A redução dos hormônios gonadais seja pelo processo natural de falência folicular denominado nas humanas de menopausa, seja pela ooforectomia, está associado com aumento da incidência de doença cardiovascular em mulheres no período pós menopausa. O objetivo desse estudo é avaliar o efeito da ooforectomia e a suplementação com DHEA sobre a morfologia dos cardiomiócitos, a expressão de proteínas celulares envolvidas com crescimento e apoptose celular e a função cardíaca. A ooforectomia induz maior ganho de massa corporal e do coração, no entanto, a avaliação morfológica do VE mostrou que há uma redução da espessura dos cardiomiócitos e do número de núcleos. Ademais, o immunoblotting demonstrou uma diminuição na expressão das proteínas IR, IRS1 e AKT nos corações das ratas ooforectomizadas e os parâmetros hemodinâmicos foram semelhantes entre os grupos. O tratamento com DHEA reverteu a redução do número de núcleos sem interferir nos demais parâmetros avaliados. Os dados obtidos nos permite concluir que a ausência dos esteroides gonadais por si só resulta em modificações morfológicas dos cardiomiócitos que podem estar relacionados ao processo de apoptose sem afetar a função de bomba do coração e o uso do DHEA é capaz de reverter a redução numérica dos núcleos. / The reduction of gonadal hormones by menopause, the natural process of failure in the human follicle, or by surgical removal, is associated with increased incidence of cardiovascular disease in postmenopause women. The aim of this study is to evaluate the effect of oophorectomy and the DHEA supplementation on the morphology of cardiomyocytes, on the expression of proteins involved in cell growth, on apoptosis (IGF-1R, IR, IRS-1, PI3K, AKT, MAPKp42/44, JAK2) and on the cardiac function. Oophorectomy enhances both the body mass e heart weight, however the left ventricle showed a reduction in cardiomyocyte thickness by 15% and in the number of nuclei by 20%. Moreover the immunoblotting showed a decrease from 25 to 50% in the expression of IR, IRS-1 and AKT proteins in the hearts of oophorectomized rats. The hemodynamic parameters were similar between groups. Treatment with DHEA reversed the reduction in the number of nuclei with no change in the other parameters evaluated. Our data allow us to conclude that the absence of gonadal steroids per se induces morphological changes in the cardiomyocytes that may be related to apoptosis with no change on the heart pump function. The DHEA supplementation is able to reverse the reduced number of nuclei.

Orientador: Artur Torres Cordeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-22T07:11:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ranzani_AmericoTavares_M.pdf: 3887425 bytes, checksum: 3ae590890f0f321ec227cb9c0967c6de (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Tripanossomíases são enfermidades associadas à infecção por protozoários do gênero Trypanosoma. Estas doenças são normalmente tratadas com medicamentos de alta toxicidade e baixa eficiência. A pesquisa de novos compostos que atuem de maneira específica contra alvos metabólicos pré-estabelecidos pode levar ao desenvolvimento de fármacos mais eficientes no tratamento destas enfermidades. A enzima glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PD) é um alvo metabólico validado experimentalmente em Trypanosoma brucei. A G6PD catalisa o primeiro passo da via de síntese de pentoses que supre a célula com ribose-5-fosfato para síntese de bases nitrogenadas e NADPH para biosíntese de lípideos, colesterol e neutralização de espécies reativas de oxigênio. O esteróide desidroepiandrosterona (DHEA) e seus análogos são conhecidos inibidores incompetitivos da enzima humana e recentemente foram caracterizados também como potentes inibidores da G6PD de T. brucei e T. cruzi. Estes esteróides também apresentam efeito citotóxico à forma sanguínea de T. brucei e à forma epimastigota de T. cruzi. Em conjunto, estes resultados sugerem que esteróides análogos do DHEA devam ser explorados como uma nova classe de fármacos antiparasitários. Apesar de já haver estruturas da enzima, o sítio de ligação destes esteróides não é conhecido, informação que ajudaria no desenho racional de novos inibidores. Assim, este projeto teve como objetivo principal a identificação do sítio de inibição por cristalografia. Conseguiu-se estabelecer um protocolo de expressão, purificação e cristalização para a G6PD humana. Testou-se a co-cristalização, seeding e soaking com os esteróides DHEA, epiandrosterona (EA) e 16-bromo-epiandrosterona (16BrEA) com os substratos da enzima, além de outros complexos com frutose-6-fosfato, glucosamina-6-fosfato e NADPH. Na tentativa de diminuir a atividade da enzima para facilitar a cristalização com os substratos e os esteróides, fez-se o mutante D200N, que além de ser menos ativo, também apresentou uma menor inibição pelos esteróides. A enzima humana se apresenta como um equilíbrio de dímero e tetrâmero, não se sabendo a influência destes estados na atividade da enzima. Assim, para favorecer somente um estado oligomérico, foram avaliadas mutações na interface do tetrâmero. A mutação A277C permite a formação de uma ponte dissulfeto com a C294, estabilizando o tetrâmero. A mutação E347A é capaz de desestabilizar o tetrâmero, favorecendo a forma dimérica. Embora não tenha sido possível obter a estrutura da enzima com os esteróides, conseguiu-se pela primeira vez apontar para um resíduo importante para a inibição, o que abre oportunidade para investigações futuras que podem levar à descrição do sítio de inibição / Abstract: Trypanosomiases are infectious diseases caused by protozoan parasites from genus Trypanosoma. Such diseases are currently treated with low effective and highly toxic drugs. The research of novel compounds which inhibits validated metabolic targets might lead to the development of more efficient drugs to such neglected diseases. The enzyme glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) was experimentally validated as a metabolic target in T. brucei bloodstream form. G6PD catalyzes the first step of the pentose phosphate pathway (PPP), which supplies the cell with ribose-5-phosphate for synthesis of nucleotides and NADPH for biosynthesis of lipids, cholesterol and detoxification of reactive oxygen species. The steroid Dehydroepiandrosterone (DHEA) and analogues are known uncompetitive inhibitors of the human G6PD and recently they were also characterized as potent inhibitors of T. brucei and T. cruzi G6PD. It was also demonstrated that these steroids are toxic to cultured T. brucei bloodstream form and T. cruzi epimastigote form. Together these results suggest that DHEA derivatives must be explored as a novel anti-parasite drug class. Although the structure of the enzyme is solved, the binding site of these steroids is unknown, information that would help in the rational design of new inhibitors. So, the main goal of this project was the identification of the inhibition site by crystallography. It was established an expression, purification and crystallization protocol for the human G6PD. It was tried the co-crystallization, seeding and soaking of the steroids DHEA, epiandrosterone (EA) and 16-bromo-epiandrosterone (16BrEA) with the substrates of the enzyme, beyond other complexes with fructose-6-phosphate, glucosamine-6-phosphate and NADPH. Attempting to diminish the enzyme activity to facilitate the crystallization with the substrates and the steroids, it was made the mutant D200N, which not only is less active, but it's also less inhibited by the steroids. The human enzyme is in equilibrium between dimer and tetramer, being unknown the effect of these states to the enzyme activity. This way, to favor one oligomer state, it was assessed mutations at the tetramer interface. The mutation A277C allows the formation of a disulfide bond with the C294, stabilizing the tetramer. The mutation E347A is able to destabilize the tetramer, favoring the dimer. Although it was not possible to determine the structure of the enzyme with the steroids, for the first time it was shown the involvement of a residue in the steroid inhibition, which makes possible future investigations that can lead to the inhibition site description / Mestrado / Fármacos, Medicamentos e Insumos para Saúde / Mestre em Biociências e Tecnologia de Produtos Bioativos

Submitted by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2013-03-15T22:01:31Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_AvaliacaoNiveisSericos.pdf: 48252101 bytes, checksum: 6d60c3aff86212a2a89095b9b67f48bf (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Rosa Silva(arosa@ufpa.br) on 2013-03-18T12:22:17Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_AvaliacaoNiveisSericos.pdf: 48252101 bytes, checksum: 6d60c3aff86212a2a89095b9b67f48bf (MD5) / Made available in DSpace on 2013-03-18T12:22:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23898 bytes, checksum: e363e809996cf46ada20da1accfcd9c7 (MD5) Dissertacao_AvaliacaoNiveisSericos.pdf: 48252101 bytes, checksum: 6d60c3aff86212a2a89095b9b67f48bf (MD5) Previous issue date: 1997 / O objetivo desta pesquisa foi avaliar o comportamento dos níveis séricos de cortisol e dehidroepiandrosterona (DHEA) em pacientes com malária por Plasmodium falciparum. Como o cortisol apresenta um efeito imunossupressor e o DHEA um efeito imunoestimulador, estudou- se a correlação entre os níveis destes esteróides e a condição clínica do paciente de malária. A amostra constou de 24 pacientes com malária por P. falciparum não-complicada, sendo 18 do sexo masculino e 6 do sexo feminino, com idade variando de 15 a 47 anos, 12 primoinfectados e 12 multi-infectados, provenientes de área endêmica de malária da Amazônia. Coletaram-se amostras diárias de sangue de 20 em 20 minutos no pré-tratamento (D0), 24 horas após o início da medicação (D1) e no 8º dia de acompanhamento (D7), quando o paciente já se encontrava assintomático. Todos os pacientes apresentavam parasitemia negativa em D7. Dosaram-se: os níveis séricos de cortisol em D0, D1 e D7; DHEA em D0 e D7; os níveis de anticorpos totais IgG anti-P. falciparum, anti-P. vivax, e anticorpos IgM anti-P. falciparum em D0. Comparam-se os níveis séricos de cortisol dos três dias, concluindo-se que os níveis de cortisol eram significativamente mais elevados em D0 do que nos outros dias. Foram correlacionados os níveis de cortisol com a parasitemia, obtendo-se como significativas as correlações entre cortisol D0 e parasitemia D1, assim como cortisol D1 com parasitemia D1, levando-se a deduzir que o cortisol pode interferir na resposta inicial à terapêutica de pacientes com malária por P. falciparum. O cortisol foi correlacionado com a temperatura, tempo de evolução da doença, níveis de anticorpos IgG anti-P. falciparum, não se obtendo resultados estatisticamente significativos, levando a inferir que a temperatura não interfere nos níveis de cortisol e o mesmo não interfere nos níveis de anticorpos, e não apresenta variações importantes com o tempo de evolução da doença. Os níveis de DHEA em D0, foram significativamente mais elevados do que em D7, apesar dos pacientes estarem sintomáticos há mais de um dia, já que um estímulo mantido do eixo hipotálamo-hipófise-adrenal (HPA) leva a uma diminuição deste esteróide. O DHEA foi correlacionado com a parasitemia obtendo-se um resultado significativo na correlação DHEA D0 com parasitemia D1. A correlação entre cortisol e DHEA em D0 não foi significativa (p = 0,057), porém este resultado leva a crer que o DHEA acompanha o aumento dos níveis de cortisol. Obteve-se uma correlação negativa entre DHEA e tempo de evolução de doença, apesar destes níveis estarem aumentados no pré-tratamento. Calculou-se a correlação parcial entre cortisol, DHEA e temperatura, concluindo-se que a temperatura interfere positivamente na correlação cortisol e DHEA. Uma vez que a febre reflete o momento em que ocorre a lise das hemácias secundária a esquizogonia, provavelmente esta lise com conseqüente liberação de citocinas serve como um fator agudizador da estimulação do eixo HPA, sugerindo que a liberação dos dois hormônios apresenta mecanismo comum. A correlação entre DHEA e anticorpos não foi significativa, portanto o DHEA não deve interferir na produção de anticorpos de pacientes com malária por P. falciparum. / The main purpuse of our study was to determine the levels of both cortisol and dehydroepiandrosterone (DHEA) in serum samples from patients suffering from Plamodium falciparum malaria. Since cortisol is potentially immunesupressive, and, conversely, DHEA is inherently immunopotentiating, we sought to assess the possible association between serum levels of these steroids and patient's clinical conditions. We enrolled to participate in this study 24 patients aged 12 to 47 years, of whom 18 were male and 6 female, suffering from uncomplicated P. falciparum malaria. All patients lived in areas of the Amazon were malaria is endemic. Half of them were found to be primo-infected, whereas the others were being reinfected by P. falciparum when recruited for this investigation. Blood samples were obtained from each patients as follows: at 20-minutes intervals during the pre-treatment phase (i. e. on day 0, D0), 24 hours after starting drug therapy (D1) and at the 8th day of follow-up (D7), when patients were asymptomatic. All patients at D7 presented with negative parasitemia. Serum levels of cortisol and DHEA were measured on D0, Dl and D7 and D0 and D7, respectively. In addition, the determination of IgG antibodies to both P. falciparum and P. vivax was performed only on D0. Our results indicated that levels of cortisol in serum samples collected on D0 were significantly higher than those of D1 and D7. High levels of cortisol on D0/D1 and significant parasitemia on D1 led us to postulated that this corticosteroid may interfere with the initial response of P. falciparum-infected patients to treatment. The cortisol levels did not correlate with the intensity of fever, duration of illness and the levels of IgG antibories to P. falciparum. These findings suggest that temperature does not interfere with the cortisol levels, and these, on the other land, do not significantly ralate to either antibody response or the duration of illness. The DHEA levels were found to be significantly more elevated on D0 than on D7, even though patients were already symptomatic for more than one day when first serum samples was taken. The progressive decrease in the DHEA levels is therefore likely to be mediated by a continuous stimulus from the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis. Similarly to cortisol, the DHEA levels on D0 correlated significantly with D1 parasitemia. Thus, it is suggested that in cortisol levels paralels that for DHEA. Of interest, the DHEA serum levels seem to inversely correlate with the duration of illness, in spite of high levels of this steroid detected at the pre-treatment phase. A not significant correlation has been noted if cortisol and DHEA serum levels are compared with temperature. This clinical parameter, however, was found to directly interfere with the correlation that exist between both cortisol and DHEA levels. It is known that fever reflects the occasion when erythrocytes disrupt from the schizogony, with release of cytokines , which act as an acute stimulating factor for the HPA axis. It would therefore be proposed that liberation of both hormones has a commom mechanism. The lack of significant interrelationships between DHEA levels and IgG antibodies indicates that this hormone does not seem to interfere with the production of antibodies by P. falciparum infected patients.

Com o envelhecimento observa-se redução da massa muscular, aumento da resistência à insulina e queda nos níveis séricos de alguns hormônios, entre eles o DHEA. Ratos com 12-14 meses de idade apresentam regulação músculo-específica em vias da insulina e IGF 1 em músculos com populações distintas de tipos de fibras e como indicador de sarcopenia apresentam redução da proporção e tamanho de fibras tipo 2b. Dose única de DHEA não modula as vias da insulina e IGF 1 no músculo esquelético e reduz tamanho de fibras tipo 1 no EDL. / Reductions in skeletal muscle mass, increased insulin resistance, and decrements in several hormones serum levels, including DHEA, are features observed in aging. Twelve to fourteen months old rats present specific regulation in the insulin and the IGF-1 intracellular pathway in distinct skeletal muscle fiber composition and show reductions in size and proportion of muscle composed predominantly by fiber type 2. DHEA treatment had no effect in these intracellular pathways but induces reduction in the size of type 1 fiber in the EDL muscle.

Made available in DSpace on 2014-12-17T15:32:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EmelineNAL_TESE.pdf: 1948129 bytes, checksum: 6863b246236e066c0974bec3439782b3 (MD5) Previous issue date: 2014-02-03 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / A s?ndrome da ard?ncia bucal (SAB) ? uma condi??o cl?nica pouco esclarecida caracterizada por sensa??o espont?nea de ard?ncia, dor ou prurido na mucosa oral, sem altera??es locais ou sist?micas identific?veis. Sua etiopatogenia ? incerta, n?o havendo at? o momento uma padroniza??o dos crit?rios utilizados para o seu diagn?stico. O presente estudo objetivou verificar a associa??o de fatores psicol?gicos, hormonais e gen?ticos com a SAB no sentido de propor uma melhor caracteriza??o de sua natureza. Al?m de uma an?lise descritiva da amostra estudada, os aspectos analisados foram especificamente os n?veis de estresse e sua fase, depress?o, e ansiedade, compondo os fatores psicol?gicos; mensura??o dos n?veis s?ricos de cortisol e desidroepiandrosterona (DHEA); bem como a verifica??o sobre a ocorr?ncia de polimorfismos no gene da Interleucina-6 (IL6). Foram realizadas an?lises comparativas entre um grupo de pacientes com SAB e um grupo composto por indiv?duos com ardor bucal secund?rio (AB). Os resultados revelaram diferen?as estatisticamente significativas entre os dois grupos com rela??o aos seguintes aspectos: xerostomia (p=0,01) e hipossaliva??o em repouso (p<0,001), que foram mais prevalentes no grupo SAB; sintomas de depress?o (p=0,033), tamb?m mais presentes no grupo SAB; e dosagem de DHEA, que apresentou n?veis mais reduzidos no grupo SAB (p=0,003). A dosagem desse horm?nio mostrou-se amplamente sens?vel e espec?fica para o diagn?stico da s?ndrome em estudo, sendo verificado que n?veis s?ricos de DHEA abaixo de 0,37?g/mL para mulheres, utilizando-se os procedimentos propostos na pesquisa, possuem um Odds Ratio de 4,0 [95%IC (0,37 a 2,71)]. Foi verificado ainda que o alelo C do polimorfismo rs2069849 da IL-6 pode representar um alelo de risco para a ocorr?ncia de ardor bucal em ambos os grupos, no entanto, n?o se pode garantir sua real implica??o nos processos inflamat?rios da SAB. Os presentes resultados sugerem uma prov?vel influ?ncia da depress?o, bem como de n?veis diminu?dos do horm?nio DHEA na SAB

Com o envelhecimento observa-se redução da massa muscular, aumento da resistência à insulina e queda nos níveis séricos de alguns hormônios, entre eles o DHEA. Ratos com 12-14 meses de idade apresentam regulação músculo-específica em vias da insulina e IGF 1 em músculos com populações distintas de tipos de fibras e como indicador de sarcopenia apresentam redução da proporção e tamanho de fibras tipo 2b. Dose única de DHEA não modula as vias da insulina e IGF 1 no músculo esquelético e reduz tamanho de fibras tipo 1 no EDL. / Reductions in skeletal muscle mass, increased insulin resistance, and decrements in several hormones serum levels, including DHEA, are features observed in aging. Twelve to fourteen months old rats present specific regulation in the insulin and the IGF-1 intracellular pathway in distinct skeletal muscle fiber composition and show reductions in size and proportion of muscle composed predominantly by fiber type 2. DHEA treatment had no effect in these intracellular pathways but induces reduction in the size of type 1 fiber in the EDL muscle.

INTRODUÇÃO: O estresse tem sido foco de interesse em diferentes áreas de estudo devido às consequências no processo saúde-doença. Destaca-se a inexistência de estudos sobre o estresse crônico no período pré e pós-natal em unhas de mulheres que tiveram parto prematuro e sua relação o método canguru (MC). OBJETIVOS: Avaliar o efeito do Método Canguru na redução do estresse psicológico materno através de escalas psicométricas e o estresse biológico crônico através dos níveis de cortisol e desidroepiandrosterona (DHEA) em unhas de mães e bebês pré-termo (PT). MÉTODO: Trata-se de estudo comparativo prospectivo. A amostra contou com 59 mães e 63 bebês, coletada num hospital com o MC implantado e em dois hospitais controle, sem o MC. Foram incluídos PT (?37 semanas), sem malformações, internados em UN; mães alfabetizadas, que tiveram contato prévio com o filho, não usuárias de drogas ou hormônios. O estresse crônico materno e do PT foi avaliado pelo Cortisol e DHEA das unhas. A primeira amostra de unhas maternas foi coletada na terceira semana de vida do PT. A segunda amostra das mães e a amostra das unhas dos PT foram coletadas três meses após parto. Para análise do cortisol e DHEA das unhas das mães foi utilizada a técnica de enzima imunoensaio e dos bebês a cromatografia líquida de alto desempenho com espectrometria de massa. As unhas foram analisadas em laboratórios especializados no Canadá. O estresse psicológico da mães foi analisado com uso das PSS-10 e PSS:NICU que foram respondidas pelas mães na semana da admissão e alta do PT. RESULTADOS: Os níveis de Cortisol e DHEA nas unhas das mães referente a gestação e puerpério não diferiu significativamente entre os grupos canguru e controle, porém, diferiu entre os tempos, sendo que, os níveis dos esteroides na gestação foi maior do que no puerpério em ambos os grupos. O estresse percebido (PSS-10) pelas mães referente a gestação (p=0,846) e puerpério (p=0,465) também não diferiu significativamente entre os dois grupos. O estresse indicado pela PSS:NICU na admissão foi moderado nos dois grupos. O maior escore foi observado na subescala alteração no papel de pais. Na alta o escore foi significativamente menor (p=0,00) no canguru do que no controle. Não houve qualquer relação entre o estresse crônico (cortisol, DHEA e razão Cort:DHEA) e o psicológico (PSS-10 na gestação e PSS:NICU no puerpério) e nem entre as duas medidas de estresse psicológico (PSS-10 e PSS:NICU na alta). O nível de cortisol foi menor nos PT submetidos ao canguru, porém, sem diferença significante (p=0,08). Diferiram significativamente a DHEA - menor no controle e a razão Cort:DHEA - menor nos PT do grupo canguru. Da análise da relação entre estresse crônico constataram-se: associação positiva entre Cort:DHEA da mãe e PT (?= 0,51canguru; ?= 0,43 controle). CONCLUSÃO: O estudo mostrou que é possível medir cortisol e DHEA em unhas de mães e de bebês PT de forma restrospectiva. Os dados sugerem que o MC pode contribuir com a regulação e redução do estresse crônico do PT e do estresse psicológico materno / INTRODUCTION: Stress has been a focus of interest in different areas of study due to the consequences in the health-disease process. We highlight the lack of studies on chronic stress in pre and postnatal period using fingernails of women who had preterm birth and its relation to the kangaroo mother care (KMC) to reduce chronic and psychological stress. OBJECTIVES: To evaluate maternal psychological stress using psicometrics tools and avaluate chronic stress of mothers and Preterm infant (PT) using the analysis of cortisol and DHEA in fingernails and analyse the implication of the kangaroo care (KMC) in reduce chronic stress. METHOD: This is a prospective comparative study. The sample were 59 mothers and 63 babies collected in a KMC\'s hospital and two controls (without the KMC). Were included PT babies (? 37 weeks), who were admitted to the NICU, those with no malformations. With regard to mothers were included that one who had saw the PT at least once and excluded those using drugs or taking hormones. Maternal and PT chronic\' stress were evaluated by fingernails\' cortisol and DHEA. The first maternal sample was collected in the third week post-delivery and the second sample in the third month after baby\'s birth. The baby\'s fingernail sample was collected in the third month of life. The enzyme immunoassay was used for analysis of mothers\' fingernails (cortisol and DHEA) and for babies\' were used high performance liquid chromatography with mass spectrometry. Fingernail\'s analysis was done in Canada. The PSS-10 and PSS: mothers filled up NICU tools on first week in NICU and at discharge of the baby from this unit. RESULTS: The cortisol and DHEA\'s level in mothers\' fingernails showed no significant difference between groups. Steroids levels in pregnancy time were higher than in puerperium in both groups (KMC and control) however, showed significant difference between times, steroids levels were higher during gestation time than the puerperium in both groups. The same occurred with the PSS-10 score (KMC\'s score referring to pregnancy (p=0,846) and puerperium (p=0,465), also had no difference was between groups. The PSS: NICU\'s stress level at admission in both groups was moderate. The highest score was showed in the subscale Parental Role. At discharge the score was significantly lower (p=0,00) in the kangaroo than in the control. There was no relationship between chronic stress (cortisol, DHEA and Cort:DHEA) and psychological stress (PSS-10 in pregnancy and PSS: NICU in the puerperium) or between the two psychological measures of stress (PSS-10 and PSS: NICU on discharge). The cortisol level was lower in PT submitted to kangaroo, however, without significant difference (p = 0.08). They differed significantly in DHEA - lower in the control and the ratio Cort:DHEA - lower in the kangaroo group. From the analysis of the relationship between chronic stress, there was a positive association between Cort: DHEA of the mother and PT (? = 0.51 kangaroo; ? = 0.43 control). CONCLUSION: The study showed that it is possible to measure cortisol and DHEA in preterm infant and mothers\' fingernails retrospectively. The data suggests that KMC can contribute to regulate and to reduce chronic stress in preterm infant and to reduce psychological mother\'s stress

INTRODUÇÃO: O estresse tem sido foco de interesse em diferentes áreas de estudo devido às consequências no processo saúde-doença. Destaca-se a inexistência de estudos sobre o estresse crônico no período pré e pós-natal em unhas de mulheres que tiveram parto prematuro e sua relação o método canguru (MC). OBJETIVOS: Avaliar o efeito do Método Canguru na redução do estresse psicológico materno através de escalas psicométricas e o estresse biológico crônico através dos níveis de cortisol e desidroepiandrosterona (DHEA) em unhas de mães e bebês pré-termo (PT). MÉTODO: Trata-se de estudo comparativo prospectivo. A amostra contou com 59 mães e 63 bebês, coletada num hospital com o MC implantado e em dois hospitais controle, sem o MC. Foram incluídos PT (?37 semanas), sem malformações, internados em UN; mães alfabetizadas, que tiveram contato prévio com o filho, não usuárias de drogas ou hormônios. O estresse crônico materno e do PT foi avaliado pelo Cortisol e DHEA das unhas. A primeira amostra de unhas maternas foi coletada na terceira semana de vida do PT. A segunda amostra das mães e a amostra das unhas dos PT foram coletadas três meses após parto. Para análise do cortisol e DHEA das unhas das mães foi utilizada a técnica de enzima imunoensaio e dos bebês a cromatografia líquida de alto desempenho com espectrometria de massa. As unhas foram analisadas em laboratórios especializados no Canadá. O estresse psicológico da mães foi analisado com uso das PSS-10 e PSS:NICU que foram respondidas pelas mães na semana da admissão e alta do PT. RESULTADOS: Os níveis de Cortisol e DHEA nas unhas das mães referente a gestação e puerpério não diferiu significativamente entre os grupos canguru e controle, porém, diferiu entre os tempos, sendo que, os níveis dos esteroides na gestação foi maior do que no puerpério em ambos os grupos. O estresse percebido (PSS-10) pelas mães referente a gestação (p=0,846) e puerpério (p=0,465) também não diferiu significativamente entre os dois grupos. O estresse indicado pela PSS:NICU na admissão foi moderado nos dois grupos. O maior escore foi observado na subescala alteração no papel de pais. Na alta o escore foi significativamente menor (p=0,00) no canguru do que no controle. Não houve qualquer relação entre o estresse crônico (cortisol, DHEA e razão Cort:DHEA) e o psicológico (PSS-10 na gestação e PSS:NICU no puerpério) e nem entre as duas medidas de estresse psicológico (PSS-10 e PSS:NICU na alta). O nível de cortisol foi menor nos PT submetidos ao canguru, porém, sem diferença significante (p=0,08). Diferiram significativamente a DHEA - menor no controle e a razão Cort:DHEA - menor nos PT do grupo canguru. Da análise da relação entre estresse crônico constataram-se: associação positiva entre Cort:DHEA da mãe e PT (?= 0,51canguru; ?= 0,43 controle). CONCLUSÃO: O estudo mostrou que é possível medir cortisol e DHEA em unhas de mães e de bebês PT de forma restrospectiva. Os dados sugerem que o MC pode contribuir com a regulação e redução do estresse crônico do PT e do estresse psicológico materno / INTRODUCTION: Stress has been a focus of interest in different areas of study due to the consequences in the health-disease process. We highlight the lack of studies on chronic stress in pre and postnatal period using fingernails of women who had preterm birth and its relation to the kangaroo mother care (KMC) to reduce chronic and psychological stress. OBJECTIVES: To evaluate maternal psychological stress using psicometrics tools and avaluate chronic stress of mothers and Preterm infant (PT) using the analysis of cortisol and DHEA in fingernails and analyse the implication of the kangaroo care (KMC) in reduce chronic stress. METHOD: This is a prospective comparative study. The sample were 59 mothers and 63 babies collected in a KMC\'s hospital and two controls (without the KMC). Were included PT babies (? 37 weeks), who were admitted to the NICU, those with no malformations. With regard to mothers were included that one who had saw the PT at least once and excluded those using drugs or taking hormones. Maternal and PT chronic\' stress were evaluated by fingernails\' cortisol and DHEA. The first maternal sample was collected in the third week post-delivery and the second sample in the third month after baby\'s birth. The baby\'s fingernail sample was collected in the third month of life. The enzyme immunoassay was used for analysis of mothers\' fingernails (cortisol and DHEA) and for babies\' were used high performance liquid chromatography with mass spectrometry. Fingernail\'s analysis was done in Canada. The PSS-10 and PSS: mothers filled up NICU tools on first week in NICU and at discharge of the baby from this unit. RESULTS: The cortisol and DHEA\'s level in mothers\' fingernails showed no significant difference between groups. Steroids levels in pregnancy time were higher than in puerperium in both groups (KMC and control) however, showed significant difference between times, steroids levels were higher during gestation time than the puerperium in both groups. The same occurred with the PSS-10 score (KMC\'s score referring to pregnancy (p=0,846) and puerperium (p=0,465), also had no difference was between groups. The PSS: NICU\'s stress level at admission in both groups was moderate. The highest score was showed in the subscale Parental Role. At discharge the score was significantly lower (p=0,00) in the kangaroo than in the control. There was no relationship between chronic stress (cortisol, DHEA and Cort:DHEA) and psychological stress (PSS-10 in pregnancy and PSS: NICU in the puerperium) or between the two psychological measures of stress (PSS-10 and PSS: NICU on discharge). The cortisol level was lower in PT submitted to kangaroo, however, without significant difference (p = 0.08). They differed significantly in DHEA - lower in the control and the ratio Cort:DHEA - lower in the kangaroo group. From the analysis of the relationship between chronic stress, there was a positive association between Cort: DHEA of the mother and PT (? = 0.51 kangaroo; ? = 0.43 control). CONCLUSION: The study showed that it is possible to measure cortisol and DHEA in preterm infant and mothers\' fingernails retrospectively. The data suggests that KMC can contribute to regulate and to reduce chronic stress in preterm infant and to reduce psychological mother\'s stress