Made available in DSpace on 2014-10-09T12:35:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:03:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Dissertação (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Orientador: Maria de Lourdes Pires Bianchi / Banca: Maria de Lourdes Pires Bianchi / Banca: Eliana Aparecida Varanda / Banca: Heloisa Della Coletta Francescato / Resumo: Os antioxidantes, principalmente os encontrados na dieta, são agentes responsáveis pela inibição e redução dos danos oxidativos causados pelas espécies reativas nas células. A cisplatina (cDDP), um potente agente antineoplásico utilizado com frequência no tratamento de tumores sólidos, tem seu uso clínico limitado devido aos efeitos adversos como nefrotoxicidade, genotoxicidade e supressão da medula óssea. Como a geração de espécies reativas pode resultar em danos ao DNA pela ação destas espécies ou indiretamente via produtos de degradação da peroxidação lipídica, nosso estudo avaliou o possível efeito protetor da adição da polpa de maracujá amarelo na dieta de ratos espontaneamente hipertensos (SHR) e Wistar normotensos, contra a nefrotoxicidade e genotoxicidade induzida pela cDDP. Os resultados obtidos nas condições experimentais estabelecidas neste trabalho mostraram que a cDDP promoveu um aumento dos níveis das substâncias reativas aos ácido tiobarbitúrico, bem como decréscimo nos níveis de glutationa nos rins dos animais SHR, reforçando a hipótese que a peroxidação lipídica está relacionada com o mecanismo de nefrotoxicidade. O tratamento com doses múltiplas da polpa de maracujá amarelo não alterou os outros parâmetros da função renal no período analisado. Embora o efeito protetor da polpa de maracujá contra os danos induzidos ao DNA em células renais e hepáticas não tenha sido evidente nos resultados obtidos pelo Ensaio do Cometa, a polpa foi eficaz na redução de micronúcleos induzidos pela cDDP. Assim, umas das hipóteses para a redução da pressão arterial sistólica observada neste trabalho, poder ser atribuída à presença de alguns compostos fenólicos e outros ainda não identificados na polpa. Visto que, a interação entre os fitoquímicos presentes na polpa de maracujá demonstraram eficácia na redução da mutagenicidade e efeitos protetores antioxidantes. / Abstract: The antioxidants, particularly those found in the diet, are responsible for inhibiting and reducing the damage caused by reactive species in the cells. Cisplatin (cDDP), a potent anticancer agent often used in the treatment of solid tumors, has limited clinical use due to adverse effects such as nephrotoxicity, genotoxicity and myelosuppression. As the generation of reactive species can result in DNA damage by direct action of this or indirectly by degradation products of the lipid peroxidation, our study evaluated the potential protector of adding yellow passion fruit pulp to the diet of spontaneously hypertensive rats (SHR) and normotensive wistar rats, against the nephrotoxicity and genotoxicity induced by cDDP. The results showed that the cDDP promoted an increase in the levels of thiobarbituric acid reactive substances and a decrease in the levels of glutathione in the kidneys of the animals, reinforcing the hypothesis that lipid peroxidation be related to the mechanism of nephrotoxicity. The treatment with multiple doses of passion fruit pulp did not change the others parameters of renal function in the schedule. Although the protective effect of passion fruit pulp against the damage caused to the DNA of kidney and hepatic cells has not been evident in the results obtained by Comet assay, the pulp was effective in the reduction of micronuclei induced by cDDP. One of the hypotheses for the reduction in systolic blood pressure observed in the present study attributed this effect to the presence of some phenolic compounds and others not yet identified in the passion fruit pulp. Furthermore, the interaction between the phytochemicals of the pulp demonstrated effectiveness in reducing the mutagenic and antioxidant effects. / Mestre

Orientador: Maria Aparecida Marin-Morales / Banca: Silvia Tamie Matsumoto / Banca: Edson Guilherme Vieira / Resumo: A mutagenicidade é um efeito tóxico que danifica o material genético da célula, causando alterações no DNA ou no cromossomo. Existem inúmeras substâncias presentes em complexos de efluentes domésticos e industriais que podem causar sérios prejuízos no material genético. Testes biológicos de toxicidade e genotoxicidade são indispensáveis para estudos de monitoramento, que tem por finalidade avaliar a extensão da poluição ambiental e as reações dos organismos vivos frente a esta poluição. Águas que recebem descargas de diferentes fontes poluidoras, como efluentes industriais e urbanos, na sua maioria, são impactadas por misturas complexas compostas de químicos diversos. O córrego Santa Gertrudes e rios associados recebem efluentes industriais, de uma série de indústrias cerâmicas, e domésticos do município de Santa Gertrudes, SP. Os efluentes cerâmicos possuem efeito tóxico, sobretudo devido à presença de metais resultantes do processo de esmaltação dos revestimentos cerâmicos. As espécies Allium cepa e Oreochromis niloticus têm se mostrado bastante eficiente na avaliação da genotoxicidade ambiental. Neste trabalho foi avaliada a qualidade da água dos córregos Santa Gertrudes, Caju, Itaqui e do ribeirão Claro, por meio de testes desenvolvidos com estes bioindicadores. Pelos resultados obtidos, pudemos observar que os compostos presentes nas águas destes rios apresentam potencial tóxico, citotóxico, genotóxico e mutagênico para os dois organismos-teste. O teste com bulbos de A. cepa mostrou uma inibição no desenvolvimento das raízes, devido às substâncias tóxicas presente em águas coletadas após o despejo de efluentes. As amostras dos pontos correspondentes ao local de emissão de efluentes também induziram elevados índices de AC e MN em células meristemáticas de A. cepa, para todas as coletas realizadas. O ponto de coleta... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Mutagenicity is a toxic effect that damages the genetic material of the cell, causing alterations in either the DNA or the chromosome. There are several substances present in complexes of domestic and industrial effluents that may cause serious damage to the genetic material. Biological tests of toxicity and genotoxicity are essential for monitoring studies, which aims at assessing the extension of the environmental pollution and the reaction of the living organisms to this pollution. Waters that receive discharges from different sources of pollution, such as urban and industrial effluents, are mostly impacted by complex mixtures composed by several chemicals. Santa Gertrudes stream and associated rivers receive domestic effluents from the municipality of Santa Gertrudes (SP, Brazil) and industrial effluents from several ceramic industries. The ceramic effluents have toxic effects mainly due to the presence of metals resulting from the enameling process of ceramic coating. Allium cepa and Oreochromis niloticus species are very efficient in evaluating environmental genotoxicity resulting from pollution. In this study, the quality of the water of the Santa Gertrudes, Caju, Itaqui and Claro streams was assessed by tests developed with these bioindicators. Based on the results, we could observe that the compounds present in the waters are potencialy toxic, cytotoxic, genotoxic and mutagenic to both test organisms. The tests with bulbs of A. cepa showed an inhibition in root development due to the toxic substances present in the waters collected after the discharge of the effluents. Likewise, the samples from the effluent emission sites induced high indices of CA and MN in meristematic cells of A. cepa for all the collections made. The collection site located after the confluence of the Santa Gertrudes and Claro streams presented an increase in the alteration indices, especially for the August... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

O crack é um subproduto da cocaína obtido a partir da pasta de coca acrescida do bicarbonato de sódio, sendo comercializado na forma de pequenas pedras porosas. No Brasil, o consumo de crack tem sido alvo de grande preocupação devido sua expressiva expansão em várias regiões, sendo que o aumento da prevalência do seu consumo vem sendo amplamente documentado nos últimos anos. A dependência de crack é a causa mais prevalente de internação por uso de cocaína. Há uma necessidade imediata de estudos que se direcionem para esta população. A presente pesquisa pretende demonstrar evidências capazes de contribuir para o entendimento dos mecanismos envolvidos na ação do psicotrópico crack sobre o DNA, bem como oferecer dados que auxiliem no desenvolvimento de tratamentos para pacientes usuários abusivos desta droga. Este estudo teve como objetivo avaliar o dano ao DNA e a capacidade de reparo, em 31 indivíduos usuários ativos de crack, relacionando-os com um grupo controle com 40 participantes. O trabalho foi desenvolvido através de voluntários recém internados na Clínica Marcelo Campos em São Leopoldo. Foram coletadas amostras em três momentos (internação, 48h após e ao término do tratamento) e submetidas às técnicas de micronúcleo e cometa. Dentre os resultados desta avaliação, foram evidenciados índices de dano significativamente diferentes entre os grupos nas técnicas de micronúcleos e cometa, e entre os períodos de coleta na técnica de cometa. Os valores obtidos para o índice de dano de DNA da técnica do cometa nos três momentos de avaliação revelaram uma diminuição estatisticamente significativa apenas após o término do tratamento. Em relação à utilização concomitante de outras substâncias, o consumo de tabaco ocorreu em 68% dos indivíduos, maconha em 71% e cocaína em 32%, sendo que 19% faziam uso concomitante de todas as drogas mencionadas. Houve correlação com o tempo de uso do tabaco e o índice de dano (P=0,043), MN (P=0,017) e NBP (P=0,023) em determinados momentos. O consumo de álcool ocorreu em 61,29% dos participantes, não havendo correlação estatisticamente significativa com os marcadores de dano. A idade e o tempo de utilização do crack não apresentaram associação ao índice de dano. Houve associação significativa entre o consumo de chimarrão (Ilex paraguaiensis) e MN (P= 0,045). Estudos associando o crack com dano ao DNA são, ainda, escassos. Este trabalho buscou acrescentar informações quanto ao potencial danoso desta substância. / Crack is a by-product of cocaine resulting from the addition of sodium bicarbonate to cocaine base paste, being sold in the form of small, porous rocks. In Brazil, the consumption of crack has been the subject of great concern due to its significant expansion in various regions, thus the increasing prevalence of drug use has been documented in recent years. The dependence of crack is the most prevalent cause of hospitalization due to cocaine use, supporting an immediate need for studies to target this population. This research aims to demonstrate evidence that can contribute to the understanding of the mechanisms involved in the action of psychotropic Crack on DNA, as well as provide data to assist in development of treatments for patients who are drug abusers. This study aimed to assess the damage and DNA repair capacity in 31 individuals who are active users of crack, comparing them to a control group of 40 participants. The study was conducted by volunteers newly admitted to the Clinic Marcelo Campos in São Leopoldo. Samples were collected at three time points (at admission, 48 hours latter and at the end of treatment) and subjected to the comet and micronucleus techniques. Among the results of this assessment damage indices were evident and significantly different between groups in the comet and micronucleus techniques, and between sampling periods for the comet technique. The values obtained for the rate of DNA damage in the comet technique in all three time points revealed a statistically significant decrease only after the end of treatment. Regarding the concomitant use of other substances, no significant association was found with the results. Tobacco consumption occurred in 68% of subjects, marijuana in 71% and cocaine in 32%, being 19% users of all drugs mentioned. There was a correlation over time of tobacco use and the damage index (P = 0.043), MN (P = 0.017) and NBP (P = 0.023) at certain time points.. Alcohol consumption occurred in 61.29% of the participants, there was no statistically significant correlation with markers of damage.The age and duration of use were not associated to the crack damage index. There was a significant association between the consumption of yerba mate (Ilex paraguaiensis) and MN. (P = 0.045). Studies associating the crack with DNA damage are still scarce. This study brings additional information about the potential harmful of substance.

Existem evidências crescentes indicando a associação entre dietas ricas em frutas e vegetais e a diminuição da incidência de câncer. O suco de laranja (OJ) pode ser incluído entre os alimentos com potencial quimioprotetor e seu estudo é muito relevante pelo amplo consumo desta bebida. O OJ possui vários nutrientes e compostos bioativos com atividades antioxidante, antimutagênica, anticarcinogênica e antiaterogênica, entre outras. A vitamina C (Vit C) é um dos nutrientes mais abundantes no OJ, e o único nutriente que pode ser provido em quantidade superior à recomendação diária por uma única porção de 200 mL de OJ. A Vit C, a exemplo de outros componentes do OJ, pode ser tanto benéfica quanto maléfica para os sistemas biológicos, dependendo do contexto metabólico. Neste sentido, vários nutrientes presentes no OJ têm sido identificados como mutagênicos ou carcinogênicos, especialmente quando administrados de forma isolada. Este estudo utilizou o ensaio Cometa alcalino em sangue de camundongos (in vivo) para avaliar: 1) a genotoxicidade do OJ e da Vit C; 2) a genotoxicidade do FeSO4 e do CuSO4: 3) o efeito modulador do OJ e da Vit C sobre a genotoxicidade do FeSO4 e CuSO4, bem como do metilmetanosulfonato (MMS) e da ciclofosfamida (CP). A versão alcalina do ensaio Cometa foi utilizada para avaliar o dano no DNA em células brancas do sangue periférico de camundongos. Adicionalmente, os níveis de cobre e ferro no sangue e no fígado dos camundongos tratados com metais e OJ foram avaliados pela metodologia de PIXE (Particle-Induced X-ray Emission). Grupos com pelo menos 6 camundongos (metade de cada sexo) foram tratados por gavage com uma ou duas doses de água (controle), CP, MMS, FeSO4 ou CuSO4. OJ (0.1 mL/Kg) foi administrado tanto antes (pré-tratamento) quanto após a administração das substâncias-teste (pós-tratamento). A Vit C (1 e 30 mg/Kg) foi administrada apenas no pós-tratamento. O dano no DNA foi avaliado 24 e 48 h após o início do tratamento. Após 24 h, o OJ induziu um suave aumento no dano no DNA, enquanto a Vit C foi genotóxica (30 mg/Kg > 1 mg/Kg). O tratamento duplo com Vit C (a 0 e a 24 h) induziu uma resposta genotóxica cumulativa a 48 h, que foi mais intensa para a dose maior. O FeSO4 e o CuSO4 foram genotóxicos após 24 h, mas tiveram seu dano efetivamente reparado após 48 h do tratamento. O pré-tratamento com OJ reduziu a genotoxicidade do FeSO4 e do CuSO4 (efeito preventivo). O pós-tratamento com OJ também reduziu a genotoxicidade do CuSO4 (efeito reparador). O OJ mostrou tanto efeito preventivo quanto reparador sobre a genotoxicidade do MMS. O OJ teve apenas efeito reparador sobre a CP. Ambas doses de Vit C aumentaram os danos no DNA causados pelo FeSO4 e pelo CuSO4. Adicionalmente, os níveis de cobre e ferro no sangue e no fígado dos camundongos tratados com metais e OJ foram avaliados pela metodologia de PIXE (Particle-Induced X-ray Emission). Grupos com pelo menos 6 camundongos (metade de cada sexo) foram tratados por gavage com uma ou duas doses de água (controle), CP, MMS, FeSO4 ou CuSO4. OJ (0.1 mL/Kg) foi administrado tanto antes (pré-tratamento) quanto após a administração das substâncias-teste (pós-tratamento). A Vit C (1 e 30 mg/Kg) foi administrada apenas no pós-tratamento. O dano no DNA foi avaliado 24 e 48 h após o início do tratamento. Após 24 h, o OJ induziu um suave aumento no dano no DNA, enquanto a Vit C foi genotóxica (30 mg/Kg > 1 mg/Kg). O tratamento duplo com Vit C (a 0 e a 24 h) induziu uma resposta genotóxica cumulativa a 48 h, que foi mais intensa para a dose maior. O FeSO4 e o CuSO4 foram genotóxicos após 24 h, mas tiveram seu dano efetivamente reparado após 48 h do tratamento. O pré-tratamento com OJ reduziu a genotoxicidade do FeSO4 e do CuSO4 (efeito preventivo). O pós-tratamento com OJ também reduziu a genotoxicidade do CuSO4 (efeito reparador). O OJ mostrou tanto efeito preventivo quanto reparador sobre a genotoxicidade do MMS. O OJ teve apenas efeito reparador sobre a CP. Ambas doses de Vit C aumentaram os danos no DNA causados pelo FeSO4 e pelo CuSO4. processado e armazenado de forma a preservar o seu potencial biológico é um alimento sugerido como uma das porções de uma dieta equilibrada (contendo pelo menos 5 porções de frutas e vegetais), recomendada para uma vida saudável e longeva. / Evidence indicates an association between diets rich in fresh fruit and vegetables and a decreased incidence of cancers. Orange juice (OJ) is a food with chemoprotective potential highly relevant for study due to its widespread consumption. OJ is composed of several nutrients and bioactive compounds with antioxidant, antimutagenic, anticarcinogenic and antiathrerogenic activities. Vitamina C (Vit C) is the most abundant nutrient in OJ, and the only one that can be provided in amounts higher that the daily recommended intake by a single portion of OJ (200 mL). Vit C, like other components of OJ, can be either benefical or noxious for biological system, depending of their metabolic context. Indeed, some components of juices have been identified as mutagenic or carcinogenic when isolated. In this study we tested by comet assay in mice in vivo: 1) the genotoxicity of orange juice (OJ) and vitamin C (Vit C); 2) the genotoxicity of FeSO4 and CuSO4: 3) the modulator effect of orange juice and Vit C over genotoxicity of FeSO4 and CuSO4, as well as over methyl methanesulfonate (MMS) and cyclophosphamide (CP). We used the alkaline version of the comet assay to assess DNA damage in peripheral white blood cells of mice. Moreover, the levels of iron and copper in the whole blood and liver of the mice treated with this metals were evaluated by PIXE (Particle-Induced X-ray Emission). Groups of at least 6 mice (half of each gender) were orally given a single dose of either water (control), CP, MMS, FeSO4 or CuSO4. OJ (0.1 mL/Kg) was given either before (pre-treatment) or after (post-treatment) administration of the test substances. Vit C (1 and 30 mg/Kg) was only administered after treatment (post-treatment). DNA damage was evaluated 24 and 48 h after the beginning of the treatment. After 24 h, OJ induced a slight increase in DNA damage and Vit C was genotoxic (30 mg/Kg > 1 mg/Kg). Double treatment with Vit C (at 0 and 24 h) induced a cumulative genotoxic response at 48 h, more intense for the higher dose. FeSO4 and CuSO4 were genotoxic after 24 h and significant DNA damage repair was observed after 48 h of treatment. OJ pre-treatment reduced the genotoxicity of FeSO4 (preventive effect). OJ had a preventive effect over the genotoxicity of CuSO4. OJ post-treatment also reduced the genotoxicity of CuSO4 (restorative effect). OJ had both protective and reparative effects over MMS. OJ had only a reparative effect over CP. Both doses of Vit C enhanced DNA damage caused by FeSO4 and CuSO4. DNA damage caused by MMS was significantly reduced by the lower dose, but not by the higher dose of Vit C. For CP, the DNA damage was not affected by the post-treatment with any of the doses of Vit C. PIXE analysis indicated a positive correlation between DNA damage and the hepatic levels of iron and a negative correlation between whole blood copper and DNA damage. A negative correlation between hepatic iron and whole blood copper content was also seen in the treatment with both ferrous and cupric sulfates. These results point a dynamic interaction between the genotoxicity and the tecidual fate of iron and copper. Vit C and the other components of OJ have several biological effects, including: 1) action as targets for toxicants; 2) influence in drug metabolization/detoxification; and 3) effect in DNA repair and homeostasis. Moreover, Vit C and transition metals, particularly copper and iron, can induce oxidative stress; however, they can also play roles in antioxidant defense system, being a DNA repair modulators. Further data from other treatment schedules are needed to shed light upon the beneficial/noxious effects of OJ as a complex mixture, as well as of its compounds in genomic stability. Indeed, one glass of fresh or adequate processed and stored OJ can be among the options for the daily 5 portions (or even more) of fruits and vegetables recommended for a health and longevity.

O crack é um subproduto da cocaína obtido a partir da pasta de coca acrescida do bicarbonato de sódio, sendo comercializado na forma de pequenas pedras porosas. No Brasil, o consumo de crack tem sido alvo de grande preocupação devido sua expressiva expansão em várias regiões, sendo que o aumento da prevalência do seu consumo vem sendo amplamente documentado nos últimos anos. A dependência de crack é a causa mais prevalente de internação por uso de cocaína. Há uma necessidade imediata de estudos que se direcionem para esta população. A presente pesquisa pretende demonstrar evidências capazes de contribuir para o entendimento dos mecanismos envolvidos na ação do psicotrópico crack sobre o DNA, bem como oferecer dados que auxiliem no desenvolvimento de tratamentos para pacientes usuários abusivos desta droga. Este estudo teve como objetivo avaliar o dano ao DNA e a capacidade de reparo, em 31 indivíduos usuários ativos de crack, relacionando-os com um grupo controle com 40 participantes. O trabalho foi desenvolvido através de voluntários recém internados na Clínica Marcelo Campos em São Leopoldo. Foram coletadas amostras em três momentos (internação, 48h após e ao término do tratamento) e submetidas às técnicas de micronúcleo e cometa. Dentre os resultados desta avaliação, foram evidenciados índices de dano significativamente diferentes entre os grupos nas técnicas de micronúcleos e cometa, e entre os períodos de coleta na técnica de cometa. Os valores obtidos para o índice de dano de DNA da técnica do cometa nos três momentos de avaliação revelaram uma diminuição estatisticamente significativa apenas após o término do tratamento. Em relação à utilização concomitante de outras substâncias, o consumo de tabaco ocorreu em 68% dos indivíduos, maconha em 71% e cocaína em 32%, sendo que 19% faziam uso concomitante de todas as drogas mencionadas. Houve correlação com o tempo de uso do tabaco e o índice de dano (P=0,043), MN (P=0,017) e NBP (P=0,023) em determinados momentos. O consumo de álcool ocorreu em 61,29% dos participantes, não havendo correlação estatisticamente significativa com os marcadores de dano. A idade e o tempo de utilização do crack não apresentaram associação ao índice de dano. Houve associação significativa entre o consumo de chimarrão (Ilex paraguaiensis) e MN (P= 0,045). Estudos associando o crack com dano ao DNA são, ainda, escassos. Este trabalho buscou acrescentar informações quanto ao potencial danoso desta substância. / Crack is a by-product of cocaine resulting from the addition of sodium bicarbonate to cocaine base paste, being sold in the form of small, porous rocks. In Brazil, the consumption of crack has been the subject of great concern due to its significant expansion in various regions, thus the increasing prevalence of drug use has been documented in recent years. The dependence of crack is the most prevalent cause of hospitalization due to cocaine use, supporting an immediate need for studies to target this population. This research aims to demonstrate evidence that can contribute to the understanding of the mechanisms involved in the action of psychotropic Crack on DNA, as well as provide data to assist in development of treatments for patients who are drug abusers. This study aimed to assess the damage and DNA repair capacity in 31 individuals who are active users of crack, comparing them to a control group of 40 participants. The study was conducted by volunteers newly admitted to the Clinic Marcelo Campos in São Leopoldo. Samples were collected at three time points (at admission, 48 hours latter and at the end of treatment) and subjected to the comet and micronucleus techniques. Among the results of this assessment damage indices were evident and significantly different between groups in the comet and micronucleus techniques, and between sampling periods for the comet technique. The values obtained for the rate of DNA damage in the comet technique in all three time points revealed a statistically significant decrease only after the end of treatment. Regarding the concomitant use of other substances, no significant association was found with the results. Tobacco consumption occurred in 68% of subjects, marijuana in 71% and cocaine in 32%, being 19% users of all drugs mentioned. There was a correlation over time of tobacco use and the damage index (P = 0.043), MN (P = 0.017) and NBP (P = 0.023) at certain time points.. Alcohol consumption occurred in 61.29% of the participants, there was no statistically significant correlation with markers of damage.The age and duration of use were not associated to the crack damage index. There was a significant association between the consumption of yerba mate (Ilex paraguaiensis) and MN. (P = 0.045). Studies associating the crack with DNA damage are still scarce. This study brings additional information about the potential harmful of substance.

Submitted by Haroudo Xavier Filho (haroudo.xavierfo@ufpe.br) on 2016-08-30T18:08:06Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação (Anderson Rodrigues).pdf: 1100092 bytes, checksum: 006b7ba8f56e81d9066bc271f99edcbe (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-30T18:08:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação (Anderson Rodrigues).pdf: 1100092 bytes, checksum: 006b7ba8f56e81d9066bc271f99edcbe (MD5) Previous issue date: 2016-02-17 / FACEPE / A perda da diversidade biológica pode ser um reflexo da degradação ambiental, principalmente em locais com grandes contingentes demográficos. No Nordeste do Brasil, a maioria das regiões metropolitanas estão concentradas em zonas costeiras, ocasionando a liberação de uma grande quantidade de poluentes e ameaçando a sobrevivência de inúmeras espécies, como os peixes. Neste estudo, tentamos avaliar possíveis danos no DNA em um dos recursos pesqueiros mais consumidos pelas comunidades ribeirinhas nesta região, a tainha (Mugil curema). Metodologias de Ensaio Cometa (EC) e Teste do Micronúcleo (MN) foram utilizadas em populações desta espécie, provenientes de cinco estuários Pernambucanos (rios Goiana e Jaguaribe no litoral Norte), (rios Sirinhaém e Formoso no litoral Sul) e (rio Capibaribe na região metropolitana). Para fins de comparação, uma amostra controle foi coletada no estuário do Rio Una (local de preservação ambiental), litoral sul do estado de São Paulo. Nossos resultados mostram que o estuário mais afastado da região metropolitana, o Rio Formoso, quando comparado ao grupo controle, foi quem apresentou os menores níveis de danificação genômica (P >0,05). Já os demais estuários apresentaram níveis elevados de danificação quando comparados ao controle (P < 0,05). Em especial, o estuário do rio Capibaribe, localizado na capital Pernambucana, foi aquele que apresentou um dos maiores níveis de dano genômico (P = 0,0001). Tais dados caracterizam-no como o mais impactado entre os cinco avaliados. Estes dados também apontam para uma forte associação entre níveis elevados de danificação genômica (macro e microlesões no DNA) em locais próximos a grandes contingentes demográficos e industriais. Consequentemente, este cenário de impactação pode também estar afetando a comunidade biótica como um todo, incluindo as comunidades humanas ribeirinhas que tem este recurso como forma de subsistência. Estes resultados demonstram a efetividade do uso de metodologias de EC e MN como protocolos rápidos e precisos na avaliação de ecossistemas marinhos, principalmente em regiões fortemente impactadas pelas atividades antrópicas. / The loss of biological diversity may be a reflection of environmental degradation, especially in places with large demographic contingents. In northeastern Brazil, most metropolitan regions are concentrated in coastal areas, causing the release of large amounts of pollutants and threatening the survival of many species, such as fish. In this study, we attempt to assess possible damage to the DNA in one of the most consumed fish resources by coastal communities in this region, mullet (Mugil curema). Methodologies comet assay (EC) and micronucleus test (MN) were used in populations of this species, from five Pernambucanos estuaries (Goiana and Jaguaribe rivers in the northern coast), (Sirinhaém and Formoso rivers in the south coast) and (Capibariberiver in Metropolitan region). For comparison purposes, a control sample was collected in the estuary of the Una River (local environmental preservation), southern coast of São Paulo. Our results show that the far estuary in the metropolitan area, the Formoso River, when compared to the control group, was the one who had the lowest levels of genomic damage (P> 0.05). None of the other estuaries showed elevated levels of damage compared to the control (P <0.05). In particular, the estuary of the river Capibaribe, located in Pernambuco capital, was the one who presented one of the highest levels of genomic damage (P = 0.0001). These data characterize it as the most affected among the five evaluated. These data also point to a strong association between high levels of genomic damage (macro and micro-lesions in DNA) in locations near major demographic and industrial contingent. Consequently, this scenario impaction may also be affecting the biotic community as a whole, including the riparian human communities that have this feature as a means of subsistence. These results demonstrate the effectiveness of using EC and MN methodologies as fast and accurate protocols in evaluating marine ecosystems, particularly in regions heavily impacted by human activities.

Submitted by Natalia de Souza Gonçalves (natalia.goncalves@ufpe.br) on 2016-09-23T12:01:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Caio Bruno Ribeiro Falcão_Programa de Pós-Graduação em Genética_CB_2016.pdf: 1323776 bytes, checksum: 25bf87d5c7e7ecd8429e2f3db35e5bbc (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-23T12:01:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Caio Bruno Ribeiro Falcão_Programa de Pós-Graduação em Genética_CB_2016.pdf: 1323776 bytes, checksum: 25bf87d5c7e7ecd8429e2f3db35e5bbc (MD5) Previous issue date: 2016-02-23 / FACEPE / CNPQ / Os sistemas estuarinos da costa brasileira e sua fauna têm sido severamente impactados ao longo das últimas décadas. O Cardisoma guanhumi é um crustáceo difundido na culinária local do Nordeste do Brasil apresentando um grande valor de mercado, mas tem mostrado significativa diminuição nos seus estoques populacionais. A intensa captura de espécimes e a destruição de seus habitats incluiu C. guanhumi na Lista de Espécies da Fauna Ameaçadas de Extinção publicada em dezembro de 2014. Objetivando aferir a impactação sobre as populações de guaiamuns e sobre seus habitats ao longo de cinco estuários da costa pernambucana duas metodologias foram utilizadas: (i) análise de danificação genômica ao longo dos períodos de inverno e verão dos anos de 2012 e 2013, e (ii) avaliação de possíveis alterações da estrutura genética de C. guanhumi em um contexto espaço-temporal nos anos de 2012 e 2014. Os resultados das análises genotóxicas evidenciaram dano genômico no inverno do ano de 2012 que coincidiu com um rigoroso inverno e intensas chuvas atípicas para região. A avaliação da estruturação genética das populações nos dois anos não mostrou alterações significativas da diversidade genética nem mudança na estrutura da espécie. Os resultados obtidos sugerem que os manguezais/estuários pernambucanos têm recebido o aporte de componentes tóxicos, tendo em vista os danos genômicos detectados. Tais resultados alertam para a necessidade de uma maior atenção acerca da conservação dos manguezais/estuários pernambucanos. / Estuarine systems along the Brazilian coast and its wildlife have been severely impacted over the past decades. Cardisoma guanhumi is a crustacean widespread in local gastronomy of northeastern Brazil presenting a great market value, but has shown significant decrease in their population stocks. Intense capture of specimens and the destruction of their habitats included C. guanhumi in the Endangered Fauna Species List published in December 2014. In order to assess the impaction on the populations of blue crabs and about their habitats over five estuaries of the coast Pernambuco two methodologies were used: a genomic damage analysis over the winter and summer periods of the years 2012 and 2013 and an assessment of possible changes in the genetic structure of C. guanhumi in a space-time context in the years 2012 and 2014. The results of the analysis showed genomic genotoxic damage in the winter of 2012 year coincided with a harsh winter and heavy rains atypical for the region. The genetic structure of populations in both years showed no significant changes in the genetic diversity of the species or change in structure. The results suggest that mangroves / estuaries have received the injection of toxic components, considering the identified genomic damage. These results emphasize the need for greater attention on the conservation of Pernambuco estuaries.

Amazonian Tambaqui (Colossoma macropomum) is a commercial important fish species that is intensively cultivated in rice fish-cultures in a variety of water paddies in the area of the São Francisco river in the northeast of Brazil. Commercial formulations of herbicides containing Trifluralin (α,α,α-trifluoro-2,6-dinitro-N,N-dipropyl-p-toluidine) are commonly used to control weed on the rice fields of the area. The present study aimed to investigate the sensitivity of Colossoma macropomum to trifluralin using biomarkers to understand the effects of an acute exposure to this substance. On the in vivo toxicity tests, C. macropomum juvenile were exposed to four concentrations of trifluralin: 0.74, 1.5, 2.23 and 3.0 μmols / L for 96 hours, and compared with negative, positive controls and solvent, respectively. The herbicide trifluralin shows a dose-dependent inhibition profile on the brain C. macropomum cholinesterase activity. On the highest trifluralin concentration was observed a drop in the cholinesterase activity around 62 % and the inhibition of the muscle was 80 % at the highest concentration tested. The estimated value of 96 h LC50 for trifluralin was 1.25 μmols / L. In vitro assays had shown that brain cholinesterase-ChE C.macropomum has a moderate sensitivity toward trifluralin (2.34 μmols / L) whereas the sensitivity to the carbamate eserine is much higher (0.158 μmols / L). In order to get the apparent kinetic constants for C.macropomum brain cholinesterase, kinetic assays were performed on brain homogenate in the presence of acetylthiocholine as substrate. The kinetic results in the presence of acetylthiocholine as substrate, the brain homogenate containing activity were 0.043 ± 0.015 mmol / L and 0.301 ± 0.014 for mmol.min-1.mg-1 protein Kapp m and Vapp max apparent kinetic constants, respectively. We also evaluated the mutagenic, genotoxic and apoptotic exposure of C. macropomum juvenile trifluralin. In the Comet assay, erythrocytes analyzed, compared to the negative control showed induction of DNA damage at all concentrations tested. The higher frequency of micronuclei and high numbers of apoptotic cells were observed in fish treated with concentrations of 1.5 μmols / L with a significant effect (p < 0.01). The results of this study indicate that brain ChE C. macropomum is a reliable biomarker for use in environmental monitoring of pesticides in the delta of the São Francisco river. It was also confirmed the genotoxic and apoptotic trifluralin at concentrations from 1.5 μmols / L for juvenile C. macropomum. (Note: check some nomeclaturas in the original summary because lost formatting in this field) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O Colossoma macropomum (Tambaqui Amazônico) é uma espécie de peixe comercial importante e intensamente cultivado em consórcio com as culturas de Oryza sativa (arroz) em uma variedade de corpos de água na área do rio São Francisco, no Nordeste do Brasil. Formulações comerciais de herbicida contendo Trifluralina (α, α, α-trifluoro-2,6-dinitro-N, N-dipropil-p-toluidina) são comumente utilizadas para controlar ervas daninha em campos de produção de arroz. O presente estudo teve como objetivo avaliar a sensibilidade de C. macropomum à trifluralina utilizando biomarcadores para analisar os efeitos de uma exposição aguda a esta substância. Nos testes de toxicidade in vivo, juvenis de C. macropomum foram expostos a quatro concentrações de trifluralina: 0,74; 1,5; 2,23 e 3,0 μmols / L durante 96 horas com os controles negativos, positivos e solvente, respectivamente. O herbicida trifluralina apresentou um perfil de inibição dose-dependente na atividade da colinesterase-ChE do cérebro de C. macropomum. Na maior concentração de trifluralina foi observada uma diminuição na atividade da ChE em torno de 62%, enquanto que no músculo a inibição foi de 80% na maior concentração testada. O valor estimado da CL50 em 96 h para trifluralina foi de 1,25 μmols / L. Os ensaios in vitro mostraram que a ChE cerebral de C. macropomum tem uma moderada sensibilidade à trifluralina (2,34 μmols / L), porém, com alta sensibilidade ao controle positivo - carbamato de eserina (0,158 μmols / L). Os resultados cinéticos, em presença de acetiltiocolina como substrato, com o homogenato de cérebro contendo atividade foram de 0,043 ± 0,015 mmol / L e 0,301 ± 0,014 mmol / min-1.mg proteína para as constantes cinéticas aparentes Kapp m e Vapp max, respectivamente. Também foram avaliados os efeitos mutagênico, genotóxico e apoptótico da exposição de C. macropomum juvenil à trifluralina. No ensaio do cometa, os eritrócitos analisados, quando comparados ao controle negativo, apresentaram indução de danos ao DNA em todas as concentrações testadas. A maior frequência de micronúcleos e o elevado número de células em apoptose foram observados nos peixes tratados com concentrações de 1,5 μmols / L com efeito significativo (p<0,01). Os resultados desse estudo indicam que a ChE do cérebro C. macropomum é um biomarcador confiável para ser utilizado no monitoramento ambiental de agrotóxicos no delta do rio São Francisco e outros rios do Brasil. Também ficou confirmado o potencial genotóxico e apoptótico da trifluralina em concentrações a partir de 1,5 μmols/L para juvenis de C. macropomum. (OBS.: verificar algumas nomeclaturas no resumo original pois perderam a formatação neste campo)

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:35:46Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:03:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / O câncer é uma doença de alta incidência e é considerado um problema de saúde pública no mundo todo. O resveratrol é um polifenol de defesa que tem a habilidade de inibir a carcinogênese em múltiplos estágios. Este polifenol é sintetizado por uma grande variedade de plantas em resposta a exposição à radiação ultravioleta (UV) ou também, pelo estresse mecânico produzido pela ação de patógenos, agentes químicos e físicos. As videiras são consideradas as plantas que têm uma capacidade elevada de produzir o resveratrol, portanto suco de uva e vinho, principalmente o vinho tinto são considerados uma boa fonte de resveratrol. Os efeitos protetores exercidos pelo resveratrol promovem efeitos como indução da resposta antiinflamatória, atividade antitumoral, prevenção ou inibição de doenças degenerativas, diminuição da incidência de doenças cardiovasculares, inibição da agregação plaquetária, entre outros. Assim, o resveratrol é considerado um protetor celular. Porém, em concentrações mais elevadas, o resveratrol promove o efeito contrário, sensibilizando as células a algum tipo de efeito, como por exemplo, o efeito da radiação ionizante. O objetivo desse trabalho foi estudar o efeito radiomodificador do resveratrol em cultura de células RD (rabdomiossarcoma humano) aplicando o teste do cometa para avaliação do dano e capacidade de reparo celular. Foi obtida a DL50 das células RD em 403 Gy e o índice de citotoxicidade do resveratrol (IC50%) nas células RD foi de 150 &mu;M. A partir destes resultados foram definidas as doses de radiação gama (50 Gy e 100 Gy) e as concentrações de resveratrol (15 &mu;M 30 &mu;M 60 &mu;M) que foram analisadas no trabalho. Foram evidenciados os efeitos do resveratrol como protetor celular na concentração de 15 &mu;M e seu efeito citotóxico em 60 &mu;M. Com a interação da radiação gama, a concentração de 60 &mu;M não mostrou efeito radiossensibilizador estatisticamente significante. / Dissertação (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP