A cultura do tabaco acumula perdas consideráveis em decorrência do ataque de nematoides das galhas e a constante busca de alternativas para controle desta praga constitui-se numa preocupação mundial. Com o intuito de avaliar a eficiência de dois agentes de controle biológico formulados à base dePochoniachlamydosporia (Pc-10) e Purpureocillium lilacinum (Pae 10)no manejo de Meloidogyneincognitae M.javanicaem mudas de tabaco, foram realizados os seguintesexperimentos: (1)in vitro, no qualse testou a compatibilidade comos fungicidasà base de óxido cuproso, de metalaxil M + mancozebe ou de iprodiona, e a compatibilidade entre eles; (2) em casa de vegetação, para analisaro efeito daaplicação deproduto formulado com P. chlamydosporia (Pc-10)e P. lilacinum (Pae 10)aos 5, 10, 15 e 20 dias antesdo transplantio, e(3) em campopara medir a eficiência de uma ou duas aplicações de produto a base deP. chlamydosporia. Os resultados obtidos in vitro indicaram que os fungos P. chlamydosporia eP. lilacinumnãointeragem entre si, e que os fungicidas testados não afetaramo desenvolvimento destes. Os experimentos em casa de vegetação indicaram quea aplicação do produto a base de P. lilacinumreduziu 56 e 59% na média da massa e número de ovos aos 5 e 15 dias, respectivamente, após o transplantio. Ao passo que, P. chlamydosporia apresentou redução na média no número de ovos e na massa de ovos de M. javanica em todas as épocas testadas.Já em campo, o produto formulado com P. chlamydosporia, em uma aplicação, em solo arenoso, reduziu o número de ovos e índice de galhas, porém, não aumentou a produtividade e qualidade do tabaco nas duas áreas avaliadas. Conclui-se, portanto, que o nematicida a base de P. chlamydosporia, é um produto eficiente na redução de M. incogita and M. javanica. / Nematode attack results into considerable cumulative losses in the tobacco crop, so the constant search for alternatives to manage this pest constitutes a global concern. In order to evaluate the efficiency of two biological control agents formulated based on Pochonia chlamydosporia (Pc-10) and Purpureocillium lilacinum (Pae 10) in management of Meloidogyneincognita and M. javanica in the tobacco crop, the following experiments were performed (1) in vitro, in order to evaluate compatibility with cuprous oxide, metalaxyl M + mancozeb or iprodione fungicides and also compatibility among them; (2) in greenhouse, to analyze the effect of P. chlamydosporia and P. lilacinum at 5, 10, 15 and 20 days before transplanting, and (3) in the field to measure the effectiveness of one and two applications of P. chlamydosporia. Results in vitro showed that there is no interaction between P. chlamydosporia and P. lilacinum, and their developments were not affected by the fungicides tested. The experiments performed in the greenhouse showed a reduction of 56 and 59%in the mass and number of eggs at 5 and 15 days after application, respectively,when the nematicide formulated with P. lilacinumwas used. On the other side, the product formulated with P. chlamydosporia reduced the number and mass of eggs ofM. javanica, regardless the time of application. Regarding the field results, the nematicide formulated with P. chlamydosporia, in sandy soil and one application, reduced the number and index of eggs, however, with no increase of tobacco yield for both areas. We conclude the nematicide formulated with P. chlamydosporia is an effective component of management ofM. incognita andM. javanica

A Musca domestica é a principal praga em aviários comerciais e o uso de inseticidas químicos vêm gerando resistência nessas moscas. Portanto, cada vez mais, estudos envolvendo a interação patógeno-hospedeiro visando o controle microbiano dessa mosca são importantes. Foram feitos isolamentos de fungos no aviário, estudos de esporulação e enzimas extracelulares, os processos de infecção, análise da resposta inflamatória e identificação dos hemócitos das larvas de Musca domestica, além de bioensaios e controle no aviário com Metarhizium anisopliae. Nenhum fungo entomopatogênico foi isolado no aviário. Os fungos Paecilomyces sp e Metarhizium anisopliae esporularam melhor no meio ágar batata maltose enquanto que Beauveria bassiana, o melhor resultado foi obtido com agar batata com 0,1% de glicose. Nos ensaios enzimáticos, protease foi a enzima mais produzida por Metarhizium anisopliae e Paecilomyces sp, e caseinases por Beauveria bassiana. A microscopia eletrônica de varredura mostrou as etapas de infecção do Metarhizium anisopliae em larvas de Musca domestica ao passo que a resposta imunológica durante as etapas de infecção demonstraram um pico de hemócitos em 48 horas após o início da infecção nessas larvas, os hemócitos identificados foram plasmatócitos, granulócitos, oenocitóides, prohemócitos além de fragmentos celulares como trombocitóides. Nos bioensaios o fungo mais virulento para larvas de 3º instar de Musca domestica foi o Metarhizium anisopliae CG 46 que após confirmação da patogenicidade foi produzido em arroz cozido e aplicado no aviário, seguido da aplicação do produto comercial Metarril WP. O Metarril não obteve um controle positivo das moscas, enquanto o fungo Metarhizium anisopliae CG 312 mostrou um discreto controle. / Musca domestica is the major pest in commercial poultry and the constant use of chemical pesticides has induced the development of resistance in these flies. Therefore, studies involving host-pathogen interaction aimed at microbial control of these flies are important. Isolations were made of fungi in the aviary studies of sporulation and extracellular enzymes, the process of infection, analysis of the inflammatory response and identification of hemocytes from larvae of Musca domestica as well as bioassays and control in the aviary with Metarhizium anisopliae. No entomopathogenic fungus was isolated in cages. The medium potato maltose agar resulted in higher sporulation for Paecilomyces sp Metarhizium anisopliae and while in Beauveria bassiana the best result for esporulation was obtained with potato agar with 0.1% glucose. In the enzyme activity assays the strains Metarhizium anisopliae and Paecilomyces sp, showed the best activity for protease and Beauveria bassiana for caseinase. The scanning electron microscopy showed the stages of infection by Metarhizium anisopliae on larvae of Musca domestica while the immune response during the early stages of infection showed a peak in hemocytes 48 hours after the onset of infection in these larvae. The fungus most virulent for larvae of 3rd instar Musca domestica in bioassays was Metarhizium anisopliae CG 46. After confirmation of the pathogenicity the fungus was multiplied in cooked rice and applied in the aviary, followed by application of the commercial product Metarril WP. The Metarril did not produced a positive control of the flies, while the fungus Metarhizium anisopliae CG 312 showed a slight control.

Espécies de Trichoderma são bastante estudadas atualmente para o controle biológico de fitopatógenos habitantes do solo e para a promoção de crescimento de plantas. Entretanto, cada vez mais se busca conhecer o comportamento deste antagonista em diferentes ambientes e os possíveis mecanismos envolvidos na sua interação com as plantas e os fitopatógenos. O objetivo deste trabalho foi avaliar o comportamento de isolados de Trichoderma spp. em ambiente alagado, cultivado com diferentes cultivares de arroz e os possíveis mecanismos que podem estar envolvidos nesta interação. Em todo o trabalho foram utilizados seis isolados de Trichoderma spp. e sete cultivares de arroz. Foram analisadas a sobrevivência em solo sob inundação, emergência, massa seca e altura de plantas de diferentes cultivares de arroz, além da produção de protease, AIA e sideróforos. Verificou-se que os isolados de Trichoderma spp. testados sobreviveram em solo sob inundação e ainda aumentaram a sua população nestas condições. Os isolados THAR e TSP2 proporcionaram efeito negativo na emergência das plantas das cultivares 416 e 418. Quanto à altura somente o isolado TSP2 foi superior a testemunha na cultivar 421. Entretanto, houve diferença significativa entre os isolados nas cultivares 418 e 420. Na variável peso seco houve diferença entre os isolados, mas nenhum foi superior a testemunha na cultivar 416. Na comparação das cultivares quando tratadas com o mesmo isolado, observou-se que na emergência de plantas, houve diferença na testemunha e no isolado TSP2. Para altura de plantas houve diferença das cultivares dentro dos tratamentos e também na testemunha. Para peso seco somente houve diferença na testemunha. Todos os isolados produziram sideróforos, com a mesma intensidade de cor. Quanto à produção de AIA, três dos cinco isolados testados produziram este composto, com destaque para o isolado TARV. Todos os isolados testados produziram proteases, porém houve diferença entre isolados no diâmetro da colônia. Conclui-se que Trichoderma spp. é capaz de sobreviver em solo sob inundação e também apresenta um comportamento diferenciado com cultivares de arroz. Além disto, os isolados testados produzem compostos que podem estar envolvidos nos mecanismos de controle de fitopatógenos e promoção de crescimento de plantas de arroz. / Trichoderma spp. are extensively studied for the biological control of soil borne plant pathogens and to promote growth of plants. However, it is necessary to keep studying the behavior of the antagonist in different environments and the possible mechanisms involved in its interaction with plants and plant pathogens. The purpose of this study was to evaluate the survival ability of isolates of Trichoderma spp. in an flooded environment with different rice varieties and the possible mechanisms that acting in this interaction. Six Trichoderma spp. isolates and seven rice cultivars were used in this experiments. The survival in paddy soil, plant emergency, dry weight and height of different rice cultivars of rice in addition to the production of protease, IIA and siderophores by the strains were evaluated. We observed that the isolates of Trichoderma spp. tested survived in paddy soil and also increased the population in these conditions. The isolates THAR and TSP2 caused negative effect on the emergence of the plants of cultivars 416 and 418. As for the height alone the isolate TSP2 was higher than control in cultivar 421. However, there was a significant difference between the isolates in the cultivars 418 and 420. In variable dry weight there was difference only between isolates, but none was higher than the control in cultivar 416. In the comparison of cultivars when treated with the same isolate, it was observed that in emergence of plants there was a difference in the control and in isolate TSP2. For height of plants there was a difference of cultivars within the treatments and also in control. For dry weight only difference was alone in control. All isolates produced siderophores, with the same intensity of color. As for the production of IIA, three of the five isolates tested produced this compound, with an emphasis on the isolate TARV. All isolates produced proteases, but there was difference between isolates in colony diameter. So it appears that Trichoderma spp. is able to survive in paddy soil and also presents a different behavior with cultivars of rice. In addition, it isolates the producing compounds that may be involved in the mechanisms of control of plant pathogens and promote growth of rice plants.

Actinomicetos endofíticos de tomateiro (Lycopersicon esculentum) têm recebido atenção especial como potencial produtores de novos compostos bioativos e agentes de bicontrole contra fitopatógenos. Portanto, este trabalho teve como objetivo isolar e caracterizar actinomicetos endofíticos de tomateiro que apresentem atividade antimicrobiana contra fungos e bactérias de importância clínica e/ou agronômica, selecionar o microrganismo com melhor potencial antimicrobiano, caracterizar este isolado, otimizar as condições de produção do(s) composto(s) e realizar testes in vivo com o potencial agente de biocontrole. Actinomicetos foram isolados das raízes desinfestadas de tomateiro e foram submetidos ao teste de antibiose pelo método de dupla camada contra 39 microrganismos de importância clínica e 16 fitopatogênicos. Todos os actinomicetos foram caracterizados em nível de gênero através de características morfológicas e moleculares. A otimização da produção foi realizada empregando AC, TSB, ISP2, Sahin, Czapeck-Dox, Bennett’s e LNMS como meios de cultura e nas temperaturas de 30, 35 e 40°C. A atividade antimicrobiana foi avaliada pela técnica de difusão em ágar. O teste in vivo foi realizado em casa de vegetação e foi avaliada a capacidade do actinomiceto proteger o tomateiro contra a murcha bacteriana ocasionada por Ralstonia solanacearum. Foram isolados 70 actinomicetos endofíticos, destes 55 foram do gênero Streptomyces sp., nove Microbispora sp., três Micromonospora sp. e três Nocardia sp. Dos 70 isolados, 88,6% apresentaram atividade antimicrobiana contra pelo menos um fitopatógeno e 87,1% inibiram os microrganismos clinicamente importantes. No processo de otimização da produção os isolados selecionados cresceram em todas as condições analisadas, entretanto somente apresentaram atividade em determinadas condições de cultivo. O isolado selecionado para o teste in vivo, R18(6), inibiu o desenvolvimento da murcha bacteriana em condições de casa de vegetação. Os actinomicetos isolados apresentaram potencial antimicrobiano. / Endophytic actinomycetes from tomato plant (Lycopersicon esculentum) receiving special attention because of its potential have been as a source for new bioactive compounds and as biocontroler agent against phytopathogens. Therefore, the aim of this study was to isolate and characterize endophytic actinomycetes from tomato with activity against bacteria and fungi of clinica and agriculture importance; to select the isolate with the best antimicrobial activity, to characterize this isolate, to optimize the growth and production, to carry out a test in vivo with selected biocontrol agent. Actinomycetes were isolated from tomato roots and were submitted of antibiose test using the double-layer agar method against 39 clinical important microorganisms and 16 phytopathogens. All actinomycetes were characterized in level of genus using morphogical characteristics and molecular analysis. The optimization of growth conditions and production were tested in SC, TSB, ISP2, Sahin, Czapeck-Dox, LNMS media culture and 30, 35 and 40°C temperature conditions. The antimicrobial activity was evaluated using the agarwell diffusion method. The test in vivo was carried out in greenhouse and the capacity of actinomycete to protect of tomato against wilt bacteria caused by Ralstonia solanacearum was evaluated. Seventy endophytic actinomycetes were isolated from the tomato roots. Out of these 55 were identified as Streptomyces sp, 9 as Microbispora sp., 3 as Micromonospora sp. and 3 as Nocardia sp.. Out of the 70 isolates 88.6% of the isolates inhibied at least on the tested phytopathogens and 87.1% inhibited the microorganisms with clinical importance. In the production optimization the select isolates grew in all conditions tested, however the production of the compounds was observed only in specific conditions of growth. The isolate R18(6), was select for the in vivo test, and in the greenhouse experiment the isolate inhibited the development of wilt bacteria in tomato plants under greenhouse conditions. The actinomycetes isolated in the work showed an excellent antimicrobial potential.

Nematóides entomopatogênicos (NEPS) e bactérias simbiontes representam uma das estratégias não-químicas mais bem sucedidas para o controle de insetos. Os juvenis infectivos dos nematóides Heterorhabditis sp. e Steinernema sp. buscam o hospedeiro no solo, o penetram através de aberturas naturais e rapidamente matam o inseto pela liberação, na hemocele, de bactérias entomopatogênicas dos gêneros Photorhabdus sp. e Xenorhabdus sp., respectivamente. A lagarta militar, Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae) é uma das principais pragas da cultura do milho (Zea mays) no Brasil e os danos provocados pelo inseto reduzem o rendimento da cultura em até 39% e perdas de 500 milhões de dólares anuais. Isolados nativos de nematóides entomopatogênicos ativos contra S. frugiperda representam uma alternativa promissora ao uso intensivo de inseticidas químicos para o controle da lagarta-militar nas plantações de milho. Este estudo caracterizou a patogenicidade de oito isolados NEPs de incidência regional (denominados NEPETs) para o controle da praga em estádios associados ao solo. Os testes foram realizados com larvas de último ínstar (in vitro) e na fase de pré-pupa (in vitro e no solo). Os dados indicam que os percentuais de mortalidade mais elevados, tanto para lagartas como para pré-pupas, foram produzidos por isolados da família Heterorhabditidae. Estes isolados também foram os que produziram maior número de juvenis infectivos/larva mostrando a capacidade de multiplicação de NEPETs neste hospedeiro. As bactérias simbióticas associada aos nematóides entomopatogênicos foram isoladas, caracterizadas por testes bioquímicos e classificadas com base no seqüenciamento do 16S rDNA. Os isolados bacterianos, identificados como Photorhabdus e Xenorhabdus, quando injetados na hemocele de S. frugiperda produziram altos níveis de letalidade particularmente aqueles obtidos a partir dos nematóides da família Heterorhabditidae. Também avaliou-se a produção de urease de quatro bactérias entomopatogênicas, duas Photorhabdus e duas Xenorhabdus, in vitro e ao longo da infecção promovida pela injeção de bactérias. O padrão de produção de urease in vitro seguiu a curva de crescimento bacteriano e houve acúmulo da enzima na fase estacionária. Os dados sugerem uma correlação positiva entre a produção de urease pela bactéria e os efeitos entomopatogênicos sobre as lagartas. Há correlação direta entre a atividade específica alcançada por ureases ácidas na fase estacionária e mortalidade induzida por bactérias injetadas em lagartas de S. frugiperda. / Entomopathogenic nematodes (EPNs) and symbiotic bacteria represent one of the best non-chemical strategies for insect control. Infective juveniles of Heterorhabditis sp. and Steinernema sp. nematodes actively seek the host in the soil, penetrating through insect’s natural openings to reach the hemocoel where symbiotic bacteria Photorhabdus sp. and Xenorhabdus sp., respectively, are released and rapidly kill the insect host. The fall armyworm Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae) is one of the major insect pests in corn (Zea mays) crops in Brazil, with infestations resulting in reduction up to 39% yield and losses amounting US$ 500 millions annually. Native strains of entomopathogenic nematodes active against S. frugiperda represent a promising alternative to the intensive use of chemical insecticides to control fall armyworm population in corn plantations. This study characterized the pathogenicity of eight EPNs isolates of regional incidence (denominated NEPETs) in stages where pest is associated to the soil. Tests were conducted with last instar larvae (in vitro) and in prepupae stage (in vitro and in soil). Data indicate that the highest mortality percentages, either for worms or prepupae, were produced by isolates of the Heterorhabditidae family. These isolates were also the ones that produced higher amounts of IJs/larvae showing the multiplication capacity of NEPETs on the host insect. Symbiotic bacteria associated to the entomopathogenic nematodes were successfully isolated and classified taxonomically both by phenotypic-biochemical criteria and sequencing of 16S rDNA. Isolated bacteria, identified as Photorhabdus and Xenorhabdus, injected into S. frugiperda hemocoel produced high levels of lethality particularly those from Heterorhabditidae family. We also studied the urease production of four entomopathogenic bacteria, two Photorhabdus and two Xenorhabdus, both in vitro and during the course of infection caused by injection of the bacteria. The pattern of urease production in vitro followed the bacteria growth curve accumulating in high levels towards the stationary phase. The data suggest a positive correlation between urease production by the bacteria and their entomopathogenic effect. There is direct correlation between the specific activity reached by acidic ureases at the stationary phase and mortality induced by injecting bacteria into S. frugiperda larvae.

A biologia de Cirrospilus neotropicus, tendo como hospedeiro larvas de terceiro instar de Phyllocnistis citrella criadas em folhas de limoeiro ‘Cravo’ (Citrus limonia Osb.), foi avaliada em estufa climatizada (25 ± 1ºC; fotofase de 12 horas), registrando-se a duração das fases imaturas, viabilidade, longevidade e as atividades de parasitismo e predação. Avaliaram-se dois grupos de fêmeas de C. neotropicus, um provindo de câmaras pupais de P. citrella coletadas em pomares de citros da Estação Experimental Agronômica da UFRGS e outro de uma criação de laboratório. As fêmeas C. neotropicus foram mantidas em caixas gerbox, recebendo, a cada 48 horas, 12 larvas de P. citrella (substrato de oviposição), mel e pólen. O ciclo médio de ovo-adulto, respectivamente, para os indivíduos gerados por fêmeas de campo e laboratório foi de 11,76 e 11,56 dias para fêmeas e 10,96 e 10,57 dias para machos. A menor viabilidade foi registrada para a fase larval na prole de ambos os grupos de fêmeas, 57,3% - campo e 57,4% - laboratório. A longevidade média de fêmeas acasaladas (21,78 dias) foi superior a das não acasaladas (9,1 dias) no grupo do campo, o mesmo verificou-se para machos de laboratório. Registrou-se, nos dois grupos, partenogênese arrenótoca, realização de picadas alimentícias (predação), parasitismo simples e superparasitismo. Constatou-se a morte por predação em 19,51% dos hospedeiros expostos às fêmeas do campo e em 25,11% dos expostos às de laboratório. Do total de hospedeiros mortos, 80,85% foi devido ao parasitismo no grupo exposto as fêmeas de campo e 79,9% naquele exposto as de laboratório. Registrou-se 6,92% de hospedeiros mortos com superparasitismo no grupo de fêmeas do campo e 3,51% naquele exposto as de laboratório. Os resultados indicam que C. neotropicus é um inimigo natural importante para o minador-doscitros. / The biology of Cirrospilus neotropicus reared on third instar Phyllocnistis citrella larvae having Citrus limonia as host plant was evaluated under controlled conditions (25 ± 1ºC; 12 hours photophase). The survival, immatures development, longevity, parasitism and predation activities of C. neotropicus was registered. Two groups of parasitoid females were evaluated: one, in which pupae were collected on field planted citrus orchards at EEA-UFRGS, and the other group came from laboratory rearing. These females, after mating, were maintained individually on Gerbox containers with honey and pollen as food source. At each 48 hours, 12 P. citrella larvae were changed. The average biological cycle of the female progenies from orchard and laboratory generation groups were 11.76 and 11.56 days, respectively. The males progenies had biological cycles of 10.96 and 10.57 days, as well. The shortest immature survival period, for both studied groups was the larval (57.3% - field orchard group and 57.4% - lab group). The mated females average longevity (21.78 days) was superior than the non mated ones (9.1 days) for the field orchard group. The same trend was also observed for males from the lab group. Arrhenotokous parthenogenesis, host feeding (predation), simple parasitism and superparasitism were registered in both evaluated groups. From the total exposed hosts, 19.51% were killed in the field orchard group and 25.11% in the lab one, showing the good predation potential behavior of the parasitoid. Average hosts with parasitism percentages were 80.85% for the field orchard group and 79.9% for the lab group. Superparasitism registered was 6.92% from the total hosts killed by the field orchard group and 3.512% killed by the lab group. The results are good indications that C. neotropicus is an important natural enemy to the citrus leaf miner pest.

A cultura do tabaco acumula perdas consideráveis em decorrência do ataque de nematoides das galhas e a constante busca de alternativas para controle desta praga constitui-se numa preocupação mundial. Com o intuito de avaliar a eficiência de dois agentes de controle biológico formulados à base dePochoniachlamydosporia (Pc-10) e Purpureocillium lilacinum (Pae 10)no manejo de Meloidogyneincognitae M.javanicaem mudas de tabaco, foram realizados os seguintesexperimentos: (1)in vitro, no qualse testou a compatibilidade comos fungicidasà base de óxido cuproso, de metalaxil M + mancozebe ou de iprodiona, e a compatibilidade entre eles; (2) em casa de vegetação, para analisaro efeito daaplicação deproduto formulado com P. chlamydosporia (Pc-10)e P. lilacinum (Pae 10)aos 5, 10, 15 e 20 dias antesdo transplantio, e(3) em campopara medir a eficiência de uma ou duas aplicações de produto a base deP. chlamydosporia. Os resultados obtidos in vitro indicaram que os fungos P. chlamydosporia eP. lilacinumnãointeragem entre si, e que os fungicidas testados não afetaramo desenvolvimento destes. Os experimentos em casa de vegetação indicaram quea aplicação do produto a base de P. lilacinumreduziu 56 e 59% na média da massa e número de ovos aos 5 e 15 dias, respectivamente, após o transplantio. Ao passo que, P. chlamydosporia apresentou redução na média no número de ovos e na massa de ovos de M. javanica em todas as épocas testadas.Já em campo, o produto formulado com P. chlamydosporia, em uma aplicação, em solo arenoso, reduziu o número de ovos e índice de galhas, porém, não aumentou a produtividade e qualidade do tabaco nas duas áreas avaliadas. Conclui-se, portanto, que o nematicida a base de P. chlamydosporia, é um produto eficiente na redução de M. incogita and M. javanica. / Nematode attack results into considerable cumulative losses in the tobacco crop, so the constant search for alternatives to manage this pest constitutes a global concern. In order to evaluate the efficiency of two biological control agents formulated based on Pochonia chlamydosporia (Pc-10) and Purpureocillium lilacinum (Pae 10) in management of Meloidogyneincognita and M. javanica in the tobacco crop, the following experiments were performed (1) in vitro, in order to evaluate compatibility with cuprous oxide, metalaxyl M + mancozeb or iprodione fungicides and also compatibility among them; (2) in greenhouse, to analyze the effect of P. chlamydosporia and P. lilacinum at 5, 10, 15 and 20 days before transplanting, and (3) in the field to measure the effectiveness of one and two applications of P. chlamydosporia. Results in vitro showed that there is no interaction between P. chlamydosporia and P. lilacinum, and their developments were not affected by the fungicides tested. The experiments performed in the greenhouse showed a reduction of 56 and 59%in the mass and number of eggs at 5 and 15 days after application, respectively,when the nematicide formulated with P. lilacinumwas used. On the other side, the product formulated with P. chlamydosporia reduced the number and mass of eggs ofM. javanica, regardless the time of application. Regarding the field results, the nematicide formulated with P. chlamydosporia, in sandy soil and one application, reduced the number and index of eggs, however, with no increase of tobacco yield for both areas. We conclude the nematicide formulated with P. chlamydosporia is an effective component of management ofM. incognita andM. javanica

Orientador: Maria Alice Garcia / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T11:47:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RodriguezFabregas_Claudia_D.pdf: 4536796 bytes, checksum: 3216120ae8cef2ffc52931b1b37302b7 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Sida rhombifolia (Malvaceae) é uma planta invasora amplamente distribuida no território brasileiro, tendo grande importância econômica devido à ocupação de pastagens, cultivos e áreas perturbadas. É uma espécie subarbustiva, que se reproduz exclusivamente por sementes. Uma das características principais das plantas invasoras que garantem o sucesso na colonização é a sua capacidade de sobrevivência por grandes períodos de tempo no solo, através de um banco de sementes persistente. Porém, são escassos os estudos de banco de sementes que analisem os diversos fatores de mortalidade das sementes no solo. Neste trabalho foi estudada, durante dois anos, a dinâmica do banco de sementes de S. rhombifolia na região de Campinas, SP. O estudo da fecundidade foi realizado através da avaliação dos parâmetros vegetativos e reprodutivos de uma população de 20 indivíduos mantida sob condições de laboratório, no Departamento de Zoologia da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). O estudo da dinâmica do banco de sementes foi desenvolvido no campo experimental do Centro de Pesquisas Biológicas e Aplicadas (CPQBA, UNICAMP). Em setembro de 1994, numa área de 1 ha, foram marcados 180 pontos distribuidos em 10 transectos paralelos. Em cada ponto foi desenhada uma cruz de 1 m de comprimento em cada eixo, em cujas pontas e centro foram enterrados, diretamente no solo, 50 carpídios em cada uma das seguintes profundidades: superfície (O), 2, 5, 10 e 20 cm. Aos 1, 3, 5, 7, 10, 14, 19 e 24 meses após a instalação do experimento no campo, foi sorteada uma cruz de cada transecto e exumadas as amostras de solo de todas as profundidades dessa cruz. A recuperação das sementes foi realizada por flotação e peneiração sob jato de água, avaliando-se os principais fatores de mortalidade como predação, patógenos, germinação mal sucedida e inviabilidade. Também mensalmente foi registrado no campo o número de sementes germinadas em cada ponto de amostragen. Os resultados obtidos são apresentados e analisados em dois capítulos. O primeiro capítulo trata da estimativa da entrada das sementes no banco. Foi encontrado que as plantas exibem um ciclo de vida bienal, com um período pré-reprodutivo de 60 dias. A partir desse momento. a produção de sementes continuou até a morte das plantas embora com maior produção ao iOf'1go do primeiro ano de vida. Em média,um indivíduo produziu 3813 sementes. das quais 11.74% eram inviáveis principalmente por má formação. As sementes apresentaram dormência inata. A produção de frutos esteve diretamente correlacionada com o número de ramos primários desenvolvidos pelas plantas. No segundo capítulo é analisada a importância relativa dos diversos fatores responsáveis pela perda de sementes, sob condições de campo. Pode-se afirmar que: 1) Antes da dispersão, predadores e pat6genos são responsáveis pela morte de 63.5% das sementes viáveis produzidas pelas plantas. 2) Foi observado um único pico de germinacão de S. rhombifolia que começou imediatamente após o início da época de chuvas (novembro de 1994) e finalizou em fevereiro de 1995. A germinação das sementes foi registrada unicamente na superfície e aos 2 e 5 ano de profundidade. 3) A proporção de sementes recuperadas diminuiu com o tempo, devido à remoção por predadores ou à redispersão por agentes físicos como o vento e a água. A taxa de recuperacão foi menor na superfície do que nas outras profundidades. 4) As causas principais de mortalidade das sementes no banco foram a predação e a infeção por patógenos. 5) Aos 2 e 5 em de profundidade. a predação pós-dispersão foi responsável pela morte de aproximadamente 45% das sementes viáveis, e aos 10 e 20 cm por 35%. Carabídeos, curculonídeos e larvas de coleópteros podem ser alguns dos agentes de predação. 6) Os fungos presentes nas sementes antes da dispersão provavelmente atacaram, por contágio sementes viáveis vizinhas quando enterradas no solo. A sua contribuição como fator de mortalidade foi muito próxima nas diferentes profundidades de enterramento, cerca de 19%. 7) Uma alta proporção das sementes enterradas sobreviveram ao menos dois anos após serem incorporadas ao banco. Entre 20-45% das sementes viáveis continuaram nessa condição. dependendo da profundidade de enterramento. Nenhuma das sementes morreu por senescência. Finalmente, integrando e sintetizando os dados dos dois capítulos anteriores, é apresentada uma tabela de vida diagramática de Sida rhombifolia, sob três profundidades de enterramento das sementes / Abstract: Sida rhombifolia (Malvaceae) is a weed of high economic importance in Brazil, mainly found in cultivars, grasslands and abandoned fields. It is a shrubby plant which reproduces exclusively by seeds. One of the main characteristics of invaders is their capacity of survival for long periods of time in soi! through a persistent seed bank. Unfortunately, seed bank studies that analyse the different mortality factors of seeds in soil are scarce. In this work, the seed dynamics of S. rhombifolia at the Campinas region, São Paulo State, was studied during two years. Fecundity was evaluated analysing the vegetative and reproductive parameters of a population of 20 individuais of S. rhombifolia under laboratory conditions, at the Department of Zoologia, University of Campinas (UNICAMP). The study of the seed bank dynamics was conducted in the experimental field "Centro de Pesquisas Biológicas e Aplicadas" (CPQBA, UNICAMP). In september 1994, in 1 ha. of the field, 180 points distributed along 10 parallel transects were marked. In each point, at equivalent distances of 0.5 m , 50 mericarps of S. rhombifolia were buried directly in the soil at each of the following depths: surface (O), 2, 5, 10 and 20 em. Afier 1, 3, 5, 7, 10, 14, 19, and 24 months of burial, a sample point of each transect was sorted randomly and soil samples were exhumed. Seed recovery was made by flotation and by soil seiving under water. Predation, pathogens, failed germination and inviability were evaluated as causes of mortality. The number of seeds germinated on the field was also registred. Results are presented and analysed in two chapters. The first chapter deals with the seed input into the bank. It was observed that the plants exhibit a biannual cycle of life, with a pre-reproductive period of 60 days. Afier that period, seed production continued until the death of the plants, although their production during the first year was significantly higher than in the second year. Each individual produced, on average, 3813 seeds during their life span, but 11.74% of them were inviable due to failed fertilization. The seeds are innate dormant. The fruit production was directly correlated with the number of primary branches developed by the plants. In the second chapter, the relative importance of the different factors of seed loss trom the seed bank was analysed under field conditions. The follo'Ning results were obtained: 1) Before dispersal, predators and pathogens accounted for 63.5% of the death of seeds. 2) A unique peak of germination during the first year of study was observed, coincident with the rainy season. Germination was observed exclusively in seeds buried above 5 em of depth. 3) The proportion of recovered seeds diminished with time, due to removal by animais or redispersion by abiotic factors like wind or water. Seed recovery was lower at surface levei than in buried seeds. 4) The main causes of mortality of seeds in the soil were predation and pathogens. 5) At 2 and 5 em of burial, post-dispersal seed predation was responsible for the death of 45% of viable seeds, and at 10 and 20 em for 35%. Carabides, curculonides and coleoptera larvae are the possible agents of predation 6) The fungi present in the pre-dispersal seeds probably attacked neighbour seeds when buried in the soi!. This facto r of mortality caused 19% of death of the seeds, independently of the depth of buria!. 7) Between 20-45% of buried viable seeds remained alive after the two years of study, depending of the depth of buria!. No seeds died by senescence. Finally, a diagrammatic life table for Sida rhombifolia, under three burial depths of seeds, is presented. / Doutorado / Ecologia / Doutor em Ciências Biológicas

As actinobactérias endofíticas estão presentes nos tecidos das plantas e, por meio da produção de metabólitos ativos, às protegem e auxiliam em condições de estresse. Esses microrganismos tem sido amplamente estudados no controle de doenças fitopatogênicas, como a mancha marrom causada por Bipolaris sorokiniana. Este fungo é o agente causal da podridão comum da raiz, manchas foliares, morte de plântulas e ponto preto das sementes de trigo e cevada, causando redução significativa na produtividade. Neste contexto, os objetivos do presente estudo foram avaliar a virulência de isolados de B. sorokiniana e a atividade antifúngica de actinobactérias contra este fitopatógeno. Os antagonistas com elevada atividade contra o fitopatógeno foram caracterizados quanto à produção enzimática, fisiologia, condições de crescimento e produção de metabólitos, bem como sequenciamento do 16S rRNA para identificação dos antagonistas. A caracterização parcial dos metabólitos foi realizada por meio de sistemas de Cromatografia de Camada delgada (CCD) contendo diferentes solventes. Os resultados mostraram que os isolados de B. sorokiniana apresentaram elevada virulência às plântulas e sementes de trigo, sendo que a maior agressividade foi relatada à semente. Por outro lado, 69,6% das actinobactérias apresentaram elevada atividade antifúngica contra isolados de B. sorokiniana em meio sólido, e 17% a mantiveram em cultura submersa. A maior produção ocorreu a 30°C após 72h de incubação, para a maioria dos isolados. A detecção da produção de catalase, amilase, pectinase, lipase e esterase foi observada para a maioria das actinobactérias (100, 95,6, 91,30, 95,6, 100%, respectivamente). Enquanto que a degradação de caseína, carboximetilcelulose e gelatina foi realizada por 60,8, 34,78 e 47,82% dos isolados, respectivamente. Os isolados 6(2), 6(4), 16(3) e R18(6), selecionados devido à elevada atividade antifúngica e enzimática, apresentaram reação positiva para produção de compostos voláteis, quitinase e glucanase, sideróforos, fixação de nitrogêno, AIA e colonização de raizes. Somente isolado R18(6) não apresentou capacidade de solubilizar fosfatos. A caracterização molecular determinou que estes isolados pertencem ao gênero Streptomyces. Os metabólitos produzidos pelo isolado R18(6) foram mais estáveis a mudanças de temperatura e pH, bem como para a ação das proteases e EDTA, quando comparado aos demais. Os solventes acetato de etila e hexano foram mais eficientes na extração de metabólitos do extrato bruto, porém a melhor separação de metabólitos em CCD foi obtida com misturas de solventes. / Endophitic actinobacterias are present in plant tissues and by means of active metabolites they protect and help them in stress conditions. These microorganisms have been widely used in the control of phytopathogenic diseases, such as the spot blotch caused by Bipolaris sorokiniana. This fungus is a causal agent of common root rot, leaf spots, death of seedlings and black point of the seeds of wheat and barley, causing significant reduction in productivity. In this context, the aim of this study was to evaluate the virulence of the B. sorokiniana isolates and the antifungal activity of actinobacterias against this phytopathogen. The antagonists with the higher activity against the phytopatogen were characterize taking in consideration their physiology, enzyme production, growth conditions and metabolites production and 16S rRNA sequencing for identification of the antagonists. Partial characterization (nós não purificamos) of the metabolites was performed using thin layer chromatography (TLC) systems containing different solvents. The results showed that the isolates of B. sorokiniana have a high virulence on wheat seed and seedlings, however the greater aggressiveness was observed to seed. On the other hand, 69.6% of actinomycetes showed high antifungal activity against of B. sorokiniana isolates on solid medium, and 17% maintained this behavior in submerged culture. The highest yield happened, for most isolates, when grown at 30°C with agitation after 72h of incubation. The detection of catalase, starch, pectin, lipase and esterase production was observed for most of the actinomycetes (100, 95.6, 91.30, 95.6, 100%, respectively). While the hydrolysis of casein, carboxymethylcellulase and gelatin was performed by 60.8, 34.78 and 47.82% of the isolates, respectively. Isolates 6(2), 6(4), 16(3) e R18(6), selected due to the high antifungal and enzyme activity, showed a positive reaction for the production of volatile compounds, chitinase and glucanase, siderophores, nitrogen fixation, AIA and colonization of the roots. Only the isolated R18(6) showed no ability to solubilize phosphates. Molecular characterization of the isolates determined that they belong to the genus Streptomyces. The metabolites produced by isolate R18 (6) were more stable to temperature and pH changes, as well to the action of proteases and EDTA, when compared to the others. The solvents ethyl acetate and hexane were more efficient for the extraction of the metabolites from the crude extract, however a better separation of the metabolites in the TLC was obtained with mixture of solvents.

Orientador: Regiane Cristina Oliveira de Freitas Bueno / Coorientador: Carlos Frederico Wilcken / Banca:Everton Pires Soliman / Banca: Valmir Antonio Costa / Resumo: A espécie Helicoverpa armigera Hübner (Lepidoptera: Noctuidae) é um inseto polífago, com ampla distribuição geográfica e considerada uma importante praga nas regiões do mundo em que ocorre. Na safra 2013/2014, a presença desse lepidóptero foi registrada pela primeira vez no Brasil, acarretando em perdas de produtividade. Essa espécie possui diversas características que a tornam de indiscutível importância, como o fato de dispersarse a longas distâncias, alimentar-se na fase jovem de estruturas reprodutivas das plantas, alta fertilidade e diapausa facultativa das pupas. Além disso, é uma espécie que apresenta resistência a um grande número de inseticidas. Diante desse cenário, outras táticas de controle, que englobem técnicas inter e multidisciplinares, devem ser adotadas, de acordo com a proposta do Manejo Integrado de Pragas. Uma delas, o controle biológico, apresenta grande potencial, pois não causa desequilíbrio ambiental e pode manter a população de pragas abaixo do nível de dano econômico. Nesse sentido, o parasitoide de pupas Trichospilus diatraeae Cherian & Margabandhu (Hymenoptera: Eulophidae) apresenta potencial de utilização no controle dessa praga. T. diatraeae é uma espécie amplamente distribuída no território brasileiro e foi registrado em diversas famílias de Lepidoptera, o que o caracteriza como altamente polífago. Para tanto, é necessário conhecer previamente as interações entre parasitoide e hospedeiro alvo, tornando importante estudar essas características. Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi estudar as características biológicas do parasitoide em diferentes hospedeiros, a influência do sexo e idade da pupa, idade e densidade de parasitoides e tempo de parasitismo, além do estudo do desenvolvimento em diferentes temperaturas de T. diatraeae em pupas de H. armigera. Concluiu-se que T. diatraeae desenvolveu-se melhor a 25ºC, em pupas ... / Abstract: Helicoverpa armigera Hübner (Lepidoptera: Noctuidae) is a polyphagous insect, with wild geographic distribution and considered the most important pest in the regions where it occurs. Recently, in the 2013/2014 growing season, its presence was first registered in Brazil, bringing yield loss and therefore economic damages. This species has several characteristics that make it of considerable interest, such as the fact of its capacity in disperse over long distances, caterpillars that feeds of reproductive structures, high fertility and optional diapause pupae. Furthermore, it is a species that is resistant to a large number of insecticides. In this scenario, other control tactics, covering inter and multidisciplinary techniques should be adopted in accordance with the proposal of Integrated Pest Management (IPM). One of them, biological control, has great potential because it does not cause environmental imbalance and can keep the pest population below economic injury level. In this sense, the pupae parasitoid Trichospilus diatraeae Cherian & Margabandhu (Hymenoptera: Eulophidae) presents potential to be utilizated in biological control. T. diatraeae is a widely distributed species in Brazil, and have already been recorded in several Lepidopteran families, which characterizes this insect as highly polyphagous. Therefore, it is necessary to know the interactions between parasitoid and host, making it important to study these characteristics. Thus, the objective of this work was to study the ... / Mestre