Espera-se que a água esteja dentro de um padrão de qualidade após passar pelos processos de tratamento, que deve ser mantido durante a distribuição chegando aos pontos de consumo em condições de jamais prejudicar a saúde humana e animal. Contudo, há vários problemas de saúde que mundialmente vêm sendo associados ao suprimento público de água, fato que tem exigido um controle de qualidade cada vez mais rigoroso. Apesar dos recursos analíticos disponíveis, que facilitam a detecção e quantificação de agentes físicos, químicos e microbiológicos potencialmente perigosos à saúde, há grande dificuldade em estabelecer parâmetros de qualidade e definir índices toleráveis daquilo que se consideram como agentes potencialmente perigosos à saúde. Muitas doenças veiculadas pela água são causadas por bactérias principalmente do grupo entérico, cuja presença é determinada através de indicadores como os coliformes totais e termotolerantes. Outros microrganismos patogênicos podem estar presentes e não serem detectados por não estarem associados a estes indicadores. Como somente uma pequena quantidade de bactérias pode ser cultivada, como demonstrado pela avaliação direta de fragmentos de genomas, tornou-se evidente que em várias situações muitas espécies microbianas embora presentes deixem de ser detectadas. Como ainda não se dispõe de informações suficientes a este respeito, este trabalho teve o objetivo de comparar métodos de identificação de bactérias cultiváveis e incultiváveis que possam comprometer a qualidade da água, analisando-se amostras coletadas ao longo do sistema de abastecimento da cidade de Piracicaba, desde a captação e processo de tratamento, distribuição e estocagem residencial da água de abastecimento, o que permitiria avaliar possíveis fontes de contaminação ao longo do trajeto nas redes de distribuição até os pontos de consumo. Amostras foram coletadas nas épocas de chuvas e seca para avaliar a qualidade da água de abastecimento e os resultados mostram que as bactérias presentes no sistema de abastecimento da cidade é 61,29% maior como estimado por SSCP em relação aos métodos de cultivo testados, sendo que o cultivo em meio R2A apresentou contagens medias superiores ao cultivo em meio TSA. Bactérias patogênicas potenciais como Shigela flexneri e Sphingomonas sp. mostraram resistência aos processos de tratamento e purificação da água, sendo identificadas em muitos pontos no sistema de abastecimento de água da cidade e nas amostras dos reservatórios domiciliares. Bactérias como Salmonella typhi, Salmonella sp. e Staphylococcus aureus foram identificadas apenas em amostras coletadas na rede, ou seja, não detectadas na amostra do ponto de captação, indicando uma provável contaminação no trajeto de distribuição da água tratada. Contudo uma maior preocupação é voltada aos reservatórios domiciliares, pois algumas amostras apresentaram uma concentração de cloro abaixo do limite mínimo exigido em Portaria e, também, a presença de microrganismos patogênicos potenciais como os pertencentes ao Grupo Entérico. Estes dados revelam que apesar do eficiente sistema de tratamento da cidade, existem microrganismos que resistem aos processos de tratamento disseminando-se pela rede e que há possíveis focos de contaminação na rede de distribuição da água, podendo comprometer a qualidade da água disponível ao consumo publico. / It is expected that the water be within the quality standards after being through the treatment processes, which must be maintained along its distribution system up to the consumption points under the same conditions. However, there are several health problems worldwide associated to the public water supply. This fact has required a more and more rigorous quality control. It is difficult to set quality parameters and to define tolerant levels of what is considered as agents potentially dangerous to health, even if the analytical resources used to detect and quantify these chemical, physical, and microbiological agents are available. Bacteria, mainly from the enteric group, cause many diseases disseminated through water. Its presence is determined by using indicators, such as, total and thermo-tolerant coliforms. Other pathogenic microorganisms can be present in water without being detected, because they are not associated to those indicators. Just a small amount of bacteria can be cultivated, as demonstrated by direct evaluation of genome fragments. It is evident that in several situations many microbial species are not detected, even being present in the environment. As there is not enough information available, this work aimed to compare the identification methods of cultivated and non-cultivated bacteria that can damage the water quality. The samples were collected along the water supply system from Piracicaba, São Paulo, from the collection site, treatment process, and distribution to domestic reservoirs in order to check possible sources of contamination throughout the distribution system up to the consumption points. Samples were collected in the rainy and dry seasons to evaluate the quality of water supply. The results demonstrated that the population of bacteria present in the supply system from the city is 61.29% higher than that estimated by SSCP. In relation to the cultivation methods under testing, R2A medium presented higher average counting when compared to TSA medium. Potentially pathogenic bacteria, such as, Shigela flexneri and Sphingomonas sp., demonstrated resistance to water treatment and purification processes. These microorganisms were identified in several points along the city water supply system and in the samples collected from the domestic reservoirs. Bacteria, such as, Salmonella typhi, Salmonella sp. and Staphylococcus aureus were identified only in some samples collected along the distribution system, that is, they were not detected in the samples from the collecting point. This fact indicates that there might have been a contamination along the distribution of treated water. However, an important concern is towards the domestic reservoirs, because some samples presented a lower concentration of Chlorine than the minimum amount required by law, and the presence of potentially pathogenic microorganisms from the enteric group. These data reveal that, despite the efficiency of the water treatment system in the city, there are microorganisms resistant to the treatment processes, and they are disseminated through the distribution pipes. There might be possible contamination focuses along the distribution pipes that can damage the quality of water available to the public consumption.

Espera-se que a água esteja dentro de um padrão de qualidade após passar pelos processos de tratamento, que deve ser mantido durante a distribuição chegando aos pontos de consumo em condições de jamais prejudicar a saúde humana e animal. Contudo, há vários problemas de saúde que mundialmente vêm sendo associados ao suprimento público de água, fato que tem exigido um controle de qualidade cada vez mais rigoroso. Apesar dos recursos analíticos disponíveis, que facilitam a detecção e quantificação de agentes físicos, químicos e microbiológicos potencialmente perigosos à saúde, há grande dificuldade em estabelecer parâmetros de qualidade e definir índices toleráveis daquilo que se consideram como agentes potencialmente perigosos à saúde. Muitas doenças veiculadas pela água são causadas por bactérias principalmente do grupo entérico, cuja presença é determinada através de indicadores como os coliformes totais e termotolerantes. Outros microrganismos patogênicos podem estar presentes e não serem detectados por não estarem associados a estes indicadores. Como somente uma pequena quantidade de bactérias pode ser cultivada, como demonstrado pela avaliação direta de fragmentos de genomas, tornou-se evidente que em várias situações muitas espécies microbianas embora presentes deixem de ser detectadas. Como ainda não se dispõe de informações suficientes a este respeito, este trabalho teve o objetivo de comparar métodos de identificação de bactérias cultiváveis e incultiváveis que possam comprometer a qualidade da água, analisando-se amostras coletadas ao longo do sistema de abastecimento da cidade de Piracicaba, desde a captação e processo de tratamento, distribuição e estocagem residencial da água de abastecimento, o que permitiria avaliar possíveis fontes de contaminação ao longo do trajeto nas redes de distribuição até os pontos de consumo. Amostras foram coletadas nas épocas de chuvas e seca para avaliar a qualidade da água de abastecimento e os resultados mostram que as bactérias presentes no sistema de abastecimento da cidade é 61,29% maior como estimado por SSCP em relação aos métodos de cultivo testados, sendo que o cultivo em meio R2A apresentou contagens medias superiores ao cultivo em meio TSA. Bactérias patogênicas potenciais como Shigela flexneri e Sphingomonas sp. mostraram resistência aos processos de tratamento e purificação da água, sendo identificadas em muitos pontos no sistema de abastecimento de água da cidade e nas amostras dos reservatórios domiciliares. Bactérias como Salmonella typhi, Salmonella sp. e Staphylococcus aureus foram identificadas apenas em amostras coletadas na rede, ou seja, não detectadas na amostra do ponto de captação, indicando uma provável contaminação no trajeto de distribuição da água tratada. Contudo uma maior preocupação é voltada aos reservatórios domiciliares, pois algumas amostras apresentaram uma concentração de cloro abaixo do limite mínimo exigido em Portaria e, também, a presença de microrganismos patogênicos potenciais como os pertencentes ao Grupo Entérico. Estes dados revelam que apesar do eficiente sistema de tratamento da cidade, existem microrganismos que resistem aos processos de tratamento disseminando-se pela rede e que há possíveis focos de contaminação na rede de distribuição da água, podendo comprometer a qualidade da água disponível ao consumo publico. / It is expected that the water be within the quality standards after being through the treatment processes, which must be maintained along its distribution system up to the consumption points under the same conditions. However, there are several health problems worldwide associated to the public water supply. This fact has required a more and more rigorous quality control. It is difficult to set quality parameters and to define tolerant levels of what is considered as agents potentially dangerous to health, even if the analytical resources used to detect and quantify these chemical, physical, and microbiological agents are available. Bacteria, mainly from the enteric group, cause many diseases disseminated through water. Its presence is determined by using indicators, such as, total and thermo-tolerant coliforms. Other pathogenic microorganisms can be present in water without being detected, because they are not associated to those indicators. Just a small amount of bacteria can be cultivated, as demonstrated by direct evaluation of genome fragments. It is evident that in several situations many microbial species are not detected, even being present in the environment. As there is not enough information available, this work aimed to compare the identification methods of cultivated and non-cultivated bacteria that can damage the water quality. The samples were collected along the water supply system from Piracicaba, São Paulo, from the collection site, treatment process, and distribution to domestic reservoirs in order to check possible sources of contamination throughout the distribution system up to the consumption points. Samples were collected in the rainy and dry seasons to evaluate the quality of water supply. The results demonstrated that the population of bacteria present in the supply system from the city is 61.29% higher than that estimated by SSCP. In relation to the cultivation methods under testing, R2A medium presented higher average counting when compared to TSA medium. Potentially pathogenic bacteria, such as, Shigela flexneri and Sphingomonas sp., demonstrated resistance to water treatment and purification processes. These microorganisms were identified in several points along the city water supply system and in the samples collected from the domestic reservoirs. Bacteria, such as, Salmonella typhi, Salmonella sp. and Staphylococcus aureus were identified only in some samples collected along the distribution system, that is, they were not detected in the samples from the collecting point. This fact indicates that there might have been a contamination along the distribution of treated water. However, an important concern is towards the domestic reservoirs, because some samples presented a lower concentration of Chlorine than the minimum amount required by law, and the presence of potentially pathogenic microorganisms from the enteric group. These data reveal that, despite the efficiency of the water treatment system in the city, there are microorganisms resistant to the treatment processes, and they are disseminated through the distribution pipes. There might be possible contamination focuses along the distribution pipes that can damage the quality of water available to the public consumption.

Orientador: Luiz Fernando Rolim de Almeida / Resumo: Plantas que presenciam a seca podem armazenar informações sobre esta experiência, tal como uma memória ao estresse. As informações adquiridas com a memória do estresse podem ser utilizadas para aumentar a tolerância a futuros eventos de défice hídrico, porém, o crescimento das plantas pode ser limitado. O objetivo deste estudo foi investigar as respostas fisiológicas, bioquímicas e epigenéticas de Sorghum bicolor (L.) Moench durante e após o primeiro e segundo evento de défice hídrico, bem como as vantagens e desvantagens de eventos recorrentes de seca para a tolerância e crescimento. Neste estudo foram utilizados quatro tratamentos que foram: Controle, onde a irrigação foi mantida, Défice Hídrico na Fase Juvenil, onde as plantas foram submetidas a desidratação na fase juvenil seguido de reidratação, Défice Hídrico na Fase Adulta, onde a irrigação foi suspensa na fase adulta seguido de reidratação e Défice Hídrico Recorrente, onde a irrigação foi suspensa na fase juvenil e adulta seguido de reidratação. Foram avaliadas as trocas gasosas, fluorescência da clorofila a, conteúdo relativo de água na folha, densidade estomática, crescimento, enzimas atioxidativas, conteúdo de açucares totais e sacarose e ocorrência da H3K4me3 no gene Sb04g038610. Mesmo com o intervalo entre o primeiro e o segundo evento de seca, o que poderia resultar na remoção da memória do estresse formada no primeiro evento, as respostas fotossintéticas, antioxidativas, morfo-anatomicas e de estado hídrico dem... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Plants that experience drought can store information about this experience, such as a memory of stress. Information acquired with stress memory can be used to increase tolerance to future water deficit events, however, plant growth may be limited. The objective of this study was to investigate the physiological, biochemical and epigenetic responses of Sorghum bicolor (L.) Moench during and after the first and second water deficit event, as well as the advantages and disadvantages of recurrent drought events for tolerance and growth. Four treatments were used: Control, where irrigation was maintained, Water Deficit in the Juvenile Phase, where the plants were submitted to dehydration in the juvenile phase followed by rehydration, Water Deficit in the Adult Phase, where irrigation was suspended in the adult phase followed by rehydration and Recurrent Water Deficit, where irrigation was suspended in the juvenile and adult phases followed by rehydration. Gas exchanges, chlorophyll a fluorescence, relative leaf water content, stomatal density, plant growth, atioxidative enzymes, total sugar and sucrose content and the occurrence of H3K4me3 in the Sb04g038610 gene were evaluated. Even with the interval between the first and second drought events, which could result in the removal of the stress memory, the photosynthetic, antioxidative, morpho-anatomical and water status responses demonstrated that S. bicolor plants showed increased tolerance to drought during recurrent water defici... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

O processo de intensificação dos sistemas alimentares na produção de ruminantes vem sendo o foco nas discussões políticas que implicam na segurança do alimento, bem-estar animal e qualidade do produto cárneo. A possibilidade da diversificação alimentar em diferentes fases do crescimento animal, através de sistemas exclusivamente a pasto ou com concentrados na dieta, determina variações no desenvolvimento corporal do animal e nas características qualitativas da carne. Neste contexto, se procurou identificar através de dois protocolos experimentais localizados no Sul do Brasil, as características produtivas estacionais da forragem, desempenho animal, atributos da carcaça e físico-químicos da carne de bovinos de corte produzidos em diferentes sistemas alimentares. Periodicamente era determinada a espessura de gordura subcutânea (EGS) dos animais através de imagens de ultrassom, sendo essa utilizada como critério para o abate. O experimento 1 (Bioma Pampa) foi constituído de um delineamento completamente casualizado com três tratamentos (sistemas alimentares) e três repetições, durante a terminação dos novilhos até o abate (EGS, 3 a 6 mm). Os tratamentos foram: i) pastagem natural; ii) pastagem natural melhorada com fertilização e introdução de gramínea hibernal. iii) idem ao ii, porém abatidos com mais idade. O experimento 2, (campos de altitude do Bioma Mata Atlântica), constituiu-se de um delineamento completamente casualizado com cinco tratamentos e três repetições, durante a recria e terminação dos animais até o abate (EGS, 2 a 3 mm). Os tratamentos foram: i) pastagem natural; ii) pastagem natural melhorada com fertilização e introdução de gramínea e leguminosa hibernal; iii) pastagem cultivada de gramíneas hibernais em dois invernos; iv) pastagem cultivada (idem ao iii) com suplemento de 0,8% PV/dia-1; v) confinamento com relação de volumoso e concentrado (75:25) na dieta. Nos dois estudos, verificou-se que a carga animal utilizada determina alterações positivas na produção estacional de forragem nos dois ambientes experimentais. Na medida em que aumenta o processo de intensificação do sistema alimentar, houve um maior acúmulo de gordura subcutânea na carcaça reduzindo, portanto, a idade de abate dos animais. Sistemas pastoris naturais e naturais com baixo aporte de insumos permitem atributos físico-químicos desejáveis na carne, maior teor de CLA, elevada concentração de n-6 e n-3 e menor razão n-6/n-3 em relação aos sistemas mais intensivos com uso de grãos na dieta. / The process of intensifying food systems in ruminant production has recently been the focus of policy discussions on food safety, animal welfare and the quality of meat products. The possibility of feed diversification at different stages of animal growth, trhough diferent pasture systems or in feedlots, leads to changes in the animal's body development and meat quality. In this context, this thesis search to identify, through two experimental protocols localizated in southern Brazil, the seasonal productive characteristics of forage, animal performance and the carcass and physical-chemical attributes of the meat of beef cattle produced under different food systems.The subcutaneous fat thickness (SFT) of the animals was determined periodically by ultrasonic images, this measure being used as a criterion for the slaughter. Experiment one (Pampa Biome) was carried out in a completely randomized design with three treatments (feeding systems) and three replicates during the finishing phase of the steers just to slaughter (SFT, 3 to 6 mm). Treatments were: i) natural grassland; ii) improved natural grassland with fertilization and oversowing of winter grass. iii) same as ii, but slaughtered at more advanced age. Experiment two (highlands of Mata Atlântica biome), was realized through a completely randomized design with five treatments and three replicates during the growing and finishing phase of the animals just to the slaughter (SFT, 2 to 3 mm). Treatments were: i) Natural grassland; ii) improved natural grassland with fertilization and oversowing of winter grass and legumes; (iii) winter cultivated pasture during two winters; iv) winter cultivated pasture (same as iii) supplemented with 0.8% LW/day-1; v) feedlot with ratio of bulky and concentrated (75:25) in the diet. Thus, we aimed to characterize productive systems of beef cattle used in each region. In these two studies, it was verified that the utilized animal stocking determine positive changes in the seasonal forage production in the two experimental environments. As the system intensification process increases, there was a greater accumulation of subcutaneous fat in the carcass, thus reducing the slaughter age of the animals. Natural grasslands systems and natural with a low use of inputs, allow desirable physical-chemical attributes in the meat, higher CLA content, high concentration of n-6 and n-3 and lower ratio n-6/n-3 in relation to the most intensive use of grain in the diet.

Made available in DSpace on 2015-04-22T22:17:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao - Eyner Godinho de Andrade.pdf: 1620387 bytes, checksum: d94449ab292c6a6a393caf5983969e46 (MD5) Previous issue date: 2006-08-03 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The aim of this study was to evaluate the effect of the frozen storage on the sensory, chemical, microbiological stability and functional properties of the protein of minced fish of tambaqui (Colossoma macropomum) and matrinxã (Brycon amazonicus) catering by fish culture located near Manaus (AM), elaborated in laboratories conditions. In general, during frozen storage of minced fish occurs losses on a functionality of proteins as reduction of solubility and of water-holding capacity (WHC), as well as deterioration enzymatic and bacterial, when diverse volatile composites that can incite, among others problems are formed, the oxidative rancidity and the muscular increase of pH. To evaluate the stability of minced of matrinxã and tambaqui during its storage -20ºC had been used parameters as: values of N-BVT, pH, sensory tests and bacteriological countings. The protein solubility and the WHC had been determined to verify the possible alterations in the functionality of proteins due to the freezing. Also the chemical and nutritional characterization of minced was made fish by means of the proximal composition and amino acid profile. The income of the triturated meat was determined, after gotten the processes of decapitation, gutted and separation mechanics. The results had been low: 37.44% and 47.0% for tambaqui and matrinxã, respectively. On the basis of the text of lipids and energy value, both the fish had been classified as semi fat. Tambaqui with 2,66% of lipids and 90,98 kcal and matrinxã with 5,55% of lipids and energy of 127,67% kcal. The fish used in the experiment process high proteins text: 16.74% for tambaqui and 18.61% for matrinxã, being gifts in its composition all the essential amino acids. The protein solubility of minced fish for both the studied species presented a drastic reduction in the first month of storage and it tends to stabilize sixty days after, remaining itself it enters 0,03 and 0,04 g/dL until the end of the experiment. Throughout the one hundred and fifteen days of frozen stockage -20ºC minced fish of tambaqui and matrinxã had presented stability of the CRA that varied between 95 and 97%. The N-BVT, for both minced , presented an increase in first the thirty days, followed of a fall accented until the end of the experiment, being always below of the limit of 30 mg of N-BVT/100 g. The values of pH had shown to a rise of 6,17 the 6,39 for matrinxã and of 6,30 the 6,48 for tambaqui until the sixty days of storage -20ºC and after this period had a fall with trend to the stability. During the frozen storage of minced of matrinxã a reduction of the bacterial countings was noticed. It can have had contamination of the samples or imperfections in the freezing, not having, however, the presence of Escherichia coli. In the sensory evaluation the products of both the species had been remained in quality A throughout the experimental period. The results allow to conclude that minced fish had kept same stability for long periods of frozen storage consisting in an alternative for diversification of the production of the regional fishing industry and allowing the search for other markets, national as in such a way international. / O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da estocagem congelada sobre a estabilidade sensorial, química, microbiológica e propriedades funcionais da proteína dos minced fish de tambaqui (Colossoma macropomum) e de matrinxã (Brycon amazonicus) provenientes de pisciculturas localizadas próximas à Manaus (AM), elaborados em condições laboratoriais. De modo geral, durante a estocagem congelada dos minced fish ocorrem perdas na funcionalidade das proteínas como a diminuição da solubilidade protéica e da capacidade de retenção de água (CRA), bem como a deterioração enzimática e bacteriana, quando são formados diversos compostos voláteis que podem provocar, entre outros problemas, a rancidez oxidativa e o aumento do pH muscular. Para avaliar a estabilidade dos minced de matrinxã e tambaqui durante sua estocagem a -20ºC foram utilizados parâmetros como: valores de N-BVT, pH, testes sensoriais e contagens bacteriológicas. A solubilidade protéica e o CRA foram determinados para verificar as possíveis alterações na funcionalidade das proteínas devido ao congelamento. Foi também feita a caracterização química e nutricional dos minced fish por meio da composição centesimal e perfil de aminoácidos. Foi determinado o rendimento da carne triturada, obtida após os processos de decaptação, evisceração e separação mecânica. Os resultados foram baixos: 37,44% e 47,0% para o tambaqui e a matrinxã, respectivamente. Com base no teor de lipídios e valor energético, ambos os peixes foram classificados como semigordos. O tambaqui com 2,66% de lipídios e 90,98 kcal/100g e a matrinxã com 5,55% de lipídios e energia de 127,67 kcal/100g. Os peixes utilizados no experimento possuíam alto teor protéico: 16,74% para o tambaqui e 18,61% para a matrinxã, estando presentes em sua composição todos os aminoácidos essenciais. A solubilidade protéica dos minced fish para ambas as espécies estudadas apresentou uma diminuição drástica no primeiro mês de armazenagem e tendeu a estabilizar-se após sessenta dias, mantendo-se entre 0,03 e 0,04 g/dL até o final do experimento. Ao longo dos cento e quinze dias de estocagem congelada a -20ºC os minced fish de tambaqui e matrinxã apresentaram estabilidade do CRA que variou entre 95 e 97%. O N-BVT, para ambos os minced , apresentou um aumento nos primeiros trinta dias, seguido de uma queda acentuada até o final do experimento, ficando sempre abaixo do limite de 30 mg de N-BVT/100 g. Os valores de pH mostraram uma elevação de 6,17 a 6,39 para a matrinxã e de 6,30 a 6,48 para o tambaqui até os sessenta dias de estocagem a -20ºC e após esse período houve uma queda com tendência à estabilidade. Durante a estocagem congelada do minced de matrinxã notou-se uma redução das contagens bacterianas. Pode ter havido contaminação das amostras ou falhas no congelamento, não havendo, contudo, a presença de Escherichia coli. Na avaliação sensorial os produtos de ambas as espécies mantiveram-se em qualidade A ao longo do período experimental. Os resultados permitem concluir que os minced fish mantiveram estabilidade mesmo por longos períodos de estocagem sob congelamento constituindo-se em uma alternativa para diversificação da produção da indústria pesqueira regional e permitindo a busca por outros mercados, tanto nacional como internacional.

Splicing é o processo de remoção de introns e ligação de exons em eucariotos. É realizado pelo spliceossomo, um complexo macromolecular composto por RNAs e mais de cem proteínas. Alguns introns possuem microRNAs, os quais devem ser processados para gerar moléculas maduras. O cluster intrônico miR-17-92 é composto por sete miRNAs que têm sido associados ao desenvolvimento de diferentes tumores em vários tecidos. Neste trabalho o splicing de dois miRNAs deste cluster foi analisado em células HeLa, BCPAP e TPC-I. Os resultados mostraram que introns com miR19a tem o splicing mais eficiente do que aqueles com miR18a em todas as três células analisadas. Além disso, a composição dos spliceossomos foi analisada por espectrometria de massas. Entre as principais proteínas encontradas, destaca-se a presença das hnRNPs, como hnRNP_A1 e hnRNP_A2/B1. Estes resultados são importantes para entender como esses miRNAs são processados, e quais são os principais componentes recrutados em diferentes tipos celulares. / Pre-mRNA splicing is the process of intron removal and exon ligation in eukaryotes. It is performed by the spliceosome, a multi-megadalton machinery composed of RNAs and more than a hundred proteins. Intronic miRNAs must be processed from the host gene to generate mature molecules. miR-17-92 is an intronic cluster composed of seven miRNAs which have been associated to the development of different tumors, in several different cells. In this work, we analyzed the splicing of two miRNAs belonging to this cluster in HeLa, BCPAP and TPC-I cells. Interestingly, we observed miR19a is more efficiently spliced than miR18a in all three cells. We also searched for specific proteins that can be involved in their respective splicing process. We observed hnRNP proteins are especially concentrated in spliceosomes assembled in introns containing these miRNAs, based on mass spectrometry data. These results are important to understand how these miRNAs are spliced and matured and also can explain their different expression levels in different cells.

<p> </p><p><em>Trypanosoma theileri</em>, of the subgenus <em>Megatrypanum, </em>a non-pathogenic cosmopolitan blood dwelling parasite of bovine. <em>T. theileri </em>can be cultured at room temperature in several culture media.</p><p>Blood samples were collected from deer's. To see if the blood was infected with trypanosomes it was cultivated in 2 ml sheep blood or cell cultivation medium DMEM with antibiotics.</p><p>Growth was detected by microscopy to see if there were any trypanosomes.</p><p>To determine the species of trypanosomes that was in the deer blood a DNA-preparation was done before a Polymerase Chain Reaction (PCR) could be done. With sequencing the trypanosomes where determined to be<em> Trypanosoma theileri</em>.</p><p>Different tests were made to see in what way the trypanosomes best were caught to the objective slides.</p><p>Forty samples of borrelia positive serum from forty different patients were tested with the fluorescent microscopy. Forty different samples from blood donors were tested the same way.</p><p>Blood samples from 16 different fissiped were taken and to see if they were infected with trypanosomes. Three different PCR's were done on the 16 blood samples.</p><p>A small test on human blood was also performed.</p><p>Protein identification by immunoblot with western blot and silver staining was done.</p><p>With the electron microscopy tests were done in the ordinary way and Critical Dry Point to see if both of the techniques worked.</p><p>Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay (ELISA) test were accomplished on two 96 well plates. The wells on the plates were diluted in different ways before they were processed.</p><p> </p><p> </p>

Trypanosoma theileri, of the subgenus Megatrypanum, a non-pathogenic cosmopolitan blood dwelling parasite of bovine. T. theileri can be cultured at room temperature in several culture media. Blood samples were collected from deer's. To see if the blood was infected with trypanosomes it was cultivated in 2 ml sheep blood or cell cultivation medium DMEM with antibiotics. Growth was detected by microscopy to see if there were any trypanosomes. To determine the species of trypanosomes that was in the deer blood a DNA-preparation was done before a Polymerase Chain Reaction (PCR) could be done. With sequencing the trypanosomes where determined to be Trypanosoma theileri. Different tests were made to see in what way the trypanosomes best were caught to the objective slides. Forty samples of borrelia positive serum from forty different patients were tested with the fluorescent microscopy. Forty different samples from blood donors were tested the same way. Blood samples from 16 different fissiped were taken and to see if they were infected with trypanosomes. Three different PCR's were done on the 16 blood samples. A small test on human blood was also performed. Protein identification by immunoblot with western blot and silver staining was done. With the electron microscopy tests were done in the ordinary way and Critical Dry Point to see if both of the techniques worked. Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay (ELISA) test were accomplished on two 96 well plates. The wells on the plates were diluted in different ways before they were processed.

O trabalho conduzido na Fazenda Rancho Santa Zelina, Júlio de Castilhos/RS, avaliou o desenvolvimento corporal e o desempenho produtivo de 64 novilhas de um rebanho comercial Angus da concepção aos 13/15 meses de idade, submetidas a quatro sistemas alimentares durante a gestação: pastagem de Brachiaria com suplementação + pastagem natural no terço final de gestação (BRACS-PN}, pastagem natural com suplementação+ pastagem natural no terço final de gestação (PNCS-PN), pastagem de Brachiara + pastagem cultivada de aveia preta e azevém no terço final de gestação (BRA-PC}, pastagem natural + pastagem cultivada de aveia preta e azevém no terço final de gestação (PN-PC). O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado, quatro sistemas alimentares e duas repetições de área, sendo cada potreiro considerado uma unidade experimental. Para as variáveis de desempenho dos bezerros, cada bezerro foi considerado uma unidade experimental. Ao final dos sistemas alimentares de verão/outono (02/06/2012), as novilhas do BRACS-PN eram mais pesadas (392,0 kg) do que as do BRA-PC (375,5 kg), as quais igualmente superiores as do PNCS-PN (355,0 kg) e PN-PC (354,5 kg). No inverno, novilhas em pastagem natural (BRACS-PN e PNCS-PN) perderam peso, enquanto as em pastagem cultivada ganharam peso e condição corporal. Novilhas do BRA-PC (421 ,O kg) e PN-PC (377,0 kg) tiveram maior peso ao parto, porém as do PN-PC não diferiram do BRACS-PN (323,5 kg) e estas não diferiram das PNCS-PN (306,5 kg). O auxílio ao parto foi maior nas BRA-PC e PN-PC (37,5%), mas não diferiram das PNCS-PN (18,8%). O peso corporal das BRA-PC foi maior (417,4 kg) ao início da monta, mas não diferiru das PN-PC (392,0 kg) e BRACS-PN (351 ,8 kg}, os quais não diferiram das PNCS-PN (329,8 kg). As novilhas do PN-PC tiveram a maior prenhez (100,0%), mas não diferiram das BRA-PC (87,5%) e BRACS-PN (66,0%), os quais não diferiram das PNCS-PN (62,0%). Os bezerros filhos das vacas dos PN-PC e BRA-PC tiveram maiores ganhos de peso até o desmame. Conclui-se da necessidade de desenvolver mais estudos com objetivo de ter maior desenvolvimento das novilhas prévio o terço final de gestação, para aumentar o conhecimento sobre a oferta e o manejo da pastagem natural para minimizar perdas de peso ao final da gestação e para identificar tempo de pastejo pré-parto em pastagem cultivada, que minimizem auxílios e perdas ao parto. Possivelmente, a antecipação da primeira prenhez, através de melhor recria de bezerras, possibilite inicialmente um menor período pré-parto em pastagem cultivada, reduzindo problemas ao parto e, após, um longo período pós-parto em pastagem cultivada. / The work conducted at Rancho Santa Zelina Farm, Júlio de Castillos/RS, evaluated lhe grow and productive performance of 64 heifers of a commercial Angus herd since the conception to 13/15 months of age under four feeding systems during the gestation: Brachiaria pasture with supplementation + natural pasture in the final third of gestation (BRACS-PN), natural pasture with supplementation + natural pasture in the final third of gestation (PNCSPN), Brachiaria pasture + cultivated pasture (oat and ryegrass) in the final third of gestation (BRA-PC), natural pasture + cultivated pasture in the final third of gestation (PN-PC). The experimental design was completely randomized, four food systems and two plots, each paddock considered an experimental unit. For lhe performance variables of the calves, each calf was considered an experimental unit. At lhe end of the feeding summer/fall systems (06/02/2012), lhe heifers of BRACS-PN were heavier (392.0 kg) than lhe BRA-PC (375.5 kg), which were heavier than PNCS-PN (355.0 kg) and PN-PC (354.5 kg). During the winter, heifers on natural pasture (BRACS-PN and PNCS-PN) lost weight, while heifers on cultivated pasture gained weight and body condition. Heifers BRA-PC (421.0 kg) and PN-PC (377.0 kg) were heavier at calving, but the PNPC did not differ from BRACS-PN (323.5 kg) and these ones of PNCS-PN (306.5 kg). The aid to calving was higher in BRA-PC and PN-PC (37.5%) without differ of PNCS-PN (18.8%). The body weight of BRA-PC at the beginning of reproduction was higher (417.4 kg), without differ of PN-PC (392.0 kg) and BRACS-PN (351.8 kg), which ones did not differ of PNCS-PN (329.8 kg). Heifers of PN-PC had the highest pregnancy rale (100.0%), without differ of BRA-PC (87.5%) and BRACS-PN (66.0%), which ones did not differ of PNCSPN (62.0%). Calves of PN-PC and BRA-PC cows had higher weight gain until weaning. This results underscores lhe need for further studies in arder to identify higher growth of heifers prior the final third of gestation, to increase the know about the availability and management of natural pasture to minimize weight loss in late pregnancy and to identify grazing time on cultivated pasture pre calving to minimize tosses and aids to calving. Probaly, earlier first pregnancy through better rearing and genetics of calves initially enables a lower pre-partum period on cultivated pasture, reducing calving problems and, after, a long postpartum grazing on cultivated pasture.

O processo de intensificação dos sistemas alimentares na produção de ruminantes vem sendo o foco nas discussões políticas que implicam na segurança do alimento, bem-estar animal e qualidade do produto cárneo. A possibilidade da diversificação alimentar em diferentes fases do crescimento animal, através de sistemas exclusivamente a pasto ou com concentrados na dieta, determina variações no desenvolvimento corporal do animal e nas características qualitativas da carne. Neste contexto, se procurou identificar através de dois protocolos experimentais localizados no Sul do Brasil, as características produtivas estacionais da forragem, desempenho animal, atributos da carcaça e físico-químicos da carne de bovinos de corte produzidos em diferentes sistemas alimentares. Periodicamente era determinada a espessura de gordura subcutânea (EGS) dos animais através de imagens de ultrassom, sendo essa utilizada como critério para o abate. O experimento 1 (Bioma Pampa) foi constituído de um delineamento completamente casualizado com três tratamentos (sistemas alimentares) e três repetições, durante a terminação dos novilhos até o abate (EGS, 3 a 6 mm). Os tratamentos foram: i) pastagem natural; ii) pastagem natural melhorada com fertilização e introdução de gramínea hibernal. iii) idem ao ii, porém abatidos com mais idade. O experimento 2, (campos de altitude do Bioma Mata Atlântica), constituiu-se de um delineamento completamente casualizado com cinco tratamentos e três repetições, durante a recria e terminação dos animais até o abate (EGS, 2 a 3 mm). Os tratamentos foram: i) pastagem natural; ii) pastagem natural melhorada com fertilização e introdução de gramínea e leguminosa hibernal; iii) pastagem cultivada de gramíneas hibernais em dois invernos; iv) pastagem cultivada (idem ao iii) com suplemento de 0,8% PV/dia-1; v) confinamento com relação de volumoso e concentrado (75:25) na dieta. Nos dois estudos, verificou-se que a carga animal utilizada determina alterações positivas na produção estacional de forragem nos dois ambientes experimentais. Na medida em que aumenta o processo de intensificação do sistema alimentar, houve um maior acúmulo de gordura subcutânea na carcaça reduzindo, portanto, a idade de abate dos animais. Sistemas pastoris naturais e naturais com baixo aporte de insumos permitem atributos físico-químicos desejáveis na carne, maior teor de CLA, elevada concentração de n-6 e n-3 e menor razão n-6/n-3 em relação aos sistemas mais intensivos com uso de grãos na dieta. / The process of intensifying food systems in ruminant production has recently been the focus of policy discussions on food safety, animal welfare and the quality of meat products. The possibility of feed diversification at different stages of animal growth, trhough diferent pasture systems or in feedlots, leads to changes in the animal's body development and meat quality. In this context, this thesis search to identify, through two experimental protocols localizated in southern Brazil, the seasonal productive characteristics of forage, animal performance and the carcass and physical-chemical attributes of the meat of beef cattle produced under different food systems.The subcutaneous fat thickness (SFT) of the animals was determined periodically by ultrasonic images, this measure being used as a criterion for the slaughter. Experiment one (Pampa Biome) was carried out in a completely randomized design with three treatments (feeding systems) and three replicates during the finishing phase of the steers just to slaughter (SFT, 3 to 6 mm). Treatments were: i) natural grassland; ii) improved natural grassland with fertilization and oversowing of winter grass. iii) same as ii, but slaughtered at more advanced age. Experiment two (highlands of Mata Atlântica biome), was realized through a completely randomized design with five treatments and three replicates during the growing and finishing phase of the animals just to the slaughter (SFT, 2 to 3 mm). Treatments were: i) Natural grassland; ii) improved natural grassland with fertilization and oversowing of winter grass and legumes; (iii) winter cultivated pasture during two winters; iv) winter cultivated pasture (same as iii) supplemented with 0.8% LW/day-1; v) feedlot with ratio of bulky and concentrated (75:25) in the diet. Thus, we aimed to characterize productive systems of beef cattle used in each region. In these two studies, it was verified that the utilized animal stocking determine positive changes in the seasonal forage production in the two experimental environments. As the system intensification process increases, there was a greater accumulation of subcutaneous fat in the carcass, thus reducing the slaughter age of the animals. Natural grasslands systems and natural with a low use of inputs, allow desirable physical-chemical attributes in the meat, higher CLA content, high concentration of n-6 and n-3 and lower ratio n-6/n-3 in relation to the most intensive use of grain in the diet.