Resumo não disponível.

Carcinoma espinocelular de cabeca e pescoco (CECP) é uma das malignidades mais prevalentes e mortais mundialmente. Até o momento não existem biomarcadores confiáveis para prognóstico e decisão de terapia na oncologia de CECP. Ganhos cromossômicos do fator de transcrição SOX2 foram demonstrados em CECP; entretanto, o impacto da expressão de SOX2 em processos relevantes tumorais e evolução clínica permanecem incompreendidos. Expressão de SOX2 foi analisada em 22 linhagens celulares de CECP, com e sem ganho em 3q. O nível médio de expressão de SOX2 foi significativamente maior nas linhagens com ganho em 3q quando comparada às linhagens sem ganho em 3q (p = 0,0012). Neste trabalho, realizamos o perfil global de expressão genica das linhagens de CECP controle e após silenciamento de SOX2, especificamente carcinoma espinocelular de língua com amplificação de SOX2. Os resultados mostraram 749 genes afetados por SOX2 “knock down”, considerando o valor ajustado de p ≤ 0,05. 456 genes forma encontrados negativamente regulados enquanto que 293 genes foram positivamente regulados após o “knock down” de SOX2. O principal gene positivamente regulado foi vimentin e sua expressão inversa com SOX2 foi confirmado usando “quantitative real time polymerase chain reaction”. De fato, a imunofluorescência indicou expressão inversa de SOX2 e vimentin. A análise da “transcriptome data” usando o software “Ingenuity pathway analysis” revelou genes diferentemente expressos envolvidos nas funções de mobilidade celular e movimento celular. Alinhados com esses achados, as células silenciadas para SOX2 apresentaram maior migração quando comparadas aos controles em duas linhagens independentes de CECP, uma de língua e outra de hipofaringe, sugerindo um maior risco para recidiva e metástase de tumores com baixa ou nenhuma expressão de SOX2. Complementando esses resultados, as células negativas para SOX2 localizaram-se preferencialmente no “fronte de invasão”, enquanto que as células positivas para SOX2 estavam no centro das colônias celulares, sugerindo que o silenciamenteo de SOX2 pode ser necessário para o início da migração em células de CECP. Por outro lado, também encontramos uma diminuição na viabilidade celular após o “knock down” de SOX2, coerente com o papel de SOX2 como oncogene. De acordo, após indução de apoptose com doxorubicina, células de CECP silenciadas para SOX2 mostraram significativamente mais apoptose que as controles. Interessantemente, a via de apresentação de antígeno foi a mais afetada após o “knock down” de SOX2. Os genes envolvidos nessa via e afetados nos nossos resultados, principalmente genes HLA classe I, estava afetados negativamente, mostrando correlação positiva com expressão de SOX2. Estes achados sugerem um papel de SOX2 na resposta imunológica de CECP e podem indicar um enfoque promissor para o desenvolvimento de novas terapias para tumors de CECP com expressão de SOX2. Além do potencial de SOX2 como biomarcador para prognóstico de CECP, uma maior compreensão dos mecanismo moleculares subjacentes pode ajudar no estabelecimento de novas estratégias de terapia direcionada. / Head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC) is one of the most prevalent and lethal human malignancies worldwide. To date there are no reliable biomarkers for prognosis or therapy decision making in HNSCC oncology. Recurrent copy number gain and overexpression of the transcription factor SOX2 has been shown in HNSCC; however, the impact of SOX2 expression on tumor relevant processes and clinical outcome remains largely elusive. Expression of SOX2 was assessed in 22 HNSCC cell lines with and without 3q gain. Mean expression level was significantly higher in cell lines with 3q gain as compared to cell lines without 3q gain (p = 0,0012). We performed global gene expression profiling of control and SOX2 silenced HNSCC cell lines, specifically tongue squamous cell carcinoma, with SOX2 gene amplification. Results showed 749 affected after SOX2 knock down, considering the adjusted p value ≤ 0,05. 456 genes were found to be down-regulated and 293 genes to be up-regulated after SOX2 knock down. The top up-regulated gene was vimentin and its inverse expression with SOX2 was confirmed by quantitative real time polymerase chain reaction. Indeed, immunofluorescence showed inverse expression of SOX2 and vimentin. Ingenuity pathway analysis of transcriptome data revealed an enrichment of differentially expressed genes with a functional annotation in cell mobility and cellular movement. In line with these findings, SOX2 silenced cells showed increased migration as compared to controls in two independent HNSCC cell lines, from tongue and hypopharynx, suggesting a higher risk for local recurrence and metastasis of tumors with low or no SOX2 expression. In addition, SOX2 negative cells were preferentially localized in the “invasion front” whereas SOX2 positive cells were seen in the center of the cell colonies, suggesting that silencing SOX2 could be a necessary step to initiate migration in HNSCC cells. On the other hand we also found that cell survival decreased after SOX2 knock down coherently with SOX2 role as an oncogene. Also, after apoptosis induction with doxorubicin, HNSCC SOX2 silenced cells had significantly more apoptosis than control. Interestingly, Antigen Presentation Pathway was the main affected pathway after the knock down of SOX2. The genes involved in this pathway that were found affected in our trancriptome data were mainly HLA class I, and they were all down-regulated after SOX2 knock down, showing a positive correlation with SOX2. This finding suggests a role of the transcription factor SOX2 in the underlying immune response of HNSCC and could indicate a promising approach for new therapies development for SOX2 expressing tumors. In addition to the potential of SOX2 as prognostic biomarker, a better understanding of the underlying molecular mechanisms could help to establish new strategies for targeted therapy.

Orientador: Jacks Jorge Junior / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-09T19:48:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Campagnoli_EduardoBauml_D.pdf: 15962845 bytes, checksum: 0ed7f5d5b20c8803dc7f1a23bf3b1d5d (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: O carcinoma espinocelular de boca é um dos cânceres mais comuns do mundo, logo a compreensão das vias moleculares envolvidas no processo de carcinogênese poderá auxiliar no desenvolvimento de drogas para o tratamento e prevenção deste tipo de neoplasia. FAS é uma das enzimas metabólicas que participam da síntese endógena de ácidos graxos, enquanto ErbB-2 é um receptor de membrana celular responsável pelo crescimento e diferenciação de vários tipos celulares. Já a proteína p27 é inibidora do ciclo celular e Skp2 é uma ubiquitina ligase que atua na ubiquitinização e degradação de p27. Estudos têm demonstrado que a inibição da FAS desencadeia o processo de apoptose em diversas linhagens de células neoplásicas. Recentemente relatou-se que o Orlistat apresenta efeito inibitório sobre a FAS. Portanto, o objetivo deste estudo foi comparar a expressão de FAS, ErbB-2, p27 e Skp2 em epitélios com displasia leve, moderada, severa e no carcinoma espinocelular quimicamente induzidos, bem como verificar o efeito do Orlistat no processo de carcinogênese bucal. Para tanto, camundongos foram expostos ao 1-óxido 4-nitroquinolina (4NQO) durante 16 semanas e sacrificados ao completarem 16, 18, 20 e 25 semanas. Um dos grupos também recebeu injeção intraperitonial de Orlistat (240 mg/kg) diária, durante quinze dias. Após o sacrifício dos animais, a língua foi removida, emblocada em parafina e cortes histológicos obtidos. Presença de displasias e neoplasias malignas foram avaliadas em lâminas coradas por hematoxilina e eosina. Reações imunohistoquímicas foram realizadas com os anticorpos: Ki-67 (marcador de proliferação celular), FAS, ErbB-2, p27 e Skp2. O índice de proliferação celular (Ki-67) foi de 26,57%, 22,85%, 26,12% e 23,86% nas áreas de displasia leve, moderada, severa e carcinoma invasivo, respectivamente. O epitélio normal teve índice de proliferação celular de 4,31%. ErbB-2 exibiu aumento na expressão tanto nas áreas displásicas como tumorais, sendo que ambas apresentaram mais de 50% de células imunomarcadas. Aumento na expressão da FAS diferiu de modo estatisticamente significante, em relação ao epitélio normal, somente nas áreas com displasia severa e de carcinoma invasivo, embora aumento gradual na expressão desta proteína tenha sido observado durante todo o processo de carcinogênese. A quantidade protéica de p27 aumentou gradualmente durante a carcinogênese, sendo as maiores taxas encontradas nas áreas de displasia severa (57,50% de células imunomarcadas) e carcinoma invasivo (53,55% de células positivas). Para Skp2 verificou-se imunomarcação exclusivamente citoplasmática (Skp2-B), a qual esteve aumentada tanto nas áreas displásicas como tumorais. Os camundongos tratados com Orlistat tiveram área tumoral 67,25% menor do que os animais não tratados. Além disso, houve diminuição na proliferação celular (2,58% de positividade celular), bem como menor número de células imunomarcadas contra as proteínas p27 e Skp2-B. Com base nesses resultados concluiu-se que durante o processo de carcinogênese bucal induzida por 4NQO houve aumento na proliferação celular (Ki-67) e na expressão das proteínas FAS, ErbB-2, p27 e Skp2-B (citoplasmática), sendo que ErbB-2 e Skp2-B tiveram aumento significativo já nos estágios iniciais da carcinogênese. Além disso, o Orlistat apresentou efeito antitumoral e antiproliferativo em carcinomas espinocelulares de língua quimicamente induzidos / Abstract: Squamous cell carcinoma of the oral cavity is one of the most common malignant epithelial neoplasms, and a better understanding of its molecular pathways could help the development of new treatment or preventive agents. Several proteins such as Fatty Acid Synthase (FAS), ErbB-2, p27 and Skp2 are involved in the tumorigenesis process. FAS has an enzyme with multiple functions, including the endogenous synthesis of saturated fatty acids. ErbB-2 is a transmembrane receptor that may have a role in cellular growth and differentiation. p27 is a cyclin-dependent kinase inhibitor and plays an important role on the negative regulation of the cell cycle. On the other hand, Skp2 is an ubiquitin ligase that targets p27 for ubiquitination and degradation. Studies have demonstrated that FAS inhibition induces apoptosis in various neoplastic cells and can suppress tumor cell proliferation. It has been demonstrated that Orlistat has anti-proliferative and anti-tumor properties through blocked FAS activity. Therefore, the aim of the present study was to investigate FAS, ErbB-2, p27 and Skp2 expression in the epithelium with chemically-induced dysplasia and squamous cell carcinoma, and to verify the effect of Orlistat on the carcinogenic process. Lesions were induced by 4NQO in the drinking water to C57BL/6 mice during 16 weeks. The animals were sacrificed after 16, 18, 20 and 25 weeks of treatment. One group also received intraperitonial injection of Orlistat, 240 mg/kg/day, during fifteen days. The tongues were removed and paraffin embedded tissues were cut and stained with hematoxylin and eosin. Dysplastic lesions and squamous cell carcinomas were analyzed in slides stained with hematoxylin and eosin. Immunohistochemistry assays were performed for Ki-67, FAS, ErbB-2, p27 and Skp2. The percentage of cells that reacted with the Ki-67 antibody was 26.57%, 22.85%, 26.12% and 23.86% in areas with mild, moderate, severe dysplasia and invasive carcinoma, respectively. The normal epithelium had low index of cellular proliferation, 4.31%. ErbB-2 showed increase in the expression in dysplastic and tumor areas, for both presented more 50% of positive cells. High expression of FAS was observed in areas with severe dysplasia and squamous cell carcinoma, although gradual increased was observed during all the carcinogenic process. Expression of p27 protein increased gradually during carcinogenesis and the biggest levels were detected in areas with severe dysplasia (57.50% of immunostaining cells) and invasive carcinoma (53.55% of positive cells). Skp2 immunoexpression was strictly cytoplasmic (Skp2-B), and it was increased in tumoral and dysplastic areas. Lesions of mice treated with Orlistat showed a 67.25% reduction when compared with non-treated animals. Moreover, cellular proliferation was reduced (2.58% of cellular immunostaining), and there were less cells immunostained for p27 and Skp2-B. Therefore dysplastic areas showed increased expression of Ki-67 and high expression of FAS, ErbB-2, p27 and Skp2-B, when compared with normal epithelium. ErbB-2 and Skp2-B had increased expression in the early stages of carcinogenesis. Moreover, Orlistat showed anti-tumoral and anti-proliferative effect in chemically-induced quamous cell carcinomas of the tongue / Doutorado / Estomatologia / Doutor em Estomatopatologia

Orientador : Luis Carlos Spolidorio / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-01T09:50:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Neves_KarinaAntunes_M.pdf: 4975751 bytes, checksum: 9385141d1248aa76b0b532064f2771f1 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A ciclosporina A (CsA) é a principal droga imunossupressora usada na prevenção e tratamento da rejeição de enxertos em transplantes alogênicos. As neoplasias malignas são relatadas entre os efeitos colaterais da CsA. O objetivo deste trabalho foi avaliar a carcinogênese bucal de ratas tratadas diariamente com 10 mg/Kg peso corporal/dia de CsA, por via subcutânea, e que receberam aplicação tópica do carcinógeno óxido de nitroquinolina (4NQO) a 0,5% em propilenoglicol no palato, 3 vezes por semana. O período experimental foi de 240 dias. O palato e a língua de todas as ratas tratadas com 4NQO ou com a associação de 4NQO e CsA apresentaram alterações tais como, áreas esbranquiçadas, atrofia de papilas e ulcerações. Microscopicamente, foram observadas hiperqueratose, vários graus de displasia epitelial, carcinoma microinvasivo e carcinoma espinocelular grau I. Tanto no palato quanto na língua,as alterações tenderam ser mais pronunciadas ou intensas quando associou-se à carcinogênese o tratamento imunossupressor com a CsA / Abstract: Cyclosporin A (CsA) is an imunossupressive agent extensively used for the treatment and prevention of allograft rejection in transplanted recipients. Malignant disease are related between the side effects of CsA treatment. The aim of this investigation was to avaliate oral carcinogenesis in rats receiving CsA treatment (10 mg/Kg weightlday), and topic applications of the 4- nitroquinoline 1-oxide (4NQO) carcinogen 0,5% in propylenoglicol, 3 times a week. The experimental investigation took 240 days. In ali rats treated with 4NQO and with the association of CsA and 4NQO, macroscopic alterations as whitening mucosa, exofitic growth and ulcers were found in palate and tongue. Microscopically finds were hyperqueratosis, ephitelial dysplasia in several scores, microinvasive carcinoma and invasive squamous cells carcinoma grade I. Ali the alterations found in this investigation tended to be more pronunciated or severe when CsA was associated with 4NQO, in both palate and tongue / Mestrado / Estomatologia / Mestre em Estomatopatologia

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / El  carcinoma  oral  de  células  escamosas  (COCE)  es  la  neoplasia  maligna  más  frecuente  en  cavidad  oral.  La  literatura  señala  un  posible  rol  etiológico  del  virus  papiloma  humano  (VPH)  en  cánceres  de  cabeza  y  cuello,  sin  embargo,  en  carcinomas orales su  participación  es aún  controversial.  Por  su  parte,  la  proteína     β­catenina actúa como regulador en la vía Wnt canónica, cuya activación induce su  estabilización,  acumulación  citoplasmática  y  posterior  translocación  nuclear,  afectando la transcripción de genes asociados a crecimiento y proliferación celular.  La  acumulación  nuclear  de  β­catenina  en  cánceres  cervical  y  orofaringeo  VPH  positivos parece ser directa consecuencia de la expresión de oncoproteínas virales  E6/E7  del  VPH.  Dicha  acumulación  serviría  como  un  posible  marcador  para  diferenciar  poblaciones  VPH  positivas  versus  VPH  negativas.  Sin  embargo,  no  existen estudios al respecto en COCE.   El objetivo de este estudio fue asociar expresión nuclear de β­catenina y presencia  de VPH de alto riesgo (VPH­AR) en COCE.  Estudio observacional analítico de corte transversal. Se utilizó una muestra de 60  casos con diagnóstico COCE. Se realizó PCR para amplificación de VPH genérico  y  técnica  de  inmunohistoquímica  para  detección  β­catenina.  Posteriormente  se  efectuó el análisis estadístico de los datos mediante software Stata 11.0.   De un total de 60 casos analizados a través de PCR convencional, 8 casos (13.3%)  resultaron positivos en la detección de VPH genérico. 7 muestras de COCE (11.6%)  mostraron expresión  nuclear  de  β­catenina.  Cinco  (71.4%) fueron  VPH positivas;  4  fueron VPH­16, con moderada o intensa expresión nuclear en más del  70% de las  células;  una muestra fue  VPH­18.  Dos muestras  VPH­negativas  tuvieron  expresión  nuclear  de  β­catenina  en  menos  del  10%  de  las  células.  Estas  diferencias  fueron  estadísticamente  significativas  con  un  valor  de  p<0.0001.  La  prevalencia  del  VPH  16/18  en  muestras  de  COCE  fue  similar  a  lo  reportado  en  la  literatura.  Así,  la  expresión de β­catenina nuclear en células epiteliales en COCE estaría relacionado  a la presencia de VPH 16/18. Esto nos permite sugerir a β­catenina como un nuevo  marcador inmunohistoquímico complementario, más efectivo y  que al ser detectado  en  muestras  de  COCE  permitiría  predecir  la  presencia  del  virus.  Palabras  clave:  Carcinoma  Oral  de  Células  Escamosas  (COCE),  Virus  Papiloma  Humano  (VPH), β­catenina.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / El Carcinoma Oral de Células Escamosas (COCE) es el tipo histológico más frecuente de Cáncer Oral, tiende a ser altamente agresivo e infiltrante, generando rápidamente metástasis. Los pacientes afectados presentan una baja sobrevida a los 5 años desde el momento del diagnóstico. La caracterización de moléculas alteradas en COCE es esencial para comprender los mecanismos moleculares involucrados en su patogénesis, autores señalan que tanto Metaloproteinasa-9 (MMP-9), a través de la degradación del colágeno tipo IV, como la expresión nuclear de β-catenina, regulador de la vía Wnt canónica, se asocian en su progresión e invasión. Este estudio tuvo como objetivo determinar la asociación entre β-catenina y MMP-9 en muestras de COCE. Se seleccionaron 50 biopsias con diagnóstico histopatológico de COCE entre los años 2000 y 2013, desde el Servicio de! Anatomía Patológica de la FOUCH, que cumplieron con los criterios de inclusión y exclusión. Las muestras fueron procesadas para el estudio histopatológico y teñidas con anticuerpos monoclonales anti-β-catenina y anti MMP-9, evaluando la expresión de ambas moléculas a través de microscopía!óptica. Se realizó el análisis estadístico mediante el software stata 11.0. Se detectó inmunoreactividad para MMP-9 en todas las muestras en estudio, con un promedio de 82,43% de las células.β-catenina fue detectada en todas las muestras en el citoplasma y en la membrana, en la cual su intensidad fue decreciendo a medida que disminuyó el grado de diferenciación celular a nivel nuclear sólo 7 muestras fueron positivas. No se observó una asociación entre la expresión nuclear de β-catenina y la expresión de MMP-9 en las muestras de COCE. Sin embargo, se evidenció que las muestras con presencia positiva a nivel nuclear de β-catenina presentaron un nivel de expresión mayor de MMP-9 que las muestras negativas. Hubo una distribución similar en la expresión de β-catenina y MMP-9 entre los parámetros clínico-patológicos en las muestras de COCE. Este estudio es un acercamiento para analizar como se relaciona β-catenina y MMP-9 y tratar de comprender su rol en el desarrollo del COCE. Palabras clave: Carcinoma Oral de Células Escamosas (COCE), β-catenina, Metaloproteinasa-9. / Adscrito a Proyecto FIOUCH 13-009

Orientador: Aloisio José Bedone / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-19T18:28:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa-Gurgel_MariaSalete_M.pdf: 1948436 bytes, checksum: 9652cc74f1c4e8abd0a8359398a304a0 (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: O tratamento do carcinoma microinvasivo do colo uterino é bastante controverso, sendo abordado diferentemente nos diversos Serviços. A histerectomia, acompanhada ou não de procedimentos mais radicais, é realizada na quase totalidade dos casos. Mais recentemente, tem-se observado uma tendência à adoção de condutas conservadoras, como a conização nos casos de invasão inicial, desde que se tenha segurança da retirada total da neoplasia. Através da revisão anatomopatológica dos 163 casos tratados no Ambulatório de Oncologia Ginecológica do Departamento de Tocoginecologia da FCM/UNICAMP, no período de 1967 a 1994, que foram submetidos à histerectomia simples ou radical após conização, procuramos estabelecer os fatores de risco para a persistência de tumor residual após esta cirurgia. Não houve influência das dimensões da microinvasão medidas pela profundidade e extensão horizontal da lesão, assim como do seu aspecto focal ou extenso e da presença de invasão vascular do estroma na ocorrência de neoplasia residual. Na análise inicial, o comprometimento das margens cirúrgicas da conização e a presença de sinais histológicos compatíveis com infecção pelo HPV demonstraram estar associados a um aumento significativo de neoplasia residual após conização uterina nos casos de carcinoma microinvasivo do colo uterino. No entanto, ao final do estudo, observou-se que houve interação entre os sinais de HPV e o comprometimento das margens cirúrgicas da conização na presença de tumor residual. / Abstract: The treatment of microinvasive carcinoma of the uterine cervix is controversial, with different approaches by different services. Hysterectomy in performed in almost all cases, associated or not with more radical procedures. Nowadays, there is a trend in adopting conservative conducts, such as conization in patients with early invasion, as long as there can be assured that the whole lesion was removed. Through histological review of 163 cases treated at the Gynecological Oncology Out patient Clinic if the Department of Gynecology and Obstetrics of the University of Campinas, from 1967 to 1994, ali of them undergone simple or radical hysterectomy after conization, it was tried to stablish the risk factors for persistency of residual tumor after conization. The microinvasion size measured by the depth and length of the lesion, its focal or extensive pattern and the presence of stromal vascular space involvement did not influence the occurrence of residual tumor. Initially the surgical margins involvement in conization and the presence of HPV histological signs were associated with on increased incidence of residual tumor after this procedure. Nonetheless, the statistical analysis showed that there was interaction between HPV histological signs and surgical margins involvement on residual tumor. / Mestrado / Mestre em Tocoginecologia

Orientador: Andrigo Barboza De Nardi / Banca: Paola Castro Moraes / Banca: Carlos Henrique Maciel Brunner / Resumo: O carcinoma de células escamosas (CCE) é a segunda neoplasia maligna cutânea que mais acomete os cães. Apesar da cirurgia consistir na terapia de eleição, a eletroquimioterapia (EQT) vem sendo cada vez mais utilizada. O objetivo desta pesquisa foi avaliar a resposta tecidual em CCE cutâneo em cães após 21 dias da EQT. Desta maneira, este é o primeiro estudo a avaliar as modificações nos fatores angiogênicos e reparação tecidual induzidas pela EQT em CCE cutâneo de em cães. Foram avaliados 11 cães, totalizando-se 18 lesões, antes da EQT (D0) e 21 dias após (D21). O protocolo de EQT consistiu na aplicação de sulfato de bleomicina seguida por cloridrato de doxorrubicina utilizando eletroporador LC BK-100. Foram determinados volume tumoral, índice mitótico, necrose microscópica, quantificação das fibras colágenas do tecido conjuntivo (pela coloração de Tricrômico de Masson) e a expressão imuno-histoquímica de fatores angiogênicos VEGF e CD31. Observou-se que a média do volume tumoral foi significativamente inferior ao 21º dia (D21: 21,99±37,55) após a realização da EQT (D0: 29,52±40,95) (p=0,044). Contudo, não foram encontradas diferenças para as demais variáveis (p>0,05). Conclui-se que, em CEC de cães, a EQT não foi capaz de alterar o índice mitótico, a necrose microscópica e as estruturas de colágeno, além dos fatores angiogênicos VEGF e CD31, após 21 dias do tratamento. Apesar disso, no mesmo momento de avaliação, redução significativa do volume tumoral pode ser observada. Su... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Squamous cell carcinoma (SCC) is the second most common cutaneous malignant neoplasm in dogs. Electrochemotherapy (ECT) is a recent technique in veterinary medicine that constitutes an alternative and effective form to treat SCC in dogs and cats. The aim of this study was to evaluate modifications in the angiogenic factors and tissue repair induced by ECT after 21 days of ECT. Eleven dogs were evaluated (18 lesions), before (D0) and after (D21) ECT. The ECT protocol consisted of the application of bleomycin sulfate followed by doxorubicin hydrochloride using the BK-100 LC electroporator. Tumor volume, mitotic index, microscopic necrosis, quantification of connective tissue collagen fibers (by Masson's trichrome staining) and immunohistochemical expression of angiogenic factors by VEGF and CD31 were determined. It was observed a significant reduction in size of the tumor volume after ECT (D0: 29.52 ± 40.95; D21: 21.99 ± 37.55) (p = 0.044). However, no differences were found in D0 and D21 for mitotic index, microscopic necrosis, collagen structures and angiogenic factors (p> 0.05). In conclusion, ECT is an effective technique to treat cutaneous SCC in dogs, however cell proliferation, necrosis and angiogenic factors were not affected after 21 days of ECT, suggesting a prior moment to be evaluated. Further studies on other angiogenic markers and tissue repair in cutaneous SCCs of dogs submitted to ECT are necessary. / Mestre

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario Tesis para optar al Grado de Magíster en Ciencias Animales y Veterinarias / Los erizos de tierra han adquirido un importante rol como mascotas en diversos países. Esta especie tiene predisposición a desarrollar lesiones orales, incluyendo la presencia de tumores. La mayoría de estas lesiones son neoplasias malignas con mal pronóstico; sin embargo, algunas son neoplasias benignas o lesiones no neoplásicas. Es por ello que es fundamental la evaluación completa de la cavidad oral durante el examen clínico rutinario, ya que identificar adecuadamente un tumor oral permitirá establecer un diagnóstico y pronóstico preciso. El objetivo de este estudio fue caracterizar clínica y patológicamente lesiones neoplásicas orales de erizos de tierra. Durante un año, 21 individuos fueron diagnosticados con un tumor oral, de los cuales se obtuvo muestras de tejido. 52% fueron hembras y 48% machos y el rango de edad fue 2 a 6,5 años (mediana = 4,3 años). Diecisiete (81%) casos fueron carcinoma de células escamosas (CCE) poco diferenciado (Grado 3), 2 fibromas odontogénicos periféricos (9,5%), un sarcoma indiferenciado (4,8%) y un hemangiosarcoma (4,8%). La morfología microscópica de estas neoplasias fue similar a la descrita en otras especies domésticas. Macroscópicamente, el CCE se presentó como un tumor altamente invasivo ulcerativo o nodular, ocasionando una deformación facial en todos los ejemplares. Las otras neoplasias fueron pólipos no invasivos con buen pronóstico posterior a la extirpación quirúrgica. Se detectó expresión de Ki67, VEGFR-2 y COX-2 en la mayoría de las muestras de CCE oral. En particular, sólo la expresión de VEGFR2 fue significativamente (p = 0,01) mayor en CCE en relación con la hiperplasia gingival. En conclusión, la mayoría de los tumores de cavidad oral en erizos de tierra fueron altamente malignos y fueron diagnosticados como CCE poco diferenciado. Adicionalmente, los tumores orales pueden ser similares en su aspecto, en etapas tempranas; sin embargo, histológicamente pueden tener diagnósticos y pronósticos distintos. Entonces, ante la detección de una masa oral se debe realizar un estudio histológico junto con el examen clínico completo. / African pigmy hedgehogs have become popular pets in several countries. One of the main medical concerns in this species is their propensity to develop oral lesions, many of which are tumors. Most of these masses are malignant neoplasms with poor prognosis; however, some of them are benign neoplasms or non-neoplastic lesions. Since the examination of the oral cavity is an important part of routine veterinary check-ups, recognizing these lesions can improve diagnosis and prognosis. The purpose of this study was to establish a clinic and pathologic characterization of oral cavity neoplasms presented in hedgehogs. Tissue samples were obtained from twenty-one privately owned hedgehogs that were diagnosed with oral cavity masses during a one-year period. 52% were female and 48% male and the ages ranged from 2 to 6.5 years (median = 4,3 years). Seventeen (81%) cases were diagnosed as poorly differentiated squamous cell carcinomas (SCC), 2 peripheric odontogenic fibromas (9,5%), one undifferentiated sarcoma (4,8%) and one hemangiosarcoma (4,8%). It is important to remark that the microscopic morphology was similar to that described in other domestic animals. At gross examination, SCCs were highly invasive masses that could be ulcerative or nodular, causing face deformation in all cases. The other masses were non-invasive, polypoid and exhibited a good prognosis after surgical excision. Immunohistochemical expression of some cancer biomarkers were assessed in the SCC samples. There were Ki67, VEGFR-2 and COX-2 expression in almost all samples of SCC. A statistical significance association (Fisher exact test) was determinated between VEGFR-2 expression and SCC (p = 0,01). In conclusion, most of the oral cavity masses of African hedgehogs are highly malignant and the majority were poorly differentiated SCC. Also, it is important to remark that oral masses could be similar grossly, especially in initial stages, however histologically different diagnoses and prognosis could be made. Therefore, if an oral mass is detected, a throughout physical examination should always be accompanied with a histologic study. / Proyecto U-INICIA UI 009/16.

O câncer de boca representa uma importante condição de saúde uma vez que apresenta um índice de mortalidade de 3% a 10% em todo o mundo e a maioria dos casos diagnosticados se apresentam em estádios avançados. O diagnóstico tardio do câncer de boca é um dos principais fatores que comprometem o prognóstico e a sobrevida do paciente. Muitos avanços ocorreram no campo da oncologia e mesmo assim os carcinomas de cabeça e pescoço continuam com altas taxas de morbidade e mortalidade. A ciclina D1 e o Ki-67 são marcadores biológicos que se destacam nas pesquisas atuais provavelmente relacionadas com a progressão tumoral. Dentro dos objetivos propostos, este estudo visou avaliar a expressão destes marcadores pela técnica de imunoistoquímica e correlacioná-las com os dados clínicos e morfológicos nos carcinomas de células escamosas da língua. Dos 30 pacientes estudados, 9 (30%) foram a óbito pela doença, 7 (23,3%) se encontram vivos com doença em atividade e 14 (46,7%) se encontram vivos sem atividade da doença. Dentre as análises estatísticas, observou-se que quanto maior o T, maiores são as chances de recidivas e menor a probabilidade de sobrevida livre de doença. O estadiamento T também mostrou possível associação com a ciclina D1 e Ki-67. Quanto maior a contagem dos marcadores pior foi a sobrevida global e a sobrevida livre de doença e a sobrevida global está inversamente relacionada ao estadiamento T e N. Enfatiza-se, portanto, a importância do estadiamento TNM para o seguimento dos carcinomas de células escamosas de língua e chama-se atenção para a relação positiva da expressão destes marcadores com a pior sobrevida destes pacientes. / Oral cancer is a major health condition since has a mortality rate of 3 % to 10 % worldwide, with most cases diagnosed in advanced stages are presented. Late diagnosis of oral cancer is one of the main factors that impact the prognosis and patient survival. Many advances have occurred in the field of oncology and still carcinomas of the head and neck continue with high rates of morbidity and mortality. The cyclin D1 and Ki-67 are biological markers that stand out in the current research probably related to tumor progression. Among the proposed objectives, this study aimed to evaluate the expression of these markers by immunohistochemistry and correlate them with clinical and morphological data in squamous cell carcinomas of the tongue. In 30 patients, 9 (30 %) died from the disease, 7 (23.3 %) are alive with active disease and 14 (46.7 %) were alive without disease activity . Among the statistical analysis, was observed that the higher the T, the greater the chances of recurrence and lower the probability of disease-free survival. The T stage also showed possible association with the cyclin D1 and Ki -67. The higher the count of markers was worse overall survival and disease-free survival and overall survival is inversely related to T and N staging. Emphasize, therefore, the importance of TNM staging for the monitoring of squamous cell carcinomas of the tongue and attention to the positive relationship between the expression of these markers with worse patient survival.