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Nematóides entomopatogênicos (Rhabditida, Heterorhabditidae) no controle biológico de Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari, Ixodidae)

Monteiro, Caio Márcio de Oliveira 18 February 2009 (has links)
Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-04-04T14:29:38Z No. of bitstreams: 1 caiomarciodeoliveiramonteiro.pdf: 1857142 bytes, checksum: 6df29461b8db39b06498cf5c935d15f1 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-04-04T15:38:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 caiomarciodeoliveiramonteiro.pdf: 1857142 bytes, checksum: 6df29461b8db39b06498cf5c935d15f1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-04T15:38:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 caiomarciodeoliveiramonteiro.pdf: 1857142 bytes, checksum: 6df29461b8db39b06498cf5c935d15f1 (MD5) Previous issue date: 2009-02-18 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Em vista do atual quadro de resistência do carrapato dos bovinos aos carrapaticidas comerciais, somando-se ainda a necessidade de preservação ambiental e de alimentos livres de resíduos, novas alternativas no controle deste artrópode vem ganhando maior atenção. Entre estas podemos destacar a utilização de nematóides entomopatogênicos como promissores agentes de controle biológico de ixodídeos e, desta forma, a Embrapa Gado de Leite vem desenvolvendo uma linha de pesquisa que investiga interações entre este ixodídeo e estes nematóides. Com objetivo de avaliar a eficiência de duas espécies de nematóides no controle do carrapato dos bovinos, o presente trabalho foi dividido em três experimentos que avaliaram o potencial “in vitro” de Heterorhabditis bacteriophora HP88 e Heterorhabditis amazonensis RSC-5 como controladores biológicos de Rhipicephalus (Boophilus) microplus. O estudo foi desenvolvido no Laboratório de Parasitologia da Embrapa Gado de Leite, Juiz de Fora, Minas Gerais. No primeiro experimento foi avaliada a eficiência de diferentes dosagens de juvenis infectantes de H. bacteriophora HP88 no controle do carrapato dos bovinos. A eficácia dos tratamentos foi superior a 90% em todas as concentrações utilizadas, demonstrando que este isolado foi altamente eficaz na redução da prole de R. (B.) microplus em condições de laboratório. No segundo experimento, foi feita a mesma avaliação, xiv entretanto foi empregado o nematóide H. amazonensis RSC-5. Os resultados alcançados com H. amazonensis RSC-5 foram inferiores aos obtidos com H. bacteriophora HP88, sendo que a melhor eficácia foi de 67% no tratamento com 300 NEPs/fêmea. Por ter sido mais eficiente, H. bacteriophora HP88 foi à espécie selecionada para o desenvolvimento do terceiro experimento, que buscou avaliar o efeito de diferentes tempos de exposição de fêmeas ingurgitadas de R. (B.) microplus a juvenis infectantes deste nematóide. Os resultados alcançados mostram que tempos de exposição inferiores a 24h não são suficientes para que o nematóide exerça controle eficiente sobre este ixodídeo. Entretanto, a partir de 24h de exposição o percentual de controle foi de 82%, e com 48 e 72h esta eficácia chegou a 100%. Os resultados alcançados no presente estudo demonstram que “in vitro” estes nematóides são eficientes no controle do carrapato dos bovinos, entretanto, ainda é necessária a realização de estudos futuros para investigar o potencial destes agentes de controle biológico em condições de campo e os possíveis impactos que esta utilização possa causar. / Because of the widespread resistance of cattle ticks to commercial carrapaticides and the need to protect the environment and food supply from chemical residues, there is increasing interest in finding new control alternatives. Among these is the use of entomopathogenic nematodes as biological control agents. In this effort, the Embrapa Dairy Cattle Research Center (Embrapa Gado de Leite) has been conducting a line of research investigating the interactions between cattle ticks and these nematodes. The present work examines the efficiency of two nematode species in the control of cattle ticks. We conducted three experiments to evaluate the in vitro potential of Heterorhabditis bacteriophora HP88 and Heterorhabditis amazonensis RSC-5 as biological controls of Rhipicephalus (Boophilus) microplus. The study was conducted in the Parasitology Laboratory of Embrapa Gado de Leite in Juiz de Fora, Minas Gerais, Brazil. In the first experiment the efficiency was evaluated of different concentrations of infective juveniles of H. bacteriophora HP88 to control the ticks. The efficiency of the treatment was greater than 90% at all the concentrations tested, demonstrating this isolate is highly effective in reducing the reproductive capacity of R. (B.) microplus in laboratory conditions. In the second experiment, the same evaluation was carried out employing different concentrations of the nematode H. amazonensis RSC-5. The results were inferior to those obtained with H. bacteriophora HP88. The best efficacy xvi was 67% in the treatment with 300 EPNs/female. Because it was more efficient, we chose H. bacteriophora HP88 for the third experiment, which evaluated the effect of different exposure times of engorged females of R. (B.) microplus to infective juveniles of this nematode. The results obtained show that exposure times shorter than 24 hours are not sufficient for the nematode to have a significant control effect on this tick. However, with exposure for longer than 24 h the control percentage rose to 82%, and at 48 and 72h it reached 100%. The results obtained in this study show that in vitro these nematodes are efficient in controlling cattle ticks, but further studies are necessary to investigate the of these biological control agents under field conditions and the possible impacts this can cause.
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Eficácia carrapaticida do timol em solubilização etanólica sobre larvas de Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari: Ixodidae)

Goldner, Márcio Scoralick January 2011 (has links)
Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-06-22T11:15:51Z No. of bitstreams: 1 marcioscoralickgoldner.pdf: 1368658 bytes, checksum: 524048ed973021e443fbeb565aadcf5d (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-06-24T13:12:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 marcioscoralickgoldner.pdf: 1368658 bytes, checksum: 524048ed973021e443fbeb565aadcf5d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-24T13:12:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 marcioscoralickgoldner.pdf: 1368658 bytes, checksum: 524048ed973021e443fbeb565aadcf5d (MD5) Previous issue date: 2011 / O uso indiscriminado de carrapaticidas sintéticos e o quadro de resistência aos produtos utilizados no mercado impulsionaram novas pesquisas e alternativas ao combate aos parasitos hematófagos. Dentre as alternativas mais promissoras, pode-se evidenciar o uso de substâncias e seus derivados provenientes de plantas com objetivo de implementar de carrapaticidas de origem natural que podem ser menos prejudiciais ao meio ambiente. O presente trabalho teve por objetivo potencializar ‘’in vitro’’ a eficácia carrapaticida do timol frente a larvas de R. (B.) microplus. No primeiro experimento, foram elaboradas três formulações, visando à escolha do preparado com melhor custo-benefício sem que os diferentes componentes das formulações interferissem na eficácia carrapaticida. A formulação de escolha demonstrou a mortalidade de 96,65% das larvas mantendo a eficácia carrapaticida do timol a 2% acima dos limites preconizados pelo Ministério da Agricultura de 95% para produtos comerciais. No segundo experimento, foram testadas, na formulação eleita, as concentrações de 0,25%%, 0,5% e 1% de timol sobre larvas de R. (B.) microplus, sendo que a taxa de mortalidade obtida com 0.25% foi de 94%, demonstrando que mesmo com baixa concentração de timol a eficácia carrapaticida foi considerável. Os resultados alcançados mostram que, in vitro, a eficácia carrapaticida do timol pode ser não somente mantida, como potencializada se for levada em consideração a metodologia de preparo da formulação, bem como características físico-químicas dos seus componentes, visando minimizar perdas do princípio ativo. Entretanto, são necessárias pesquisas futuras para ratificar o potencial acaricida do timol em ambiente de campo, modificando e testando diferentes apresentações. / The indiscriminate use of synthetic acaricides and the picture of resistance to products used in the market spurred new research and alternatives to combat these hematophagous parasites. Among the most promising alternatives, it can be highlight the use of substances and their derivatives from plants, aiming to implement the carrapaticide products of natural origin that may be less harmful to the environment. This study aimed to ''enhance'' the in vitro acaricide efficacy of thymol against the larvae of R. (B.) microplus. In the first experiment, three formulations were prepared, in order to choose the most cost-prepared without any of the different components interfere with the efficacy of insecticide formulations. The formulation of choice showed 96.65% mortality of larvae still remain effective insecticide of the thymol 2% above the limits established by the Ministry of Agriculture of 95% for commercial products. In the second experiment, were tested in the formulation choice, the concentrations of 0.25%, 0.5% and 1% of thymol on larvae of R. (B.) microplus, with a mortality rate of 94% with 0.25% of thymol, demonstrating that even in low concentrations of thymol acaricide efficacy was considerable. The results show that in vitro, acaricide efficacy of thymol can be not only maintained, as increased if it is taken into account the preparation method of the formulation and the physicochemical characteristics of its components in order to minimize losses of active. However, further research is needed to ratify the acaricidal potential of thymol in a field environment, modifying and testing different presentations and to assess its impact on the environment.
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Efeito de formula??es oleosas de fungos entomopatog?nicos no controle do carrapato Rhipicephalus microplus / Effect of oil-based formulations of entomopathogenic fungi to control Rhipicephalus microplus ticks

Camargo, Mariana Guedes 18 August 2011 (has links)
Submitted by Sandra Pereira (srpereira@ufrrj.br) on 2016-09-08T13:37:00Z No. of bitstreams: 1 2011 - Mariana Guedes Camargo.pdf: 1490617 bytes, checksum: fa92cbaf85207d3979daee781f5d74b1 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-08T13:37:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011 - Mariana Guedes Camargo.pdf: 1490617 bytes, checksum: fa92cbaf85207d3979daee781f5d74b1 (MD5) Previous issue date: 2011-08-18 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / The formulations of entomopathogenic fungi to control ticks has been widely studied. The present study evaluated the efficacy of Metarhizium anisopliae sensu lato (s.l.) and Beauveria bassiana oily formulations on different Rhipicephalus microplus stages. The efficacy of conidial aqueous suspensions was compared to the efficacy of conidia formulated in 10, 15 or 20% mineral oil. Twelve groups were studied: one control aqueous, three control groups oil-based at 10%, 15% or 20%, two fungal aqueous suspensions of M. anisopliae s.l. or B. bassiana and M. anisopliae s.l. or B. bassiana oil-based formulations at 10%, 15% or 20%. To prepare aqueous suspensions and oily formulations, fungal isolates were cultivated on grains rice in polypropylene bags. The conidial suspensions and formulations had concentration of 108 conidia/mL. Bioassays were repeated twice. After treatment, the biological parameters of engorged females were evaluated; the following parameters were evaluated in the bioassays with eggs: period of incubation, period of hatch and hatching percentage; in bioassays with larva mortality was evaluated. Metarhizium anisopliae s.l. and B. bassiana oil-based formulations were more effective than aqueous suspensions to R. microplus eggs, larvae and engorged females. Metarhizium anisopliae s.l. oil-based formulations caused significant effects in all biological parameters of engorged females while B. bassiana oil-based formulations modified significantly the nutritional index only. Metarhizium anisopliae s.l. and B. bassiana formulated in mineral oil caused a control percentage up to 93.69% and 21.67%, respectively, while M. anisopliae s.l. and B. bassiana aqueous suspension caused a control percentage of 18.70% and 1.72%, respectively. Eggs treated with M. anisopliae s.l. and B. bassiana oil-based formulations had reduced percentage of hatch up to 102.5 and 3.65 times, respectively. In the bioassay with larvae, M. anisopliae s.l. oil-based formulations caused approximately 100% mortality five days after treatment, while larva treated with B. bassiana oil-based formulations reached 100% mortality only at day 20 after treatment. Larva from oil-based control groups had mortality at day 15 after treatment, indicating possible toxic effect off the oil for this R. microplus stage. The results showed that M. anisopliae s.l., Ma 959 isolate, was more virulent to R. microplus engorged females, eggs and larvae than B. bassiana, Bb 986 isolate. The fungal mineral oily formulations tested were more effective than the aqueous suspension. Oil-based formulations at 10%, 15% or 20% enhances the activity of M. anisopliae s.l., Ma 959, and B. bassiana, Bb 986, to R. microplus tick and can be used as an adjuvant for oily formulations / A utiliza??o de formula??es de fungos entomopatog?nicos no controle de carrapatos tem sido amplamente estudada. O presente estudo avaliou a efic?cia de formula??es do isolado Ma 959 de Metarhizium anisopliae sensu lato (s.l.) e Bb 986 de Beauveria bassiana contendo 10%, 15% e 20% de ?leo mineral sobre ovos, larvas e f?meas ingurgitadas de Rhipicephalus microplus, al?m de comparar a efici?ncia entre formula??es oleosas e suspens?es aquosas dos mesmos isolados f?ngicos sobre as fases do desenvolvimento do carrapato R. microplus. Foram formados doze grupos: controle aquoso e controles com 10%, 15% ou 20% de ?leo mineral, suspens?o aquosa de M. anisopliae s.l. ou B. bassiana e formula??es de M. anisopliae s.l. ou B. bassiana contendo 10%, 15% ou 20% de ?leo mineral. Para o preparo das suspens?es aquosas e formula??es oleosas, os isolados f?ngicos foram cultivados em gr?os de arroz acondicionado em sacos de polipropileno. As suspens?es e formula??es conidiais utilizadas possu?am concentra??o de 108 con?dios/mL. Os bioensaios foram repetidos duas vezes. Os par?metros biol?gicos das f?meas ingurgitadas foram avaliados; em rela??o aos ovos foram avaliados os per?odos de incuba??o e eclos?o e o percentual de eclos?o, e para larvas foi avaliado o percentual de mortalidade. As formula??es oleosas de M. anisopliae s.l. e de B. bassiana foram mais eficazes sobre ovos, larvas e f?meas ingurgitadas de R. microplus do que as suspens?es aquosas. O isolado de M. anisopliae s.l. formulado em ?leo mineral causou altera??es significativas em todos os par?metros de f?meas ingurgitadas, entretanto, as formula??es oleosas do isolado de B. bassiana alteraram significativamente somente o ?ndice nutricional. Os isolados f?ngicos de M. anisopliae s.l. e B. bassiana formulados em ?leo mineral apresentaram percentual de controle de at? 93,69% e 21.67%, respectivamente, enquanto que o percentual de controle das suspens?es aquosas de M. anisopliae s.l. e B. bassiana foi de 18,70% e 1,72%, respectivamente. No tratamento de ovos, as formula??es oleosas de M. anisopliae s.l. e B. bassiana causaram redu??o no percentual de eclos?o de at? 102,5 e 3,64 vezes, respectivamente. No bioensaio com larvas, as formula??es oleosas de M. anisopliae s.l. causaram um percentual de mortalidade pr?ximo a 100% no quinto dia ap?s o tratamento, enquanto que as formula??es de B. bassiana atingiram este percentual somente no 20? dia ap?s o tratamento. Os grupos controle contendo ?leo mineral causaram mortalidade de larvas a partir do 15? dia ap?s o tratamento, indicando um poss?vel efeito t?xico do ?leo sobre este est?gio de R. microplus. Os resultados demonstram que o isolado Ma 959 de M. anisopliae s.l. foi mais virulento para f?meas ingurgitadas, ovos e larvas de R. microplus do que o isolado Bb 986 de B. bassiana. As formula??es oleosas dos fungos testados foram mais eficazes do que as suspens?es aquosas. O ?leo mineral utilizado nas concentra??es de 10%, 15% e 20% potencializa a a??o dos isolados Ma 959 de M. anisopliae s.l. e Bb 986 de B. bassiana contra o carrapato R. microplus, podendo ser utilizado como adjuvante em formula??es oleosas.
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Sele??o de isolados de Metarhizium spp. para o controle do carrapato Rhipicephalus microplus: ensaios in vitro da virul?ncia e conidiog?nese / Selection of Metarhizium spp. isolates to the control of the tick Rhipicephalus microplus: in vitro tests of virulence and conidiogenesis

JONES, Giselle Arieiro 22 February 2017 (has links)
Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2017-11-09T18:08:26Z No. of bitstreams: 1 2017 - Giselle Arieiro Jones.pdf: 1320964 bytes, checksum: e8d0ab39f4d7067b17f7ebd4d2d26139 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-09T18:08:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017 - Giselle Arieiro Jones.pdf: 1320964 bytes, checksum: e8d0ab39f4d7067b17f7ebd4d2d26139 (MD5) Previous issue date: 2017-02-22 / CAPES / The parasitism caused by Rhipicephalus microplus, popularly known as cattle tick, causes several losses to the Brazilian livestock. The indiscriminate use of chemical products for its control has generated several negative effects and in this context, studies involving the fungus Metarhizium spp. for biological control of ticks have shown great importance. The present study evaluated the virulence of 11 isolates of Metarhizium spp. for engorged females, eggs and larvae of R. microplus and also the conidiogenesis potential of the same isolates and their relationship with virulence. Single point of inoculum and cultivation between slide and coverslip were performed to evaluate the macro and micromorphology of the isolates. During the bioassay using engorged females, the effects of fungi on reproductive parameters were evaluated by analyzing the control percentage of each isolate after treatment by immersion of females in suspensions of 107 and 108 conidia / mL. The virulence of the isolates for eggs and larvae was evaluated by observing the hatch rate and mortality, respectively, after treatment with aqueous suspensions of Metarhizium spp. at concentrations of 105, 106, 107 and 108 conidia / mL. The LC50 and CL90 of each isolate for larvae were also calculated on the 25th day after treatment. To calculate the conidiogenesis of the isolates, three random cuts of 1.256 cm2 of area of each plate containing fungal conidia of 14 days of culture were made, then stirred in 1 ml of distilled water solution and 0.1% tween 80 and one aliquot of this suspension was quantified using a Neubauer chamber and optical microscope. Parametric data were analyzed by analysis of variance (ANOVA) followed by Tukey test and non-parametric by Kruskal Wallis test followed by Student-Newman-Keuls (SNK) with significance level of 5% through free software R Studio Version 0.99 .903 and the "agricolae" package (Statistical Procedures for Agricultural Research), version 1.2-4. In addition, multivariate statistics were applied using Principal Component Analysis (PCA) for parameters of engorged females. The macro and micromorphological analysis of the isolates tested were compatible with those described in the literature for Metharizium spp. In general, the results were directly proportional to the concentrations that were tested and the isolates ARSEF 729 of Metarhizium anisopliae and ARSEF 3643 of Metarhizium anisopliae senso latu, presented the best results for R. microplus females, eggs and larvae, proving to be good candidates for future studies, whereas the isolate ARSEF 2211 of Metarhizium anisopliae senso latu demonstrated low virulence for all stages. The conidiogenesis of the different isolates tested varied a lot and no relation between conidia production and virulence was observed. The present study made possible the selection of isolates of Metarhizium spp. with high virulence for several stages of life of the R. microplus tick as well as isolates with high conidia production and their relationship with virulence, emphasizing the importance of studies to select suitable isolates for future use in formulations for biological control in the field. / O parasitismo causado por Rhipicephalus microplus, conhecido popularmente como carrapato dos bovinos, acarreta diversos preju?zos para a pecu?ria brasileira. O uso indiscriminado de produtos qu?micos para o seu controle tem gerado diversos efeitos negativos e nesse contexto, estudos envolvendo o fungo Metarhizium spp. para controle biol?gico de carrapatos tem demonstrado grande import?ncia. O presente estudo avaliou a virul?ncia de 11 isolados de Metarhizium spp. para f?meas ingurgitadas, ovos e larvas de R. microplus e tamb?m o potencial de conidiog?nese dos mesmos isolados e a sua rela??o com a virul?ncia. Pontos ?nicos de in?culo e microcultivo entre l?mina e lam?nula foram realizados a fim de avaliar a macro e micro morfologia dos isolados. Durante o bioensaio utilizando f?meas ingurgitadas, foram avaliados os efeitos dos fungos sobre os par?metros reprodutivos atrav?s da an?lise do percentual de controle de cada isolado ap?s o tratamento por imers?o das f?meas em suspens?es aquosas de 107 e 108 con?dios/mL. A virul?ncia dos isolados para ovos e larvas foi avaliada atrav?s da observa??o da taxa de eclos?o e mortalidade, respectivamente, ap?s tratamento com suspens?es aquosas nas concentra??es de 105, 106, 107 e 108 con?dios/mL. Tamb?m foi calculada a CL50 e CL90 de cada isolado para larvas no vig?simo quinto dia ap?s o tratamento. Para calcular a conidiog?nese dos isolados, foram feitos tr?s recortes aleat?rios de 1,256 cm2 de ?rea de cada placa contendo con?dios f?ngicos de 14 dias de cultivo, em seguida foram agitados em 1mL de solu??o de ?gua destilada e tween 80 a 0,1% e uma al?quota desta suspens?o foi quantificada com o auxilio de c?mara de Neubauer e microsc?pio ?ptico. Os dados param?tricos foram avaliados pela an?lise de vari?ncia (ANOVA) seguida do teste de Tukey e os n?o param?tricos pelo teste de Kruskal Wallis seguido de Student-Newman-Keuls (SNK) com n?vel de signific?ncia de 5% atrav?s do software livre R Studio Vers?o 0.99.903 e o pacote ?agricolae? (Statistical Procedures for Agricultural Research), vers?o 1.2-4. Adicionalmente foi aplicada estat?stica multivariada mediante a An?lise de Componentes Principais (ACP) para par?metros de f?meas ingurgitadas. A an?lise macro e micromorfol?gica dos isolados testados se mostrou compat?vel com as descritas na literatura para Metharizium spp. De maneira geral, os resultados se apresentaram diretamente proporcionais ?s concentra??es que foram testadas e os isolados ARSEF 729 de Metarhizium anisopliae e ARSEF 3643 de Metarhizium anisopliae senso latu, apresentaram os melhores resultados para f?meas, ovos e larvas de R. microplus, demonstrando ser bons candidatos para estudos futuros. O isolado ARSEF 2211 de Metarhizium anisopliae senso latu demonstrou baixa virul?ncia para todos os est?gios. A conidiog?nese dos diferentes isolados testados se mostrou muito variada e n?o apresentou nenhuma rela??o com a virul?ncia dos mesmos. O presente estudo possibilitou a sele??o de isolados de Metarhizium spp. com alta virul?ncia para os diferentes est?gios de vida do carrapato R. microplus bem como isolados com alta produ??o de con?dios, ressaltando a import?ncia de estudos que visem selecionar isolados adequados para serem utilizados futuramente em formula??es para controle biol?gico a campo.
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Controle de Rhipicephalus microplus (Acari: Ixodidae): uso de formula??es oleosas de Metarhizium spp. em condi??es seminaturais / Rhipicephalus microplus (Acari: Ixodidae) Control: Metarhizium spp. oil-based formulations in semi-natural conditions

MARCIANO, Allan Felipe 03 October 2016 (has links)
Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2018-08-28T18:22:19Z No. of bitstreams: 1 2016 - Allan Felipe Marciano.pdf: 1368631 bytes, checksum: bba1066f388233008b1c3f41343d33e2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-28T18:22:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016 - Allan Felipe Marciano.pdf: 1368631 bytes, checksum: bba1066f388233008b1c3f41343d33e2 (MD5) Previous issue date: 2016-10-03 / CAPES / CNPq / The tick Rhipicephalus microplus has been considered the most important parasite in cattles. It causes economic lost in dairy and beef cattle. As the fungus Metarhizium spp, a promising biocontrol agent, with remarkable virulence and efficacy against this arthropod. Environmental conditions can directly influence entomopathogenic fungal activity when it is released on the field. Therefore, adjuvants should be used to enhance fungal pathogenicity, stability and viability under unfavorable environmental conditions. Accordingly, several oily vehicles have been studied as adjuvant components. The present study aimed at investigate under semi-natural conditions, the permanence of fungi in the soil, the pathogenicity and the efficacy of two isolates of Metarhizium anisopliae sensu latu (ARSEF 3641 and CG 148) formulated in oil (soy and mineral), on engorged females of R. microplus engorged. The fungus was mass produced on rice cultivation and the semi-natural environment was framed from pots with Brachiaria brizantha cv. Marandu. The experiment was compound of seven groups: Control OLV (treated with vegetable oil and 0,1% of tween 80), Control OLM (treated with mineral oil and 0,1% of Tween 80), Treated 3641 OLV (treated with isolated ARSEF 3641 + vegetable oil); Treated 3641 OLM (treated with ARSEF 3641 isolated + mineral oil); Treated CG 148 OLV (treated with CG148 isolated + vegetable oil); Treated CG 148 OLM (treated with CG 148 isolated + mineral oil). Each group contained ten pots. The soil of each pot was sprayed with 80 ml of formulation at 108 conidia/ml in accordance with the proposed group. Afterwards, 5 engorged females were put on each pot. All pots were daily inspected for evaluating the percent mortality of famales. The efficacy of formulations tested was obtained by comparison of the number of live larvae collected at the apex of forage leaves of the control groups with the number of larvae from the treated groups. The collection of larvae was held on the 7th, 14th and 21st after the hatch. To evaluate the presence of Metarhizium spp. in the soil, a methodology was established to quantify the colonies number found in samples collected from each pot before the spraying and at 3th, 7th, 21th and 60th day after treatment. For the standardization of the methodology set out in the quantification of colonies in the soil, data from three evaluators were confronted by Kaapa test, the statistical analysis of data were submitted to the distribution of normality by the Shapiro-Wilk test. Data were analyzed as nonparametric and we used the Kruskal-Wallis test for analysis of variance followed by the Student-Newman-Keuls to compare the mean. The tested oil fungal formulations showed daily efficacy ranging between 85,08 and 96,13% compared to their respective controls. The group trated with isolated ARSEF 3641 formulated both in mineral oil and vegetable oil showed the better efficacy when compared to the respective control groups. Also, during tick females? laying period, it was possible to observe Metarhizium spp. externalization on R. microplus engorged females cuticle in all groups that were exposed to fungal formulations, confirming the ability of these fungal isolates on develop all growth stages over this arthropod in semi-natural conditions. Both fungal isolates formulated in vegetable or mineral oil showed to be able to remain active in semi-natural environment as they were pathogenic and effective against engorged females, and able to reduce significantly future generations of the tick. / O carrapato Rhipicephalus microplus ? considerado um dos principais agentes de parasitismo em bovinos por representar significativas perdas econ?micas na pecu?ria de leite e corte. Sendo o fungo Metarhizium spp, um promissor agente biocontrolador para este artr?pode, por apresentar grande virul?ncia e efic?cia contra este ectoparasita. Agentes microbianos quando lan?ados a campo, podem sofrer grande influ?ncia pelas intemp?ries ambientais, devendo estes receberem componentes que favore?am a sua patogenicidade, perman?ncia e viabilidade no ambiente, a fim de atingirem resultados satisfat?rios. Visto isto, diferentes ve?culos oleosos v?m sendo alvos de estudos como componentes adjuvantes. O objetivo deste trabalho foi investigar, sob condi??es seminaturais, a perman?ncia no solo, a virul?ncia e a efic?cia de dois isolados do fungo Metarhizium anisopliae s.l. (ARSEF 3641 e CG 148) formulados em ?leo (soja e mineral) sobre f?meas de R. microplus, assim como a taxa e recupera??o de larvas. O fungo foi produzido em massa a partir do cultivo dos isolados em arroz e para a forma??o do ambiente seminatural, sementes de Brachiaria brizantha, cultivar Marandu, foram plantadas em vasos de polipropileno. O experimento foi composto por sete grupos: Controle CTR (grupo sem tratamento); Controle OLV (tratado com ?leo vegetal e Tween 80 a 0,1%), Controle OLM (tratado com ?leo mineral e Tween 80 a 0,1%), Tratado 3641 OLV (tratado com o isolado ARSEF 3641 + ?leo vegetal + Tween 80 a 0,1%); Tratado 3641 OLM (tratado com o isolado f?ngico ARSEF 3641 + ?leo mineral + Tween 80 a 0,1%); Tratado CG 148 OLV (tratado com o isolado 148 + ?leo vegetal + Tween 80 a 0,1%); Tratado CG 148 OLM (tratado com o isolado CG 148 + ?leo mineral + Tween 80 a 0,1%). Cada grupo conteve dez vasos. Foram pulverizados sobre a superf?cie do solo de cada vaso, 80ml da formula??o a 108 con?dios/ml de acordo com o grupo proposto para cada formula??o e posteriormente 5 f?meas ingurgitadas de peso m?dio e homog?neo foram adicionadas em cada vaso. Os mesmos foram vistoriados diariamente para a avalia??o da mortalidade das f?meas. O percentual de efic?cia das formula??es dos isolados testados foi obtido a partir da compara??o entre o n?mero de larvas vivas coletadas no ?pice das folhas da forrageira dos grupos controles e dos grupos tratados. A coleta de larvas foi realizada no 7?, 14? e 21? ap?s a eclos?o das mesmas. Para a avalia??o da presen?a de Metarhizium spp. no solo, foi estabelecido e validada uma metodologia para a quantifica??o do n?mero de col?nias encontradas em amostras coletadas de cada vaso antes da pulveriza??o e no 3?, 7?, 21? e 60? dia ap?s o tratamento. A valida??o do m?todo se fez pelo confronto da avalia??o de tr?s observadores utilizando o teste Kaapa. Para a an?lise estat?stica dos demais dados, os mesmos foram submetidos ? distribui??o da normalidade pelo teste de Shapiro-Wilk sendo classificados como n?o param?tricos e foi utilizado o teste de Kruskal Wallis para an?lise de vari?ncia, seguido do Student-Newman-Keuls para compara??o entre as ordena??es m?dias. Os grupos tratados com as formula??es f?ngicas oleosas apresentaram efic?cia m?dia no controle de R. microplus variando entre 85,08 e 96,13% em rela??o aos seus respectivos grupos controles durante o per?odo de avalia??o do n?mero de larvas infestantes. O isolado ARSEF 3641 formulado tanto em ?leo vegetal quanto em ?leo mineral apresentou os melhores percentuais de efic?cia. Durante o per?odo de postura das f?meas, foi poss?vel encontrar a exterioriza??o de Metarhizium sp. nas mesmas em todos os grupos tratados com as formula??es f?ngicas, confirmando a capacidade dos isolados f?ngicos em se manterem e realizarem todas as fases de desenvolvimento sobre o artr?pode em condi??es seminaturais. Ambos os isolados testados, nas duas condi??es de formula??es propostas, mostraram-se aptos a permanecerem ativos no ambiente seminatural, virulentos e eficazes contra f?meas de R. microplus, sendo capazes de reduzir significativamente gera??es futuras do carrapato.
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Atividade carrapaticida do timol sobre larvas e ninfas de Amblyomma cajennense (Acari, Ixodidae) fêmeas ingurgitadas e ovos de Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari, Ixodidae)

Silva, Andressa Mendes Ribeiro e 24 January 2011 (has links)
Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-09-12T14:45:10Z No. of bitstreams: 1 andressamendesribeiroesilva.pdf: 2026948 bytes, checksum: 19277115bed655135017cdb6e87636f9 (MD5) / Approved for entry into archive by Diamantino Mayra (mayra.diamantino@ufjf.edu.br) on 2016-09-13T12:56:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 andressamendesribeiroesilva.pdf: 2026948 bytes, checksum: 19277115bed655135017cdb6e87636f9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-13T12:56:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 andressamendesribeiroesilva.pdf: 2026948 bytes, checksum: 19277115bed655135017cdb6e87636f9 (MD5) Previous issue date: 2011-01-24 / Dentre as várias espécies de ixodídeos existentes na região neotropical, Rhipicephalus (Boophilus) microplus e Amblyomma cajennense são duas das que despertam maior interesse econômico e em saúde pública, ocasionando perdas na produção animal e atuando como vetores de agentes patogênicos. A utilização de carrapaticidas químicos sintéticos é o método predominante no controle destes artrópodes, entretanto, o uso indiscriminado tem resultado em sérios problemas, como a pressão de seleção de carrapatos resistentes, risco de intoxicação de animais e do homem. Uma alternativa a estes métodos tem sido o uso de substâncias de origem vegetal de pouca ou nenhuma toxidez para animais e humanos. Assim, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade carrapaticida do timol em diferentes concentrações sobre larvas e ninfas de A. cajennense e fêmeas ingurgitadas e ovos de R. microplus. O estudo foi desenvolvido no Laboratório Avançado de Zoologia da Universidade Federal de Juiz de Fora, Minas Gerais, Brasil. No primeiro estudo (subdividido em dois experimentos) foi avaliada a influência de diferentes concentrações de timol (1,0%, 1,5%, e 2,0%) sobre os parâmetros biológicos da fase não parasitária de fêmeas ingurgitadas de R. microplus e também sua atividade sobre ovos deste carrapato. Os seguintes parâmetros biológicos foram observados: peso inicial (mg); peso de massa de ovos (mg); período de pré-postura (dias), período de postura (dias), período de sobrevivência (dias); percentual de eclosão de larvas; índice de produção de ovos (IPO), índice nutricional (IN) e eficácia do tratamento. No primeiro experimento os parâmetros peso da fêmea antes da postura e período de pré-postura não apresentaram diferenças significativas (p>0.05) entre os grupos. As diferentes concentrações de timol causaram alterações nos parâmetros peso da massa de ovos, período de postura, período de sobrevivência, percentual de eclosão de larvas, IPO, e IN, sendo constatadas diferenças altamente significativas entre os grupos tratados e o controle (p<0.01). A eficácia de controle foi superior a 95% em todos os tratamentos, chegando a 99% na concentração de 2,0%. O percentual de eclosão de larvas não foi afetado em nenhum dos tratamentos (p>0.05). No segundo estudo foi avaliado o potencial carrapaticida do timol sobre larvas não ingurgitadas e ingurgitadas e ninfas ingurgitadas de A. cajennense. Os valores referentes à mortalidade de larvas não ingurgitadas foram de 18,2%, 51,8%, 97,6%, 93,5%, 94,5%, e para ninfas ingurgitadas foi de 26,0%, 92,2%; 100,0%, 100,0%, 100,0% nas concentrações de 0,25%; 0,5%; 1,0%; 1,5% e 2,0%, respectivamente. No teste com larvas ingurgitadas a mortalidade foi de 100,0% em todos os tratamentos. Os resultados encontrados no estudo demonstram que o timol possui ação carrapaticida, interferindo na maioria dos parâmetros analisados para R. microplus, apresentando também atividade acaricida sobre imaturos de A. cajennense, sendo larvas e ninfas ingurgitadas mais susceptíveis do que larvas não ingurgitadas. / Among the various species of Ixodidae existing in the Neotropics, Rhipicephalus (Boophilus) microplus and Amblyomma cajennense are two of the ones that arouse more economic and public health interest, causing losses in animal production and acting as pathogens vectors. The use of synthetic chemical acaricide is the predominant method in controlling these arthropods; however, the indiscriminate use has resulted in serious problems such as the pressure on the selection for resistant ticks and the risk of animal and man toxicity. An alternative to this method has been the use of plant origin substances with little or no toxicity to animals and humans. The fore, this study aimed to evaluate the acaricide activity of thymol in different concentrations on larvae and nymphs of A. cajennense and engorged females and eggs of R. microplus. The study was conducted in the Advanced Laboratory of Zoology at the Federal University of Juiz de Fora, Minas Gerais, Brazil. In the first study (divided into two experiments) it was evaluated the influence of different concentrations of thymol (1.0%, 1.5% and 2.0%) on the biological parameters of the non-parasitic phase of R. microplus engorged females and also its activity on the eggs of this tick. The following biological parameters were observed: initial weight (mg), eggs weight mass (mg), pre-oviposition (days), oviposition period (days), survival period (days), percentage of hatching; egg production index (IPO), nutritional index (NI) and treatment efficacy. In the first experiment, the parameters weight of the female before oviposition and pre-oviposition presented no significant differences (p> 0.05) between groups. The different concentrations of Thymol caused changes in the parameters eggs weight mass, oviposition period, survival period, percentage of hatching, IPO, and IN, having found highly significant differences between the treated and control groups (p <0.01) . Control efficacy was greater than 95% in all treatments, reaching 99% at 2.0%. The percentage of hatching was not affected in any treatment (p> 0.05). In the second study it was evaluated the acaricide potential of Thymol on not engorged and engorged larvae and engorged nymphs of A. cajennense. The values concerning the mortality of not engorged larvae were 18.2%, 51.8%, 97.6%, 93.5%, 94.5%, and for engorged nymphs they were 26.0%, 92.2 % 100.0% 100.0% 100.0% at concentrations of 0.25%, 0.5%, 1.0%, 1.5% and 2.0% respectively. In tests with engorged larvae the mortality was 100.0% in all treatments. The results found in this study demonstrate that Thymol has an acaricide action, interfering in the majority of the analyzed parameters for R. microplus, also showing acaricidal activity on immature A. cajennense, being larvae and engorged nymphs more susceptible than not engorged ones.
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Atividade do timol, carvacrol e eugenol sobre larvas de Rhipicephalus microplus (Acari: Ixodidae) e Rhipicephalus sanguineus s.l. (Acari: Ixodidae) em condições laboratoriais e semi-naturais / Activity of thymol, carvacrol and eugenol on larvae of Rhipicephalus microplus (Acari: Ixodidae) and Rhipicephalus sanguineus (Acari: Ixodidae) in laboratorial and semi-natural conditions

Araújo, Laryssa Xavier 12 February 2015 (has links)
Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2015-12-02T19:00:12Z No. of bitstreams: 1 laryssaxavieraraujo.pdf: 1452466 bytes, checksum: 171c39ef6b34539f22d4565011471c2b (MD5) / Rejected by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br), reason: Título: somente primeira letra da primeira palavra em maiúsculo e nomes próprios também. Palavras-chave: primeira letra de cada palavra em maiúsculo. Acrescentar uma em cada linha (não precisa colocar ponto e nem vírgula no final) on 2015-12-03T11:58:48Z (GMT) / Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2015-12-03T13:09:46Z No. of bitstreams: 1 laryssaxavieraraujo.pdf: 1452466 bytes, checksum: 171c39ef6b34539f22d4565011471c2b (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2015-12-03T13:58:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 laryssaxavieraraujo.pdf: 1452466 bytes, checksum: 171c39ef6b34539f22d4565011471c2b (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-03T13:58:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 laryssaxavieraraujo.pdf: 1452466 bytes, checksum: 171c39ef6b34539f22d4565011471c2b (MD5) Previous issue date: 2015-02-12 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Substâncias de origem vegetal como óleos essenciais e seus componentes têm demonstrado potencial para serem empregados no controle de diferentes pragas, incluindo carrapatos. Entre essas substâncias destacam-se os monoterpenos timol e carvacrol e o fenilpropanóide eugenol, moléculas que já tiveram sua atividade evidenciada sobre os carrapatos Rhipicephalus microplus e Rhipicephalus sanguineus s.l., espécies de grande importância econômica. Apesar da ação isolada dessas substâncias sobre carrapatos ter sido demonstrada in vitro em diferentes trabalhos, até o momento não existem estudos sobre o efeito da combinação das mesmas e relato de possível ação sinérgica sobre ixodídeos. Também são escassos os trabalhos que avaliam a atividade dessas substâncias em ambientes naturais ou semi-naturais, visando controlar carrapatos com ações direcionadas sobre a fase não parasitária. Dessa forma, este estudo teve como objetivos, avaliar os efeitos das combinações dos monoterpenos timol e carvacrol e do fenilpropanóide eugenol sobre larvas de R. microplus e R. sanguineus s.l. e avaliar a atividade carrapaticida do timol sobre larvas de R. microplus em condições semi-naturais. O primeiro capítulo traz os resultados dos efeitos das combinações das substâncias sobre as larvas desses carrapatos e para esse fim, foi utilizado o teste de pacote de larvas. Primeiramente foi feito o cálculo de CL50 e em seguida essas substâncias foram testadas em associação ou isoladas em concentrações subletais. Para larvas de R. microplus foram observados valores de CL50 para o timol, carvacrol e eugenol de 1,53; 1,76 e 4,67 mg/mL, respectivamente, e sinergismo entre todas as nove combinações testadas. Os valores de CL50 do timol, carvacrol e eugenol observados para larvas de R. sanguineus s.l., foram de 2,98; 3,29 e 5,19 mg/mL, respectivamente, sendo esse o primeiro estudo a determinar a CL50 dessas substâncias para R. sanguineus s.l. Para esta espécie, oito misturas apresentaram efeito sinérgico e apenas a combinação de carvacrol+timol na concentração da CL50, apresentou efeito sinérgico moderado. No segundo capítulo foi observado, pela primeira vez na literatura, que o timol ao ser aplicado em mudas de Brachiaria decumbens infestadas artificialmente com larvas de R. microplus foi capaz de reduzir 11 significativamente a infestação por esse carrapato. As maiores concentrações (10, 15, 20, 25 e 30,0 mg/mL) ocasionaram eficácias acima de 95% e os valores encontrados para as CL50 e CL90 foram de 3,45 e 9,25 mg/mL, respectivamente. Conclui-se que associações entre timol, carvacrol e eugenol em concentrações subletais apresentam efeito sinérgico sobre larvas de R. microplus e R. sanguineus s.l. e que o timol apresenta potencial para redução de larvas de R. microplus em condições semi-naturais. / Substances of plant origin, such as essential oils and their components have demonstrated the potential to be used to control different pests, including ticks. Among these substances stand out monoterpenes thymol and carvacrol and the phenylpropanoid eugenol, molecules that already had their activity demonstrated against ticks Rhipicephalus microplus and Rhipicephalus sanguineus s.l., species of great economic importance. Despite the isolated action of these substances on ticks has been demonstrated in vitro in different papers, until now there are no studies on the effect of the combination of this substances and report of possible synergistic action on ticks. Also there are few studies that evaluate the activity of these substances in natural and semi-natural environments in order to control ticks with targeted actions on the non-parasitic phase. Therefore, this study aimed to evaluate the effects of combinations of monoterpenes thymol and carvacrol and phenylpropanoid eugenol on larvae of Rhipicephalus microplus and Rhipicephalus sanguineus s.l. and evaluate the insecticidal activity of thymol on larvae of R. microplus in semi-natural conditions. The first chapter presents the results of the effects of combinations of substances on the larvae of these ticks. For R. microplus larvae were observed LC50 values for the thymol, carvacrol and eugenol of 1.53; 1.76 and 4.67 mg/ml, respectively, and synergism between all combinations tested. The LC50 values of thymol, carvacrol and eugenol observed for larvae of R. sanguineus s.l., were 2.98; 3.29 and 5.19 mg/ml, respectively. This is the first work reporting the LC50 values of these three substances against R. sanguineus s.l. For this species, eight combinations showed synergistic effect and only the combination of carvacrol+thymol in the concentration of LC50, showed moderate synergism. In this study it was observed that the larvae of R. microplus were more sensitive to the tested substances and their combinations. In the second chapter it was observed for the first time that thymol when applied in Brachiaria decumbens seedlings artificially infested with larvae of R. microplus was able to significantly reduce the infestation by this tick. The highest concentrations (10, 15, 20, 25 and 30.0 mg/ml) resulted efficiencies above 95% and the values found for the LC50 and LC90 were 3.45 and 9.25 mg/ml, respectively. It is concluded that associations between thymol, eugenol and carvacrol at sublethal concentrations have a synergistic effect on larvae of R. microplus and Rhipicephalus sanguineus s.l. and thymol has the potential for reducing R. microplus larvae in semi-natural conditions.
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Atividade acaricida do extrato metanólico de Acmella oleracea (L.) R.K. Jansen (Asteraceae) e espilantol sobre Rhipicephalus microplus (Acari: Ixodidae) e Dermacentor nitens (Acari: Ixodidae)

Cruz, Paula Barroso 29 July 2016 (has links)
Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-04-20T19:47:06Z No. of bitstreams: 1 paulabarrosocruz.pdf: 1781659 bytes, checksum: 62d0ee084bc070be10b7ca48781a98c6 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-04-24T16:51:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 paulabarrosocruz.pdf: 1781659 bytes, checksum: 62d0ee084bc070be10b7ca48781a98c6 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-24T16:51:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 paulabarrosocruz.pdf: 1781659 bytes, checksum: 62d0ee084bc070be10b7ca48781a98c6 (MD5) Previous issue date: 2016-07-29 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O objetivo do presente trabalho foi avaliar a atividade carrapaticida do extrato metanólico de Acmella oleracea e do espilantol sobre Rhipicephalus microplus e Dermacentor nitens. O extrato metanólico foi obtido através de maceração com metanol. Desse extrato, foi obtida uma fração diclorometano com 99% de espilantol (que pode ser considerado um composto puro), que também foi testada sobre larvas e fêmeas ingurgitadas de R. microplus e larvas de D. nitens. Para a avaliação da atividade sobre larvas, foi utilizado o teste de pacote de larvas modificados e o extrato metanólico e a fração diclorometano (99% de espilantol) foram testadas em concentrações de 0,2 a 50,0 mg/mL. No teste de tempo letal, também foi utilizado a técnica de pacote de larvas, o extrato metanólico foi usado na concentração de 12,5 mg/mL e a avaliação do percentual de mortalidade foi feita após 15, 30, 45, 60, 75, 90, 120 minutos e 24 horas. Nesse teste foi feito o cálculo de tempo letal 50% (TL50). O teste com fêmeas ingurgitadas foi feito apenas com R. microplus, sendo testadas concentrações de 25 a 200 mg/mL do extrato metanólico e concentrações entre 2,5 a 20,0 mg/mL para o espilantol. O extrato metanólico ocasionou mortalidade de 100% das larvas de R. microplus e D. nitens a partir de concentrações de 3,1 e 12,5 mg/mL, respectivamente. O espilantol resultou em mortalidade de 100% para larvas de R. microplus a partir da concentração 1,6 mg/mL e de 12,5 mg/mL para D. nitens. No experimento de tempo letal, a mortalidade foi de 100% para larvas de R. microplus e D. nitens após 120 minutos e 24 horas, com TL50 de 38 e 57 minutos. No teste com fêmeas, o peso da massa de ovos e percentagem de eclosão dos grupos tratados com concentrações iguais e/ou superiores a 50,0 mg/mL do extrato metanólico apresentaram redução significativa (p> 0,05) em relação ao controle, enquanto o espilantol provocou redução significativa do peso da massa de ovos e percentagem de eclosão em concentrações de 10,0 mg/mL e 2,5 mg/mL, respectivamente. As fêmeas tratadas com 200,0 mg/mL do extrato morreram antes de iniciar o processo de oviposição, resultando em eficácia de 100%, enquanto a melhor eficácia para espilantol foi de 92,9% na concentração de 20,0 mg/mL. Portanto, é possível concluir que o extrato metanólico da A. oleracea e o espilantol apresentam atividade acaricida sobre R. microplus e D. nitens. / We evaluate the acaricidal activity of Acmella oleracea methanol extract and spilanthol on Rhipicephalus microplus and Dermacentor nitens. The methanol extract was made through maceration with methanol. From this extract, a dichloromethane fraction with approximately 100% spilanthol was obtained and tested on R. microplus larvae and engorged females and D. nitens larvae. For evaluation against larvae, modified larvae test packages were used, and both methanol extract and the dichloromethane fraction were tested at concentrations of 0.2 to 50.0 mg/mL. The larvae package technique was also used in the lethal time (LT) test, with methanol extract at a concentration of 12.5 mg/mL and the mortality percentage assessment was made after 15, 30, 45, 60, 75, 90, 120 minutes and 24 hours. The lethal time calculation 50% (LT50) was performed in this test. The engorged female test was done with R. microplus only, at concentrations of 25 to 200 mg/mL for methanol extract and 2.5 to 20.0 mg/mL for spilanthol. The methanol extract caused 100% mortality of the R. microplus and D. nitens larvae at concentrations from 3.1 and 12.5 mg/mL, respectively. Spilanthol resulted in 100% mortality for R. microplus larvae at concentration from 1.6 mg/mL and 12.5 for D. nitens. In the lethal time essay using the methanol extract, the mortality rate was 100% for R. microplus and D. nitens larvae after 120 minutes and 24 hours with LT50 of 38 and 57 minutes. In the test of females, the egg mass weight and the hatching percentage of the groups treated with concentrations equal to and/or higher than 100.0 mg/mL of methanol extract showed significant differences (p> 0.05) while spilanthol causes significant reduction of the egg mass weight and hatching percentage at concentrations of 10.0 mg/mL and 2.5 mg/mL, respectively. Females treated with 200.0 mg/mL of extract died before starting the oviposition process, resulting in 100% effectiveness, while the best efficacy for spilanthol was 92.9% at concentration of 20.0 mg/mL. Thus we conclude that the methanol extract of A. oleracea and spilanthol present acaricide activity against R. microplus and D. nitens.

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