Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2009. / Submitted by Elna Araújo (elna@bce.unb.br) on 2011-06-07T14:32:11Z No. of bitstreams: 1 2009_AiltonDomiciodaSilva.pdf: 5229886 bytes, checksum: f814c0a109627cfc1a8259cedf664424 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2011-06-14T15:53:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_AiltonDomiciodaSilva.pdf: 5229886 bytes, checksum: f814c0a109627cfc1a8259cedf664424 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-06-14T15:53:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_AiltonDomiciodaSilva.pdf: 5229886 bytes, checksum: f814c0a109627cfc1a8259cedf664424 (MD5) / No Distrito Federal, entre 2001 a 2006 quase 70,0% dos casos suspeitos de dengue não se confirmaram esta enfermidade e permaneceram sem elucidação diagnóstica. Frente a essa problemática, o estudo visou ampliar a vigilância das síndromes febris agudas (SFA) dentre os casos suspeitos de dengue com sorologia não-reagente. Estudo descritivo composto por 144 pessoas residentes no DF, entre janeiro a maio de 2008. Procedeu-se a coleta de sorologia na convalescença para pesquisa de IgM para dengue, quando não confirmado, pesquisou-se anticorpos para rubéola, leptospirose e hantavirose, seletivamente. O estudo foi aprovado no Comitê de Ética em Pesquisa da SES-DF, sob parecer nº 215/2007. A incidência encontrada foi de 27,1%. Para dengue a proporção de positividade observada foi de 11,8%, rubéola 4,0% e leptospirose, 14,1%. Não houve confirmação de hantavirose. Na comparação da dengue, rubéola e leptospirose com a raça/cor (p=0,0351) e escolaridade (p=0,0096) observaram-se diferença estatística. Quando comparado sintoma de dispnéia na dengue e leptospirose (p=0,0124), dengue e rubéola com exantema/petéquias (p=0,0007) observaram-se associação estatística. A execução de atividade em terreno baldio entre casos diagnosticados de leptospirose apresentou um risco relativo de 3,75 vezes (p=0,0135). A dengue esteve presente em 34,5% das Regiões Administrativas, a rubéola em 17,1% e a leptospirose, 37,9%. Cerca de 85,0% das enfermidades ocorreram no primeiro trimestre, período chuvoso no DF. Os achados desta casuística referentes a dengue, a rubéola e a leptospirose representaram um percentual de 3,5%, 6,9% e 170,0%, respectivamente, em relação aos totais de casos confirmados existentes no SINAN/DF, no mesmo período da pesquisa.A vigilância de SFA envolvendo suspeitos de dengue foi importante na elucidação de outras doenças fortalecendo a vigilância epidemiológica. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / In the Federal District from 2001 to 2006, almost 70.0% of suspected cases of dengue fever have not confirmed this disease and remain without diagnosis. Due to this problem, the study aimed to expand the surveillance of acute febrile syndrome (AFS) among the suspected cases of dengue fever with serology nonreactive. The descriptive study was composed of 144 persons residing in the DF, from January to May 2008. The serology for IgM to dengue fever was collected in the convalescent persons; cases not confirmed were investigated for antibodies to rubella, leptospirosis and hantavirus, selectively. The study was approved by the Committee of Ethics in Research of the SES-DF, in the opinion No. 215/2007. The incidence found was 27.1%. The proportion of dengue fever was 11.8%, rubella 4.0%, and leptospirosis 14.1%. There was no confirmation of hantavirus infection. In the comparison of dengue fever, rubella and leptospirosis with race / color (p = 0.0351) and education (p = 0.0096) a statistical difference was observed. Compared symptom of dyspnea in dengue fever and leptospirosis (p = 0.0124), dengue fever and rubella with rash / petechiae (p = 0.0007), a statistical association was observed too. The implementation of activity in a vacant lot between diagnosed cases of leptospirosis had a relative risk of 3.75 times (p = 0.0135). Dengue fever was present in 34.5% of administrative regions, rubella in 17.1% and leptospirosis in 37.9%. About 85.0% of illnesses occurred during the first quarter, rainy season in the FD. The findings of this case related to dengue fever, leptospirosis and rubella represent a percentage of 3.5%, 6.9% and 170.0% respectively compared to the total of confirmed cases registered in SINAN / DF, during the same period of search. The monitoring of AFS involving suspected cases of dengue fever was important in the elucidation of other diseases and strengthened the epidemiological surveillance.

Submitted by Pedro Henrique Rodrigues (pedro.henriquer@ufpe.br) on 2015-03-05T16:55:31Z No. of bitstreams: 2 Filipe Santana da Silva - Dissertação de Mestrado - Centro de Informática - 2012.pdf: 1889466 bytes, checksum: 40445fee934930648cf335bdbaebbc31 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-05T16:55:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Filipe Santana da Silva - Dissertação de Mestrado - Centro de Informática - 2012.pdf: 1889466 bytes, checksum: 40445fee934930648cf335bdbaebbc31 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2012-03-05 / Muitas aplicações não conseguem tratar a ambiguidade presente em fontes de dados e informação. Tal fato ganhou maior notoriedade a partir do desenvolvimento de tecnologias relacionadas à web semântica, principalmente com as ontologias. O estudo de modelos com certo grau de complexidade representacional relacionados às doenças infecciosas, especificamente as Doenças Tropicais Negligenciáveis (DTNs), vem gradualmente ganhando interesse por parte dos pesquisadores. O presente estudo visa representar um conjunto de conhecimento complexo sobre a transmissão de Doenças Tropicais Negligenciáveis e os possíveis processos que ocorrem a partir do desenvolvimento destas, como o falecimento de indivíduos, em uma ontologia: a NTDO (Neglected Tropical Disease Ontology). A partir do modelo básico de transmissão de doenças, incluindo vetores artrópodes, e do conteúdo tabular com a representação de vetores, patógenos, hospedeiros, locais de ocorrência e doenças causadas, foi possível descrever um Padrão de Projeto Ontológico (PPO) para a representação de tais processos, refinados e testados segundo consultas em Lógica de Descrições. Outros resultados foram encontrados a partir da representação de processos complexos relacionados ao falecimento de indivíduos por causas específicas. No presente estudo, conhecimento acerca das DTNs foi descrito a partir de informações legadas presentes em tabelas, e puderam ser expressas em uma ontologia formal. A NTDO evidencia eventos complexos com marcações temporais e sequência de processos, desde a transmissão de um patógeno ao falecimento de um indivíduo por uma doença. Assim, a NTDO pode permitir a construção de consultas inteligentes em bancos de dados de Morbidade e Mortalidade. Ainda, pode permitir uma inovação no que concerne a vigilância de casos de doenças relacionados a infecções por doenças, principalmente negligenciadas, por possibilitar o estudo de um amplo conjunto de variáveis, inerentes aos registros de morbidade e mortalidade, e a conseqüente construção de novo conhecimento sobre os dados de saúde.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2014-10-20T16:22:11Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - José Alberto Alvarenga - 2008.pdf: 340716 bytes, checksum: e24f369f53383dc817cf234c17729275 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-10-20T17:09:06Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - José Alberto Alvarenga - 2008.pdf: 340716 bytes, checksum: e24f369f53383dc817cf234c17729275 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-20T17:09:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - José Alberto Alvarenga - 2008.pdf: 340716 bytes, checksum: e24f369f53383dc817cf234c17729275 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2008-08-25 / It is estimated that until the year 2020, in Brazil, 13 % of the population will be constituted by the elderly (population who are above 60 years old), counting 30 million people. The frequency and the gravity of the infectious diseases spread with age. Among these days, infectious diseases are the third cause of death after the sixty’s. The physical changes and the lack of immunological response in the elderly worsen day after day, favoring the infections’ gravity. Moreover, chronic diseases treated with immunosuppressor drugs and other, repeated hospitalizations and nutritional deficiency are addictive factors which explain this kind of diseases to grow worse in this specific population. This dissertation is about a retrospective essay with a descriptive analysis raising medical documents from patients with infectious meningitis in the Hospital de Doenças Tropicais (HDT), State of Goiás, Brazil, and aimed to evaluate the epidemiologic and clinical profile of the infectious meningitis in the elderly, the level of clinical suspicion and confirmation in health services in our State. About 110 cases of meningitis in elderly were notified between the years 2000 and 2006. From all cases, 64 (58,71%) were confirmed, 64,0% of non-specified infection meningitis, 14,06%, fungus meningitis (4,68%), pneumococcol meningitis (12,5%), tuberculosis meningitis (3,12%) and meningococcal meningitis(1,5%). The mortality was higher in non-specified meningitis (65,21%), and fungus, tuberculosis and pneumococcol meningitis presented the highest lethality. The long period between the clinical suspicion of meningitis, with 6,41 days until the diagnose was confirmed, delayed treatment and surely contributed to raise the number of the infections and deaths. The unsuitable medical graduation in elderly’s support has delayed diagnose, extending the interval between the beginning of the symptoms and the effective treatment, and so on, increasing the mortality index of this population. The proposal of this essay is to build a preferable attendance service for the elderly, with basic knowledge in infectious diseases in this particular population, favoring the fast diagnose and the effective treatment in order to reduce the mortality in this age group. / No Brasil estima-se que até o ano 2020 a população de idosos deva chegar a 30 milhões de pessoas (13% do total) e a esperança de vida alcançará 70,3 anos. A frequencia e a gravidade das doenças infecciosas aumentam com o envelhecimento e hoje representam a terceira causa de morte após os 60 anos. As alterações fisiológicas e a queda da função nos órgãos de resposta imune do idoso acentuam-se progressivamente, favorecendo a superveniencia das infecções. Além disso, as moléstias cronicas associadas ao tratamento com imunossupressores e outras drogas, as hospitalizações repetidas e a deficiencia nutricional são fatores suplementares que explicam a elevada freqüência das moléstias infecciosas nesta faixa etária. O objetivo do estudo foi avaliar o perfil clínico e epidemiológico das meningites infecciosas na população idosa, o nível de suspeição e de confirmação diagnóstica nos serviços de saúde do Estado de Goiás, mediante análise dos registros de prontuários de pacientes portadores de meningites infecciosas, internados no Hospital de Doenças Tropicais – (HDT) do Estado de Goiás, Brasil, referência regional para doenças transmissíveis. No período de 2000 a 2006 foram internados 110 pacientes com suspeita de meningite, sendo a doença confirmada em 64 (58,71%), de acordo com os critérios do SINAN-MS. Predominaram as meningites bacterianas não especificadas (64,02%), seguindo-se a pneumocócica (14,06%), viral (12,5%), as fúngicas (4,68%), a tuberculosa (3,12%) e a meningocócica (1,56%). O maior número de mortes ocorreu nas meningites não especificadas (65,21%). As meningites tuberculosas, fúngicas e pneumocócica apresentaram maior letalidade. Observou-se um período entre o início do quadro clínico e a confirmação do diagnóstico (média de 6,4 dias) nos pacientes do interior, situação que resultou em retardo na instituição do tratamento antimicrobiano adequado e em maior letalidade. Os dados do presente estudo mostram que o atendimento à saúde pouco voltado para os idosos resulta em delonga no diagnóstico e na instituição da terapeutica antimicrobiana adequada, responsáveis pela elevada mortalidade por doenças infecciosas nos idosos, destacadamente as meningites. Daí a necessidade de se construir uma rede de atendimento preferencial a pacientes idosos, com pessoal qualificado em doenças infecciosas, com vistas a diminuir o drástico impacto destes agravos nos idosos.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-07-25T14:03:16Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_AnaliseMolecularRotavirus.pdf: 10923869 bytes, checksum: da8e1b57dee11ef6c88b67fcac9da851 (MD5) / Approved for entry into archive by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2017-07-27T14:11:32Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_AnaliseMolecularRotavirus.pdf: 10923869 bytes, checksum: da8e1b57dee11ef6c88b67fcac9da851 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-27T14:11:32Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_AnaliseMolecularRotavirus.pdf: 10923869 bytes, checksum: da8e1b57dee11ef6c88b67fcac9da851 (MD5) Previous issue date: 2016-10-31 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O rotavírus do grupo A (RVA) é o principal agente viral associado às gastrenterites agudas, ocasionando cerca de 200 mil óbitos entre crianças menores de cinco anos de idade anualmente. Pertencem à família Reoviridae, gênero Rotavirus, possui RNA de dupla fita (dsRNA) com 11 segmentos codificando 12 proteínas, sendo seis estruturais (VPs) e seis não estruturais (NSPs). Cada proteína designa um genótipo específico de RVA, sendo a proteína VP7 responsável pelo genótipo G, existindo, atualmente, 32 variantes genéticas. O genótipo G9 emergiu em escala global na década de 90, período este anterior a introdução da vacina de RVA no Brasil em 2006, sendo continuamente detectado até os dias atuais. Este estudo objetivou descrever a frequência e a constelação genética associada ao genótipo G9 circulantes na região Norte do Brasil. Foram selecionadas 50 amostras coletadas de 1999 a 2013, sendo 45 G9P[8], 2 G9P[4] e 3 G9P[6], nas quais se procedeu a suspensão e extração do dsRNA para posterior amplificação e sequenciamento de nucleotídeos. Foi observado que no período pré-introdução da vacina a frequência de G9 alcançou frequência de 43%, enquanto que após a introdução da vacina, a maior frequência obtida foi 12,5% (2008 a 2010). A análise filogenética do gene VP7 demonstrou que todas as amostras agruparam na linhagem III de G9, observandose modificações aminoacídicas em sítios antigênicos quando comparadas às cepas vacinais. Tal fato foi observado também na análise do gene VP4-P[8], os quais agruparam na linhagem III de P[8], enquanto que VP4-P[4] agrupou na linhagem V e VP4-P[6] na linhagem I. Todas as amostras G9P[6] e G9P[4] foram associadas à constelação DS-1, genogrupo 2, enquanto que as amostras G9P[8] apresentaram a constelação Wa, genogrupo 1, com exceção de uma amostra que apresentou o gene NSP3 com perfil DS-1. As amostras G9 da região Norte analisadas associaram-se às constelações esperadas e descritas em outras partes do mundo, com exceção de uma amostra G9P[8] que apresentou uma reestruturação genética na proteína NSP3. O genótipo G9 pode ser considerado um tipo usual de RVA na região Norte e apesar de terem sido detectadas as mesmas linhagens circulantes no período antes e após a implantação da vacina, observou-se modificações em regiões antigênicas relevantes assim como reestruturação genetica, enfatizando a necessidade de contínua monitorização das variantes genéticas circulantes de RVA. / Group A rotavirus (RVA) is the most viral agent associated with acute gastroenteritis, responsible for about 200,000 deaths among children aged under five years annually. RVA belongs to Reoviridae family, Rotavirus genus, its genome is composed by double-stranded RNA (dsRNA) with 11 segments encoding 12 proteins, six structural (VPs) and six non-structural (NSPs). Each protein designating a specific RVA genotype, being VP7 protein responsible for G genotype and currently there are 32 genetic variants. G9 genotype emerged on a global scale in the 90s, a period before RVA vaccine introduction in Brazil that occurred in 2006, and is continuously detected until present day. This study aimed to describe the frequency and genetic constellation associated with the current G9 genotype in Northern Brazil. It was selected 50 samples collected between 1999 and 2013, being 45 G9P[8], 2 G9P[4] and 3G9P[6], for fecal suspension preparation and dsRNA extraction for further genome amplification and sequencing of nucleotides. It was observed that during pre-RVA vaccine introduction period G9 frequency rate was 43%, while after RVA vaccine introduction the most frequece obtained was 12.5% (2008 to 2010). Phylogenetic analysis of VP7 gene showed that all strains belong to lineage III of G9, observing aminoacidic substitutions in antigenic sites when compared with vaccine strains. It was demonstrated in VP4 gene that P[8] strains gathered in lineage III, whereas P[4] grouped into lineage V and P[6] strains into lineage I. All G9P[6] and G9P[4] samples were associated with DS-1 constellation, genogroup 2, while G9P[8] samples showed Wa constellation, genogroup 1, except for one sample showing NSP3 gene with DS-1 profile. G9 samples from Northern region analyzed were associated with the expected constellations described in other parts of the world, except for one G9P[8] sample that showed a genetic restructuration in NSP3 protein. In the present study the same G9 lineages have circulated during pre and post RVA vaccine introduction periods, and it was described aminoacidic substitutions in relevant antigenic regions, such as it was reported genetic restructuration phenomenon in one sample of this genotype, emphasizing the continuous monitoring of current genetic variants of RVA.

Orientador: Prof. Dr. Rodrigo Luiz Oliveira Rodrigues Cunha / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Ciência & Tecnologia - Química, 2014. / Errata: Folha 4, linha 20. Onde se lê "Figura 1. Imagem de microscopia evidanciando o anel trofozoíta (no centro em destaque), leia-se Figura 1. Imagem de microscopia evidanciando o anel trofozoíta (no centro, em destaque). Fonte: https://pt.wikipedia.org/wiki/ficheiro:Plasmodium_ovale_01.png / As doenças tropicais negligenciadas (DTNs), características de regiões menos desenvolvidas do planeta com baixos níveis de escolaridade, habitação e saneamento básico estão sujeitas às opções terapêuticas limitadas e ineficientes. A cada ano, cerca de 250 milhões de casos de malária são diagnosticados e aproximadamente um milhão de pessoas morre desta doença. A baixa eficácia, elevada toxicidade e a emergência de cepas de parasitas resistentes à fármacos, são fatores que determinam a necessidade da síntese de novos fármacos e programas de investimentos e inovação em pesquisa e desenvolvimento (P&D). A proposta de compostos híbridos ou funcionalização de moléculas, como também pode ser chamada, é uma abordagem bem estabelecida para síntese de fármacos. Moléculas híbridas ganham destaque com o uso em várias áreas terapêuticas, tais como inflamação, alergia, depressão, propostas quimioterápicas contra o câncer e parasitemia. Recentemente as atividades biológicas de compostos de Selênio têm recebido crescente atenção, em especial os derivados hipervalentes de Selênio (IV) que têm sido estudados por nosso grupo de pesquisas como inibidores de cisteína peptidases. O merecido destaque dos compostos de Selênio hipervalentes, avaliados como inibidores enzimáticos aumentam as chances de encontrar inibidores mais eficientes e seletivos para enzimas envolvidas em infecções parasitárias. Neste sentido, esse trabalho propôs a junção de duas propriedades químicas que atuam contra o desenvolvimento do Plasmodium falciparum (protozoário responsável pela Malária): a inibição da heme-polimerase através da ação de sistemas hetrocíclicos nitrogenados (como bases fracas), e a inibição de cisteína peptidases com a atuação das selenuranas, as quais reduzem o efluxo da droga em cepas resistentes a outros fármacos. Os compostos sintetizados foram submetidos a testes biológicos para a avaliação de seu potencial como quimioterápicos para a malária. Os compostos foram eficientes na inibição do desenvolvimento dos parasitas in vitro e mostraram interferir na homeostase celular. Além disso, não causaram hemólise e nem diminuição significativa da viabilidade de células endoteliais. Juntos, os resultados obtidos mostram que esses compostos são potenciais candidatos para desenvolvimento de novos fármacos, uma vez que é letal ao parasita e contém os benefícios de composto híbrido. / Neglected tropical diseases (NTDs), typical of less developed regions of the world with low levels of education, habitation and sanitation are subject to limited and ineffective treatment options. Each year, about 250 million cases of Malaria are diagnosed and about 1 million people die of this disease. The low efficacy, high toxicity and the emergence of chloroquine resistant in Plasmodium falciparum strains are factors that determine the necessity for synthesis of new drugs and investments and innovations programs in research and development (R&D). The proposed of hybrid compounds, or they are also called functionalization of molecules, is a well-established approach to synthesis of drugs. Hybrid molecules are highlighted on use in various therapeutic areas such as inflammation, allergy, depression, proposals for cancer and parasitosis chemotherapy. Recently the biological activities of selenium compounds has received great attention, particularly hypervalent derivatives of selenium (IV) that it has been studied by our research group as inhibitors of cysteine peptidases. The worth prominence of hypervalent selenium compounds evaluated as enzyme inhibitors, which increase the chances of finding more efficient and selective for enzymes involved in parasitic infections inhibitors . In this way, this work proposed the addition of two chemical properties that act against the development of Plasmodium falciparum (protozoan responsible for Malaria). Inhibition of heme polymerase by way of the action of amino groups (such as weak bases), and inhibition of cysteine peptidases with the performance of selenuranes reduces the efflux of drug in resistant strains to other drugs. The synthesized compounds were subjected to biological evaluation of their potential as chemotherapeutic agents for Malaria tests. The compounds were effective in inhibiting the development of parasites in vitro and interference on cellular homeostasis. In addition, didn¿t cause hemolysis or a significant decrease in viability of endothelial cells. Together, the results show that these compounds are good candidates for development of new drugs since it is lethal to the parasite, does not harm the host and has the benefits of a hybrid compound.

Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2017-03-10T13:11:37Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese Rafael de Freitas e Silva.pdf: 13510018 bytes, checksum: 080b7ee10e7a8be555cb7a7ca29c10fb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-10T13:11:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese Rafael de Freitas e Silva.pdf: 13510018 bytes, checksum: 080b7ee10e7a8be555cb7a7ca29c10fb (MD5) Previous issue date: 2016-09-06 / As leishmanioses são doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania e estão presentes em 98 países e territórios e possuem incidência anual de 2 milhões de casos. A Leishmania (Viannia) braziliensis (L.V. braziliensis) é uma das principais espécies causadoras da leishmaniose cutânea (LC) no Brasil. Apesar disso, ainda não há uma vacina segura e eficaz para ser utilizada em seres humanos. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho foi identificar no proteoma predito de L.V. braziliensis, potenciais epítopos de linfócitos T e avaliá-los por meio de ensaios imunológicos. No primeiro capítulo, o proteoma predito de L. braziliensis foi comparado ao de outras espécies e analisado quanto a presença de epítopos. Nessa etapa foram encontrados epítopos derivados de mais de 8 mil proteínas conservadas entre diferentes espécies de Leishmania. Os epítopos foram clusterizados e então utilizados para etapa de docagem molecular com estruturas de MHC I e MHC II depositadas no Protein Data Bank. A docagem molecular resultou em epítopos peptídicos de 15 aminoácidos com alta afinidade de ligação às moléculas de MHC I e MHC II. Os 10 melhores resultados foram então sintetizados e avaliados, in vitro, quanto à capacidade de estimular a proliferação de células mononucleares do sangue periférico (PBMC) de indivíduos com LC após o tratamento (PT). Os resultados indicaram que 50% das moléculas testadas apresentaram capacidade de estimular, significativamente (p<0,05), a proliferação celular quando comparado às células de indivíduos saudáveis que não vivem em região endêmica para LC. No segundo capítulo, os peptídeos foram avaliados quanto à capacidade de estimular a proliferação de PBMC de indivíduos com LC em sua fase ativa (AD) e indivíduos moradores de área endêmica para LC resistentes à infecção (RT). Em paralelo, quantificou-se a expressão do fator de transcrição T-bet em PBMC de indivíduos PT, e citocinas dos perfis Th1, Th2 e Th17 foram mensuradas no sobrenadante de cultura das células de indivíduos PT e AD. Os resultados demonstraram altos níveis de proliferação nas células do grupo RT para todos os peptídeos testados. Além disso, níveis significativos de Tbet foram observados em linfócitos T CD4+ e CD8+ após estímulo com seis peptídeos. Níveis significativos de IFN-γ, TNF e IL-6 foram observados no sobrenadante das células do grupo PT com quatro dos peptídeos testados. Altos níveis dessas citocinas também foram encontrados no sobrenadante do grupo AD. No terceiro capítulo, avaliou-se o efeito dos peptídeos sobre células dendríticas de medula (BMDC) murinas, produção de citocinas de sobrenadante, e células dendríticas esplênicas murinas após estímulo com os peptídeos. Verificou-se altos níveis de MHC II e CD40 em uma subpopulação de BMDC estimuladas com as moléculas e altos níves de TNF e IL-6 após 48h de estímulo. Para as células esplênicas, foram observados altos níveis de subpopulações celulares expressando CD11b+, IL-12p70+, CD205+ e CD11b+ após estímulo com o peptídeo que teve o melhor resultado in silico. Por fim, os resultados indicam o grande potencial imunogênico que os epítopos identificados apresentam, o que dá suporte ao desenvolvimento futuro de abordagens vacinais. / The leishmaniasis are diseases caused by protozoans from the genus Leishmania which are present in 98 countries and territories, with an annual incidence of 2 million cases. Among the other species, Leishmania (Viannia) braziliensis is the main specie implicated with cutaneous leishmaniasis (CL) in Brazil. Besides that, there is no safe and effective vaccine against leishmaniasis to be applied in humans. In this context, the aim of this work was to identify in the predicted proteome of L. braziliensis potential CD4+ and CD8+ T cell epitopes and evaluate them by immunological assays. In the first chapter, the predicted proteome of L. braziliensis was compared with other species and analyzed for the presence of epitopes. In this step, epitopes from more than 8,000 conserved proteins were found among other species of Leishmania. The epitopes were clustered and then used for the molecular docking with MHC I and MHC II structures deposited in the Protein Data Bank. This approach resulted in 15 aminoacids peptide epitopes with high binding affinity for MHC I and MHC II. The 10 best results were synthesized and evaluated in vitro for their capacity to stimulate the proliferation of peripheral blood mononuclear cells (PBMC) of individuals with CL post treatment (PT). The results have shown that 50% of the tested molecules had the capacity to stimulate, significantly (p<0.05), cell proliferation when compared with cells of healthy individuals living in non-endemic regions. For the second chapter, the peptides were evaluated for their capacity to stimulate the proliferation of PBMC from CL individuals with active disease (AD) and of individuals resistant to infection (RT) living in endemic region. In parallel, the T-bet transcription factor expression was quantified in PBMC of PT individuals, and cytokines from the Th1, Th2 and Th17 profiles were measured in culture supernatant of PT and AD groups. High levels of cell proliferation in the RT group were demonstrated for all peptides tested. Moreover, significant levels of T-bet in CD4+ and CD8+ T cells were verified after stimulation with six peptides. For IFN-γ, TNF and IL-6, significant levels were detected in the supernatant of cultures from the PT group with four peptides tested. High levels of these same cytokines were also present in the supernatant of AD group. In the third chapter, the peptide effects over murine bone marrow dendritic cells (BMDC), the production of cytokines in the supernatant and murine spleen dendritic cell subsets were evaluated after peptide stimuli. High levels of MHC II and CD40 were verified for stimulated BMDC and high levels of TNF and IL-6 after 48h of stimuli. For spleen cells, high levels of cells expressing CD11b+, IL-12p70+, CD205+ e CD11b+ were observed after stimulation with the peptide which showed the best in silico result. In conclusion, the results indicate the great immunogenic potential of the identified peptides and support the further development of vaccine approaches using those molecules.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-09-11T18:10:57Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_UsoTecnicaBiologia.pdf: 2281724 bytes, checksum: a45c8462c51f7b087c62763c6118d17b (MD5) / Approved for entry into archive by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2017-09-13T14:16:55Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_UsoTecnicaBiologia.pdf: 2281724 bytes, checksum: a45c8462c51f7b087c62763c6118d17b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-13T14:16:55Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_UsoTecnicaBiologia.pdf: 2281724 bytes, checksum: a45c8462c51f7b087c62763c6118d17b (MD5) Previous issue date: 2016-06-28 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O propósito deste estudo foi aplicar a técnica da biologia molecular em amostra de secreção nasal de contatos intradomiciliares de portadores de hanseníase, em combinação com a avalição dermatoneurológica, na melhoria do diagnóstico precoce da hanseníase. O estudo foi realizado em unidades municipais de saúde de Belém-PA, no período de fevereiro de 2013 a abril de 2015. A amostra foi constituída de 154 contatos intradomiciliares e 58 casos índices de hanseníase, totalizando 212 sujeitos. A coleta de dados se deu por meio de ficha epidemiológica, avaliação dermatoneurológica e exame da cicatriz de BCG. Foi coletada uma amostra de secreção nasal de cada sujeito para a PCR. Nos casos índices, a PCR positiva prevaleceu na faixa etária de 40-59 anos (35,0%); na forma MB (80,0%); casos com 7 a 9 lesões de pele (35,0%) e com ausência de nervos espessados (40,0%). Todos os casos índices positivos para a PCR evidenciaram sinais e sintomas de hanseníase (34,5%) e a maioria não possuía cicatriz de BCG (65,0 %). Entre os contatos, a PCR positiva incidiu no sexo feminino (63,9 %); na faixa etária de 20 a 39 anos (44,4 %); renda familiar de um salário mínimo (47,2 %); ocupação de estudante (33,3 %) e no ensino médio completo (36,1 %). A maior evidência de positividade da PCR nos casos índices e contatos foi na forma multibacilar, respectivamente (37,2 % e 25,6 %). Comprova-se uma concordância altamente significante entre os sinais e sintomas clínicos com a PCR na secreção nasal dos contatos multibacilares, indicando que se estes vierem a adoecer há maior probabilidade de reproduzirem a mesma forma operacional dos casos índices. O maior percentual de PCR positiva foi nos contatos com ausência de cicatriz de BCG (25,8 %). A associação entre os sinais e sintomas e a PCR indica que os contatos com PCR positivo têm 07 vezes mais chance de apresentar sinais e sintomas de hanseníase. Ao estimar o risco potencial para o desenvolvimento da hanseníase nos contatos identificou-se 22 (14,3%) em risco intermediário e 06 (3,9 0%) no alto risco. Cento e quarenta e quatro (144) contatos referiram convívio diário com o caso índice (93,5 %) e destes 36 (25,0 %) foram positivos para a PCR. Verifica-se que com a evolução do tratamento dos casos índices há redução da positividade da PCR, em ambas as formas operacionais. Na correlação entre a PCR e o grau de incapacidade dos casos índices, o grau 1 foi mais prevalente (55,0 %). A detecção do DNA do M. leprae na secreção nasal de contatos intradomiciliares, por PCR, em associação com a avaliação dermatoneurológica eleva a efetividade do diagnóstico precoce na hanseníase, contribuindo com o controle da doença na comunidade. / The purpose of this study was to apply the technique of molecular biology in nasal secretion sample from household contacts of leprosy patients, in combination with dermatological and neurological assessments, improving the early diagnosis of leprosy. The study was conducted in health municipal units of Belém-PA, from February 2013 to April 2015. The sample consisted of 154 household contacts and 58 index cases of leprosy, totaling 212 subjects. Data collection was through epidemiological record, dermatologic and neurological evaluations and BCG scar examination. A nasal secretion sample from each subject for the PCR was collected. In index cases, positive PCR was in the age group of 40-59 years (35.0%), in multibacillary (MB) form (80,0%); cases with 7 to 9 skin lesions (35.0%) and with no enlarged nerves (40.0%). All positive index PCR cases show signs and symptoms of leprosy (34.5%) and most do not have BCG scar (65.0%). Among the contacts, positive PCR prevailed in females (63.9%); in the age group 20-39 years (44.4%); family income of a minimum wage (47.2%); student occupation (33.3%) and completed high school (36.1%). The strongest evidence of positive PCR in index cases and contacts was in multibacillary, respectively (37.2% and 25.6%). Proves to be a highly significant correlation between clinical signs and symptoms with PCR in nasal secretion of multibacillary contacts, indicating that if they get sick are more likely to reproduce the same operating way of index cases. The highest percentage of positive PCR was in contact with the absence of BCG scar (25.8%). The association between the signs, symptoms and PCR indicates that contacts with positive PCR have 07 times more likely to show signs and symptoms of leprosy. In estimating the potential risk for the development of leprosy in contacts, we identified 22 (14.3%) at intermediate risk and 06 (3.9% 0) at high risk. One hundred and forty-four (144) contacts said that they have daily contact with the index case (93.5%) and of these 36 (25.0%) were positive for PCR. The treatment of index cases led to a reduction of PCR positivity in both modes of operation. The correlation between PCR and the degree of disability of the index cases, grade 1 was more prevalent (55.0%). M. leprae DNA detection in the nasal secretion of household contacts for PCR, in association with dermatological and neurological assessments, raises the effectiveness of early diagnosis of leprosy, contributing to the control of the disease in the community.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-09-11T18:41:38Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_HormoniosTireoidianosAnti.pdf: 573411 bytes, checksum: 596bf84dd8d49b7791e71cec6f09484e (MD5) / Approved for entry into archive by Irvana Coutinho (irvana@ufpa.br) on 2017-09-13T15:09:46Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_HormoniosTireoidianosAnti.pdf: 573411 bytes, checksum: 596bf84dd8d49b7791e71cec6f09484e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-13T15:09:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_HormoniosTireoidianosAnti.pdf: 573411 bytes, checksum: 596bf84dd8d49b7791e71cec6f09484e (MD5) Previous issue date: 2015 / Há evidências que o acúmulo de mercúrio na tireóide pode causar distúrbios endócrinos e imunes. Populações ribeirinhas da Amazônia com histórico de exposição prolongada ao mercúrio têm sido investigadas para danos neurológicos, porém, pouco se conhece sobre os distúrbios hormonais e imunes específicos da tireóide. O objetivo deste estudo foi verificar a associação das concentrações de HgT em amostras de cabelo com as concentrações dos hormônios tireoidianos e com a titulação do anticorpo anti-TPO. O estudo incluiu 86 ribeirinhos do Tapajós com exposição em longo prazo ao mercúrio. Participaram homens e mulheres com idade entre 14 e 54 anos, residentes no local por mais de cinco anos. As concentrações hormonais no soro (TSH, T3 e T4 livre) e os títulos de Anti-TPO foram obtidas através de método imunoenzimático. Mercúrio total (HgT) em amostras de cabelo foi medido pela espectrofotometria de absorção atômica usando o Mercury Analyzer SP3D da Nippon Corporation. Disfunções hormonais ocorreram em 10,3% com aumento de T3, 2,3% com redução de T4L, 3,4% de redução de TSH e 4,6% com aumento de TSH que expressou o máximo valor de 8,9 μU/m. Títulos de Anti-TPO foram normais em todos os participantes. Não houve correlação dos marcadores hormonais (TSH, T3 e T4L) nem do Anti-TPO com os níveis de mercúrio. Os resultados mostraram que as concentrações de HgT em cabelo, de TSH no soro e os títulos de Anti-TPO não foram influenciados pelo sexo; que os níveis dos hormônios tireoidianos e os títulos de Anti_TPO não mostraram associação com os níveis de HgT sugerindo a interferência de fatores protetores na função tireoidiana. / There is evidence that mercury accumulation in the thyroid can cause endocrine and immune disorders. Riverside populations of the Amazon with a history of prolonged exposure to mercury have been investigated for neurological damage, but little is known about the hormonal disorders and specific immune thyroid. The objective of this study is to verify the existence of association between the total mercury concentrations in hair samples and concentrations of thyroid hormones and the anti-TPO antibody. The study included 86 riverine from Tapajos region mercury exposed to long-term. Participated this study men and women aged between 14 and 54 years, residents in place for more than five years. Measurements of serum hormone concentrations (TSH, T3 and free T4) and Anti-TPO titles were taken by enzyme immunoassay. Total mercury (THg) in hair samples was measured by atomic absorption spectrophotometry by cold vapor technique. Hormonal dysfunction occurred in 10.3% with an increase of T3, 2.3% with a reduction of T4L, 3.4% decrease in TSH and 4.6% with increased TSH expressed that the maximum value of 8.9 μU/m. Anti-TPO titles were normal in all participants. There was no correlation of hormonal markers (TSH, T3 and T4L) or the Anti-TPO with mercury levels. The results showed that THg concentrations in hair, serum TSH and anti-TPO titles were not influenced by sex; that hormonal changes in thyroid studied riparian not associated with the levels of THg suggesting the interference of protector factors on thyroid function.