica, en cuyo análisis vertebro un paradigma de encuentro y de oscilación, que facilita un estudio transatlántico entre la minificción del exilio y su lugar en la historia literaria.
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Modelos matemáticos para predição das exigências nutricionais da colina para frangos de corte / Mathematical models for prediction of nutritional requirement of the choline for chicksLima, Michele Bernardino de 26 July 2012 (has links)
A colina é um nutriente essencial nas dietas de frangos de corte. Os valores de exigências nutricionais são variáveis e foram estabelecidos há muitos anos. Assim, o objetivou-se com este trabalho reavaliar as respostas de frangos de corte de alto potencial genético de 1 a 7, 1 a 14 e 1 a 21 dias de idade como também modelar as respostas por diferentes funções matemáticas. Foram conduzidos dois experimentos sob dois níveis de metionina na dieta, tendo como base o método dose-resposta. Para os ensaios, foram utilizados 2.160 pintos de corte machos da linhagem Cobb 500 (1.080 em cada experimento), distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado, com seis tratamentos, seis repetições e 30 aves por unidade experimental. Os tratamentos consistiram em rações com níveis de 390, 715, 1.040, 1.365, 1.690 e 2.015 mg/kg de colina. As rações experimentais foram formuladas utilizando-se a técnica da suplementação. Foi formulada uma ração basal à base de milho, farelo de soja, concentrado proteico de soja, açúcar e amido contendo 390 mg/kg de colina total e 0,596% de metionina digestível. O cloreto de colina (62,5%) comercial foi suplementado para obter os demais níveis. O segundo experimento consistiu nos mesmos tratamentos do primeiro, porém com atendimento de 0,440% da metionina digestível. As variáveis mensuradas em ambos os ensaios foram: consumo de ração, consumo de colina, conversão alimentar e ganho de peso. Para modelar as respostas considerou-se o consumo de colina como variável independente e ganho de peso como variável dependente. As respostas foram modeladas por cinco modelos matemáticos: broken line, broken line com ascendência quadrática, cinética de saturação, logístico e monomolecular e o melhor modelo foi selecionado pelo critério de Akaike. As análises estatísticas foram realizadas com auxílio do programa computacional SAS® utilizando o procedimento PROC GLM para análise das pressuposições e análise de variância e PROC NLIN para o ajuste dos modelos. Os modelos que melhor se ajustaram foram: Broken line com ascendência quadrática (1,26 mg/g de GP ensaio 1) e Logístico (1,26 mg/g de GP ensaio 2) para o período de 1 a 7 dias. No período de 1 a 14 dias os modelos selecionados para o experimento com metionina normal e reduzida foram Logístico (1,16 mg/g de GP) e Broken line com ascendência quadrática (1,28 mg/g de GP), respectivamente. Já para o período de 1 a 21 foram o cinética de saturação, estimando uma exigência de 1,35 mg/g de GP para o experimento com metionina normal, e Broken line com ascendência quadrática estimando uma exigência de 1,21 mg de colina/g de GP para o experimento com metionina reduzida. / Choline is an essential nutrient in the diets of chicks. Supplementation levels in feeds is variable and requirements have been established many years ago. Thus, the objective of this study was to reassess the responses of high genetic potential chicks from 1-7, 1-14 and 1 to 21 days as well as modeling the responses of different mathematical functions. Two trials were conducted using two dietary levels of methionine, based on the dose-response method. For the trials were used 2,160 Cobb 500 male broiler chicks (1,080 birds in each experiment), distributed in a completely randomized design with six treatments and six replicates and 30 birds per experimental unit. The treatments consisted of diets with levels of 390, 715, 1,040, 1,365, 1,690 and 2,015 mg/kg of choline. The diets were formulated using the supplementation method. The basal diet was formulated based on corn, soybean meal, soy protein concentrate, sugar and starch, and contained 390 mg/kg of choline and 0.596% of digestible methionine. Commercial choline chloride (62.5%) was supplemented to obtain the other levels. The second trial consisted of the same treatments of the first, but with 0.440% of digestible methionine. The variables measured in both trials were: feed intake (FI), intake of choline (IC), feed conversion (FC) and weight gain (WG). To model the responses, the variables used were the intake of choline as an independent variable and weight gain as the dependent variable. The responses were modeled by five mathematical models: broken line (ascending linear and quadratic segments), saturation kinetic, 4-parameter logistics and monomolecular models and the best model was selected by Akaike information criterion. Statistical analyzes were performed using the computer program SAS® using PROC GLM for analysis of the assumptions and analysis of variance and PROC NLIN to fit the models. The models that best fit were: broken line quadratic segments (1.26 mg/g of WG - trial 1) and Logistics (1.26 mg/g of WG - trial 2) for the period 1-7 days. In the period 1-14 days, the models selected for the experiment with normal and deficient methionine were Logistic (1.16 mg/g WG) and broken line quadratic segments (1.28 mg/g WG), respectively. For the period 1-21days, the models were the saturation kinetics, estimating a requirement of 1.35 mg/g of WG for the experiment with normal methionine, and broken line quadratic segments estimating a requirement of 1.21 mg choline/g of WG for the experiment with deficient methionine.
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Suplementação de diferentes níveis de colina e aminoácidos sulfurados digestíveis sobre o desempenho de frangos de corte / Supplementation of different levels of choline and digestible sulfur amino acid for broiler chickensSantiago, Gabriela de Oliveira January 2018 (has links)
O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito da suplementação de níveis crescentes de colina e de aminoácidos sulfurados totais (AST) digestíveis em uma dieta de milho e proteína isolada de soja, sobre o desempenho produtivo, bem como a ocorrência de deformidades e desvios nas patas e fígado gorduroso de frangos de corte. Foram alojados 525 frangos de corte, machos Cobb 500, de um dia de idade, em 75 gaiolas experimentais. As aves foram distribuídas em um delineamento inteiramente casualizado com 15 tratamentos, 5 repetições e 7 aves por unidade experimental. Foi utilizada uma dieta basal semipurificada com 74% de milho (736 ppm de colina) e esta foi suplementada utilizando um arranjo fatorial 3 x 5 com 3 níveis de AST digestíveis em relação à lisina digestível (70, 75 e 80%) e 5 níveis de suplementação de colina (0, 700, 1.400, 2.100 e 2.800 ppm). Foi utilizado um programa alimentar de 2 fases: pré-inicial (1 a 7 d) e inicial (8 a 21 d). Ganho de peso (GP), consumo de ração e conversão alimentar (CA) foram avaliados aos 7, 14 e 21 d. Aos 21 d, as aves foram avaliadas para perose, valgus, varus e tibia rotada na articulação tibio matatarsal, os fígados foram avaliados macroscopicamente (coloração, tamanho e consistência) e quanto ao seu teor de extrato etéreo. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey. Regressões lineares e quadráticas foram estimadas para as variáveis de desempenho produtivo e a resposta máximada de suplementação de colina foi estimada. Não houve interação entre AST digestíveis e colina, também não houve diferença entre os níveis de AST digestíveis (P>0,05). O GP dos frangos alimentados com níveis crescentes de colina aumentou quadraticamente (P<0,05) de 1 a 7 d, 8 a 14 d, 1 a 14 d, 15 a 21 d e 1 a 21 d e a CA diminuiu quadraticamente (P<0,05) 1 a 14 d e 1 a 21 d. No período de 1 a 7 d, 8 a 14 d e 15 a 21d foram estimadas exigências de 2.700, 2.907 e 3.105 ppm para GP. De 1 a 14 d e 1 a 21 d, as exigências foram de 2.875 ppm e 2.925 ppm para GP, e 2.938 ppm e 2.849 ppm para CA. Os tratamentos que não receberam suplementação de colina apresentaram maior ocorrência de varus e tibia rotada (P<0,05), quando comparados aos outros níveis de colina, não houve diferença entre os níveis de colina para valgus. Os níveis de colina em que houve o melhor GP e CA para frangos foram determinados como 2.925 ppm e 2.849 ppm para as fases iniciais. Considerando-se uma ração de milho e farelo de soja (1.500 ppm de colina), 1.425 e 1.349 ppm de suplementação de colina são apropriados para melhorar a performance de frangos de corte de 1 a 21 d. Esses valores são superiores às recomendações prévias para as fases iniciais (500 ppm). / The objective of this study was to evaluate growth performance, the occurrence of leg deformity and deviations and fatty liver of broilers fed a corn and soy protein isolate diet supplemented with increasing levels of choline and digestible total sulfur amino acid (TSAA). A total of 525 one-day-old Cobb 500 chicks were distributed in a completely randomized design in 75 battery cages, 15 treatments, and 7 birds per cage. A 74% corn semi-purified basal diet (736 ppm of choline) was supplemented using a 3 x 5 factorial arrangement with 3 levels of digestible TSAA ratio to digestible lysine (70, 75 and 80%) and 5 levels of choline supplementation (0; 700; 1,400; 2,100, and 2,800 ppm). A 2-phases feeding program was used: pre-initial (1 to 7 d) and initial (8 to 21 d). Body weight gain (BWG), feed intake and feed conversion ratio (FCR) were evaluated at 7, 14 and 21 d. At 21 d all birds were evaluated for perosis, valgus, varus and rotated tibia in tibiometatarsal joint, livers were evaluated macroscopically (color, size, and consistency) and for fat content. Data were submitted to analysis of variance and means were compared by the Tukey test. Performance data were fitted to linear and quadratic polynomial regressions and the maximum response of choline supplementation was estimated. No interactions between digestible TSAA and choline were observed, also no differences among digestible TSAA levels (P>0.05). The BWG of broilers fed diets with increasing levels of choline increased quadratically (P<0.05) from 1 to 7 d, 8 to 14 d, 1 to 14 d, 15 to 21 d, and 1 to 21 d, also FCR decreased quadratically (P<0.05) from 1 to 14 d and 1 to 21 d. From 1 to 7 d, 8 to 14 d, and 15 to 21d quadratic regression estimated requirements as 2,700, 2,907, and 3,105 ppm for BWG. From 1 to 14 d and 1 to 21 d, quadratic regression estimates were 2,875 ppm and 2,925 ppm for BWG, and 2,938 ppm and 2,849 ppm for FCR. Treatments with no supplementation of choline had higher occurrence of varus and rotated tibia (P<0.05) compared to the other levels of choline. There was no difference for valgus deviation. Choline level that provided better BWG and FCR responses were determined as 2,925 and 2,849 ppm for starter phases, respectively. Considering a corn-soybean meal common diet (1,500 ppm of choline), 1,425 and 1,349 ppm of choline inclusions are appropriate to improve BWG and FCR response for broilers from 1 to 21 d, which are above previous recommendation for starter phases (500 ppm of choline).
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Validação de métodos para análise de citrato de colina e acetilmetionina em soluções injetáveis por cromatografia líquida de alta eficiência e eletroforese capilar / Validation of methods for analysis of choline citrate and acetylmethionine in injectable solutions by high performance liquid chromatography and capillary electrophoresis.Alexandre, Grazielle Prado 11 February 2011 (has links)
O objetivo desta pesquisa foi desenvolver, validar e comparar métodos analíticos para separação e quantificação de citrato de colina e acetilmetionina em formulações injetáveis por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e eletroforese capilar (EC). O método por CLAE, com o qual foi possível quantificar e separar simultaneamente, o citrato de colina e a acetilmetionina, foi realizado empregando-se uma coluna cromatográfica C18, 250 x 4,6 mm, 5µm, Shim-Pack® VP-ODS e fase móvel constituída por tampão fosfato de potássio 25 mM pH 5,7: acetonitrila: metanol (88:10:2 v/v/v). O método por EC foi validado utilizando-se como eletrólito, tampão de tetraborato de sódio 20 mM a pH 9,2 e capilar de sílica fundida de 40,2 cm, sendo 30 cm efetivos, com 75 µm de diâmetro interno. O método por CLAE apresentou um coeficiente de correlação (r) de 0,9996 para o citrato de colina e 0,9998 para a acetilmetionina. No método por EC, o coeficiente de correlação (r) encontrado foi de 0,9996 para a acetilmetionina. Os métodos podem ser considerados eficientes e confiáveis para serem empregados em análises de rotina de controle de qualidade de soluções injetáveis contendo a associação dos dois fármacos selecionados para o estudo. / The objective of this research was to develop, to validate and to compare two analytical methods for separation and quantification of choline citrate and acetylmethionine in injectable formulations by high performance liquid chromatography (HPLC) and capillary electrophoresis (CE). The HPLC method which enables the separation and simultaneous quantitative determination of choline citrate and acetylmethionine was performed using a C18, 250 x 4.6 mm, 5µm-Shim-Pack®VP-ODS column and a mobile phase constituted of buffer 25 mM potassium phosphate, pH 5.7: acetonitrile: methanol (88:10:2 v/v/v). The CE method was validated using a solution of 20 mM sodium tetraborate buffer pH 9.2 as the electrolyte and a fused silica capillary of 40.2 cm, with 30 cm effective, and 75 mm of diameter. The HPLC method showed a correlation coefficient (r) of 0.9996 for choline citrate and 0.9998 for acetylmethionine. For CE method the correlation coefficient (r) was found to be 0.9996 for acetylmethionine. The methods showed to be efficient and reliable methods, and can be used in routine analysis for quality control of injectable solutions containing the association of the two compounds selected to be studied in this research.
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Validação de métodos para análise de citrato de colina e acetilmetionina em soluções injetáveis por cromatografia líquida de alta eficiência e eletroforese capilar / Validation of methods for analysis of choline citrate and acetylmethionine in injectable solutions by high performance liquid chromatography and capillary electrophoresis.Grazielle Prado Alexandre 11 February 2011 (has links)
O objetivo desta pesquisa foi desenvolver, validar e comparar métodos analíticos para separação e quantificação de citrato de colina e acetilmetionina em formulações injetáveis por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e eletroforese capilar (EC). O método por CLAE, com o qual foi possível quantificar e separar simultaneamente, o citrato de colina e a acetilmetionina, foi realizado empregando-se uma coluna cromatográfica C18, 250 x 4,6 mm, 5µm, Shim-Pack® VP-ODS e fase móvel constituída por tampão fosfato de potássio 25 mM pH 5,7: acetonitrila: metanol (88:10:2 v/v/v). O método por EC foi validado utilizando-se como eletrólito, tampão de tetraborato de sódio 20 mM a pH 9,2 e capilar de sílica fundida de 40,2 cm, sendo 30 cm efetivos, com 75 µm de diâmetro interno. O método por CLAE apresentou um coeficiente de correlação (r) de 0,9996 para o citrato de colina e 0,9998 para a acetilmetionina. No método por EC, o coeficiente de correlação (r) encontrado foi de 0,9996 para a acetilmetionina. Os métodos podem ser considerados eficientes e confiáveis para serem empregados em análises de rotina de controle de qualidade de soluções injetáveis contendo a associação dos dois fármacos selecionados para o estudo. / The objective of this research was to develop, to validate and to compare two analytical methods for separation and quantification of choline citrate and acetylmethionine in injectable formulations by high performance liquid chromatography (HPLC) and capillary electrophoresis (CE). The HPLC method which enables the separation and simultaneous quantitative determination of choline citrate and acetylmethionine was performed using a C18, 250 x 4.6 mm, 5µm-Shim-Pack®VP-ODS column and a mobile phase constituted of buffer 25 mM potassium phosphate, pH 5.7: acetonitrile: methanol (88:10:2 v/v/v). The CE method was validated using a solution of 20 mM sodium tetraborate buffer pH 9.2 as the electrolyte and a fused silica capillary of 40.2 cm, with 30 cm effective, and 75 mm of diameter. The HPLC method showed a correlation coefficient (r) of 0.9996 for choline citrate and 0.9998 for acetylmethionine. For CE method the correlation coefficient (r) was found to be 0.9996 for acetylmethionine. The methods showed to be efficient and reliable methods, and can be used in routine analysis for quality control of injectable solutions containing the association of the two compounds selected to be studied in this research.
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Suplementação de diferentes níveis de colina e aminoácidos sulfurados digestíveis sobre o desempenho de frangos de corte / Supplementation of different levels of choline and digestible sulfur amino acid for broiler chickensSantiago, Gabriela de Oliveira January 2018 (has links)
O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito da suplementação de níveis crescentes de colina e de aminoácidos sulfurados totais (AST) digestíveis em uma dieta de milho e proteína isolada de soja, sobre o desempenho produtivo, bem como a ocorrência de deformidades e desvios nas patas e fígado gorduroso de frangos de corte. Foram alojados 525 frangos de corte, machos Cobb 500, de um dia de idade, em 75 gaiolas experimentais. As aves foram distribuídas em um delineamento inteiramente casualizado com 15 tratamentos, 5 repetições e 7 aves por unidade experimental. Foi utilizada uma dieta basal semipurificada com 74% de milho (736 ppm de colina) e esta foi suplementada utilizando um arranjo fatorial 3 x 5 com 3 níveis de AST digestíveis em relação à lisina digestível (70, 75 e 80%) e 5 níveis de suplementação de colina (0, 700, 1.400, 2.100 e 2.800 ppm). Foi utilizado um programa alimentar de 2 fases: pré-inicial (1 a 7 d) e inicial (8 a 21 d). Ganho de peso (GP), consumo de ração e conversão alimentar (CA) foram avaliados aos 7, 14 e 21 d. Aos 21 d, as aves foram avaliadas para perose, valgus, varus e tibia rotada na articulação tibio matatarsal, os fígados foram avaliados macroscopicamente (coloração, tamanho e consistência) e quanto ao seu teor de extrato etéreo. Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey. Regressões lineares e quadráticas foram estimadas para as variáveis de desempenho produtivo e a resposta máximada de suplementação de colina foi estimada. Não houve interação entre AST digestíveis e colina, também não houve diferença entre os níveis de AST digestíveis (P>0,05). O GP dos frangos alimentados com níveis crescentes de colina aumentou quadraticamente (P<0,05) de 1 a 7 d, 8 a 14 d, 1 a 14 d, 15 a 21 d e 1 a 21 d e a CA diminuiu quadraticamente (P<0,05) 1 a 14 d e 1 a 21 d. No período de 1 a 7 d, 8 a 14 d e 15 a 21d foram estimadas exigências de 2.700, 2.907 e 3.105 ppm para GP. De 1 a 14 d e 1 a 21 d, as exigências foram de 2.875 ppm e 2.925 ppm para GP, e 2.938 ppm e 2.849 ppm para CA. Os tratamentos que não receberam suplementação de colina apresentaram maior ocorrência de varus e tibia rotada (P<0,05), quando comparados aos outros níveis de colina, não houve diferença entre os níveis de colina para valgus. Os níveis de colina em que houve o melhor GP e CA para frangos foram determinados como 2.925 ppm e 2.849 ppm para as fases iniciais. Considerando-se uma ração de milho e farelo de soja (1.500 ppm de colina), 1.425 e 1.349 ppm de suplementação de colina são apropriados para melhorar a performance de frangos de corte de 1 a 21 d. Esses valores são superiores às recomendações prévias para as fases iniciais (500 ppm). / The objective of this study was to evaluate growth performance, the occurrence of leg deformity and deviations and fatty liver of broilers fed a corn and soy protein isolate diet supplemented with increasing levels of choline and digestible total sulfur amino acid (TSAA). A total of 525 one-day-old Cobb 500 chicks were distributed in a completely randomized design in 75 battery cages, 15 treatments, and 7 birds per cage. A 74% corn semi-purified basal diet (736 ppm of choline) was supplemented using a 3 x 5 factorial arrangement with 3 levels of digestible TSAA ratio to digestible lysine (70, 75 and 80%) and 5 levels of choline supplementation (0; 700; 1,400; 2,100, and 2,800 ppm). A 2-phases feeding program was used: pre-initial (1 to 7 d) and initial (8 to 21 d). Body weight gain (BWG), feed intake and feed conversion ratio (FCR) were evaluated at 7, 14 and 21 d. At 21 d all birds were evaluated for perosis, valgus, varus and rotated tibia in tibiometatarsal joint, livers were evaluated macroscopically (color, size, and consistency) and for fat content. Data were submitted to analysis of variance and means were compared by the Tukey test. Performance data were fitted to linear and quadratic polynomial regressions and the maximum response of choline supplementation was estimated. No interactions between digestible TSAA and choline were observed, also no differences among digestible TSAA levels (P>0.05). The BWG of broilers fed diets with increasing levels of choline increased quadratically (P<0.05) from 1 to 7 d, 8 to 14 d, 1 to 14 d, 15 to 21 d, and 1 to 21 d, also FCR decreased quadratically (P<0.05) from 1 to 14 d and 1 to 21 d. From 1 to 7 d, 8 to 14 d, and 15 to 21d quadratic regression estimated requirements as 2,700, 2,907, and 3,105 ppm for BWG. From 1 to 14 d and 1 to 21 d, quadratic regression estimates were 2,875 ppm and 2,925 ppm for BWG, and 2,938 ppm and 2,849 ppm for FCR. Treatments with no supplementation of choline had higher occurrence of varus and rotated tibia (P<0.05) compared to the other levels of choline. There was no difference for valgus deviation. Choline level that provided better BWG and FCR responses were determined as 2,925 and 2,849 ppm for starter phases, respectively. Considering a corn-soybean meal common diet (1,500 ppm of choline), 1,425 and 1,349 ppm of choline inclusions are appropriate to improve BWG and FCR response for broilers from 1 to 21 d, which are above previous recommendation for starter phases (500 ppm of choline).
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