Orientador: Fernanda Gonçalves Basso / Banca: Elisa Maria Aparecida Giro / Banca: Rita de Cássia Loiola Cordeiro / Banca: Hérica Adad Ricci / Banca: Adriano Fonseca de Lima / Resumo: Os objetivos desse estudo foram investigar o efeito da aplicação de diferentes agentes promotores de ligações cruzadas (cross-linkers) sobre (1) a rigidez do colágeno dentinário e (2) sobre a degradação da união resinadentina produzida pela técnica dry-bonding. Para responder ao primeiro objetivo, 40 discos de dentina com 0,3 mm de espessura foram obtidos de pré-molares hígidos. Após completa desmineralização em ácido fosfórico 10%, os discos foram aleatoriamente divididos em 5 grupos (n=8): água deionizada (controle), carbodiimida (EDC) 0,5 mol/L, proantocianidina (PA) 5% ou glutaraldeído (GA) 5% ou 25%. Os discos permaneceram imersos nas soluções por 60s. A rigidez do colágeno foi indiretamente avaliada com base na contração após desidratação, por meio de transformador linear diferencial variável (LVDT). Para responder ao segundo objetivo, 64 pré-molares humanos hígidos foram desgastados para remoção total do terço coronário, obtendo desta forma superfícies planas de dentina. Estas foram condicionadas com ácido fosfórico a 37% por 15s, seguido do tratamento com as mesmas soluções descritas acima (n=16), exceto para o GA 25%. Após um tempo pré-determinado de tratamento, a dentina foi mantida úmida em metade dos dentes (n=8), e desidratada com jatos de ar nos dentes restantes (n=8). Em seguida, em todos os dentes, foi aplicado o adesivo Prime & Bond 2.1 e foi construído um bloco de resina. Espécimes de 0,81 mm² de área adesiva foram submetidos ao ensaio mecânico de microtração, após 24h ou 6 meses de envelhecimento em saliva artificial. Também foram analisados os tipos de fratura após o teste de microtração e oito espécimes por grupo/período de envelhecimento foram preparados para análise da nanoinfiltração. Para ambos os experimentos, os dados foram submetidos aos testes de ANOVA e Tukey (p<0,05). Na ausência de tratamento...(Resumo completo, clicar acessO letrônico abaixo) / Abstract: The aims of this study were to investigate the effect of the application of cross-linkers on (1) the stiffness of dentin collagen and (2) the resin-dentin bond degradation produced by the dry-bonding technique. To respond the first objective, forty 0.3 mm-thick dentin disks were obtained from sound premolars. After complete demineralization in 10% phosphoric acid, the discs were randomly divided into 4 groups according to the treatment (n=8): deionized water (control), 0.5 mol/L carbodiimide (EDC), 5% proanthocyanidin (PA) and 5% or 25% glutaraldehyde (GA). The discs were immersed in the solutions for 60s. Collagen stiffness was assessed indirectly based on the shrinkage after dehydration, measured in a linear variable differential transformer (LVDT). For second objective, flat dentin surfaces were produced in 64 sound pre-molars. The dentin was etched with phosphoric acid 37% for 15s, followed by treatment with the same solution described previously (n=16), except for the 25%GA. After the 60s treatment, the dentin was kept moist in half of the teeth (n=8) and dehydrated by air jets in the remaining teeth (n=8). Prime & Bond 2.1 adhesive was applied in all teeth followed by the built up of a composite block. Specimens of 0.81mm² adhesive area were obtained for the microtensile bond strength test, performed after 24h or 6 months of aging in saliva-like solution. After the mechanical test, the failure type was analyzed. Eight specimens by group were prepared for nanoleakage analysis. For both experiments, data were submitted to ANOVA and Tukey tests (p<0.05). In the absence of treatment with cross-linkers (control group), the percentage of shrinkage of the dentin matrix was 60%. Only EDC (23.9%) and glutaraldehyde 25% applied for 10 min (21.7%) were able to significantly reduce dentin shrinkage after dehydration. The highest bond strength values were found for EDC and 10% GA...(Complete abstract eletronic access below) / Doutor

Resumo: O comportamento reológico de soluções aquosas de gelatina e colágeno hidrolisado (4 e 10 % de sólidos totais) e de gelatina e amido de milho modificado de forma ácida (AMMA) (10 % de sólidos totais) foi estudado através de testes dinâmicos oscilatórios em um reômetro de tensão controlada com geometria cone e placa (60 mm de diâmetro e distância de trabalho de 52 mm). Para todas as concentrações, o módulo de armazenamento, G', aumentou com aumento da freqüência angular. Como esperado, os valores dos módulos correspondentes aos platôs aumentou com o aumento da concentração de gelatina e os valores de G' foram maiores nas soluções contendo amido. Os valores de G' e G' aumentaram com a diminuição da temperatura. O colágeno hidrolisado não apresentou comportamento de gel. A substituição de 25 % de gelatina por amido de milho modificado resultou em valores similares de G' nas amostras contendo somente gelatina. Foi realizado um estudo de separação de fases nas suspensões aquosas de gelatina e AMMA através de microscopia laser confocal, sendo observado que os biopolímeros co-existem, sem separação de fases na amostra em que gelatina e AMMA representam, respectivamente, 37,5 % e 62,5 % dos sólidos totais. Em geral, os demais sistemas apresentaram separação de fases, sendo esta mais pronunciada à medida que as amostras foram ficando enriquecidas com gelatina ou amido. Também foi estudado o comportamento reológico por compressão e as propriedades colorimétricas de gomas de gelatina dietéticas enriquecidas com colágeno hidrolisado e preparadas à base de xarope de maltitol e xilitol. A análise dos parâmetros de textura e o estudo colorimétrico permitiram observar que não há efeitos significativos (p<0,05) na interação entre concentração de gelatina e colágeno hidrolisado quanto à dureza das amostras. Além disso, a maior concentração... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The rheological behavior of aqueous solutions of gelatin and hydrolyzed collagen (4 and 10 % total solids) or gelatin and acid modified corn starch (AMCS) (10 % total solids) was studied. A controlled stress rheometer fitted with a cone and plate geometry (60 mm, gap 52 mm) was used for the dynamic oscillatory shear tests. For all concentrations, the storage modulus increased with the increasing angular frequency. As expected, the modulus plateau values increased with gelatin concentration increasing and G' was higher in the solutions with modified corn starch. G' and G' values attained the highest observed values at lower temperatures. Hydrolyzed collagen did not show gel formation ability. When 25 % of the gelatin content was substituted by AMCS, the observed values of G' were similar to those corresponding to pure gelatin suspensions. A phase separation study was carried out with gelatin and AMCS aqueous suspensions using confocal laser scanning microscopy. The results showed that the two biopolymers co-exist, without phase separation in a system containing 37,5 % of gelatin and 62,5 % of AMCS (based in a 10 wt% total solids). In general, the others systems showed phase separation, which was more intense with increasing gelatin/AMCS concentration. The rheological behavior in compression and the optical proprieties of diet gelatin gummy enriched with hydrolyzed collagen were also studied. The gummies were prepared with maltitol syrup and xilitol. The analysis of texture and opacity parameters showed that significant effects (p<0.05) were not observed in the interaction between the two factors with regard to samples hardness. High concentrations of gelatin and hydrolyzed collagen resulted in a high opacity. The rheological behavior in compression and the optical proprieties of gelatin/AMMA gels were also studied. When AMCS was introduced into gelatin gels, the system structure... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Vânia Regina Nicoletti Telis / Coorientador: Geórgia Álvares Castro Fernandes / Banca: Rosiane Lopes da Cunha / Banca: Célia Maria Landi Franco / Mestre

Orientador: Josimeri Hebling / Co-orientador: Débora Lopes Scheffel / Banca: Elisa Maria Aparecida Giro / Banca: Mariane Emi Sanabe / Resumo: Objetivo: Avaliar o efeito da aplicação de um primer experimental contendo carbodiimida (EDC) na atividade total de metaloproteinases (MMPs), na degradação do colágeno dentinário e na estabilidade longitudinal da união resina-dentina. Métodos: Foram desenvolvidos dois estudos para responder aos objetivos do trabalho. Estudo 1:Cem espécimes de dentina (1x1x6mm) foram obtidos de molares permanentes humanos hígidos. Cinquenta espécimes foram condicionados com ácido fosfórico 37% e tratados por 60s com (n=10): água deionizada (controle), EDC 0,5 mol/L, primer experimental (PE), primer experimental com EDC (PE+EDC) ou primer do sistema Scotchbond MP (SBMP). Após lavagem, os espécimes foram submetidos a um teste colorimétrico (SenSolyte) para a análise da atividade total de MMP. Outros 20 espécimes foram submetidos a um protocolo de indução de cárie. Esses e os demais 20 espécimes mantidos hígidos foram completamente desmineralizados em ácido fosfórico 10% por 18h e tratados como descrito acima. Os espécimes foram armazenados em solução semelhante à saliva por 15 dias a 37ºC, quando a saliva foi coletada para a quantificação de hidroxiprolina (HYP). Os dados foram submetidos aos testes ANOVA e Tukey (p<0,05). Estudo 2: Superfícies planas de dentina foram produzidas em 32 molares permanentes hígidos. Os dentes foram condicionados por 15s e tratados (n=8) como descrito no estudo 1, com exceção da água deionizada.Após o tratamento, o adesivo do sistema SBMP foi aplicado sobre todos os dentes seguido da construção de um bloco em resina composta. Os dentes foram seccionados em espécimes com área de secção transversal de 0,81 mm2, os quais foram armazenados em solução semelhante à saliva por 24h ou 6 meses previamente ao ensaio de microtração. Os dados em MPa foram submetidos aos testes de ANOVA a dois critérios fixos...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Objective: To evaluate the effect of an experimental primer containing EDC on the total matrix metalloproteinases (MMPs) activity, collagen degradation and resin-dentin bond stability. Methods: Two studies were developed to answer to the objectives of this dissertation. Study 1: One hundred dentin beams (1x1x6 mm) were obtained from sound human permanent molars. Fifty specimens were acid-etched with 37% phosphoric acid and treated for 60s with (n=10): deionized water (control), 0.5 mol/L EDC, experimental primer (EP), experimental primer with 0.5 mol/L EDC (EP+EDC) or Scotchbond MP primer (SBMP). After rinsing, the total MMP activity was assessed by a colorimetric assay (SenSolyte). Additionally, 20 specimens were subjected to a caries-inducing protocol. These and the remaining 20 sound specimens were completely demineralized in 10% phosphoric acid for 18h. The specimens were treated as mentioned above and stored in saliva-like solution for 15 days at 37°C. After this period, the saliva was collected for the quantification of hydroxyproline (HYP) release. MMP activity and HYP release were submitted to ANOVA and Tukey tests (p<0.05). Study 2: Flat dentin surfaces were obtained from 32 sound third molars. The dentin was acid-etched for 15s and treated (n=8) as described in the study 1, except for deionized water. After treatment, the bond of SBMP was applied to all teeth and resin blocks were constructed. After 24h, the teeth were cut into specimens with 0.81 mm2 of cross-sectional area, which were stored in saliva-like solution for 24h or 6 mo prior to microtensile testing. The bond strength values (MPa) were submitted to two-way ANOVA, Tukey and chi-square (χ2) tests (p<0.05). Types of fractures were descriptively analyzed. Results: All treatments reduced the activity of MMPs, however, 0.5 mol/L EDC (92%) and the EP+EDC (78%) were the most effective...(Complete abstract electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2018-08-01T21:58:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_10826_DISSERTAÇÃO DE MESTRADO (JONACIR NOVAES DAS VIRGENS (1).pdf: 2898530 bytes, checksum: 48b46f080aa4052ea24556acee922f6c (MD5) Previous issue date: 2017-04-05 / Os denominados biopolímeros, destaque para a quitosana (QUI) e o colágeno (COL), vêm desempenhando um papel importante como biomateriais, esse novo campo de pesquisa na última década tem alcançado avanços notáveis nas áreas de substituição, reconstituição e regeneração tecidual, pois os mesmos apresentam características essenciais como biocompatibilidade, biodegrabilidade e não-citotoxidade. Este trabalho consiste na obtenção e caracterização de membranas de quitosana/colágeno carregadas com nanopartículas de prata obtidas por mistura das soluções poliméricas em diferentes proporções em massa e posterior evaporação do solvente, já as nanopartículas de prata foram obtidas na própria matriz polimérica. As membranas quitosana/colágeno carregadas com nanopartículas de prata foram caracterizadas através das técnicas de infravermelho com transformada de Fourier (FTIR), raios X (DRX), microscopia eletrônica de varredura (MEV), microscopia eletrônica de transmissão (MET) e espectroscopia de energia dispersiva (EDX). Os resultados obtidos demostraram que o método de síntese das membranas por evaporação e a síntese das nanopartículas de prata na matriz polimérica foram realizados com muita eficiência e comprovados pelos resultados obtidos. As blendas de quitosana-colágeno otidas e analisadas por MEV apresentaram uma morfologia formada por estruturas porosas e interconectadas. A proporção em massa de QUI/COL foi importante para a manuntenção da estrutura do colágeno uma vez que na proporção 3:1 (m/m de QUI-COL) observou-se através do espectro vibracional uma diminuição da razão entre os picos de 1235 cm-1 e 1450 cm-1 respectivamente, o que sugere que o aumento da proporção de quitosana acarreta em uma perda da integridade proteíca do colágeno. As nanopartículas de cloreto de prata agregadas a matriz polimérica da quitosana obtidas tinha tamanho médio de 25 nm confirmadas por MET, no difratograma de raios X foram observado picos padrões para nanopartícula de cloreto de prata, no EDX do precipitado obtido da síntese das nanopartículas de prata foi observado além dos elementos prata e cloro a presença dos elementos carbono e oxigênio que confirmam a presença da matriz da quitosana aderida às nanopartículas de cloreto de prata.

Orientadores: Selma Candelaria Genari, Arnaldo Rodrigues dos Santos Junior / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-07T07:23:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cunha_MarceloRodriguesda_D.pdf: 5098178 bytes, checksum: b94b973afe0b096e483ba907231c9237 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Recentemente, existe um interesse no desenvolvimento de biomateriais que possam ser utilizados na substituição do tecido ósseo ou que atuem como indutores na reparação em caso de fraturas ou defeitos ósseos. Os biomateriais constituídos de elementos de matriz extracelular tridimensionais (MECa) compostas de colágeno/elastina apresentam a vantagem de poder sofrer alterações nas suas propriedades por modificações químicas do colágeno, resultando em matrizes carregadas positivo ou negativamente. Tais modificações podem melhorar as propriedades mecânicas e fisiológicas da MECa. O objetivo deste trabalho foi avaliar a capacidade das MECa de colágeno nativo e polianiônica no processo de reparação de defeitos produzidos no fêmur de ratas ovariectomizadas. Foram realizados defeitos na porção do côndilo femoral de ratas normais e ovariectomizadas. Foi feita a análise das características morfológicas, físicas e mecânicas do osso formado na região. A análise do material demonstrou ausência de alterações patológicas nas áreas implantadas, sugerindo que o material usado é biocompatível. A análise microscópica revelou que a área que recebeu a membrana de colágeno nativa teve menor quantidade de osso neoformado. Nos animais ovariectomizados que receberam membranas polianiônicas, observou-se um atraso no processo da regeneração na falha óssea, principalmente naqueles que não foram submetidos à reposição hormonal. A densidade e percentual mineral foi menor nos animais ovariectomizados e a resistência mecânica foi maior nas áreas que receberam membrana polianiônica 96 (PMC96). Conclui-se que nos casos de osteoporose por deficiência hormonal, a melhor membrana a ser utilizada num reparo ósseo é a polianiônica 96, pois proporciona crescimento ósseo mais rápido e de boa qualidade mecânica / Abstract: There has been recent interest in the development of biomaterials that can be used as replacement of bone tissue or that act as inducer of the healing process in the case of bone fractures or defects. Biomaterials consisting of three-dimensional extracellular matrix elements (aECM) composed of collagen/elastin have the advantage that their properties can be altered by introducing chemical modifications to the collagen that result in positively or negatively charged matrices. These modifications may improve the mechanical and physiological properties of aECM. The objective of the present study was to evaluate the effect of aECM consisting of native and polyanionic collagen on the healing process of defects created in the femur of ovariectomized rats. Defects were created in the femoral condyle of intacts and ovariectomized rats and the morphological, physical and mechanical characteristics of the bone formed in the region were analyzed. The results showed the absence of pathological alterations on implanted areas, suggesting that the implants were biocompatible. Microscopic analysis verified that areas that received native membrane had less quantity of neoformed bone. In ovariectomized animals that received anionic membranes, we observed a delay in bone regeneration, mainly in animals that did not receive hormonal replacement. The density and mineral matter percentage was smaller in ovariectomized animals and the a mechanical resistance was greater in the area receiving the 96 polyanionic membrane (PMC96). Thus, we conclude that in cases of osteoporosis due to hormone deficiency, the 96 polyanionic membrane possibly is the best to be used for bone repair since it provides faster bone growth, as well as good mechanical resistance / Doutorado / Anatomia / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientadores: Luiz Andre Freire Pimenta, Mario Alexandre Coelho Sinhoreti / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-12T16:36:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Soeiro_CaioRaphaelMartins_D.pdf: 792390 bytes, checksum: 07f8d0fd2a9315402a13ccecf7098f0a (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A utilização de procedimentos adesivos está consolidada na odontologia atual, sendo protocolo indispensável à realização de uma ampla gama de procedimentos preventivos e restauradores. Os substratos dentais, esmalte e dentina, diferem quanto a sua composição, morfologia e, conseqüentemente, em relação à sua interação com os sistemas adesivos. A remoção do colágeno exposto pelo condicionamento ácido, procedimento também conhecido por desproteinização da dentina condicionada, é sugerido para remover alguns dos problemas enfrentados na união à dentina, como a degradação do colágeno e a incompleta infiltração do sistema adesivo. Além disso, a remoção da matéria orgânica poderia aumentar a energia livre de superfície da dentina condicionada, facilitando seu molhamento pelo sistema adesivo. O uso de hipoclorito de sódio, em concentração de 10%, apresentado em forma de solução ou gel, tem sido estudado na remoção das fibrilas colágenas dentinárias. O objetivo desta tese foi avaliar o comportamento de sistemas adesivos com diferentes solventes frente à desproteinização. Três estudos focam diferentes aspectos dessa união, tais como tempo de aplicação do sistema adesivo, tipo de solvente do agente de união, armazenagem a longo prazo em água a 37oC e ainda a avaliação da aplicação do hipoclorito sob a apresentação líquida ou em forma de gel. Os resultados mostram que a remoção do colágeno dentinário ainda se mostra muito heterogênea e dificilmente aplicável em procedimentos clínicos futuros visando o aumento dos valores de resistência de união dos sistemas adesivos ao substrato dentina. Estudos futuros necessitam ser realizados visando definir com clareza o real papel da remoção do colágeno na união adesiva dentinária. / Abstract: The use of adhesives systems is well-known at current dentistry. Most of prevent and restorative procedures requires an adhesive technique. The dental tissues, enamel and dentin, differ from its composition, morphology and, thus, their relation to adhesive systems available. The collagen removal after acid conditioning (dentin deproteinization), could remove some of troubles founded by adhesion between adhesives and dentin tissue, as collagen degradation and incomplete infiltration of adhesives systems thought demineralized dentin, as well an increase in wettability of those adhesives. The use of 10% sodium hypochlorite, as solution or gel, had been studied in its capacity to remove dentin collagen fibrils. The aim of this thesis was to evaluate the behavior of some adhesive systems applied in a demineralized and deproteinized dentin substrate. Three studies present different characteristics of this union: influence of adhesive application time, adhesive solvent type, storage of restored specimens in water at 37oC and a comparison of NaOCl efficacy used in a solution or gel form. According to the results, the dentin collagen removal is not completely effective in an increase of bond strength values, regardless adhesive system or technique applied. Further studies need to be done to disclose the hole of sodium hypochlorite in dentin bonding. / Doutorado / Dentística / Doutor em Clínica Odontológica

Orientador: Alexandre Augusto Zaia / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-08T12:23:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moreira_DannaMota_M.pdf: 5878321 bytes, checksum: 4089eb0ec4e19d31fd9966e0b4a6b16f (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: O objetivo desse trabalho foi avaliar a ocorrência de alterações na estrutura e organização do colágeno presente na matriz orgânica da parede dentinária do canal radicular de incisivos bovinos bem como, avaliar a topografia da matriz inorgânica desta estrutura após irrigação com hipoclorito de sódio 5,25%, EDTA 17% e clorexidina gel 2%. Foram utilizados 60 dentes bovinos divididos aleatoriamente em seis grupos com 10 dentes cada: G1 - Hipoclorito de sódio (NaOCl) 5,25% e EDTA 17%; G2 - Clorexidina gel 2%; G3 - NaOCl 5,25%; G4 - EDTA 17%; G5 - Clorexidina gel 2% e EDTA 17%; G6 - Solução de cloreto de sódio 0,9% (Controle). Uma análise paralela foi realizada em 10 dentes onde nenhum tipo de procedimento foi realizado, sendo possível a obtenção dos parâmetros da birrefringência característica de incisivos bovinos sem instrumentação. As amostras experimentais foram submetidas à instrumentação e irrigação com as diferentes substâncias químicas auxiliares e em seguida, segmentadas em dois fragmentos. Um fragmento foi processado histologicamente utilizando o corante pricrosirius e em seguida, seu retardo óptico foi mensurado por meio de microscopia de polarização. O outro segmento foi preparado e avaliado por meio de microscopia eletrônica de varredura. Os resultados das mensurações dos retardos ópticos foram submetidos à análise estatística por meio do teste de Dunnet. Os resultados demonstraram que os grupos tratados com a clorexidina gel 2% e EDTA 17%, associados ou não, não obtiveram diferença estatisticamente significante em relação ao grupo controle. Nos grupos tratados com NaOCl 5,25%, associado ou não ao EDTA 17%, as médias dos retardos ópticos foram estatisticamente diferentes ao grupo controle. Concluindo que o NaOCl 5,25% provoca alterações na organização macromolecular do colágeno presente na matriz orgânica da dentina radicular de dentes bovinos. A análise realizada por meio da MEV demonstrou alterações estruturais na matriz inorgânica em todos os grupos em que o EDTA 17% foi utilizado / Abstract: The aim of this study was to evaluate the change in collagen structure and organization present in the organic matrix of the dentine wall of the root canals of bovine inferior incisors as well as the topography of the inorganic matrix after irrigation with 5.25% sodium hypochlorite, 17% EDTA and 2% chlorexidine gel. Sixty bovine incisors were randomly divided into six groups of 10: G1 - 5.25% Sodium Hypochlorite (NaOCl) and 17% EDTA; G2 - 2% Chlorexidine gel; G3 - 5.25% NaOCl; G4 - 17% EDTA; G5 - 2% Chlorexidine gel and 17% EDTA; G6 (Control) - 0.9% Sodium chloride. A parallel analysis was performed with 10 teeth which had not been submitted to any treatment. Hence, it was possible to obtain parameters for the birefringence characteristic of non-instrumented inferior bovine incisors. Experimental samples were submitted to instrumentation and irrigation with different auxiliary chemical substances and then segmented in two. One fragment was histologically processed using picrosirius pigment. Its optical retardations were measured through polarization microscopy. The second fragment was prepared to be evaluated through scanning electron microscopy. The optic retardation measurement data were submitted to statistical analysis using Dunnet?s test. Results revealed that the groups that associated or not 2% chlorexidine gel and 17% EDTA were not statistically different in relation to the control group. For the groups which 5.25% NaOCl was used, associated or not to 17% EDTA, the average optic retardations were statistically different to the control group. Therefore, 5.25% sodium hypochlorite proved to cause alterations to the molecular organization of collagen present in the organic matrix of root dentine of bovine teeth. Scanning electron microscopy showed structural alterations of the inorganic matrix of all groups tested with 17% EDTA / Mestrado / Endodontia / Mestre em Clínica Odontológica

nÃo hà / O objetivo desse estudo foi avaliar membranas de colÃgeno polianiÃnico (CPA) reticuladas e impregnadas com hidroxiapatita, manufaturadas pelo Departamento de FÃsica da Universidade Federal do CearÃ. Dividiu-se o trabalho em 2 etapas, onde inicialmente avaliou-se a biocompatibilidade e a biodegradaÃÃo de 6 diferentes membranas de CPA, divididas nos seguintes grupos: trÃs com 0, 25 e 75 ciclos de impregnaÃÃo com hidroxiapatita (CPA, CPA 25, CPA 75) e mais trÃs cujas membranas foram reticuladas com glutaraldeÃdo (GA) (CPA GA, CPA 25GA, CPA 75GA) inseridas em tecido subcutÃneo de ratos. AnÃlises histopatolÃgicas do infiltrado inflamatÃrio, atividade de mieloperoxidase (MPO), dosagem de citocinas, espessura de cÃpsula fibrosa, imunohistoquÃmica para metaloproteinase e biodegradaÃÃo das membranas foram avaliadas apÃs 1, 7, 15, 30, 60 e 120 dias. Posteriormente, avaliou-se o efeito das 3 melhores membranas na regeneraÃÃo Ãssea guiada usando defeito Ãsseo crÃtico em calvÃria de ratos (DOC), onde as membranas foram posicionadas sobre o defeito. FormaÃÃo Ãssea foi avaliada com base na radiografia digital (RD), tomografia computadorizada (TC) e anÃlise histolÃgica, 24 horas, 4, 8 e 12 semanas apÃs o procedimento cirÃrgico. MPO e dosagem de citocinas foram realizadas apÃs 24 horas. No subcutÃneo, as membranas reticuladas com GA mostraram espessa cÃpsula fibrosa e menor reaÃÃo inflamatÃria permanecendo intactas apÃs 120 dias. No modelo de regeneraÃÃo Ãssea em calvÃria de ratos, apÃs 12 semanas, os grupos CPA GA e CPA 25GA apresentaram reduÃÃo significativa da Ãrea radiolÃcida quando comparadas ao grupo basal. A anÃlise histolÃgica mostrou que nos grupos CPA GA e CPA 25GA as membranas ainda estavam intactas, envolvidas por uma espessa cÃpsula fibrosa e as membranas do grupo CPA 75GA apresentaram inÃcio de reabsorÃÃo. NÃo foi encontrada diferenÃa estatÃstica entre os grupos quanto a atividade MPO e citocina IL-1&#946;. ConcluÃmos que as membranas reticuladas mostraram-se mais biocompatÃveis e se mantiveram livre de biodegradaÃÃo no perÃodo de observaÃÃo. Essas membranas induziram o fechamento dos defeitos Ãsseos e nÃo induziram reaÃÃo inflamatÃria. A impregnaÃÃo de hidroxiapatita nÃo acelerou a cicatrizaÃÃo do defeito cirÃrgico. Nossos resultados sugerem que as membranas de CPA reticuladas poderÃo ser Ãteis nos processos em que a formaÃÃo de um novo osso depende de uma duraÃÃo mais prolongada da barreira mecÃnica. / The aim of this study was to evaluate polyanionic collagen (PAC) membranes reticulated and impregnated with hydroxyapatite, manufactured by the Physics Department, Federal University of CearÃ. This study was divided into two stages, initially it was evaluated the biocompatibility and biodegradation of six different membranes of PAC, divided into the following groups: three with 0, 25 and 75 cycles of impregnation with apatite (PAC, PAC 25, PAC 75 ) and three more whose membranes were crosslinked with glutaraldehyde (GA) (GA PAC, PAC 25GA, PAC 75GA) inserted into the subcutaneous tissue of rats. Histopathological analyzes of inflammatory infiltration, myeloperoxidase activity (MPO), cytokine, thickness of fibrous capsule, immunohistochemistry for metalloproteinase and degradation of the membranes were evaluated after 1, 7, 15, 30, 60 and 120 days. Subsequently, it was evaluated the effect of the three best membranes in guided bone regeneration using bone critical defects in rat calvaria (DOC), where the membranes were placed over the defect. Bone formation was evaluated based on digital radiography (DR), computed tomography (CT) and histological analysis, 24 hours, 4, 8 and 12 weeks after surgery. MPO and cytokine were performed after 24 hours. In the subcutaneous tissue, the membranes crosslinked with GA showed thick fibrous capsule, less inflammatory reaction and remained intact after 120 days. In the bone regeneration model in rat calvaria, after 12 weeks, PAC GA and PAC 25GA groups showed significant reduction in radiolucent area compared to the baseline group. Histological analysis showed that in PAC GA and PAC 25GA groups, membranes were still intact, surrounded by a thick fibrous capsule and in PAC 75GA group, membranes showed early resorption. There was no statistical difference between groups in MPO activity and IL-1&#946;. We conclude that the crosslinked membranes were more biocompatible and remained free from degradation during the observation period. These membranes induced closure of bone defects and did not induce inflammatory reaction. The impregnation of hydroxyapatite did not accelerate the healing of surgical defect. Our results suggest that the crosslinked membranes CPA may be useful in cases where new bone formation is dependent on a longer duration of mechanical barrier.

Um dos maiores desafios da ortopedia moderna é recuperar o tecido ósseo que tenha sido perdido por motivo de doença ou acidente. Na busca de substitutos para os enxertos, tem-se utilizado comumente biomateriais para recuperação desse tecido. Um dos vários tipos de biomateriais usados são os preparados à base de colágeno. Além de desempenhar papel importante na estrutura dos tecidos, o colágeno é capaz de orientar a formação de tecidos em desenvolvimento fato altamente favorável na sua utilização como biomaterial. Uma nova vertente de pesquisa do processo de mineralização de matrizes colagênicas que vem sendo desenvolvida é a analise de como a organização do tecido interfere no modo como ocorre esse processo de deposição. O uso do tendão vem sido pesquisado devido ao fato de ser um tecido extremamente organizado, com as fibras colagênicas alinhadas por toda a sua extensão. Este trabalho teve como objetivo a preparação e caracterização de matrizes de colágeno tipo I, oriundas de tendão bovino (TB) e avestruz (TA) após a hidrólise alcalina e mineralização. Os tendões foram colocados em solução alcalina contendo sais de K+, Na+ e Ca2+ por 72, 96 e 120 h a 25&deg;C e depois equilibrados em solução de sais, lavados em H3BO3, EDTA e água. As matrizes resultantes foram então mineralizadas em soluções de CaCl2 0,2 mol L-1, pH = 7,4 e de Na2HPO4 0,12 mol L-1 pH = 9,0 durante 6 h, ocorrendo a troca de soluções a cada 30 min. As matrizes antes e após mineralização foram congeladas, liofilizadas e submetidas à análise termogravimétrica (TG), calorimetria exploratória diferencial (DSC), microscopia eletrônica de varredura (MEV), espectroscopia no infra-vermelho (FT-IR) e dispersão de energia por raios-X (EDX). DSC mostrou que não houve desnaturação do colágeno durante o processo de tratamento alcalino e mineralização. A análise termogravimétrica mostrou que houve deposição de fosfato de cálcio, com o valor dependendo do número de ciclos de mineralização. MEV mostrou que essa mineralização não é uniforme, ocorrendo a formação de aglomerados. FT-IR e EDX mostrou que o fosfato de cálcio depositado provavelmente seja hidroxiapatita, mas não em sua estrutura estequiométrica. / One of greatest challenges of modern orthopedics is to restore bone tissue that has been lost due to sickness or accident. Searching for substitutes for grafts, biomaterials have been commonly used for recovery of bone tissue. Between different types of biomaterials, several are based on collagen. In addition to have important role in tissue structure, collagen is able to guide the formation of tissues, a highly favorable fact in its use as biomaterial. A possible research in collagen scaffolds mineralization is the analysis of how tissue organization interferes in deposition process. The tendon has been used because it is a highly organized tissue, with collagen fibers lined on its structure. This research aims the preparation and characterization of type I collagen scaffolds, prepared from bovine tendon (TB) and ostrich tendon (TA) after alkaline hydrolysis and mineralization. Tendons were maintained in alkaline solution containing K+, Na+ and Ca2+ ions for 72, 96 and 120 hours at 25&deg;C and then equilibrated in salt solution, washed with H3BO3, EDTA and water. The resulting matrices were then mineralized in 0.2 mol L-1, pH = 7.4 CaCl2 solution and 0.12 mol L-1 Na2HPO4 pH = 9.0 for 6 h, changing solutions after 30 minutes. The matrices before and after mineralization were frozen, lyophilized and subjected to thermogravimetric analysis (TG), differential scanning calorimetry (DSC), scanning electron microscopy (SEM), infrared spectroscopy (FT-IR) and energy dispersive X-ray spectroscopy (EDS). DSC showed that the collagen was not denaturated by alkaline treatment process and mineralization. TG analysis showed deposition of calcium phosphate on the scaffolds, with values depending on the number of mineralization cycles. SEM showed that the mineralization is not uniform, forming clusters of phosphate crystals. FT-IR and EDS showed that the deposited calcium phosphate is probably hydroxyapatite, but not in its stoichiometric structure.

O desenvolvimento de novos materiais tem sido baseado na mistura de dois ou mais polímeros ou biopolímeros, onde soluções destes são misturadas em diferentes proporções na tentativa de se obter materiais com propriedades distintas das de seus precursores. Neste trabalho foram analisadas blendas colágeno:PVA. O colágeno utilizado foi o tipo I, porem proveniente de duas formas diferentes, o colágeno comercial que foi cedido pela Novaprom Food Ingredients Ltda e o colágeno obtido a partir de tendão bovino por meio de hidrólise alcalina em diferentes tempos (24h e 96h). As blendas e os colágenos foram caracterizados por análise térmica (DTG e DSC), microscopia eletrônica de varredura (MEV), espectroscopia de absorção no infravermelho (FT-IR) e analises reológicas. As curvas DSC mostraram que o colágeno comercial é o de maior temperatura de desnaturação e que a adição de PVA não altera essa temperatura. Já as curvas TG mostraram que o PVA, seja qual for sua massa molecular, aumenta a estabilidade térmica do colágeno. A microscopia eletrônica mostrou que os colágenos com tratamento alcalino apresentam uma estrutura fibrilar e pouco desorganizada, enquanto o colágeno comercial apresenta uma estrutura uma pouco mais compacta. Através do FT-IR foi possível observar que a presença de PVA nas blendas não influencia na presença dos picos, sugerindo que não há interação química entre os mesmos. A análise reológica permitiu comparar os módulos elástico (G\') e viscoso (G\") dos géis em diferentes proporções, tendo todos eles valores de G\' maior do que G\", ou seja, podemos concluir que os materiais são mais elásticos do que viscosos. Observa-se também a influência na viscosidade dos géis com a adição de PVA ao mesmo, sendo a viscosidade maior com o aumento da massa de PVA adicionado. / The development of new materials has been based on the mix of two or more polymers or biopolymers where solutions are mixed in different portions trying to get materials with distinct properties from their precursors. In this work different collagen solutions and collagen-PVA blends were analyzed. The used collagen was the type I, however obtained from two different forms, the commercial collagen that was provided by Novaprom Food Ingredients Ltda and the collagen obtained from bovine tendon by alkaline hydrolysis in different times (24h and 96h). The blends and collagen were characterized by thermal analysis (DTG and DSC), electronic scan microscopy (ESM), infrared absorption spectroscopy (FT-IR) and rheological analysis. DSC curves showed that the commercial collagen has the highest denaturing temperature and that the addition of PVA does not change this temperature. In other hand, TG curves showed that PVA, in any given molecular weight, increases collagen thermal stability. Electronic microscopy shows that collagen with alkali treatment have a fibrillar and little disorganized structure, insofar, the commercial collagen have a little more compact structure. By FT-IR it was to possible observe that the presence of PVA on blends have no influence on the peaks, suggesting that there is no chemical interaction between then. Rheological analysis allow to compare the elastic module (G\') and the viscous module (G\'\') from blends in different proportions. All the obtained values for G\' are higher than G\'\', so it can be conclude that samples are more elastic than viscous.