Made available in DSpace on 2014-06-12T15:03:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3029_1.pdf: 4439891 bytes, checksum: 464c8a707df024d7b6cf478493ae8798 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Candidíase esofágica (CE) é uma infecção oportunista comum em hospedeiros imunossuprimidos. Devido à identificação inadequada e imprecisa, o surgimento de espécies não-C. albicans como patógenos potenciais tem sido subestimado. Assim, os objetivos deste trabalho foram isolar espécies de Candida da cavidade oral e mucosa esofágica de pacientes diagnosticados para esofagite, comparar as amostras isoladas por marcadores moleculares e avaliar in vitro e in vivo o efeito antifúngico do extrato de própolis vermelha. Um total de 1.482 pacientes com sintomas gastrointestinais foi examinado. Destes, 42 apresentaram lesões sugestivas para CE durante a endoscopia. Amostras da cavidade oral e do esôfago foram obtidas e cultivadas em Sabouraud dextrose ágar. A identificação foi realizada por métodos clássicos e moleculares. As espécies isoladas da mucosa oral e esofágica foram C. albicans, C. glabrata, C. parapsilosis, C. tropicalis, C. krusei, C. guilliermondii, C. kefyr e Trichosporon inkin. O polimorfismo inter e intraespecífico dos isolados de Candida foi avaliado pela técnica de PCR com primer derivado de regiões dos espaços intergênicos (T3B), e primers microssatélites (GTG)5 e (GACA)4. O primer (GACA)4 revelou variabilidade inter e intraespecífica e nenhuma similaridade foi observada entre os isolados orais e esofágicos, demonstrando a independência na patogênese entre a candidíase oral e CE. Testes in vitro conduzidos pelo M27-A3 (CLSI) apresentaram concentrações inibitórias mínimas entre 32-512 μg ml-1 para própolis vermelha (Rp) e 0,125-16 μg ml-1 para fluconazol (Flz), respectivamente. Para realização dos testes in vivo, camundongos foram imunossuprimidos com doses diárias de dexametasona (0,5 mg/animal) por via intraperitoneal durante 14 dias, com intervalos de três dias. A infecção foi realizada, após o período de imunossupressão, com 1x108 células viáveis de C. albicans URM6285 por swab via intra-esofágica seguida pela administração intragástrica de 0,2 mL desta suspensão. Sete dias após a infecção, os camundongos foram divididos em 6 grupos (n = 5) e tratados diariamente por via oral com Flz e Rp em diferentes concentrações. O tratamento exclusivo com Rp 150 mg/kg/dia e doses combinadas com Flz:Rd em diferentes concentrações eliminou a levedura da língua e mucosa do esôfago. Este estudo destaca a possível utilização do extrato de própolis vermelha isoladamente ou em combinação com medicamentos antifúngicos comerciais para o tratamento da CE

Orientador: Altair Antoninha Del Bel Cury / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-16T03:32:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Senna_PlinioMendes_M.pdf: 1431524 bytes, checksum: 8c1c0402a546f7f036b3905bf8e60465 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: A candidose oral é a infecção fúngica mais comum diagnosticada em humanos. Em indivíduos com sistema imunológico comprometido, pode disseminar-se sistemicamente causando um quadro denominado de candidemia, o qual está relacionado com alta mortalidade e aumento do tempo de permanência hospitalar. A candidose é frequentemente associada ao uso de próteses removíveis, apresentando-se como uma inflamação da região recoberta da mucosa, o que demanda a necessidade de controle microbiológico no biofilme patogênico acumulado na prótese para prevenção da candidose oral. Assim, o objetivo deste estudo foi verificar se a extensão da área da prótese removível colonizada com biofilme de Candida albicans influencia o processo de esterilização por energia de micro-ondas. Cento e vinte próteses totais superiores estéreis tiveram áreas distintas de 2,35cm2 ou 5,50cm2 colonizados com biofilme de Cândida albicans de 72 horas. Cada prótese foi imersa em 200 mL de água destilada estéril e irradiada com potências de 450, 630 ou 900 W por diferentes tempos (1,2 e 3 min) até que não fosse detectada a presença de células fúngicas viáveis (n=6). Também a temperatura final da água foi aferida imediatamente após a irradiação para verificar sua influência neste processo. Os resultados apresentaram diferença estatística significante para a extensão da área colonizada (p<0,001), sendo que a área de maior extensão demandou um maior tempo de irradiação para esterilização. Nas próteses totais com a maior área colonizada e irradiadas por 3 minutos, independente da potência não foi detectado crescimento fúngico, sendo significantemente diferente dos demais tempos (p<0,001). As próteses com menor extensão de área colonizada apresentaram-se estéreis após 1 minuto a 900 W e 2 minutos para 450 e 630 W. Houve correlação positiva entre a temperatura final da água e a eficácia da esterilização (r=0, 6170). Considerando as limitações deste estudo, é possível concluir que quanto menor a extensão da área colonizada por biofilme menor é o tempo de irradiação por micro-ondas requerido para a esterilização. / Abstract: Oral candidosis is the most common fungal infection diagnosed in humans. In subjects with compromised immune system, it can disseminate to candidemia, which is related to high mortality and more hospital time consumption. Candidosis is commonly related to denture wearers, characterized by an inflammation of the coverage portion of mucosa, demanding the necessity of microbiologic control of the biofilm accumulated on denture surface for prevention of oral candidosis. Therefore, the aim of this study was to evaluate the influence of Candida albicans biofilm coverage area on the effectiveness of microwave disinfection. One hundred twenty sterile dentures have two distinct areas, 2.35 or 5.50cm2, coverage by 72 hours Candida albicans biofilm. Each denture was immersed in 200 mL of sterile distilled water and was irradiated by 450, 630 or 900 W and different exposure times (1, 2 e 3 min) until no viable cells were detected (n=6). The final temperature was also measured to verify its influence on this process. The results showed statistical difference between the biofilm coverage area (p<0,001), in which a higher coverage demands more exposure time for sterilization. The dentures with higher biofilm coverage and irradiated for 3 minutes, independently of power set, showed no fungal growth, this exposure time was statistically different from 1 and 2 min (p<0,001). Dentures with lower biofilm coverage were sterilized after 1 min at 900 W and 2 min for 450 and 630 W. There was a positive correlation between the final water temperature and the effectiveness of sterilization (r=0, 6170). Considering the limitations of this study, it is possible to conclude that lower biofilm coverage demands a lower microwave exposure time for sterilization achievement. / Mestrado / Protese Dental / Mestre em Clínica Odontológica

Orientador: Wander José da Silva / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-21T22:03:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vasconcellos_AndreaAraujode_M.pdf: 2510768 bytes, checksum: 3dde887465d6f0762c3b4b6771c9dd5f (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Na cavidade oral, a colonização por Candida albicans em nichos com valores distintos de pH contribui para o desenvolvimento de candidose associada ao uso de prótese. O tratamento dessa infecção tem sido facilitado utilizando-se o fluconazol (FLZ). Entretanto, não está claro se o pH dos biofilmes de C. albicans interfere na susceptibilidade destes ao FLZ. Dessa forma, neste trabalho foi avaliada a influência do pH de biofilmes de C. albicans na susceptibilidade ao FLZ. Testes de susceptibilidade ao FLZ foram realizados em células planctônicas e em biofilmes em três condições de pH (4,0, 5,5 ou 7,0). Testes de concentração inibitória mínima, concentração fungicida mínima e tempo de morte celular foram realizados para avaliar a susceptibilidade ao FLZ de células planctônicas. Para a susceptibilidade de biofilmes, Candida albicans ATCC 90028 foi desenvolvida na superfície de discos de resina a base de poli (metilmetacrilato) por um período de 48 horas. Em seguida, 2,56 ?g/mL de FLZ foram adicionados aos grupos experimentais por 24 horas, e os biofilmes foram analisados quanto à quantificação celular, bioatividade, secreção de proteinases e fosfolipases e parâmetros estruturais, como bio-volume, espessura média e coeficiente de rugosidade. A quantificação celular foi determinada por diluição decimal seriada, e a bioatividade foi avaliada pelo ensaio de XTT. A secreção de enzimas foi determinada por métodos colorimétricos. Microscopia confocal de varredura a laser foi usada para avaliar bio-volume, espessura média e coeficiente de rugosidade dos biofilmes. Todos os dados foram analisados estatisticamente por meio de análise de variância com dois fatores, seguido do teste de Tukey (? = 0,05). Para as células planctônicas, aumento na susceptibilidade ao FLZ foi observado com o valor mais alto de pH. Biofilmes desenvolvidos em pH 5,5 mostraram menor susceptibilidade ao FLZ em relação à quantificação celular (p < 0,05). Células de C. albicans expostas ao FLZ apresentaram menor bioatividade (p < 0,001). Quanto à atividade enzimática, maior produção de proteinase foi observada em biofilmes desenvolvidos em pH 4,0 (p < 0,001), enquanto houve valores aumentados de fosfolipase nos biofilmes desenvolvidos em pH 4,0 e 7,0 (p < 0,05). Considerando os parâmetros estruturais, os biofilmes desenvolvidos em pH 5,5, sem exposição ao FLZ, mostraram maior bio-volume e espessura média (p < 0,05), enquanto os biofilmes expostos ao FLZ mostraram coeficiente maior de rugosidade (p < 0,001). Dentro das condições estudadas, conclui-se que o pH dos biofilmes de C. albicans modula a susceptibilidade destes ao FLZ / Abstract: In the oral cavity, a successful colonization by Candida albicans in sites with different pH values contributes to the development of Candida-associated denture stomatitis. The treatment of this infection has been facilitated using fluconazole (FLZ). However, it is not clear how the pH of C. albicans biofilms can interfere in the susceptibility of FLZ. Therefore, this study evaluated the influence of pH of C. albicans biofilms in the susceptibility to FLZ. Susceptibility tests to FLZ were performed in planktonic cells and biofilms under three different pH values (4.0, 5.5 or 7.0). Minimal inhibitory concentration, minimal fungicidal concentration and time kill tests were used to evaluate the susceptibility in planktonic cells. For biofilms susceptibility, Candida albicans ATCC 90028 was allowed to be developed on poly (methlymethacrylate) resin discs surfaces for a period of 48 hours. Then, 2.56 ?g/mL of FLZ was added to the experimental groups for 24 hours and biofilms were analyzed by cell quantification, bioactivity, secretion of proteinases and phospholipases and structural parameters of bio-volume, average thickness and roughness coefficient. Cell quantification was determined by serial dilution, and bioactivity was evaluated by XTT assay. Secretion of enzymes was determined by colorimetric methods. Confocal microscopy was used to evaluate the bio-volume, average thickness and roughness coefficient of biofilms. All data were statistically analyzed by two?way ANOVA, followed by Tukey test (? = 0.05). For planktonic cells, an increase in susceptibility to FLZ was observed at the highest pH value. Biofilms developed at pH 5.5 showed less susceptibility to FLZ with respect to cell quantification (p < 0.05). C. albicans cells exposed to FLZ showed lower bioactivity (p < 0.001). In relation to enzymatic activity, higher production of proteinase was observed in biofilms developed at pH 4.0 (p < 0.001), whereas there were increased levels of phospholipase in biofilms developed at pH 4.0 and 7.0 (p < 0.05). Considering the structural parameters, the biofilms developed at pH 5.5, without exposure to FLZ, showed higher bio-volume and average thickness (p < 0.05), while the biofilms exposed to FLZ showed higher roughness coefficient (p < 0.001). Within the conditions studied, it can be concluded that pH of Candida albicans biofilms modulates the susceptibility to FLZ / Mestrado / Protese Dental / Mestra em Clínica Odontológica

Nas últimas décadas, houve aumento progressivo das infecções hospitalares por leveduras principalmente, do gênero Candida. A fonte de infecção pode ser endógena ou exógena, desde que esporos unicelulares de leveduras, permanecem viáveis por meses sobre superfícies bióticas ou abióticas. Diversas espécies de leveduras são encontradas em pele e mucosas de indivíduos sadios. Em estado saprofítico ainda, as leveduras encontram-se no trato gastrintestinal humano mas, a relação entre a presença desses microorganismos e sua patogenicidade está associada a diversos fatores predisponentes, tais como: número e variedade de sítios topográficos colonizados, uso prolongado de antibióticos, infecções associadas causadas por outros microorganismos e particularmente, distúrbios imunológicos ou metabólicos. Leveduras do trato gastrintestinal podem ser transmitidas, via fecal-oral diretamente ou de modo indireto, de indivíduo para indivíduo. A transmissão de uma cepa em estado saprofítico para um hospedeiro suscetível, pode resultar em colonização seguida de infecção. A gravidade do quadro clínico depende de condições do hospedeiro e características do agente etiológico que engloba fatores de virulência e resistência a antifúngicos. Esses atributos são importantes em Candida albicans na qual, enzimas com atividade de fosfolipase e proteinase são marcadores de virulência. De outro modo, fenótipos de resistência, ocorrem, com maior freqüência, em espécies não-Candida albicans. Dada a possibilidade de instalação de doença endógena e a dispersão de cepas virulentas e resistentes, a partir de colonização gastrintestinal, estudos que contribuam para a determinação desses agentes constituintes da microbiota de pacientes internados, são importantes para o conhecimento da história natural das infecções nosocomiais por leveduras. Os objetivos deste trabalho foram avaliar o trato intestinal como fonte potencial de infecção hospitalar por leveduras, descrevendo as espécies prevalentes nas primeiras horas de internação e possíveis alterações temporais, quanto a fenótipo de virulência e resistência a antifúngicos. Foram analisadas 281 amostras de leveduras isoladas de 66 crianças internadas em unidades de pediatria e semi-intensiva de hospitais públicos das cidades de São Paulo e Guarulhos, Brasil. As amostras foram isoladas de fezes coletadas nas primeiras horas de internação e durante o período de internação. A identificação das leveduras quanto a gênero e espécie foram realizadas por métodos tradicionais, analisando aspectos morfológicos e fisiológicos. A capacidade de produção de enzimas, fosfolipase e proteinase, foram verificadas conforme proposto por Price et al. 1982 e Ruchël et al., 1982. A sensibilidade aos antifúngicos: anfotericina B (AMB), fluconazol (FZ), itraconazol (IZ), cetoconazol (CZ) e nistatina (NIS) foram analisada pela técnica de difusão por discos (CECON São Paulo, Brasil). Amostras resistentes ou com sensibilidade intermediária, foram re-avaliadas pelo método de microdiluição segundo NCCL (1997) modificado por EUCAST (2002). As espécies isoladas foram: Candida tropicalis (32,7%), C.albicans (29,9%), C.parapsilosis (27, 1%), Trichosporon cutaneum e T.inkin (3,2%), Rhodotorula mucilaginosa e R.glutinis (0,7%), C.krusei (3,6%), C.guilliermondii (2,1%), C.glabrata (0,4%) e C.kefyr (0,4%). A atividade enzimática foi observada na maioria das 84 amostras de C. albicans, sendo 96% de fosfolipase e 95% de proteinase. Entre as espécies não-albicans do gênero Candida foi verificada atividade em 97% de fosfolipase e 67% de proteinase. Amostras menos sensíveis às drogas azólicas, ou seja, amostras resistentes ou com sensibilidade dependente da dose, foram encontradas em 4,3% das 281 amostras de leveduras, sendo maior porcentagem observada em C.krusei (90%). Conclui-se que existem leveduras de diversas espécies em fezes de população pediátrica hospitalizada, com fenótipos de virulência e resistência a antifúngicos. A manutenção desses fenótipos durante o período de internação pode representar fator de risco para infecção hospitalar endógena, ou ainda, fonte de dispersão de patógenos em potencial, no meio ambiente hospitalar. / At the last decades the nosocomial infections caused by yeasts raised significantly especially by Candida yeasts. The infections source can be endogen or exogenous, since spores of unicellular and multicellular are kept viable for months and several yeasts species are found in skin and mucosa of healthy people. In a saprophytic state yeasts are found in the human gastrointestinal tract but the relationship between the presence of these microorganisms and their pathology is associated with several facts such as: number, variety of sites colonized, effective use of antibiotics, associated infections caused by another microorganisms and mainly disturbance in due to lack of immunity and metabolic. Yeasts in the gastrointestinal tract can be transmitted fecal-oral direct or indirectly from an individual to another. The transmission of a strain in a saprophytic state to a host can result in colony followed by infection. The infection can be serious depending on the host conditions and the etiologic agent that includes virulent factor and resistance to antifungal drugs. These attributes are important to Candida albicans in which enzymes with phospholipase activity are responsible for virulent factors. Resistance phenotypes, otherwise it should occur more frequently in non-albicans species. Concerning the possibility of an endogen disease and the spread of virulent and resistant strains, from the gastrointestinal colony, studies that contribute to determine these agents that constitute the microbiota of patients, are important to know the natural story of nosocomial infections caused by yeasts. This work aims at evaluating the intestinal tract as a source of hospital infections by yeasts describing the remaining species in the first hours and a possible change depending on the time that may happen to virulent phenotypic and resistance to ant fungi. Two hundred eighty one yeast samples from sixty-six children attended in pediatric and semi-intensive units in 2 public hospitals located in São Paulo and Guarulhos cities in Brazil were analyzed. The fecal samples were collected at the first hours after and during their arrival at the hospital. To identify the yeasts according to their gender and species traditional methods were used, analyzing morphological and physiological aspects. The ability to produce enzymes phospholipase and proteinase was verified the same way it was proposed by Price et al. 1982 and Ruchel et al. 1982. The sensibility to antifungals: amphotericin B (AMB), f1uconazole (FZ), ketoconazole (CZ) e nistatin (NIS), was analyzed by the diffusion technical by disks (CECON São Paulo, Brazil). Resistant samples or with intermediate sensibility were confirmed by micro-dilution method according to NCCLS (1997) modified by EUCAST (2002). The isolated species were: Candida tropicalis (30%), C.parapsilosis (27%), C.krusei (4%), Trichosporon cutaneum e T.inkin (3%), Rhodotorula mucilaginosa e R.glutinis (2%), C.guilliermondii (2%), C.glabrata (1%) and C.kefyr (1%). Enzymatic activity was verified in most of the 84 C.albicans samples being 96% of phosfolipase and 95% of proteinase production. Among the non-albicans species of Candida it was observed 97% of phospholipase and 67% of proteinase activity. Less sensitive samples to azoic drugs including resistant or SDD sensibility, which depends on the achieved dose, were found in 4.3% of the 281 samples of yeast. The hugest percentage was observed in C.krusei (90%). We can conclude that different yeast species occur in stools of pediatric population hospitalized, including virulent strains and antifungal resistant phenotypes. The persistent of these phenotypes in the intestinal tract during hospitalization period may represents a risk facto r contributing to endogen infection, or play a role in dissemination of potential pathogens inside a nosocomial environment.

Orientador: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: Sheila Cavalca Cortelli / Banca: Elizabete Brasil dos Santos / Banca: Luiz Eduardo Blumer Rosa / Banca: Yasmin Rodarte Carvalho / Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar o desenvolvimento de candidose e a recuperação de Candida albicans na cavidade bucal de ratas controles e ovariectomizadas. Foram utilizadas 124 ratas não portadoras do gênero Candida na cavidade bucal, divididas em dois grupos: controle e ovariectomizado. Em cada grupo, quatro ratas foram utilizadas para avaliação morfológica do dorso da língua por microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura; e 58 ratas receberam inoculações de C. albicans para estudo da candidose e recuperação de leveduras. O desenvolvimento de candidose no dorso da língua foi observado em microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura nos períodos de seis horas, 24 horas, sete e 15 dias após a última inoculação. A recuperação de C. albicans foi realizada através de coletas de amostras bucais em intervalos de tempo de um, dois, cinco, sete dias, e progressivamente, a cada 15 dias até a obtenção de culturas negativas para leveduras. Os resultados foram analisados estatisticamente pelos testes t de Student e Mann-Whitney. A morfologia do dorso da língua das ratas do grupo ovariectomizado não infectado por Candida foi semelhante ao controle. Entre as ratas infectadas, o grupo ovariectomizado exibiu menor quantidade de lesões de candidose em relação ao controle. A recuperação de C. albicans da cavidade bucal dos animais ovariectomizados foi inferior aos controles em todos os períodos de observação. Concluiu-se que a candidose e a recuperação de C. albicans na cavidade bucal das ratas foram menos freqüentes no grupo ovariectomizado em relação ao controle / Abstract: The purpose of this work was to observe the development of candidosis and the recovery of C. albicans from the oral cavity of control and ovariectomized rats. Hundred twenty-four rats originally negative for the Candida spp. in the oral cavity were divided into two groups: control and ovariectomized. ln each group, four rats were used for tongue dorsum morphologic analysis by optical microscope and scanning electron microscope; and 58 rats received inoculations of C. albicans for the study of candidasis and recovery of yeasts. The development of candidosis on the tongue dorsum was observed in optical microscope and scanning electron microscope in the periods of six hours, 24 hours, seven days and 15 days after the last inoculation. The recovery of C. albicans was performed through oral samples collected at one, two, tive, seven days and progressively at each 15 days until negative cultures for the yeasts were obtained. The results were statistically analyzed by the t-student and Mann-Whitney tests. The tongue dorsum of the control and ovariectomized rats, not infected by Candida, presented normal aspect. Among lhe infected rats, the ovariectomized group showed less quantity of candidosis lesions in relation to control. The recovery of C. albicans from the oral cavity of ovariectomized animals was lower in relation to control in all periods of observation. lt could be concluded lhat candidosis and recovery of C. albicans ln the oral cavity of rats were less frequent in the ovariectomized group in relation to control / Doutor

Orientador: Sigmar de Mello Rode / Coorientador: Lucio Murilo dos Santos / Banca: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: Fernando Callera / Resumo: Micro-organismos como fungos do gênero Candida, são habitantes comensais da cavidade bucal; em condições normais, co-existem com a microbiota normal sem provocar doenças. Entretanto, alterações locais ou sistêmicas como imunossupressão, desequilíbrio da microbiota oral, hipossalivação e mucosite, secundárias ao tratamento quimioterápico, predispõem pacientes com câncer a um alto risco de infecções fúngicas orais e sistêmicas. O objetivo desse trabalho foi avaliar a presença de leveduras do gênero Candida na cavidade bucal de pacientes onco-hematológicos submetidos a transplante autólogo de células-tronco hematopoiéticas (TACTH). Foram avaliados 27 pacientes, nos períodos pré, e pós-transplante. As amostras da cavidade bucal foram obtidas pela técnica de enxágüe bucal e semeadas em Chromagar Candida para triagem das cepas isoladas. Após o crescimento, foi extraído o DNA e submetido a identificação molecular (PCR) utilizando iniciadores para os genes ribossomais dessa levedura. Após a amplificação do fragmento esperado, as cepas foram sequenciadas utilizando sequenciador automático.Para análise descritiva e estatística dos resultados obtidos, os dados foram submetidos ao teste de Shapiro-Wilk para avaliação da normalidade. Em seguida, o teste de variância Wilcoxon foi utilizado. A significância adotada foi de 5%. Candida spp foi encontrada em 40,74% (11 pacientes), sendo que 2 (18,18%) possuíam mais de uma espécie, dos 9 pacientes colonizados por apenas uma espécie, 7 eram port... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Microorganisms such as fungi of the genus Candida, are commensal inhabitants of the oral cavity; under normal conditions co-exist with normal microflora without causing disease. However, local or systemic changes such as immunosuppression, imbalance in the oral microbiota, hyposalivation and mucositis, secondary to chemotherapy, predispose cancer patients at high risk of oral and systemic fungal infections. The aim of this project is to evaluate the presence of Candida species in the oral cavity of hematological malignances patients undergoing autologous transplantation of hematopoietic stem cells (HSCT). We evaluated 27 patients in preand post-transplant. Samples of the oral cavity were obtained by oral rinse technique and plated on Chromagar Candida for screening of the strains. After growth, the DNA was extracted and subjected to molecular identification (PCR) using primers for the ribosomal genes in this yeast. After amplification of the expected fragment, the strains were sequenced using the sequencer automático. For descriptive and statistical analysis of the results, the data will be submitted to the Shapiro-Wilk test for evaluation of normality. Then the variance Wilcoxon test was used. The significance of 5% was adopted. Candida spp was found in 40.74% (11pacientes), and 2 (18.18%) had more than one species, of the 9 patients colonized by only one species, 7 patients had Candida albicans (77.77%) and 1 Candida dubliniensis (11.11%) and 1 C. krusei (11.11%). Mixed settlements, in the other two patients were composed of C. albicans + C. glabrata; C. albicans + C. dubliniensis. In the second collection (C2), 9 (81.81%) of Candida carriers remained colonized, including by non albicans species. The homology identification of species standardized strains was 85 99%. Within the conditions of this study it was possible to determine with ...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Orientador: Ana Marisa Fusco Almeida / Coorientador: Paulo Cesar Gomes / Banca: Mario Sergio Palma / Banca: Claudia Vianna Maurer Morelli / Banca: Tais Maria Bauab / Banca: Rosemeire Cristina Linhari Rodrigues Pietro / Resumo: Devido ao aumento das doenças fúngicas, do uso indiscriminado de antimicrobianos, associados ao aparecimento de cepas resistentes e formadoras de biofilmes, é essencial a busca pelo desenvolvimento de novos antifúngicos mais eficientes. As espécies de Candida são conhecidas pela capacidade de infectar humanos, sendo a formação de biofilmes um dos fatores de virulência mais importantes. No estudo interação patógeno-hospedeiro, bem como para eficácia terapêutica e segurança, algumas vantagens no uso de modelos animais alternativos são a redução de tempo de resposta em experimentos, eficiência e baixo custo quando comparado ao uso de camundongos. Desta forma, moléculas antifúngicas estão sendo testadas nestes animais alternativos, como Danio rerio (Zebrafish), um vertebrado que apresenta rápida reprodução e homologia genética e funcional com os mamíferos. Em relação às moléculas em testes, há um crescente estudo de peptídeos oriundos de venenos e da hemolinfa de insetos, como novos compostos antifúngicos, os quais possam apresentar além de boa atividade, baixa toxicidade e não-teratogenicidade. Neste trabalho, foram estudados peptídeos análogos de Mastoparanos de vespas (MKs) cuja atividade antimicrobiana já é conhecida, previamente sintetizados com modificações nas suas características estruturais, como número de resíduos de Lisina e carga líquida. Levando em consideração as características estruturais dos MKs, outros quatro peptídeos foram sintetizados e estudados, dos quais d... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Due to the increase of fungal diseases, indiscriminate use of antimicrobial linked to occurrence of resistance and biofilm - forming strains, the search for the development of new efficient antifungals is essential. Candida species are known for their ability to infect humans, and biofilm formation is one of the most important virulence factors. In respect pathogen - host interaction, as well as for therapeutic efficacy and safety, some advantages in the use of alternative animal models are the reduction of response time in experiments, efficiency and low cost when compared to the use of mice. Thus, antifungal molecules are being tested in these alternative animals, such as Danio rerio (Zebrafish), a vertebrate that exhibits rapid reproduction and genetic and functional homology with mammals. Regarding molecules under test, there is a growing study of peptides from poisons and insect hemolymph, as new antifungal compounds, which may present aside from to good activity, low toxicity and non-teratogenicity. In this work, it was studied was mastoparan analog peptides (MKs), whose antimicrobial activity is already known, previously synthesized with modifications in their structural characteristics, such as Lysine residues number and net charge. Taking into account the structural characteristics of MKs, four other peptides were synthesized and studied, of which two peptides (PepM1; PepM2) are analogues of the antimicrobial Moricin C3, derived from Galleria mellonella hemolymph, an... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Alexandrina Sartori / Resumo: A esclerose múltipla é uma doença autoimune ainda sem cura que acomete o sistema nervoso central (SNC). Evidências observadas em pacientes e em modelos experimentais indicam que infecções fúngicas e/ou derivados fúngicos podem contribuir com a patogênese da doença. Neste contexto, o objetivo deste projeto foi avaliar o efeito da infecção por Candida albicans e derivados fúngicos no desenvolvimento da encefalomielite autoimune experimental (EAE) que é o modelo murino desta patologia. Para avaliar o papel da infecção, camundongos C57BL/6 foram infectados com C. albicans três dias antes da indução da EAE. A infecção prévia agravou os sinais clínicos da doença. Este agravamento foi relacionado com a disseminação do fungo para o SNC e aumento da produção de citocinas encefalitogênicas (TNF-a, IL-6, IL-17 e IFN-y) tanto na periferia (baço) quanto no SNC. Para avaliar o efeito de derivados fúngicos no desenvolvimento da EAE, camundongos foram inoculados com três doses de gliotoxina ou de leveduras mortas de C. albicans após a indução da doença. A inoculação de gliotoxina resultou em sintomatologia mais grave, associada com um intenso infiltrado inflamatório e maior produção de TNF-a no SNC. De forma distinta a inoculação de leveduras mortas resultou em uma doença bem mais branda, com menor porcentagem de células apoptóticas e baixa produção de citocinas encefalitogênicas no SNC. Considerando que recentemente nosso grupo de pesquisa demonstrou que a vacinação com MOG associada à vita... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Multiple sclerosis (MS) is an autoimmune disease that affects the central nervous system (CNS). Data from patients and experimental models suggest that fungal infection and fungalderived antigens could contribute to the immunopathogenesis of this pathology. The main objective of this research was to investigate the effect of C. albicans and fungal derivatives on experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) that is a widely employed animal model to study MS. Initially, C57BL/6 mice were infected with C. albicans and three days later they were submitted to EAE induction. Infected animals developed a more severe disease associated with fungus spread to the CNS and increased production of encephalitogenic cytokines as TNF-α, IL-6, IL-17 and IFN-γ by cells from the spleen and the CNS. To test the effect of fungal derivatives mice were submitted to EAE induction and then injected with three doses of gliotoxin or dead yeasts of C. albicans. Gliotoxin inoculation resulted in clinical disease aggravation, higher local inflammatory infiltration and higher production of TNF-α by the CNS. Dead C. albicans inoculation determined a less severe disease associated with a lower production of encephalitogenic cytokines and a lower degree of apoptosis by CNS eluted cells. Lastly we demonstrated that C. albicans infection did not disrupt the prophylactic efficacy of MOG+VitD tolerogenic vaccination. Even in infected mice this vaccine decreased clinical signs, downmodulated the production of e... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Introdução: A candidíase bucal é uma infecção fúngica comum em pacientes irradiados em região de cabeça e pescoço. No período de tratamento antineoplásico eles passam por um quadro de imunodepressão transitória, no qual há predisposição à proliferação de fungos oportunistas. Na cavidade oral as formas clínicas de candidíase podem estar associadas à alteração de mucosa, manifestando-se nas formas pseudomembranosa aguda, atrófica aguda, crônica hiperplásica, atrófica crônica, glossite rombóide e queilite angular. A infecção fúngica proporciona na cavidade bucal, orofaringe e hipofaringe sintomas de ardência, o que dificulta a ingestão de alimentos, reduzindo a qualidade de vida do paciente, além de dificultar o tratamento antineoplásico. Dessa forma, tratamentos eficazes são importantes para que sejam sanadas estas intercorrências. Objetivos: Investigar a ocorrência de candidíase bucal diagnosticada em pacientes com câncer de cabeça e pescoço atendidos no ambulatório odontológico no período de janeiro de 2013 a junho de 2014; avaliar a terapêutica antifúngica e fatores predisponentes relacionados à candidíase bucal, em pacientes submetidos a tratamento antineoplásico; relacionar tempo de tratamento, evolução clínica da candidíase e sintomatologia; relacionar sítio anatômico da neoplasia, presença de candidíase, tempo de radioterapia e/ou quimioterapia e estágio da neoplasia. Material e Métodos: Foi realizado um estudo retrospectivo, descritivo, transversal, de análise de prontuários provenientes do Aplicativo de Gestão para Hospitais Universitários (AGHU) e arquivos do Hospital do Câncer do Hospital de Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia. Resultados: Do total de prontuários avaliados (de 83 pacientes), 48 (57,8%) pacientes apresentaram pelo menos um episódio de candidíase bucal. Os antifúngicos utilizados foram nistatina, fluconazol e miconazol gel oral, por até três meses. Os sintomas mais frequentes foram xerostomia (p = 0,006) e disgeusia (p = 0,031). As terapias antifúngicas foram eficazes em 95,8% dos pacientes. A quimioterapia antineoplásica teve relevância estatística (p = 0,021) no acometimento por candidíase bucal e 26,5% dos pacientes tiveram a primeira infecção fúngica com dose acumulativa de 1800 cGy de radioterapia. Conclusão: A maioria dos pacientes apresentou pelo menos um episódio de candidíase bucal durante o tratamento antineoplásico. O aparecimento de candidíase bucal esteve relacionado aos seguintes fatores: dose acumulada de radioterapia, hipossalivação e sítios anatômicos tumorais.Após o tratamento antifúngico a maioria dos pacientes evoluiu para a cura. Os sintomas da infecção mais relatados em prontuários foram ardência, odinofagia, trismo, xerostomia, disfagia e disgeusia. A maioria 13 dos pacientes foi acometida pela candidíase bucal em dose cumulativa de radioterapia de 1800 cGy. / Introduction: Oral candidiasis is a common fungal infection in patients irradiated in the head and neck region. In antineoplastic treatment period they undergo a transient immunosuppression framework in which there is a predisposition to the proliferation of opportunistic fungi. In the oral cavity clinical forms of candidiasis may be associated with mucosal changes, manifesting in acute pseudomembranous forms, acute atrophic, chronic hyperplastic, chronic atrophic, glossitis rhomboid and angular cheilitis. The fungal infection provides the oral cavity, oropharynx and hypopharynx symptoms of burning, which difficult, reducing the quality of life of the patient, as well as hamper the antineoplastic treatment. Thus, effective treatments are important, to avoid these complications. Objectives: To investigate the occurrence of oral candidiasis diagnosed in patients with head and neck cancer treated at the dental clinic from January 2013 to June 2014; evaluate the antifungal therapy and predisposing factors related to oral candidiasis; relate time of treatment, clinical course of candidiasis and symptoms; relate anatomical site of the tumor, presence of candidiasis, radiation time and / or chemotherapy and stage of cancer. Material and Methods: A retrospective, descriptive, cross-sectional, chart analysis from the “Aplicativo de Gestão para Hospitais Universitários” (AGHU) (Management Application for University Hospitals) and Hospital files of the Clinical Cancer Hospital, Federal University of Uberlândia. Results: Of the total assessed medical records (83 patients), 48 patients (57.8%) had at least one episode of oral candidiasis. The antifungal agents used were nystatin, miconazole and fluconazole oral gel for up to three months. The most frequent symptoms were dry mouth (p = 0.006) and dysgeusia (p = 0.031). Antifungal therapies have been effective in 95.8% of patients. Chemotherapy in this study had statistically significant (p = 0.021) in involvement by oral candidiasis, but it was not possible to evaluate the periods between chemotherapy, and 26.5% of patients had the first fungal infection with cumulative dose 1800 cGy radiotherapy. Conclusion: The majority of patients experienced at least one episode of oral candidiasis during antineoplastic treatment. The appearance of oral candidiasis was related to the following items: the cumulative dose of radiotherapy, tumor hyposalivation and anatomical sites. The most patients evolved to cure after antifungal treatment. Symptoms most frequently reported were burning, odynophagia, trismus, xerostomia, dysphagia, and dysgeusia. Most of the patients were affected by oral candidiasis in a cumulative dose of 1800 cGy radiotherapy. / Dissertação (Mestrado)

Este estudo clínico-laboratorial avaliou uma solução à base de Ricinus communis para higiene de próteses totais, comparando-a ao hipoclorito de sódio, quanto à efetividade na remoção do biofilme, remissão de Candidíase Atrófica Crônica, grau de satisfação dos pacientes e rugosidade superficial da resina acrílica termopolimerizada. Sessenta e quatro usuários de próteses totais com ausência (n=40) ou presença de Candidíase (n=24) foram selecionados e orientados a escovar as próteses com escova específica e sabão neutro por 3 minutos, 3 vezes ao dia e imergi-las nas soluções de higiene (Hipoclorito de sódio 0,25% - S1; e 0,5% - S2; R. communisa 10% - S3; Salina - S4: controle) por 20 minutos. As soluções foram utilizadas de forma cruzada e randomizada com períodos de \"wash out\". Para quantificação do biofilme (ImageTool 3.0), a superfície interna foi evidenciada (vermelho neutro 1%) e fotografada ao final de cada período. A remissão da Candidíase foi avaliada por atribuição de escores antes e após o uso das soluções. A satisfação dos pacientes foi analisada por questionário. A rugosidade da superfície polida e não polida de 40 espécimes (90x30x4mm) de resina foi avaliada antes e após a exposição dos mesmos ao protocolo clínico de higiene por meio de rugosímetro e Microscopia Eletrônica de Varredura. A remoção do biofilme foi analisada como um \"split-plot\" com dois fatores de variação: presença de inflamação e soluções. A remissão da Candidíase foi analisada após ajuste dos dados por regressão logística multinomial. Para análise da satisfação dos pacientes os dados foram ajustados por regressões logísticas e foi adotada análise de simetria composta. Para avaliação da rugosidade das superfícies polida e não polida foi empregada análise de variância com dois fatores (período e solução). Todas as análises foram realizadas com nível de significância de 5%. Não houve diferença na porcentagem de biofilme entre pacientes com e sem inflamação, bem como na interação entre os fatores. Houve diferença entre soluções, sendo que o Hipoclorito de sódio a 0,25 e 0,5% promoveu as menores médias de biofilme (4,41±7,98 e 2,93±5,23), seguido do R. communis(6,95±10,93) e Salina (11,07±11,99). Para remissão da Candidíase, as soluções mais eficientes foram R. communis(50%) e Hipoclorito de sódio 0,25% (46%). O questionário de satisfação não indicou diferença entre as soluções. A rugosidade da superfície polida não foi alterada pelo período (p=0,062). Houve alteração em função das soluções (p=0,00) e da interação entre os fatores (p=0,005). Para S1 e S4, o período não influenciou na rugosidade. Para S2, houve alteração a partir de 07 dias, permanecendo estável após 14 dias. Para S3, houve alteração e estabilização a partir de 14 dias. Após 07 e 14 dias, S2 e S3 promoveram as maiores alterações, porém após 21 dias, não houve diferença entre as soluções, exceto a salina. A superfície não polida não foi influenciada pelos fatores período (p=0,358), solução (p=0,120) e interação (p=0,204). Concluiu-se que há viabilidade do uso do hipoclorito de sódio em menores concentrações e do Ricinus communis para remoção do biofilme, remissão da Candidíase e controle da rugosidade superficial. / This clinical-laboratory study evaluated a solution based on Ricinus communis for denture cleansing, comparing it to sodium hypochlorite, regarding biofilm removal capacity, remission of atrophic chronic candidiasis, degree of patient satisfaction and surface roughness of heat-polymerized acrylic resin. Sixty-four denture wearers with absence (n = 40) or presence of Candidiasis (n = 24) were selected and oriented on how to brush their dentures with a specific brush and mild soap for 3 minutes, 3 times a day and immerse them in hygiene solutions (0.25% sodium Hypochlorite - S1 and 0.5% - S2, R. communis 10% - S3; Saline - S4: control) for 20 minutes. The solutions were used in a randomized and cross form with \"washout\" periods. To quantify biofilm (ImageTool 3.0), the inner surface was disclosed (1% neutral red) and photographed at the end of each period. The remission of Candidiasis was assessed by assigning scores before and after using solutions. Patient satisfaction was assessed by questionnaire. The surface roughness of 40 polished and unpolished resin specimens (90x30x4mm) was evaluated before and after their exposure to clinical protocol hygiene by surface roughness and scanning electron microscopy. The biofilm removal was analyzed as a \"split-plot\" with two variation factors: inflammation and solutions. The candidiasis remission was analyzed after adjustment using multinomial logistic regression. For patient satisfaction logistic regression analysis was adopted and compound symmetry. For evaluation of surface roughness polished and unpolished was employed analysis of variance with two factors (time and solution). All the analysis were performed with a significance level of 5 %. There was no difference in the percentage of biofilm between patients with and without inflammation, as well as the interaction between the factors. There were differences among the solutions, having the Sodium Hypochlorite 0.25 % and 0.5% promoted the lowest average biofilm (4.41±7.98 and 2.93±5.23), followed by R. communis (6.95±10.93) and Saline (11.07±11.99) . For the remission of candidiasis, the most efficient solutions were R. communis (50%) and 0.25% sodium hypochlorite (46%). The satisfaction questionnaire indicated no difference among the solutions. The roughness of the polished surface was not affected by time (p = 0.062). There was a change in function of the solutions (p = 0.00) and the interaction between factors (p = 0.005). For S1 and S4, the period did not influence the roughness. For S2, there was a change from 07 days, remaining stable after 14 days. For S3, there were changes and stabilization from 14 days. After 7 and 14 days, S2 and S3 promoted major changes, but after 21 days, there were no difference among the solutions except the saline. The unpolished surface is not influenced by factors: period (p = 0.358), solution (p = 0.120) and interaction (p = 0.204). It was concluded that there is feasibility for using sodium hypochlorite at lower concentrations and Ricinus communis for the removal of biofilm, remission of candidiasis and control of surface roughness.