Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2007. / Submitted by Priscilla Brito Oliveira (priscilla.b.oliveira@gmail.com) on 2009-10-02T18:04:46Z No. of bitstreams: 1 Dissert_Fabio de Araujo Schwartz Coelho.pdf: 872357 bytes, checksum: 5285c7a5e3660e358c93749e9061b2e2 (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2010-02-13T00:38:36Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissert_Fabio de Araujo Schwartz Coelho.pdf: 872357 bytes, checksum: 5285c7a5e3660e358c93749e9061b2e2 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-02-13T00:38:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissert_Fabio de Araujo Schwartz Coelho.pdf: 872357 bytes, checksum: 5285c7a5e3660e358c93749e9061b2e2 (MD5) Previous issue date: 2007-11 / Análises proteômicas foram realizadas a fim de se verificar a ocorrência de modificações na expressão protéica em corações de Gallus gallus (galo doméstico) submetidos a integração em seu genoma de DNA cinetoplástico (kDNA) de Trypanosoma cruzi. Foram utilizados galos, que são aves naturalmente refratárias à infecção por células de T. cruzi, contendo o kDNA integrado em seu genoma através da inoculação do parasito nos estágios iniciais do desenvolvimento. O controle negativo foram aves sem nenhum contato com o protozoário. Extratos de tecidos de corações nessas duas condições (kDNA positivo e kDNA negativo) foram comparados por eletroforese bidimensional em busca de proteínas condição-específicas ou diferencialmente expressas. Foram selecionadas quatro manchas para identificação, sendo duas exclusivas da amostra de galo com integração positiva e duas presentes em ambas condições, como controle positivo da técnica. Através da impressão digital do mapa peptídico (PMF), foram identificadas três manchas: proteína C-reativa, cadeia leve 3 de miosina e actina cardíaca. A primeira desempenha um importante papel no sistema imune hospedeiro, sendo, inclusive, relacionada com inflamação e cardiomiopatias. A quarta mancha protéica não rendeu identificação conclusiva. Não foi possível ainda relacionar diretamente a diferença de expressão protéica com a integração do kDNA no genoma hospedeiro. A continuidade deste estudo com ampliação do grupo amostral e utilização de seqüenciamento por espectrometria de massa, permitirá identificar as demais proteínas diferencialmente expressas, assim como mapear quaisquer modificações em suas seqüências relacionadas a proteínas quiméricas. / Proteomic analyses were carried out in order to verify the occurrence of modifications in the protein expression in hearts of Gallus gallus (domestic rooster), submitted to genomic integration of kinetoplast DNA (kDNA) of Trypanosoma cruzi. The present work utilized roosters, which are refractory to the infection by T. cruzi cells, containing the kDNA integrated in their genome through the inoculation of the parasite early in the embryonic developmental process. Negative control birds were utilized without any contact with the protozoan. Heart tissue extracts in those two conditions (kDNA positive and kDNA negative) were compared by two-dimensional electrophoresis for investigation of the existence of condition-specific or differentially expressed proteins. Two exclusive spots in the kDNA positive rooster sample were selected for identification, as well as two spots present in both conditions, which were taken as positive control for the validation of the technique. Through the use of peptide mass fingerprinting (PMF), three spots were identified: c-reactive protein, slow skeletal ventricular myosin alkali light chain 3 and cardiac actin. The first one performs an important role in the host immune system, being related with inflammation and cardiomyopathies. The fourth protein spot did not yield conclusive identification. It was not possible yet to directly relate the difference of protein expression with the integration of the kDNA into the host genome. The continuity of this work by expanding the sample group and utilization of mass spectrometry sequencing techniques will permit us to identify the further differentially expressed proteins, as well as to map any modifications in its sequences related to chimeric proteins.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2008. / Submitted by Diogo Trindade Fóis (diogo_fois@hotmail.com) on 2009-10-07T18:18:30Z No. of bitstreams: 1 2008_RodrigoCDeAlmeida.pdf: 1076004 bytes, checksum: 807743d41ffb03ac91d37b830ba0a7b8 (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2010-02-03T23:38:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_RodrigoCDeAlmeida.pdf: 1076004 bytes, checksum: 807743d41ffb03ac91d37b830ba0a7b8 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-02-03T23:38:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_RodrigoCDeAlmeida.pdf: 1076004 bytes, checksum: 807743d41ffb03ac91d37b830ba0a7b8 (MD5) Previous issue date: 2008 / Introdução: O ácido fólico é um dos elementos essenciais para o desenvolvimento normal do feto e sua deficiência durante a gestação pode resultar no aparecimento de defeitos do fecha-mento do tubo neural (DTN). A doença celíaca (DC), caracterizada por intolerância ao glúten, pode resultar em má absorção de nutrientes que frequentemente resulta em deficiência de ácido fólico e, conseqüentemente, numa possível maior prevalência de DTN na prole de mães com DC. Objetivo: Determinar a prevalência de DC em um grupo de mães de crianças porta-doras de DTN. Métodos: Mães com filhos afetados por DTN atendidas em ambulatório de Neu-rocirurgia Pediátrica do Hospital de Base de Brasília, foram submetidas ao teste de antiendo-mísio (IgA-EMA), pelo método de imunofluorescência indireta sobre secções criostáticas de esôfago de primata. Resultados: Foram investigadas 208 mães, com idades compreendidas entre 19 e 43 anos (média: 33 anos; mediana: 32 anos). Todas as mães apresentaram EMA negativo. Conclusões: Nossos resultados sugerem que a DC materna não é um fator de risco para aparecimento de DTN. Consequentemente, até o presente, uma rotina de rastreamento para DC em mulheres grávidas a fim de evitar uma possível gestação agravada por DTN não seria justificável. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: Folic acid is one of the elements essential for the normal development of the fetus. Its deficiency during pregnancy can result in the appearance of neural tube closure defects (NTD). Celiac disease, characterized by intolerance to gluten, can result in poor absorption of nutrients potentially leading to deficiency of folic acid which could possibly result in a higher prevalence of NTD in celiac mothers offspring. Objective: To determine the prevalence of CD in a group of mothers of children affected by NTD. Methods: Mothers with children affected by NTD attending the walking in clinic of the Neuropediatric Surgical Unit of the Brasilia General Hospital, underwent antiendomysium serologic testing (IgA-EMA), utilizing the indirect immunofluorescence method on cryostat sections of monkey esophagus. Results: Two hundred-eight mothers, aged between 19 and 43 years (average: 33 years; median: 32 years) were tested. All mothers showed negative results on the EMA test. Conclusions: The negative results of the study suggest that celiac disease is not a risk factor for NTD in the offspring. Consequently, at this moment, routine screening for CD in pregnant women in order to avoid a possible pregnancy aggravated by NTD would not be justifiable.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2008. / Submitted by Kathryn Cardim Araujo (kathryn.cardim@gmail.com) on 2009-10-13T12:32:57Z No. of bitstreams: 1 2008_CorinaElizabethSatler.pdf: 1131590 bytes, checksum: 80649edc392f09a889b588c1879a0c14 (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2010-02-10T23:37:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_CorinaElizabethSatler.pdf: 1131590 bytes, checksum: 80649edc392f09a889b588c1879a0c14 (MD5) / Made available in DSpace on 2010-02-10T23:37:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_CorinaElizabethSatler.pdf: 1131590 bytes, checksum: 80649edc392f09a889b588c1879a0c14 (MD5) Previous issue date: 2008-02-26 / O presente estudo tem como objetivo contribuir com o conhecimento sobre a modulação da memória declarativa pela emoção em idosos com provável Doença de Alzheimer (DA), utilizando um teste auditivo-visual com conteúdo emocional. Foram selecionados 20 sujeitos entre 60 e 80 anos de idade, voluntários do Hospital Universitário - Centro de Referência e Assistência ao Idoso, sendo 10 idosos normais e 10 idosos com suspeita de doença de Alzheimer leve, segundo os critérios do NINCDS-ADRDA e do Clinical Dementia Rating - CDR. Os dois grupos foram avaliados mediante uma bateria neuropsicológica para obter maior compreensão do estado mental de cada um dos participantes, posteriormente, por um teste áudio-visual de memória emocional. Este teste auditivo-visual é composto por uma história em duas versões, neutra e emocional, e um questionário de reconhecimento de múltipla escolha. Na primeira sessão, os participantes assistiram à história neutra, pontuaram a história e depois de assistirem novamente a história responderam o questionário de reconhecimento. Duas semanas após, eles assistiram a história com alertamento emocional, realizando o mesmo procedimento de teste. De forma geral, os resultados encontrados mostram que a prova de memória emocional poderia ser um instrumento sensível para detectar prejuízos mnemônicos em pacientes com DA. Analisando as pontuações dos idosos controles, foi observado que eles lembraram mais detalhes das histórias do que os pacientes com DA; mas nenhum dos grupos apresentou diferenças significativas em relação à versão da história. O motivo da ausência de ativação emocional no grupo controle pode ser devido à modificação dos questionários de reconhecimento a fim de evitar que os pacientes com DA apresentem um efeito chão. O baixo desempenho nos questionários pode ser indicador de prejuízo nas funções mnésicas característico da doença. Com relação à atribuição do valor emocional às histórias, os idosos sadios diferenciaram emocionalmente, em ambas as histórias, atribuindo maior emoção à versão com altertamento emocional. No entanto, este padrão de valoração emocional não foi observado nos pacientes com DA, pelo fato deles atribuírem altos valores de emoção a ambas as histórias. Para maior compreensão dos resultados obtidos, foram analisadas as pontuações dos pacientes com DA tanto no teste de memória emocional como nos testes neuropsicológicos, observando-se uma associação entre as tarefas e diversas funções cognitivas, especificamente aquelas que envolvem funções mnésicas. Desta forma, nos pacientes com DA, os resultados sugerem que as alterações na cognição estariam associadas à modificação no processamento dos estímulos (neutros e emocionais) produzindo, conseqüentemente, falhas no posterior reconhecimento das emoções. Assim, estas alterações, junto com o déficit de memória, podem explicar a ausência de facilitação da emoção na memória declarativa nos pacientes com DA. Futuros estudos, utilizando uma combinação de instrumentos neuropsicológicos e técnicas complementares de neuroimagem, podem contribuir no esclarecimento do processo de modulação da memória pela emoção nos pacientes com DA. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The present study aims at contributing to the knowledge about the modulation of declarative memory by emotion in elderly with Alzheimer’s disease (AD) using an auditory-visual test with emotional content. Twenty subjects were selected ranging in age from 60 to 80 years old, 10 normal elderly controls and 10 with a suspicion of mild AD, according to NINCDS-ADRDA and Clinical Dementia Rating Scale - CDR criterion, voluntaries of the University Hospital of Brasília – Assistance and Reference Center to the Elderly. Both groups were assessed with a neuropsychological battery in order to get an understanding of the mental state of each subject. The battery was used subsequently in the auditory -visual test of emotional memory. This auditory -visual test is compounded with a story in two versions, neutral and emotional and a recognizing questionnaire of multiple choices. During a first session, the subjects watched the neutral story and rated it as neutral or emotional. Then, the subjects watched the story again and filled a multiple choice questionnaire. After two weeks, the subjects watched the emotional story with the same procedure. In general, the results show that the test of emotional memory could be a sensitivity instrument to detect memory impairments in AD patients. The analysis of the control group’s scores showed that they remembered more details of the stories than the AD patients. However, neither group demonstrated significant differences regarding to the story version. The reason of the absence of emotional activation in the control group could be due to the modification of the recognizing questionnaire in order to avoid a floor effect in the AD patients. A low performance on the questionnaires could be a good indicator of the memory impairments characteristic of Alzheimer’s disease. Regarding to the attribution of the emotional value to the stories, the healthy elderly differentiate emotionally the stories attributing more emotion to the emotional version. However, this pattern of emotional valuation was not observed in the AD patients since they attributed high emotional values to both stories. For a better understanding of the results obtained, AD patient’s scores on the emotional test, as well as on the neuropsychological tests were analyzed. This indicated an association between the task and different cognitive functions, specifically those that involve memory functions. Therefore, this evaluation suggests that the cognitive alterations observed in the AD patients could be associated with the modification on the processing of the stimulus (neutral and emotional), producing consequently, problems in the subsequent recognition task. Thus, these alterations, together with the memory impairments, could explain the lack of facilitation of emotion on the declarative memory of AD patients. Future studies, using a combination of neuropsychological instruments and complementary techniques of neuroimage, could contribute to explanation of the process of modulation of memory by emotion in AD patients.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2006. / Submitted by Natália Cristina Ramos dos Santos (nataliaguilera3@hotmail.com) on 2009-11-01T17:27:42Z No. of bitstreams: 1 2006_David Neves.pdf: 1665803 bytes, checksum: 120b8a159902f36958452567ba6c8f3a (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2009-11-10T12:59:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_David Neves.pdf: 1665803 bytes, checksum: 120b8a159902f36958452567ba6c8f3a (MD5) / Made available in DSpace on 2009-11-10T12:59:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_David Neves.pdf: 1665803 bytes, checksum: 120b8a159902f36958452567ba6c8f3a (MD5) Previous issue date: 2006 / Esta tese descreve a identificação do gene mtaf (metiltioadenosina fosforilase) de T. cruzi, o qual contém uma fase aberta de leitura de 921 pb, sendo que sua a seqüência traduzida exibe a assinatura da família 2 das purina nucleosídeo fosforilase/MTAP. A seqüência da TcMTAF é 59% e 58% idêntica às seqüências MTAF do Trypanosoma brucei and Leishmania major, respectivamente, mas apresentando apenas 35% de identidade com a seqüência da MTAF humana. Além disso, o gene está representado como cópia única por genoma haplóide do parasita. A TcMTAF recombinante migra como um monômero de 33 kDa em gel de “SDS-PAGE” sob condições redutoras, mas se associa em oligômeros na ausência de agentes redutores. A MTAF nativa é expressa pelas três formas de desenvolvimento do T. cruzi. Apesar da enzima ser ativa em uma ampla faixa de pH e temperatura, ela exibe atividade máxima à 50 °C e um pH ótimo na faixa neutra. Ao contrário da MTAF humana, que degrada apenas MTA, a TcMTAF catalisa a clivagem de MTA, adenosina, deoxiadenosina e guanosina. Devido ao fato da TcMTAF e da MTAF humana possuírem diferentes parâmetros cinéticos e especificidade a substratos, a TcMTAF pode ser explorada como um novo alvo para o desenvolvimento de quimioterapia tripanocída. A rTcMTAP foi submetida a caracterização fisicoquímica. A enzima foi submetida à desnaturação térmica, visualizada por dicroísmo circular, em uma ampla faixa de pH, contudo não se observou uma relação entre a estabilidade da proteína e as condições de ionização do meio. A enzima demonstrou uma considerável resistência à desnaturação térmica, desdobrando-se em temperaturas acima de 79 °C. O conteúdo de estruturas secundárias da enzima é significativamente composto por α-hélices. Contudo, mesmo após a desnaturação térmica, a percentagem das α-hélices exibe pouca variação, principalmente no pH 7.4 e 9.0. Desnaturação química, induzida por hidrocloreto de guanidina e uréia, foi monitorada tanto por dicroísmo circular como por espectroscopia de fluorescência. A enzima suportou concentrações de até 3.6 M de hidrocloreto de guanidina e até 8 M de uréia sem alterar sua estrutura terciária. Os parâmetros termodinâmicos calculados a partir dos experimentos de desnaturação química e térmica demonstraram estar em harmonia. Em pH 6.0 e na presença de CTAB a enzima demonstrou uma resistência ainda maior à desnaturação térmica.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Psicologia, 2006. / Submitted by Natália Cristina Ramos dos Santos (nataliaguilera3@hotmail.com) on 2009-10-31T17:10:25Z No. of bitstreams: 1 2006_Daniella Maria Freire Meira Lima.pdf: 623594 bytes, checksum: e78d896f6727bffa7075a7ca02cac325 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2009-12-07T13:51:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_Daniella Maria Freire Meira Lima.pdf: 623594 bytes, checksum: e78d896f6727bffa7075a7ca02cac325 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-12-07T13:51:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_Daniella Maria Freire Meira Lima.pdf: 623594 bytes, checksum: e78d896f6727bffa7075a7ca02cac325 (MD5) Previous issue date: 2006-12 / Neste trabalho analisamos, a partir de uma perspectiva psicossocial, apoiados na Teoria das Representações Sociais, os discursos produzidos na mídia acerca da aids e em especial aqueles que de algum modo faziam referência aos adolescentes e jovens neste contexto. Entendemos que estes discursos são muito importantes na formação de crenças, valores e atitudes relacionados à aids e à adolescência/juventude, e, desta forma, acabam por dar sentido às práticas preventivas no cotidiano. Procuramos identificar como a revista VEJA, em tempos de efetiva distribuição gratuita de medicação anti-retroviral, fez circular e popularizou o conhecimento científico acerca da aids e da juventude no contexto da doença. Para tanto, estruturamos a pesquisa em dois estudos. No primeiro estudo - Aids na VEJA de 1999 a 2005 - todas as reportagens publicadas entre 1999 e 2005 que continham a palavra aids foram selecionadas e analisadas com auxílio do software ALCESTE (N=352). Verificamos que os discursos da revista acerca da aids estruturavam-se em três eixos, cada um deles apontando distintos elementos de representação. No primeiro eixo aspectos privados, íntimos, das pessoas soropositivas, são tornados públicos e a aids é abordada principalmente pelo seu caráter de doença sexual. Elementos de antigas representações são reavivados - a doença é novamente associada a comportamentos sexuais desviantes, de risco. No segundo eixo predominam os discursos de médicos e cientistas, e a revista cumpre o papel de tornar a epidemiologia e o tratamento da doença familiares às pessoas comuns. Foi a medicação anti-retroviral que permeou a ressignificação da aids como doença crônica, com a qual é possível viver, mas não muito bem. Por fim, no terceiro eixo, a aids é abordada como tema de política internacional e aspectos econômicos da doença são enfocados. A aids é significada como doença que nos países pobres, além de colocar em risco vidas humanas, compromete o desenvolvimento econômico e a coesão social. A doença é agora associada à pobreza, à ignorância. No estudo - Aids e Juventude na VEJA de 1999 a 2005 -troduzimos mais um parâmetro – adolescência – eliminando todas as reportagens que não continham pelo menos uma das seguintes palavras: juventude, jovem, jovens, adolescência, adolescente, ou adolescentes (N=152). As representações da aids encontradas no primeiro estudo, de algum modo, continuaram presentes no segundo estudo. Grande parte da informação relacionada aos jovens utilizou o discurso médico-científico enfatizando a necessidade da redução do comportamento de risco, em uma tentativa de favorecer o controle do comportamento sexual. Foram identificadas idéias de imaturidade e irresponsabilidade na representação dos jovens no contexto da aids, qualificando-os como sujeitos incapazes de se prevenir. __________________________________________________________________________________ ABSTRACT / On this study we analyze, from a psychosocial perspective, supported by the Social representations Theory, the speeches produced in the media concerning aids and especially the ones that somehow referred to the teenagers and young people in the disease context. We believe that these speeches are very important in the formation of beliefs, values and attitudes toward aids and to adolescence or youth, and, thus, are responsible for preventive practices in the everyday life. We try to identify how VEJA magazine, in times of effective free distribution of antiretroviral medication, circulated and popularized the scientific knowledge concerning aids and of youth in the disease context. To do so, we decided to structure the research on two studies. On the first study - Aids on VEJA from 1999 to 2005 - all the news published between 1999 and 2005 that contained the word aids were selected and analyzed with the help of the software ALCESTE (N=352). We verified that the speeches in the magazine concerning aids were structured in three axes, each one of them pointing distinct representation elements. On the first axis, private issues of people living with HIV were made public, and aids was boarded mostly by its characteristic of sexual disease. Elements of antique aids representations were revived - the disease is again associated with risk sexual behaviors. On the second axis predominate scientists and doctors' speeches, and the magazine accomplishes the role of turning epidemiology and the treatment of the disease familiar to common people. It was the antiretroviral medication that permeated the ressignification of aids as a chronic disease, with which it is possible to live, but not very well. Finally, on the third axis, the international, political and economic aspects of aids are focused. Aids was signified as a disease that on poor countries, besides putting in scratch human lives, pledges the economic development and the social cohesion. The disease is now associated with poverty and ignorance. On the study - Aids and Youth on VEJA from 1999 to 2005 - one parameter more was introduced – adolescence – there were eliminated all the reportages that did not contain at least one of the following words: Youth, young people, adolescence, teenager, or teenagers (N=152). The aids representations found on the first study, somehow, remained present on the second study. A great part of the information related to young people present on the doctor-scientific speeches emphasized the need of risk behavior reduction, in an attempt to favor the control of their sexual behavior. There were identified immaturity and irresponsibility ideas on young people representations in the aids context, they were qualified as subjects unable to prevent themselves.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Psicologia, 2006. / Submitted by Natália Cristina Ramos dos Santos (nataliaguilera3@hotmail.com) on 2009-11-14T18:28:57Z No. of bitstreams: 6 capitulo7_8.pdf: 224334 bytes, checksum: 0f730a645f7f106b63225df3428a79b4 (MD5) capitulo5_6.pdf: 654887 bytes, checksum: 171c1b05cd3a4b15423e8bd53befca02 (MD5) capitulo4.pdf: 142536 bytes, checksum: ce077d36c247b90590bc7f21c1e0eeed (MD5) capitulo3.pdf: 846027 bytes, checksum: 39933a1dbf714f742232562c25843028 (MD5) capitulo1_2.pdf: 331885 bytes, checksum: 44f4d5dbe4bf714a28d40d2a123fe11c (MD5) Deusivania V S Falcão_capa_sumario_introducao_objetivos.pdf: 484047 bytes, checksum: 4ed0e20faf22258a8030a34139e3777d (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2010-02-25T22:27:50Z (GMT) No. of bitstreams: 6 capitulo7_8.pdf: 224334 bytes, checksum: 0f730a645f7f106b63225df3428a79b4 (MD5) capitulo5_6.pdf: 654887 bytes, checksum: 171c1b05cd3a4b15423e8bd53befca02 (MD5) capitulo4.pdf: 142536 bytes, checksum: ce077d36c247b90590bc7f21c1e0eeed (MD5) capitulo3.pdf: 846027 bytes, checksum: 39933a1dbf714f742232562c25843028 (MD5) capitulo1_2.pdf: 331885 bytes, checksum: 44f4d5dbe4bf714a28d40d2a123fe11c (MD5) Deusivania V S Falcão_capa_sumario_introducao_objetivos.pdf: 484047 bytes, checksum: 4ed0e20faf22258a8030a34139e3777d (MD5) / Made available in DSpace on 2010-02-25T22:27:50Z (GMT). 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A partir da revisão bibliográfica elaborou-se uma entrevista aberta com roteiro semi-estruturado. Sua aplicação foi gravada, transcrita e, posteriormente, analisada segundo a técnica de Bardin. Também foi utilizado o FAST (Family System Test), instrumento que consiste em um processo de investigação bidimensional destinado a realizar uma análise estrutural e sistêmica das percepções dos sujeitos sobre as relações familiares. Os resultados apontaram que ao receber a notícia do diagnóstico, a maioria das filhas cuidadoras e de seus familiares reagiu de maneira desfavorável. Antes e após a doença, a subcategoria mais destacada por elas foram as relações familiares desfavoráveis (conflitos). A maioria delas nutria um sentimento de obrigação filial e gratidão perante os pais – motivos mais apontados para justificar o exercício deste papel. Verificou-se também que elas percebiam uma inversão hierárquica de poder em relação às mães com Alzheimer, ou seja, antes da doença, não tinham poder sobre estas, mas depois passaram a ter. Todavia, constatou-se que elas gostariam de exercer menos tal autoridade, revelando o descontentamento diante do fato de se sentirem, por vezes, mães das próprias mães. Embora as cuidadoras tenham percebido a inversão hierárquica em relação às mães, não apresentaram diminuição do vínculo afetivo (coesão) com as respectivas mães, permanecendo o que sentiam antes da doença. Isso confirmou que coesão e hierarquia são construtos independentes. Conclui-se pela importância de políticas públicas de saúde que divulguem e esclareçam o mal de Alzheimer, prestando apoio aos pacientes e seus familiares. Outrossim, deveria ser incentivada a busca pelos profissionais, logo que surgissem os primeiros sintomas da doença, favorecendo o tratamento e a promoção de saúde da família. O domínio das informações acerca da enfermidade pode favorecer o sistema familiar a tomar decisões e a efetivar medidas práticas, contribuindo para o equilíbrio emocional dos membros. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Alzheimer’s disease is the most common form of dementia, and one of its main consequences is the fact that it affects all the family system. This research aims at investigating the family relationships between daughters and their parents (father or mother, possible or probable AD patients). The sample consisted of thirty-two daughters and their respective parents (six fathers and twenty-six mothers). We started from a bibliographical review, out of which we devised an open interview with a semi-structured format. This was recorded, transcribed and later analyzed according to the Bardin technique. We also used FAST (Family System Test), a tool consisting of a bi-dimensional investigation process with the view to analyzing, structurally and systemically, the subjects’ perceptions insofar as their family relationships went. The results have pointed out that, upon receiving the news of the diagnosis, the majority of daughters and of their relatives reacted negatively. Prior and subsequent to the disease, the most highlighted sub-category was unfavourable family relationships (conflicts). Most daughters nurtured a sense of filial duty towards their parentsthe most frequent reason to justify their caregiving role. It was also verified that the daughters perceived a hierarchical inversion of power regarding their Alzheimer mothers. Although before the disease, the former had no power over the latter, the daughters came to exercise this power later on. Nevertheless, it was clear that the daughters would rather exercise their authority less often, which reveals their discontentment with being, in fact, their mothers' mothers at times. Even though the caregivers have realized the hierarchical inversion in relation to their mothers, the emotional bond (cohesion) towards their mothers did not grow less strong. This confirms that family cohesion and hierarchy are independent constructs. Therefore, we conclude that it is vital the promotion of public health policies which can enable the population to have a better understanding of Alzheimer’s disease, providing patients and their relatives with support. We also see the search for professionals as crucial when the disease is in its initial stage so as to facilitate treatment and to promote the health of the family. Having a great range of information about the disease may favour the family system when it comes to decision-making and to practical measures which can contribute to the emotional balance of those involved.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2006. / Submitted by Natália Cristina Ramos dos Santos (nataliaguilera3@hotmail.com) on 2009-10-31T17:28:44Z No. of bitstreams: 1 2006_Danielle Lacerda Pires.pdf: 4562953 bytes, checksum: 1c871e5bdd732392ec55d433358b37b4 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2011-01-19T13:28:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2006_Danielle Lacerda Pires.pdf: 4562953 bytes, checksum: 1c871e5bdd732392ec55d433358b37b4 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-01-19T13:28:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006_Danielle Lacerda Pires.pdf: 4562953 bytes, checksum: 1c871e5bdd732392ec55d433358b37b4 (MD5) Previous issue date: 2006 / Os artrópodes hematófagos são capazes de neutralizar defesas do hospedeiro durante repasto, devido à presença de ampla variedade de fatores anti-hemostáticos presentes em suas salivas como vasodilatadores, fatores antiplaquetários e anticoagulantes. O principal mecanismo de transmissão da Doença de Chagas é a contaminação do hospedeiro por excretas de triatomíneos infectados. O Triatoma infestans Klug, 1834, o principal vetor do mal de Chagas no Brasil, possui várias apirases em sua saliva que inibem a agregação plaquetária do hospedeiro. Neste estudo, nós mostramos que as apirases de 88, 82 e 79 kDa desse inseto são antigenicamente distintas e localizam-se na unidade D2 de sua glândula salivar. O conteúdo de uma unidade D2, e não os das outras, foi capaz de inibir a agregação de plaquetas, induzida por ADP, presentes em 1 mL de sangue. Em adição, identificamos pela primeira vez atividades apirásicas nos conteúdos de glândulas salivares de Rhodnius brethesi Matta, 1919; Rhodnius milesi Carcavallo, Rocha, Galvão, Jurberg & Valente 2001; Rhodnius pictipes Stal, 1872 e Rhodnius robustus Larrousse, 1927 por meio de testes enzimáticos utilizando ATP e ADP como substratos. Os ensaios enzimáticos, realizados a 37 °C e pH 8,3, revelaram que as atividades apirásicas são dependentes de cálcio. As atividades apirásicas das glândulas salivares de R. brethesi e R. pictipes foram parcialmente purificadas em coluna de Oligo dT Celulose. Para identificação de proteínas relacionadas com essa atividade, extratos glandulares e frações eluídas da coluna de Oligo dT, não fervidos e não reduzidos, foram submetidos à enzimografia após separação em SDS-PAGE. Este experimento revelou bandas de proteínas com atividades ATPásicas e ADPásicas de aproximadamente 44-45 kDa. Adicionalmente, experimentos de agregação plaquetária realizados in vitro demonstraram que 0,5 par de glândula salivar de R. brethesi, R. milesi, R. pictipes e R. robustus inibiram totalmente a agregação plaquetária induzida por ADP. Diferentemente das apirases de T. infestans, as de Rhodnius spp. são de baixa massa molecular e não fazem parte da família das 5´nucleotidases. A ampla distribuição das apirases nas salivas dos vetores da doença de Chagas e de outros artrópodes indica que estas enzimas têm importância fundamental na hematofagia. / Blood-feeding arthropods are able to constraints barriers imposed by host defenses, due to the presence of a wide range of antihemostatic factors in their saliva, including vasodilators, antiplatelet factors and anticoagulant. The main Chagas disease transmission mechanism is contamination of a host by faeces from triatominae infected. Triatoma infestans Klug, 1834, the main vector of Chagas disease in Brazil, expresses several apyrases in its saliva that inhibit the vertebrate host platelet aggregation. We show in this report that the 88, 82 E 79 kDa apyrases of the insect are antigenically different and localize within the salivary gland D2 unit. The content of one D2 unit, and not that of the others, was able to mediate fully inhibition of platelet aggregation induced by ADP, from 1 mL of human blood. In addition, we identified for the first time apyrase activities in the saliva of Rhodnius brethesi Matta, 1919; Rhodnius milesi Carcavallo, Rocha, Galvão, Jurberg & Valente 2001; Rhodnius pictipes Stal, 1872 e Rhodnius robustus Larrousse, 1927. The tests, which were accomplished at 37 °C and pH 8,3, revealed that these apyrase activities are dependent upon Ca+2 . The apyrase activities present in the salivary glands of R. brethesi e R. pictipes were then partially purified on an Oligo dT Cellulose® column. To identify proteins related to apyrase activity, salivary gland content and eluted fractions from the Oligo dT column were submitted to SDS-PAGE enzimography without previous boiling or reduction of the samples. This experiment allowed the identification of 44-45 kDa protein bands displaying both ATPase and ADPase activities. In vitro platelet aggregation assays showed that the content of 0,5 salivary gland pair R. brethesi, R. milesi, R. pictipes e R. robustus completely abolished platelets aggregation induced by ADP. Differently fromf T. infestans apirases, Rhodnius spp. express apyrases of low molecular masses that aren’t members of the 5´nucleotidase family. The wide distribution of apyrases in the saliva of Chagas disease vectors and other arthropods indicate that these enzymes play an important role during the hematophagous process.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2007. / Submitted by wesley oliveira leite (leite.wesley@yahoo.com.br) on 2009-12-08T17:28:16Z No. of bitstreams: 1 2007_DanielFrancaVasconcelos.PDF: 1699785 bytes, checksum: b28e70030f30f52c64711e4e97d8a94a (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2010-01-07T00:23:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_DanielFrancaVasconcelos.PDF: 1699785 bytes, checksum: b28e70030f30f52c64711e4e97d8a94a (MD5) / Made available in DSpace on 2010-01-07T00:23:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_DanielFrancaVasconcelos.PDF: 1699785 bytes, checksum: b28e70030f30f52c64711e4e97d8a94a (MD5) Previous issue date: 2007 / Justificativa: A doença de Chagas, apesar do controle, persiste como sério problema de saúde pública nos países em desenvolvimento, acometendo entre 15 e 20 milhões de indivíduos. Vários estudos sobre a função autonômica na doença de Chagas têm sido realizados. Na forma indeterminada, os estudos são escassos e com resultados conflitantes. O real papel da disfunção autonômica na evolução da doença não está bem estabelecido. Objetivos: Os objetivos do presente estudo foram: a) avaliar a função autonômica cardíaca por meio da variabilidade da freqüência cardíaca e as variáveis morfofuncionais ecocardiográficas em indivíduos portadores de cardiopatia chagásica e naqueles com a forma indeterminada da doença comparando-os entre si e com indivíduos saudáveis; b) correlacionar as variáveis morfofuncionais ecocardiográficas com as variáveis da função autonômica. Indivíduos e métodos: Foram avaliados 45 indivíduos, sendo 17 portadores da forma indeterminada (5 homens) com idade mediana de 39anos (variação interquartil 35-45,5), 13 portadores da forma cardíaca (7 homens) com idade mediana de 44 anos (35,5-49,5) e 15 indivíduos saudáveis (9 homens) com idade mediana de 43 anos (40-46). Os grupos foram semelhantes estatisticamente quanto à idade e ao gênero. Todos os indivíduos foram submetidos ao estudo da variabilidade da freqüência cardíaca (VFC) em registro eletrocardiográfico de 5 minutos na posição supina e 5 minutos na posição ortostática ativa com a obtenção de índices temporais e espectrais da variabilidade da freqüência cardíaca. Em seguida, os indivíduos foram submetidos ao ecocardiograma em repouso, durante o esforço isométrico com 30% da capacidade voluntária máxima, e 3 minutos após o esforço. Os grupos foram comparados pelo Teste de Kruaskal-Wallis, seguido pelo teste de Dunn. A análise correlativa entre as variáveis ecocardiográficas e os índices da função autonômica cardíaca foi feita pelo teste de Spearman. Resultados: Na análise dos resultados, os índices temporais da VFC (SDNN, CV, pNN50 e r-MSSD) se mostraram significativamente (0,0003<p<0,01) deprimidos nos chagásicos cardiopatas em comparação com o grupo controle, tanto na posição supina quanto na ortostática. A VFC também esteve deprimida nos indivíduos com a forma indeterminada na posição supina (SDNN, CV, pNN50 e r-MSSD) e na posição ortostática (CV) com nível de significância estatística entre 0,01 e 0,05. Com relação aos índices espectrais, os resultados foram a redução da AT, AabBF, AabAF, tanto na forma cardíaca , quanto na indeterminada e nas posições supina e ortostática (0,0001<p<0,004). A ArBF foi significativamente (p=0,01) menor nos chagásicos (IND) na posição supina e nos cardiopatas na posição ortostática (p=0,02). Não houve diferenças morfológicas da amostra do ponto de vista ecocardiográfico na situação de repouso e após o esforço. O DDVE foi maior nos cardiopatas durante o esforço isométrico (p=0,04), assim como a ESPP que foi maior nos dois grupos chagásicos em comparação ao controle (p=0,006). Os parâmetros de avaliação da função diastólica foram semelhantes entre os grupos em repouso, bem como o IPM. Entretanto durante o esforço o IPM foi maior nos cardiopatas (p=0,02). A análise correlativa entre as variáveis ecocardiográficas e a função autonômica mostrou correlação significativa e inversa entre a rampa E-F do fluxo mitral com r-MSSD e AabAF na posição supina (rs=-0,57; p=0,02) na forma indeterminada. A relação E/A apresentou correlação positiva com a AnAF (rs=0,59; p=0,01) e inversa com a razão BF/AF (rs=-0,59; p=0,01). O Doppler tecidual do anel septal da valva mitral teve correlação positiva com AnAF (rs=0,50; p=0,04) e inversa com a razão BF/AF (rs=-0,48; p=0,05). No grupo cardiopata, a correlação foi significativa entre o DDVE e r-MSSD (rs=- 0,56; p=0,05). O DSVE apresentou correlação com MiRR (rs=-0,59; p=0,03), SDNN (rs=- 0,73; p=0,005), CV (rs=-0,58; p=0,04), r-MSSD (rs=-0,77; p=0,002), AT (rs=-0,68; p=0,01), AabBF (rs=-0,71; p=0,007) e AabAF (rs=-0,68; p=0,01). O átrio esquerdo teve correlação significativa com a AnBF (rs=0,57; p=0,04), com a AnAF (rs=-0,57; p=0,04) e com a razão BF/AF (rs=-0,57; p=0,04). A relação VDF/m se correlacionou com a r-MSSD (rs=-0,55; p=0,05) e com a AabAF (rs=-0,56; p=0,05). Entre os parâmetros de função sistólica, houve correlação positiva entre a FE e o ∆d%a AT (rs=0,57; p=0,04) e AabBF (rs=0,62; p=0,02). Entre a Vcf e AabBF (rs=0,63; p=0,02) e AabAF (rs=0,64; p=0,02). Na função diastólica houve correlação entre E/A e AnBF (rs=0,66; p=0,01), AnAF (rs=-0,66; p=0,01) e razão BF/AF (rs=0,68; p=0,01). Entre a rampa E – F e AnBF (rs=-0,57; p=0,04), AnAF (rs=0,57; p=0,04) e razão BF/AF (rs=-0,57; p=0,04). A relação E/e’ teve correlação com a AnBF (rs=0,62; p=0,02), com a AnAF (rs=-0,62; p=0,02) e com a razão BF/AF (rs=0,62; p=0,03). Com relação ao IPM a correlação foi entre a AnBF (rs=-0,62; p=0,02), AnAF (rs=0,62; p=0,02) e a razão BF/AF (rs=-0,62; p=0,02). Conclusões: Na amostra estudada a doença de Chagas apresentou depressão da função autonômica cardíaca total, tanto simpática, como parassimpático, tanto na forma cardíaca, quanto na forma indeterminada, mesmo na ausência de disfunção mecânica. Os resultados fortalecem a hipótese que a disfunção autonômica precede a disfunção mecânica. Existe correlação entre as funções cardíacas sistólica e diastólica avaliadas pela ecocardiografia e a função autonômica, sem que haja necessariamente relação de causa e efeito, porém, é provável que a disfunção autonômica tenha colaborar para a evolução da doença. / Background: Chagas’ disease, until ours days, persist as a public health challenge, with about 15 to 20 million subjects infected in developing countries of Latin America. Several studies about autonomic dysfunction in Chagas’ disease have been done. However, studies involving the indeterminate form of the disease are scarce and the results are apparently conflicting. The real meaning of autonomic impairment in pathogenesis and evolution of Chagas’ disease still persist. Objectives: The objectives of the present study are: a) evaluate the cardiac autonomic function by five minutes heart rate variability and the morphologic and functional parameters using echocardiographic register; b) to correlate the morphological and functional echocardiographic parameters with temporal and spectral heart rate variability indexes. Methods: Time- and frequency-domain of 5-minute heart interval rate series variability in supine and standing position, and Doppler echocardiographic left systolic and diastolic morph-functional parameters were obtained at rest, during handgrip at 30% of maximal voluntary capacity and after 3 minutes of recovery. Variables were comparatively evaluated in 17 chagasic with indeterminate form, 13 with heart disease and in 15 control healthy subjects using the Kruskal-Wallis Test followed by the Dunn’s multiple comparative test at a significance level of p<0.05. For correlative analyses between morph-functional echocardiographic and autonomic indexes the Spearman correlation coefficient were applied. Results: In the supine position, reduced time-domain (SDNN, CV, pNN50, r-MSSD) (p=0.0002-0.0005) and absolute frequency-domain (total power, low- and high-frequency power) (p=0.0001-0.003) indexes were observed in both chagasic groups. In standing position, time-domain indexes were reduced only in heart disease group (p=0.009-0.01), while frequency-domain indexes in both chagasic groups (p=0.002-0.004). Sympathovagal balance (normalized low- and high-frequency power, low-to-high-frequency power ratio) remained comparable in chagasic and control groups in both postures (p=0.21-0.78). No significant differences between the three groups were observed for any achocardiographic variable (p=0.07-0.77). In indeterminate form the results of correlative analyses shows a inverse and significative correlation between mitral flow E-F slope and r-MSSD (rs=-0.57; p=0.02) and absolute High Frequency spectral area (HF) (rs=-0.57; p=0.02). Between E/A ratio and LF/HF ratio (rs=-0.59; p=0.01), e’/a’ ratio and LF/HF (rs=-0.48; p=0.05). The correlation was positive between E/A and e’/a’ ratio and normalized HF area (rs=0.59; p=0.01 and 0.50; p=0.04). In cardiac form, the correlation was positive and significative between both EF and ∆d% with MiRR sup (rs=0.64; p=0.02), r-MSSD (rs=0.63; p=0.02), Total Power ort (rs=0.57; p=0.04), absolute LF ort (rs=0.62; p=0.02). The Vcf agaisnt MiRR sup (rs=0.64; p=0.02), ort (rs=0.56; p=0.05), r-MSSD ort (rs=0.76; p=0.002), absolute LF ort (rs=0.64; p=0.02). In variables of diastolic function the correlative analyses was positive and significative between E/A and normalized LF area sup (rs=0.66; p=0.01) and LF/HF ratio sup (rs=0.68; p=0.01), between E-F slope and normalized HF area ort (rs=0.57; p=0.04), E/e’ and normalized LF area sup (rs=0.62; p=0.02) and LF/HF ratio sup (rs=0.62; p=0.03). The correlative analyses was positive and inverse between E/A and normalized HF sup (rs=-0.66; p=0.01), between E-F slope and normalized LF area ort (rs=- 0.57; p=0.04) and LF/HF ratio (rs=-0.57; p=0.04) and E/e’ ratio with normalized HF area sup (rs=-0.62; p=0.02). The Tei index had a positive and significative correlation with normalized HF area sup (rs=0.62; p=0.02) in cardiac form. This index was inverse with normalized LF area sup (rs=-0.62; p=0.02) and LF/HF ratio sup (rs=-0.62; p=0.02). There was not a significativa correlation between Tei index and echocardiographic parameters in indeterminate forma of Chagas’ disease. Conclusions: In this study, the Chagas’ disease presents with depressed absolute short- term heart interval variability, without a impaired sympathovagal balance in cardiac and indeterminate forms, more severe but not significant in the first. There are no differences in morph-functional variables by echocardiography between chagasic with oligo or no symptoms and control groups. The correlative analyses suggest that the autonomic impairment and has a significativa correlation with echocardiographic systolic and diastolic parameters in cardiac and indeterminate form of Chagas’ disease, without a necessary straight relationship of cause and effect.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2009. / Submitted by Raquel Viana (tempestade_b@hotmail.com) on 2010-05-04T18:30:08Z No. of bitstreams: 1 2009_MichellyZanchin.pdf: 987446 bytes, checksum: 76b6b2c09f60368bce9881c2dbb3508f (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-06-23T23:00:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_MichellyZanchin.pdf: 987446 bytes, checksum: 76b6b2c09f60368bce9881c2dbb3508f (MD5) / Made available in DSpace on 2010-06-23T23:00:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_MichellyZanchin.pdf: 987446 bytes, checksum: 76b6b2c09f60368bce9881c2dbb3508f (MD5) Previous issue date: 2009 / Introdução: A infecção pelo vírus da Hepatite C (VHC) é um problema de saúde pública em todo o mundo. A Hepatite C constitui no Brasil uma das principais doenças infecciosas encontradas em gestantes que podem ser transmitidas da mãe para o filho. A co-infecção com o HIV representa um grande problema para as gestantes já infectadas com VHC, devido, entre outros fatores, elevar a carga viral do VHC, aumentando as chances de transmissão vertical. Objetivos: Verificar a prevalência de Hepatite C nas gestantes do Estado do Mato Grosso do Sul e avaliar a taxa de co-infecção com HIV entre as gestantes com casos de Hepatite C confirmados, caracterizando também a prevalência de acordo com a faixa etária e as Microrregiões do Estado. Método: Foi realizado um levantamento dos dados de todas as gestantes atendidas pelo Programa de Proteção a Gestante do Estado do Mato Grosso do Sul no período de novembro de 2002 a dezembro de 2007. Um total de 192.871 resultados de testes para o VHC em gestantes foram analisados por meio de busca em um banco de dados, onde informações como a idade e o município de origem das gestantes infectadas também estavam disponíveis. Foi analisada também, entre as gestantes positivas para o VHC, a existência de co-infecção com HIV. Resultados: Das 192.871 gestantes triadas nesse período, 244 (0,13%) apresentaram-se positivas para o VHC e 6 (2,44%) dessas gestantes positivas apresentaram co-infecção com o HIV. A prevalência foi mais relacionada com a faixa etária de 23 - 27 anos (28,83%) e com a Microrregião de Campo Grande. Conclusões: A prevalência da infecção pelo VHC nas gestantes apresentou-se dentro das variações de frequência encontradas na literatura mundial, sendo considerada baixa quando comparada a alguns trabalhos disponíveis e inferior ao padrão de endemicidade relatado pelo Programa Nacional de Prevenção e Controle das Hepatites Virais, do Ministério da Saúde. A taxa de co-infecção com HIV também apresentou-se dentro dos padrões já publicados, porém bem abaixo em relação a outros estudos. ________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: The infection of hepatitis C virus (HCV) is a public health problem worldwide. Hepatitis C in Brazil is a major infectious disease found in pregnant women that can be transmitted from mother to child. Co-infection with HIV is a major problem for women already infected with HCV, because, among other factors, increase of HCV viral load, increasing the chances of vertical transmission. Objectives: To assess the prevalence of hepatitis C in pregnant women of the State of Mato Grosso do Sul and to evaluate the co-infection with HIV among pregnant women with confirmed cases of Hepatitis C, also featuring the prevalence according to age and the Microregion the State. Method: A survey of data from all pregnant women at the Pregnancy Protection Program of the State of Mato Grosso do Sul in the period November 2002 to December 2007. A total of 192.871 tests for the results of HCV in pregnant women were analyzed using the search in a database, where information such as age and municipality of origin of the infected pregnant women were also available. Was also analyzed, among women positive for HCV, the existence of co-infection with HIV. Results: Of the 192.871 women screened during this period, 244 (0,13%) were positive for HCV and 6 (2,44%) of these women had positive co-infection with HIV. The prevalence was more related to the age group 23 - 27 years (28,83%) and the microregion of Campo Grande. Conclusions: The prevalence of HCV infection in pregnant women showed up in the frequency of variations found in the literature and is considered low when compared to some jobs available and lower the standard of endemicity reported by the National Program for Prevention and Control of Viral Hepatitis of the Ministry Health A co-infection with HIV also presented within the standards already published, but well below in relation to other studies.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2008. / Submitted by Allan Wanick Motta (allan_wanick@hotmail.com) on 2010-07-08T19:32:20Z No. of bitstreams: 1 2008_CarlosMaximilianoRMFilho.pdf: 1415168 bytes, checksum: 458bfff36d1c3017ce67dc4f8ca8205a (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-07-14T22:23:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_CarlosMaximilianoRMFilho.pdf: 1415168 bytes, checksum: 458bfff36d1c3017ce67dc4f8ca8205a (MD5) / Made available in DSpace on 2010-07-14T22:23:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_CarlosMaximilianoRMFilho.pdf: 1415168 bytes, checksum: 458bfff36d1c3017ce67dc4f8ca8205a (MD5) Previous issue date: 2008 / A proteína acessória do HIV-1 Vpr ativa ATR induzindo um estresse replicativo do DNA. A ativação de ATR resulta num prolongamento da fase G2 do ciclo celular e termina induzindo a célula entrar em apoptose. No presente estudo investigou-se a função do sistema ubiquitina/proteassoma no contexto da atividade de Vpr. Reporta-se que esse sistema essencial para Vpr disparar o ponto de checagem de dano ao DNA na fase G2. Também investigou-se em detalhes as E3 ligases manipuladas por Vpr nesse processo. Foi encontrado que Vpr se liga a DCAF1, uma subunidade de Cul4-A/DDB1 E3 ligase. Mutações no domínio C-terminal da Vpr(R80A) mutante, a qual é capaz de se ligar à DCAF1, é incapaz de realizar a ativação do ponto de checagem do ciclo celular e possui um caráter dominante negativo. Em contraste, a mutação Q65R, na cadeia rica em leucina de Vpr inibe a interação com DCAF1, resultando numa forma inativa de Vpr; portanto, considerar-se-ia, então, que essa interação é requerida porém não suficiente para Vpr induzir o prolongamento de G2. Foi, então, proposto um modelo no qual Vpr recruta, através do seu domínio C-terminal, uma proteína celular desconhecida para ser degradada pelo sistema de ubiquitina- proteassoma e isto causaria o bloqueio do ciclo celular. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / HIV-1 Vpr is a viral accessory protein that activates ATR through the induction of DNA replication stress. ATR activation results in cell cycle arrest in G2 and induction of apoptosis. In the present study, we investigate the role of the ubiquitin/proteasome system (UPS) in the above activity of Vpr. We report that the general function of the UPS is required for Vpr to induce G2 checkpoint activation. We further investigated in detail the specific E3 ubiquitin ligase subunits that Vpr manipulates. We found that Vpr binds to the DCAF1 subunit of a cullin 4a/DDB1 E3 ubiquitin ligase. The carboxyterminal domain Vpr(R80A) mutant, which is able to bind DCAF1, is inactive in checkpoint activation and has dominant-negative character. In contrast, the mutation Q65R, in the leucine-rich domain of Vpr that mediates DCAF1 binding, results in an inactive Vpr devoid of dominant negative behavior. Thus, the interaction of Vpr with DCAF1 is required, but not sufficient, for Vpr to cause G2 arrest. We propose that Vpr recruits, through its carboxy terminal domain, an unknown cellular factor that is required for G2- to-M transition. Recruitment of this factor leads to its ubiquitination and degradation, resulting in failure to enter mitosis.