Made available in DSpace on 2017-07-10T14:17:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissertaLizyana_ Vieira (1).pdf: 1605588 bytes, checksum: 7e6998e440abedd75e6806c3fa363e76 (MD5) Previous issue date: 2015-12-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / An adequate activity of the sciatic nerve is essential for the morphofunctional integrity of the lower limb structures, including the ankle joint or talocrural, responsible for providing a stable base of support for the body, in addition to propel it effectively during locomotion. These motor functions may be affected by changes in the peripheral nervous system by various pathological conditions, such as sciatica, which can be generated through the sciatic nerve compression, leading to functional incapacities. Among the treatment modalities, the resistive exercise stands out, and despite of its widespread use, still shows divergences in literature as to the best type, its intensity and the most indicated period for its outset. Therefore, the objective of this research was to verify the effects of experimental model of nerve compression and treatment with resistive exercise on the morphology of the talocrural joint of Wistar rats. For this purpose, 32 rats were divided into 4 groups (n = 8 / group): G1 (control), G2 (injury), G3 (exercise) and G4 (injury and exercise). Three days after the sciatic nerve compression surgery, groups G3 and G4 were submitted to resistive exercise stair climbing during 21 days. After euthanasia, the talocrural joints followed the protocol for paraffin embedding. The slides were colored with hematoxylin-eosin and Safranin O-Fast Green, photomicrographed and analyzed using Image Pro Plus 6.0®. Data were presented in mean and standard deviation, and ANOVA one way with posttest t was used for comparison. No significant differences in the thickness of the articular cartilage in the tibia and the talus were found. As for the number of chondrocytes in the tibia, G2 and G3 presented more cells in the anterior region of articular cartilage compared to G1, condition reversed in G4 animals. In the talus, there was an increase in the number of chondrocytes in anterior and posterior articular region of G2 and G3, and in G4, this hypercellularity was maintained only in the posterior region. As the central region of the joint, all groups presented a higher cell density compared to G1. In the morphological analysis, in the injury group (G2), changes were observed in the tibia and talus with the presence of flocculation, invagination of the subchondral bone, tidemark discontinuity and presence of pannus in the talus. In the exercise group (G3), discrete alterations were found only in talus and, in G4, the cartilage presented similar characteristics to G1. As for the morphology of the synovial membrane, this showed to be fibrous in the injury group, while in the other groups tissue changes were not noticed. Thus, sciatica led to an increase of the number of chondrocytes mainly in the talus and also produced morphological changes in the cartilage and in the synovial membrane of the talocrural joint, and the resistive physical exercise proved to be effective in the recovery of morphological characteristics of the joint components. / Atividade adequada do nervo isquiático é essencial para a integridade morfofuncional das estruturas do membro inferior, entre elas a articulação do tornozelo/talocrural, responsável por proporcionar base estável de suporte para o corpo, além de impulsioná-lo efetivamente durante a locomoção. Essas funções motoras podem ser afetadas por alterações no sistema nervoso periférico pelas mais diversas condições patológicas, como por exemplo a ciatalgia, que pode ser gerada por meio da compressão do nervo isquiático, levando a incapacidades funcionais. Dentre as modalidades de tratamento, destaca-se o exercício resistido, que apesar do seu uso difundido, ainda apresenta divergências na literatura quanto ao melhor tipo, sua intensidade e o período mais indicado para seu início. Assim, o objetivo dessa pesquisa foi verificar os efeitos do modelo experimental de compressão nervosa e o tratamento com exercício resistido sobre a morfologia da articulação talocrural de ratos Wistar. Para tanto, foram utilizados 32 ratos divididos em 4 grupos (n = 8/grupo): G1 (controle), G2 (lesão), G3 (exercício) e G4 (lesão e exercício). Três dias após a cirurgia de compressão do nervo isquiático, os grupos G3 e G4 foram submetidos ao exercício resistido de subida de escada durante 21 dias. Após a eutanásia, as articulações talocrurais seguiram o protocolo para emblocamento em parafina. As lâminas foram coradas com hematoxilina-eosina para análise morfológica geral do tecido e Safranina O-fast Green para cartilagem articular. Posteriormente fotomicrografadas e analisadas através do programa Image Pro Plus 6.0®. Os dados foram apresentados em média e desvio-padrão e para comparação dos diferentes grupos foi utilizado ANOVA one-way com pós teste t. Não foram encontradas diferenças significativas quanto a espessura da cartilagem articular na tíbia e o tálus. Já quanto ao número de condrócitos na tíbia, G2 e G3 apresentaram mais células na região anterior da cartilagem articular em relação a G1, condição revertida nos animais de G4. No tálus, houve um aumento do número de condrócitos tanto na região articular anterior quanto na posterior de G2 e G3, sendo que em G4, esta hipercelularidade se manteve apenas na região posterior. Quanto a região central da articulação, todos os grupos apresentaram uma maior densidade celular em relação ao G1. Na análise morfológica, no grupo lesão (G2), foram verificadas alterações na tíbia e tálus, com presença de floculações, invaginação do osso subcondral, descontinuidade da tidemark e presença de panus no tálus. No grupo exercício (G3), foram encontradas alterações discretas apenas no tálus e em G4, a cartilagem se apresentou com características próximas ao G1. Quanto a morfologia da membrana sinovial, essa se mostrou fibrosa no grupo lesão, sendo que nos demais grupos não foram notadas alterações teciduais. Assim, a ciatalgia levou ao aumento do número de condrócitos principalmente no tálus e também produziu alterações morfológicas na cartilagem e na membrana sinovial da articulação talocrural, e o exercício físico resistido se mostrou eficaz na recuperação das características morfológicas dos componentes articulares.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:19:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 598.pdf: 612982 bytes, checksum: 1ec87d8ea6133011e61dbd36abec0293 (MD5) Previous issue date: 2005-02-25 / Universidade Federal de Sao Carlos / Objective: The aim of this study is to evaluate the articular cartilage alterations of rat ankles, after applying unilateral cyclic passive muscle stretching protocol for three weeks in previously immobilized rats. Materials and Methods: Twenty-two male albino rats (280+25.4g) divided into four groups: I-immobilized (n=6), IS-immobilized and stretched (n=5), S-stretched (n=6) and C-control (n=5), were used in this experiment. In the immobilization protocol (groups I and IS) the left ankle joints were immobilized in full plantar flexion and this immobilization device was kept on for four weeks. The animal was allowed free cage activity with the device. In the muscle stretching protocol (groups IS and S) the left ankle joint was manually full dorsal flexed 10 times for 60 seconds with a 30s interval between each 60 second period, seven days a week for four weeks, to stretch the ankle plantar flexors muscle group. At the end of the experiment, the ankles were removed, processed in paraffin, cut and stained with Hematoxilin-Eosin and Safranin-O. Two blinded observers graduated histological and histochemical findings related to cellularity, chondrocyte cloning and Safranin-O staining, observed through light microscopy. For histological and histochemical grading, the Mankin et al (1982) and LeRoux et al (2001) modified grading system was used. For statistical analysis it was used the Spearman test, Kruskal-Wallis nonparametric test with the Post Hoc Newman Keuls and Wilcoxon non-parametric test. Results: The previously immobilized stretching group (treated limbs) presented a significantly higher reduction of proteoglycans content than the solely stretched and solely immobilized groups. No significant effect of muscle stretching on treated limbs concerning cellularity and chondrocyte cloning parameters was detected. Conclusion: These findings suggest that the stretching protocol used was harmful to the previously immobilized articular cartilage. However, the same stretching protocol did not harm the cartilage of non-immobilized groups. / Objetivo: Este estudo avaliou a resposta da cartilagem articular do tornozelo de ratos, após aplicação de um protocolo de alongamento muscular passivo cíclico em animais previamente submetidos à imobilização. Materiais e Métodos: Para isso foram utilizados 22 ratos albinos adultos jovens (280+25,4g) distribuídos aleatoriamente em 4 grupos: imobilizado (I), n=6, imobilizado e alongado (IA), n=5, alongado (A), n=6 e controle (C), n=5. Nos grupos I e IA foi utilizado um modelo de imobilização que manteve a pata posterior esquerda imobilizada com o tornozelo, deste membro, em flexão plantar máxima por quatro semanas (pata tratada). Enquanto a pata posterior direita (contralateral) e as anteriores permaneceram livres para o movimento. Após a retirada do aparato de imobilização os grupos IA e A foram submetidos ao protocolo de alongamento muscular por três semanas. Seus tornozelos esquerdos foram manualmente mantidos em flexão dorsal máxima (10 repetições com 60s de duração, intercalados com 30s de relaxamento, sete dias da semana). Após as sete semanas do experimento, os tornozelos foram retirados, processados em parafina, secionados e corados com Hematoxilina-Eosina e Safranina-O. Dois observadores graduaram os achados histológicos e histoquímicos relativos a celularidade, presença de clones e ortocromasia para Safranina-O. As avaliações foram cegas. Para isso foi elaborada uma tabela de pontuação, com nível crescente de lesão, adaptada de dois sistemas de graduação para dano a cartilagem articular descritos na literatura (Mankin et al, 1971 e LeRoux et al, 2001). Os testes estatísticos não paramétricos utilizados foram: Spearman, Kruskal- Wallis com Post Hoc Newman-Keuls e Wilcoxon, considerando grau de significância de 5%. Resultados: As patas tratadas do grupo submetido ao alongamento após a imobilização apresentaram significativamente maior perda do conteúdo de proteoglicanas que as do grupo somente imobilizado. Entretanto o alongamento não gerou alterações teciduais das variáveis estudadas nas patas tratadas dos grupos que não foram previamente imobilizados. Conclusão: Esses dados sugerem que o protocolo de alongamento utilizado nesse estudo foi prejudicial somente à cartilagem articular previamente imobilizada.

Diferenças na espessura e regularidade da cartilagem da articulação temporomandibular (ATM) ocorrem como o resultado de áreas em crescimento ou em remodelamento. Esse aspecto dificulta a interpretação clínica das imagens e geralmente negligencia a presença da fibrocartilagem. O estudo, por meio da Ressonância Magnética utilizando bobinas microscópicas, possibilita uma melhor observação da cartilagem articular. Confirmamos essa evidência por meio do estudo que analisou 20 indivíduos (40 ATM), divididos em grupo sintomático (DTM) com 10 pacientes (20 ATM) apresentando queixa clínica e suspeita diagnóstica de DTM e, o grupo controle com 10 voluntários (20 ATM) assintomáticos ou que não apresentavam sinais e sintomas clínicos de DTM. As imagens de RM sagitais oblíquas ponderadas em DP SPIR da ATM foram capazes de mostrar a cartilagem com melhor evidência tanto na cabeça da mandíbula quanto na eminência articular proporcionado mensurações, as quais se apresentaram estatisticamente iguais entre os grupos e também a avaliação da regularidade com o mesmo comportamento entre os grupos e geralmente acompanhando a morfologia da cortical óssea. Em muitos casos, principalmente quando da presença de deslocamento para anterior do disco articular, a observação se torna mais difícil, requerendo mais prática para esse tipo de avaliação. Observamos que pacientes do grupo controle apresentaram deslocamento de disco. Dessa maneira, consideramos um exame muito útil como auxiliar no diagnóstico da DTM, e com o desenvolvimento de novas terapias para doenças degenerativas e traumas na cartilagem, as imagens de RM com o uso de bobina microscópica são de crescente importância clínica e poderão desempenhar um papel importante na avaliação da eficácia dessas terapias. / Differences in thickness and regularity of the temporomandibular joints (TMJ) cartilage occur as the result of areas of growth or remodeling. This fact leads to misinterpretations on diagnosis and generally neglects the presence of fibrocartilage. The present study, using MRI microscopic coils, allows better observation of the articular cartilage. This evidence was confirmed by this study that examined 20 individuals (40 TMJ), divided into: symptomatic group with temporomandibular dysfunction (TMD) of 10 patients (20 TMJ) presenting clinical complaint and TMD diagnosis; and the control group of 10 volunteers (20 TMJ) that were asymptomatic or who had no clinical signs and symptoms of TMD. On both groups were measured cartilage thickness and if the cartilage was regular or not. The oblique sagital MR images of weighted SPIR protons density (PD\'s) TMJ were able to show the best cartilage images either in the mandibles head or on the articular eminence providing measurements. Both groups presented no statistically significant differences regarding to thickness and the evaluation of the regularity presented the same result. The regularity of the cartilage generally was similar to the morphology of the cortical bone. In many cases, especially when the presence of anterior articular disc displacement, the evaluation was more difficult, requiring practice. The control group with asymptomatic patients was found also to have disc displacements. Thus, we review a very useful tool in the diagnosis of TMD and its importance to evaluate the cartilage to development new therapies for degenerative diseases and trauma. The MRI images with the use of microscopic coil are of increasing clinical importance and might play an important role in assessing the effectiveness of these therapies.

A subnutrição tem sido ao longo dos anos um dos maiores problemas de saúde pública do mundo, que acomete principalmente crianças de países em desenvolvimento. Estima-se que em Moçambique na África Oriental, cerca de 40% das crianças são acometidas pela desnutrição crônica que resulta dentre outras afecções em baixa estatura e diminuição da capacidade física. Este estudo visa avaliar a estrutura óssea de ratos wistar submetidos à dieta básica da população de Moçambique (DM) reproduzida em laboratório. Para isso a DM foi oferecida aos animais em fase pré e pós-natal durante 42 dias. Para alguns desses animais foi fornecida a DM acrescida de 20% de caseína (DMC) subsequentemente os grupos subnutrido de Moçambique (SM) e nutrido de Moçambique (NM). Foi formado também um grupo denominado renutrido (RM) composto por animais que receberão a DMC a partir do 22&ordm; dia e até completarem 42 dias de vida. Após o desmame foram mensurados os parâmetros metabólicos da ingestão alimentar e hídrica, excreção de urina e fezes. A tíbia e o úmero do lado direito foram macerados quimicamente a fim de verificar as medidas ósseas. Esses ossos do lado esquerdo foram processados com técnicas rotineiras histológicas e corados de forma a evidenciar as estruturas cartilagineas. Os dados obtidos foram submetidos a análise de variância paramétrica seguida por comparações múltiplas pelo método de Tukey, com nível de significância p&lt;0,05. Os resultados apontam que a Subnutrição é capaz de modificar a espessura da CA e da LE e os componentes de sua MEC. Embora a inserção de caseína na dieta dos animais SM, tenha reestabelecido parâmetros da osteometria, na LE e na CA a melhora apresentada, não foi o suficiente para atingir seus parâmetros normais apresentados no grupo NM / Undernutrition has been over the years one of the major public health problems worldwide, which affects mainly children in developing countries. It is estimated that in Mozambique in East Africa, about 40% of children are affected by chronic undernutrition resulting from other conditions in stature and diminished physical capacity. This study aims to evaluate the bone structure of Wistar rats submitted to the staple diet of the population of Mozambique (DM) reproduced in the laboratory. To this DM was given to the animals in pre and postnatal 42 days. For some of these animals was provided to DM plus 20% casein (DMC) subsequently the undernourished groups of Mozambique (SM) and nursed Mozambique (NM). Also it has formed a group called renutrido (RM) consists of animals that receive the DMC from the 22nd day until completing 42 days of life. After weaning metabolic parameters were measured food and water intake, urine output and feces. The tibia and the humerus on the right side were chemically macerated in order to verify the bone measurements. These bones on the left side were processed with routine histological techniques, and stained to show the form cartilage structures. The data were subjected to parametric analysis of variance followed by multiple comparisons by the Tukey method, with significance level of p <0.05. The results show that the Malnutrition is able to modify the thickness of the CA and LE and the components of its MEC. Although the inclusion of casein in the diet of animals SM, has reestablished osteometria parameters in LE and CA improvement presented, was not enough to achieve their normal parameters presented in NM group

O objetivo deste trabalho foi avaliar a membrana de celulose bacteriana associada a células mesenquimais, que foram inoculadas juntamente com derivado do ácido hialurônico, hylano G-F 20, em patelas lesadas de suínos. Foram utilizados 12 suínos (24 joelhos) submetidos à raspagem das superfícies articulares das patelas até osso esponjoso; joelhos esquerdos sem tratamento, grupo controle (GC). Joelhos direitos, grupo tratado (GT), tiveram membranas de celulose bacteriana fixadas às superfícies de suas patelas, sendo que as mesmas foram preparadas com inoculação de células mesenquimais, ósseas e cartilaginosas, provenientes das raspagens das superfícies, lavadas em solução fisiológica 0,9%, filtradas e diluídas em 5 ml de solução fisiológica à 0,9% e posteriormente acrescentados 2 ml de hylano G-F 20. Colhidos 5 ml dessa papa que teve contido o volume de 16,35 x \'10 POT.8\' células na sua totalidade, e foram infiltrados na membrana de celulose revestindo a patela, obedecendo a distribuição de 3,27 x \'10 POT.8\' por 1,2 \'CM POT.3\'. Após 2, 4 e 6 meses os animais foram sacrificados para avaliações macroscópicas e histológicas. As superfícies patelares apresentaram aspecto de neoformação de cartilagem aos dois meses; essas membranas evoluíram para tecido fibroso de altíssima resistência, com densidade de fibras conjuntivas aumentando proporcionalmente ao tempo de cirurgia, quatro ou seis meses conforme as células do infiltrado tiveram alterações morfológicas para fibroblastos Ao mesmo tempo, parte do volume dessas células sofreu processo de degeneração e morte celular, semelhante ao mecanismo de apoptose celular. Dessa forma, ofereceu substratos para as células remanescentes, colaborando para a neoformação desse tecido conjuntivo. Não ocorreram processos inflamatórios ou agressão às cartilagens em contigüidade à membrana. Pelo contrário, em relação ao grupo controle não tratado, a membrana de celulose bacteriana utilizada segundo a metodologia aplicada, atuou com uma barreira protetora para agressões maiores à cartilagem da fossa intercondilar do fêmur que manteve a integridade de seus contornos articulares. Desta forma, segundo a metodologia utilizada, concluímos que a membrana de celulose bacteriana apresentou biocompatibilidade para uso articular, hábil para agregar condrócitos e fibroblastos. / The goal of this work was to evaluate the bacterial cellulose membrane associated with mesenchymal cells, which were inoculated with hyaluronic acid derivative, G-F 20 hylano in patelas injured pigs. 12 pigs were used (24 knees) submitted to the scraping of the articular surfaces of spongy bone patelas up; knees left without treatment, group controller (GC). Knees rights, treated group (GT), bacterial cellulose membranes had fixed on their surfaces patelas, being that they were prepared with inoculation of mesenchymal cells, bone and cartilage from sweeps of surfaces, washed in 0.9% saline solution, filtered and diluted in 5 ml of saline solution to 0.9% and subsequently added 2 ml hylano G-F 20. Collected 5 ml that Pope had contained the volume 16.35 x \'10 POT.8\' cells in its entirety, and were infiltrated in the membrane of cellulose coating the patella, obeying distribution 3.27 x \'10 POT.8\' per 1.2 \'CM POT.3\'. After 2, 4 and 6 months the animals were sacrificed to macroscopic and histological evaluations. The surfaces patellar components submitted aspect of neoplasm of cartilage to two months; These membranes evolved into fibrous tissue resistance of high density fibrous tears increasing in proportion to the time of surgery, four or six months as had infiltrated cells for morphological changes while fibroblasts, part of the volume of these cells suffered process of degeneration and cell death, similar to the mechanism of cellular apoptosis. This way, offered substrates for the remaining cells, collaborating for this connective tissue neoplasm. There were no inflammatory processes or aggression on cartilage in adjacency to the membrane. On the contrary, compared to the untreated control group, the bacterial cellulose membrane used according to the methodology applied, served with a protective barrier for larger aggressions of cartilage of the femur intercondilar trench that maintained the integrity of its articular contours. This way, according to the methodology, we found that the bacterial cellulose membrane biocompatibility presented for use articulate, skilled to aggregate condrócitos and fibroblasts.

O tratamento das lesões condrais e osteocondrais do joelho em pacientes jovens ainda permanece um desafio para os médicos ortopedistas. As técnicas de reparo destas lesões atualmente disponíveis no Brasil, como desbridamento, microfraturas e transplante osteocondral autólogo são insuficientes nos tratamentos das lesões condrais e osteocondrais maiores do que 4 cm2. O transplante osteocondral homólogo a fresco (TOF) na articulação do joelho vem sendo usado em outros países com excelentes resultados. Até o presente momento não existem relatos da utilização desta técnica no Brasil, fato que dificulta o tratamento de pacientes jovens ativos que necessitam de reparo biológico. Foram incluídos neste estudo oito pacientes de 15 a 45 anos portadores de lesões osteocondrais maiores que 4 cm2. Os enxertos a fresco foram obtidos de doadores de órgãos, sendo a articulação do joelho captada sem violação da cápsula articular e transportada ao Banco de Tecidos para processamento. O pareamento doador e receptor foi realizado conforme o tamanho, a localização e a prioridade em lista de espera de acordo com os tecidos captados, sendo os mesmos armazenados no meio de preservação Ham F-12 - GIBCO com glutamax (Invitrogen, Life Technologies, Estados Unidos) e com antibióticos. O procedimento cirúrgico foi realizado pelas técnicas de cilindro osteocondral e de superfície, sendo fixados quando necessário. Os pacientes foram avaliados através dos questionários de IKDC objetivo, IKDC subjetivo, KOOS e índice de Merle D\'Aubigne e Postel modificado. Foram realizados oito TOFs de março a outubro de 2012. A média de idade dos pacientes transplantados foi de 30,1 anos (17- 44 anos) e a média da área transplantada foi de 10,6 cm2 (4,6 - 22,4 cm2). O intervalo médio em dias entre captação e transplante foi de 15,3 (14 - 16 dias) e o número médio de cirurgias prévias ao TOF foi de 2 cirurgias (0-4 cirurgias). A pontuação na escala de IKDC objetiva no pré-operatório foi B em 12%, C em 25% e D em 63% dos pacientes; e 12% A e 88% B aos 18 meses de pós-operatório. A média da pontuação da escala IKDC subjetiva pré-operatória foi de 31,99 ± 13,4 e de 81,84 ± 9,25 em 18 meses de pós-operatório, e da escala KOOS pré-operatória foi de 46,8 ± 20,9 e de 89,58 ± 7,06 em 18 meses de pós-operatório, com melhora significativa ao longo do tempo (p < 0,01) pela análise da variância. A média da pontuação pelo índice de Merle D\'Aubigne e Postel modificado foi de 8,75 ± 2,25 no pré-operatório e de 16,75 ± 2,19 em 18 meses de pós-operatório. O resultado do teste de Friedman para amostras não-paramétricas demonstrou melhora significativa ao longo do tempo (p < 0,01). A padronização da captação, processamento e transplante de enxertos osteocondrais a fresco na articulação do joelho depende de um banco de tecidos altamente especializado e leva a excelentes resultados no tratamento de lesões osteocondrais grandes, sendo atualmente uma boa alternativa de tratamento biológico para pacientes jovens no Brasil / Treatment of chondral and osteochondral lesions of the knee in young patients is still a challenge for Orthopedic Surgeons. The techniques available nowadays in Brazil, as debridement, microfracture and autologous osteochondral transplantation are insufficient for the treatment of chondral and osteochondral lesions larger than 4 cm2. Fresh osteochondral allografts on the knee joint have been used in other countries with great success. Until the present days there are no reports of the utilization of this technique in Brazil, a fact that creates boundaries for the treatment of young active patients that need cartilage repair treatment. Eight patients with age ranging from 15 to 45 years old and osteochondral lesions larger than 4 cm2 were included in this study. Fresh grafts were obtained from organ donors and the knee joint was harvest without violation of synovium capsule and then was transported to the tissue bank for processing. Donor and receptor tissue matching occurred according to size, localization and priority on waiting list and tissue was preserved in Ham F-12 - GIBCO media with glutamax (Invitrogen, Life Technologies, United States) and antibiotics. Surgical procedure was achieved with osteochondral plugs or shell techniques, with additional fixation when needed. Patients were evaluated with IKDC objective, IKDC subjective, KOOS and modified Merle D\'Aubigne-Postel outcome scores. Eight fresh osteochondral allografts were performed from march to october, 2012. The average age was 30.1 years old (17-44) and mean graft surface area was 10.6 cm2 (4.6 - 22.4 cm2). Average time from harvest to transplantation was 15.3 days (14-16 days) and mean number of previous surgical procedures was 2 (0 - 4 procedures). Pre-operative objective IKDC score was B in 12%, C in 25% and D in 63% and was A in 12% and B in 88% in 18 months follow-up. Pre-operative IKDC subjective and KOOS score were 31.99 ± 13.4 and 46.8 ± 20.9; and in 18 months follow-up were 81.84 ± 9.25 and 89.58 ± 7.06, respectively, with a significant increase along time on variance analysis (p < 0.01). Pre-operative mean modified Merle D\'Aubigne-Postel scores were 8.75 ± 2.25 and 16.75 ± 2.19 in 18 months follow-up. Non-parametric Friedman test analysis showed a significant progression in follow-up (p < 0.01). Standards of procurement, processing and utilization of fresh osteochondral allografts in the knee joint relay on a high specialized tissue bank and promote excellent results on the treatment of large osteochondral lesions, being a good alternative of a biologic repair for young patients in Brazil

Submitted by Caroline Xavier (caroline.xavier@pucrs.br) on 2017-05-23T17:25:42Z No. of bitstreams: 1 DIS_LENIO_TOGNI_PARCIAL.pdf: 1339619 bytes, checksum: f9a493b6c4f4be9a8d1569be186595f8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-23T17:25:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_LENIO_TOGNI_PARCIAL.pdf: 1339619 bytes, checksum: f9a493b6c4f4be9a8d1569be186595f8 (MD5) Previous issue date: 2017-01-17 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Objective: This study aimed to characterize the development of temporomandibular osteoarthritis (TMJ-OA) following the surgical anterior displacement of the articular disc (ADD) in rats, in comparison to the well-established model of OA induced by the intra-articular injection of the inflammatory agent CFA. Methods: Male Wistar rats (160-180 g) were randomly divided into two surgical groups, namely ADD (submitted to anterior disc displacement) and sham-operated (surgical access, without ADD). For purposes of comparison, two additional experimental groups received an intra-articular infiltration of complete Freund?s adjuvant (CFA; 50 ?l/site; 1:1 oil/saline emulsion), or the same volume of saline solution (0.9% NaCl). Different experimental subgroups (N=8 per group) were euthanized on 15, 30 or 60 days after procedures. The region corresponding to the left TMJ was collected for histological analysis of fibrocartilage thickness (hematoxylin-eosin staining), presence of proteoglycans (safranin-O and toluidine blue), subchondral bone metabolism (tartrate-resistant acid phosphatase; TRAP) and collagen levels (Masson's trichrome). The immunopositivity for the aggrecanase ADAMTS5 was examined in the fibrocartilage layers. Micro-CT images were acquired for morphological and microstructural evaluation (30 and 60 days; N=4 per group). The levels of inflammatory serum proteins (IL-1?, IL-6 and TNF) were assessed to evaluate the possible systemic outcomes of TMJ-OA induced by ADD or CFA. Results: The analysis of hematoxylin-eosin-stained sections revealed an increment of fibrocartilage thickness in the ADD group, on 15 and 30 days, mainly in the anterior third of the condyle. In the CFA group, a fibrocartilage thickening was seen in the posterior third, only at 15 days. Increased proteoglycan contents were present in the fibrocartilage of the ADD group, according to the qualitative analysis by safranin-O and toluidine blue staining. The ADD group also displayed an augmented immunopositivity for ADAMTS5 in the fibrocartilage cells, on 15 and 30 days, whereas the expression of this aggrecanase was subtly increased in the CFA group at 15 days. The histological evaluation of the subchondral bone did not reveal any evident difference in the collagen contents, or in the number of activated osteoclasts, in the ADD or CFA groups, as indicated by Masson?s trichrome and TRAP staining. However, the micro-CT analysis showed marked morphological and structural changes in condyles of the ADD group, with osteophyte formation on 30 days, and a flattening of condylar surface on 60 days. The anterior condyle third of the ADD group also presented an increment of trabecular separation and bone surface, associated to a reduction of trabecular thickness and bone volume. The serum levels of the pro-inflammatory cytokines, namely IL-1?, TNF or IL-6, were undetectable in all the experimental groups. Conclusion: The surgical model of ADD in rats led to long-term OA-like alterations, with the formation of osteophytes, followed by flattening of the condyle surface and trabecular derangements. This experimental model might represent a reliable strategy to investigate TMJ-OA-related mechanisms, allowing the identification of novel therapies for this condition. / Objetivo: Este trabalho teve por objetivo caracterizar o desenvolvimento de um modelo de osteoartrite, na articula??o temporomandibular (TMJ-OA), posteriormente ? cirurgia de anterioriza??o de disco articular em ratos, em compara??o a um modelo j? estabelecido de indu??o de osteoartrite (OA), pela infiltra??o intra-articular do agente inflamat?rio, CFA. M?todos: Ratos Wistar machos (160-180 g) foram randomicamente divididos em dois grupos, denominados ADD (submetidos ? anterioriza??o do disco articular) e falso-operados (acesso cir?rgico, sem a anterioriza??o do disco articular). Para fins de compara??o, dois grupos experimentais adicionais receberam a infiltra??o intra-articular do adjuvante completo de Freund (CFA; 50 ?l/s?tio; 1:1 ?leo/emuls?o salina) ou, o mesmo volume de solu??o salina (NaCl 0,9%). Diferentes subgrupos experimentais (n=8 por grupo) foram eutanasiados em 15, 30 ou 60 dias depois dos procedimentos. A regi?o correspondente ? articula??o temporomandibular (ATM) foi coletada para an?lises histol?gicas quanto ? espessura da fibrocartilagem (hematoxilina-eosina), ? presen?a de proteoglicanas (safranin-O e azul de toluidina), ao metabolismo ?sseo sub-condral (fosfatase ?cida tartarato-resistente; TRAP) e aos n?veis de col?geno (tricr?mico de Masson). A imunopositividade para a agrecanase, ADAMTS5, foi avaliada nas diferentes camadas de fibrocartilagem. Imagens de microtomografia foram adquiridas para avalia??o da morfologia e microestrutura (30 e 60 dias; N=4 por grupo). Os n?veis inflamat?rios das citocinas s?ricas, IL-1?, IL-6 e TNF, foram avaliados como indicativos dos poss?veis efeitos da indu??o de TMJ-AO, por ADD ou CFA. Resultados: A an?lise da colora??o por hematoxilina-eosina demostrou um aumento na espessura da fibrocartilagem no grupo ADD, em 15 e 30 dias, principalmente no ter?o anterior do c?ndilo. No grupo CFA, um espessamento da fibrocartilagem foi encontrado no ter?o posterior, somente em 15 dias. Um aumento da presen?a de proteoglicanas foi encontrado na fibrocartilagem do grupo ADD, de acordo com a an?lise qualitativa pelas colora??es de safranin-O e de azul de toluidina. O grupo ADD tamb?m apresentou um aumento da imunopositividade para ADAMTS5 nas c?lulas da fibrocartilagem, em 15 e 30 dias, enquanto que a express?o dessa agrecanase, no grupo CFA, apresentou-se discretamente aumentada em 15 dias. A avalia??o histol?gica do osso subcondral n?o revelou nenhuma diferen?a em rela??o ao conte?do de col?geno ou, ao n?mero de osteoclastos ativos, nos grupos ADD ou CFA, como indicado pelas colora??es de tricr?mico de Masson e TRAP. Contudo, a an?lise microtomogr?fica demostrou mudan?as marcantes na morfologia e na estrutura ?ssea dos c?ndilos do grupo ADD, com forma??o de oste?fitos em 30 dias e, achatamento da superf?cie articular em 60 dias. O ter?o anterior do c?ndilo do grupo ADD tamb?m apresentou um aumento na separa??o trabecular e na superf?cie ?ssea, associada com uma redu??o da espessura trabecular e do volume ?sseo. Os n?veis s?ricos de citocinas pr?-inflamat?rias (IL-1?, IL-6 e TNF) foram indetect?veis em todos os grupos experimentais. Conclus?o: O modelo cir?rgico ADD em ratos levou a altera??es cr?nicas compat?veis com OA, com forma??o de oste?fitos, seguida por achatamento da superf?cie condilar e altera??es trabeculares. Este modelo experimental pode representar uma nova estrat?gia para investigar os mecanismos relacionados ? TMJ-OA, permitindo a identifica??o de novas terapias para esta condi??o.

Vários estudos demonstraram que o estrógeno exerce um papel fundamental na manutenção da estrutura da cartilagem articular, e que a deficiência em mulheres podem causar um aumento na incidência de degeneração articular. Sabe-se também que a atividade física é capaz de trazer benefícios para este tipo de tecido, reduzindo os riscos de lesão articular. Contudo, existem poucos os trabalhos que relacionam estes dois fatores: deficiência estrogenica e atividade física regular. O objetivo deste trabalho é verificar os efeitos da deficiência estrogênica sobre a cartilagem articular, suas implicações, e se a atividade física regular e moderada é capaz de reverter este processo natural de degeneração articular. Foram utilizadas 12 ratas Wistar adultas, divididas em quatro grupos de três animais, de modo aleatório e sistematizado, sendo eles: ratas controle sedentárias (RCS), ratas controle treinadas (RCT), ovariectomizadas sedentárias (ROS) e ovariectomizadas treinadas (ROT). Cada grupo foi analisado pelas técnicas de microscopia de luz e microscopia eletrônica de transmissão. Os resultados foram obtidos a partir do método estereológico. Os valores foram estatisticamente significantes em relação a deficiencia estrogenica para os parametros: peso, condicionamento físico, densidade numérica de condrócitos, número total de condrócitos, densidade de volume dos condrócitos, densidade de volume da matriz extracelular, volume total de matriz extracelular e densidade de volume de colágeno. Em relação aos efeitos concomitantes da atividade física e da deficiência estrogênica, os resultados foram significativamente diferentes em relação a densidade numérica, volume total da cartilagem, volume médio dos condrócitos e densidade de volume de colágeno. Estes dados nos levam a concluir que a diminuição dos níveis de estrógeno afeta profundamente a cartilagem articular da cabeça do fêmur, enquanto a atividade fisica contínua é benéfica para esta cartilagem, incluseve quando há deficiência estrogênica. / Several studies show that estrogen has an important function in maintaining the structure of articular cartilage and that deficiency in women can cause an increase in the incidence of joint degeneration. It is also known that physical activity can bring benefits to this type of tissue, reducing the risk of joint damage. However, there are few works that relate these two factors: continuous physical activity and estrogen deficiency. The aim of this study is to verify the effects of estrogen deficiency on joint cartilage, its implications, and if frequent and moderate physical activity is able to reverse the natural process of joint degeneration. A total of 12 adult female rats were divided into four groups of three animals in a random and systematic way, as follows: sedentary control rats (RCS), trained control rats (RCT), ovariectomized sedentary rats (ROS) and trained ovariectomized rats (ROT). Each group was analyzed by light microscopy and transmission electron microscopy. Results were obtained from the stereological method. The values were statistically significant in relation to estrogen deficiency for the parameters: weight, physical condition, numerical density of chondrocytes, total number of chondrocytes, chondrocyte volume density, volume density of extracellular matrix, the total volume of the extracellular matrix and volume density of collagen. Regarding the concomitant effects of physical activity and estrogen deficiency, the results were significantly different in numerical density, total volume of cartilage, mean volume of chondrocytes and volume density of collagen. These data take us to conclude that the decrease in estrogen levels profoundly affects the articular cartilage of the femoral head, while the continuous physical activity is beneficial to this cartilage, also in estrogen deficiency.

O resveratrol (RES), um composto natural, é encontrado em diversas plantas, mas pode ser observado em altas concentrações na uva e nos vinhos tintos, apresentando propriedades antioxidantes e condroprotetoras capazes de proteger a cartilagem articular, no entanto, os efeitos do resveratrol frente à subnutrição ainda são desconhecidos. Assim, o presente estudo teve por objetivo avaliar os efeitos da suplementação com resveratrol sobre o tecido cartilagíneo do joelho de ratos submetidos a uma subnutrição protéica. Para tanto, foram formados 6 grupos experimentais de animais subnutridos e nutridos nos períodos pré e pós-natal com 21 e 60 dias de vida (Grupos S21 e N21; e S60 e N60, respectivamente). Dois grupos de 60 dias, um submetido à recuperação protéica e outro suplementado com resveratrol (ambos a partir do 22&ordm; dia) formaram, respectivamente os grupos RN60 e RES60. Após o desmame, foram mensurados os parâmetros metabólicos de ingestão hídrica e alimentar, bem como os de excreção de fezes e urina. As amostras da articulação do joelho foram processadas com técnicas rotineiras de histologia e submetidas a colorações que permitam evidenciar os componentes cartilagíneo e de colágeno. Os aspectos tridimensionais e ultraestruturais da cartilagem articular também foram analisados. Para as avaliações relativas aos dados metabólicos foi utilizada a Análise de Variância - ANOVA com dois fatores (idade e dieta) e quando necessário aplicou-se pós-teste de Bonferroni. Para as demais variáveis empregou-se a Análise de Variância - ANOVA com dois fatores (idade e dieta) e a Análise de Variância ANOVA com um fator e, quando necessário, aplicaram-se comparações múltiplas pelo método de Tukey. Os nossos resultados mostram que a subnutrição é capaz de modificar as propriedades biomecânicas das cartilagens articulares do fêmur e da tíbia, causando atraso no seu desenvolvimento. Quanto às dietas aqui empregadas, mostram que a renutrição protéica melhora os efeitos da subnutrição sobre a cartilagem articular, mas não recupera em comparação ao grupo controle, enquanto que, a renutrição suplementada com resveratrol, reestabelece os parâmetros analisados. Conclui-se que o resveratrol auxiliou na recuperação dos efeitos deletérios da subnutrição, melhorando os aspectos metabólicos, estruturais e ultraestruturais da cartilagem articular do fêmur e da tíbia em fases precoces do desenvolvimento. / Resveratrol (RES), a naturally occurring compound is found in several plants, but can be observed at high concentrations in grapes and red wines having antioxidant and chondroprotective properties and able to protect the articular cartilage, however, the effects of resveratrol front malnutrition are still unknown. Thus, this study aimed to evaluate the effects of supplementation with resveratrol on the cartilage tissue of the knee of rats submitted to protein malnutrition. Thus, we formed six experimental groups of malnourished and nourished animals pre- and postnatal 21 and 60 days (Groups S21 and N21, and N60 and S60, respectively). Two groups of 60 days, one submitted to protein recovery and other supplemented with resveratrol (both from the 22nd day) formed respectively the RN60 and RES60 groups. After weaning, metabolic parameters of water and food intake and the excretion of faeces and urine were measured. The knee joint specimens were processed for routine histology staining techniques and submitted to which emphasize the collagen and cartilage components. Three-dimensional and ultrastructural aspects of articular cartilage were also analyzed. For assessments of the metabolic data was used analysis of variance - ANOVA with two factors (age and diet) and when necessary applied Bonferroni post-test. For the other variables we used analysis of variance - ANOVA with two factors (age and diet) and analysis of variance - ANOVA with one factor and, when necessary, we applied multiple comparisons by the Tukey method. Our results show that malnutrition is able to modify the biomechanical properties of articular cartilage of the femur and tibia, causing delays in their development. The diets used here, show that the protein renutrition improves the effects of malnutrition on the articular cartilage, but does not recover as compared to the control group, while renutrition supplemented with resveratrol, restores the parameters analyzed. We conclude that resveratrol helped him overcome the deleterious effects of malnutrition, improving metabolic, structural and ultrastructural aspects of the articular cartilage of the femur and tibia in the early stages of development.

A doença degenerativa da cartilagem articular, ou osteoartrose, pode ser causada por diversos fatores, dentre eles o envelhecimento. Com o aumento da longevidade no Brasil, a prevalência da osteoartrose vai aumentar com o aumento progressivo da idade média da população nas próximas décadas. O estresse do dia a dia, com o avanço da vida moderna, são acompanhados pela má alimentação, sendo essa caracterizada por uma subnutrição ou até uma nutrição excessiva. Utilizando ratos Wistar, como modelo experimental, o objetivo deste trabalho é verificar se a alimentação com baixo nível calórico ameniza ou acelera as alterações na estrutura da cartilagem articular das epífises distal do fêmur e proximal da tíbia, causadas pelo envelhecimento. Para tanto foram utilizadas 15 ratos, separados em três grupos, com 5 animais cada: C- animais de 06 meses alimentados com dieta normal (A); SR- animais de 18 meses alimentados dieta normal (A); RC- animais de 18 meses submetidos à restrição calórica de 31% alimentados com dieta B. A avaliação foi realizada pela microscopia de luz em cortes histológicos corados pela Hematoxilina-Eosina, Picrossírius e por imunohistoquímica com marcação do colágeno tipo II. Foram feitas medidas da espessura das zonas da cartilagem articular, contado o número de condrócitos por área, determinados os volumes dos núcleos dos condrócitos, a morfometria do colágeno, a identificação dos tipos de colágeno e a análise imunohistoquímica. Os resultados mostram que os animais do grupo RC ganharam massa corpórea de maneira significativamente mais lenta que os do SR a partir dos 8 meses. Os animais do SR apresentaram na tíbia, aumento da espessura total bicondilar provocado pelo aumento da zona profunda, aumento do número de condrócitos no côndilo lateral, manutenção do volume dos núcleos e da proporção volumétrica de colágeno, marcação mais heterogenea do colágeno tipo II no côndilo lateral, predominância desse tipo de fibras na zona média do côndilo medial. No fêmur os animais do SR mostraram diminuição da espessura total bicondilar provocada pela diminuição da zona profunda, sendo menor no côndilo medial, diminuição do número de condrócitos causado por diminuição da zona profunda, sendo menor no côndilo medial, diminuição do volume total dos núcleos dos condrócitos no côndilo medial, diminuição da proporção volumétrica do colágeno bicondilar, marcação heterogênea do colágeno tipo II, predomínio desse tipo de fibras nas zonas média e profunda bicondilar. Os animais do RC apresentaram na tíbia, manutenção da espessura, aumento do número de condrócitos bicondilar, manutenção do volume nuclear, aumento da densidade de colágeno, marcação menos heterogênea do colágeno tipo II no côndilo lateral, predominância desse tipo de fibras nas zonas média e profunda do côndilo lateral. No fêmur, os animais do RC mostraram aumento da espessura total pelo aumento da zona profunda no côndilo medial, aumento do número de condrócitos pelo aumento da zona profunda, sendo maior no côndilo medial, aumento do volume total dos núcleos dos condrócitos bicondilar, aumento da proporção volumétrica de fibras colágenas no côndilo medial, marcação heterogênea do colágeno tipo II e predomínio desse tipo de fibras nas três zonas da cartilagem. Dessa maneira, concluímos que os efeitos do envelhecimento e da restrição calórica são diferentes nas cartilagens articulares da tíbia e do fêmur. As alterações naturais do envelhecimento são amenizadas pela restrição calórica na cartilagem articular do fêmur, porém na cartilagem articular da tíbia, essas alterações são compatíveis com início de doença degnerativa sendo intensificadas pela restrição com sinias de avanço de osteoartrose. / A degenerative disease of articular cartilage, or osteoarthritis, can be caused by several factors, including aging. With increased longevity in Brazil, the prevalence of osteoarthritis will increase with the progressive increase of the average age of the population in the coming decades. The stress of everyday life, with the advance of modern life, are accompanied by poor diet, this being characterized by malnutrition or even excessive nutrition. Using Wistar rats as experimental model, the aim of this work is to verify if feeding with low calorie softens or accelerates changes in the structure of articular cartilage of the epiphysis of the distal femur and proximal tibia, caused by aging. For this purpose were used 15 rats divided into three groups with five animals each: C, 6 month animals fed with normal diet (A), SR-18 month animals fed with normal diet (A), RC-18 month animals submitted to calorie restriction of 31% fed with diet B. The evaluation was performed by light microscopy in histological sections stained with Hematoxylin-Eosin, Picrossirius and by immunohistochemistry with tagging of type II collagen. Measurements were made of thick zones of articular cartilage, counted the number of chondrocytes per area, the volumes of certain nuclei of chondrocytes, collagen morphometry, the identification of the types of collagen and immunohistochemical analysis. The results show that the RC group animals gained body mass significantly slower than the SR from 8 months. The SR animals showed increasing of total thickness bicondylar of the tibia caused by the increase in the deep zone, increasing of the number of chondrocytes in the lateral condyle, maintaining the volume of the cores and the volumetric proportion of collagen, the most heterogeneous labeling of type II collagen in the lateral condyle, predominance of such fibers in the middle zone of the medial condyle. In the femur the SR animals showed decreased of total bicondylar thickness caused by the decrease of deep zone, being lower in the medial condyle, decreasing the number of chondrocytes caused by decreased deep zone, being lower in the medial condyle, decreased total volume of nuclei chondrocytes in the medial condyle, decreased volumetric proportion of collagen bicondylar, marking heterogeneous collagen type II predominance of such fibers in the middle and deep zones bicondylar. The RC animals showed in the tibia, maintaining thickness, increasing the number of chondrocytes bicondylar, maintenance of nuclear volume, increased collagen density, less heterogeneous marking of type II collagen in the lateral condyle, the predominance of this type of fiber areas and average deep lateral condyle. In the femur, the animals RC showed increased of total thickness caused by increasing of the medial condyle deep zone, increasing the number of chondrocytes by increasing the deep zone, being greater in the medial condyle, increasing the total volume of the nuclei of chondrocytes bicondylar, increased volumetric proportion of collagen fibers in the medial condyle, heterogeneous marking of type II collagen and prevalence of this type of fiber in the three zones of cartilage. Thus, we conclude that the effects of aging and caloric restriction are different in the articular cartilage of the tibia and femur. The natural changes of aging are attenuated by caloric restriction in the articular cartilage of the femur, but in the articular cartilage of the tibia, these changes are consistent with early degenerative disease being intensified by restriction with signs of advanced osteoarthritis.