Orientador: José Luis Laus / Banca: Aline Adriana Bolzan / Banca: Leucio Camara Alves / Banca: Fábio Luiz da Cunha Brito / Banca: Newton Nunes / Resumo: A leishmaniose ocular canina envolve um complexo de alterações decorrentes da atuação do agente nos diversos tecidos oculares. Valendo-se de cães com sorologia positiva para a doença, portadores (G1) ou não (G2) de alterações oftálmicas, com este estudo avaliou-se: o exame parasitológico de esfregaço a partir de swab conjuntival, a presença do parasito, pela PCR, em fragmento conjuntival e no humor aquoso (HA) e as concentrações protéicas, pela eletroforese, no HA. O parasitológico de esfregaço a partir do swab conjuntival foi positivo em 60% e 38,1% dos animais do G1 e do G2, respectivamente, com a oddsratio de 2,438 para positividade em tal parâmetro nos cães do G1, comparativamente aos do G2. A positividade na PCR de fragmento conjuntival foi maior no G1 (p < 0,005), com oddsratio igual a 17,31 quando comparados G1 e G2. O parasito não foi detectado no HA de qualquer dos grupos. Houve correlação fracopositiva entre as concentrações de IgG e de albumina séricas e do HA. Diferenças significativas foram encontradas entre os grupos, quando comparadas as proteínas totais, IgG, e proteína de peso molecular 33 kDa no HA. A haptoglobina foi detectada apenas no HA dos cães do G1. Os dados apontam para uma tendência dos cães com sinais oftálmicos serem positivos no parasitológico de esfregaço a partir do swab conjuntival e na PCR de conjuntiva, podendo, o método ser útil no diagnóstico parasitológico da leishmaniose visceral canina. Proteínas de fase aguda merecem mais avaliações quanto ao seu valor diagnóstico para esta enfermidade / Abstract: Canine ocular leishmaniasis involves several ophthalmic alterations owing to the action of the parasite in numerous ocular tissues. Therefore, dogs serologically positive for leishmaniasis either presenting (G1) or not (G2) ocular alterations were enrolled in this study to evaluate the conjunctival cytology as a method for the diagnosis of this disease, the detection of the parasite in conjunctival tissue samples and in the aqueous humor using PCR, as well as the serum and aqueous humor protein concentrations determined by electrophoresis. The parasitological evaluation of the swabs disclosed 60% and 38.1% of positivity in dogs of groups 1 and 2, respectively, with a calculated oddsratio of 2.438 for a single animal testing positive in this procedure when ocular changes existed. The documented PCR results were more expressive in G1 dogs (P<0,005), with an oddsratio of 17,81 for the animals of this group testing positive using this method as compared to G2. The parasite was not found in the aqueous humor of either group. A weak positive correlation was calculated between the serum and aqueous humor IgG and albumin concentrations, and significant differences were found to exist between groups regarding total protein, IgG, and 33 kDa protein measured in the aqueous humor. Also, haptoglobin was detected only in the aqueous humor of G1 dogs. Our data suggest a tendency of dogs with ocular signs testing positive on the conjunctival swab exams and PCR, being these methods useful in the diagnosis of canine leishmaniasis. However, acute phase proteins require a more detailed evaluation concerning its diagnostic value for this disease / Doutor

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Saúde Animal, 2014. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2014-11-03T14:42:03Z No. of bitstreams: 1 2014_LuanaPaesdeAguiarMota.pdf: 1499752 bytes, checksum: 77902a8b2bff8efacfd2065894ebf23d (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-11-12T13:54:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_LuanaPaesdeAguiarMota.pdf: 1499752 bytes, checksum: 77902a8b2bff8efacfd2065894ebf23d (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-12T13:54:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_LuanaPaesdeAguiarMota.pdf: 1499752 bytes, checksum: 77902a8b2bff8efacfd2065894ebf23d (MD5) / O presente trabalho foi um estudo abrangente e optou-se por dividi-lo em dois artigos. O primeiro redigido e formatado segundo as normas de submissão para publicação na revista Pesquisa Veterinária Brasileira (Brazilian Journal of Veterinary Research, ISSN: 0100-736X; Fator de impacto 0.51, Qualis A2) e o segundo, redigido e formatado segundo as normas de submissão para publicação da revista Veterinary Ophthalmology (Fator de impacto 0.959, ISI Journal Citation Reports © Ranking: 2012: 66/143 (Veterinary Sciences) Online ISSN: 1463-5224)”. ______________________________________________________________________________ RESUMO DO ARTIGO 1 / O teste de cristalização da lágrima (TCL) ainda não foi padronizado em cães. Este trabalho propõe padroniza-lo e validar o programa STEPanizer © stereology tool version 1.0 como método de classificação complementar para o teste. Foram utilizados 31 cães (62 olhos), sem predominância de sexo ou raça, com idade média de 18,8 ± 18.4 meses. Dentre estes, 14 apresentavam a superfície ocular hígida e 17 apresentavam protrusão unilateral da glândula da terceira pálpebra. Foram realizados em todos os cães, testes de rotina para avaliar a higidez da superfície ocular. O TCL foi classificado de acordo com Rolando (1984) e pelo programa STEPanizer. Neste, testou-se a avaliação com 16, 25, 36, 49, 64, 81 e 100 pontos equidistantes de contagem, no sistema teste que fica sobreposto à imagem, correlacionando-os com a classificação segundo Rolando (1984). Os dados foram analisados com o software Statistical Analysis System (SAS®). Valores de maior correlação (r), p < 0.05, menor erro mean square (MSE) e maior coeficiente de determinação (R2 ajustado) foram utilizados para definir o melhor número de pontos no STEPanizer. O TCL classificado segundo Rolando (1984) resultou, em média, tipo II para os animais hígidos e tipo III para os animais com protrusão da glândula da terceira pálpebra. A classificação do TCL utilizando o STEPanizer mostrou melhor correlação com a classificação de Rolando quando feita por meio da contagem com 100 pontos equidistantes (r - 0.9; MSE 0.38 e R2 ajustado 0.81). A classificação para o TCL utilizando o STEPanizer mostrou-se objetiva e factível de ser empregada na rotina clínica, sendo útil como ferramenta de padronização para a classificação do TCL, feita segundo Rolando (1984). ______________________________________________________________________________ RESUMO DO ARTIGO 2 / Objetivo Avaliar a superfície ocular de cães com protrusão da glândula da terceira pálpebra, antes e após a cirurgia de reposicionamento da glândula, comparativamente a animais hígidos. Animais vinte e sete cães, sendo 14 sem alterações de superfície ocular (grupo controle – GC) e 13 acometidos unilateralmente pela protrusão da glândula da terceira pálpebra (grupo afetado – GA), machos ou fêmeas, com idade media de 20,8 ± 19 meses. Procedimentos Foram realizados, em todos os cães, o teste lacrimal de Schirmer (TLS); o tempo de ruptura do filme lacrimal (TRFL); a coloração com fluoresceína (FLUO), a análise histopatológica do fórnix conjuntival (BIO) e o teste de cristalização da lagrima (TCL), classificado como o proposto por Rolando (1984) e por meio do programa STEPanizer © Stereology tool version 1.0. Sendo que no GA, os testes também foram realizados nos dias 7, 15, 30 e 60 após a reposição da glândula protruída. Os dados foram analisados com o software Statistical Analysis System (SAS ®). Valores de maior correlação (r), p < 0.05, menor erro mean square (MSE) e maior coeficiente de determinação (R2 ajustado) foram considerados significativos. Resultados Não se verificou diferença significativa para os testes TLS, TRFL e FLUO nem antes, nem após o procedimento de reposição da glândula. O TCL classificado de acordo com o STEPanizer mostrou piora significativa após o procedimento cirúrgico (p < 0,001), piora não significativa quando classificado de acordo com Rolando (1984). A classificação do TCL 20 pelo STEPanizer é altamente correlacionada com a de Rolando, tanto nos olhos dos animais hígidos (r – 0,94), como nos olhos afetados pela protrusão (r – 0,91). A concentração de células caliciformes por campo de grande aumento (400x) para os olhos do GC (22,28 ± 5,78) foi significativamente maior do que no GA (18,45 ± 10,6). Conclusão O diagnóstico e a terapêutica cirúrgica precoce provavelmente evitaram os sinais característicos da cronicidade desta afecção sobre a superfície ocular dos animais deste estudo. A classificação do TCL utilizando o STEPanizer, mostrou-se mais sensível do que a de Rolando (1984). As alterações visualizadas no olho sem a protrusão foram as mesmas visualizadas no olho afetado pela protrusão, o que gera a hipótese de que a etiopatogenia da doença pode ter início com alterações de superfície ocular ainda não descritas em literatura. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT OF THE ARTICLE 1 / The tear ferning test (FT) has no standard in dogs. This paper proposes this standardization it and validation using the STEPanizer © Stereology tool version 1.0 program (STEPanizer) as a complementary classification method for the test. Thirty one dogs (62 eyes) of no predominant sex or bread, with an average age of 18.8 ± 18.4 months were used. Among these, 14 had a healthy ocular surface and 17 had a unilateral third eyelid gland protrusion. Routine tests for evaluating the health of the ocular surface were performed on all dogs. The FT was classified according to Rolando (1984) and by the STEPanizer program. The STEPanizer uses a test system with equidistant points overlaid on the analyzed image. A total of 16, 25, 36, 49, 64, 81 and 100 equidistant points were evaluated, correlating them with the Rolando (1984) classification. Data were analyzed with the Statistical Analysis System (SAS®) software. Higher correlation (r) coefficients, p < 0.05, lower mean square error (MSE) and higher adjusted R2 were used to define the best number of points. Healthy animals showed, on average, FT classification according Rolando (1984) of Type II in healthy animals and Type III in animals with third eyelid gland protrusion. The FT regression on STEPanizer using 100 equidistant points (r - 0.9; MSE 0.38 and adjusted R2 0.81) showed the highest correlation with Rolando (1984) classification. The FT classification using STEPanizer proved to be objective and feasible for use in clinical routine, being useful as a standardized tool for the FT Rolando (1984) classification. INDEX TERMS: eye, ocular surface, validation, Rolando (1984), test system, third eyelid gland protrusion. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT OF THE ARTICLE 2 / Objective Evaluate third eyelid gland protrusion dogs ocular surface both before and after surgical repositioning of the gland, compared to healthy animals. Animals Twenty-seven dogs, 14 with healthy ocular surface (control group - CG) and 13 unilaterally affected by third eyelid gland protrusion (affected group - AG), male or female, with a mean age of 20.8 ± 19 months. Procedures In all dogs were performed the Schirmer tear test (STT); the breakup time of the tear film (BUT); the fluorescein staining (FLUO), the histopathological analysis of the conjunctival fornix (BIO) and the tear Ferning test (FT), classified as proposed by Rolando (1984) and with STEPanizer © Stereology tool version 1.0 program. On AG, the tests were also performed on 7, 15, 30 and 60 days after the gland replacement. Data were analyzed with the Statistical Analysis System software. Higher correlation values, p < 0.05, lower mean square error and higher determination coefficient were significant. Results No statistical difference was found for STT, BUT and FLUO tests. FT classified using STEPanizer showed significant worse after surgery (p <0.001), but no significant when classified according to Rolando (1984). On AG, changes in the eyes without protrusion were the same displayed in the affected eyes. Conclusion Early diagnosis and surgical therapy of affected dogs prevented chronic changes on their ocular surface. The FT rating using the STEPanizer was more sensitive than Rolando (1984) classification. It’s assumed that the disease pathogenesis may begin with changes in ocular surface not previously described in the literature.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Saúde Animal, 2014. / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2015-01-26T15:27:06Z No. of bitstreams: 1 2014_LauraReiseSilva_Parcial.pdf: 161972 bytes, checksum: 89874efc0cb86bc2635a1299393d9626 (MD5) / Rejected by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com), reason: on 2015-01-27T14:23:09Z (GMT) / Submitted by Ana Cristina Barbosa da Silva (annabds@hotmail.com) on 2015-01-27T15:17:56Z No. of bitstreams: 1 2014_LauraReiseSilva_Parcial.pdf: 161972 bytes, checksum: 89874efc0cb86bc2635a1299393d9626 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2015-02-02T12:31:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_LauraReiseSilva_Parcial.pdf: 161972 bytes, checksum: 89874efc0cb86bc2635a1299393d9626 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-02T12:31:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_LauraReiseSilva_Parcial.pdf: 161972 bytes, checksum: 89874efc0cb86bc2635a1299393d9626 (MD5) / Objetivo: Descrever, pela primeira vez, o teste de cristalização do filme lacrimal (TCFL) em equinos hígidos, e sua correlação com outros parâmetros de avaliação da superfície ocular. Materiais e métodos: Trinta equinos (60 olhos), sem raça definida, machos ou fêmeas, adultos e hígidos. Realizou-se o TLS seguido da coleta de amostra lacrimal com microcapilar, aferindo-se a temperatura e umidade do ambiente no momento da coleta. Depositou-se na superfície de uma lâmina de vidro uma gota da lágrima, deixando-a secar por 10 minutos em temperatura ambiente. Avaliou-se a cristalização da lagrima conforme modelo proposto por Rolando (1984) em tipos I, II, III e IV. Adjutoriamente, utilizou-se o programa STEPanizer© stereology tool, version 1.0, para a contagem de pontos sobre a imagem de cristalização digitalmente capturada. Procedeu-se a biópsia conjuntival bilateral para contagem de células caliciformes (CCC) e avaliação do infiltrado celular local. Resultados: O TCFL foi classificado em tipo I em 18 olhos (30%), tipo II em 31 olhos (51,7%) e o tipo III em 11 olhos (18,3%), sendo as amostras coletadas sob temperatura média de 27,3± 1,5ºC e a umidade relativa de 61,5±5,7%. Não houve amostra com a classificação tipo IV. Na cristalização tipo I, a contagem variou entre 27 - 36 pontos (média: 33,27± 2,40), no tipo II entre 22 - 31 pontos (25,42±1,95) e no tipo III entre 13 - 25 pontos (16,82±3,76). Não houve diferença estatística ou correlação entre os olhos direito e esquerdo, tampouco a influência estatisticamente significativa (p < 0,05) dos fatores avaliados sobre o TCFL. A CCC apresentou valores médios de 51,8 e 48,2 células/campo para os olhos direito e esquerdo, respectivamente. Todas as amostras evidenciaram linfócitos, plasmócitos e eosinófilos Conclusão O TCFL é de fácil execução, sem riscos para o paciente, e de baixo custo. Uma vez padronizado para a espécie equina, associado ou não com o programa STEPanizer© stereology tool, version 1.0, constitui método adicional de avaliação da superfície ocular. / Objective: To describe, for the first time, the tear ferning test (TFT) in healthy horses, and its correlation with other parameters for evaluating the ocular surface. Animals studied: Thirty horses (60 eyes), of no defined breed, males or females, adult and healthy. Procedures: The Schirmer tear test (STT) was performed after collecting a tear sample with a microcapillary tube, while measuring the ambient temperature and relative humidity at the moment of the collection. A drop of the tears was placed on the surface of a glass slide and allowed to dry for 10 min at room temperature. The crystallization pattern of the tears was classified according to the model proposed by Rolando (1984) into types I, II, III and IV. The program STEPanizer© stereology tool, version 1.0, was utilized for counting points on the crystallization image digitally captured. A bilateral conjunctival biopsy was performed for the caliciform cell count (CCC) and evaluation of the local cellular infiltrate. Results: TFT was classified into type I in 18 eyes (30%), type II in 31 eyes (51.7%) and type III in 11 eyes (18.3%), where the samples were collected at a mean temperature of 27.3± 1.5ºC and relative humidity of 61.5±5.7%. There was no sample with a type IV classification. In the type I crystallization, the count varied between 27 and 36 points (mean: 33.27± 2.40), in type II between 22 and 31 points (25.42±1.95), and in type III between 13 and 25 points (16.82±3.76). There was no statistical difference or correlation between the right and left eyes, and nor was there a statistically significant influence (p < 0.05) on TFT by the factors evaluated. The mean CCC values were 51.8 and 48.2 cells/field for the right and left eyes, respectively. All samples showed the presence of lymphocytes, plasmocytes and eosinophils. Conclusion: TFT is easy to perform, without risks to the patient, and is inexpensive. Once standardized for horses, associated or not with the program STEPanizer© stereology tool, version 1.0, it is an additional method for evaluating the ocular surface.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2011. / Submitted by Shayane Marques Zica (marquacizh@uol.com.br) on 2011-09-05T18:25:51Z No. of bitstreams: 1 2011_StellaAlvesdaFonseca.pdf: 1459900 bytes, checksum: 8e551b86d0680e69d061e73ab6c7dc88 (MD5) / Approved for entry into archive by Repositorio Gerência(repositorio@bce.unb.br) on 2011-10-25T20:41:02Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_StellaAlvesdaFonseca.pdf: 1459900 bytes, checksum: 8e551b86d0680e69d061e73ab6c7dc88 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-10-25T20:41:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_StellaAlvesdaFonseca.pdf: 1459900 bytes, checksum: 8e551b86d0680e69d061e73ab6c7dc88 (MD5) / Foi realizado estudo retrospectivo de 159 cães com ceratoconjuntivite seca (CCS) atendidos no Hospital Veterinário da Universidade de Brasília, a fim de estabelecer os padrões da doença no Distrito Federal. O estudo demonstrou predisposição da raça cocker spaniel (P<0,0001), sinais clínicos mais evidentes em animais com valores do Teste da Lágrima de Schirmer realizado sem colírio anestésico (TLS-1) < 5mm/minuto (P<0,0001) e maior incidência da CCS em cães com idade superior a seis anos. Exceção foi observada em cães da raça Yorkshire terrier, acometidos mais precocemente. Os sinais clínicos observados com maior frequência foram hiperemia conjuntival, secreção mucosa, neovascularização e pigmentação de corneanas. A ciclosporina A foi o principal medicamento prescrito. A fim de investigar o potencial da terapia com células-tronco, foi criado um protocolo aplicado ao tratamento da CCS, de colheita de medula óssea (MO), separação de fração de células mononucleares (FCM) e administração autóloga por via subconjuntival palpebral sobre a glândula da terceira pálpebra de coelhos e cães. Foram utilizados dez coelhos e 20 cães, que, após passarem por exames clínicos e laboratoriais e ambientação, foram divididos em grupo controle e grupo tratado. Para obtenção da FCM, foi realizada colheita, centrifugação e isolamento da medula óssea. O material, ressuspenso em solução salina, foi administrado no grupo tratado, enquanto o grupo controle recebeu apenas solução salina. Os animais passaram por avaliações clínicas e TLS-1 até 60 dias da aplicação, e avaliação histológica da glândula da terceira pálpebra, que demonstraram não haver alterações que contraindicassem o tratamento. Tanto a administração de solução salina quanto a de solução salina + FCM aumentaram significativamente os valores do TLS, mas o aumento foi mais pronunciado nos cães que receberam células mononucleares. Aos 60 dias da aplicação da FCM, os cães tratados apresentaram aumento de 3,4mm;min ao TLS-1. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / A retrospective study of 157 dogs with keratoconjunctivitis sicca (KCS) examined at the Veterinary Hospital at the University of Brasilia was undertaken in order to establish the patterns of disease in Distrito Federal. The study demonstrated predisposition of cocker spaniels (P <0.0001), more clinical signs in patients with Schirmer Tear Test (STT) values less than 5 mm/minutes (P <0.0001) and higher incidence of KCS on dogs over six years (except on Yorkshire terriers, which were stricken younger). Clinical signs more frequently observed were conjunctival hyperaemia, mucus discharge, neovascularization and pigmentation. Cyclosporin A was the main drug prescribed, regardless of the amount of clinical signs and values of the STT presented by each animal. In order to investigate the potential of stem cell therapy, an experimental model of harvest of bone marrow (BM), separation of mononuclear cell fraction (MCF) and administration by subconjunctival autologous eyelid on the third eyelid gland in rabbits and dogs was created and applied to the treatment of KCS. Ten rabbits and 20 dogs were were divided into control and treated group, after undergoing clinical and laboratorial exams and quarantine. To obtain MCF, BM was harvested, centrifuged and isolated. Treated group was submitted to the autotransplant of MCF + saline , while the control group received only saline. The animals underwent clinical and histological evaluation and STT, which showed no contraindicative changes. Both the administration of saline as that of saline + FCM significantly increased the values of the TLS, but the increase was more pronounced in dogs that were inoculated mononuclear cells.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-09-26T15:37:59Z No. of bitstreams: 1 2013_RomuloVitelliRochaPeixoto.pdf: 2229695 bytes, checksum: b9d0c709c69121a3e5d2a1eaff4d1400 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-10-03T13:13:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_RomuloVitelliRochaPeixoto.pdf: 2229695 bytes, checksum: b9d0c709c69121a3e5d2a1eaff4d1400 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-03T13:13:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_RomuloVitelliRochaPeixoto.pdf: 2229695 bytes, checksum: b9d0c709c69121a3e5d2a1eaff4d1400 (MD5) / A ceratoconjuntivite seca em cães é uma afecção frequente na rotina clínica. Embora se verifiquem resultados satisfatórios no emprego de imunomoduladores, alguns pacientes não respondem positivamente ao uso desses fármacos, e a terapia celular pode se tornar uma alternativa ao tratamento convencional. Objetivou-se avaliar os efeitos da aplicação de fração autógena de células mononucleares (FCM) da medula óssea na região periglandular da terceira pálpebra, sobre a superfície ocular de cães com CCS. Foram selecionados 15 pacientes (25 olhos acometidos) provenientes do Serviço de Oftalmologia Veterinária da FAV/UnB, sendo nove machos e seis fêmeas, de dez raças distintas. Para inclusão neste estudo, os indivíduos apresentaram valores inferiores à 10mm/min ao teste lacrimal de Schirmer (TLS). Eles foram submetidos ao TLS, à tonometria de aplanação, à biomicroscopia com lâmpada em fenda, ao tempo de ruptura do filme lacrimal (TRFL), ao teste da lissamina verde e ao teste da fluoresceína, semanalmente, durante 16 semanas consecutivas. Realizou-se, neste mesmo período, avaliação quanto à hiperemia e à secreção ocular, à quemose e à transparência corneal. A medula óssea foi coletada mediante punção pelo esterno, a FCM foi isolada por centrifugação e o pellet contendo a FCM foi aplicado na região periglandular da terceira pálpebra no dia inicial do estudo. Realizou-se biopsia da conjuntiva bulbar temporal superior para avaliação do grau de inflamação e quantificação das células caliciformes no dia da aplicação da FCM e 16 semanas após a mesma. Os resultados obtidos foram avaliados empregando-se teste t-Student e descritos em um gráfico de pontos acompanhado de regressão linear. Verificou-se aumento dos valores do TLS até a sexta semana após o tratamento, seguindo-se diminuição do TLS, mas nos dois momentos não ocorreu diferença estatisticamente significativa dos valores iniciais. Quadro semelhante foi observado com a avaliação dos parâmetros clínicos. Entretanto, o TRFL aumentou ao término das avaliações, bem como a impregnação por lissamina verde foi menor do que a verificada previamente ao tratamento. A inflamação conjuntival foi classificada como inferior, estável e superior aos valores iniciais em 30%, 40% e 30% dos olhos, respectivamente. A média no número de células caliciformes aumentou de 78,3 células/campo para 161 células/campo, verificando-se melhora em 50% dos olhos avaliados, estabilidade em 20% e piora em 30%. Diante das condições experimentais descritas, conclui-se que o uso da fração de células mononucleares da medula óssea aumentou a quantidade de células caliciformes conjuntivais, além de melhorar parâmetros de avaliação da superfície ocular. Desta forma tornando-se uma opção promissora para o tratamento da CCS canina, conferindo melhora à superfície ocular dos pacientes acometidos pela ceratoconjuntivite seca. O efeito de plasticidade celular e a ação anti-inflamatória da FCM sobre a glândula da terceira pálpebra merecem maiores investigações. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The keratoconjunctivitis sicca in dogs is a common condition in clinical practice. While there are satisfactory results in the use of immunomodulators, some patients do not respond positively to these drugs, and cell therapy may become an alternative to conventional treatment. This study aimed to evaluate the effects of the application of autologous mononuclear cell fraction (MCF) bone marrow periglandular in the region of the third eyelid, on the ocular surface of dogs with CCS. We selected 15 patients (25 affected eyes) from the Department of Veterinary Ophthalmology FAV/UNB, nine males and six females, ten distinct breed. For inclusion in this study, subjects had values below the 10mm/min the Schirmer tear test (STT). They were submitted to TLS, the applanation tonometry, slit lamp examination with the slit lamp, the breakup time of the tear film (BUT), the test of lissamine green and fluorescein test weekly for 16 consecutive weeks. Took place in the same period, evaluation as to hyperemia and ocular discharge, the chemosis and corneal transparency. Bone marrow was collected by puncture of the sternum, MCF was isolated by centrifugation and the pellet containing the MCF was applied in the region of the third eyelid periglandular the initial day of the study. Held biopsy superior temporal bulbar conjunctiva for assessing the degree of inflammation and quantification of goblet cells on the day of application of MCF and 16 weeks thereafter. The results were analyzed employing Student's t test and described in a scatterplot accompanied by linear regression. An increase in the values of the TLS until six weeks after treatment, followed by reduction of the TLS, but the two moments not statistically significant difference from baseline. A similar picture was observed with assessment of clinical parameters. However, BUT increased at the end of the evaluations, as well as lissamine green impregnation was lower than that determined prior to treatment. The conjunctival inflammation was ranked lower, stable and superior to the initial values by 30%, 40% and 30% of eyes, respectively. The mean number of goblet cells increased from 78.3 cells / field to 161 cells / field, verifying an improvement in 50% of eyes evaluated, stability in 20% and worsened in 30%. Given the experimental conditions described, it is concluded that the use of the fraction of bone marrow mononuclear cells increased the amount of conjunctival goblet cells, and improve evaluation parameters of the ocular surface. Thus making it a promising option for the treatment of canine CCS, giving improves the ocular surface of patients suffering from keratoconjunctivitis sicca. The effect of cellular plasticity and anti-inflammatory action of MCF on the gland of the third eyelid deserve further investigation.

Orientador: Carlos Eduardo Leite Arieta / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-15T13:36:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paes_JoaquimPereira_D.pdf: 1675369 bytes, checksum: a671cc24bdc34134b1f16e5bd46b7b77 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Objetivo: Determinar se o transplante de membrana amniótica é um procedimento mais eficaz que a rotação de retalho conjuntival, no tratamento cirúrgico de pterígio primário, quanto à taxa de recidiva. Material e métodos: Foi realizado um estudo prospectivo, do tipo ensaio clínico randomizado, de 228 pacientes (228 olhos) com pterígio primário grau II. Os pacientes foram divididos em dois grupos: grupo teste (126 olhos) - exérese de pterígio seguida de transplante de membrana amniótica; grupo controle(102 olhos)- exérese de pterígio seguida de rotação de retalho conjuntival. Os procedimentos foram realizados no período de janeiro de 2001 a outubro de 2005 no bloco cirúrgico do Hospital Escola da Universidade Federal do Triângulo Mineiro. Os pacientes tiveram um seguimento de 1 ano e o critério de recidiva foi a invasão corneana por tecido fibrovascular. A análise estatística foi feita pelo teste de igualdade de duas proporções. Resultados: No grupo teste foram observados 8 quadros de recidiva (6,3%) sendo 6 em pacientes do sexo masculino e 2 no sexo feminino. A média de idade dos pacientes foi de 39,6 anos, sendo que a recidiva ocorreu em média 3.3 meses pós-operatório. No grupo controle foram observadas 17 recidivas (16,7%) sendo 11 no sexo masculino e 6 no feminino.A média de idade dos pacientes foi de 35,7 anos sendo que a recidiva ocorreu em média 3,1 meses pós operatório . O z calculado foi de 2,48 evidenciando significância estatística e validando a hipótese proposta. Conclusão: O transplante de membrana amniótica é um procedimento efetivo e seguro no tratamento cirúrgico do pterígio primário apresentando baixa taxa de recidiva / Abstract: Objective: Determine the best procedure for the treatment of the surgical primary pterygium according to the recurrence rate. Design: Randomized clinical trials. Material and Methods: 228 patients (228 eyes) carrying primary pterygium level II diagnosed with biomicroscopy, having the surgical treatment from January 2001 to October 2005 in the surgical room of the School Hospital of UFTM. Patients were divided into two groups:Test group (126 eyes): exeresis of the pterygium followed by a transplant of amnionic membrana;Control group (102 eyes): exeresis of the pterygium followed by rotation of the conjunctival flap. Criterion of recidivation considered was the corneal invasion by the fibrovascular tissue in a period of a year after the surgery. Statistics analysis was done using the significance test for equality of two proportions. Results: In the test group we observed 8 tables of recidivation, being 6 in male patients and 2 in female ones. Average age of these patients was 39.6 (ranging from 22 to 53). Recidivation occurred on an average of 3.3 months (ranging from the 2nd to the 7th month). In the control group we observed 17 recidivations of the pterygium being 11 in the male sex and 06 in the female one. The average age of these patients was 35.7 years old (ranging from 20 to 50 years). Recidivation occurred on an average of 3.1 months (ranging from the 1st to the 8th month). The calculated z (2.48) was higher than the table z. Conclusions: Amniotic membrane transplantation is an effective and safe procedure for primary pterygium surgery with a relatively low recurrence rate. However, we couldn't affirm that the amniotic membrane transplant has to be considered the first choice in the primary pterygium surgery treatment / Doutorado / Oftalmologia / Doutor em Ciências Médicas

A microbiota normal exerce função protetora na superfície ocular, competindo por nutrientes e secretando substâncias com propriedades bactericidas, o que dificulta a invasão de patógenos. Animais diabéticos apresentam diferentes alterações ceratoconjuntivais, tais como maior concentração de glicose no filme lacrimal, menor quantidade e qualidade da lágrima e diminuição da sensibilidade corneal, diferenças clinicamente relevantes que podem alterar essa microbiota. Traumas oculares também podem apresentar tal alteração por promoverem a quebra da barreira de proteção da superfície ocular. A correta identificação do agente etiológico, além de proporcionar um tratamento eficiente em alterações oculares, direciona a antibioticoterapia profilática tópica nos casos cirúrgicos e evita o uso abusivo de antibióticos, o que pode levar a destruição da microbiota normal da superfície ocular, facilitando assim o crescimento de bactérias e fungos patogênicos. Com o intuito de minimizar as complicações pós-operatórias das cirurgias intra-oculares, como as facectomias, freqüentemente realizadas nos cães diabéticos por serem predispostos a apresentarem catarata, este estudo visou avaliar a prevalência dos principais microrganismos da microbiota conjuntival de cães diabéticos. Foram avaliadas as microbiotas conjuntivais de 29 cães diabéticos, atendidos no Hospital Veterinário da Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade de São Paulo, totalizando 58 olhos. Estes, não estavam utilizando qualquer medicação tópica e não apresentavam alterações oculares ou doença sistêmica infecciosa que pudesse interferir nos resultados. As amostras foram colhidas do saco conjuntival com auxilio de zaragatoas, cuidando para que não houvesse contaminação pelo contato com pálpebras e cílios. As amostras foram inoculadas em meio enriquecedor Brain Heart Infusion (BHI) e caldo Sabouraud-dextrose e semeados em ágar sangue, MacConkey e Sabouraud-dextrose com cloranfenicol. Os microrganismos foram identificados por suas características morfológicas na bacterioscopia, pela coloração de gram e pelas características macro e microscópicas das colônias, além de testes bioquímicos. Houve maior prevalência de Staphylococcus (32,79%), principalmente coagulase negativos, que são os mais freqüentemente isolados nas infecções oculares: S. klosii, S. simulans, S. capitis, S. pasteuri, S. saprophyticus, S. haemolyticus. Também foram isolados Bacillus sp. (11,48%), S. intermedius (6,56%), Streptococcus sp (1,64%) e alguns fungos, como Cladosporium sp e Candida parapsilosis. Não houve crescimento de microrganismos gram negativos, anaeróbios estritos ou facultativos. Sugere-se que os resultados encontrados se relacionam diretamente às alterações ceratoconjuntivais dos animais analisados, local do exame, clima e diferentes raças. Sabendo-se que cães diabéticos são prováveis candidatos à facectomia, intervenção que promove quebra da barreira de proteção da superfície ocular e que existem microrganismos potencialmente patogênicos na conjuntiva destes animais, sugere-se análise da microbiota ocular antes da intervenção cirúrgica, para uso profilático de agentes antimicrobianos. / Normal ocular flora avoids infection depriving investor microorganisms of nutrients and by the secretion of bactericidal substances. Diabetic animals usually develop keratoconjunctival abnormalities, such as the higher concentration of glucose in the tear film; qualitative and quantitative tear deficiency and a decrease of the cornea sensitivity, what probably changes their conjunctival flora either. The same alteration may happen after ocular traumas, when the ocular barrier of protection is discontinued. The identification of agent etiology allows the efficient treatment of ocular infections, the prophylactic prescription of antibiotics before surgery and avoids destruction of normal ocular flora or multiplication of pathogens. Aiming to minimize complications on intraocular surgeries, such as facectomies, frequently realized in DM dogs for its predisposition to develop cataract, this study evaluated the prevalence of microorganisms in their conjunctival flora. The conjunctival flora of 29 diabetic dogs (58 eyes), attended at the Ophthalmology Service, of the Veterinary Hospital of the Veterinary College University of São Paulo were evaluated. These dogs werent using any kind of eyedrops, didnt present any ocular or systemic disease other than diabetes mellitus, what could change the results. Samples were taken with sterile swabs from the conjunctival sac and inoculated on Brain Heart Infusion (BHI) and Sabouraud-dextrose broth, then sown in blood agar, MacConkey and Sabouraud-dextrose-cloranfenicol. Contamination was avoided during procedure not touching the swab on eyelid or eyelashes. Microorganisms were identified by their morphological aspects at bacterioscopy, gram staining, macro and microscopy characteristics of the colonies and by biochemical tests. Staphylococcus presented the higher prevalence (32,79%), mostly the coagulase negative ones (S. klosii, S. simulans, S. capitis, S. pasteuri, S. saprophyticus, S. haemolyticus), which are frequently isolated from ocular infections. Either isolated, were Bacillus sp. (11,48%), S. intermedius (6,56%), Streptococcus sp (1,64%) and some fungus, such as Cladosporium sp and Candida parapsilosis. Gram negative bacteria, anaerobic stricts or facultative were not identified during the study. We suppose that these results are strictly correlated to keratoconjunctival alterations in DM dogs, procedure, weather and breed. We conclude that, as DM dogs presents potential pathogens on its conjunctiva and are probable candidates to cataract surgery, which discontinues the ocular barrier of protection, we suggest the identification of the agent etiology before surgery and the proper use of antibiotic before and after any intraocular intervention.

Orientadores : Berenice Cunha Wilke, Jaime Amaya-Farfan / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-18T18:56:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_CeciliaMariaResendeGoncalvesde_D.pdf: 4180157 bytes, checksum: a4b5262e3d1ed4b20061921b51de7dcc (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: A prevalência de hipovitaminose A foi determinada por citologia de impressão da conjuntiva ocular (CICO) em 288 crianças com idade entre 3 e 10 anos, residentes em favelas do munícipio de Campinas, SP, no período de abril de 1991 a fevereiro de 1992. O nível sérico de retino I foi também determinado em 131 crianças por cromatografia líquida de alta eficiência. A prevalência de hipovitaminose pela CICO foi 2,0%, enquanto os níveis de retinol sérico mostraram uma prevalência de 17,6%, com níveis entre 0,35 a 0,70 µmol/L. Crianças com CICO anormal apresentaram níveis séricos de retinol significativamente mais baixos (0,65+-0,14µmol/L) do que aquelas com CICO normal (0,98+-0,03µmol/L; p=0,013). Análise de regressão demonstrou correlação entre os dois método's. Diferenças significativas foram encontradas usando-se as médias dos níveis de retinol sérico contra diferentes pontos de corte aplicados à CICO (p<0,05). A sensibilidade e especificidade variou com o critério de classificação da CICO, passando de 21,1 para 47,4%, e de 98,0 para 87,2%, respectivamente, mudando-se o ponto de corte da CICO de cinco para dez células caliciformes. Informações complementares sobre a caracterização da amostra foram obtidas para 341 crianças. A renda familiar per capita mostrou-se surpreendentemente alta, apesar de necessidades primárias como saneamento e moradia serem insatisfatórias. O consumo alimentar só foi adequado para proteínas (101,0 a 166,0%), sendo os menores valores de adequação aqueles encontrados para energia (82,0 a 94,0%) e, principalmente para vitamina A (53,0 a 78,0%) e ferro (37,0 a 49,0%). A presença de anemia foi 23,2%; muito poucas crianças tiveram hipoalbuminemia e nenhuma apresentou hipoproteinemia. Dados antropométricos foram avaliados pela distribuição do escore z, comparando-se com a população padrão-referência do National Center for Health Statistics. Para toda a amostra, os indicadores altura/idade e peso/altura identificaram que 33,2% e 15,3% das crianças, respectivamente encontravam-se abaixo de -1 desvio padrão / Abstract: The prevalence of vitamin A deficiency was estimated by conjunctival impression cytology (CIC) in 288 children in the age group of 3 to 10 years, residing in slum areas of Campinas, SP, between april 1991 and february 1992. In 131 children, the level of serum retinol was also determined by high-performance liquid chromatography. The prevalence of vitamin A deficiency was 2.0%, by CIC and 17.6% by the method serum retinol with levels ranging from 0.35 to 0.70 µmol/L. Children with abnormal cytology had significanttly lower serum retinollevels (0.65 +- 0,14 µmol/L) than those with normal eyes (0.98 +- 0.03 µmol/L; p=0,013). Results by two method were statistically correlated. There was significant difference between the mean serum retinal levels and the different classes of CIC, according to the cutting point (p<0.05). The sensitivity and specificity of the CIC varied with the classification criteria, the former increasing from 21.1 to 47.4% against a drop of the latter from 98.0 to 87.2% by changing the cutting point from five to ten goblet cells. Complementary information about the sample was obtained for 341 children. The per-capita family income was surprisingly high, although primary needs such as sanitation and housing were unsatisfactory. The dietary intake of children was adequate only for protein (101.0-166.0%). Major inadequacies were found for iron (37.0-49.0%), vitamin A (53.0-78.0%) and energy (82.0-94.0%). Anemia was present in 23,2% of the children but very few had serum hipoalbuminemia and none hipoproteinemia. The anthropometric data were assessed by the z-score distribution of the height-for-age and weight-for-height cri teria in relation to growth charts of the National Center for Health Statistics for a standard reference population. In the overall sample, 33.2% of the children were found below -1 z-score of height-for-age and 15.3% under1 z-score of weight for height / Doutorado / Doutor em Ciência da Nutrição

O objetivo deste estudo foi comparar alterações histológicas induzidas por análogos de prostaglandinas e maleato de timolol na conjuntiva de coelhos. Cinqüenta coelhas da raça Nova Zelândia com idade e peso semelhantes foram divididos em cinco grupos de dez animais. Os olhos esquerdos foram tratados com uma gota diária de bimatoprosta 0,03%, travoprosta 0,004%, latanoprosta 0,005%, maleato de timolol 0,5% ou lágrimas artificiais contendo cloreto de benzalcônio (CBA) durante 30 dias. Os olhos contra-laterais serviram como controles. Realizaram-se biópsias na conjuntiva limbar superior com dimensões de 5 mm x 5 mm no oitavo e trigésimo dias em cinco coelhos de cada grupo. A conjuntiva foi imediatamente fixada com formaldeído a 10% por 24 horas, seguido de coloração por Hematoxilina-Eosina (HE) e Ácido Periódico de Shiff (PAS) e avaliação qualitativa por microscopia óptica. A avaliação histo-morfométrica quantitativa foi realizada usando o programa Image Pro-Plus 4.5. Os parâmetros avaliados foram: infiltrado inflamatório, espessura epitelial, número de células caliciformes, diâmetro e número de vasos sanguíneos. Observou-se leve infiltrado inflamatório focal no tecido conectivo subepitelial nos olhos controle e do grupo CBA, que consistia de aglomerados de linfócitos e raros neutrófilos. Todos os demais grupos exibiram no oitavo e trigésimo dias de tratamento infiltrado inflamatório moderado, composto por linfócitos e neutrófilos, que foi mais denso no grupo tratado com maleato de timolol do que nos grupos dos análogos de prostaglandinas. No trigésimo dia, o grupo que recebeu timolol mostrou aumento da densidade subepitelial de colágeno e aumento estatisticamente significante da espessura epitelial (P=0,004), que não foram observados nos demais grupos. Observou-se um aumento estatisticamente significante do número de vasos no grupo tratado com timolol (P=0,001). O diâmetro vascular no grupo que recebeu travoprosta apresentou aumento estatisticamente significante no oitavo dia de tratamento (P=0,008) e redução no 30º dia (P=0,035). A densidade de células caliciformes aumentou significativamente no grupo que recebeu travoprosta no oitavo dia (P=0,001) e no 30º dia nos grupos tratados com bimatoprosta (P=0,002) e latanoprosta (P=0,009). Conclui-se que, na conjuntiva de coelhos, o número de células caliciformes aumenta com o uso de análogos das prostaglandinas. O estudo sugere que essas drogas, entretanto, induzem menos alterações que o maleato de timolol na conjuntiva de coelhos / The purpose of this study was to compare histological changes induced by prostaglandin analogues and timolol maleate in the rabbit conjunctiva. Fifty New Zealand female rabbits with similar age and weight were divided in five groups of 10 animals. The left eyes were treated with one daily drop of bimatoprost 0,03%, travoprost 0,004%, latanoprost 0,005%, timolol maleate 0,5% or artificial tears containing benzalkonium chloride (BAC) for 30 days. The fellow eyes served as controls. Limbal superior conjunctival biopsies of 5 mm x 5 mm were performed at the 8th and 30th day in five rabbits of each group each time. The conjunctiva was immediately fixed with 10% formaldehyde for 24 hours, followed by Hematoxiline-Eosine (HE) and Periodic Acid Shiff (PAS) staining and optical qualitative microscopic evaluation. Morphohistometric quantitative analyses were conducted using the Image Pro-Plus 4.5 software. The evaluated parameters were: inflammatory infiltrate, epithelial thickness, number of goblet cells, diameter and number of blood vessels. A low level infiltration, consisting of localized clusters of lymphocytes and rare neutrophils, was observed in the subepithelial connective tissue of the control eyes and in the BAC group. At the 8th and 30th day post treatment, all other groups exhibited a diffuse inflammatory infiltrate, composed by lymphocytes and neutrophils, which was denser in the timolol group than in the prostaglandin analogue groups. At the 30th day, the timolol group also showed an increased subepithelial collagen density and a significant increase in epithelial thickness (P=0.004), which was not present in the other groups. A significant increase (P =0.001) in the number of blood vessels was observed in the group treated with timolol. An initial increase in the vascular diameter was observed at the 8th day in the travoprost group (P=0,008) although a significant reduction was observed at the 30th day (P =0,035). The goblet cell density was significantly increased at the 8th day in the group treated with travoprost (P =0.001) and at the 30th day in those treated with bimatoprost (P =0.002) and latanoprost (P =0.009). We conclude that an increase in the number of goblet cell was initially observed with the use of all prostaglandin analogues. This study suggests that these drugs, however, induce fewer changes than timolol maleate in the rabbit conjunctiva

A neoplasia escamosa da superfície ocular constitui é uma das lesões mais frequentes que envolve a conjuntiva ou a córnea e tem como principais fatores de risco a exposição solar (radiação ultravioleta), a infecção pelo vírus do papiloma humano (HPV) e os estados de imunodeficiência, especialmente a infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV). Em suas formas mais avançadas, a neoplasia pode cursar com infiltração do globo ocular, da órbita e, mais raramente, com ocorrência de metástases para linfonodos ou a distância. O presente estudo teve como objetivo investigar os dados clínicos, histopatológicos, a presença de HPV e a expressão das proteínas p16 e p53 em 45 casos de neoplasia escamosa da superfície ocular diagnosticados no Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo, no período de 2005-2015. Avaliação histopatológica das lesões, estudo imuno-histoquímico para a detecção das proteínas e hibridização in situ cromogênica (CISH) para a detecção do DNA de HPV de alto e baixo grau foram realizados em todas as amostras. As lesões foram mais frequentes em homens de cor branca, com idade superior a 40 anos. A avaliação histopatológica revelou 31 casos (69%) de carcinoma invasivo e 14 casos (31%) de carcinoma in situ. Em 6 casos (13%) foi detectado DNA de HPV de alto grau por CISH. A frequência de expressão de proteínas p53 e p16 foi alta nas lesões, 89% e 53%, respectivamente. Em nosso estudo, a neoplasia escamosa da superfície ocular predomina em homens de cor branca, com idade acima dos 40 anos, com presença de HPV de alto grau em 13% dos casos. A expressão de p16 não apresentou um valor preditivo positivo alto quanto a possibilidade de associação com o vírus. / Ocular surface squamous neoplasia (OSSN) is one the most frequent lesions involving the conjunctiva or cornea and its main risk factors are solar exposure (ultraviolet radiation), human papilloma virus (HPV) infection and immunodeficiency states, especially human immunodeficiency virus (HIV) infection. In advanced cases one can observe eyeball or orbital infiltration and, rarely, lymph node or distant metastases. The present study aimed to investigate the clinical and histopathological data, as well as the presence of HPV and the expression of proteins p16 e p53 in 45 cases of OSSN diagnosed at the Clinics Hospital of Ribeirão Preto Medical School, University of São Paulo, from 2005 through 2015. Histopathological examination, immunohistochemical study for proteins p16 and p53, and chromogenic in situ hybridization (CISH) for low and high grade HPV were performed in all samples. Lesions were more frequent in white males, above 40 years old. Histopathological examination revealed 31 cases (69%) of invasive carcinoma and 14 cases (31%) of carcinoma in situ. In 6 cases (13%) high grade HPV was detected by CISH. The expressions of p53 and p16 were high, 89% and 53%, respectively. In our study, increased incidence of OSSN was observed in white males, above 40 years old, with high grade HPV in 13% of the cases. The expression of p16 did not show a high positive predictive value for HPV positivity in OSSN.