Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-06-25Bitstream added on 2014-06-13T20:35:26Z : No. of bitstreams: 1 ribeiro_mcm_me_botfmvz.pdf: 287673 bytes, checksum: dec8c154bcb68842908b9737b4e6eeb8 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A cinomose e a parvovirose canina são duas enfermidades infecto-contagiosas de grande importância para a clínica de pequenos animais onde a PCR vem sendo aplicada com ótimos resultados no diagnóstico. No entanto, para o sucesso da técnica, é necessário que o ácido nucléico esteja o mais puro possível e livre de inibidores das polimerases (Transcriptase reversa e/ou Taq DNA polimerase), desejando-se um método de extração simples e rápido. O teste de coaglutinação utilizando o Staphylococcus aureus (COA) é baseado na propriedade da proteína A de se ligar especificamente à porção Fc da imunoglobulina G de alguns mamíferos e algumas subclasses de IgG de camundongos. Assim, neste trabalho utilizou-se a coglutinação para obtenção de DNA ou RNA livres de inibidores, com capacidade de concentração de partículas virais dispersas nas amostras biológicas e de forma simples, rápida e de baixo custo. Para tanto, 10 amostras de fezes positivas para o vírus da parvovirose canina e 17 amostras de urina positivas para o vírus da cinomose foram submetidas à extração de ácidos nucléicos utilizando o COA e kits comerciais para posteriormente serem analisadas pela PCR em tempo real e PCR convencional respectivamente. As amostras de fezes foram diluídas de 1: 10 a 1: 100 000 e as amostras de urina foram utilizadas puras. A metodologia desenvolvida foi eficiente na extração dos dois tipos de amostra. O método proposto demonstrou ser confiável e de baixo custo para a preparação de DNA e RNA viral para o diagnóstico molecular. / PCR presents excellent results for the diagnosis of canine distemper and canine parvoviruses, two important infectious and contagious diseases for small animal internal medicine. However, success of technique depends on nucleic acid samples free of polymerase inhibitors (Reverse Transcriptase and / or Taq DNA polymerase). The coagglutination test using Staphylococcus aureus (COA) is based on the property of specific binding of protein A to the Fc portion of immunoglobulin G of some mammals and some of IgG subclasses of mice. This work was carried out the coagglutination procedure to obtain nucleic acid inhibitors free, with capacity for viral particle concentration dispersed in biological samples, simply, quickly and low cost. For this purpose, 10 canine parvovirus positive stool samples and 17 canine distemper virus positive urine samples were submitted to the preparation of nucleic acids using the COA and commercial kits in order to be analyzed by real-time PCR or conventional PCR respectively. Fecal specimens were diluted from 1: 10 to 1: 100 000 and urine samples were used pure. The developed methodology was efficient in extracting the two types of sample. The method proposed demonstrated to be reliable and cheap to prepare viral DNA or RNA for molecular diagnosis.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-07-31Bitstream added on 2014-06-13T20:32:08Z : No. of bitstreams: 1 sanches_cdc_me_botfmvz.pdf: 295039 bytes, checksum: 6f34579c879b04e0904921b7b1b9cfe5 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / A cinomose é uma doença infecto-contagiosa viral, sistêmica e letal causada pelo Morbilivírus que acomete cães de todas as idades e apresenta sinais clínicos respiratórios, gastrintestinais, dermatológicos, oftálmicos e neurológicos, que podem ocorrer sequencialmente ou isoladamente. Este estudo teve como objetivo comparar lesões encefálicas utilizando a histopatologia e avaliar a quantidade de vírus pela imunoistoquímica em cães tratados com Ribavirina na dose de 30mg/Kg por via oral uma vez ao dia por 15 dias e animais não tratados com esse fármaco, e que devido a evolução desfavorável da doença foram eutanasiados. Os animais foram atendidos e tratados durante a rotina do Setor de Enfermidades Infecciosas dos Animais Domésticos- FMVZ- UNESP/ Botucatu, SP. A análise histopatológica constituiu na avaliação de córtex cerebral, cerebelo, tálamo, tronco encefálico, hipocampo e visualização de manguitos perivasculares em meninges. A partir dessas regiões foi possível identificar e classificar lesões como: desmielinização; presença de manguitos perivasculares, edema, necrose neuronal, alterações vasculares (congestão, hemorragia e trombose) e alterações inflamatórias (meningite, meningoencefalite e meningoencefalomielite). Foi observado que a desmielinização se manteve altamente presente nos dois grupos, e que quando comparados estatisticamente não existe diferença significante entre os grupos, assim como na formação de manguitos perivasculares. Houve diminuição considerável do edema em todas as estruturas avaliadas, e a ribavirina® se mostrou eficaz na redução da inflamação encefálica, assim como a necrose neuronal foi menor em quase todas as estruturas avaliadas no grupo tratado, com exceção do tálamo. A análise estatística comparativa da marcação viral entre os grupos se mostrou significante somente para o cerebelo, tálamo e tronco encefálico / Distemper is a viral infectious disease, caused by systemic and lethal morbillivirus that affects dogs of all ages and clinical signs respiratory, gastrointestinal, dermatological, ophthalmic and neurological disorders, which may occur sequentially or separately. This study aimed to compare brain lesions using histopathology and assess the amount of virus by immunohistochemistry in dogs treated with Ribavirin at a dose of 30mg/Kg orally once daily for 15 days and animals not treated with this drug, and that due to the unfavorable development of the disease were euthanized. The animals were treated and handled during routine Division of Infectious Diseases of Domestic Animals-FMVZ-UNESP / Botucatu, SP. Histopathologic analysis was to evaluate the cerebral cortex, cerebellum, thalamus, brainstem, hippocampus and viewing perivascular cuffs in the meninges. From these regions it was possible to identify and classify lesions such as demyelination, the presence of perivascular cuffing, edema, neuronal necrosis, vascular changes (congestion, hemorrhage and thrombosis) and inflammatory changes (meningitis, meningoencephalitis and meningo-encephalomyelitis). It was observed that the demyelination remained strongly present in both groups, and compared statistically no significant difference between groups, as well as the formation of perivascular cuffs. There was a considerable decrease of the edema measured in all structures, and ribavirin ® was effective in reducing brain inflammation, and neuronal necrosis was lower in almost all structures evaluated in the group treated with the exception of the thalamus. The comparative statistical analysis of the viral marking between groups was significant only for the cerebellum, thalamus and brainstem

Orientador: João Pessoa Araújo Júnior / Banca: Marcos Bryan Heinemann / Banca: Clarice Weis Arns / Banca: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Banca: José Paes de Oliveira Filho / Resumo: Devido às diversas formas de apresentação clínica e aos sinais clínicos comuns com outras afecções, o diagnóstico laboratorial do CDV (Canine distemper virus) se torna necessário. A RT-PCR seguida da NESTED com amostras de urina é atualmente a técnica mais recomendada para o diagnóstico do CDV. No Capítulo 2, foi desenvolvida a técnica de One-Step-RT-qPCR utilizando o sistema de detecção Syber Green I. Foram testados e comparados três kits comerciais (Sigma®, Promega® e Qiagen®). Foi determinada a sensibilidade analítica de dois sistemas de detecção (Sistema A e Sistema B) utilizando uma curva padrão de RNA sintético. Os três kits comerciais testados detectaram o vírus em 100% das urinas provenientes de animais sintomáticos e o kit da Qiagen® mostrou melhores resultados de reação. O Sistema A detectou aproximadamente 10 cópias de RNA por microlitro e no Sistema B detectou 100 cópias de RNA por microlitro na RT-qPCR e 10 cópias por microlitro quando seguida da NESTED-qPCR. No Capítulo 3 foram desenvolvidos três imunoconjugados de microesferas de poliestireno (MP) utilizando anticorpos policlonais hiperimunes anti-CDV (IgY, IgG e Proteína A+IgG) para o preparo de RNA e aplicação na RT-qPCR. A aplicação dos conjugados foi comparada ao método convencional de extração de RNA por kit comercial. Os conjugados foram padronizados e a sensibilidade analítica foi determinada através de curva padrão de RNA sintético. A sensibilidade diagnóstica foi determinada utilizando-se conjugado com IgY, MP sem anticorpos conjugados e urina adsorvida diretamente nos tubos de qPCR / Abstract: The diagnosis of canine distemper is usually based on clinical suspicion of the disease. However, due to the different clinical forms of the disease and other disorders common to clinical signs, the laboratory diagnosis is necessary. The RT-PCR followed by NESTED is currently the method used to diagnosis of CDV (Canine Distemper Virus). The Chapter 2 aimed to standardized the technique of One-Step RT-qPCR-using Syber Green I system. Three commercial kits (Sigma®, Promega® and Qiagen®) were tested and compared. Analytical sensitivity of two detection systems (System A and System B) was determined using a standard curve. The three commercial kits tested detected the virus in 100% of samples from symptomatic dogs and the kit of Qiagen® showed better results. The System A detected approximately 10 RNA copies/μL and System B detected approximately 100 RNA copies/ μL in RT-qPCR and 10 RNA copies/ μL when followed by NESTED-qPCR. In Chapter 3 three immunoconjugates were developed with polystyrene microspheres (PM) using polyclonal hyperimmune anti-CDV antibody (IgY, IgG and protein A+IgG) to prepare RNA to canine distemper molecular diagnosis and comparison with the conventional method of RNA extraction by commercial kit. Conjugates were standardized and the analytical sensitivity was determined by standard curve. The diagnostic sensitivity was determined using IgY-conjugated, PM without conjugated antibodies and urine adsorption directly qPCR in tubes / Doutor

Orientador: Stelio Pacca Loureiro Luna / Coorientador: Jean Guilherme Fernandes Joaquim / Banca: Antônio Carlos Paes / Banca: Alexandre Mendes Amude / Resumo: A cinomose é uma enfermidade infectocontagiosa e multissistêmica de ocorrência mundial com alta morbidade e mortalidade. Quando acomete o sistema neurológico, os animais apresentam sinais clínicos severos que se tornam sequelas, quando recomenda-se comumente a eutanásia pela escassez de métodos de tratamento eficazes. O objetivo deste estudo prospectivo foi avaliar os efeitos da acupuntura no tratamento de sequelas neurológicas em cães, com diagnóstico definitivo de cinomose. Os 24 pacientes selecionados apresentavam RT-PCR positivo para cinomose, sinais neurológicos estáveis e hemograma normal 15 dias antes do início do tratamento com acupuntura associada à eletroacupuntura. Semanalmente realizou-se exame neurológico e graduação do acometimento dos sinais neurológicos de acordo com escala desenvolvida para o estudo. Para análise estatística utilizaram-se os testes de McNemar e Wilcoxon, para comparar respectivamente as proporções e medianas das alterações neurológicas antes e após o tratamento, Fisher, para comparar a porcentagem de animais com acometimento de cada par de nervos cranianos e localização da lesão e as curvas de Kaplan-Meier para avaliar a porcentagem de reversão de cada sinal neurológico ao longo do tratamento. Definiu-se se significância estatística quando P<0.05. Antes do tratamento todos os animais apresentavam alteração de deambulação (de III a V), que retornou a deambulação funcional, escore I ou II, em 79,2% e 8,3% dos animais respectivamente. A mioclonia presente em 50% dos animais, apresentou redução da severidade em todos e cura em 25% dos animais. As alterações encefálicas (18 de 24 animais), de nervos cranianos (18 de 24 animais) e de micção (5 de 24 animais) foram revertidas em todos os animais. Concluiu-se que a acupuntura associada à eletroacupuntura é eficaz no tratamento das sequelas neurológicas da cinomose e atualmente é a melhor opção terapêutica disponível ... / Abstract: Canine distemper is worldwide infectious and multisystemic disease, with high morbidity and mortality. When the neurological system is affected, the animals usually show severe clinical signs and sequels. As no treatment is available, euthanasia is commonly recommended under these circumstances. This study evaluated the effects of acupuncture in the treatment of neurological sequels in dogs with clinical and laboratory diagnosis of distemper. The 24 selected patients were RT-PCR positive for canine distemper, the neurological signs were stable and the CBC was normal 15 days before the treatment with acupuncture combined to electroacupuncture. All animals underwent weekly neurological examination and clinical signs were classified by degree according to a scale developed for the study. Statistical analysis was performed using McNemar's and Wilcoxon's test to compare the proportions and medians of neurological changes before and after treatment respectively. Fisher test compared the percentage of animals showing cranial nerve changes and localization of the lesions and Kaplan- Meier curves evaluated the percentage of reversion of each clinical sign along treatment. Differences were considered significant when p < 0.05. Grades from III to V abnormal ambulation before treatment progressed to grades I or II in 79.2% and 12.4% respectively. The myoclonus which was present in 50% of the animals (12 of 24), reduced in all animals and was cured in 25% of the animals after treatment (3 of 12). Brain (18 of 24 animals), cranial nerve (18 of 24 animals) and urination (5 of 24 animals) changes were reversed in all cases. It was concluded that acupuncture combined to electroacupuncture is effective to treat neurological sequels of distemper and is currently the best therapeutic option available due to the high cure rate provided / Mestre

O vírus da cinomose canina (CDV) é classificado no gênero Morbillivirus da família Paramyxoviridae e é o agente etiológico de uma das mais importantes doenças virais de canídeos domésticos. A cinomose ocorre em todo o mundo e produz alta mortalidade em populações imunologicamente naïve. Apesar de encontrar-se bem controlada pela vacinação, casos de cinomose ocorrem esporadicamente tanto em cães vacinados quanto em não vacinados. Uma das causas suspeitas desta falha vacinal é a grande variabilidade genética entre cepas de CDV. O objetivo deste trabalho foi detectar e analisar a variabilidade genética do CDV circulante no País. Foram coletados 386 suabes retais de cães em diversas regiões do Brasil, dos quais se detectaram 155 positivos através de uma RT-nested-PCR de um fragmento do gene do nucleocapsídeo. Destes, 23 foram selecionados para amplificação parcial do gene da hemaglutinina, sequenciamento e análise filogenética. A grande maioria das sequências obtidas agrupou no genótipo América do Sul-I, que inclui isolados da Argentina e do Uruguai, com exceção de uma amostra similar à cepa vacinal Rockborn. A análise filogenética sugere a presença de pelo menos sete subgenótipos do genótipo América do Sul-I circulando neste continente. O grupo América do Sul-II é formado somente por isolados da Argentina. Além disso, propõe-se que este grupo e os clados Rockborn-like e Europa Selvagem sejam denominados subgenótipos dentro de um genótipo único. / Canine distemper virus (CDV) is classified in the genus Morbillivirus within the family Paramyxoviridae and is the etiologic agent of one of the most important viral diseases of domestic Canidea. It occurs worldwide and produces high mortality in immunologically naïve populations. Despite being well controlled by vaccination, cases of canine distemper occur sporadically in vaccinated and unvaccinated dogs. One of the suspected causes of this vaccine failure is the great genetic variability between strains of CDV. The objective of this study was to detect and analyze the genetic variability of CDV circulating in our country. Rectal swabs were collected from 386 dogs in various regions of Brazil, of which 155 were found positive by a nested RT-PCR of a fragment of the nucleocapsid gene. Of these, 23 were selected for partial amplification of the hemagglutinin gene, sequencing and phylogenetic analysis. The vast majority of sequences obtained grouped in genotype South America-I, which includes isolates from Argentina and Uruguay, with the exception of a sample similar to the vaccine strain Rockborn. Phylogenetic analysis suggests the presence of at least seven subgenotypes belonging to South America-I genotype, circulating in this continent. The group South America-II consists only of isolates from Argentina. Furthermore, it is proposed that this group and clades Rockborn-like and Europe Wildlife are denominated subgenotypes within a single genotype.

O vírus da cinomose canina (CDV) é classificado no gênero Morbillivirus da família Paramyxoviridae e é o agente etiológico de uma das mais importantes doenças virais de canídeos domésticos. A cinomose ocorre em todo o mundo e produz alta mortalidade em populações imunologicamente naïve. Apesar de encontrar-se bem controlada pela vacinação, casos de cinomose ocorrem esporadicamente tanto em cães vacinados quanto em não vacinados. Uma das causas suspeitas desta falha vacinal é a grande variabilidade genética entre cepas de CDV. O objetivo deste trabalho foi detectar e analisar a variabilidade genética do CDV circulante no País. Foram coletados 386 suabes retais de cães em diversas regiões do Brasil, dos quais se detectaram 155 positivos através de uma RT-nested-PCR de um fragmento do gene do nucleocapsídeo. Destes, 23 foram selecionados para amplificação parcial do gene da hemaglutinina, sequenciamento e análise filogenética. A grande maioria das sequências obtidas agrupou no genótipo América do Sul-I, que inclui isolados da Argentina e do Uruguai, com exceção de uma amostra similar à cepa vacinal Rockborn. A análise filogenética sugere a presença de pelo menos sete subgenótipos do genótipo América do Sul-I circulando neste continente. O grupo América do Sul-II é formado somente por isolados da Argentina. Além disso, propõe-se que este grupo e os clados Rockborn-like e Europa Selvagem sejam denominados subgenótipos dentro de um genótipo único. / Canine distemper virus (CDV) is classified in the genus Morbillivirus within the family Paramyxoviridae and is the etiologic agent of one of the most important viral diseases of domestic Canidea. It occurs worldwide and produces high mortality in immunologically naïve populations. Despite being well controlled by vaccination, cases of canine distemper occur sporadically in vaccinated and unvaccinated dogs. One of the suspected causes of this vaccine failure is the great genetic variability between strains of CDV. The objective of this study was to detect and analyze the genetic variability of CDV circulating in our country. Rectal swabs were collected from 386 dogs in various regions of Brazil, of which 155 were found positive by a nested RT-PCR of a fragment of the nucleocapsid gene. Of these, 23 were selected for partial amplification of the hemagglutinin gene, sequencing and phylogenetic analysis. The vast majority of sequences obtained grouped in genotype South America-I, which includes isolates from Argentina and Uruguay, with the exception of a sample similar to the vaccine strain Rockborn. Phylogenetic analysis suggests the presence of at least seven subgenotypes belonging to South America-I genotype, circulating in this continent. The group South America-II consists only of isolates from Argentina. Furthermore, it is proposed that this group and clades Rockborn-like and Europe Wildlife are denominated subgenotypes within a single genotype.

A cinomose canina é uma doença viral e afeta principalmente os sistemas respiratório, gastrintestinal e nervoso. O presente trabalho analisou 54 cães com cinomose de um total de 760 cães necropsiados no período de julho de 2006 a outubro de 2007. As lesões macroscópicas observadas eram caracterizadas por secreção ocular e nasal mucopurulentas, hiperqueratose dos coxins digitais, pulmões de coloração avermelhada e não colabados, atrofia do timo, conteúdo intestinal diarréico e evidenciação das placas de Peyer. Os achados microscópicos caracterizavam-se principalmente por pneumonia intersticial, rarefação linfóide, desmielinização da substância branca, manguitos perivasculares e corpúsculos de inclusão viral na mucosa do estômago, epitélios da bexiga, brônquios e bronquíolos, pelve renal, coxins digitais, pálpebra e orelha, no sistema nervoso central (principalmente em astrócitos) e em células mononucleares dos linfonodos, baço e tonsilas. O teste de imunoistoquímica foi positivo em 94,4% dos casos analisados. Os tecidos foram marcados pela técnica imunoistoquímica utilizando o anticorpo monoclonal anti-cinomose canina (VMRD) na diluição de 1:400. O coxim digital se apresentou como o órgão com o maior número de casos marcados positivamente (67,4%), seguido pelo estômago com 62,7%. A utilização da imunoistoquímica auxiliou na identificação do antígeno viral em diferentes tecidos e foi importante como diagnóstico complementar da cinomose canina. / Canine distemper is a viral disease that affects mainly, respiratory, gastrointestinal and nervous system. The present study analyzed 54 dogs with canine distemper from total of 760 necropsies done in dogs between July 2006 to October 2007. The macroscopic lesion were characterized by mucopurulent oculonasal discharge, hyperkeratosis of footpads, red and not collapsed lungs, thymic atrophy, watery intestinal, hyperemia and Peyer’s patches enlarged. The microscopic findings were characterized by interstitial pneumonia, lymphoid depletion, white matter demylization, perivascular cuffs and viral inclusion bodies located in stomach mucosa, bladder, bronchial, renal pelvis, footpads, eyelid, skin of the ear epithelium, central nervosus system (mainly in astrocytes) and mononuclear infiltrates in lymph nodes, spleen, and tonsils. The immunohistochemistry test was positive in 94,4% of analyzed cases. Tissues were strained by an immunohistochemical procedure with mouse monoclonal anti-cinomose (VMRD) diluted 1:400. The footpads was the best tissue with majority of positive marked cases (67,4%), followed by stomach with 62,7%. This observation suggests that the immunohistochemistry technique aided to identify distemper virus antigens in different tissue making it an important test for complementary diagnostic of canine distemper.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-08-12T13:46:36Z No. of bitstreams: 1 Clodomir Guedes Lopes Junior.pdf: 203332 bytes, checksum: fbacb2945acd0b7b6ba3e5b7331c16d6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-12T13:46:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Clodomir Guedes Lopes Junior.pdf: 203332 bytes, checksum: fbacb2945acd0b7b6ba3e5b7331c16d6 (MD5) Previous issue date: 2006-09-04 / Canine distemper is an important viral disease in dogs that affects the respiratory, gastrointestinal, and also central nervous characterized by immunosuppression. The goal of this work was to study the counting of red blood and white blood cells, albumin, plasmatic total protein, alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), glucose, creatinine and ureia patterns in 37 dogs from differents breeds. On the other hand, studies were performed on a total of 16 analysis from four dogs at different times following of infection (1th, 7th, 14th and 21th day after the diagnosis of the disease) The results showed the Normocytic-normochromic anemia in 67% of animals and the white blood cell couting present lymphocytopenia , thrombocytopenia in 65% and 30% respectivelly. Hypoglycemia was observed in 67% and high AST and ALT values were recorderd in 78% and 21 % in this study. Serum protein electrophoresis revealed alterations in serum components with elevation in the gamma region and decrease of alpha-globulins regions. It was not observed a significative difference between counting of red blood and white blood cells, plasmatic total protein and seric biochemistry evaluated statistics. The exams laboratories are important as resources in the diagnosis of the distemper, mainly the hematological alterations, biochemistries and electrophoresis, can aid in the therapeutic conduct of this illness. / A Cinomose é uma enfermidade infecciosa que acomete cães, que afeta o sistema respiratório, gastrointestinal, e nervoso que se caracteriza por imunossupressão. O objetivo do presente estudo foi estudar as contagens das células vermelhas e brancas, padrões de albumina, proteína plasmática total, alanino aminotransferase (ALT),aspartato aminotransferase (AST), glicose, creatina e uréia em 37 cães avaliados. Em outra condição foram estudados 4 cães com 16 analises em diferentes tempos da infecção (0 , 7 , 14 , e 21 dias após diagnóstico da doença). O resultado demonstrou anemia normocítica e normocrômica (67%), na contagem apresentou linfocitopenia (65%), trombocitopenia (30%) hipoglicemia (67%), AST (TGO) aumentada (78%), ALT (TGP) aumentada (21%) neste presente estudo. A eletroforese das proteínas revelou alteração, com elevação da gama globulina e decréscimo nas alfas globulinas. Não foi observada diferença significativa entre as contagens das séries branca e vermelha, proteínas plasmática total e bioquímica avaliados estatisticamente. Os exames laboratoriais são importantes como recursos no diagnóstico da cinomose, principalmente as alterações hematológicas, bioquímicas e eletroforéticas, podem auxiliar na conduta terapêutica desta enfermidade.

Diferentes amostras biológicas foram avaliadas (zaragatoa ocular, genital, urina e células mononucleares do sangue periférico) pela RT-PCR em 50 cães com sintomas neurológicos compatíveis como cinomose, na presença ou não de outros sintomas sistêmicos. O gene da nucleoproteína do vírus da cinomose foi detectado em 43 das 50 amostras avaliadas. Considerando apenas os animais com resultado positivos pela hemi-nested - PCR, os sintomas neurológicos observados com freqüência maior que 50%, foram mioclonia e alteração locomotora (maioria dos cães evoluiu a tetraparesia); convulsão e vocalização foram observados em 32% dos casos Outros sintomas sistêmicos, sintomas oculares, respiratórios ou digestivos, prévios ou associados aos sintomas neurológicos, foram observados em 82% dos cães. Também observou-se hiperqueratose nasal ou de coxins em 44% dos casos. Somente 20% dos animais positivos haviam sido vacinados contra o vírus da cinomose. Zaragatoas genitais forneceram maior número de resultados positivos (40), seguidos por zaragatoas oculares e urina (37) e células mononucleares do sangue periférico (34). A coleta associada de duas amostras biológicas (zaragatoa genital e urina) por animal aumentou a possibilidade de detecção de animais positivos, principalmente nos casos de cães suspeitos que não apresentaram sintomas respiratórios, gastrintestinais e oculares, assim como nos animais vacinados e cronicamente infectados ou convalescentes. / Using Reverse transcription-PCR assay, different biological samples were avaliabled (conjunctival and genital swabs, urine and peripheral blood mononuclear cells) from dogs with or with no extraneural signs prior to or accompanying the neurologic signs. Canine distemper nucleoprotein were detected in 43 from 50 dogs availabled by hemi-nested-PCR. Considering just dogs with distemper confirmed by hemi-nested PCR, gait abnormalities (most commonly tetraparesis) and myoclonus were the neurological signs observed in over 50%; vocalizing and seizures occurred in 32%. Other systemic signs (respiratory, gastroenteric or ocular signs). preceding or associated to neurological signs, occurred in 82% of dogs Hyperkeratosis of the footpads or nose were observed in 44 % of the cases. Only (20%) were vaccinated against canine distemper. A greater number of positive results were obtained from genital swabs (40), followed by conjuctival swabs and urine (37) and PBMCs (33). Sensitivity of detection positive results were increased by using two clinical samples association (genital swab and urine), specially in dogs that had not shown extra neural signs, vaccinate dogs or during the convalescent and late stage of canine distemper.

A cinomose é uma doença infecciosa de ocorrência mundial que acomete diversas espécies de carnívoros domésticos e selvagens. Devido ao alto nível de mortalidade de pacientes com cinomese, tratamentos alternativos e eficazes tornam-se necessários. A terapia utilizando células-tronco é uma ciência em formação considerada uma alternativa terapêutica promissora no tratamento de diversas patologias degenerativas, hereditárias e inflamatórias. Portanto, o presente estudo teve como objetivo avaliar e comparar a resposta sistêmica dos animais infectados com o vírus da cinomose canina tratados com terapia medicamentosa convencional (Grupo Suporte - GS) e animais que receberam tratamento convencional associado à terapia celular com células-tronco mesenquimais de epitélio olfatório fetal canino (Grupo suporte + terapia celular- GSTC). O GS foi composto por cinco animais (n=5) e o GSTC composto por três animais (n=3) que foram acompanhados pelo período de quinze dias com avaliação da evolução da patologia de acordo com as principais alterações clínicas e laboratoriais através da análise das alterações hematológicas, avaliação bioquímica e urinária. Os resultados nos mostram que houve uma alta taxa de mortalidade em ambos os grupos (GS=4) e (GSTC=2) devido à gravidade dos sinais clínicos na fase aguda da doença, nos fornecendo dados imprecisos da evolução clínica dos pacientes. Conclui-se que faz necessário, estudos posteriores que selecionem animais na fase crônica da doença, devido à estabilização do quadro clínico e às características celulares das células-tronco, que podem se tornar um potencial método de controle do processo inflamatório sistêmico causado pelo vírus da cinomose, bem como promotor da reparação de células e tecidos lesionados pela injúria viral direta, através da diferenciação e repovoamento de células danificadas, restaurando a integridade e funcionalidade do Sistema Nervoso Central (SNC). / Canine distemper is an infectious disease of world occurrence that affects many species of domestic and wild carnivores. Due to the high level of mortality in patients with cinomese, and effective alternative treatments are necessary. Cellular therapy is a promising therapeutic alternative for the treatment of various degenerative, hereditary and inflammatory diseases. Therefore, this study aimed to evaluate and compare the systemic response of animals infected with canine distemper virus treated using conventional drug therapy (suport group - SG) and with cell therapy with using mesenchymal stem cells from canine fetal olfactory epithelium (Suport group + therapy cell), following the evolution of the pathology according to the main clinical and laboratory findings through the analysis of hematological abnormalities, and urinary biochemical evaluation. The GS was composed of five animals (n = 5) and the GSTC composed of three animals (n = 3) were followed by fifteen days period with evaluation of the evolution of the disease according to the main clinical and laboratory findings by analyzing haematological, biochemical and urinary assessment. The results showed that a high mortality rate (SG=4) e (SG+SC=2) due to the severity of clinical signs in the acute phase of the disease, providing inaccurate data on the clinical evolution of patients. We conclude that is necessary, to select animals that further studies in the chronic phase of the disease, due to the stabilization of the clinical and cellular characteristics of stem cells, which can be a potential method of controlling systemic inflammation caused by the virus distemper, as well as a promoter of cell and tissue repair lesioned by direct viral injury, through differentiation and repopulation of damaged cells, restoring the integrity and functionality of the Central Nervous System (CNS).