Orientador: Eunice Oba / Coorientador: Rodolpho Satrapa / Banca: Sony Dimas Bicudo / Resumo: O desempenho reprodutivo bovino pode sofrer interferência de diversos fatores, dentre os quais os relacionados à fisiologia, à patologia, à genética, à nutrição e ao manejo zootécnico-sanitário dos rebanhos, os quais, direta ou indiretamente podem comprometer o embrião, o feto e o trato reprodutivo das fêmeas. O propósito desse estudo foi estabelecer em receptoras de embriões (n=235), se e em qual proporção a resposta aos protocolos de sincronização hormonal, as taxas de prenhez e de perda embrionária foram, negativamente, afetadas devido à constatação de soropositividade para enfermidades reprodutivas, das concentrações plasmáticas de cortisol e de P4, das temperaturas ambiente, retal e umidade relativa do ar. Avaliou-se, ainda, o volume do CL e sua relação com a produção de P4. As taxas de soropositividade para brucelose, leptospirose, diarreia viral bovina (BVD), rinotraqueíte infecciosa bovina (IBR) e neosporose foram 2,89% (n=7), 54,47% (n=128), 43,83% (n=98), 74,04% (n=174) e 63,82% (n=150), respectivamente. Com respeito às enfermidades, as diferenças entre as taxas de receptoras reagentes e não reagentes mostraram-se estatisticamente significantes (p<0,05) para as associações da leptospirose e da neosporose, com a taxa de aproveitamento e da brucelose e IBR com a taxa de perda embrionária. Nas avaliações sobre cortisol e P4, observou-se que as diferenças entre suas respectivas concentrações plasmáticas não diferiram estatisticamente (p>0,05) entre as receptoras que resultaram prenhas (17,24±7,59; 13,58±6,41) e as não prenhas (17,78±5,54; 14,15±7,16), mas apresentaram correlação positiva (p<0,05) Desse modo, essas concentrações plasmáticas de cortisol observadas, presumivelmente, não interferiram com a capacidade de resposta das receptoras aos protocolos, mas, nos grupos de animais "Resp.P." e "N.Resp.P." suas concentrações diferiram estatisticamente (p<0,05). Em relação ao VCL e à ... / Abstract: Beef catle reproductive performance is under the interference of several factors among which those related to physiology , pathology , genetics , nutrition and management of health - livestock herds , which directly or indirectly may affect the embryo , fetus and reproductive tract of females . The purpose of this study was to establish in recipient embryos (n=235), if and in some extent, the response to synchronization protocols hormone, pregnancy and embryonic loss rates were negatively affected due to the finding of reproductive diseases serumpositivity, of cortisol and P4 serum levels and of ambient and rectal temperatures and air relative humidity; it was also evaluated the CL volume and its relation to P4 production. Brucellosis, leptospirosis, bovine viral diarrhea (BVD), infectious bovine rhinotracheitis (IBR) and neosporosis seropositivity rates were 2.89% (n=7), 54.47% (n=128), 43.83% (n=98), 74.04% (n=174) and 63.82% (n=150), respectively. Correlations of leptospirosis and neosporosis with responsive cows to protocols and of brucelosis and IBR with embryonic loss rate were all statistically significant (p<0.05). Pregnant and non- pregnant recipient cows cortisol and P4 respective serum levels (17.24±7.59, 13.58±6.41; 17.78±5.54, 14.15±7.16) did not differ statistically (p>0,05), but were positively correlated (p<0,05), thus this cortisol serum level, presumably, did not interfere with recipient cows responsiveness to the protocols, but in groups "Resp.P." and "N.Resp.P." their concentrations differed significantly (p<0,05). Regarding the VCL and the concentration of P4 , no difference was found statistically significant (p>0,05) between the mean values. For all cases studied, only correlation was observed between the amount of CL and P4 production (p < 0,05) in group "small". In relation to environmental temperatures, rectal and relative humidity values in averages were 30.07°C , 39.38°C and 69.23, respectively. Was ... / Mestre

Orientador: Fernanda da Cruz Landim / Banca: João Carlos Pinheiro Ferreira / Banca: Maria Denise Lopes / Banca: Alício martins Júnior / Banca: Edson Guimarães Lo Turco / Resumo: Este trabalho teve como objetivo geral averiguar o efeito da BL-I e da ROS em bloquear temporariamente a retomada da meiose, atuando sobre os fatores que controlam o ciclo celular meiótico de oócitos bovinos e a expansão das células do cumulus oophoros. No Experimento I, os oócitos permaneceram em meio MIV durante 6, 12 e 24 h na presença de duas concentrações de ROS (12,5 μM e 25 μM) ou na presença de BL-I (50 μ e 100 μM) ou na presença da associação de ROS (6,25 μM) + BL-I (25 μM) e em seguida foram cultivados em meio MIV livre de fármacos por 18 h, 12 h ou 24 h. Após esse tempo, os oócitos inibidos por 6 ou 12 h foram fertilizados e cultivados in vitro. O tratamento com ROS e BL-I não resultou em atraso na quebra da vesícula germinativa em relação ao controle. Entretanto, quando utilizados por 24 h, elevadas taxas de degeneração oocitária foram encontradas. Quando estes fármacos foram utilizados por 12 h com reversão por mais 12 h, verificamos uma menor taxa produção de blastocistos em relação ao grupo controle. No entanto, após a retirada do bloqueio por 6 h e maturação por 18 h um maior número de oócitos tratados tanto com ROS, como BL-I encontraram-se em MII. Da mesma forma, ao reduzirmos a dose e o tempo de inibição, os grupos tratados por 6 h de inibição meiótica e reversão por 18 h apresentaram taxas de produção embrionária similares ao grupo controle. No Experimento II, os oócitos permaneceram em meio MIV durante 6h na presença de 12,5 μM de ROS ou na presença de 50 μM de BL-I ou com a associação de ROS (6,25 μM) + BL-I (25 μM) sendo em seguida cultivados em meio MIV livre de fármacos por 18 h. Após esse tempo, os oócitos inibidos foram fertilizados, cultivados in vitro e os embriões produzidos foram submetidos a vitrificação. Os grupos BI-I e ROS + BL-I apresentaram superioridade de produção embrionária, tanto em relação ao grupo ROS como o controle. O grupo ... / Abstract: This work had as main objective to investigate the effect of BL-I and ROS in temporarily blocking the resumption of meiosis, acting on the factors that control the meiotic cell cycle of bovine oocytes and expansion of cumulus oophoros cells. In Experiment I, the oocytes remained in IVM mediafor 6, 12 and 24h in the presence of two concentrations of ROS (12.5 μM and 25 μM) or in the presence of BL-I (50 μ to 100 mM) or the association of ROS (6.25 μM) + BL-I (25 μM) and then cultured in a drug-free IVM media for 18, 12 or 24 h. After this time, the inhibited oocytes by 6 or 12 h were fertilized and cultured in vitro. Treatment with ROS and BL-I did not resulted in delay in germinal vesicle breakdown in relation to control. However, when used for 24 h, higher rates of oocyte degeneration were found. When these drugs were used for 12 h with reversion for more than 12 h, a lower blastocyst production rate compared to the control group was verified. However, after removal of the blockage for 6 h and maturation for 18 h, a higher number of oocytes treated with both ROS and BL-I were found in MII. Similarly, when the dose and duration of inhibition were reduced, the groups treated for 6 h of meiotic inhibition and reversion for 18 h showed similar embryo production rates to the control group. In Experiment II, oocytes remained in IVM mediafor 6 h in the presence of 12.5 μM of ROS or the presence of 50 μM of BL-I or the association of ROS (6.25 μM) + BL-I (25 μM) and then cultured in drug-free IVM media for 18 h. After this time, the inhibited oocytes were fertilized in vitro and the produced embryos were submitted to vitrification. The BI-I and ROS + BL-I groups showed superiority in embryo production, both in relation to the control as ROS group. The ROS + BL-I group showed higher rate of re-expansion after vitrification. Additionally, embryos from BL-I and BL-I + ROS showed lower number of apoptotic cells when compared to ... / Doutor

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Darbo uždaviniai: surinkti ir išanalizuoti mokslinę literatūrą apie chromosominius pakitimus ir jų poveikį galvijų reprodukcijai. Paruošti ir ištirti galvijų chromosomų preparatus. Įvertinti chromosomų skaičiaus ir struktūros pakitimus bei jų įtaką reprodukcinėms savybėms. Rezultatai ir aptarimas: ištyrus karves, kurioms nustatyti reprodukcijos sutrikimai, buvo identifikuoti ir chromosomų struktūros, ir chromosomų skaičiaus pakitimai. Didžiąją dalį chromosomų struktūros pakitimų, t. y. 38,2 proc., sudarė spragos vienoje chromatidėje (S1), 16,9 proc. spragos abiejose chromatidėse (S2) ir 16,9 proc. – chromatidžių trūkiai (D1). Fragmentai (F) sudarė 12,4 proc. Mažiausią dalį chromosomų struktūros aberacijų, t. y. 2,2 proc., sudarė žiedinės chromosomos (Ž) ir 2,2 proc. – chromosomų trūkiai (D2). Iš chromosomų skaičiaus pakitimų rasta 7,9 proc. poliploidijų (P). Ištyrus karves, kurioms nenustatyti reprodukcijos sutrikimai, taip pat buvo identifikuoti tiek chromosomų struktūros, tiek skaičiaus pakitimai. Iš chromosomų struktūros pakitimų nustatyta: 28,6 proc. spragų vienoje chromatidėje (S1), 11,4 proc. chromatidžių trūkių (D1), 11,4 proc. fragmentų (F), 8,6 proc. spragų abiejose chromatidėse (S2). Žiedinių chromosomų ir dicenrikų nenustatyta. Iš chromosomų skaičiaus pakitimų aptikta 34,3 proc. poliploidijų (P) ir 2,9 proc. trisomijų (Tr). Karvių grupėje, turinčių reprodukcijos sutrikimų, ląstelių su pakitimais pasitaiko 3,3 karto dažniau (p<0,001) nei kontrolinėje grupėje... [toliau žr. visą tekstą] / The Object of the work: cytogenetic analysis was performed on 26 cows from animal farm in Giraitė, 12 cows with reproductive disorder and 14 cows with no reproductive disorder (the control group). The research was performed by standard citogenetical approach modified in laboratory. The extent of the work: 48 pages. There are 4 tables and 10 pictures included. The aim of the work: to evaluate the influence of chromosomal aberrations on reproductive features of the cattle. The tasks of the work: to collect and analyze scientific literature on chromosomal changes and their impact on reproduction of cattle. To prepare and investigate the preparation of cattle chromosomes, estimate the structural and numeral variations of chromosomes and their influence on reproductive characteristics. The results and their discussion: after the examination of the cows with reproductive disorders the structural and numeral variations of chromosomes were identified. The major part of structural variations in chromosomes, i.e. 38.2%, consisted of gaps in one chromatid (S1), 16.9% of gaps in both chromatids (S2), 16.9% of cracks in chromatids (D1) and 12.4% of fragments (F). The least part (2.2%) of structural aberrations of chromosomes consisted of circular chromosomes (Ž) and 2.2% of cracks in chromosomes (D2). There were 7.9% of poliploidies (P) found in numeral variations of chromosomes. There were also identified both the structural and numerical variations of chromosomes after examining the... [to full text]

Reproductive performance of lactating dairy cows was studied using a prospective observational study of 29,462 cows in 168 commercial herds in 9 regions in Australia. There was substantial variation in all reproductive performance measures between herds, suggesting that important increases in reproductive performance would be possible in many commercial Australian herds if causal factors were identified and modified. Multivariable multilevel logistic models were used to study potential determinants for two measures of overall reproductive performance - pregnancy by week 6 after start of the mating period (mating start date or MSD) and non-pregnancy by week 21 after MSD, and for two components of overall reproductive performance - submission by week 3 after MSD and conception to first service.

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-11-08Bitstream added on 2014-08-13T18:00:46Z : No. of bitstreams: 1 000754017_20141006.pdf: 124813 bytes, checksum: 8aa4ba135a60ece4a526b02ffd3a8244 (MD5) / O desempenho reprodutivo bovino pode sofrer interferência de diversos fatores, dentre os quais os relacionados à fisiologia, à patologia, à genética, à nutrição e ao manejo zootécnico-sanitário dos rebanhos, os quais, direta ou indiretamente podem comprometer o embrião, o feto e o trato reprodutivo das fêmeas. O propósito desse estudo foi estabelecer em receptoras de embriões (n=235), se e em qual proporção a resposta aos protocolos de sincronização hormonal, as taxas de prenhez e de perda embrionária foram, negativamente, afetadas devido à constatação de soropositividade para enfermidades reprodutivas, das concentrações plasmáticas de cortisol e de P4, das temperaturas ambiente, retal e umidade relativa do ar. Avaliou-se, ainda, o volume do CL e sua relação com a produção de P4. As taxas de soropositividade para brucelose, leptospirose, diarreia viral bovina (BVD), rinotraqueíte infecciosa bovina (IBR) e neosporose foram 2,89% (n=7), 54,47% (n=128), 43,83% (n=98), 74,04% (n=174) e 63,82% (n=150), respectivamente. Com respeito às enfermidades, as diferenças entre as taxas de receptoras reagentes e não reagentes mostraram-se estatisticamente significantes (p<0,05) para as associações da leptospirose e da neosporose, com a taxa de aproveitamento e da brucelose e IBR com a taxa de perda embrionária. Nas avaliações sobre cortisol e P4, observou-se que as diferenças entre suas respectivas concentrações plasmáticas não diferiram estatisticamente (p>0,05) entre as receptoras que resultaram prenhas (17,24±7,59; 13,58±6,41) e as não prenhas (17,78±5,54; 14,15±7,16), mas apresentaram correlação positiva (p<0,05) Desse modo, essas concentrações plasmáticas de cortisol observadas, presumivelmente, não interferiram com a capacidade de resposta das receptoras aos protocolos, mas, nos grupos de animais Resp.P. e N.Resp.P. suas concentrações diferiram estatisticamente (p<0,05). Em relação ao VCL e à ... / Beef catle reproductive performance is under the interference of several factors among which those related to physiology , pathology , genetics , nutrition and management of health - livestock herds , which directly or indirectly may affect the embryo , fetus and reproductive tract of females . The purpose of this study was to establish in recipient embryos (n=235), if and in some extent, the response to synchronization protocols hormone, pregnancy and embryonic loss rates were negatively affected due to the finding of reproductive diseases serumpositivity, of cortisol and P4 serum levels and of ambient and rectal temperatures and air relative humidity; it was also evaluated the CL volume and its relation to P4 production. Brucellosis, leptospirosis, bovine viral diarrhea (BVD), infectious bovine rhinotracheitis (IBR) and neosporosis seropositivity rates were 2.89% (n=7), 54.47% (n=128), 43.83% (n=98), 74.04% (n=174) and 63.82% (n=150), respectively. Correlations of leptospirosis and neosporosis with responsive cows to protocols and of brucelosis and IBR with embryonic loss rate were all statistically significant (p<0.05). Pregnant and non- pregnant recipient cows cortisol and P4 respective serum levels (17.24±7.59, 13.58±6.41; 17.78±5.54, 14.15±7.16) did not differ statistically (p>0,05), but were positively correlated (p<0,05), thus this cortisol serum level, presumably, did not interfere with recipient cows responsiveness to the protocols, but in groups Resp.P. and N.Resp.P. their concentrations differed significantly (p<0,05). Regarding the VCL and the concentration of P4 , no difference was found statistically significant (p>0,05) between the mean values. For all cases studied, only correlation was observed between the amount of CL and P4 production (p < 0,05) in group small. In relation to environmental temperatures, rectal and relative humidity values in averages were 30.07°C , 39.38°C and 69.23, respectively. Was ...

Made available in DSpace on 2016-07-01T13:10:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-06-03. Added 1 bitstream(s) on 2016-07-01T13:14:08Z : No. of bitstreams: 1 000866036_20180601.pdf: 325201 bytes, checksum: a0d87ca43cc5f27c592376327ded4d24 (MD5) Bitstreams deleted on 2018-06-05T12:59:10Z: 000866036_20180601.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2018-06-05T13:00:19Z : No. of bitstreams: 1 000866036.pdf: 5142822 bytes, checksum: 96c25ee51aa1d598cd3170f024f468dc (MD5) / O estresse pode interferir no bem-estar animal, assim como gerar alterações cardiovasculares, endócrinas e metabólicas em vacas e fetos durante no período de transição e na fase neonatal, conhecida como período de adaptação, fase de mudanças necessárias para adaptar-se à vida extrauterina. Por conseguinte, o estúdio foi desenhado para descrever o comportamento dos parâmetros eletrocardiográficos (ECG), dos valores normais da frequência cardíaca (FC), dos índices de variabilidade da frequência cardíaca (VFC) e a sua associação com os perfis endócrinos e bioquímicos da vaca prenhe da raça Holandesa variedade preto e branco, assim como do feto e do recém-nascido. Para o ECG, as avaliações foram realizadas no grupo de recém-nascidos separados por sexo, e no grupo das vacas, separadas por período pré-parto e pós-parto. No domínio do tempo, mediu-se, a frequência cardíaca (FC), intervalo entre batimentos (RR), desvio-padrão da média de todos os intervalos RR normais (SDNN), raiz quadrada da média do quadrado das diferenças entre intervalos RR normais adjacentes (RMSSD). No domínio da frequência (por análise FFT) calculou-se a potência normalizada da banda LF (LF normal) e da banda de HF (HF normal), bem como o quociente LF / HF. Foram analisados glicose, magnésio, fósforo, cálcio, sódio e cortisol. Os dados de ECG revelaram que, durante o primeiro mês de vida, não houve diferença nas ondas P, Q, S e T, em intervalos PR, QRS, e ST e na orientação do eixo. Houve uma diferença significativa em amplitude e duração R no intervalo QT. Entre os sexos, a diferença estava na amplitude Q. Foram registrados no estágio fetal, aumento da baixa frequência (LF nu), diminuição da alta frequência (HF nu) bem como no índice SDNN até o nascimento, o que reflete mudança em direção à predominância do sistema nervoso simpático. Em vacas, os índices SDNN e LF/HF... / Stress can interfere with animal welfare, as well as generate cardiovascular, endocrine and metabolic disorders in cows and fetuses during the transition period and neonatal phase, known as adjustment period, phase changes necessary to adapt to extrauterine life. Therefore, the study was design to describe the electrocardiographic parameters (ECG), the normal range of heart rate (HR), the indices of heart rate variability (HRV) and the association with endocrine and biochemical profiles of Holstein pregnant cow, her fetus and neonate. The study was designed to evaluate the physiological changes during the adaptation period and in cows during the transition period between three weeks before and after delivery. The evaluations were done into the group of neonates between female and male and in pre and post-delivery cows for ECG. In time domain, heart rate (HR), beat-to-beat interval (RR), the square root of variance of RR intervals (SDNN), and square root of the mean squared differences of successive RR intervals (RMSSD) were assessed. The studied parameters of frequency domain were, low frequency measured in normalized units (LF nu), high frequency measured in normalized units (HF nu), and LF/HF ratio. Glucose, magnesium, potassium, phosphorus, calcium, sodium and cortisol concentrations in plasma were determined. The ECG data revealed that during the first month of life, no differences were observed in P, Q, S and T waves, in PR, QRS, and ST intervals and in axis orientation. There was a significant difference in R amplitude and duration in the QT interval. Among sexes, the difference was in the Q amplitude. In the fetal stage, an increase in low frequency (LF nu) and a decrease in high frequency (HF nu) and the SDNN index to birth was recorded, this reflects a shift toward dominance of the sympathetic nervous system. Cows in the transition period, the SDNN and the ratio LF / HF displayed a significant ...

Orientador: Simone Biagio Chiacchio / Coorientador: Maria Lucia Gomes Lourenço / Banca: Roberto Calderon Gonçalves / Banca: Rogério Martins Amorim / Banca: Ivan Roque de Barros Filho / Banca: Luís Souza Lima de Souza Reis / Resumo: O estresse pode interferir no bem-estar animal, assim como gerar alterações cardiovasculares, endócrinas e metabólicas em vacas e fetos durante no período de transição e na fase neonatal, conhecida como período de adaptação, fase de mudanças necessárias para adaptar-se à vida extrauterina. Por conseguinte, o estúdio foi desenhado para descrever o comportamento dos parâmetros eletrocardiográficos (ECG), dos valores normais da frequência cardíaca (FC), dos índices de variabilidade da frequência cardíaca (VFC) e a sua associação com os perfis endócrinos e bioquímicos da vaca prenhe da raça Holandesa variedade preto e branco, assim como do feto e do recém-nascido. Para o ECG, as avaliações foram realizadas no grupo de recém-nascidos separados por sexo, e no grupo das vacas, separadas por período pré-parto e pós-parto. No domínio do tempo, mediu-se, a frequência cardíaca (FC), intervalo entre batimentos (RR), desvio-padrão da média de todos os intervalos RR normais (SDNN), raiz quadrada da média do quadrado das diferenças entre intervalos RR normais adjacentes (RMSSD). No domínio da frequência (por análise FFT) calculou-se a potência normalizada da banda LF (LF normal) e da banda de HF (HF normal), bem como o quociente LF / HF. Foram analisados glicose, magnésio, fósforo, cálcio, sódio e cortisol. Os dados de ECG revelaram que, durante o primeiro mês de vida, não houve diferença nas ondas P, Q, S e T, em intervalos PR, QRS, e ST e na orientação do eixo. Houve uma diferença significativa em amplitude e duração R no intervalo QT. Entre os sexos, a diferença estava na amplitude Q. Foram registrados no estágio fetal, aumento da baixa frequência (LF nu), diminuição da alta frequência (HF nu) bem como no índice SDNN até o nascimento, o que reflete mudança em direção à predominância do sistema nervoso simpático. Em vacas, os índices SDNN e LF/HF... / Abstract: Stress can interfere with animal welfare, as well as generate cardiovascular, endocrine and metabolic disorders in cows and fetuses during the transition period and neonatal phase, known as adjustment period, phase changes necessary to adapt to extrauterine life. Therefore, the study was design to describe the electrocardiographic parameters (ECG), the normal range of heart rate (HR), the indices of heart rate variability (HRV) and the association with endocrine and biochemical profiles of Holstein pregnant cow, her fetus and neonate. The study was designed to evaluate the physiological changes during the adaptation period and in cows during the transition period between three weeks before and after delivery. The evaluations were done into the group of neonates between female and male and in pre and post-delivery cows for ECG. In time domain, heart rate (HR), beat-to-beat interval (RR), the square root of variance of RR intervals (SDNN), and square root of the mean squared differences of successive RR intervals (RMSSD) were assessed. The studied parameters of frequency domain were, low frequency measured in normalized units (LF nu), high frequency measured in normalized units (HF nu), and LF/HF ratio. Glucose, magnesium, potassium, phosphorus, calcium, sodium and cortisol concentrations in plasma were determined. The ECG data revealed that during the first month of life, no differences were observed in P, Q, S and T waves, in PR, QRS, and ST intervals and in axis orientation. There was a significant difference in R amplitude and duration in the QT interval. Among sexes, the difference was in the Q amplitude. In the fetal stage, an increase in low frequency (LF nu) and a decrease in high frequency (HF nu) and the SDNN index to birth was recorded, this reflects a shift toward dominance of the sympathetic nervous system. Cows in the transition period, the SDNN and the ratio LF / HF displayed a significant ... / Doutor

Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-17Bitstream added on 2015-05-14T16:59:09Z : No. of bitstreams: 1 000829407.pdf: 3139564 bytes, checksum: ac15cce43cb3520f922ab5d6b73802ab (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Este trabalho teve como objetivo geral averiguar o efeito da BL-I e da ROS em bloquear temporariamente a retomada da meiose, atuando sobre os fatores que controlam o ciclo celular meiótico de oócitos bovinos e a expansão das células do cumulus oophoros. No Experimento I, os oócitos permaneceram em meio MIV durante 6, 12 e 24 h na presença de duas concentrações de ROS (12,5 μM e 25 μM) ou na presença de BL-I (50 μ e 100 μM) ou na presença da associação de ROS (6,25 μM) + BL-I (25 μM) e em seguida foram cultivados em meio MIV livre de fármacos por 18 h, 12 h ou 24 h. Após esse tempo, os oócitos inibidos por 6 ou 12 h foram fertilizados e cultivados in vitro. O tratamento com ROS e BL-I não resultou em atraso na quebra da vesícula germinativa em relação ao controle. Entretanto, quando utilizados por 24 h, elevadas taxas de degeneração oocitária foram encontradas. Quando estes fármacos foram utilizados por 12 h com reversão por mais 12 h, verificamos uma menor taxa produção de blastocistos em relação ao grupo controle. No entanto, após a retirada do bloqueio por 6 h e maturação por 18 h um maior número de oócitos tratados tanto com ROS, como BL-I encontraram-se em MII. Da mesma forma, ao reduzirmos a dose e o tempo de inibição, os grupos tratados por 6 h de inibição meiótica e reversão por 18 h apresentaram taxas de produção embrionária similares ao grupo controle. No Experimento II, os oócitos permaneceram em meio MIV durante 6h na presença de 12,5 μM de ROS ou na presença de 50 μM de BL-I ou com a associação de ROS (6,25 μM) + BL-I (25 μM) sendo em seguida cultivados em meio MIV livre de fármacos por 18 h. Após esse tempo, os oócitos inibidos foram fertilizados, cultivados in vitro e os embriões produzidos foram submetidos a vitrificação. Os grupos BI-I e ROS + BL-I apresentaram superioridade de produção embrionária, tanto em relação ao grupo ROS como o controle. O grupo ... / This work had as main objective to investigate the effect of BL-I and ROS in temporarily blocking the resumption of meiosis, acting on the factors that control the meiotic cell cycle of bovine oocytes and expansion of cumulus oophoros cells. In Experiment I, the oocytes remained in IVM mediafor 6, 12 and 24h in the presence of two concentrations of ROS (12.5 μM and 25 μM) or in the presence of BL-I (50 μ to 100 mM) or the association of ROS (6.25 μM) + BL-I (25 μM) and then cultured in a drug-free IVM media for 18, 12 or 24 h. After this time, the inhibited oocytes by 6 or 12 h were fertilized and cultured in vitro. Treatment with ROS and BL-I did not resulted in delay in germinal vesicle breakdown in relation to control. However, when used for 24 h, higher rates of oocyte degeneration were found. When these drugs were used for 12 h with reversion for more than 12 h, a lower blastocyst production rate compared to the control group was verified. However, after removal of the blockage for 6 h and maturation for 18 h, a higher number of oocytes treated with both ROS and BL-I were found in MII. Similarly, when the dose and duration of inhibition were reduced, the groups treated for 6 h of meiotic inhibition and reversion for 18 h showed similar embryo production rates to the control group. In Experiment II, oocytes remained in IVM mediafor 6 h in the presence of 12.5 μM of ROS or the presence of 50 μM of BL-I or the association of ROS (6.25 μM) + BL-I (25 μM) and then cultured in drug-free IVM media for 18 h. After this time, the inhibited oocytes were fertilized in vitro and the produced embryos were submitted to vitrification. The BI-I and ROS + BL-I groups showed superiority in embryo production, both in relation to the control as ROS group. The ROS + BL-I group showed higher rate of re-expansion after vitrification. Additionally, embryos from BL-I and BL-I + ROS showed lower number of apoptotic cells when compared to ... / FAPESP: 2010/18994-4

Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-27Bitstream added on 2015-05-14T16:59:02Z : No. of bitstreams: 1 000827001.pdf: 1244164 bytes, checksum: 53be6cbd163a4c6a3a3afa2dbf6acc42 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Divergências genéticas de termotolerância foram demonstradas entre animais Bos taurus taurus (Holandesa) e Bos taurus indicus (Nelore). O efeito deletério do estresse térmico sobre o potencial de desenvolvimento do oócito é maior para Bos taurus taurus em comparação aos oócitos Bos taurus indicus. Portanto, o presente estudo determinou o perfil do transcriptoma em oócitos das raças Nelore e Holandesa submetidos ao estresse térmico durante a maturação in vitro (MIV), bem como a abundância de RNAm de genes candidatos em oócitos e células do cumulus submetidos aos mesmos tratamentos. Vacas não lactantes das raças Holandesa e Nelore foram submetidas à aspiração folicular guiada por ultra-som durante a estação fria. Os complexos cumulus-oócitos (CCOs) foram aleatoriamente distribuídos nos tratamentos controle (38,5 °C por 22 horas) e estresse térmico (41 °C por 12 horas, seguido de 38,5 °C por 10 horas) durante a MIV. Oócitos desnudados foram submetidos à análise de microarray bovino (Affymetrix). Genes com fold change de pelo menos 1,5 e P<0,05 foram considerados diferencialmente expressos. A análise de microarray demonstrou 127, 9 e 6 genes diferencialmente expressos entre Raça, Temperatura e interação Raça x Temperatura, respectivamente. Os genes diferencialmente expressos foram avaliados por RT-PCR em oócitos e nas suas respectivas células de cumulus. Houve uma correlação positiva entre o fold change do microarray e do RT-PCR dos oócitos para os genes KIF3A, CLDN11, BIRC3, DAP, MT1E, CCT4, DICER1 e DENND3. Em particular, o gene membro da família cinesina 3A (KIF3A) foi induzido em oócitos de Holandesa, enquanto que os genes da proteína associada à morte (DAP) e de tráfego intracelular de membrana domínio DENN/MADD 3 (DENND3) foram reprimidos em oócitos de Holandesa quando comparados a Nelore. A abundância relativa do RNAm da molécula antioxidante metalotioneína 1E ... / Genetic divergences in thermotolerance have been demonstrated between Bos taurus taurus (Holstein) and Bos taurus indicus (Nelore) animals. The deleterious effect of heat stress on oocyte developmental potential is greater for Bos taurus taurus as compared to Bos taurus indicus oocytes. Therefore, the present study determined transcriptome profile in Nelore and Holstein oocytes subjected heat shock during in vitro maturation (IVM) as well as mRNA abundance of selected candidate genes in Nelore and Holstein heat-shocked oocytes and cumulus cells. Non-lactating Holstein and Nelore cows were subjected to ultrasound-guided follicle aspiration during the cool season. Cumulus-oocyte complexes (COCs) were randomly assigned to control (38.5°C for 22 hours) and heat shock (41°C for 12 hours followed by 38.5°C for 10 hours) treatments during IVM. Denuded oocytes were subjected to Affymetrix bovine microarray. Genes with fold change of at least 1.5 and P< 0.05 were considered differently expressed. Microarray analyses demonstrated 127, 9 and 6 genes differentially expressed between Breed, Temperature and Breed x Temperature interaction, respectively. Selected differentially expressed genes were evaluated by RTPCR in oocytes and respective cumulus cells. There was a positive correlation between oocyte microarray and RT-PCR fold change for the genes KIF3A, CLDN11, BIRC3, DAP, MT1E, CCT4, DICER1 and DENND3. In particular, the member of the kinesin family 3A (KIF3A) gene was up-regulated in Holstein oocytes, while the deathassociated protein (DAP) and the protein trafficking gene DENN/MADD domain containing 3 (DENND3) were down-regulated in Holstein oocytes as compared to Nelore. The mRNA relative abundance of the antioxidant molecule metallothionein 1E (MT1E) was higher in Holstein cumulus cells, whereas, claudin 11 (CLDN11) that participates in cellular tight junctions, was higher in Nelore. Moreover, heat shock down regulated MT1E mRNA abundance ... / FAPESP: 2007/53323-0