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Expressão de IL-18 por PCR em tempo real em membranas corioamnióticas de gentantes com rotura prematura de membrans pré-termo /Vieira, Eliane Passarelli. January 2008 (has links)
Resumo: A rotura prematura de membranas pré-termo (RPM-PT), é uma das principais causas de prematuridade, ocorrendo em 30% a 40% dos nascimentos prematuros. Sua etiologia está relacionada à ascensão bacteriana do trato genital inferior para a decídua e membranas corioamnióticas. Quantificar a expressão de IL-18 pelas membranas corioamnióticas de gestantes com RPM-PT e avaliar a relação dessa expressão com a presença de corioamnionite histológica. Foram incluídas no estudo 30 gestantes com RPM-PT em trabalho de parto e 20 gestantes com RPM-PT fora do trabalho de parto. Como grupo controle, foram avaliadas 30 gestantes normais, fora de trabalho de parto, que tiveram indicação de cesárea para resolução da gestação de termo. No momento da resolução da gestação, após a dequitação, foram retirados fragmentos das membranas corioamnióticas e acondicionados em RNA later para posterior quantificação do RNAm de interleucina (IL)-18 pela técnica de PCR em tempo real. Outros fragmentos das membranas foram submetidos à análise histopatológica para avaliação da presença de corioamnionite. No período do estudo, a incidência de RPM-PT foi de 6,2%. A presença de corioamnionite foi de 44% no grupo RPM-PT. A concentração relativa de RNAm de IL-18 não foi estatisticamente diferente nos grupos estudados. Não houve relação entre concentração relativa de RNAm de IL-18 e presença de corioamnionite. Conclusão: A RPM-PT não é capaz de induzir aumento na concentração relativa de RNAm de IL-18 e não existe relação entre expressão relativa dessa citocina e corioamnionite. / Abstract: Preterm premature rupture of the membranes (PPROM) is one of the major causes of prematurity, accounting for 30-40% of all preterm births. Its etiology is related to the ascending pathway of bacteria from the lower genital tract to the decidua and chorioamniotic membranes. To quantify the expression of the inflammatory cytokine interleukin-18 in the chorioamniotic membranes of pregnant women with PPROM and evaluate the correlation of this expression with the presence of the chorioamnionitis present in the membranes. Thirty PPROM women in labor and 20 PPROM without labor women were studied. As a control group 30 normal pregnant that underwent selective cesarean section without labor were studied. After delivery, samples of the chorioamniotic membranes were collected for histopathological analyses and others fragments were conditioned in RNA later for posterior quantification of cytokine mRNA expression by real time PCR. In the study period, the incidence of PPROM was 6.2% and in 44% of these samples the presence of chorioamnionitis was observed. mRNA expression of IL-18 was not statistically different in the groups studied. No difference occurred in the presence of chorioamnionitis in the membranes and the concentration of IL-18 mRNA. Conclusion: The concentration of IL-18 mRNA in the chorioamniotic membranes was not statistically different in the groups studied and this cytokine in PPROM is not related with the presence of the chorioamnionitis in the membranes. / Orientador: Márcia Guimarães da Silva / Coorientador: José Carlos Peraçoli / Banca: Tânia Machado de Alcântara / Banca: Cilmery Suemi Kurokawa / Mestre
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Expressão de IL-18 por PCR em tempo real em membranas corioamnióticas de gentantes com rotura prematura de membrans pré-termoVieira, Eliane Passarelli [UNESP] 28 April 2008 (has links) (PDF)
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vieira_ep_me_botfm.pdf: 369040 bytes, checksum: 5915a57d72f07e1e5440fa8514d1edc8 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A rotura prematura de membranas pré-termo (RPM-PT), é uma das principais causas de prematuridade, ocorrendo em 30% a 40% dos nascimentos prematuros. Sua etiologia está relacionada à ascensão bacteriana do trato genital inferior para a decídua e membranas corioamnióticas. Quantificar a expressão de IL-18 pelas membranas corioamnióticas de gestantes com RPM-PT e avaliar a relação dessa expressão com a presença de corioamnionite histológica. Foram incluídas no estudo 30 gestantes com RPM-PT em trabalho de parto e 20 gestantes com RPM-PT fora do trabalho de parto. Como grupo controle, foram avaliadas 30 gestantes normais, fora de trabalho de parto, que tiveram indicação de cesárea para resolução da gestação de termo. No momento da resolução da gestação, após a dequitação, foram retirados fragmentos das membranas corioamnióticas e acondicionados em RNA later para posterior quantificação do RNAm de interleucina (IL)-18 pela técnica de PCR em tempo real. Outros fragmentos das membranas foram submetidos à análise histopatológica para avaliação da presença de corioamnionite. No período do estudo, a incidência de RPM-PT foi de 6,2%. A presença de corioamnionite foi de 44% no grupo RPM-PT. A concentração relativa de RNAm de IL-18 não foi estatisticamente diferente nos grupos estudados. Não houve relação entre concentração relativa de RNAm de IL-18 e presença de corioamnionite. Conclusão: A RPM-PT não é capaz de induzir aumento na concentração relativa de RNAm de IL-18 e não existe relação entre expressão relativa dessa citocina e corioamnionite. / Preterm premature rupture of the membranes (PPROM) is one of the major causes of prematurity, accounting for 30-40% of all preterm births. Its etiology is related to the ascending pathway of bacteria from the lower genital tract to the decidua and chorioamniotic membranes. To quantify the expression of the inflammatory cytokine interleukin-18 in the chorioamniotic membranes of pregnant women with PPROM and evaluate the correlation of this expression with the presence of the chorioamnionitis present in the membranes. Thirty PPROM women in labor and 20 PPROM without labor women were studied. As a control group 30 normal pregnant that underwent selective cesarean section without labor were studied. After delivery, samples of the chorioamniotic membranes were collected for histopathological analyses and others fragments were conditioned in RNA later for posterior quantification of cytokine mRNA expression by real time PCR. In the study period, the incidence of PPROM was 6.2% and in 44% of these samples the presence of chorioamnionitis was observed. mRNA expression of IL-18 was not statistically different in the groups studied. No difference occurred in the presence of chorioamnionitis in the membranes and the concentration of IL-18 mRNA. Conclusion: The concentration of IL-18 mRNA in the chorioamniotic membranes was not statistically different in the groups studied and this cytokine in PPROM is not related with the presence of the chorioamnionitis in the membranes.
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Análise quantitativa da expressão de IL-4 e IL-10 em membrans corioamnióticas de gestantes com rotura prematura de membranas pré-termoPereira, Ana Carolina [UNESP] 28 April 2008 (has links) (PDF)
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pereira_ac_me_botfm.pdf: 434651 bytes, checksum: 3c30a9ed577db22f98db92a5a9549e4d (MD5) / A Rotura Prematura de Membranas Pré-Termo (RPM-PT) é um dos principais problemas da Clínica Obstétrica, com etiologia relacionada à ascensão bacteriana do trato genital inferior para a decídua e membranas corioamnióticas. Objetivo: Quantificar a expressão de interleucina (IL)-4 e IL- 10 pelas membranas corioamnióticas de gestantes com RPM-PT e avaliar a relação dessa expressão com presença de corioamnionite. Material e Foram incluídas no estudo 30 gestantes com RPM-PT em trabalho de parto (RPM-PT em TP) e 20 gestantes com RPM-PT fora do trabalho de parto (RPM-PT fora de TP). Como grupo controle foram avaliadas 30 gestantes em trabalho de parto prematuro (TPP) e bolsa das águas íntegra. No momento da resolução da gestação, após a dequitação, foram retirados fragmentos das membranas corioamnióticas e acondicionados em RNA later para posterior quantificação do RNAm das citocinas pela técnica de PCR em tempo real. Fragmentos das membranas foram submetidos à análise histopatológica para avaliação da presença de corioamnionite. No período do estudo, a incidência de RPM-PT foi de 6,2% e de TPP foi de 5,5%. Para a IL-10, a concentração relativa de RNAm foi estatisticamente superior nas membranas corioamnióticas de gestantes do grupo RPM-PT fora de TP em relação ao grupoTPP. Em relação à IL-4 não houve diferença significativa entre os grupos estudados. A presença de corioamnionite foi de 44,0% no grupo RPM-PT e de 66,7% no grupo TPP. A análise estatística não apontou diferença significativa entre a expressão de IL-4 e IL-10, na presença ou ausência de corioamnionite, nos grupos estudados. A concentração relativa de RNAm de IL-10 é superior nas membranas corioamnióticas do grupo RPM-PT fora de TP em relação ao grupo TPP e entre os grupos RPM-PT e TPP a expressão de IL-4 é similar. Não existe relação entre a expressão de IL-4 e IL-10 e corioamnionite. / The preterm premature rupture of membranes (PPROM) is one of the major problems of Clinical Obstetrics. Its etiology is related to the ascending pathway of bacteria from the lower genital tract to the decidua and chorioamniotic membranes. Objective: To quantify the expression of the interleukin (IL)-4 and IL-10 in the chorioamniotic membranes of pregnant women with PPROM and evaluate the relation of this expression with the presence of chorioamnionitis. Material and Methods: Thirty PPROM women in labor and 20 PPROM without labor women were studied. As a control group 30 pregnant women in premature labor (PTL) were studied. After delivery, samples of the chorioamniotic membranes were collected for histopathological analyses and others fragments were conditioned in RNA later for posterior quantification of cytokine mRNA expression by real time PCR. Results: In the study period, the incidence of PPROM was 6,2% and 5,5% for PTL. For IL-10, the expression of mRNA was statistically higher in the PPROM without labor group in relation to the groups with PTL. mRNA expression of IL-4 was not statistically different in the groups studied. In 44,0% of samples in PPROM group the presence of chorioamnionitis was observed and for PTL group the incidence was 66,7%. No difference occurred in the expression of cytokine mRNA in relation to the presence of chorioamnionitis in the groups studied. Conclusion: The expression of mRNA was statistically higher in the PPROM without labor group in relation to the group with PTL and among the PPROM and PTL groups mRNA expression of IL-4 was not statistically different. No difference occur in the expression of IL-4 and IL-10 mRNA in relation to the presence of chorioamnionitis.
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Perfil de citocinas inflamatórias em indivíduos submetidos a procedimentos cirúrgicos utilizando propofol ou isofluranoMazoti, Marina Ázer [UNESP] 25 February 2010 (has links) (PDF)
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mazoti_ma_me_botfm.pdf: 303335 bytes, checksum: 4f4fd9740f381b988fb0ea70236c2a7c (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Introdução. Cirurgia gera no paciente uma resposta inflamatória conhecida como stress. Não está esclarecido o papel dos anestésicos voláteis e venosos na modulação do perfil de citocinas inflamatórias em pacientes saudáveis submetidos a cirurgias eletivas pouco invasivas. Assim, o objetivo deste trabalho foi estudar o perfil das citocinas IL-1 , IL- 6, IL-8, IL-10, IL-12 e TNF- frente à anestesia inalatória com isoflurano e intravenosa com propofol, em pacientes saudáveis submetidos a cirurgias eletivas pouco invasivas. Métodos. Quarenta pacientes ASA I, submetidos à cirurgia de otorrinolaringologia, foram alocados ao acaso para receber anestesia com isoflurano 1 CAM (concentração alveolar mínima) (n = 20) ou com propofol 2 a 4 μg mL-1 (n = 20). Também foram administrados fentanil 5 mg kg-1 e brometo de rocurônio 0,6 mg kg-1 a todos os pacientes. Foram coletados 10 mL de sangue venoso de cada paciente em cada um dos seguintes momentos: antes do início da cirurgia e anestesia (M1), 2 h após o início da cirurgia (M2) e no dia posterior ao ato anestésico-cirúrgico (M3). As concentrações plasmáticas das interleucinas IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10 e IL-12 e do fator de necrose tumoral TNF-α foram mensuradas em cada amostra pela técnica de citometria de fluxo, utilizando o método Cytometric Bead Array (CBA). Amostras de sangue venoso de quinze voluntários não submetidos a stress também foram coletadas como controle, dosando nessas amostras as mesmas citocinas. Resultados. A comparação das concentrações plasmáticas de citocinas entre os grupos de anestésicos (M1) e o grupo de voluntários mostrou aumento de IL-8 nos grupos propofol e isoflurano. Os pacientes dos grupos isoflurano e propofol apresentaram baixas concentrações plasmáticas das citocinas pró-inflamatórias IL-1 , IL-12 e TNF- e da anti-inflamatória... / Introduction. A surgery causes in the patient an inflammatory response known as stress. The role of volatile and venous anesthetics on the modulation of inflammatory cytokine profile in healthy patients subjected to minimally invasive elective surgeries is not elucidated. Thus, the aim of this paper was to study the profile of cytokines IL-1 , IL-6, IL-8, IL-10, IL-12 and TNF- under inhalation anesthesia with isoflurane and intravenous anesthesia with propofol in healthy patients subjected to minimally invasive elective surgeries. Methods. Forty ASA-I patients, subjected to otorhinolaryngology surgery, were randomly allocated to receive anesthesia with isoflurane 1 MAC (minimum alveolar concentration) (n = 20) or propofol 2 to 4 μg mL-1 (n = 20). Fentanyl 5 mg kg-1 and rocuronium bromide 0.6 mg kg-1 were also administered to all patients. Venous blood (10 mL) was collected from each patient at each of the following times: before the beginning of surgery and anesthesia (T1), 2 h after the beginning of surgery (T2), and on the day after the anesthetic-surgical procedure (T3). Plasma concentrations of interleukins IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10 and IL-12 and tumor necrosis factor (TNF-α) were measured in each sample through flow cytometry technique by using the method Cytometric Bead Array (CBA). Venous blood samples from fifteen volunteers not subjected to stress were also collected as control, and the same cytokines were measured. Results. Plasma concentrations of IL-8 increased in Propofol and Isoflurane groups (T1), compared to the group of volunteers. Patients of Isoflurane and Propofol groups had low plasma concentrations of proinflammatory cytokines IL-1 , IL-12 and TNF- and anti-inflammatory cytokine IL-10 throughout the study period. On the other hand, plasma concentration of IL-6 significantly increased at T2 and T3 in the group of patients... (Complete abstract click electronic access below)
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Análise quantitativa da expressão de IL-4 e IL-10 em membrans corioamnióticas de gestantes com rotura prematura de membranas pré-termo /Pereira, Ana Carolina. January 2008 (has links)
Orientador: Márcia Guimarães da Silva / Banca: Denise Fecchio / Banca: Tânia Machado de Alcântara / Resumo: A Rotura Prematura de Membranas Pré-Termo (RPM-PT) é um dos principais problemas da Clínica Obstétrica, com etiologia relacionada à ascensão bacteriana do trato genital inferior para a decídua e membranas corioamnióticas. Objetivo: Quantificar a expressão de interleucina (IL)-4 e IL- 10 pelas membranas corioamnióticas de gestantes com RPM-PT e avaliar a relação dessa expressão com presença de corioamnionite. Material e Foram incluídas no estudo 30 gestantes com RPM-PT em trabalho de parto (RPM-PT em TP) e 20 gestantes com RPM-PT fora do trabalho de parto (RPM-PT fora de TP). Como grupo controle foram avaliadas 30 gestantes em trabalho de parto prematuro (TPP) e bolsa das águas íntegra. No momento da resolução da gestação, após a dequitação, foram retirados fragmentos das membranas corioamnióticas e acondicionados em RNA later para posterior quantificação do RNAm das citocinas pela técnica de PCR em tempo real. Fragmentos das membranas foram submetidos à análise histopatológica para avaliação da presença de corioamnionite. No período do estudo, a incidência de RPM-PT foi de 6,2% e de TPP foi de 5,5%. Para a IL-10, a concentração relativa de RNAm foi estatisticamente superior nas membranas corioamnióticas de gestantes do grupo RPM-PT fora de TP em relação ao grupoTPP. Em relação à IL-4 não houve diferença significativa entre os grupos estudados. A presença de corioamnionite foi de 44,0% no grupo RPM-PT e de 66,7% no grupo TPP. A análise estatística não apontou diferença significativa entre a expressão de IL-4 e IL-10, na presença ou ausência de corioamnionite, nos grupos estudados. A concentração relativa de RNAm de IL-10 é superior nas membranas corioamnióticas do grupo RPM-PT fora de TP em relação ao grupo TPP e entre os grupos RPM-PT e TPP a expressão de IL-4 é similar. Não existe relação entre a expressão de IL-4 e IL-10 e corioamnionite. / Abstract: The preterm premature rupture of membranes (PPROM) is one of the major problems of Clinical Obstetrics. Its etiology is related to the ascending pathway of bacteria from the lower genital tract to the decidua and chorioamniotic membranes. Objective: To quantify the expression of the interleukin (IL)-4 and IL-10 in the chorioamniotic membranes of pregnant women with PPROM and evaluate the relation of this expression with the presence of chorioamnionitis. Material and Methods: Thirty PPROM women in labor and 20 PPROM without labor women were studied. As a control group 30 pregnant women in premature labor (PTL) were studied. After delivery, samples of the chorioamniotic membranes were collected for histopathological analyses and others fragments were conditioned in RNA later for posterior quantification of cytokine mRNA expression by real time PCR. Results: In the study period, the incidence of PPROM was 6,2% and 5,5% for PTL. For IL-10, the expression of mRNA was statistically higher in the PPROM without labor group in relation to the groups with PTL. mRNA expression of IL-4 was not statistically different in the groups studied. In 44,0% of samples in PPROM group the presence of chorioamnionitis was observed and for PTL group the incidence was 66,7%. No difference occurred in the expression of cytokine mRNA in relation to the presence of chorioamnionitis in the groups studied. Conclusion: The expression of mRNA was statistically higher in the PPROM without labor group in relation to the group with PTL and among the PPROM and PTL groups mRNA expression of IL-4 was not statistically different. No difference occur in the expression of IL-4 and IL-10 mRNA in relation to the presence of chorioamnionitis. / Mestre
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Avaliação longitudinal de fatores inflamatórios e linfócitos T reguladores em pacientes sépticos / Longitudinal evaluation of inflammatory factors and regulatory T lymphocytes in septic patientsGozzi, Aline 07 May 2018 (has links)
A sepse é descrita como uma disfunção orgânica ameaçadora à vida secundária à resposta desregulada do organismo a uma infecção, e é responsável por uma alta e crescente taxa de internação hospitalar no Brasil e no mundo. Apesar da diminuição da mortalidade ao longo do tempo, efeitos da doença a longo prazo como infecções secundárias e mortes tardias têm sido observadas. A sepse caracteriza-se pela liberação de mediadores inflamatórios e posterior imunossupressão compensatória, e o distúrbio na homeostase pode causar danos às células e órgãos levando a um estado mais grave da doença. Os linfócitos T reguladores (Tregs) são células responsáveis pela tolerância periférica e modulação de processos inflamatórios e são essenciais na imunossupressão observada na sepse. Este trabalho teve por objetivo estudar a relação entre a atividade imunológica (quantificação de Tregs, monócitos e citocinas inflamatórias) e a susceptibilidade a novas infecções e mortalidade em pacientes sépticos admitidos na Unidade de Emergência do HC-FMRP-USP. Foram incluídos 33 pacientes sépticos e 34 controles saudáveis, entre outubro de 2014 e novembro de 2015. Os pacientes foram acompanhados durante a internação na admissão (D0), D2, D7, D14, D21 e D28, e 12 pacientes retornaram para avaliação pelo menos três meses após a alta. Os pacientes tiveram porcentagens de Treg em linfócitos CD4+ elevados em relação aos controles nos momentos D2 e retorno (p = 0,0004), sendo que no D2 pacientes que desenvolveram complicação infecciosa tiveram porcentagens significativamente menores que os que não desenvolveram complicação (p = 0,0015). Além disso, porcentagens altas de Treg na admissão (D0) correlacionaram-se inversamente com o tempo de internação dos pacientes sobreviventes (p = 0,0271). Valores absolutos de Treg nos pacientes estiveram significativamente elevados no retorno em relação à admissão (p = 0,0074). Pacientes no retorno tiveram maior porcentagem de monócitos CD163+ em relação aos controles (p = 0,036). Pacientes na admissão tiveram menor porcentagem demonócitos HLA-DR+ em relação aos controles e aos pacientes no retorno (p = 0,0057). Pacientes tiveram valores de IL-6, IL-8, IL-10 e ST2 superiores em relação aos controles em diversos momentos da internação e retorno (p < 0,0001, p < 0,0001, p = 0,0030 e p < 0,0001, respectivamente). Valores de ST2 na admissão correlacionaram-se com o escore SOFA (p = 0,0252), tempo de internação (p = 0,0105), presença de complicação infecciosa (p = 0,0356) e mortalidade (p = 0,0114) dos pacientes. Valores de IL-8 na admissão também se correlacionaram com a presença de complicação infecciosa (p = 0,0387). Podemos inferir, portanto, que apesar de uma inflamação exacerbada já na admissão dos pacientes, evidenciada por altos valores de citocinas inflamatórias, há um aumento posterior de células Treg, imunorreguladoras, no D2, e o mesmo foi benéfico em relação à recuperação mais rápida dos pacientes e instalação de uma nova infecção. Porém, a imunossupressão continua sendo exibida mesmo após a alta dos pacientes, como podemos observar com a alta porcentagem de Tregs e monócitos CD163+ e valores de IL-10 nos pacientes em retorno em relação aos controles. Além disso, muitos dos pacientes sobreviventes à primeira internação foram internados novamente, e alguns deles foram a óbito no ano seguinte. / Sepsis is defined by a life-threatening organ dysfunction caused by a dysregulated host response to infection, and it is responsible for a high and increasing rate of hospital admission in Brazil and worldwide. Despite the decrease in mortality over time, long-term disease effects such as secondary infections and late deaths have been observed. Sepsis is characterized by the release of inflammatory mediators and subsequent compensatory immunosuppression, and the homeostasis disorder can cause damage to cells and organs leading to a more severe disease state. Regulatory T lymphocytes (Tregs) are cells responsible for peripheral toleran ce and modulation of inflammatory processes and are essential in the immunosuppression observed in sepsis. This study aimed to investigate the relationship between immunological activity (quantification of Tregs, monocytes and inflammatory cytokines) and susceptibility to new infections and mortality in septic patients admitted to the HC-FMRP-USP Emergency Unit. Thirty-three septic patients and 34 healthy controls were included between October 2014 and November 2015. Patients were followed up at admission (D0) and during hospitalization at D2, D7, D14, D21 and D28, and 12 patients returned for evaluation at least three months after discharge. Patients had higher Treg percentages on CD4 + lymphocytes than had controls at D2 and on return (p = 0.0004), whereas in D2 patients who developed infectious complications had significantly lower percentages than those who did not develop complications (p = 0.0015). In addition, high percentages of Treg at admission (D0) correlated inversely with the length of hospital stay of surviving patients (p = 0.0271). Absolute values of Treg in patients were significantly elevated in the return relative to admission (p = 0.0074). Patients on return had a higher percentage of CD163 + monocytes than controls (p = 0.036). Patients on admission had a lower percentage of HLA-DR+ monocytes than controls and patients on return (p = 0.0057). Patients had higher IL-6, IL-8, IL-10 and ST2 levels than controls at various times ofhospitalization and return (p < 0.0001, p < 0.0001, p = 0.0030 and p < 0.0001, respectively). ST2 values at admission were correlated with SOFA score (p = 0.0252), length of hospital stay (p = 0.0105), presence of infectious complication (p = 0.0356) and mortality (p = 0.0114). IL-8 values at admission also correlated with the presence of infectious complication (p = 0.0387). We can infer, therefore, that despite exacerbated inflammation as soon as at the admission of the patients, demonstrated by high levels of inflammatory cytokines, there is a posterior increase of immunoregulatory Treg cells at D2, and that was beneficial in relation to the faster recovery of the patients and setting up of new infection. However, immunosuppression continues to appear even after discharge of patients, as can be observed with the high percentage of CD163 + monocytes, Tregs and L-10 levels in patients on return compared to controls. In addition, many of the patients surviving the first hospitalization were hospitalized again, and some of them died the following year.
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Efeitos do uso de drogas ilícitas na resposta inflamatória / Efects of illicit drugs in the inflammatory responseRibeiro, Camila Bastos 27 November 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-11-27 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Studies have reported that illicit drugs can alter immune system function and further suggest a greater commitment related to the use of these drugs, such as increased susceptibility to infection and progression to disease. Considering these effects in the body, we conducted a study to investigate the effect of drug use on the inflammatory response in subjects grouped according to the drug used: marijuana, cocaine and crack users and individuals from more than one drug. Thus, the study groups were: 1. non drug users (control); 2. marijuana users; 3. Cocaine/crack users; 4.cocaine/crack/marijuana users (multiuser). The profile of proinflammatory and anti-inflammatory cytokines and C-reactive protein (CRP) in the plasma of study subjects was investigated. There were also measured the levels of soluble CD14 (sCD14) and lipopolysaccharide (LPS) circulating in the plasma of individuals that are indicative of microbial translocation. We obtained high levels of sCD14, LPS, CRP, IL-6 and IL-8 in multi-user group and decreased levels of IL-6 and TNF- in cannabis user group compared to the control group. This set of findings suggests that illicit drugs may be causing a change in the integrity of the intestinal mucosa multiuser individuals due to the increased presence of LPS and sCD14 was detected in the circulation and changes in the inflammatory response with increased production and / or decreased biomarkers relevant inflammation. / Estudos têm relatado que as drogas ilícitas são capazes de alterarfunções do sistema imune e ainda sugerem um maior comprometimento relacionado ao uso dessas drogas, tais como,maior susceptibilidade a infecções e progressão para doenças. Considerando esses efeitos no organismo, realizamos um estudo parainvestigaro efeito do uso das drogas sobre a resposta inflamatóriaem indivíduos agrupadosconforme as drogas utilizadas: maconha, cocaína oucrack e indivíduos usuários de mais de uma droga. Assim, os grupos de estudo foram: 1. não usuários de drogas (controle); 2. usuários de maconha; 3. usuários de cocaína/crack; 4. usuários de cocaína/crack/maconha (multiusuários).Foi investigadoo perfil de citocinas proinflamatórias e anti-inflamatórias e proteína C reativa (PCR)no plasma dos indivíduos do estudo. Também foram medidos os níveis de CD14 solúvel (sCD14)e lipopolissacarídeo(LPS)circulantes no plasma dos indivíduos, que são indicativos de translocação microbiana. Observamos níveis elevados de sCD14, LPS, PCR, IL-6 e IL-8 no grupo de multiusuários e níveis diminuídos de IL-6 e TNF-no grupo de usuários de maconha em relação ao grupo controle.Esse conjunto de achados sugere que as drogas ilícitas podem estar provocando uma alteração na integridade da mucosa intestinal de indivíduos multiusuários devido à presença aumentada de LPS e sCD14que foi detectada na circulação e alterações na resposta inflamatória com a produção aumentada e/ou diminuída de biomarcadores importantes da inflamação.
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Efeito do citral no choque endotoxêmico / Effect of citral on endotoxemic shockBorges, Gabriela Silva 23 March 2018 (has links)
A sepse é caracterizada por uma produção excessiva de mediadores inflamatórios, acompanhada de taquicardia e hipotensão. Experimentalmente, a administração de endotoxina (Lipopolissacarídeo, LPS) em doses relativamente elevadas induz choque endotoxêmico, sendo um bom modelo de estudo da sepse. Diversos grupos têm demonstrado ações antiinflamatórias e antitumorais do citral, um composto do óleo essencial de Cymbopogon citratus. Nosso laboratório demonstrou ação antipirética do citral em modelo de febre induzida por LPS, acompanhada de redução nos níveis de citocinas plasmáticas e de prostaglandina E2 (PGE2) no plasma e área pré óptica do hipotálamo (POA), importante região termorregulatória. A hipótese testada neste trabalho foi a de que o citral atenua a hipotensão provocada pela endotoxina, além de amenizar as alterações termoregulatórias. Todos os procedimentos foram executados de acordo com os princípios éticos de experimentação animal, aprovados pelo comitê de ética local (CEUA 2015.1 1214 58-2). Foi realizado o implante de cânulas na artéria e veia femoral para registro da pressão arterial e administração de LPS (1,5 mg/kg) ou salina apirogênica 0,9% além do implante de datalogger na cavidade peritoneal de ratos Wistar, para registro da temperatura corporal. No dia do registro, 30 minutos antes da administração de LPS ou salina, os animais receberam citral (100 mg/kg) ou tween 80 a 1% (veículo) por via oral. Os parâmetros cardiovasculares e temperatura corporal foram registrados por 300 minutos após os respectivos tratamentos. Os valores de pressão arterial média (PAM) e frequência cardíaca (FC) foram coletados a cada 10 minutos após o tratamento e a temperatura corporal foi registrada pelo datalogger em intervalos de 5 minutos. Em outro protocolo foi realizado apenas o implante de cânula na veia femoral dos animais de todos os grupos para administração de LPS ou salina, coleta de sangue para dosagem de interleucina 6, PGE2, nitrito e nitrato e corticosterona e coleta do encéfalo para dosagem de PGE2 e PGD2. As diferenças estatísticas entre os grupos foram analisadas pelo teste ANOVA two-way seguido por pós teste de Newman-Keuls, com o nível de significância adotado de p < 0,05. A administração de LPS provocou queda na PAM eaumento na FC. Tais respostas não foram afetadas pela administração prévia de citral. O LPS também induziu febre e aumento nas concentrações plasmáticas de interleucina - 6 (IL-6), óxido nítrico (NO), PGE2 e corticosterona. Esses parâmetros não foram alterados pela pré- administração de Citral. No entanto, o citral provocou redução na produção de PGD2 naPOA, sem alterar a de PGE2 nesta região. Podemos concluir que o citral não previne as alterações nos parâmetros cardiovasculares no modelo de endotoxemia em ratos, porém reduz a produção de um mediador termorregulatório e inflamatório do sistema nervoso central (a PGD2), sem alterar a produção de outros mediadores inflamatórios a nível periférico (no plasma). Portanto, em um modelo mais agressivo de inflamação sistênica o citral não se mostrou suficiente para proteger o organismo das ações deletérias do LPS. / Sepsis is characterized by the overproduction of inflammatory mediators, accompanied by tachycardia and hypotension. Experimentally, administration of endotoxin (Lipopolysaccharide, LPS) in relatively high doses induces endotoxemic shock, a widely used model of sepsis in rats. Several groups have demonstrated anti-inflammatory and antitumor roles of citral, an essential oil compound of Cymbopogon citratus. Emilio-Silva et al. (2017) have shown an antipyretic role of citral in a model of LPS-induced fever, accompanied by a reduction of cytokines and prostaglandin E2 plasma levels and in the preoptic area of hypothalamus (POA), the hierarchically most important thermoregulatory region. We hypothesized that citral attenuates the LPS-induced hypotension, besides mitigating the thermoregulatory adjustments in rats. All procedures were performed in agreement with ethical guidelines for animal experimentation aproved by the local ethical committee (CEUA 2015.1 1214 58-2). Femoral artery and vein were implanted with cannulas for blood pressure recording and LPS (1.5 mg/kg) or 0.9% apyrogenic saline injection. In a second surgical procedure a datalogger was implanted into the peritoneal cavity for measurements of body temperature. All surgical procedures were performed under Ketamin/xilazin (100/10 mg/kg) anesthesia. One day after arterial catheterization, 30 minutes prior to LPS or saline administration, the animals received either citral (100 mg / kg) or 1% tween 80 (vehicle) oralstarly. The cardiovascular parameters and body temperature were recorded for 300 minutes after the respective treatments. Mean blood pressure (MAP) and heart rate (HR) were collected every 10 minutes after treatments and body temperature was recorded by the datalogger at 5 minute intervals. Blood samples were obtained in another set of rats for interleukin-6, PGE2, nitrite and nitrate and corticosterone analyses. The brain was removed for PGE2 and PGD2 analyses. Statistical differences between groups were analyzed by the two-way or one-way ANOVA test followed by Newman-Keuls post-test, with significance level adopted at p <0.05. As expected, LPS administration caused a decrease in MAP and an increase in HR, and these responses were not affected by citral. LPS also induced fever and increased plasma levels of interleukin - 6 (IL - 6), nitric oxide (NO), prostaglandin E 2 andcorticosterone. These parameters were also not altered by citral. On the other hand, citral caused a reduction in prostaglandin D2 concentration in the POA, but failed to alter PGE2 levels in this region. Our data are consistent with the notion that citral does not affect changes in cardiovascular and thermoregulatory parameters. Consistently, citral also caused no changes in both LPS-induced peripheral inflammatory mediators (in plasma) and in the POA, except PGD2. Therefore, in our model which mimetic a fairly critical situation, citral may not be sufficient to protect the organism from the deleterious actions of LPS. Financial support: FAPESP / CAPES.
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Associações entre as variações de adipocinas, citocinas inflamatórias e composição corporal em pacientes com doença pulmonar obstrutiva crônica no período de um anoMesquita, Carolina Bonfanti. January 2018 (has links)
Orientador: Suzana Erico Tanni Minamoto / Resumo: Introdução: Estudos recentes mostram que o tecido adiposo também contribui para a inflamação sistêmica em pacientes com DPOC. Entretanto, não há dados na literatura que avaliem a variação das adipocinas e suas associações com marcadores inflamatórios, exacerbações e mortalidade em um ano nos pacientes com DPOC. Objetivo: Avaliar as variações das adipocinas, citocinas inflamatórias e composição corporal em pacientes com DPOC no período de um ano. Pacientes e Métodos: Foram avaliados 57 pacientes com DPOC leve a muito grave, destes 6 pacientes morreram, 6 não foram contatados após a avaliação e 5 não quiseram participar da segunda fase estudo, logo realizamos análise de dois momentos dos 40 pacientes que completaram um ano de acompanhamento. No momento basal e após 1 ano foram realizados espirometria pré e pós-broncodilatador, gasometria arterial, exames laboratoriais, oximetria de pulso, dosagem plasmática sérica de interleucina (IL)-6, fator de necrose tumoral alfa (TNF-α), adiponectina e leptina e avaliação sérica laboratorial. Também foi realizado avaliação da composição do corpo, força muscular do quadríceps (FMQ) (MicroFet 2), sensação de dispneia, por meio do Índice de Dispneia Basal (BDI), Escala de Borg e Medical Research Council Modificado (mMRC), avaliação do estado geral de saúde, por meio do questionário de Qualidade de Vida na Doença Respiratória do Hospital Saint George (SGRQ) e Escala Hospitalar de Ansiedade e Depressão (HAD), calculado índice de BODE e Teste de... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Introduction: Recent studies show that adipose tissue also contributes to systemic inflammation in chronic obstructive pulmonary disease (COPD). However, there are no data in the literature evaluating the evolution of level of adipokines and their associations with systemic inflammation, exacerbations and mortality in COPD patients. Objective: Evaluate the variations of adipokines and their association with systemic inflammation and and body composition in patients with COPD during one year. Patients and Methods: Fifty-seven patients with mild to very severe COPD were evaluated. During the follow up, six patients died, six lost the follow up and five refused to participate in the second assessment. At baseline and after one year we performed post-bronchodilator spirometry, arterial blood gas analysis, laboratory tests, pulse oximetry, serum plasma levels of interleukin (IL)-6, tumor necrosis factor alpha (TNF-α), adiponectin and leptin. We also assessed body composition, peripheral muscle strength (quadriceps), Basal Dyspnea Index (BDI), Borg Scale, and Modified Medical Research Council (mMRC), general health status was evaluated by Saint George Respiratory Questionnaire (SGRQ), Hospital Anxiety and Depression Scale (HAD), BODE index and 6-minute walk test. Results: From the total of 40 patients, we analyzed the variation during one year and we observed a positive association between leptin and BMI (R:0.43; p=0.006), QMS L (R:0.42; p=0.008) and BODE index (R:0.39; p=0.024) an... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Avaliação do estresse oxidativo no órgão subfornical e no bulbo ventrolateral rostral de animais Knockout para apolipoproteína EAssis, Taísa França de Medeiros 13 June 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-06-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Atherosclerosis is a multifactorial disease, considered as one of the main risk factors that lead to the development of cardiovascular diseases. It is characterized by endothelial and autonomic dysfunction due to the presence of inflammation and systemic oxidative stress.
The objective of this study was to evaluate the presence of ROS (reactive oxygen species) in the subfornical organ (SFO) and rostral ventrolateral medulla (RVLM) of animals knockout apolipoprotein E (apoE-/-) fed with a standard diet and the possible relation of the presence of peripheral inflammatory cytokines with central oxidative stress. So, for this purpose, the serum was collected from C57BL/6 mice, isogenic mice, and apoE-/-, mice, also isogenic, genetically modified for the deletion of the gene coding for apolipoprotein E. The serum was used for cholesterol dosage, lipid peroxidation in the
form of malonialdehyde (MDA) and inflammatory cytokines (IL-1β, TNF-α and IL-10). In addition, the aortas of both groups were collected for the evaluation of lipid deposition. For the determination of reactive oxygen species by the dihydroethidine technique (DHE) and quantification of inflammatory cytokines (IL-1β, TNF-α and IL-10) were also collected samples from the SFO and RVLM from the two groups. We observed a significant increase in total cholesterol levels in apoE-/- animals compared to control animals (237.4±17.7 mg/dL n=6 vs 90.7±6.4 mg/dL n=6, p<0.05), both fed a standard diet. We
also observed a higher lipid deposition in the apoE-/- animals when compared to controls (27.7±4.8% n=3 vs 5.3±0.6% n=4, p<0.05, respectively). There was an increase in serum levels of malonialdehyde in the apoE-/- mice compared to the control (1.8±0.2 nmol/mL, n=15 vs 1.1±0.2 nmol/mL, n=12, p<0.05). Regarding systemic inflammatory evaluation, we observed an increase in IL-1β levels in apoE-/- animals when compared to controls (17.7±2.9 pg/mL, n=11 vs 5.8±0.5 pg/ML, n=11, p<0.05), as well as TNF-α, which was
also elevated in atherosclerotic animals (4.6±0.8 pg/mL, n=8 vs 2.1±0.6 pg/mL, n=8, p<0.05). However, we did not observe a significant difference in IL-10 levels when we compared the groups (apoE-/-: 201.6±16.0 pg/mL, n=6 vs C57BL/6: 190.1±11.1pg/mL,
n=6). Regarding the evaluation of the oxidative stress in SFO and RVLM, an increase in O2•- levels was observed in both areas from the apoE-/- animals compared to the control (SFO: 36.4±2.1FR/u.a, n=4 vs 19.4±2 FR/u.a, 1, n=4, p<0.05; RVLM: 31.7±2.7 FR/u.a,
n=4 vs 16.0±1.0 FR/u.a, n=5, p<0.05). Finally, we evaluated the levels of inflammatory cytokines in the SFO, and observed a decrease in the levels of both the proinflammatory cytokines (TNF-α and IL-1β) and IL-10 (anti-inflammatory) in apoE-/-: IL-1β (4.4±0.3 pg/mL n = 5, vs. 9.1 ± 0.8 pg/mL n=5, p<0.05), TNF-α (3.0±0.7 pg/mL, n=7 vs 6.4±0.9
pg/mL n=7, p<0.05), IL-10 (214.0±1.9 pg/mL n=3, vs 354.2±19.3 pg/mL n=3, p<0.05). Therefore, we can conclude that apoE-/- animals fed standard diet have high levels of ROS in the SFO and RVLM, which together are important regions responsible for cardiovascular control. We may also suggest that the peripheral inflammatory cytokines participate in the induction of central oxidative stress from its action in the SFO. / A aterosclerose é uma doença multifatorial, considerada como um dos principais fatores
de risco que levam ao desenvolvimento de outras doenças cardiovasculares. É
caracterizada por disfunção endotelial e autonômica devido à presença de inflamação e
estresse oxidativo sistêmico. O objetivo deste trabalho foi avaliar a presença de EROs
(espécies reativas de oxigênio) no órgão subfornical (SFO) e no bulbo ventrolateral
rostral (RVLM) de animais knockout para apolipoproteína E (apoE-/-), alimentados com
dieta padrão e a possível relação da presença de citocinas inflamatórias periféricas com
a geração de estresse oxidativo central. Para isso foi realizada a coleta do soro de
camundongos C57BL/6, camundongos isogênicos, e apoE-/-, camundongos, também
isogênicos, geneticamente modificados para a deleção do gene que codifica a
apolipoproteína E. O soro foi utilizado para a dosagem do colesterol, da peroxidação
lipídica na forma de malonialdeído (MDA) e das citocinas inflamatórias (IL-1β, TNF-α e
IL-10). Além disso, foram coletadas as aortas de ambos os grupos para a avaliação “en
face” da deposição lipídica. Ainda foi realizada a coleta de amostras do SFO e do RVLM
dos dois grupos para a realização da dosagem de espécies reativas de oxigênio pela
técnica do di-hidroetídio (DHE) e para a quantificação de citocinas inflamatórias (IL-1β,
TNF-α e IL-10) no SFO. Observamos um aumento significativo dos níveis de colesterol
total nos animais apoE-/- em relação aos animais controle (237,4±17,7 mg/dL n=6 vs
90,7±6,4 mg/dL n=6, p<0,05), ambos alimentados com dieta padrão e com idade de 13
meses. Observamos também uma maior deposição lipídica nos animais apoE-/- quando
comparados com os controles (27,7±4,8% n=3 vs 5,3± 0,6% n=4, p<0,05,
respectivamente). Houve aumento nos níveis séricos de malondialdeído nos
camundongos apoE-/- quando comparados com o controle (1,8±0,2 nmol/mL, n=15 vs
1,1±0,2 nmol/mL, n=12, p<0,05). Com relação a avaliação inflamatória sistêmica,
observamos aumento nos níveis de IL-1β nos animais apoE-/- quando comparados aos
controles (17,7±2,9 pg/mL, n=11 vs 5,8±0,5 pg/mL, n=11, p<0,05), bem como o TNF-α
que também se apresentou elevado nos animais ateroscleróticos (4,6±0,8 pg/mL, n=8 vs 2,1±0,6 pg/mL, n=8, p<0,05). No entanto, não constatamos diferença significativa nos
níveis de IL-10 quando comparamos ambos os grupos (apoE-/-:201,6±16,0 pg/mL, n=6
vs C57BL/6:190,1±11,1 pg/mL, n=6). Quanto à avaliação do estresse oxidativo no SFO
e no RVLM foi observado aumento nos níveis de O2•- em ambas as áreas dos
camundongos apoE-/- quando comparados com o controle (SFO: 36,4±2,1 FR/u.a, n=4
vs 19,4±2,1 FR/u.a, n=4, p<0,05; RVLM: 31,7±2,7 FR/u.a, n=4 vs 16,0±1,0 FR/u.a, n=5,
p<0,05). Por fim avaliamos os níveis de citocinas inflamatórias no SFO e observamos
uma diminuição nos níveis tanto das citocinas pró-inflamatórias (TNF-α como da IL-1β),
como da IL-10 (anti-inflamatória) nos camundongos apoE-/- quando comparados com o
controle: IL-1β (4,4±0,3 pg/mL n=5, vs 9,1±0,8 pg/mL n=5, p<0,05), TNF-α
(3,0±0,7pg/mL, n=7 vs 6,4±0,9 pg/mL n=7, p<0,05), IL-10 (214,0±1,9 pg/mL n=3, vs
354,2±19,3 pg/mL n=3, p<0,05). Portanto, concluímos que os animas apoE-/- alimentados com dieta padrão apresentam níveis elevados de EROs no SFO e RVLM, que em conjunto, são importantes regiões responsáveis pelo controle cardiovascular. Podemos ainda sugerir que, possivelmente, as citocinas inflamatórias periféricas participam da indução do estresse oxidativo central a partir da sua ação no SFO.
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