O uso de irrigação com solução de hipoclorito de sódio a 1% (NaOCl) seguida de irrigação final com solução de clorexidina a 2%(CHX) pode promover uma melhor antissepsia do sistema de canais radiculares do que as abordagens tradicionais. Já foi relatado que estas substâncias quando entram em contato dentro do sistema de canais radiculares produzem subprodutos a partir de sua mistura, que apresentam uma fase líquida e uma fase sólida precipitada que permanece nas paredes do canal radicular. Sua ação citotóxica em cultura de células ainda não foi estudada. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito desta mistura e seus subprodutos in vitro sobre a viabilidade celular. Para avaliar se o grau de diferenciação pode afetar a sobrevivência celular foram escolhidas para o experimento fibroblastos de gengiva humana (FMM1) que são células mais diferenciadas e células-tronco de polpa dentária humana (PDH3) menos diferenciadas. Métodos: partes iguais de soluções de hipoclorito 1% (NaOCl) e digluconato de clorexidina 2% (CHX) foram misturadas e os subprodutos obtidos. Os grupos experimentais testados foram: G1- CHX, G2- NaOCl + CHX(fase líquida), G3- NaOCl + CHX(fase sólida). Quatro(4) diferentes concentrações (100%, 1%, 0,5% e 0,25%) das substâncias de G1 e G2 e do meio de cultivo condicionado pelo G3, foram aplicadas às culturas de células. A viabilidade celular foi mensurada pelo teste de redução do MTT (n=24/concentração/substância/células) e a genotoxicidade através de contagem de micronúcleos apenas para as concentrações das substâncias de 0,5% e 0,25% (número de micronúcleos/1000 células em cada contagem, 2 contagens), ambos em 24 horas após o contato de 15 minutos com as substâncias testadas. Os dados foram analisados por ANOVA complementado por teste de Tukey(p<0,05) para o MTT e qui-quadrado para genotoxicidade. Como resultados da viabilidade celular a dose letal de 50%(DL50) ocorreu apenas nas concentrações menores que 5% no G1, e ao redor de 1% para G2 e G3. Como resultados do teste de genotoxicidade os mesmos números de micronúcleos foram encontrados para todos os grupos em duas contagens de 1000 células. As células PDH3 apresentaram maior viabilidade que a FMM1 com maior número de células em concentrações maiores das substâncias testadas, demonstrando maior resistência de células menos diferenciadas. Como não houve diferença estatística no número de micronúcleos entre os grupos do teste de genotoxicidade inferimos que não houve aumento do número de micronúcleos entre os grupos de teste e o controle. Portanto, a solução de CHX a 2% quando aplicada sobre as células em cultura in vitro não foi biocompatível em concentrações de diluição acima de 0,5%; não foi genotóxica, pois não houve aumento na formação de micronúcleos nem com o grupo da clorexidina nem com a fase líquida da mistura ou com o precipitado. / New antimicrobial therapies have been introduced in Endodontics for periapical lesions and treatment-resistant infections. Alternating irrigating solutions such as 1% sodium hypochlorite (NaOCl) solution and 2% chlorhexidine (CHX) solution has shown promising results. However, inside the root canal system the NaOCl and CHX interact producing byproducts (Bps) represented by a liquid (Liq) and a solid precipitated (Sol) that remain on the canal walls. Objectives: To study the cytotoxicity of such Bps and CHX using cultured fibroblasts (FMM1) and stem cells(PDH3). Two cell lines were chosen to test if different differentiated cell types would present different survival results. Methods: Equal parts of 1% NaOCL and 2% CHX solutions were mixed and the Bps were obtained. Three drug solutions were tested: cell culture medium dilution of CHX, cell culture medium dilution of Liq and cell culture medium conditioned by the Sol byproduct. They were prepared in fresh medium in 4 different concentrations (100%, 1%, 0,5%, 0,25%) and applied to the cells for 15 minutes. In the control wells the cells grew on fresh medium. Cytotoxicity was measured by using the MTT reduction assay in 24 replicates per concentration per solution. Twenty-four hours later cell viability was analyzed. Micronucleus counting was used to check genotoxicity (number of micronucleus/ 1000 cell, 2 counting). Data was evaluated through ANOVA test with post hoc Tukey(p<0,05) for MTT assay and qui-square for genotoxicity. Lethal dose concentration 50%(LD50) was obtained in concentrations less than 0,5% with CHX and around 1% for Liq and Sol. there were obtained same number of micronucleous for all the substances tested. PDH3 cells presented higher survival rate to higher concentrations, so they were more resistant than FMM1. There was no statistical difference between control and tested groups for genotoxicity. 2% CHX solution when applied to cell cultures was not biocompatible in concentrations above 0,5%; there is no increase in micronucleous number with tested substances.

No intuito de avaliar novas possibilidades de instrumentação radicular em dentes decíduos, o objetivo do presente estudo foi avaliar a performance de três diferentes métodos, manual e mecanizados, utilizando tomografia computadorizada por feixe cônico (TCFC). As técnicas utilizadas foram manual (MAN), rotatória com o sistema Protaper (ROT) e oscilatória com o sistema EndoEZE (OSC). Para o segundo objetivo, as técnicas foram testadas em dentes decíduos naturais e artificiais, para que também se pudesse avaliar a diferença entre a performance dos métodos nesses dois tipos de dentes. Após o acesso endodôntico inicial, imagens padronizadas foram realizadas em aparelho de TCFC (sistema iCat), com cortes sagital, coronal e axial. Após a instrumentação dos dentes pelos diferentes métodos, novas imagens foram realizadas. Avaliações quantitativas foram feitas medindo-se nas imagens axiais dos canais radiculares, a espessura das paredes e área do canal, em três diferentes regiões: terços cervical, médio e apical. Três desfechos foram considerados após instrumentação: desvio para a parede de risco, descentralização do canal e diferença na área do canal antes e após a instrumentação. Os valores foram comparados com análise de variância e teste de Tukey, ou com testes não paramétricos. Não houve diferença no desvio entre os métodos para os dentes anteriores artificiais e naturais. Nos posteriores naturais, entretanto, a técnica MAN apresentou maior desvio no terço cervical (p<0,05). Com relação as áreas do canal, para os dentes anteriores, o método ROT e OSC apresentaram maior desgaste que o MAN nos terços cervical e médio, mas no terço apical o OSC e o MAN foram semelhantes (p > 0,05). Para os posteriores, o método ROT apresentou um desgaste estatisticamente maior do que os demais apenas no terço apical (p<0,05). Análises qualitativas do padrão de desgaste de cada método de instrumentação radicular foram realizadas e representadas em gráficos e imagens obtidas pela TCFC. Avaliando as imagens, o padrão anatômico de todos os canais mostrou uma área maior da cervical e menor na apical. O método MAN apresentou uma tendência de preservar a anatomia inicial do canal em todos os terços. Já o ROT apresentou expressiva alteração no perfil anatômico em todos os terços e o método OSC atuou com maior expressão nas regiões cervical e média, comparado à região apical. Os dentes artificiais apresentaram similaridade de forma e radiopacidade com os dentes naturais, mas apresentaram resultados diferentes nos diversos desfechos, limitando seu uso como substitutos dos dentes naturais em pesquisas. Em conclusão, o método MAN apresenta boa performance na instrumentação radicular de dentes decíduos, mas o sistema oscilatório seria a melhor opção para obter as vantagens da instrumentação mecanizada. Em relação aos modelos de dentes artificiais utilizados, ainda necessitam ser aperfeiçoados para substituírem os dentes naturais nas pesquisas. / In order to appraise new options of root canal instrumentation in primary teeth, the aim of the present study was to evaluate the performance of three different methods, manual and mechanical, using cone beam computed tomography (CBCT). The techniques tested were manual (MAN), rotatory with Protaper system (ROT) and oscillatory with EndoEZE system (OSC). For the second objective, the techniques were assessed in natural and artificial primary teeth, in order to evaluate the difference in the performance of the methods in these types of teeth. After initial endodontic access, standardized scans were obtained by CBTC (iCat system), with sagittal, coronal and axial planes. After the root canal instrumentation of teeth with different methods, new images were achieved. Quantitative evaluations were performed measuring the thickness of root canal wall and canal area in the axial images of root canals, at three different places: coronal, middle and apical thirds. Three outcomes were considered after the instrumentation: canal transportation towards the side of root resorption, centering ability and difference in canal area before and after the instrumentation. The values were compared using ANOVA and Tukey test, or with non-parametric tests. There were no differences among the methods used in both natural and artificial anterior teeth concerning the canal transportation. In the natural posterior teeth, however, the MAN technique showed greater canal transportation towards the size of root resorption in the coronal third (p < 0.05). With regard to the canal area, for the anterior teeth, the ROT and OSC methods presented higher increase in canal area than the MAN in coronal and middle thirds, but in the apical third, OSC and MAN were similar (p > 0.05). In posterior teeth, the ROT method showed statistically higher increase in canal area than the other methods only in the apical third. Qualitative analysis of the shaping patterns of each root canal instrumentation method were carried out and presented in graphics and images obtained with CBCT. After evaluating the images, the shaping pattern of all root canals showed a larger area in the coronal and smaller in apical third. The MAN method tended to preserve the baseline anatomy of the root canal in all areas. The ROT method, on the other hand, presented more significant changes in the anatomical shaping in all thirds, and the OSC method showed higher increase in canal area in the coronal and middle thirds, compared to the apical third. The artificial teeth are very similar to natural teeth in their anatomical shape and radiopacity, but they yielded different results in several of the outcomes, which limits their use as substitute of natural teeth for research purpose. In conclusion, the MAN method presents good performance for root canal instrumentation in primary teeth, but the OSC system would be the best option to achieve the advantages of mechanical instrumentation. Concerning the artificial teeth used, some properties still need to be improved in order to substitute natural teeth for research purposes.

Avaliou-se, por meio do teste de microtração, a resistência adesiva da interface pino de fibras de vidro /cimento/ dentina radicular, variando-se cimentos, adesivos dentinários e tempo de armazenamento. Foram utilizados dentes caninos humanos permanentes, extraídos por razões periodontais, que tiveram suas coroas seccionadas e as raízes preparadas para receber pinos de fibras de vidro (Fibrekor). Os dentes foram aleatoriamente divididos em grupos de dez, variando a técnica de cimentação adesiva e o tempo de armazenamento. Os cimentos utilizados foram (1) Panavia F, (2) Variolink II, (3) Enforce, com seus respectivos adesivos. Avaliou-se também a influência da aplicação de uma camada do adesivo hidrofóbico Scotchbond Multi-Purpose Plus [SBMP] com o cimento Panavia F e Enforce. Espécimes cimentados com Variolink II, Panavia F com SBMP e Enforce com SBMP foram armazenados em água destilada por três meses. Após a cimentação, as raízes foram seccionadas (longitudinalmente e horizontalmente) com disco diamantado obtendo-se espécimes de 1mm de espessura, dois por terço da raiz. Os espécimes foram submetidos ao teste de microtração e o modo de fratura analisado em microscópio óptico. Os valores médios de resistência (MPa) foram submetidos aos testes ANOVA e Tukey (p < 0,05). A análise estatística mostrou (1) diferenças significativas na resistência adesiva entre cimentos e terços sendo que na média total dos terços, o cimento Variolink II foi superior aos outros cimentos; (2) na análise por terços, o cimento Variolink II mostrou valores estatisticamente superiores para o terço cervical. Os cimentos Panavia F e Enforce apresentaram valores significativamente menores no terço cervical; (3) diferenças significativas na resistência adesiva, com a aplicação do adesivo hidrofóbico, independente da região avaliada; (4) diminuição significativa na resistência adesiva para os cimentos Variolink II e Enforce, após armazenamento em água; (5) após o armazenamento, o cimento Variolink II apresentou diminuição na resistência adesiva no terço cervical e o cimento Enforce nos terços médio e apical. O cimento Panavia F exibiu aumento significativo da resistência adesiva nos terços cervical e médio, e diminuição no terço apical; (6) em microscopia óptica, um padrão de fraturas predominantemente do tipo adesiva para todos os experimentos. / This study evaluated the microtensile bond strengths of the fiber post-resin / resin cement/ root dentin when were varied the resin cement, dentin bonding system and longterm water storage. Were used for this study, human canines teeth extracted for periodontal reasons. The crown was sectioned and root canals were prepared for fiber post-resin (Fibrekor). The teeth were randomly assigned into experimental groups (n = 10) when were varied the resin luting technique and term water storage. The resin cements were (1) Panavia F, (2) Variolink II, (3) Enforce mediated by their respective adhesives. Experimental groups, using Panavia F and Enforce, were prepared in the same way, except that the additional layer of a low-viscosity bonding resin (Scotchbond Multi-Purpose Plus [SBMP]) was placed on the bonded root dentin surface before luting the fiber post-resin. The teeth were stored for 3 months and subsequently prepared for microtensile bond strength testing. Beams of approximately 1mm2 were tested in tension at 0,5mm/mim in a universal testing machine. Fractured surfaces were examined under X 40 stereomicroscope to determine the mode of fracture. The data were divided into cervical, middle and apical regions and analyzed using ANOVA and Tukey\'s test (p < 0,05). The results of tensile bonding strengths showed (1) significant differences among resin cements and root dentin regions, were presented higher mean bond strength values to Variolink II, when compared with others; (2) the cervical third of Variolink II demonstrated higher values, to Panavia F and Enforce demonstrated lower values for that regions; (3) the application of the additional layer of the hydrophobic adhesive resulted in significant improved in the tensile bonding strength; (4) water storage for 3 months produced bond strengths that were significant lower for Variolink II e Enforce; (5) after storage, the Variolink II reduced bond strengths in the cervical third and Enforce in the middle and apical regions. The cervical and middle third of Panavia F presented higher mean bond strength values and apical regions demonstrated lower values; (6) No cohesive fractures within resin cement, fiber-reinforced composite resin post, or root dentin were identified.

No preparo dos canais radiculares, eminentemente os curvos, a abordagem cérvico-apical amplamente difundida promovendo a dilatação da região cervical do canal radicular previamente à atuação de instrumentos em sua região apical constitui técnica e inegavelmente uma forma adequada, tanto do ponto de vista mecânico como microbiológico, de interagir com o espaço endodôntico em busca de uma experiência bem sucedida e previsível. De outra forma, os mais recentes instrumentos endodônticos, muito mais flexíveis em decorrência das novas ligas de baixo módulo de elasticidade empregadas em sua fabricação e dotados de novos índices de conicidade, surgem melhorando tais perspectivas. Desde o surgimento da liga de Níquel-Titânio na Endodontia, na década de oitenta, uma gama imensa de instrumentos desta derivados e para serem empregados com dispositivos mecânicos, eletromecânicos ou pneumocânicos, têm reavivado a esperança de se obter um dispositivo ideal que simulando a cinemática manual supere as limitações operacionais decorrentes, principalmente, da configuração anatômica do canal radicular. Assim, neste experimento verificou-se o desempenho de quatro diferentes recursos técnicos no desgaste da região cervical do canal radicular. Constituíram-se quatro amostras, cada qual composta de 10 espécimes (raízes mésio-vestibulares de primeiros molares superiores), para serem preparadas com (i) Brocas Gates-Glidden, (ii) Brocas Largo-Peeso, (iii) ProFile® .04/.06 & Orifice Shapers e (iv) Pow-R Coronal Shapers. Imagens digitais obtidas antes e após o preparo do canal radicular foram analisadas também digitalmente estudo morfométrico computadorizado avaliando-se a variação das áreas das mesmas em função do desgaste promovido pelos referidos instrumentos. Todos os instrumentos produziram desgaste de ambas as paredes, mesial e distal, do canal radicular na região analisada. A análise estatística das variações de área para o fator parede mesial não mostrou diferenças estatisticamente significantes entre os grupos experimentais para =5%. No entanto quando da comparação dos grupos experimentais para o fator parede distal verificou-se diferenças estatisticamente significantes entre os grupos #1 e #3 para =5%. Ainda, para o fator área total (paredes mesial e distal) verificou-se diferenças estatisticamente signifcantes entre os grupos #3 e #4 para =5%. Concluiu-se que todos os instrumentos testados produzem desgaste tanto da parede mesial como da parede distal do canal radicular e, conseqüentemente, da estrutura dentinária global da região cervical do canal radicular. Por outro lado verificou-se uma tendência da Broca Gates-Glidden em promover maior desgaste da parede distal que o Sistema ProFile® .04/.06 & Orifice Shapers e do Sistema Pow-R Coronal Shapers em promover maior desgaste da estrutura toal que o Sistema ProFile® .04/.06 & Orifice Shapers. / Nowadays is common sense among endodontists that in root canal preparation, mainly the curved ones, the crown-down approach enlarging the cervical third prior instrumentation of the apical third regions provides better interaction between the instrument and the canal walls than the conventional methods. Technically it provides an adequate form to achieve the best and predictable results in cleaning and shaping the root canal system. Additionally the most recent nickel-titanium made endodontic instruments more flexible than the stainless steel instruments and the new taper design have been appeared to improve the endodontic panorama. Since the introduction of the nickel-titanium alloy in Endodontics by Walia et al. in 1988 a number of instruments produced by such alloy in conjunction with the engines new generation have brought new perspectives to deal tridimensionally with the still challenger endodontic space. In this study the performance of four different instruments in the root canal cervical third enlargement was evaluated. Four experimental groups comprised by ten upper molars mesiobuccal roots each were prepared by either (i) Gates bur, (ii) Largo bur, (iii) Profile® .04/.06 & Orifice Shapers or (iv) Pow-R Coronal Shapers. Before and after preparation digitally acquired images were evaluated for area changes within both mesial and distal root canal walls. All instruments produced some amount of wear in both walls and the distals have changed more than the mesials in most times probably due an excentric performance of all evaluated instruments. Comparison of root canal walls wearing among the four experimental groups showed no statistically significant differences (=5%) for mesial wall. However, statistically analyze (=5%) showed significant differences between Experimental Group #1 (Gates-Glidden burs) and Experimental Group #3 (Profile® .04/.06 & Orifice Shapers) for distal walls with the first showing greater wearing than the latter. Also, the results showed statistically significant differences between Experimental Group #4 (Pow-R & Coronal Shapers) and Experimental Group #3 (Profile® & Orifice Shapers) for the entire structure i.e. mesial and distal walls with the first showing the greater than the latter wearing . It was concluded that all tested instruments wear so the mesial as the distal root canal walls. Experimental results have showed that in first upper molaras mesiobuccal roots Gates-Glidden bur for distals and Pow-R nickel-titanium instruments for both walls, i.e. the cervical dentin entire structure, are supposed to wear more root canal cervical third dentin than the others instruments which they were compared.

O presente estudo objetivou testar experimentalmente a existência da possível correlação entre a penetração de cimento nos túbulos dentinários e a qualidade do selamento. Foram utilizados 60 incisivos centrais superiores humanos que formaram um único grupo experimental. Após a eliminação das porções coronárias, as raízes foram padronizadas em 13 mm de comprimento. A instrumentação dos canais foi realizada no sentido coroa-ápice, e o comprimento de trabalho estabelecido a 1 mm aquém do forame apical. Como solução irrigadora foi empregado o NaOCl a 5,25% e ao final, EDTA a 17%. Em seguida, todos os canais foram obturados com guta-percha e cimento AH Plus marcado com um corante fluorescente. Para determinar a qualidade do selamento das obturações endodônticas, as amostras foram submetidas ao modelo de infiltração de glicose sob pressão. As raízes foram montadas em um dispositivo de dupla-câmara selada para permitir a infiltração da glicose. Como controle negativo foram utilizados 4 dentes hígidos, e como controle positivo, 2 dentes instrumentados porém, não obturados. Foram utilizados 0,75 mL de solução de glicose a 1 mol/L na câmara superior e 0,75 mL de água deionizada na câmara inferior. Os dispositivos foram conectados a um sistema de distribuição de pressão desenvolvido com o objetivo de permitir a infiltração de 32 amostras em uma mesma etapa. A solução de glicose foi forçada apicalmente sob uma pressão de 15 psi durante 1 hora. Uma alíquota de 50 L foi coletada da câmara inferior para quantificar a glicose infiltrada. A concentração de glicose foi determinada através de um método enzimático com o auxílio do Kit Glucose HK e de um espectrofotômetro em um comprimento de onda de 340 nm. Na sequência, as amostras foram desacopladas dos corpos de prova, embutidas em resina epóxi e cortadas em 3 secções transversais. Uma sequência de preparação metalográfica padrão foi realizada para permitir a observação da penetração de cimento nos túbulos dentinários por meio de microscopia confocal e óptica. Os dados obtidos nos 2 experimentos foram cruzados pelo teste de correlação de Spearman, o qual revelou a inexistência de qualquer possibilidade de correlação (r = 0,12). Com base nesses resultados, o presente trabalho concluiu que, dentro das condições experimentais usadas, a quantidade de cimento presente dentro dos túbulos dentinários não teve relação com a qualidade do selamento produzido. / The purpose of the present study was to experimentally test the potential correlation between tubular dentin sealer penetration and sealability. Sixty human maxillary central incisors were selected in order to compose a single experimental group. After removing of crowns, the roots were standardized at 13 mm in length. A crown-down root canal instrumentation was performed 1mm short of the apical foramen (working length). How irrigating solution was used 5.25% NaOCl and final, 17% EDTA. Then, all root canals were filled with gutta percha and AH Plus sealer labeled with a fluorescent dye. To determine the sealability pattern, samples were submitted to glucose leakage model under pressure. Four intact teeth were used as negative control while further 2 instrumented but nonfilled teeth was used as positive control. The roots were mounted in a double-chamber apparatus where 0,75 mL of 1 mol/L glucose solution was placed into the superior chamber and 0,75 mL of deionized water was placed into the inferior chamber. The devices were connected to a pressure distribution system that was developed in order to allow testing 32 specimens at the same experimental stage. The glucose solution was forced apically under a pressure of 15 psi during 1 hour. A sample of 50 L was taken from the inferior chamber and the glucose concentration was measured following an enzymatic reaction using a Glucose HK Kit readed under spectrophotometry (wave-length of 340 nm). After that, the samples were removed from the apparatus, embedded in epoxy resin and cut into 3 sections. Standard metallographic preparation was performed prior the observation of the sealer penetration into dentinal tubules by confocal and optical microscopy. Data provided by the evaluations were submitted to Spearman correlation test which revealed a lack of correlation between the two variables (r = 0.12). Therefore, the present study concluded that there was no correlation between tubular sealer penetration and sealability in non-bonding conventional root-fillings.

Orientador: Marcia Carneiro Valera / Banca: Flaviana Bombarda de Andrade / Banca: Carlos Henrique Ribeiro Camargo / Resumo: O presente estudo teve como objetivo detectar espécies bacterianas, quantificar microrganismos e endotoxinas em canais radiculares com insucesso endodôntico e presença de lesão periapical, correlacionando-os com os sinais e sintomas clínicos e, avaliar a ação do hipoclorito de sódio 1% e extrato glicólico de gengibre 20% sobre estes microrganismos e endotoxinas. Foram selecionados para o estudo dez dentes tratados endodonticamente com lesões periapicais persistentes que foram divididos em 2 grupos (n=5), de acordo com a substância química auxiliar utilizada durante o preparo biomecânico (PBM): hipoclorito de sódio 1% e extrato glicólico de gengibre 20% intercalado com solução salina fisiológica. Foram realizadas coletas do conteúdo do canal radicular imediatamente após a desobturação do dente, imediatamente após a instrumentação e, imediatamente após 14 dias da ação da medicação intracanal (MIC) de hidróxido de cálcio. Para todas as coletas foram realizados os seguintes testes: a) avaliação da atividade antimicrobiana por cultura microbiológica e através do método molecular - PCR; b) quantificação de endotoxinas verificada pelo lisado de amebócitos de Limulus. Os resultados foram submetidos a análise estatística de Wilcoxon e Mann-Whitney e mostraram que tanto o PBM quanto à MIC foram capazes de reduzir a quantidade de microrganismos e de endotoxinas, independente da solução utilizada. No entanto, endotoxinas não foram completamente neutralizadas. Espécies de E. faecalis, T. denticola, T. forsythia, P. endodontalis, P. gingivalis, P. nigrescens, P. intermedia, P. micra foram detectadas nos canais radiculares. Observou-se correlação positiva entre a quantidade de endotoxinas e o diâmetro das lesões. Concluiuse que as substâncias testadas foram eficazes na redução de microrganismos e de endotoxinas / Abstract: The aim of the present study was to detect bacterial species, quantify microorganisms and endotoxins within failed root canals presenting periapical lesion, to correlate them with clinical signs and symptoms, and to evaluate the effect of 1% sodium hypochlorite and 20% glycolic ginger extract on microorganisms and endotoxins. Ten endodontically treated teeth presenting persistent periapical lesion were selected for this study and divided into 2 groups (n=5), according to the auxiliary chemical substance employed during the biomechanical preparation (BMP): 1% sodium hypochlorite and 20% glycolic ginger extract interposed with saline solution. Root canal contents were collected right after root canal filling removal, right after instrumentation, and 14 days of calcium hydroxide intracanal medication (ICM) activity. The following tests were performed for every collection: a) antimicrobial activity evaluation by means of microbiologic culture and molecular biology - PCR; b) endotoxins quantification assessed by Limulus amebocyte lysate. The results were submitted to statistical analysis by Wilcoxon and Mann-Whitney tests. Both BMP and ICM were able to reduce microorganisms and endotoxins quantity, regardless the employed solution. However, endotoxins were not completely neutralized. E. faecalis, T. denticola, T. forsythia, P. endodontalis, P. gingivalis, P. nigrescens, P. intermedia, P. micra species were detected within root canals. A positive correlation was detected for the endotoxin quantity and the diameter of lesion. It can be concluded the tested substances were efficient for endotoxin and microorganisms reduction / Mestre

Orientador: Ana Paula Martins Gomes / Banca: Marcia Carneiro Valera / Banca: Sandra Márcia Habitante / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a remoção da camada residual (smear layer) das paredes do canal radicular após instrumentação oscilatória ou rotatória e utilização de diferentes pontas de irrigação. Foram utilizados 60 dentes unirradiculares humanos que tiveram seus canais instrumentados por técnica oscilatória ou rotatória, variando a ponta de irrigação com hipoclorito de sódio a 2,5% (n=10): G1- instrumentação oscilatória + irrigação com pontas NaviTip; G2 - instrumentação oscilatória + irrigação com pontas NaviTip FX; G3 - instrumentação oscilatória + irrigação com pontas Endo-Eze Irrigator; G4 - instrumentação rotatória + irrigação com pontas NaviTip; G5 - instrumentação rotatória + irrigação com pontas NaviTip FX; G6 - instrumentação rotatória + irrigação com pontas Endo-Eze Irrigator. Finalizada a instrumentação, os dentes foram clivados e preparados para análise em MEV, com aumento de 500x e 2000x, avaliando a limpeza dos canais radiculares nos terços cervical, médio e apical. A área analisada foi quantificada pelo número total de túbulos dentinários presentes e pela porcentagem de túbulos abertos na região avaliada. Os dados relativos à porcentagem de túbulos abertos foram submetidos à análise estatística utilizando ANOVA e Teste de Tukey 5%. Os resultados mostraram menor quantidade de túbulos dentinários abertos no grupo G5 com diferenças estatisticamente significantes. Em todos os grupos a limpeza obtida nos terços cervical e médio foi superior à conseguida no terço apical, entretanto apenas no grupo G1 e G5 o terço apical diferiu estatisticamente dos outros terços. Pôde-se concluir que a limpeza obtida no terço apical foi inferior em todos os grupos e nenhuma técnica de instrumentação ou ponta de irrigação foi capaz de promover a remoção total da smear layer das paredes do canal radicular / Abstract: The aim of this study was to evaluate the removal of smear layer of the root canal dentin walls after oscillatory or rotary instrumentation and use of different irrigation tips. A total of 60 single-rooted human teeth had their canals instrumented with rotary or oscillatory technique, varying the irrigation tip with sodium hypochlorite 2.5% (n=10): G1 - oscillatory instrumentation + irrigation with NaviTip; G2 - oscillatory instrumentation + irrigation with NaviTip FX; G3 - oscillatory instrumentation + irrigation with Endo-Eze Irrigator; G4 - rotary instrumentation + irrigation with NaviTip; G5 - rotary instrumentation + irrigation with NaviTip FX; G6 - rotary instrumentation + irrigation with Endo-Eze Irrigator. The teeth were sectioned and prepared for SEM analysis with 500x and 2000x magnification, for evaluation of cleaning at the cervical, medium and apical thirds of root canal. The analyzed area was quantified according the total number of tubules present and the percentage of open tubules in the region evaluated. The values were subjected to statistical analysis by ANOVA and Tukey tests, at a significance level of 5%. The results showed fewer open tubules in G5 with significant differences. In all groups the cleaning obtained in the cervical and middle thirds was higher than that achieved in the apical third, although only in G1 and G5 apical third differed significantly from the other thirds. It is concluded that cleaning process in the apical third was less in all groups and no instrumentation or tip was able to promote canals completely clean / Mestre

Orientador: Marcia Carneiro Valera / Banca: Giulio Gavini / Banca: Cláudio Antônio Talge Carvalho / Resumo: A proposta deste trabalho foi detectar microrganismos e avaliar in vivo a ação do extrato glicólico de gengibre 20% (GENG), do hipoclorito de sódio 1% (NaOCl), da clorexidina gel 2% (CLX) como soluções irrigadoras e da medicação intracanal (MIC) de hidróxido de cálcio sobre microrganismos e endotoxinas em dentes com necrose pulpar e lesão periapical. Para isso 36 pacientes portadores de dente com necrose pulpar e lesão periapical visível radiograficamente foram submetidos ao tratamento endodôntico e divididos em 3 grupos (n=12), de acordo com a substância química auxiliar utilizada durante o preparo biomecânico: GENG; NaOCl ou CLX intercalado com solução salina fisiológica. Foram realizadas coletas do conteúdo do canal radicular com cones de papel absorvente após a abertura do dente, após a instrumentação e, após 14 dias da ação da MIC. Para todas as coletas foram realizados os seguintes testes: a) avaliação da atividade antimicrobiana pela contagem de UFC/mL e método molecular - PCR e; b) análise da quantidade de endotoxina verificada pelo lisado de amebócitos de Limulus. Os resultados foram submetidos à análise descritiva e estatística de Kruskal-Wallis e teste de Dunn. Os resultados mostraram presença de DNA bacteriano em todas as coletas, sendo que Parvimonas micra foi a espécie mais frequente. A instrumentação com as substâncias testadas reduziram significativamente microrganismos e endotoxinas dos canais radiculares. A utilização da MIC não foi capaz de potencializar os efeitos antimicrobianos nem sobre endotoxinas. Pôde-se concluir que o preparo biomecânico com GENG foi eficiente tanto em reduzir microrganismos quanto endotoxinas dos canais radiculares. A MIC de Ca(OH)2 não foi capaz de potencializar a neutralização de endotoxinas após PBM / Abstract: The purpose of this study was to detect microorganisms and to evaluate in vivo the action of 20% ginger glycolic extract (GENG), 1% sodium hypochlorite (NaOCl) and 2% chlorhexidine gel (CLX) as irrigating solutions and intracanal medication (ICM) of calcium hydroxide on microorganisms and endotoxins in teeth with necrotic pulp and periapical lesions. Thirty six patients with tooth with pulp necrosis and radiographically visible periapical lesion were submitted to endodontic treatment and divided into 3 groups (n = 12), according to the auxiliary chemical substance used during the biomechanical preparation: GENG, NaOCl or CHX interspersed with saline solution. Samples of the root canal were taken with paper cones immediately after exposure of the canal, immediately after instrumentation and 14 days after MIC. For all samples were performed the following tests: a) evaluation of antimicrobial activity by counting the CFU / mL and molecular method - PCR and b) quantification of endotoxins verified by the Limulus amoebocyte lysate. The results showed the presence of bacterial DNA in all samples, and Parvimonas micra was the most frequent species. The instrumentation with all substances tested reduced significantly microorganisms and endotoxins from root canals. The use of ICM was not able to potentiate the antimicrobial effects either on endotoxins. It was concluded that biomechanical preparation with glycolic extract of ginger was effective in reducing microorganisms and endotoxins from root canals with no significant differences from NaOCl or chlorhexidine. The Ca(OH)2 ICM could not enhance the neutralization of endotoxins after biomechanical preparation / Mestre

Este estudo identificou a presença e a viabilidade de Streptococcus spp., Propionibacterium acnes e Enterococcus faecalis antes e após os procedimentos endodônticos, utilizando o método de reação de cadeia de polimerase (PCR) baseado em RNA ribossômico (rRNA) e seus respectivos genes (rDNA). Foram coletadas amostras de 20 dentes com infecção primária antes (S1) e após o preparo químico-cirúrgico (S2), e depois do emprego do Ca(OH)2 como medicação intracanal (S3). DNA e RNA foram extraídos da mesma amostra de canal radicular e utilizados como moldes para reação de PCR com iniciadores específicos para a região 16S rRNA das espécies analisadas. Streptococcus espécies foram detectados em 20% e 25% das amostras S1 utilizando os métodos baseados em rRNA e rDNA, respectivamente; enquanto P. acnes foi detectado apenas pela análise de rRNA, estando presente em 10% das amostras S1. Após o preparo químico-cirúrgico, Streptococcus spp. foram detectado em 10% das amostras S2 quando se utilizou rDNA, porém não foi detectado pelo método baseado em rRNA, indicando ausência de células viáveis. Por outro lado, P. acnes foi detectado por ambos os métodos nas amostras S2, com prevalência de 10% e 5% quando se utilizou rRNA e rDNA como molde para PCR, respectivamente. Nas amostras S3, P. acnes foi a única espécie detectada nos ensaios baseados em rRNA, presente em 10% dos casos, enquanto o método baseado em rDNA falhou em detectar essa espécie. Por sua vez, E. faecalis não foi detectado em nenhuma amostra pelos métodos utilizados. Portanto, concluise que a suscetibilidade bacteriana aos procedimentos endodônticos varia entre as espécies Gram-positivas. Enquanto Streptococcus spp. foram suscetíveis, P. acnes persistiu ativo em canais radiculares após o preparo químico-cirúrgico e medicação intracanal. Esses dados sugerem que há necessidade de novas estratégias para a eliminação de espécies resisitentes ao tratamento endodôntico. / This study identified the presence and viability of Streptococcus spp., Enterococcus faecalis and Propionibacterium acnes before and after endodontic procedures, using the polymerase chain reaction (PCR) based on ribosomal RNA (rRNA) and their genes (rDNA ). Samples of 20 teeth with primary infection were collected before (S1) and after chemical-surgical preparation (S2), and after Ca(OH)2 as temporary dressing (S3). DNA and RNA were extracted from the same root canal sample and used as templates for PCR with specific primers for 16S rRNA region of the analyzed species. Streptococcus species were detected in 20% and 25% of the S1 samples using methods based on rRNA and rDNA, respectively; while P. acnes was only detected by analysis of rRNA, present in 10% of the samples S1. After chemicalsurgical preparation, Streptococcus spp. were detected in 10% of S2 samples when using rDNA as template, but they were not detected by the method based on rRNA, indicating the absence of viable cells. Furthermore, P. acnes was detected by both methods in samples S2, with a prevalence of 10% and 5% when using as template rRNA and rDNA for PCR, respectively. In S3 samples, P. acnes was the only species detected in assays based on rRNA, present in 10% of cases, while the rDNA-based method failed to detect this species. E. faecalis was not detected in any sample by the methods used. Therefore, it is concluded that bacterial susceptibility to endodontic procedures may vary among Gram-positive species. While Streptococcus spp. were susceptible, P. acnes persisted active in root canals after chemicalsurgical preparation and dressing. These data suggest the need for new strategies to eliminate resisitant species to endodontic treatment.

Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2017-01-04T09:35:23Z No. of bitstreams: 2 Tese - Iussif Mamede Neto - 2016.pdf: 8414229 bytes, checksum: dbd825fbd28378443533fac54c7a09c1 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-01-04T09:59:04Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Iussif Mamede Neto - 2016.pdf: 8414229 bytes, checksum: dbd825fbd28378443533fac54c7a09c1 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-04T09:59:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Iussif Mamede Neto - 2016.pdf: 8414229 bytes, checksum: dbd825fbd28378443533fac54c7a09c1 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2016-11-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Objective: To evaluate transportation (T) and centering ability (CA) of root canal preparations using continuous or reciprocating nickel-titanium endodontic files. Material and methods: Ninety-six mesiobuccal root canals of mandibular first and second molars were randomly divide into 6 groups (n=16) according to the rotary file used: Group 1- ProTaper Next®; Group 2- ProTaper Gold®; Group 3- Mtwo®; Group 4- BioRaCe®; Group 5- WaveOne Gold®; Group 6- Reciproc®. Root canals were prepared according to manufacturer’s instructions. Cone-beam computed tomography scans were obtained before and after canal preparation. Measurements were made at five different points: 2, 3 and 4 mm from the apex and 2, 3 and 4 mm below furcation. Transportation and centering ability were analyzed following the recommendations made by Gambill et al. (1996). Results: The greatest mesiodistal (MD) transportation (T) was found for Reciproc® files (p<0.05), and the greatest buccolingual (BL) T, for Reciproc®, ProTaper Gold® and ProTaper Next® files (p<0.05). The greatest mesiodistal (MD) centering ability (CA) was found for BioRaCe® files (p<0.05), and the greatest buccolingual (BL) CA, for BioRaCe® and Mtwo® files (p<0.05). Conclusion: All systems produced root canal transportation. No file system achieved perfect CA of root preparation. Reciproc® files had the greatest MD T and BL T. BioRaCe® files had the greatest MD CA, whereas BL CA was similar for BioRaCe® and Mtwo® files. / Objetivo: Avaliar o índice de transporte (IT) e a capacidade de centralização (CC) do preparo do canal radicular com instrumentos endodônticos de níquel-titânio acionados em rotação contínua e reciprocante. Materiais e métodos: Noventa e seis canais mesiovestibulares de molares inferiores (primeiro e segundo) foram aleatoriamente divididos em 06 grupos (n=16), de acordo com o instrumento rotatório utilizado: Grupo 1- ProTaper Next®; Grupo 2- ProTaper Gold®; Grupo 3- Mtwo®; Grupo 4- BioRaCe®; Grupo 5- WaveOne Gold®; Grupo 6- Reciproc®. A técnica de preparo do canal radicular obedeceu a orientação dos fabricantes. Tomografia computadorizada de feixe cônico foi realizada antes e após o preparo dos canais radiculares. Foram estabelecidos 06 níveis para a realização das mensurações nas imagens: 2, 3 e 4 mm aquém do vértice radicular e 2, 3 e 4 mm abaixo da furca. O índice de transporte e a capacidade de centralização foram analizados conforme proposto por Gambill et al. (1996). Resultados: O maior IT no sentido mesiodistal (MD) foi observado com o Reciproc® (p<0,05), enquanto que no sentido vestíbulolingual (VL) foram verificados com Reciproc®, ProTaper Gold® e ProTaper Next® (p<0,05). Os maiores valores de CC(MD) e (VL) foram observados com os sistemas BioRaCe® (p<0,05) e BioRaCe® e Mtwo® (p<0,05), respectivamente. Conclusão: Todos os sistemas promoveram transporte do canal radicular. Nenhum instrumento mostrou capacidade de centralização do preparo perfeita. O Reciproc® obteve os valores maiores de IT(MD) e (VL). O sistema BioRaCe® apresentou a maior CC(MD), enquanto que no sentido (VL) o BioRaCe® e Mtwo® mostraram capacidades similares.