Dynamic properties of Josephson junctions are interesting due to the emission of high frequency radiation (up to THz range) from Josephson junctions, closely related to fluxon dynamics. A better understanding of this dynamics can help to improve the Josephson devices used for applications. Josephson junctions can also be of great use as T-shaped multiple Josephson junctions in Josephson electronic circuits. In general, T-junctions consist of two attached Josephson transmission lines: a main Josephson transmission line (MJTL) along the -axis, and an additional Josephson transmission line (AJTL) along the -axis. These junctions can use to create fluxons (solitons) in junctions without applied magnetic field, (called flux cloning phenomenon). This work is devoted to contributing to a clarification of the dynamic behaviour of solitons (fluxons) in 2D extended conventional T-shaped Josephson junctions (extended means an AJTL is larger than MJTL). A conventional T-junction is a MJTL along the x-axis which divides into two Josephson transmission lines along the x- and y-axes. In addition, we also attempt to elucidate further the concept of flux cloning in rotated T-junctions, which are 90 degrees anticlockwise rotation of conventional T-junction. In rotated Tjunction, a MJTL along the x-axis divide into two Josephson transmission lines along the y-axis. We find the first evidence of moving semifluxon and observe for the first time new phenomena of semifluxons and anti-semifluxons in both extended conventional and rotated T-junctions. We numerically study the electrodynamics behaviour of solitons in the standard Tshaped Josephson junction (conventional T-junction) in a magnetic field. Therefore, we describe theoretically how flux cloning circuits exist and give an opportunity for use as flux flow oscillators operating without applied magnetic field. The results that emerge give further support to the flux cloning mechanism.

A cotton PATE cDNA clone has a 1.7-kb insert with an coding region for 410 amino acids, lacking codons for the three N-terminal amino acids. The predicted amino acid sequence of the PATE preprotein has a characteristic stromal-targeting domain and a 63% identity to the Arabidopsis FatB1 thioesterase sequence. A cotton genomic clone containing a 17.4-kb DNA segment was found to encompass a palmitoyl-ACP thioesterase (FatB1) gene. The gene spans 3.6 kb with six exons and five introns. The six exons are identical in nucleotide sequence to the open reading frame of the corresponding cDNA, and would encode a preprotein of 413 amino acids. The preprotein is identified as a FatB thioesterase from its deduced amino acid sequence similarity to those of other FatB thioesterase preproteins. A 5'-flanking region of 914 bp was sequenced, with the potential promoter/enhancer elements including basic helix-loop-helix elements (E box). Alkaline blot hybridization of cotton genomic DNA suggests the presence at least two FatB1 thioesterase genes in cotton. Four plasmid constructs for both constitutive and seed-specific anti-sense RNA suppression and gene-transgene co- suppression of PATE gene expression were successfully generated. Two overlapping cotton genomic clones were found to encompass a Δ-12 fatty acid desaturase (FAD2-3) gene. The continuous FAD2-3 coding region is 1,155 bp and would encode a protein of 384 amino acids. The FAD2-3 gene has one large intron of 2,967 bp entirely within its 5'-untranslated region. Several potential promoter/enhancer elements, including several light responsive motifs occur in the 5'-flanking region. Yeast cells transformed with a plasmid construct containing the cotton FAD2-3 coding region accumulate an appreciable amount of linoleic acid (18:2), not normally present in wild-type yeast cells, indicating that the gene encodes a functional FAD2 enzyme.

Orientador: Cíntia Duarte de Freitas Milagre / Banca: Isabele Rodrigues Nascimento / Banca: Lourdes Campaner dos Santos / Banca: Anita Jocelyne Marsaioli / Banca: Alvaro Takeo Omori / Resumo: Reações catalisadas enzimaticamente constituem uma alternativa ambientalmente atrativa em relação a catálise metálica e organometálica, pois utiliza catalisadores biodegradáveis e oriundos de fontes renováveis, oferecendo ferramentas apropriadas para a transformação de substâncias naturais ou sintéticas levando-se em conta os preceitos da Química Verde. Neste trabalho, foi realizada a clonagem do gene nitrila hidratase (subunidades α e β e gene ativador) de Rhodococcus erythropolis ATCC 4277 e Klebisella oxytoca via metodologia de clonagem livre de restrição e posterior expressão em E. coli para realização de reações de biotransformação. A análise da especificidade do substrato da NHase tipo Fe de R. erythropolis ATCC 4277 indica que este aceita uma diversidade de nitrilas. As nitrilas alifáticas foram hidratadas com conversões acima de 99%, com exceção da acrilonitrila. As nitrilas aromáticas foram hidratadas com conversões que variaram de 1% a 88%. As células inteiras de E. coli recombinante hidrataram o 1,4-fenilenodiacetonitrila com elevada regiosseletividade, enquanto o excesso enantiomérico das nitrilas aromáticas 2-amino-2-(4-fluorofenil) acetonitrila e 2-fenilbutironitrila foram de 7% e 60%, respectivamente. A clonagem do gene NHase de Klebisella oxytoca não foi observada. A segunda etapa deste trabalho consistiu na síntese de 4-(cianometil)benzenoacetanamida, um intermediário importante na síntese de compostos de interesse industrial e utilizado como material de part... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Enzymatically catalyzed reactions are an environmentally attractive alternative for metal and organometallic catalysis, because it uses biodegradable catalysts and from renewable sources, offering appropriate tools for the transformation of natural substances or synthetic taking into account the precepts of Green Chemistry. This work was performed nitrile hydratase gene cloning (α- and β- subunits and activator gene) from Rhodococcus erythropolis ATCC 4277 and Klebisella oxytoca via restriction-free cloning methodology and subsequent expression in E. coli to perform biotransformation reactions. The analysis of the substrate specificity of the Fe-type NHase of R. erythropolis ATCC 4277 indicates that it accepts a diversity of nitriles. The aliphatic nitriles were hydrated with conversions above 99%, with the exception of acrylonitrile. The aromatic nitriles were hydrated with conversions ranging from 1% to 88%. Whole cells of recombinant E. coli hydrated 1,4-phenylenediacetonitrile with high regioselectivity, while the enantiomeric excess of the aromatic nitriles 2-amino-2- (4-fluorophenyl)acetonitrile and 2-phenylbutyronitrile were 7% and 60%, respectively. The cloning of the gene NHase of Klebisella oxytoca was not observed. The second step of this work consisted in the synthesis of 4-(cyanomethyl)benzeneacetanamide an important intermediate in the synthesis of compounds of industrial interest and used as starting material in Grignard reactions and transamidation. A collecti... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Rifampicin is one of the major antibiotics used in the treatment of Mycobacterium tuberculosis. This organism causes tuberculosis. Other related nocardioform bacteria which include the Rhodococci are opportunistic pathogens in AIDS patients. These organisms cause tuberculosis-like disease and are currently treated with rifampicin and other drugs. The presence of a low level rifampicin resistance mechanism was identified in seven rhodococcal strains and five other related and unrelated bacteria. Abbreviated Abstract. Open document to view full version] / GR2017

A comunidade de insetos visitantes de flores de clones do eucalipto urograndis (Eucalyptus grandis x E. urophylla) foi estudada em um plantio localizado na Fazenda Areão, em Piracicaba, SP (22° 41 41 S e 47° 38 5 3 W ) por meio de levantamentos semanais com rede entomológica, durante os florescimentos de 2007 e de 2008 com a finalidade de caracterizar seu potencial apícola com a determinação de sua apifauna associada, e das características de néctar produzidos por suas flores. A comunidade antófila nos dois anos do levantamento foi representada por 29.492 indivíduos pertencentes a 6 ordens, 21 famílias, 43 gêneros e 52 espécies. A apidofauna foi representada por 24.882 indivíduos pertencentes a 11 gêneros e 10 espécies. A abelha africanizada Apis mellifera, o visitante mais efetivo em todo o levantamento (80,96%), seguida do sirfídeo Ornidia obesa (5,29%) e do mantispídeo Zeugomantispa virescens (4,26%). Os índices de diversidade (H) e equitabilidade (E); foram distintos nos dois levantamentos indicando distribuição de espécies mais uniforme na coleta de 2007 em relação à de 2008. Dentre as demais espécies predominantes, destacaram-se as abelhas Trigona spinipes (irapuá), Tetragonisca angustula (jataí), e Nannotrigona testaceicornis (iraí). As concentrações médias encontradas por clones foram inferiores ao relatado na literatura, sendo os valores máximos variando entre 13 e 14%. As diferenças encontradas entre alguns clones possivelmente foram influenciadas pela altura de algumas plantas. / The community of insect flower visitors of eucalyptus urograndis clones (Eucalyptus grandis x E. urophylla) was studied in an plantation located at Areão farm, in Piracicaba, São Paulo state, Brazil (22° 41 41 S e 47° 38 53 W ). Weekly collections were conducted using hand net during the bloom periods of 2007 and 2008 in order to characterize the potential for beekeeping by determining the associated apifauna and the nectar characteristics produced by the flowers.The anthophilous community in the two-year survey was represented by 29,492 individuals belonging to 6 orders, 21 families, 43 genera and 52 species. The apidofauna was represented by 24,882 individuals belonging to 11 genera and 10 species. The Africanized honey bee Apis mellifera. This species was the most effective visitor throughout the survey (80.96%) followed by the syrphid Ornidia obesa (5.29%) and the mantispid Zeugomantispa virescens (4.26%). The diversity (H\') and equitability (E) indices were different between the two surveys showing that species distribution was more uniform in the collecting of 2007 when compared to the 2008. Among the other dominant species, the bees Trigona spinipes (Irapuá bee), Tetragonisca angustula (jataí bee), and Nannotrigona testaceicornis (Iraí bee) were the main ones. The differences found between some clones were possibly influenced by the height of some plants.

As modificações das lipoproteínas de baixa densidade (LDL) são uma etapa essencial na aterogênese pois acarretam a geração de LDL eletronegativa [LDL(-)] que apresenta propriedades quimiotática, citotóxica, imunogênica e pró-inflamatória. O objetivo deste trabalho foi a produção de hibridomas secretores de anticorpos monoclonais anti-LDL(-), a clonagem dos genes que codificam para as cadeias variáveis destes anticorpos, e sua expressão como fragmentos de anticorpo de cadeia única (scFv). A LDL(-) isolada de plasma humano foi utilizada como antígeno para imunização de camundongos BALB/c. Após triagem dos clones, dois anticorpos monoclonais foram obtidos baseados em sua reatividade pela LDL( -) e não pela LDL nativa: 1A3H2 (1A3) e 2C7D5F10 (2C7). Os cDNAs codificante para a cadeia pesada (VH) e cadeia leve (VL), de ambos os anticorpos, foram obtidos por meio de RT-PCR utilizando bibliotecas de oligonucleotídeos que reconhecem todas os genes de domínios variáveis das famílias de VH e VL murinas. Os genes da VH e VL obtidos foram clonados no vetor pGEM-T Easy (Promega®) e suas seqüências determinadas. A VH do anti-LDL(-) 1A3 pertence família J558.84 e fragmento gênico JH2, enquanto sua VL pertence a família 8.24 e fragmento gênico Jk5. A VH do anti¬-LDL(-) 2C7 pertence a família Vmu 3.2 (J558) e fragmento gênico JH4, enquanto sua VL pertence a família 8.24 e fragmento gênico Jk5. A partir disso, oligonucleotídeos sintéticos foram sintetizados a fim de clonar estes segmentos gênicos no vetor pPlgLE de expressão em Pichia pastoris. Foram realizadas três construções: o scFv 1A3, scFV 2C7 e um scFv híbrido (VH do 1A3 e VL do 2C7). Das três construções obtidas, conseguimos expressar o scFv do anti-LDL 2C7D5F10 que demonstrou ser capaz de reconhecer o antígeno. A proteína recombinante expressa tem grande potencial de ser usada no diagnóstico clínico incluindo imunoensaios in vitro e como reagentes para exames que envolvam a obtenção e análise de imagens. / Oxidative modification of low-density lipoproteins (LDL) is an essential step in atherogenesis, generating electronegative LDL [LDL(-)], which has chemotactic cytotoxic, immunogenic and proinflammatory properties. The aim of this study was the generation of anti-LDL(-) mAbs, the cloning of the genes that code for their variable domains and their expression as single-chain Fv (scFv). LDL(-) was isolated from human blood plasma and used as an antigen for immunization of Balb/c mice. Upon screening, two different mAbs were selected based on their ability to recognize LDL(-) and not native LDL: 1A3H2 (1A3) e 2C705F10 (2C7). The cDNAs that code for VH and VL were obtained by RT-PCR using specific immunoglobulin primer libraries wich recognize all VH and VL murine families. The VH and VL genes were cloned in pGEM-T Easy (Promega®) and sequenced. The anti-LDL(-) 1A3 uses a VH segment from J558.84 and a JH2 segment, while VL uses a 8.24/Jk5 segments. The anti-LDL(-) 2C7 uses a VH segment from Vmu 3.2 (J558) and a JH4 segment, while VL uses a 8.24/Jk5 segments. Oligonucleotides were synthetized and those gene segments were cloned in pPIGLE a Pichia pastoris immunoglobulin expression vector. We obtained three scFv constructions: scFV 1A3, scFv 2C7 and a husk hybrid, harboring 1A3 VH and 2C7 VL. Among those, we expressed the scFv anti¬-LDL(-) 2C7 that are able to recognize the antigen. The recombinant protein has a great potential for clinicai diagnostic applications, including in vitro immunoassays and as imaging reagents.

A família das galectinas compreende um grupo de lectinas cujos domínios de reconhecimento de carboidratos (CRDs) possuem afinidade específica para ß-galactosídeos. Estas se encontram amplamente distribuídas em células normais e neoplásicas de diferentes organismos e estão envolvidas em uma grande diversidade de mecanismos celulares. As galectinas têm sido foco de estudos recentes, principalmente pelo seu envolvimento em processos inflamatórios e neoplásicos, entretanto, muitas perguntas sobre as interações com diferentes carboidratos, a especificidade destas interações e o papel específico das galectinas em inflamação, adesão celular, progressão tumoral e metástase permanecem ainda sem resposta. O presente projeto focou os estudos estruturais dos domínios de reconhecimento de carboidratos (CRDs) da galectina-4 humana (HGal-4). Nosso trabalho envolveu a clonagem, expressão, purificação dos domínios de reconhecimento de carboidratos (CRD-I e CRD-II) de forma independente. O domínio CRD-I da HGal-4 foi cristalizado e sua estrutura determinada por técnicas de cristalografia de raios-X a 2 Å de resolução. A estrutura cristalográfica do domínio CRD-I da galectina-4 humana possue duas folhas- compostas de seis fitas (S1- S6) e cinco fitas (F1-F6) enoveladas na forma de um -sanduiche. Uma comparação estrutural entre membros da classe das galectinas mostra que este enovelamento global dos CRDs é conservado e que e a diferença em especificidade pelos carboidratos observado pelas diferentes galectinas é consequência de mutações pontuais de aminoácidos. Os resultados obtidos no desenvolvimento do presente projeto serão utilizados como uma ferramenta importante para o entendimento de processos celulares que envolvem a galectina-4 humana, como inflamação, progressão celular e metástase, e conseqüentemente, contribuir para o planejamento de novas estratégias de diagnóstico e tratamento de neoplasias. / The galectin family comprises a group of lectins where the carbohydrate-recognition domains (CRDs) display specific affinity for ß-galactosides. They are widely distributed in normal and neoplasic cells of different organisms and are involved in a great diversity of cellular mechanisms. The galectins have been focus of recent studies, mainly for their involvement in inflammatory and neoplasic processes, however, many questions about the interactions with different carbohydrates, the specificity of these interactions and the specific role of the galectins in inflammation, cell adhesion, tumor progression and metastasis remain unanswered.The present project focused the strctural studies of human galectin-4 (HGal-4) carbohydrate-recognition domains (CRDs). Our work involved the independent cloning, heterologous expression and purification of both carbohydrate-recognition domains (CRD-I and CRD-II). The HGal-4 CRD-I domain has been successfully crystallized and its structure solved by X-ray crystallography techniques at 2 Å resolution. The crystallographic structure of HGal-4 CRD-I domain comprises two -sheets containing six (S1- S6) and five strands (F1-F6) each packed as a -sandwich domain. A structural comparison among members of galectin class of proteins shows that this folding is highly conserved and that the difference in specificity for carbohydrate molecules is consequence of punctual aminoacid mutations. Our results will be used as an important tool towards a better understanding of cellular processes such as inflammation, cell progression and metastasis, and consequently, contribute for the development of new strategies for diagnosis and treatment of neoplasies.

A purificação da proteína VP3 do vírus da anemia das galinhas (CAV), expressada em um sistema de expressão procariótico como uma proteína de fusão com cauda de histidina, está demonstrada neste estudo. Extraiu-se o DNA da partícula do CAV, obtida de fígado de galinha infectado. Amplificou-se o gene da proteína VP3 a partir do DNA extraído pela reação da polimerase em cadeia (PCR), para subseqüentes clonagem e expressão protéica. O produto recombinante da expressão (pTrc-VP3) foi identificado por PCR e sequenciamento. A técnica de Western blotting determinou a expressão da proteína de fusão VP3 com cauda de histidina de peso molecular de aproximadamente 21 KDa. Através da eluição do gel, obteve-se a purificação da proteína VP3 expressada com homogeneidade julgada pelo gel de poliacrilamida e dodecil sulfato de sódio. A proteína VP3 purificada foi reconhecida por anticorpos do CAV no método Western blotting. Este resultado indica que a proteína VP3 recombinante expressada no sistema do vetor pTrcHis2 pode ser utilizada como antígeno para detectar anticorpos contra o CAV. / Purification of chicken anemia virus (CAV) VP3 protein, expressed in a prokaryotic expression system as histidine-tagged fusion protein is demonstrated in the present study. CAV particle was obtained from infected liver of chicken and DNA was extracted. The VP3 protein gene was amplified from the extracted DNA by polymerase chain reaction (PCR) and cloned. The recombinant expression construct (pTrc-VP3) was identified by PCR and sequencing analysis. Expression of VP3 protein with a molecular mass of approximately 21 KDa was confirmed by Western blotting analysis with CAV-specific antibodies. The in vitro expressed VP3 protein was purified to near homogeneity by elution from the gel, as judged by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis analysis. The purified VP3 protein was recognized by CAV antibodies in a Western blotting assay. This finding indicates that recombinant VP3 expressed in the pTrcHis2 vector system can be used as antigen to detect anti-CAV antibodies.

A presente pesquisa avaliou as anomalias e/ou disfunções cardíacas através da determinação e comparação dos parâmetros ecocardiográficos e ecodopplercardiográficos do fluxo da valva pulmonar em bezerros da raça Nelore originados através de transferência nuclear de células somáticas adultas (TNCS) e concebidos por inseminação artificial ou monta natural durante os primeiros 30 dias de vida, com a finalidade de contribuir nos estudos na área de clonagem e no desenvolvimento da clínica de neonatos bovinos. O delineamento experimental envolveu a avaliação ecocardiográfica do coração e avaliação do fluxo da valva pulmonar através de ecocardiografia Doppler distribuídos nos seguintes intervalos: de 0 a 12 horas após o nascimento, de 12 a 24 horas após o nascimento, de 1 a 2 dias de vida, de 2 a 4 dias de vida, de 4 a 7 dias de vida, de 7 a 10 dias de vida, de 10 a 15 dias de vida, de 15 a 20 dias de vida e de 20 a 30 dias de vida. Os bezerros foram divididos em 2 grupos experimentais: 1- Grupo Controle composto por 10 bezerros obtidos por monta natural ou inseminação artificial e 2- Grupo Clones composto por 10 bezerros obtidos por meio de TNCS. Os parâmetros e índices ecocardiográficos foram: diâmetro interno do átrio esquerdo e direito em sístole, diâmetro interno de ventrículo direito em sístole e diástole, espessura do septo interventricular em sístole e diástole, diâmetro interno do ventrículo esquerdo em sístole e diástole, parede livre do ventrículo esquerdo em sístole e diástole, diâmetro da aorta em diástole, razão átrio esquerdo em sístole e aorta, tempo de ejeção do ventrículo esquerdo, separação septal do ponto E, encurtamento fracional, fração de ejeção, volumes sistólico, diastólico e de ejeção, débito cardíaco, razão septo interventricular em sístole pela parede livre do ventrículo esquerdo em sístole.A avaliação do fluxo da valva pulmonar foi feita através da mensuração da velocidade máxima, velocidade média, tempo de ejeção, tempo de aceleração, integral de velocidade, volume sistólico, débito cardíaco e frequência cardíaca. Dos 10 animais clonados, 3 morreram em até 48 horas de vida apresentando hipertrofia ventricular congênita concêntrica, comunicação interatrial por não oclusão do forame oval e hipertensão arterial pulmonar. Os clones vivos apresentaram fluxo colorido através de comunicação interatrial em até 10 dias de vida enquanto que os bezerros do grupo Controle apresentaram fluxo colorido em até 7 dias. O peso vivo dos animais apresentou alta correlação com o perímetro torácico. Os valores do ecocardiograma determinados para o grupo Controle não são indicados para serem usados como valores de referência para os clones, pois variam muito com o peso dos animais e os clones apresentam variação de peso acima do normal para a espécie. / The present research evaluated anomalies and/or cardiac dysfunctions through the determination and comparison of echocardiographic and echodopplercardiographic parameters of pulmonary valve flow on Nelore breed calves originated from the somatic cell nuclear transfer technique (SCNTT) and from form Nelore breed calves conceived trough artificial insemination or natural mating on its first 30 days of life, with the purpose of contributing on researches on the cloning technique field and on the bovine neonatal clinic development. The experimental design involved heart echocadiographic evaluation and the pulmanary valve echodopplercardiographic evaluation on the following intervals: 0 to 12 hours after birth, 12 to 24 hours after birth, 1 to 2 days old, 2 to 4 days old, 4 to 7 days old, 7 to 10 days old, 10 to 15 days old, 15 to 20 days old and 20 to 30 days old. Calves were allocated in two experimental groups: 1- Control Group composed of 10 calves conceived through artificial insemination and natural mating and 2- Clone Group composed of 10 calves originated from SCNTT. The echocardiographic parameters and indices were: systolic left and right atrium diameters, systolic and diastolic internal diameter, interventricle septum thickness during the systolic and diastolic movement, systolic and diastolic left ventricle internal diameter, left ventricle free wall during systolic and diastolic movement, diastolic aorta diameter, systolic left atrium and aortic root ratio, left ventricle ejection timing, E-point septal separation, fractional shortening, ejection fraction, systolic volume, diastolic volume, ejection volume, systolic interventricle septum and systolic left ventricle ratio. The pulmonary valve flow evaluation was performed through the measurement of the maximum velocity, the average velocity, ejection time, acceleration time, velocity integral, systolic volume, cardiac debit and cardiac frequency. 3 from 10 clones died up to 48 hours after birth, presented congenital concentric ventricle hipertrophy, interatrial communication due to non occlusive oval foramen and pulmonary artery hypertension. The living clones presented colored flow through the interatrial communication until 10 days old while animals from Control Group presented it until 7 days old. Animals´ body weight and thoracic perimeter showed high correlation. The echocardiographic values determined for Control Group are not supposed to be used as reference for clones, because body weight causes great variation on these values and clones present much bigger body weight than what is normal for the species.

Os tripanosomatídeos utilizam aminoácidos, particularmente a prolina, como fontes de carbono e energia. Essas moléculas estão também envolvidas em outros processos fisiológicos como a metaciclogênesis, osmorregulação, ou resistência a diferentes condições de estresse. Duas enzimas, prolina desidrogenase e <font face=\"Symbol\">D1-pirrolina-5-carboxilato desidrogenase catalisam a oxidação de prolina a glutamato. Embora a presença dessa via em algumas espécies do gênero Leishmania seja amparada por dados do projeto genoma, ainda não ha evidências bioquímicas de sua atividade. Nesse trabalho focamos alguns aspectos dessa via em L. (L.) amazonensis. Demonstramos a presença das ORFs de ambos os genes dessa via (que denominamos LaPRODH e LaP5CDH) e dos seus produtos. Constatamos que ambas enzimas são mitocondriais. Também demonstramos que esses genes complementam cepas de Saccharomyces cerevisiae mutantes para <font face=\"Symbol\">Dput1 ou <font face=\"Symbol\">Dput2, ortólogos de LaPRODH e LaP5CDH respectivamente. Em conjunto, os dados obtidos sugerem a presença e funcionalidade da via prolina-glutamato em L. (L.) amazonensis. / Trypanosomatids use amino acids, particularly proline, as a carbon and energy sources. In addition, they are involved in other physiological processes such as metacyclogenesis, osmorregulation or resistance to different stress conditions. Two enzymes, proline dehydrogenase and <font face=\"Symbol\">D1-pyrroline-5-carboxylate dehydrogenase catalyze the oxidation from proline to glutamate. Although, the presence of this pathway in some species of the Leishmania is supported by the genome project, no biochemical data on their activities were shown up to now. In this work we focus on some aspects of the proline-glutamate pathway in L. (L.) amazonensis. We demonstrate the presence of ORFs for both genes (which we called LaPRODH and LaP5CDH) and their products. We also showed that both enzymes are mitochondrial. We could also demonstrate that both genes complement Saccharomyces cerevisiae strains mutant for <font face=\"Symbol\">Dput1 or <font face=\"Symbol\">Dput2, orthologs of LaPRODH and LaP5CDH respectively. Taken together, these data show the presence and functionality of the proline-glutamate pathway in L. (L.) amazonensis.