Orientador: Elenice Deffune / Banca: Hamilton da Rosa Pereira / Banca: Marco Antonio Batista / Resumo: Foi realizado estudo experimental em coelhos para avaliar o efeito da aplicação do gel de plaquetas no reparo de lesões osteocondrais, comparada com o mesmo tipo de lesão não tratada. Foram utilizados 30 coelhos machos com idade mínima de três meses e peso acima de 2kg. Foi colhido sangue dos animais para preparo do gel de plaquetas e depois estes foram operados para realização de uma lesão osteocondral, com trefina, no côndilo femoral medial, de ambos os joelhos, de 3,5mm de diâmetro e 4,0mm de profundidade. A lesão do joelho esquerdo foi preenchida com o gel de plaquetas e o joelho direito foi usado como controle, sem tratamento. Após 180 dias realizou-se a eutanásia dos animais. As peças foram analisadas e seu tecido de reparo classificado macroscopicamente e depois histologicamente. Utilizou-se uma tabela de escore histológico que avalia os seguintes critérios: morfologia celular, regularidade da superfície, metacromasia, espessura condral e integração do tecido de reparo ao tecido normal. Foi observado que o grupo tratado com gel de plaquetas obteve uma melhor cicatriz na avaliação macroscópica, e na avaliação histológica o único critério que não apresentou diferença estatística foi a metacromasia, sendo que o grupo tratado com gel foi melhor em todos os outros, inclusive no escore total. Desta forma conclui-se que o grupo tratado com gel de plaquetas obteve melhor reparo macroscópica e histologicamente, com 180 dias, quando comparado com o mesmo tipo de lesão não tratada / Abstract: An experimental study was performed on rabbits to evaluate the application effects of Platelet Gel for the repair of osteochondral injuries compared to the same, yet not treated, type of injuries. Thirty male rabbits were used, with minimum age of 3 months and weight over 2kg. The animals' blood was collected to prepare the Platelet Gel; afterwards, these animals were operated in order to make an osteochondral injury with 3.5mm in diameter and 4.0mm in depth, with trephine, at the medial condyle of femur of both knees. The left knee injury was filled with the Platelet Gel and the right knee was used as control, without treatment. After 180 days, euthanasia was performed on the animals. The pieces were analyzed and the repair tissue was macroscopically and, subsequently, histologically classified. One has used a Histological Grading Scale, which evaluates the following criteria: cell morphology, surface regularity, metachromasy, chondral thickness, and repair tissue integration with the normal tissue. It was observed that the group treated with Platelet Gel obtained better repair tissue under macroscopic evaluation; and, under histologic evaluation, the only criteria which did not present statistical difference was the metachromasy, being that the group treated with gel was better at all others, including the total score. Thus, one concludes that the group treated with Platelet Gel obtained better repair, macroscopically and histologically, after 180 days, in comparison to the same non-treated type of injury / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-01-27Bitstream added on 2014-06-13T20:50:03Z : No. of bitstreams: 1 danieli_mv_me_botfm.pdf: 410656 bytes, checksum: 2c3ee8db9f55397380d6e42d6d5b5ebc (MD5) / Foi realizado estudo experimental em coelhos para avaliar o efeito da aplicação do gel de plaquetas no reparo de lesões osteocondrais, comparada com o mesmo tipo de lesão não tratada. Foram utilizados 30 coelhos machos com idade mínima de três meses e peso acima de 2kg. Foi colhido sangue dos animais para preparo do gel de plaquetas e depois estes foram operados para realização de uma lesão osteocondral, com trefina, no côndilo femoral medial, de ambos os joelhos, de 3,5mm de diâmetro e 4,0mm de profundidade. A lesão do joelho esquerdo foi preenchida com o gel de plaquetas e o joelho direito foi usado como controle, sem tratamento. Após 180 dias realizou-se a eutanásia dos animais. As peças foram analisadas e seu tecido de reparo classificado macroscopicamente e depois histologicamente. Utilizou-se uma tabela de escore histológico que avalia os seguintes critérios: morfologia celular, regularidade da superfície, metacromasia, espessura condral e integração do tecido de reparo ao tecido normal. Foi observado que o grupo tratado com gel de plaquetas obteve uma melhor cicatriz na avaliação macroscópica, e na avaliação histológica o único critério que não apresentou diferença estatística foi a metacromasia, sendo que o grupo tratado com gel foi melhor em todos os outros, inclusive no escore total. Desta forma conclui-se que o grupo tratado com gel de plaquetas obteve melhor reparo macroscópica e histologicamente, com 180 dias, quando comparado com o mesmo tipo de lesão não tratada / An experimental study was performed on rabbits to evaluate the application effects of Platelet Gel for the repair of osteochondral injuries compared to the same, yet not treated, type of injuries. Thirty male rabbits were used, with minimum age of 3 months and weight over 2kg. The animals’ blood was collected to prepare the Platelet Gel; afterwards, these animals were operated in order to make an osteochondral injury with 3.5mm in diameter and 4.0mm in depth, with trephine, at the medial condyle of femur of both knees. The left knee injury was filled with the Platelet Gel and the right knee was used as control, without treatment. After 180 days, euthanasia was performed on the animals. The pieces were analyzed and the repair tissue was macroscopically and, subsequently, histologically classified. One has used a Histological Grading Scale, which evaluates the following criteria: cell morphology, surface regularity, metachromasy, chondral thickness, and repair tissue integration with the normal tissue. It was observed that the group treated with Platelet Gel obtained better repair tissue under macroscopic evaluation; and, under histologic evaluation, the only criteria which did not present statistical difference was the metachromasy, being that the group treated with gel was better at all others, including the total score. Thus, one concludes that the group treated with Platelet Gel obtained better repair, macroscopically and histologically, after 180 days, in comparison to the same non-treated type of injury

Orientador : Laurecir Gomes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-28T09:38:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigues_EdsonDelgado_D.pdf: 13735157 bytes, checksum: bc1b213b05a7f7ae4652d0bc93a4d39a (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A matriz extracelular é essencial para o desenvolvimento do organismo, desempenhando diferentes funções. Nas cartilagens das articulações, a composição da matriz determina uma estrutura com propriedades elásticas e de suporte mecânico que facilita os movimentos. O papel fisiológico da cartilagem depende da integridade dessa matriz, formada em geral por fibras de colágeno, principalmente do tipo 11, proteoglicanos e glicoproteínas não colagênicas. Variações na concentração dos componentes e no tipo de constituição conferem propriedades biomecânicas especiais ao tecido. A análise bioquímica destes componentes tem sido descrita, especialmente em mamíferos, porém pouco se sabe dessa matriz na cartilagem de aves. Os proteoglicanos são importantes para a fisiologia do tecido, e a sua expressão pode variar sob a influência de diferentes fatores. Pequenos proteoglicanos, como fibromodulim e decorim, estão distribuídos de maneira diversa nas sub-regiões articulares, sugerindo uma relação entre a expressão dessas moléculas e as diferentes propriedades biomecânicas do tecido resultantes das forças em ação. Neste contexto, este trabalho teve como finalidade fazer a análise bioquímica da matriz extracelular de cartilagens das articulações escapulo-umeral, úmero-ulnar e úmero-radial de frangos, visando analisar pequenos proteoglicanos e identificar os tipos de glicosaminoglicanos presentes em cada região. As cartilagens provenientes do úmero proximal, úmero distal em contato com o rádio e úmero distal em contato com a ulna apresentaram maior conteúdo de ácido hexurônico e glicosaminoglicanos sulfatados quando comparados com as cartilagens oriundas da ulna proximal e rádio proximal. Variações significativas na concentração de proteína, ácido urônico e glicosaminoglicanos sulfatados foram obtidas no extrato total e na fração 04 de cada região. O glicosaminoglicano encontrado nas cartilagens estudadas foi o condroitim sulfato, com predominância de resíduos de ácido a-L-glicurônico e N-acetil _-O-galactosamina 4-0-sulfatados com uma relação de três _Oi-4S para cada _Oi-6S em todas as regiões, com exceção da cartilagem da região proximal do rádio, onde a razão foi de 2,5. As amostras obtidas, após cromatografias de troca iônica e interação hidrofóbica das frações D4, apresentaram um perfil eletroforético semelhante em SDS-PAGE. Na ausência de _-mercaptoetanol ocorrem duas bandas de 160 e 200 kDa que após tratamento com _-mercaptoetanol ficam tênues e ocorre o aparecimento de uma banda com 57 kDa. Esse fenômeno pode representar interação com outros elementos de matriz ou mesmo auto-agregação. Duas moléculas parcialmente isoladas reagiram com anticorpos anti-fibromodulim e anti-decorim em immunoblotting, sugerindo uma correspondência com fibromodulim e decorim. Os resultados obtidos neste trabalho podem corresponder à fisiologia normal de tecidos sob diferentes condições de pressão mecânica. Esses resultados podem ser representativos para as condições que esses animais se encontravam, porém diferentes variações podem ocorrer quando essas cartilagens forem analisadas em diferentes idades, condições de criação, genótipo, etc / Abstract: The extracellular matrix is present in every tissue, but it is specially abundant in tendons and cartilages. In articular cartilages, the composition of the matrix determines a structure with elastic and structural properties that facilitate the movements. The physiological role of cartilage depends on the integrity of the matrix, made mainly by type 11 collagen fibers, proteoglycans and non collagen glycoproteins. Variations in the concentration and types of components may result in special biomechanical properties to the tissue. The biochemical analysis of extracellular matrix components has been carried out in several species, but it is scarce in avian. Proteoglycans are important for the tissue physiology and its expression may vary under the influence of different factors. Small proteoglycans, as the fibromodulin and decorin, are differentially distributed in the articular cartilage sub-regions, suggesting a relation among the expression of those molecules and the presence of different biomechanical properties of the tissue. According to that, this work was focused on the biochemical analysis of the extracellular matrix articular cartilages from scapular-humerus, ulnar-humerus and radial-humerus articulations of chicken, aiming to analyze small proteoglycans and identify the type of glycosaminoglycans present in each cartilage. The cartilages obtained from proximal humerus, distal humerus in contact with the radius and distal humerus in contact with the ulna, presented higher content of uronic acid and sulfated glycosaminoglycans, when compared with cartilages obtained from proximal ulna and proximal radius. Significant variations in the concentration of protein, uronic acid and sulfated glycosaminoglycan were obtained from the total extract and in the 04 fraction of each region. The glycosaminoglycan found in the different cartilages was condroitin sulfate, with a predominance of a-L-glucuronic acid and N-acetil _-O-galactosamine 4-0-sulfated residues with a relation of three LlOi-4S for each LlOi -6S in ali regions, with the exception of cartilage from the radium proximal region, where the relation was of 2.5. Samples obtained afier ion exchange and hydrophobic interaction chromatographies from 04 fraction presented the same electrophoretic profile in SDS-PAGE. In the absence of _mercaptoethanol two components of 160 and 200 kDa were detected, which afier treatment with _-mercaptoethanol appear as a faint band; a polypeptide with 57 kDa was also present in reducing conditions. If the 57 kDa component arose from a oligomeric component or from some autoaggregation process remains to be studied. Immunoassays using anti-fibromodulin and anti-decorin, indicated that the components with 57 kDa and 70-90 kDa found in matrix of each joint analyzed are the small proteoglycans fibromodulin and decorin. Despite the different sites and functional properties of the different cartilages, no differences were found in the composition of the extracellular matrix of each one / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Esta pesquisa teve como objetivo estudar as alterações da cartilagem articular dos côndilos femural de ratos, provocadas pela variação da amplitude de movimento e da frequência, utilizando-se uma máquina de movimentação de flexo-extensão contínua passiva. Foram utilizados 24 ratos machos Wistar, divididos em quatro grupos: G1 (exercitados com 80 ciclos/minuto em grande amplitude), G2 (exercitados com 80 ciclos/minuto em pequena amplitude), G3 (exercitados com 40 ciclos/minuto em grande amplitude) e G4 (exercitados com 40 ciclos/minuto em pequena amplitude). Os animais pertencentes aos quatro grupos realizaram exercícios de flexo-extensão contínuas, diariamente, por 1 hora, através de um equipamento que atende aos princípios do mecanismo biela-manivela, o qual produz movimentos contínuos de flexo-extensão com grande e pequena amplitude, em frequência de 80 e 40 ciclos por minuto. Após 15 dias os animais foram sacrificados e de cada um a cartilagem articular do côndilo lateral do joelho direito foi retirada, incluída, cortada, corada com hematoxilina-eosina e analisada em fotomicroscópio. Pela análise histológica observou-se aumento do número de células na área da cartilagem articular definida para o estudo, nos quatro grupos exercitados, quando comparados ao respectivo controle. Os animais exercitados à velocidade de 80 ciclos por minuto e grande amplitude apresentaram um aumento no número de células quando comparados aos animais exercitados à velocidade de 40 ciclos por minuto em grande e pequena amplitude. O mesmo ocorreu com os animais exercitados com velocidade de 80 ciclos por minuto e pequena amplitude, comparados aos animais exercitados com velocidade de 40 ciclos por minuto e pequena amplitude. Quanto à análise das medidas de espessura foi encontrado aumento em todos os grupos em relação ao respectivo controle. Os animais exercitados à velocidade de 80 ciclos por minuto e grande amplitude apresentaram um aumento da medida de espessura quando comparados aos animais exercitados à velocidade de 40 ciclos por minuto e pequena amplitude, o mesmo ocorrendo com os animais exercitados com velocidade de 40 ciclos por minuto e pequena amplitude. Os dados demonstram que os exercícios de flexo-extensão contínua passiva estimulam aumento do número de células e aumento da espessura, não podendo ser atribuída como processo de lesão e, sim, como aumento de atividade metabólica e fator de proteção e adaptação. / This research had as objective to study the alterations of the articular cartilage of the knee of mices provoked by the variation of the movement width and of the frequency, using a machine of movement of passive continuous flexo-extension. 24 Wistar male mices were used, divided in four groups: G1 (exercised with 80 cycles/minute in great width), G2 (exercised with 80 cycles/minute in small width), G3 (exercised with 40 cycles/minute in great width) and G4 (exercised with 40 cycles/minute in small width). The animals belonging to the four groups accomplished flexo-extension exercises daily for 1 hour, through a equipment that assists to the principles of the \"rod-cranck\" mechanism, which produces continuous movements of flexo-extension with great width and small width in frequency of 80 and 40 cycles per minute. After 15 days the animals were sacrificed, the articular cartilage was collected, included, cut, colored with hematoxiline-eosine and analyzed in a photomicroscope. For the histologic analysis an increase of the number of cells was observed in every area of the articular cartilage in the 4 exercised groups when compared to the respective control, that the exercised animals at the speed of 80 cycles/minute and great width presented an increase in the number of cells when compared the exercised animals at the speed of 40 cycles/minute in great and small width, the same thing happening with the animals exercised with speed of 80 cycies/minute and small width, when compared to the exercised animals of 40 cycles/minute and small width. As the analysis of the measures of thickness it was found an increase in all the groups in relation to the respective control. The exercised animals at the speed of 80 cycles/minute and great width presented an increase of the measure of thickness when compared the exercised animals the speed of 40 cycles/minute and small width, the same happening with the animals exercised with speed of 40 cycles/minute and small width. The data demonstrate that the exercises of passive continuous flexo-extension stimulate an increase of the number of cells and increase of the thickness, not allowing us to attribute it as a Iesion process, but as an increase of metabolic activity as a protection and adaptation factor.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-11-24Bitstream added on 2014-06-13T20:40:39Z : No. of bitstreams: 1 arruda_mf_dr_arafcf.pdf: 1544944 bytes, checksum: 75a1678618fc45bbed80bdb04d417b13 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A osteoartrose se caracteriza pela degeneração articular, perda de cartilagem e alterações no osso subcondral. Pouco se sabe sobre a patogênese e mudanças que ocorrem na osteoartrose como também em seu reparo. As técnicas terapêuticas disponíveis podem resultar em alívio dos sintomas, mas não na regeneração do tecido lesado. Um dos métodos usuais para pesquisa em osteoartrose com o preceito de mimetizar esta situação e também realizada neste trabalho, é o modelo experimental utilizando a inoculação intra-articular de zymosan (Saccharamyces cerevisiae), gerando artrite em grau progressivo. A eletroterapia potencializa a reparação de tecidos conjuntivos representando uma alternativa na reparação de lesões da cartilagem hialina. O acido ascórbico é um dos precurssores do colágeno que junto com outras estruturas complexas como a trama de glicosaminoglicanas e proteoglicanas constitui a cartilagem. A utilização dessa técnica para administração do acido ascórbico em tecido biológico é fator substancial do presente trabalho. Objetivo: O objetivo do presente estudo foi verificar a resposta imuno-bioquímica e avaliar microscopicamente a cartilagem articular de ratos artrose induzidos, frente ao tratamento com iontoforese na presença e ausência de acido L - ascórbico. Materiais e Métodos: Ratos wistar machos divididos em 6 grupos de 6 animais cada um, diferenciados em grupos: controle positivo C+, controle negativo C-,gavagem com solução fisiológica GSF, gavagem com ácido ascórbico GAA, iontoforese solução fisiológica IFSF iontoforese com ácido ascórbico IFAA.Resultados: Histológicos demonstraram em coloração Hematoxilina e Eosina que com o grupo IFAA obteve normalidade da variável celularidade (40.1 mm2), e manutenção da cartilagem não calcificada (75.5mm) (p<0.05), sugerindo espessuras normais. Quanto ao grupo não tratado C+ apresentou-se menor... / Osteoarthritis is characterized by joint degeneration, loss of cartilage and subchondral bone changes. Little is known about the pathogenesis and changes that occur in osteoarthritis as well as in its repair. Available therapeutic techniques can result in relief of symptoms but not in the regeneration of injured tissue. One of the usual methods for research used in this study is the experimental model which uses intra-articular inoculation of zymosan (Saccharamyces cerevisiae), causing arthritis in progressive degree. Electrotherapy enhances the healing of tissues representing an alternative in the repair of hyaline cartilage injuries. Ascorbic acid is one of the forerunners of collagen which along with other complex structures like the chains of glycosaminoglycans and proteoglycans form the cartilage. The use of this technique for administration of ascorbic acid in biological tissue is a substantial factor in this study. Objective: The objective of this study was to investigate the immune-biochemical reply and evaluate microscopically the histology of articular cartilage in rats arthritis induced, compared to treatment with iontophoresis in the presence and absence of L - ascorbic acid. Methods: Male wistar rats were divided into 6 groups of 6 animals each, in different groups: positive control C+, negative control C-, gavage with saline solution GSS, gavage with ascorbic acid GAA, saline iontophoresis IPSS, iontophoresis with ascorbic acid IPAA. Results: Histological it was demonstrated that in hematoxylin and eosin staining the group that received IPAA obtained normality of variable (40.1 mm2), and maintenance of non calcified cartilage (75.5mm) (p<0.05), suggesting normal thickness. Regarding the untreated group C+, it presented lower average in the number of chondrocytes (13.0mm2), and with regard to the thickness of cartilage it had a higher average of calcified cartilage with... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Bruno Watanabe Minto / Banca: Luis Gustavo Gosuen Gonçalves Dias / Banca: Paulo César Jark / Resumo: A cartilagem articular possui capacidade de reparação limitada, aumentado a predisposição ao desenvolvimento de alterações degenerativas, muitas vezes irreversíveis. Diversas formas de tratamento, cirúrgicas ou conservativas, são descritas, entretanto a terapêutica da osteoartrite continua sendo grande desafio ao médico veterinário. Neste contexto, a pesquisa envolvendo células-tronco mesenquimais destaca-se na busca de melhorias e avanços na reparação da cartilagem articular. Objetivou-se, no presente projeto, comparar a regeneração cartilaginosa da articulação coxofemoral de coelhos, com e sem o transplante de células-tronco mesenquimais autólogas, por meio de exames radiográficos e histopatológicos. Dois grupos, com 15 animais da espécie leporina cada, foram submetidos à indução química de osteoartrite com solução de colagenase 2% na articulação coxofemoral direita. No Grupo 1 (Células-tronco) realizou-se a aplicação intra-articular de células-tronco mesenquimais autólogas, enquanto que, o Grupo 2 (Controle) foi constituído por animais submetidos à aplicação intra-articular de solução salina estéril. Foram realizadas avaliações radiográficas e histopatológicas aos 30, 60 e 90 dias após a aplicação. Os resultados histológicos deste ensaio indicam que células-tronco mesenquimais (Grupo 1) melhoraram discretamente a qualidade do tecido de reparo, de acordo com os critérios da escala semi-quantitativa ICRS 1 ("International Cartilage Repair Society"). O Grupo 1 (Células-Tronco... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The articular cartilage has limited repair capacity, leading to an increased risk for degenerative changes, potentially irreversible. Several treatments, surgical or not, are described, however osteoarthritis remains a major challenge for the veterinarian. In this context, research involving mesenchymal stem cells stands out. The aim of this study was to compare cartilage regeneration of the hip in rabbits, with and without the transplantation of autologous mesenchymal stem cells. Radiographic and histopathological evaluation were used. Thirty rabbits were submitted to chemical induction of osteoarthritis with a 2% colagenase in the right hip. They were divided into 2 groups of 15 animals each: Group 1 (intra-articular application of autologous mesenchymal stem cells) and Group 2 (control - intra-articular application of sterile saline solution). Radiographic and histopathological evaluations were performed at 30, 60 and 90 days after application. The mesenchymal stem cells group (Group 1) showed slight improvement of the quality of the repair tissue, according to the semi-quantitative scale criteria ICRS 1 (International Cartilage Repair Society). The Group 1 (Stem Cells) showed superiority in relation to Group 2, specially in the parameters joint surface, extracellular matrix and cellular distribution. / Mestre

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:44:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Introdução: O exercício físico é um hábito difundido com comprovados benefícios à saúde. Quando praticado em intensidade leve e moderada, acarreta alterações benéficas na cartilagem, sendo até mesmo preconizado no tratamento da artrose. Porém, a relação entre o exercício excessivo e a osteoartrose ainda é controversa. Objetivo: Avaliar se o exercício excessivo pode acarretar osteoartrose utilizando um novo protocolo denominado treinamento de ultra-endurance em ratos. Métodos: Ratos Wistar foram divididos em dois grupos: grupo controle (GC) com 12 animais e grupo treinado (GT) com 12 animais. Os animais do GT foram submetidos a um treinamento de corrida em esteira com melhora progressiva do condicionamento físico durante 12 semanas realizando um exercício final de corrida até exaustão, tendo percorrido pelo menos 55 km nessas 12 semanas. Ao término desse período, todos os animais foram sacrificados e seus joelhos removidos para estudo hitomorfométrico, histomorfológico, histoquímico, eletroforético e fluorimétrico. Resultados: Houve diferenças significativas entre os dois grupos. O GT apresentou maior número de condrócitos, um importante aumento no número de pares de clones de condrócitos, uma quantidade de condrócitos em processo de morte celular expressivamente maior, alcançando graus mais elevados da classificação histológica de osteoartrose e uma marcante diminuição dos glicosaminoglicanos sulfatados e do ácido hialurônico. Conclusões: A cartilagem articular dos ratos treinados submetidos ao exercício de ultra-endurance demonstrou alterações predisponentes do processo osteoartrósico através de modificações celulares patológicas como aumento dos pares de clones de condrócitos e aumento da quantidade de condrócitos com características de morte celular, além da diminuição expressiva de componentes da matriz extracelular como os glicosaminoglicanos sulfatados e o ácido hialurônico. / Introduction: Exercise is an increasingly widespread habit with proven health benefits. Mild and moderate exercise causes beneficial changes in cartilage and are advocated for the treatment of osteoarthritis, however, the relationship between excessive or strenuous exercise and osteoarthritis remains a matter of controversy. Objective: Investigate whether osteoarthritic changes could be obtained in a new protocol named ultra-endurance training of rats. Methods: Wistar rats were divided into two groups: control group (GC) with 12 animals and trained group (GT) with 12 animals. The GT animals undergone a training run on a treadmill with progressive improvement in fitness for 12 weeks doing a final running exercise to exhaustion. They ran at least 55 km in 12 weeks. After this period, both groups were sacrificed and their knees were removed for histomorphometrical, histomorphological, histochemical, electrophoretic and fluorimetric analyses. Results: There were significant differences between the two groups. The GT had a higher number of chondrocytes, a significant increase in the number of chondrocytes clusters, more chondrocyte cell death, higher grades of osteoarthritis histological classification and a marked decrease in suphated glycosaminoglycans and hyaluronic acid concentrations. Conclusions: The articular cartilage of the trained rats submitted to ultraendurance exercise showed predisposing osteoarthritic changes such as pathological cellular alterations like increased clusters of chondrocytes and increased chondrocytes with features of cell death in addition to the significant reduction of extracellular matrix components such as hyaluronic acid and sulfated glycosaminoglycans. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Esta pesquisa teve como objetivo estudar as alterações da cartilagem articular dos côndilos femural de ratos, provocadas pela variação da amplitude de movimento e da frequência, utilizando-se uma máquina de movimentação de flexo-extensão contínua passiva. Foram utilizados 24 ratos machos Wistar, divididos em quatro grupos: G1 (exercitados com 80 ciclos/minuto em grande amplitude), G2 (exercitados com 80 ciclos/minuto em pequena amplitude), G3 (exercitados com 40 ciclos/minuto em grande amplitude) e G4 (exercitados com 40 ciclos/minuto em pequena amplitude). Os animais pertencentes aos quatro grupos realizaram exercícios de flexo-extensão contínuas, diariamente, por 1 hora, através de um equipamento que atende aos princípios do mecanismo biela-manivela, o qual produz movimentos contínuos de flexo-extensão com grande e pequena amplitude, em frequência de 80 e 40 ciclos por minuto. Após 15 dias os animais foram sacrificados e de cada um a cartilagem articular do côndilo lateral do joelho direito foi retirada, incluída, cortada, corada com hematoxilina-eosina e analisada em fotomicroscópio. Pela análise histológica observou-se aumento do número de células na área da cartilagem articular definida para o estudo, nos quatro grupos exercitados, quando comparados ao respectivo controle. Os animais exercitados à velocidade de 80 ciclos por minuto e grande amplitude apresentaram um aumento no número de células quando comparados aos animais exercitados à velocidade de 40 ciclos por minuto em grande e pequena amplitude. O mesmo ocorreu com os animais exercitados com velocidade de 80 ciclos por minuto e pequena amplitude, comparados aos animais exercitados com velocidade de 40 ciclos por minuto e pequena amplitude. Quanto à análise das medidas de espessura foi encontrado aumento em todos os grupos em relação ao respectivo controle. Os animais exercitados à velocidade de 80 ciclos por minuto e grande amplitude apresentaram um aumento da medida de espessura quando comparados aos animais exercitados à velocidade de 40 ciclos por minuto e pequena amplitude, o mesmo ocorrendo com os animais exercitados com velocidade de 40 ciclos por minuto e pequena amplitude. Os dados demonstram que os exercícios de flexo-extensão contínua passiva estimulam aumento do número de células e aumento da espessura, não podendo ser atribuída como processo de lesão e, sim, como aumento de atividade metabólica e fator de proteção e adaptação. / This research had as objective to study the alterations of the articular cartilage of the knee of mices provoked by the variation of the movement width and of the frequency, using a machine of movement of passive continuous flexo-extension. 24 Wistar male mices were used, divided in four groups: G1 (exercised with 80 cycles/minute in great width), G2 (exercised with 80 cycles/minute in small width), G3 (exercised with 40 cycles/minute in great width) and G4 (exercised with 40 cycles/minute in small width). The animals belonging to the four groups accomplished flexo-extension exercises daily for 1 hour, through a equipment that assists to the principles of the \"rod-cranck\" mechanism, which produces continuous movements of flexo-extension with great width and small width in frequency of 80 and 40 cycles per minute. After 15 days the animals were sacrificed, the articular cartilage was collected, included, cut, colored with hematoxiline-eosine and analyzed in a photomicroscope. For the histologic analysis an increase of the number of cells was observed in every area of the articular cartilage in the 4 exercised groups when compared to the respective control, that the exercised animals at the speed of 80 cycles/minute and great width presented an increase in the number of cells when compared the exercised animals at the speed of 40 cycles/minute in great and small width, the same thing happening with the animals exercised with speed of 80 cycies/minute and small width, when compared to the exercised animals of 40 cycles/minute and small width. As the analysis of the measures of thickness it was found an increase in all the groups in relation to the respective control. The exercised animals at the speed of 80 cycles/minute and great width presented an increase of the measure of thickness when compared the exercised animals the speed of 40 cycles/minute and small width, the same happening with the animals exercised with speed of 40 cycles/minute and small width. The data demonstrate that the exercises of passive continuous flexo-extension stimulate an increase of the number of cells and increase of the thickness, not allowing us to attribute it as a Iesion process, but as an increase of metabolic activity as a protection and adaptation factor.

Orientador: Ibsen Bellini Coimbra / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-07T22:55:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andrade_AndreLuisLugnanide_M.pdf: 2450375 bytes, checksum: f33edb219ba25e56f663f1256a99bbeb (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Introdução: Os condrócitos da cartilagem articular vivem em um ambiente com baixa concentração de oxigênio. Nestas condições, a proteína do fator induzido por hipóxia (HIF-1a) mantém-se estável e ativa genes que são fundamentais na homeostase do oxigênio. A expressão do HIF-1a aumenta, em joelhos com osteoartrite (OA), principalmente nas áreas mais afetadas pela degeneração. Os condrócitos são capazes de produzir mediadores inflamatórios, como a interleucina-1 (IL-1) e o fator de necrose tumoral a (TNF-a), que estimulam a produção de prostaglandinas, metaloproteinases e óxido nítrico e relacionam-se com o início e com a progressão da osteoartrite. Os antiinflamatórios são drogas freqüentemente utilizadas no tratamento sintomático da OA. Material e Método: condrócitos humanos de joelhos osteoartríticos cultivados em suspensão e em condições normais de oxigênio foram divididos em quatro grupos: 1) controle, 2) estimulados com IL-1 ou TNF-a, 3) estimulados com meloxicam ou parecoxibe e 4) estimulados com meloxicam ou parecoxibe associados a IL-1 ou TNF-a. Os grupos foram submetidos à extração de RNA (ácido ribonucléico) e de proteína nuclear. O RNA foi convertido em cDNA, sendo então realizada a reação de PCR em tempo real para verificar a expressão do HIF-1a. As proteínas nucleares foram extraídas, quantificadas e analisadas pela técnica de Western Blotting. Resultados: Foi detectada a expressão de HIF-1a e cDNA de HIF-1a em todos os grupos de condrócitos cultivados em suspensão em tensões normais de oxigênio, não havendo diferenças significativas entre os grupos. Discussão: a meia-vida do HIF-1a é extremamente curta em normóxia e marcadamente prolongada em hipóxia, por isso muitos pesquisadores acreditam não ser possível a detecção da proteína do HIF-1a em condrócitos cultivados em condições normais de oxigênio. Neste estudo foi possível constatar a expressão do HIF-1a em normóxia, possivelmente devido ao modelo de cultura utilizado. O estímulo com IL-1, TNF-a e inibidores da COX-2 não alterou a expressão de HIF-1a. Condrócitos oriundos de articulações osteoartríticas avançadas poderiam apresentar resistência à ação das citocinas / Abstract: Introduction: The chondrocytes of joint surface live in low concentration of oxygen environment. In this condition, the hypoxia inducible factor 1 a (HIF-1a) becomes stable and regulates the expression of genes that are important for oxygen homeostasis. The expression of HIF-1a mRNA is augmented in chondrocytes from osteoarthritic knees, especially in more degenerated areas. Chondrocytes are capable of producing inflammatory mediators, such as interleukin 1 (IL-1) and tumoral necrosis factor a (TNF-a), that stimulate the production of prostaglandin, metalloproteinases and nitric oxide, correlated with the onset and progression of osteoarthritis. Antiinflammatory drugs are frequently used in the treatment of symptoms of osteoarthritis. Material e Methods: human chondrocytes from osteoarthritic knees were cultivated in suspension and in normal tension of oxygen. The cells were divided in 4 groups: control, stimulated with IL-1 or TNF-a, stimulated with meloxicam or parecoxib and the last one stimulated with meloxicam or parecoxib and IL-1 or TNF-a. Nuclear protein and RNA were extracted from these cells. cDNA was synthesized from RNA and real time PCR was performed with this product in order to determine HIF-1a expression. Nuclear protein was analyzed using the Western-Blotting method. Results: HIF-1a and HIF-1a mRNA was detectable in all cell groups, and there was not a statistic significant difference between them. Discussion: As half live of HIF-1a is extremely short when in normoxic and greater in hypoxic conditions, many researchers believe it is not possible to detect this protein in chondrocytes cultivated in normoxic environment. Our results presented expression of HIF-1a in normal oxygen tensions, probably due to the fact that chondrocytes were cultivated in suspension. As chondrocytes were obtained from advanced osteoarthritic knees and in such conditions the cells can be more resistant to the action of cytokines, this could explain why IL-1, TNF-a and antiinflamatory did not result in modification of HIF-1a / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Clinica Medica

Orientador: Célia Marisa Rizzatti Barbosa / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-18T16:04:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FariasNeto_Arcelino_D.pdf: 1895628 bytes, checksum: 3d9e789620307fdbeaffe939bf75437e (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: A cartilagem articular do côndilo mandibular é responsável pelo crescimento ósseo endocondral durante o desenvolvimento mandibular. Ela depende do funcionamento adequado da articulação temporomandibular (ATM) para sua diferenciação e maturação. Trabalhos demonstram que a manipulação funcional da mandíbula foi capaz de alterar a dinâmica fisiológica dessa cartilagem. Nesse sentido, a protrusão diminuiria a ação de cargas sobre o côndilo mandibular, estimulando o crescimento endocondral, e de forma inversa, a retrusão aumentaria a pressão sobre a cartilagem, inibindo o crescimento. Essas técnicas têm sido utilizadas com relativo sucesso na ortopedia facial com o intuito de corrigir discrepâncias maxilo-mandibulares. Entretanto, alguns quadros patológicos presentes nas ATMs podem alterar o seu desenvolvimento normal. Um dos fatores etiológicos que pode ser associado à presença de alterações no côndilo mandibular é a oclusão dental. A hipótese formulada é de que a presença de instabilidade ortopédica causada por um fator oclusal durante a fase de desenvolvimento pode levar à deficiência do crescimento mandibular e alterações intra-articulares. Assim, este trabalho teve por objetivo avaliar, em modelo animal, alterações da oclusão dental sobre o crescimento mandibular e tecidos intra-articulares. O estudo foi randomizado e cego. Foram utilizadas 40 ratas Wistar com 5 semanas de idade divididas aleatoriamente em 4 grupos com o mesmo número de animais: controle, com interferência oclusal, com ausência dos molares inferiores unilateral e com ausência dos molares inferiores bilateral. Os animais foram acompanhados por 8 semanas, período que correspondeu a sua fase de maturação óssea. Após esse período, os animais foram sacrificados e realizou-se tomografia computadorizada de feixe cônico (Cone beam) de suas cabeças para construção de protótipos de biomodelos, sobre os quais foram mensurados o comprimento da mandíbula, a altura do ramo mandibular e distância intercondilar. Em seguida, as articulações temporomandibulares foram cuidadosamente preparadas para análise imunohistoquímica dos níveis de colágeno tipo II, Fator de Crescimento Endotelial Vascular, e Interleucina 1? na cartilagem condilar. Os dados foram submetidos a análise estatística através do Software SPSS versão 17.0. As médias entre os grupos foram comparadas através do One-way Anova, enquanto as diferenças entre os lados da mandíbula foram avaliadas através do teste t de Student (?=0.05). A partir da análise dos resultados, observou-se que alterações oclusais podem afetar o desenvolvimento do osso mandibular, bem como alterar a expressão de Colágeno tipo II, Fator de Crescimento Endotelial Vascular e Interleucina 1? na cartilagem condilar. Diante do exposto, conclui-se que a oclusão dentária é capaz de interferir na dinâmica dos tecidos intra-articulares, sendo um fator importante durante o desenvolvimento craniofacial / Abstract: The condylar cartilage regulates the endochondral ossification during mandibular development. Mechanical stimulus in the temporomandibular joint (TMJ) plays an important role in cell proliferation and differentiation of mandibular condyle. Studies have shown that functional mandibular displacement can affect TMJ cartilage dynamics. Mandibular advancement induces profound metabolic changes in the condyle and enhances growth. In contrast, mandibular retraction reduces growth. The overall picture emerging from the data is that unloading of the condyle increases growth, while loading reduces it. Therefore, dental occlusion could be one of the factors associated with the alteration of the TMJ growth. The hypothesis is that orthopedic instability caused by occlusal factors present during TMJ development can affect mandibular growth and intra-articular tissue. Thus, the purpose of this study was to evaluate the influence of dental occlusion on mandibular growth and intra-articular tissue in Wistar rats. The study was randomized and blinded. Forty 5 weeks old female Wistar rats composed the sample. The animals were randomly allocated to four groups with the same number of rats: (1) control, (2) occlusal appliance for functional posterior displacement of the mandible, (3) unilateral mandibular tooth extraction, (4) bilateral mandibular tooth extraction. The rats were sacrificed after 8 weeks, when they had achieved skeletal maturity. Immediately after death, the heads were fixed in 10% paraformaldehyde, and cone beam CT scan images were taken using the Classic I-CAT (Imaging Sciences International, Hatfield, PA, USA). The 3-dimensional images of rats' skulls were exported in multifile Digital Imaging and Communications in Medicine (DICOM) format, and acrylic rapid-prototyped templates of the mandibles were constructed for measurement of mandibular growth. Immunostaining was used for the detection of type II collagen, vascular endothelial growth factor (VEGF) and interleukin-1?. The data were processed with SPSS software (V 17.0 for Windows, SPSS Inc, Chicago, IL, USA). Differences among the groups were analyzed by one-way ANOVA (Tukey test as post-hoc test), while differences between sides were analyzed by non-paired Student's t test. Shapiro-Wilk and Levene tests were used to observe normality and variance homogeneity, respectively. Confidence level was set at 5%. The results of this study showed that dental occlusion is an important factor for the integrity of intra-articular tissues and to the healthy craniofacial development, emphasizing the importance of early treatment to normalize occlusion and create appropriate conditions for normal craniofacial development / Doutorado / Protese Dental / Doutor em Clínica Odontológica