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Suplementação de vitamina C e efeito da salinidade em Tilápias do Nilo : desempenho e expressão gênica / Vitamin C supplementation and salinity effect in Nile Tilapia : performance and gene expressionVieira, Caio Alexandre Santos Caxico 29 July 2016 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / In aquatic organisms, changes in salinity in water provoke a variety of physiological
responses, so this study aimed to evaluate the effect of water salinity on weight gain,
survival and expression of the genes Catalase (CAT), Glutathione Reductase (GSR),
Glutathione Synthase (GSS), Glutaione peroxidase (GPX), and heat shock protein
(HSP70) in the liver of Nile Tilapia (Oreochromis niloticus). For the conduction of the
experiment, 160 tilapias with a mean weight of 20.8 g ( ± 4.02) were used. The
experiment was conducted in a completely randomized design (DIC) composed of four
treatments and four replicates, being: T1 = Treatment 1 (salinity 0 + basal diet); T2 =
Treatment 2 (salinity 7 + basal diet); T3 = Treatment 3 (salinity 21 + basal diet); T4 =
treatment 4 (salinity 21 + diet with 1500 mg of vitamin C / kg of feed). The parameters
of water quality were monitored daily and were kept within the range of comfort for the
species. For the analysis of gene expression samples of liver of tilapia were collected in
two distinct periods, 24 hours and 14 days after the beginning of the experiment. Gene
expression quantification was performed by qRT-PCR. There was a significant effect of
the treatments on weight gain, treatment 1 (4.10 g) and treatment 2 (6.42 g) had the
highest weight improve. Animals from T4 had greater weight gain than animals from T3.
Higher survival was observed in treatment 2 followed by control (T1). HSP 70 and GSS
were more expressed in the 24 h period and GSRR was more expressed in the 14 day
period, whereas CAT and GPX did not differ from one period to the other (P <0.05). The
salinity variation had an effect under the expression of the genes evaluated in the liver of
O. niloticus with the exception of catalase for the 24 hour period. After 14 days of
evaluation, animals raised in salinity 21 and fed with vitamin C supplementation
presented greater expression of GPX, GSR and GSS, suggesting that animals raised at
this level of salinity had greater need of action of glutathione system, and that the
supplementation of vitamin C under these conditions allowed greater expression of these
genes. It was concluded that salinity had an effect on the expression of the antioxidant
defense system genes evaluated, which varied considerably over the 24-hour period and
presented a more defined pattern in the 14-day period. Supplementation of vitamin C
contributed, in parts, for better development of tilapia created in salinity 21, which can be
observed, through the results of weight gain and gene expression. / Em organismos aquáticos, mudanças de salinidade na água provocam uma
variedade de respostas fisiológicas, assim, este estudo objetivou avaliar o efeito da
salinidade da água sobre o ganho de peso, a sobrevivência e a expressão dos genes
Catalase (CAT), Glutatona Redutase (GSR), Glutationa Sintetase (GSS), Glutationa
peroxidase (GPX) e o da proteína de choque térmico (HSP70) no fígado de Tilápias do
Nilo (Oreocrhomis niloticus). Para a condução do experimento foram utilizadas 160
tilápias com peso médio 20,8 g (± 4,02). O experimento foi conduzido em delineamento
inteiramente casualizado (DIC) compostos por quatro tratamentos e quatro repetições,
sendo: T1 = Tratamento 1 (salinidade 0 + dieta basal); T2= Tratamento 2 (salinidade 7 +
dieta basal); T3= Tratamento 3 (salinidade 21 + dieta basal ); T4 = tratamento 4
(salinidade 21 + dieta com 1500 mg de vitamina C/ kg de ração). Os parâmetros de
qualidade de água foram monitorados diariamente e se mantiveram dentro da faixa de
conforto para a espécie. Para as análises de expressão gênica foram coletadas amostras
do fígado de tilápias em dois períodos distintos, 24 horas e 14 dias após o início do
experimento. A quantificação da expressão gênica foi realizada por qRT-PCR. Houve
efeito significativo dos tratamentos sobre o ganho de peso, tilápias do tratamento 1 (4,10g)
e tratamento 2 (6,42 g) obtiveram os maiores ganhos de peso. Animais do tratamento 4
(salinidade 21 + acréscimo de vitamina C na ração) tiveram maior ganho de peso que os
animais do tratamento 3 (salinidade 21 + dieta basal). Maior sobrevivência foi observada
no tratamento 2 seguido pelo controle. HSP 70 e GSS foram mais expressos no período
de 24 h e GSR sendo mais expressa no período de 14 dias, enquanto que CAT e GPX não
diferiram de um período para o outro. A variação de salinidade teve efeito sob a expressão
dos genes avaliados no fígado de O.niloticus com exceção da catalase para o período de
24 horas. Após 14 dias de avaliação animais criados em salinidade 21 e alimentados com
suplementação de vitamina C apresentaram maior expressão de GPX, GSR e GSS,
sugerindo que animais criados nesse nível de salinidade, tiveram maior necessidade de
ação do sistema glutationa, e que a suplementação de vitamina C nessas condições
permitiu maior expressão desses genes. Conclui-se que a salinidade apresentou efeito
sobre a expressão dos genes do sistema de defesa antioxidantes avaliados, os quais
variaram bastante no período de 24 horas e apresentaram um padrão mais definido no
período de 14 dias. A suplementação de vitamina C contribuiu em partes, para melhor
desenvolvimento das tilápias criadas em salinidade 21, o que pode ser observado, pelos
resultados de ganho de peso e expressão gênica.
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Avaliação de adsorvente alternativo na extração em fase sólida de resíduos de agrotóxicos em tecido muscular de tilápia (Oreochromis niloticus) / Evaluation of alternative adsorbent in solid phase extraction of pesticide residues in muscular tissue tilapia (Oreochromis niloticus)Santos, Luiza Maria Ramos dos 24 February 2017 (has links)
Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The fish products is the most commonly used animal protein in the world. Brazil
stands out for pisciculture with emphasis on the production of tilapia
(Oreochromis niloticus). Fish farming is subject to attack by pests and pesticide
application has been used as a form of control. This work aims at the
development of an effective methodology based on the matrix solid phase
dispersion (MSPD) and gas chromatography/spectrometry tandem mass (GCMS/
MS) techniques for determination of residues of aldrin, ametrina,
bromopropylate, bromuconazole, cypermethrin, chlorpyrifos, chlorpropham,
coumaphos, esfenvalerate, etion, permethrin, pirimicarb, pirimiphos methyl,
procymidone, vinclozolin pesticides in muscle tissue of tilapia. Therefore,
optimization of chromatographic and evaluation of best extraction conditions
proposed were performed. The best quantitative response conditions were
obtained with 0.25 g of sample homogenized with 0.75 g of adsorbent, using 0.5
g of auxiliary adsorbent, eluted with 5 mL of acetonitrile. The biochar produced
from coconut wastes was tested as an adsorbent for DMFS extraction too and
presented satisfactory recovery results between 70 ± 1.38% and 120 ± 5.55%
at concentration levels 0.02 to 0.1 μg g-1. The parameters evaluated for the
validation of the method were: linearity and sensitivity, obtaining a good
sensitivity and linear response with coefficients of 0.9999 in the range of 0.01 to
4 μg g-1; selectivity, through matrix effect studies; accuracy and precision with
recovery values between 70 - 120% and coefficients ranging from 0 to 16.69%
for the concentration levels 0.02 to 0.1 μg g-1 (n = 5) and detection limits and
quantification in the range of 0.01 to 0.0009 μg g-1 respectively. The method
developed was adequate for the determination of residues of pesticides in
samples of tilapia. / O pescado representa a proteína animal mais consumida no mundo. O Brasil
se destaca pela prática da piscicultura com notoriedade para a produção de
tilápia (Oreochromis niloticus). O cultivo de peixes está sujeito ao ataque de
pragas e a aplicação de agrotóxicos tem sido usado como forma de controle. O
presente trabalho objetiva o desenvolvimento de uma metodologia eficiente
com base nas técnicas de dispersão da matriz em fase sólida (DMFS) e
cromatografia gasosa/espectrometria de massas sequencial (GC-MS/MS) para
determinação de resíduos dos agrotóxicos aldrin, ametrina, bromopropilato,
bromuconazol, cipermetrina, clorpirifós, clorprofam, coumafós, esfenvalerato,
etiona, permetrina, pirimicarbe, pirimifós metílico, procimidona e vinclozolina
em tecido muscular de tilápia. Para tanto, a otimização das condições
cromatográficas e a avaliação da melhor proposta de extração foram
realizados. As condições de melhor resposta quantitativa foram obtidos com
0,25 g de amostra homogeneizada com 0,75 g de C18, utilizando 0,5 g de
alumina, eluído com 5 mL de acetonitrila. O biocarvão produzido a partir de
rejeitos de coco foi também testado como adsorvente para a extração por
DMFS e apresentou resultados satisfatórios de recuperação entre 70 ± 1,38% –
120 ± 5,55% para os níveis de concentração 0,02 a 0,1 μg g-1. Os parâmetros
avaliados para a validação do método foram: linearidade e sensibilidade,
obtendo-se uma boa sensibilidade e resposta linear com coeficientes de 0,9999
no intervalo de 0,01 a 4 μg g-1; seletividade, através de estudos de efeito
matriz; exatidão e precisão com valores de recuperação entre 70 - 120% e
coeficientes de variação na faixa de 0 a 16,69%, para os níveis de
concentração 0,02 a 0,1 μg g-1 (n=5) e limites de detecção e quantificação no
intervalo de 0,0009 – 0,02 μg g-1, respectivamente. O método desenvolvido se
mostrou adequado para determinação de resíduos de agrotóxicos em amostras
de tilápia.
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