Orientador : Anita Jocelyne Marsaioli / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-01T10:01:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Camara_ClaudioAugustoGomesda_D.pdf: 23845659 bytes, checksum: b2cd7c5a026f8f2e0678cf5a65593e7f (MD5) Previous issue date: 2001 / Doutorado

Orientador: Selma Candelaria Genari / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:42:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Petinari_Leandro_M.pdf: 1891620 bytes, checksum: 00620df0a905704b914a9cf8decf8855 (MD5) Previous issue date: 2004 / Mestrado

Orientador: Liana Verinaud / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:32:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Machado_CamilaMariaLongo_M.pdf: 3207491 bytes, checksum: b6086bc544c5ddab7233a9e3d8fba20d (MD5) Previous issue date: 2004 / Mestrado

Orientadores: Angela Maria Moraes, Carlos Augusto Pereira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-03T21:03:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Batista_FabianaReginaXavier_M.pdf: 2519549 bytes, checksum: 9a767f56a5012a084b651731c3577e7f (MD5) Previous issue date: 2003 / Mestrado

Orientador: Rolf Dieter Illg / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T11:08:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Faria_RicardoTadeude_D.pdf: 3297661 bytes, checksum: 563e2b374e865ef1c7518e9a5ff157ae (MD5) Previous issue date: 1998 / Doutorado / Genetica Vegetal / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador: Jose Mauro Granjeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T03:03:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Takamori_EstherRieko_M.pdf: 4278363 bytes, checksum: 0d831343742c2db28de42970dad8d707 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Dentre os biomateriais que visam auxiliar a regeneração óssea, destacam-se os de origem bovina. Têm sido avaliados diferentes protocolos de tratamento químico do osso bovino com a finalidade de preservar os componentes orgânicos (colágeno) e inorgânicos (hidroxiapatita), resultando no Osso Bovino Misto (OBM), a fim de aumentar a resistência mecânica do material. Apesar do OBM apresentar-se como um material promissor para uso na clínica médico-odontológica, por conciliar resistência e resiliência, deve-se certificar a ausência de efeitos tóxicos ou ativação do sistema imune do organismo, ou seja, sua biocompatibilidade. O objetivo deste trabalho foi avaliar a citocompatibilidade do OBM por meio de testes de citotoxicidade (Norma ISO 10993), análise morfológica e estudo da interação célula-material. Os ensaios de citotoxicidade consistiram de contagem de células, redução do MTT e captação do Vermelho Neutro. Nesses testes, células da linhagem Balb/c 3T3 foram incubadas com diferentes concentrações do extrato puro do OBM (100mg/mL), a 37oC, 24 h. Nesses ensaios, verificamos diferença estatisticamente significante entre o grupo controle (não tratado) e as concentrações superiores a 50 mg/mL (p<0,01, Análise de Variância, teste de Tukey), similar à proporcionada pelo GENOX ® orgânico e GEN-OX® inorgânico, comercialmente disponíveis. Estes resultados foram confirmados pela análise da morfologia das células tratadas nas diferentes condições, utilizando microscopia óptica de luz. A análise da interação célula-material (por microscopia eletrônica de varredura) somente foi possível após diálise do material (água deionizada) e condicionamento (72 h) em Meio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) + 10% Soro Fetal Bovino (SFB). Concluímos que concentrações do extrato do OBM acima de 50 mg/mL diminuem significativamente o número de células, as funções mitocondrial e lisossomal. Provavelmente isto se deve à presença de resíduos do processamento do material, indicando a necessidade de otimização do processo / Abstract: Biomaterials have been developed and investigated aiming to help bone regeneration. Xenografts of bovine origin stand out due to their biocompatibility, low cost and availability. Some protocols have been tested to develop a chemically treated material containing the anorganic (hydroxiapatite) and the organic (collagen) components of bovine boned: the mixed bovine bone (MBB). In spite of the MBB has been shown as a promising material for dental and medical applications, due to its resistance and resilience, it must be certified that this material is atoxic and do not activate the immunological system of the organism. The purpose of this investigation was to evaluate the MBB cytocompatibility by the use of cytotoxicity tests (ISO 10993), morphological analysis and cell-material interaction studies. The cytotoxicity assays consisted of cell number determination, MTT reduction and Neutral Red uptake. In these tests, Balb/c 3T3 cell lines were treated with different concentrations of MBB extract (100mg/mL, 37oC, 24h). Statistically significant differences were observed among control group (no treatment) and concentrations higher than 50 mg/mL (p< 0.01, ANOVA, Tukey¿s test), similar to results observed for organic and inorganic bovine bone (Gen-Ox®). Morphological analysis (optical microscopy) confirmed these results. Cell-material interaction (scanning electron microscopy) was studied only after material dialysis and 72 h conditioning (Dulbecco Modified Eagle Medium, DMEM, plus 10% Fetal Calf Serum, FCS). Fibroblast proliferation and cell adhesion to the material were observed. We conclude that concentrations of MBB extract higher than 50mg/mL decreased significantly the cell number, mitochondrial and lisosomal function. Probably toxic residues from manufacturing procedures remain in the material, indicating that process optimization should be considered. / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Gonçalo Amarante Guimarães Pereira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T01:59:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Queiroz_DianaAzevedo_M.pdf: 1675319 bytes, checksum: f069b324506d8cba908193d06299c754 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A compreensão das informações geradas pelos diversos Projetos Genoma já totalizados ou em andamento constitui-se em uma ferramenta essencial à pesquisa em biologia molecular. A identificação de genes diferencialmente expressos em estágios distintos de uma dada doença, por exemplo, constituirá um enorme avanço na determinação de sua fisiopatologia, fornecendo marcadores moleculares para seu prognóstico e possíveis alvos para a intervenção do processo. Dentre as moléstias humanas, o câncer constitui-se em um dos principais alvos de pesquisa em biologia molecular e clínica médica, basicamente porque envolve um quadro de reprogramação celular complexo e ainda pouco compreendido. Entre os vários tipos de cânceres, a leucemia linfóide aguda é bastante prevalente no Brasil, classificando-a como 8° lugar em número de casos e óbitos decorrentes. Buscando compreender as bases moleculares do câncer, o Projeto Genoma Humano do Câncer (LICR/ FAPESP) se destacou por ter gerado milhares de seqüências codantes do DNA de tecidos humanos normais e tumorais, possibilitando a descoberta de novos genes relacionados aos processos carcinogênicos. Assim, o presente estudo utilizou fragmentos produzidos durante o Projeto Genoma Humano do Câncer para investigar o perfil de expressão gênica em leucemias linfóides agudas através da técnica de microarranjos de DNA. Foram identificados como diferencialmente expressos os genes IgK VLJ (¿immunoglobulin kappa light chain VLJ region¿) e TPT1 (¿Tumor Protein , translationally-controlled 1¿), cuja expressão foi confirmada por ensaios de Northern blot / Abstract: The comprehension of data generated by many finished or in progress Genome Projects will provide essential informations to molecular biology research. The identification of differentially expressed genes in distinct stages of any given disease, for example, will permit an enormous advance in the determination of its physiopathology, identifying molecular markers for its prognostic and possible targets for the intervention of the process. Among human diseases, cancer consists in one of the main subjects of research in clinical and molecular biology, basically because involves a complex and poorly understood process of cellular reprogramming. Among the cancer subtypes, acute lymphoblastic leukemia is prevalent in Brazil, ranked in 8th position in number of clinical cases and decorrent deaths. Attempting to increase the understanding of cancer molecular bases, Human Cancer Genome Project (LICR/ FAPESP) had detached by generation of thousand of expressed sequences of normal and tumoral human tissues, increasing the possibility of discovery of novel genes related to carcinogenic processes. Thus, the present work employed the Human Cancer Genome Project fragments to investigate the global gene expression profile in acute lymphoblastic leukemia by DNA microarrays technique. It was identified the genes of IgK VLJ (imunoglobulina kappa light chain VLJ region) e TPT1 (Tumor Protein, ananslationally-controlled 1), which differential expression was confirmed by Northern blot assays / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Mary Luci de Souza Queiros / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T19:13:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bincoletto_Claudia_D.pdf: 4247184 bytes, checksum: a0026bf456d6bf0cd05ab5acf14add45 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Neste trabalho estudamos o crescimento e diferenciação dos precursores hematopoiéticos da medula óssea, na ausência de fatores estimuladores de colônias (autoproljferação) em vinte e oito pacientes com Leucemia Mielóide Aguda (LMA), doze pacientes com Síndrome Mielodisplásica (SMD) e dezenove controles (indivíduos normais). Os nossos resultados demonstraram que pacientes com LMA e SMD apresentam um aumento autócrino no número de colônias hematopoiéticas que é significativamente superior ao observado em indivíduos normais (p = 0.001). Além disso, verificamos que a presença de autoproliferação celular está associada a um mau prognóstico nas leucemias agudas, pois os pacientes com autoproliferação celular (n = 15) apresentaram uma sobrevida menor em relação aos pacientes com ausência de capacidade autoproliferativa (n = 13), (p = 0.01). O estudo da sobrevida celular, realizado através da caracterização morfológica por microscopia óptica de células apoptóticas, revelou um baixo índice de células apoptóticas em pacientes com LMA (n = 18, P = 0.001) em relação aos controles. Por outro lado, pacientes com SMD apresentaram um alto índice de apoptose celular quando comparado aos indivíduos normais (n = 11, p = 0.001). Em relação à expressão do proto-oncogene bcl-2, verificamos novamente resultados opostos entre os pacientes com LMA e SMD, pois observamos um alto índice de expressão do bcl-2 em células mononucleares de pacientes com LMA (n = 28, P = 0.002) em relação aos controles, e um baixo índice de expressão do proto-oncogene bcl-2 em células mono nucleares de pacientes com SMD (n = 15, p = 0.002). Além disso, verificamos uma correlação linear negativa entre a expressão do proto-oncogene bcl-2 e apoptose celular em pacientes com LMA (rs = - 0.664; P < 0.001). A elevada expressão do bcl-2 verificada nos pacientes com LMA também indica uma interferência deste proto-oncogene na resposta celular à quimioterapia, pois sua expressão estava significativamente maior em pacientes refratário& à quimioterapia (p = 0.03). Sendo assim, os resultados obtidos neste trabalho contribuem para uma melhor compreensão dos mecanismos envolvidos no processo de resistência celular à quimioterapia nos pacientes com LMA e também ajudam a esclarecer, pelo menos em parte, alguns processos envolvidos na hematopoiese desordenada nos casos de SMD / Abstract: In this work we studied the growth and differentiation of early bone marrow progenitor cells in the absence of exogenous growth factors (autonomous proliferation), the bcl-2 expression and the number of apoptotic cells in mononuclear bone marrow cells from patients with confirmed diagnosis of Acute Myeloid Leukaemia (AML) and Myelodysplastic Syndrome (MDS). Bone marrow cells from normal individuals were used as controls. We observed an increased percentage of bcl-2 expression on mononuclear bone marrow cells from AML patients in relation to controls (p = 0.002). Accordingly, the number of apoptotic cells was reduced (p = 0.001) and there was a negative correlation between bcl-2 expression and the number of apoptotic cells (r= - 0.664, P < 0.001) in these patients. In addition, bcl-2 expression was significantly increased in the chemotherapy resistant group in relation to the responsive group (p = 0.03). Survival in the group of AML patients with autonomous proliferation was reduced (p = 0.01). These results suggest that a high bcl-2 expression and the presence of autonomous proliferation are related with a poor prognosis in AML. In the MDS patients, the autonomous proliferation and the percentage of apoptotic cells were also significantly greater when compared to controls (p = 0.001). However, bcl-2 expression was significantly lower on mononuclear bone marrow cells from MDS patients In relation to normal individuals (p = 0.002 - Wilcoxon). These results suggest that the autonomous proliferation observed in these patients is counteracted by the high range of cell death which is probably related to the lower bcl-2 expression / Doutorado / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador : Benedicto de Campos Vidal / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T12:53:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Wada_MariaLuciaFurlan_D.pdf: 5575326 bytes, checksum: 96e75026eea80936efc19fa6427fe7a6 (MD5) Previous issue date: 1985 / Resumo: É amplamente aceito que as características morfológicas e fisiológicas da célula são resultantes da interação genoma + meio ambiente e, portanto, as diferenças observadas entre tipos celulares seriam o resultado da ação diferencial de genes. Nos últimos anos tem-se estudado o quanto da informação contida na célula é codificada pela seqüência primária dos genes e quanto do ambiente influencia esta expressão gênica. O papel da matriz extracelular íntegra, ou de seus componentes isolados, na regulação da expressão final de uma informação genética tem sido constatada por vários autores tanto ¿in vivo" quanto ¿in vitro". Estes trabalhos evidenciam que a matriz extracelular está envolvida nos processo de diferenciação. No nosso trabalho utilizamos uma matriz óssea desmineralizada (MOD) como substrato para a adesão e crescimento de células Vero, uma linhagem celular estabelecida a partir de células renais de macaco. Com os resultados obtidos através de análises citoquímicas, do índice mitótico, de eletroforese e de microscopia de polarização pudemos concluir que a MOD induz um processo de diferenciação que se caracteriza por alterações na forma e no tamanho das células, por alterações no complexo DNP, por aumento de grânulos de secreção contendo substâncias com radicais livres de D. manopiranose e D. glicopiranose, por alterações de constituição do nucléolo e da membrana plasmática. Desta forma, a utilização de MOD, em cultura de células Vero, as quais normalmente apresentam características epitelióides, induz alteração a nível da expressão gênica das mesmas, que se manifestam através de características morfológicas e fisiológicas, fazendo com que estas se assemelhem à condrócitos. Este processo de diferenciação induzido pela MOD ocorre formando um gradiente, sendo o sinal informacional contido na MOD, transmitido de célula a célula, e, provavelmente, o fato indutor de diferenciação presente na MOD não deve ser solúvel no meio de cultivo / Abstract: We studied the demineralized bane matrix, in vitro, used as a substrate for cell adesion and cell growth. The cells used were Vero cells, which are a call line developed from monkey kidney tissue. From the results obtained through cytochemical analysis, mitotic index, eletroforesis, and polarization microscopy we concluded that demineralized bone matrix induces a differentiation process, which modifies the size and shape of the cells. Modifications may be encontered of the DNP complex, the nucleolus, the plasma membrane, as well as an increase in the number of the secretion granules containing substances with free radicals of a-D, mannopyranosyl and a-D. glucopyranosyl In Vero cells cultures, which normally are epithelial, the use of demineralized bone matrix after their level of gene expression, change their morphological and physiological characteristics to the point that the cells appear to be chondrocytes. This differentiation process induced by the demineralized bone matrix is gradually intensified since the informational signal is contained in this matrix and is transmitted from cell to cell. The diferenciation inducing factor of demineralized bone matrix is probably not soluble in the culture medium / Doutorado / Genetica / Doutor em Ciências

Orientadores: Maria Edwiges Hoffmann, A.T. Natarajan / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-19T08:34:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Capucci_MariaSilvia_D.pdf: 6708542 bytes, checksum: f660b3940bd707763d76d06e2b170801 (MD5) Previous issue date: 1994 / Doutorado / Doutor em Genetica