Made available in DSpace on 2017-07-25T19:29:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lincom Koguishi.pdf: 1991536 bytes, checksum: 2ab0674dbbe3a078502f0ecb0a0b2a5b (MD5) Previous issue date: 2011-12-20 / The objective of this study was to evaluate the effects of application timing of fungicides epoxiconazole + pyraclostrobin and azoxystrobin + cyproconazole in corn in the control of Phaeosphaeria leaf spot (Phaeosphaeria maydis), rust (Puccinia sorghi), Cercospora leaf spot (Cercospora zea-maydis), stain Diplodia (Diplodia macrospora) and stem rot. Three experiments were installed in a randomized block design with four replications in plots measuring 3.2 x 5.0 meters. In experiment 1, we applied the fungicide epoxiconazole + pyraclostrobin at a dose of 99.75 + 37.5 g ai ha-1, more mineral oil (Assist) at a dose of 500 mL pc ha-1 and Experiments 2 and 3 was applied fungicide azoxystrobin + cyproconazole at a dose of 70 gy + 28 ha-1, more paraffinic mineral oil (Nimbus) at a dose of 600 mL pc ha-1. In experiment 1, applications were made at the phenological stages V8, V16, V8 and V16, V12, V15, VT and R2, and evaluated the severity of Phaeosphaeria leaf spot and Cercospora leaf spot in at R3, R4 and R5 and rot stalk the stage R6. With the data of severity, we calculated the area under the disease progress curve to Phaeosphaeria leaf spot. The lowest AUDPC occurred in treatments with a V16 application, with two applications in V8 and V16, with controls from 74 to 80%. In Experiments 2 and 3, applications of fungicides were made in V8, V16, R2, V8 and V16, V8 and R2, and R2 V16, V8, V16 and R2. Was evaluated in experiment 2 to Cercospora leaf spot, Phaeosphaeria leaf spot and stem rot. In the control of Cercospora leaf spot were the best treatment applications in developmental stage V8, which coincided with the occurrence of disease in the crop. To Phaeosphaeria leaf spot, the lowest values were in AUDPC with two applications in V8 and V16, V16 and R2 and the three applications in V8, V16 and R2, with control ranging from 25 to 40%. In Experiment 3, we assessed the common rust, leaf spot Phaeosphaeria, stain and Diplodia stalk rot. To common rust treatments containing application in V8 were the most effective with the percentage of controls over 80%. In relation to Phaeosphaeria leaf spot, the best treatment for AUDPC was the three applications (V8, V17 and R2) with 27% control. The treatments did not control the stain of Diplodia. In three experiments, was also evaluated damaged kernels, weight of thousand seeds and productivity, there being only in experiment 2, significant difference in the number and developmental stage of application for the variables weight of thousand seeds and productivity, highlighting the three applications in V8, V16 (17), R2 and applications V16 (17), R2, V8, V17. Keywords: Phaeosphaeria maydis, Puccinia sorghi, Cercospora zea / O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da época de aplicação dos fungicidas piraclostrobin + epoxiconazole e azoxystrobin + ciproconazole na cultura do milho no controle da mancha foliar de phaeosphaeria (Phaeosphaeria maydis), ferrugem comum (Puccinia sorghi), mancha foliar de cercospora (Cercospora zea-maydis), mancha de diplodia (Diplodia macrospora) e a podridão de colmo. Foram instalados três experimentos, no delineamento de blocos ao acaso com 4 repetições, em parcelas medindo 3,2 x 5,0 metros. No experimento 1, foi aplicado o fungicida piraclostrobin + epoxiconazole na dose de 99,75 + 37,5 g i.a. ha-1, mais óleo mineral (Assist) na dose de 500 mL p.c. ha-1 e nos experimentos 2 e 3 foi aplicado o fungicida azoxystrobin + ciproconazole na dose de 70 + 28 g.i.a. ha-1, mais óleo mineral parafínico (Nimbus) na dose de 600 mL p.c. ha-1. No experimento 1, as aplicações foram realizadas nos estádios fenológicos V8; V16; V8 e V16; V12; V15; VT e R2, sendo avaliada a severidade da mancha foliar de phaeosphaeria e mancha foliar de cercospora nos estádios R3, R4 e R5 e a podridão de colmo no estádio R6. Com os dados de severidade calculou-se a área abaixo da curva de progresso da doença para a mancha foliar de phaeosphaeria. Os menores valores de AACPD ocorreram nos tratamentos com uma aplicação em V16, com duas aplicações em V8 e V16, com controles de 74 a 80%. Nos experimentos 2 e 3, as aplicações dos fungicidas foram realizadas em V8; V16; R2; V8 e V16; V8 e R2; V16 e R2; V8, V16 e R2. Avaliou-se no experimento 2 a mancha foliar de cercospora, mancha foliar de phaeosphaeria e a podridão de colmo. No controle da mancha foliar de cercospora os melhores tratamentos foram as aplicações no estádio fenológico V8, os quais coincidiram com a ocorrência da doença na cultura. Para mancha foliar de phaeosphaeria, os menores valores na AACPD foram os com duas aplicações em V8 e V16, V16 e R2 e as três aplicações em V8, V16 e R2, com controle variando de 25 a 40%. No experimento 3, foram avaliadas a ferrugem comum, mancha foliar de phaeosphaeria, mancha de diplodia e a podridão de colmo. Para ferrugem comum os tratamentos que continham aplicação em V8 foram os mais eficientes com porcentagem de controles acima de 80%. Em relação a mancha foliar de phaeosphaeria, o melhor tratamento para AACPD foi o com três aplicações (V8, V17 e R2) com 27% de controle. Os tratamentos não controlaram a mancha de diplodia. Nos três experimentos avaliou-se também grãos ardidos, peso de mil sementes e produtividade, constatando-se somente no experimento 2, diferença significativa quanto ao número e estádio fenológico de aplicação, para as variáveis peso de mil sementes e produtividade, destacando as 3 aplicações em V8, V16 (17), R2 e as 2 aplicações em V16 (17), R2 e V8, V17.

A ocorrência das doenças de final de ciclo causadas pelos fungos Septoria glycines e Cercospora kikuchii é facilmente observada no campo. Entretanto, são necessárias informações precisas sobre a quantificação de danos e perdas na produtividade, bem como, a definição da melhor época para aplicação de fungicidas. A falta de um método padrão de quantificação visual pode levar a estimativas imprecisas da severidade das mesmas, induzindo a conclusões erradas. Com os objetivos de elaborar e validar uma escala diagramática para a quantificação das doenças de final de ciclo da soja, avaliar o efeito dessas doenças sobre a produtividade, identificar o melhor estádio fenológico da cultura para o controle dessas doenças, verificar a relação entre a severidade dessas doenças e a produtividade e avaliar os efeitos das mesmas sobre a duração e absorção da área foliar sadia das plantas de soja, foram instalados experimentos na Fazenda Areão (ESALQ/USP), localizada em Piracicaba - SP. Utilizou-se o cultivar de soja MG/BR - 46 (Conquista), considerado suscetível a essas doenças, adotando-se o delineamento experimental de blocos ao acaso, no esquema fatorial 2 x 3 (dois fungicidas: benomyl e tebuconazole e três momentos fenológicos de pulverização: R4, R5.3 e R6) com três tratamentos adicionais (testemunha, pulverização quinzenal de benomyl e pulverização quinzenal de tebuconazole), repetidos três vezes. Determinou-se a severidade dessas doenças; o número de vagens e de sementes por planta; a massa de 1000 sementes e a produtividade. Para quantificação da severidade dessas doenças foi elaborada uma escala diagramática a partir de folhas coletadas em campo, apresentando diferentes níveis de severidade. A área de cada folha e sua correspondente severidade foram determinadas e, seguindo-se a “Lei do Estímulo de Weber-Fechner”, elaborou-se a escala com os níveis de severidade de doença: 2,4; 15,2; 25,9; 40,5 e 66,6%. A validação foi realizada por nove avaliadores, sem experiência na avaliação das doenças de final de ciclo, os quais estimaram a severidade de 30 folíolos de soja com sintomas destas doenças. A precisão das avaliações variou de acordo com o avaliador (0,84<R 2 <0,65), bem como a acurácia (0,00<a<3,40; 0,90<b<1,29), não ocorrendo erro sistemático na superestimativa ou subestimativa da doença entre os avaliadores. Com base nos resultados obtidos em três safras agrícolas consecutivas (1999/2000, 2000/2001 e 2001/2002), pôde-se concluir que: a) a escala diagramática desenvolvida é adequada para a quantificação da severidade das doenças de final de ciclo em soja; b) as doenças de final de ciclo, quando em severidade inferior a 10%, não afetam o número de vagens e sementes produzidos por planta mas, causam redução na produtividade da soja; c) os fungicidas benomyl e tebuconazole podem ser utilizados no controle dessas doenças; d) não foi possível determinar a época fenológica mais adequada para a pulverização de fungicidas, que proporcionasse aumentos na produtividade da soja; e) em severidade dessas doenças abaixo de 10%, não existe relação entre esta variável, a massa de 1000 sementes e a produtividade; f) a absorção da área foliar sadia é a variável que melhor expressa a relação entre a severidade dessas doenças e a produtividade da soja. / The occurrence of late season leaf diseases caused by the fungus Septoria glycines and Cercospora kikuchii is easily identified in field. However, there is a need of precise information to quantify the damage and yield losses as well as to define the best occasions for fungicide applications. The lack of a standardized visual method may lead to inaccurate estimates of their severity, inducing inexact conclusions. With the purposes: to elaborate and validate a diagrammatic scale to assess late season leaf soybean diseases; to evaluate the effect of theses diseases on yield; to identify the best soybean growth stages for chemical control; to verify the relation between severity of theses diseases and yield and to evaluate the effect of theses diseases on healthy leaf area duration and healthy leaf area absorption, were installed field experiments at Fazenda Areão (ESALQ/USP), in Piracicaba - SP. The soybean cultivar MG/BR - 46 (Conquista), susceptible to both diseases was sown in a complete randomized blocks design in factorial 2 x 3 (two fungicides: benomyl and tebuconazole and three application stages: R4, R5.3 e R6) and three extra treatments (control without application, fortnightly application of benomyl and fortnightly application of tebuconazole), at three replications. The severity, the pod number per plant, the seed number per pod, the mass of 1,000 seed and yield were determined. To quantify the severity of these diseases it was elaborated a diagrammatic scale, from leaves collected in the field presenting different levels of severity. The area of each leaf and its correspondent severity were determined, and following the “Stimulus Law by Weber-Fechner” a scale was elaborated with the severity levels: 2.4, 15.2, 25.9, 40.5 and 66.6%. The validation was carried out by nine appraisers, without previous practice in assessing late season leaf diseases, who estimate the severity on 30 leaflets of soybean with disease symptoms. The evaluation precision varied according to the appraiser (0.84<R 2 <0.65), as well as the accuracy (0.00<a<3.40; 0.90<b<1.29), do not occurring systematic mistakes in the super or underestimation of the disease among the appraisers. Based on the obtained results in three consecutive crop seasons (1999/2000, 2000/2001 e 2001/2002), it was possible to conclude that: a) the developed diagrammatic scale is appropriate to quantify the late season leaf diseases severity of soybean; b) the late season leaf diseases, when in severity below 10%, do not affect the number of pod and seeds per plant but cause reduction of yield; c) the fungicides benomyl and tebuconazole may be used to control these diseases; d) it was not possible to determine the most appropriate growth stage for fungicide application, which result in yield gain; e) under severity below 10% there are not relation between this variable and the mass of 1,000 seed and yield; f) the healthy leaf area absorption is the variable which most express the relation between the severity of this diseases and the soybean yield.

Maize grey leaf spot (GLS), caused by Cercospora zeae-maydis, and potato late blight (LB), caused by Phytophthora infestans, are foliar diseases of maize and potato, two of the most widely grown crops in KwaZulu-Natal (KZN), after sugarcane and timber. Commercial maize in KZN accounts for just on 4.3% of the national maize crop. This is worth R563 million using an average of the yellow and white maize price for the 2001/02 season (at R1 332.87 ton(-1)). In 2003 KZN produced about 5% of the national potato crop (summer crop: 7531 300 10kg pockets from 2243 hectares). This equates to a gross value of R89.4 million based on an average price of R1 188 ton(-1) in 2001. Successful commercial production of maize and potatoes depends upon control of these diseases by translaminar fungicides with highly specific modes of action. This study extends an existing model available for timing of fungicide sprays for GLS and tests and compares two LB models for two calendar-based spray programmes. The study also evaluated the use of an early blight model which is caused by Alternaria solani, and over the single season of evaluation showed potential for use in KZN. For the GLS model it was found that a number of refinements are needed, e.g., the amount of infected maize stubble at planting and not the total amount of maize residue at planting. Based on two years' data, it was found that for the LB models there are no significant differences in levels of control between using a predicted fungicide programme and a calendar-based programme. The importance of knowing initial infection sites, and hence initial inoculum, was demonstrated. This led to the creation of a KZN LB incidence map, now being used to more accurately time the start of a preventative spray programme and to time the inclusion of systemic fungicides in the preventative spray programme. This study has contributed to the further development and expansion of the Automatic Weather Station Network (AWSN) at Cedara, which now comprises 15 automatic weather stations in KZN. The AWSN is currently used to aid farmers and advisers in decision-making regarding fungicide spray timing for GLS and LB. / Thesis (M.Sc.Agric.)-University of Natal, Pietermaritzburg, 2003.

Lipases são enzimas que catalisam a hidrólise de triacilgliceróis em ácidos graxos, mono e diacilgliceróis e glicerol. Em contraste com as esterases, lipases são ativadas apenas quando estão adsorvidas a uma interface óleo-água. Lipases têm sido amplamente utilizadas em muitos processos industriais, tais como química orgânica, formulações de detergentes e de produtos como cosméticos e farmacêuticos. A principal preocupação na produção de enzimas comerciais é a proteção da sua estabilidade em solução aquosa. A água facilita ou medeia uma variedade de vias de degradação física e química, durante as etapas de purificação, transporte e armazenamento. Por conseguinte, formulações sólidas são desenvolvidas para alcançar uma vida útil aceitável para essas substâncias. Spray drying é comumente usado como uma técnica de desidratação na indústria farmacêutica para fabricação de produtos em pó diretamente do estado líquido. No presente trabalho, a purificação e caracterização bioquímica de lipases produzidas pelo fungo endofítico Cercospora kikuchii, bem como os efeitos de adjuvantes no processo de secagem destas enzimas foram estudados. A lipase bruta foi purificada à homogeneidade através de cromatografia de interação hidrofóbica e gel filtração. A lipase foi purificada 5,54 vezes, com rendimento de 9% e a atividade específica de 223,6 U/mg. O peso molecular da enzima foi estimado em 65,1 kDa por SDS-PAGE e 73,5 kDa utilizando cromatografia de gel filtração, indicando que provavelmente trata-se de um monômero. A lipase mostrou um pH ótimo em 4,6 e uma temperatura ótima de 35°C. Cerca de 80,2% de sua atividade foi mantida após incubação a 40°C durante 2 horas. A Vmax e Km foram 10,28 mmol/min/mg de proteína e 0,03240 mM, respectivamente, utilizando pNPP como substrato. As lipases presentes no extrato bruto e as lipases ligadas ao micélio foram caracterizadas para avaliar o potencial de utilização em biocatálise. A lipases no extrato bruto apresentaram atividade máxima a 60ºC e pH 6,2, enquanto que as lipases ligadas ao micélio apresentaram atividade máxima a 50ºC e pH 5,4. Nos estudos de efeito da temperatura sobre a atividade enzimática, as lipases no extrato bruto mantiveram-se estáveis a 50°C, com 85,3% de atividade residual após 2 horas de incubação. As lipases ligadas ao micélio mantiveram pelo menos 75,1% de atividade residual após 2 horas de incubação a 80°C. Estes resultados mostram que as lipases de C. kikuchii têm propriedades cinéticas e termoestabilidade desejáveis para aplicações em biocatálise. As lipases presentes no extrato bruto foram secas em spray dryer com diferentes adjuvantes, e sua estabilidade foi avaliada. A recuperação da atividade enzimática após a secagem, com a adição de 10% de lactose, -ciclodextrina, maltodextrina, manitol, goma arábica, e trealose variou de 63 a 100%. A atividade da enzima foi totalmente perdida durante a secagem do extrato bruto na ausência de adjuvantes. A maioria dos adjuvantes utilizados manteve pelo menos 50% da atividade enzimática a 5°C e 40% a 25°C, após 8 meses de armazenagem. As lipases secas com 10% de - ciclodextrina mantiveram 72% da atividade a 5°C no mesmo período. A partir destes resultados preliminares foi realizada a otimização do processo de secagem utilizando -ciclodextrina, maltodextrina e lactose como adjuvantes. A análise estatística dos resultados experimentais permitiu a determinação das condições ótimas para a retenção da atividade enzimática (RAE), a saber: concentração de adjuvantes de secagem de 12,05%, temperatura de entrada do gás de secagem em 153,6oC e vazão do extrato enzimático alimentado de 9,36 g/min, para - ciclodextrina e maltodextrina como adjuvantes. Para lactose, o estudo mostrou que o aumento da quantidade de adjuvante de secagem e/ou diminuindo a temperatura do gás de entrada tem um efeito positivo sobre a retenção da atividade enzimática do produto seco. Após o processo de purificação foi realizada a secagem da enzima parcialmente purificada e da lipase pura, com estes três adjuvantes. A manutenção da atividade enzimática variou 90,6-100% quando foram utilizadas as condições ótimas para cada adjuvante de secagem. Concluindo, as lipases produzidas por C. kikuchii podem ser eficientemente secas por spray dryer, uma vez que a atividade enzimática foi mantida no extrato bruto, na lipase pura e na lipase semi-purificada submetidas à secagem. / Lipases are enzymes that catalyze the hydrolysis of triacylglycerols to fatty acids, mono and diacylglycerols, and glycerol. In contrast to esterases, lipases are activated only when they are adsorbed to an oilwater interface. They have been widely used in many industrial processes such as organic chemical, detergent and cleaning formulations and in products like cosmetics and pharmaceutical products. The main concern in the production of commercial enzymes is to protect their stability in aqueous solution. Water facilitates or mediates a variety of physical and chemical degradation pathways, active during protein purification, shipping and storage. Consequently, dry solid formulations are developed to achieve an acceptable protein shelf life. Spray drying is commonly used as a dehydration technique in the pharmaceutical industry for making powdery products directly from the liquid. In the present work, the purification and biochemical characterization of lipases produced by endophytic fungus Cercospora kikuchii as well as the effects of adjuvants on the spray drying process of theses enzymes were studied. The crude lipase was purified to homogeneity by hydrophobic interaction chromatography and gel filtration. The lipase purified was 5.54-fold with 9% recovery and the specific activity was 223.6. The molecular mass of the lipase was estimated to be 65.1 kDa using SDS-PAGE and 73.5 using gel filtration chromatography, indicating that the lipase is a monomer. The lipase demonstrated an optimum pH at 4.6, an optimum temperature of 35°C. About 80.2% of its activity was retained after incubation at 40°C for 2 hours. The Vmax and Km were 10.28 mol/min/mg protein and 0.03240 mM, respectively, using pNPP as substrate. The lipases present in crude extract and the mycelium-bound lipases were characterized in order to evaluate the potential for use in biocatalysis. The crude extract showed maximum activity at 60ºC and pH 6.2 while the myceliumbound lipases showed maximum activity at 50ºC and pH 5.4. In tests of the temperature effect on the enzymatic activity, the lipases in the crude extract was stable at 50°C, with 85.3% residual activity after 2 hours of incubation. The mycelium-bound lipases maintained at least 75.1% of residual activity after 2 h incubation at 80°C. These results show that the lipases of C. kikuchii have kinetic properties and stability characteristics suitable to applications in biocatalysis. The lipases present in crude extract were spray dried with different adjuvants, and their stability was evaluated. The recovery of the enzyme after drying with 10% of lactose, -cyclodextrin, maltodextrin, mannitol, gum arabic, and trehalose ranged from 63% to 100%; but the enzyme activity was lost in the absence of adjuvants. Most of the adjuvants used kept up at least 50% of the enzymatic activity at 5°C and 40% at 25°C after 8 months. The lipase dried with 10% of -cyclodextrin retained 72% of activity at 5°C. From these preliminary results the optimization of drying process using -cyclodextrin, maltodextrin and lactose as adjuvants was carried out. Statistical optimization of the experimental results allowed the determination of the processing conditions that maximized the retention of the enzymatic activity (RAE), namely: concentration of drying adjuvants of 12.05 %, inlet temperature of the drying gas of 153.6oC, and flow rate of the enzymatic extract fed to the dryer of 9.36 g/min, for the b-cyclodextrin and maltodextrin as adjuvants. For lactose as adjuvant the study showed that increasing the amount of drying adjuvant and/or decreasing the inlet gas temperature has positive effect on the retention of enzymatic activity of the dried product. After the purification process was carried out the drying of the partially purified enzyme and pure lipase, using these three adjuvants. The retention of enzymatic activity ranged from 90.6 to 100% when was used the optimal conditions for each drying adjuvant. Concluding, the lipases produced by C. kikuchii may be efficiently spray dried since its activity enzimatic was retained in crude extract, pure lipase and in semi-purified lipase after drying.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2017-08-22T18:10:01Z No. of bitstreams: 1 2016 - Kerly Martinez Andrade.pdf: 5719602 bytes, checksum: 90b1873e2b692ed4bcabe9969709919b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-22T18:10:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016 - Kerly Martinez Andrade.pdf: 5719602 bytes, checksum: 90b1873e2b692ed4bcabe9969709919b (MD5) Previous issue date: 2016-09-05 / CAPES / The Atlantic Forest is one of the ecosystems richest in biological diversity of the planet and is directly responsible for the quality of life of thousands of Brazilians. Among the species present in the Atlantic including PNM Curi?, Paracambi, R.J., are present cercosporoid fungi, represented by the genus Cercospora. Are plant parasitic fungi, polyphagous and cosmopolitan, causing leaf spots, as well as in flowers, fruits and cereal seeds, vegetables, ornamental plants of forest trees and grasses. These fungi were quite challenged in recent years, mainly because of its immense morphological variation and studies based on nucleic acid sequences, have become widely used for the elucidation of several doubts in its taxonomy, then for the knowledge and description of new species in new hosts are so important to discuss their morphology as well as studies using molecular data for this group. This work was developed aiming to increase the knowledge of biodiversity of cercosporoid fungi associated to different botanical families from the Atlantic Forest in the state of Rio de Janeiro. From October, 2014 to May, 2016 several collections of plants with leaf spot symptoms were collected in Atlantic Forest areas, especially in the PNM Curi?, Paracambi, RJ. and areas of the municipality of Serop?dica, RJ. and taken to DENF laboratories (Mycology) / UFRRJ, and studied using optical, dissecting and scanning electron microscope techniques and several attempts of isolation in axenic culture media were made, for their in vitro characterization and extraction of DNA for molecular characterization studies. Collection of material was done at five different times in PNM Curi? and several other sporadic within the campus UFRRJ and Fazendinha EMBRAPA Agrobiology - Serop?dica. It was about 150 samples, of which 22 species are presented in this work, in Cercospora genres (2 species), Passalora (2 species) and Pseudocercospora (18 species). Ten species were isolated in PDA medium and had their molecular analysis performed with ITS (IT1-5.8S-ITS2). Based on morphometric data are proposed 21 likely new species and a known one found in B. nivea, which was confirmed with molecular data. These species will be presented as well as its taxonomic position discussed. / O bioma Mata Atl?ntica representa um dos ecossistemas com maior riqueza em diversidade biol?gica do planeta e ? diretamente respons?vel pela qualidade de vida de milhares de brasileiros. Entre as esp?cies presentes na Mata Atl?ntica incluindo PNM Curi?, Paracambi, R.J., est?o presentes os fungos cercospor?ides, representados pelo g?nero Cercospora. S?o fungos fitoparasitas, pol?fagos e cosmopolitas, causadores de manchas foliares, em flores, frutos e sementes de cereais, hortali?as, plantas ornamentais, de ess?ncias florestais e de gram?neas. Estes fungos foram bastante questionados nos ?ltimos anos, principalmente pela sua imensa varia??o morfol?gica e estudos baseados em sequ?ncias de ?cidos nucleicos, tornaram-se amplamente utilizados para a elucida??o de v?rias d?vidas taxon?micas logo, ? importante o conhecimento e descri??o de novas esp?cies em novos hospedeiros e discutir sua morfologia bem como realizar estudos com dados moleculares para este grupo. Este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de ampliar o conhecimento da biodiversidade f?ngica de cercosp?roides associada a diferentes fam?lias bot?nicas representadas da Mata Atl?ntica, no Estado do Rio de Janeiro. Durante o per?odo de outubro de 2014-maio 2016, 150 plantas com sintomas de manchas foliares foram coletadas em ?reas de Mata Atl?ntica, em especial no PNM do Curi?, Paracambi-RJ, e ?reas do munic?pio de Serop?dica, RJ. Foram levados aos laborat?rios do DENF (Setor de Micologia)/ICBS/UFRRJ e estudados usando t?cnicas de microscopia ?ptica, estereosc?pica e eletr?nica de varredura. V?rias tentativas de isolamentos em meio ax?nico foram efetuadas, visando sua caracteriza??o in vitro e extra??o de DNA para estudos de caracteriza??o molecular (laborat?rios da EMBRAPA Agrobiologia). Foram efetuadas cinco coletas em diferentes ?pocas no PNM Curi? e v?rias outras espor?dicas dentro do Campus da UFRRJ, bem como Fazendinha da EMBRAPA Agrobiologia ? Serop?dica. Totalizaram-se cerca de 150 amostras, das quais 22 esp?cies foram estudadas e s?o apresentadas neste trabalho, nos g?neros Cercospora (2 esp?cies), Passalora (2 esp?cies) e Pseudocercospora (18 esp?cies). Dez esp?cies foram isoladas em meio BDA e tiveram sua an?lise molecular efetuada com ITS (IT1-5.8S-ITS2). Com base em dados morfom?tricos, s?o propostas 21 prov?veis novas esp?cies e uma j? conhecida encontrada em B. nivea, o qual teve a confirma??o com dados moleculares. Estas esp?cies ser?o apresentadas, bem como sua posi??o taxon?mica discutida.

Fungi in the genus Trichoderma have been characterized as biocontrol agents of plant pathogens since the 1930s. The use of biologicals for disease management has increased in recent years, typically marketed as a safer alternative to chemical applications. However, biologicals often lack consistent control across varying environmental conditions. To overcome the loss in efficacy due to environmental conditions, biologicals can be combined with common fungicide seed-treatments to provide improved control. Additionally, the presence of a biological organism could slow the development of a pathogen population. Greenhouse trials were conducted to determine the baseline root colonization of three Trichoderma spp. used in conjunction with five commonly used seed treatments. In field trials, a stand-alone treatment of the Trichoderma isolates was assessed for management of Rhizoctonia root rot (caused by Rhizoctonia solani) and frogeye leaf spot (caused by Cercospora sojina). The greenhouse trial provided evidence that isolates of T. virens and T. hamatum can colonize the roots of plants in which seeds were treated with metalaxyl + prothioconazole + penflufen or metalaxyl + prothioconazole + penflufen + fluopyram. Surprisingly, in the Rhizoctonia root rot trials, the soybean seedlings treated with Trichoderma spp. had significantly reduced stand compared to the R. solani inoculated control. For the frogeye leaf spot trial, an application of T. virens conidial suspensions as a foliar treatment significantly (P ≤ 0.10) reduced frogeye leaf spot severity of soybean compared to a non-treated control. Future research is warranted to better understand the potential efficacy in additional environments and the mechanism(s) of action used by the Trichoderma isolates evaluated in these experiments.

Diss. (sammanfattning). Uppsala : Sveriges lantbruksuniversitet, 2004. / Härtill 4 uppsatser.

Thesis (M.S.)--Montana State University--Bozeman, 2004. / Typescript. Chairperson, Graduate Committee: Barry J. Jacobsen. Includes bibliographical references.

Submitted by Matheus Bravo de Souza (matheusbravosouza@gmail.com) on 2018-09-12T01:49:32Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Matheus_Bravo_de_Souza_2018.pdf: 1480906 bytes, checksum: f25d88d208b2e85f665f1aab67b15b6a (MD5) / Approved for entry into archive by Neli Silvia Pereira null (nelisps@fcav.unesp.br) on 2018-09-12T18:22:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 souza_mb_me_jabo.pdf: 1480906 bytes, checksum: f25d88d208b2e85f665f1aab67b15b6a (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-12T18:22:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 souza_mb_me_jabo.pdf: 1480906 bytes, checksum: f25d88d208b2e85f665f1aab67b15b6a (MD5) Previous issue date: 2018-07-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A cultura do amendoim representa uma excelente opção econômica e social para pequenos e médios produtores, uma alternativa importante para o aproveitamento de áreas agrícolas e ótima cultura para reforma dos canaviais. A cultura é, no entanto, afetada por vários problemas de ordem fitossanitária, com destaque às doenças, o principal fator para elevação dos custos de produção. As doenças fúngicas mancha-castanha e mancha-preta, causadas respectivamente por Cercospora arachidicola e Cercosporidium personatum, são responsáveis por perdas superiores a 50%, e às vezes a totalidade da produção, quando sob condições ambientais favoráveis aos patógenos e ausência de um bom manejo. Todas as cultivares empregadas são suscetíveis aos patógenos. O controle destas doenças é baseado no uso de fungicidas do grupo das estrobilurinas (IQe) e dos triazóis, combinado com os fungicidas protetores que visam também o manejo da resistência dos patógenos. São feitas até oito aplicações de fungicidas por safra, com intervalos entre as aplicações de no máximo 15 dias. Neste estudo, o controle das cercosporioses foi mediante o emprego do fungicida oxicloreto de cobre SC, aplicado isoladamente, em combinação com silício e fungicidas IQe, triazol e chlorothalonil. Os testes foram realizados com a cultivar IAC OL-3 in vitro e em campo agrícola. No teste in vitro, foi determinada a eficiência do oxicloreto de cobre SC na inibição da germinação de conídios de C. personatum comparando-o com o chlorothalonil. Já no teste a campo foram avaliados os melhores tratamentos para determinar a eficácia do fungicida cúprico no controle da C. arachidicola e C. personatum. O fungicida oxicloreto de cobre SC, foi eficiente na inibição da germinação de conídios de C. personatum in vitro nas doses de registro de 0,82 e 1,2 L ha-1, apresentando inibição entre 99% a 100%, a eficácia é comparável à dosagem empregada por chlorothalonil a 2,0 L ha-1. O emprego do posicionamento em campo agrícola do fungicida oxicloreto de cobre, na formulação SC, associado a chlorothalonil, piraclostrobina e epoxiconazol, mostra-se eficiente como medida complementar ao controle do complexo das cercosporioses na cultura do amendoim. O oxicloreto de cobre SC quando aplicado isoladamente a 1,2 L ha-1 não apresentou controle mínimo satisfatório. Não houve melhorias nos níveis de controle das cercosporioses quando do uso complementar de silício a 0,5 L ha-1. / Peanut crop represents an excellent economic and social option for small and medium producers, being an important alternative for using agricultural areas and a great crop for sugarcane field reform. However, this crop is affected by several phytosanitary problems, standing out the diseases, which are the main factors for increasing the production costs. The fungal diseases early and late leafspots, caused respectively by Cercospora arachidicola and Cercosporidium personatum, are responsible for losses of more than 50%, sometimes reaching the entire production when environmental conditions are favorable to pathogens and there is no adequate management. All the cultivars are susceptible to these pathogens. The control of these diseases is based on the use of strobilurin (QoI) and triazole fungicides combined with protective fungicides that also aim at the management of pathogen resistance. Up to eight applications of fungicides are made per crop season, with intervals between applications of up to 15 days. In this study, the control of cercosporioses was carried out using the fungicide copper oxychloride SC, applied in isolation and in combination with silicon and the fungicides QoI, triazole, and chlorothalonil. The tests were carried out in vitro and under field conditions with the cultivar IAC OL-3. In the in vitro test, the efficiency of copper oxychloride SC in the inhibition of germination of conidia of C. personatum was determined by comparing it with chlorothalonil. In the field test, the best treatments were assessed to determine the effectiveness of the cupric fungicide in the control of C. arachidicola and C. personatum. The fungicide copper oxychloride SC was efficient in inhibiting the conidia germination of C. personatum in vitro at doses of 0.82 and 1.2 L ha−1, with an inhibition between 99 and 100%. Its effectiveness is comparable to the chlorothalonil at a dose of 2.0 L ha−1. The use of copper oxychloride SC associated with chlorothalonil, pyraclostrobin, and epoxiconazole under field conditions is efficient as a complementary measure to control the cercosporioses in the peanut crop. The fungicide copper oxychloride SC, when applied in isolation at a dose of 1.2 L ha−1, did not present a satisfactory minimum control. No improvements were observed in the levels of control of the cercosporioses when using the silicon at a dose of 0.5 L ha−1.

ARANTES, Mariana Reis. Expressão gênica da toxina da soja (SBTX) durante o desenvolvimento da soja [Glycine max (L.) Merril] e seu envolvimento na defesa vegetal. 2015. 120 f. Dissertação (Mestrado em bioquímica)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2015. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-09-01T19:49:36Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_mrarantes.pdf: 2506880 bytes, checksum: 104fd156a0b0653c61de679f81e853eb (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2016-09-02T20:52:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_mrarantes.pdf: 2506880 bytes, checksum: 104fd156a0b0653c61de679f81e853eb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-02T20:52:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_mrarantes.pdf: 2506880 bytes, checksum: 104fd156a0b0653c61de679f81e853eb (MD5) Previous issue date: 2015 / Brazil is the second major global soybean producer, whose magnitude is due to its use multiples. However, losses in productivity of soybean grains in the field are still significant, especially those caused by pathogenic fungi. In view of this obstacle, it is important to search natural molecules able to inhibiting the progress of fungal diseases in an environmental friendly practice. Among the soybean molecules which could be used for this purpose, the soybean toxin (SBTX) stands out. SBTX is a protein composed of two subunits (17 and 27 kDa) isolated from seeds with in vitro activity against phytopathogenic fungi. The present study aimed to verify the SBTX tissue localization in soybean seed cotyledons, as well as to evaluate the gene expression profile of two SBTX subunits, both in different stages of plant development and in response to treatment with plant defense elicitors. Soybean seeds were grown in a greenhouse and plant tissues harvested at different days. In addition, soybean primary leaves were treated with salicylic acid (SA) or inoculated with the Cercospora kikuchiii (CK) spores and harvested at different times after the treatments. Based on the N-terminal sequences of the SBTX subunits, primers were designed and their gene expression evaluated by quantitative real-time PCR technique. SBTX tissue localization was performed by immunohistochemistry using anti-SBTX. Transcripts for both SBTX subunits were detected in all plant tissues, predominantly in cotyledons and unifoliate leaves in the early stages of their development, as well as in mature seeds. SBTX was found in the epidermis of the cotyledons. Transcripts were detected for both genes SBTX17 e SBTX27 in all tissues collected, but their expression levels were different. The highest transcript levels for both SBTX subunits were found in mature seeds, cotyledons and unifoliate leaves. In cotyledons, SBTX was found in the epidermis. Leaves treated with elicitors showed induction of the corresponding 17 and 27 kDa subunit transcripts, however this response was earlier in the CK treatment (from 6 h) compared to AS treatment (from 12 h). In almost all analyses, the highest transcript levels were found for the 27 kDa subunit. The ubiquitous and constitutive gene expression during plant development, the induction of gene expression by defense response elicitors and the localization on the surface of cotyledons support the role of SBTX in plant defense and its use to produce fungal-resistant transgenic soybean plants. / O Brasil é o segundo maior produtor mundial de soja, destacando-se por sua multiplicidade de uso. Entretanto, perdas na produtividade de seus grãos em campo são ainda consideráveis, particularmente oriundas das doenças causadas por fungos. Diante desse obstáculo, emerge a necessidade de busca de moléculas naturais capazes de inibir o progresso dessas doenças, sem causar impactos ambientais. Dentre as moléculas presentes na soja, com potencial de uso para essa finalidade, destaca-se a toxina da soja (SBTX), uma proteína isolada de sementes, composta por duas subunidades (17 e 27 kDa) e ativa contra fungos fitopatogênicos. Esse trabalho teve como objetivos verificar a localização tecidual da SBTX em cotilédones de sementes maduras, bem como avaliar seu perfil de expressão gênica ao longo do desenvolvimento da soja e, também, em resposta ao tratamento com elicitores de defesa vegetal. Sementes de soja foram cultivadas em casa de vegetação e, ao longo do desenvolvimento da planta, diferentes tecidos vegetais coletados. Em adição, folhas primárias da soja foram tratadas com ácido salicílico (AS) ou inoculadas com esporos do fungo Cercospora kikuchii (CK) e coletadas em diferentes tempos após os tratamentos. Iniciadores foram desenhados com base nas sequências NH2-terminal das subunidades de SBTX e a expressão gênica foi avaliada pela técnica de RT-PCR quantitativa. A localização de SBTX em sementes foi avaliada por imunohistoquímica, usando anti-SBTX. Transcritos dos genes SBTX17 e SBTX27 foram detectados em todos os tecidos vegetais coletados, porém seus níveis de expressão foram diferenciados. Níveis mais elevados de transcritos para ambas as subunidades da SBTX foram detectados em sementes maduras, cotilédones e folhas unifoliadas. Nos cotilédones, SBTX foi encontrada na epiderme. Indução da expressão de transcritos da SBTX ocorreu em ambos os tratamentos, porém essa resposta se manifestou mais rápida (a partir de 6 h) com CK ao invés de AS (a partir de 12 h). Praticamente, em todas as análises, transcritos do gene SBTX27 prevaleceram em relação àqueles do SBTX17. A presença constitutiva e ubíqua de transcritos dos genes da SBTX ao longo do desenvolvimento da planta, a indução da expressão desses genes por elicitores de resposta de defesa e a localização da toxina na superfície dos cotilédones validam o papel de defesa atribuído a SBTX, suscitando a possibilidade de uso dessa proteína na produção de soja resistente ao ataque de fungos de relevância agronômica.