Resumo: O presente trabalho teve por objetivo avaliar o uso de diferentes produtos químicos como maturadores, em diferentes doses e misturas na qualidade tecnológica e também quantificar os teores de nutrientes nas lâminas foliares e no caldo da cana-planta cv. SP83-2847. O experimento foi conduzido na Fazenda São Francisco do Itaquerê, da Usina Santa Fé, Nova Europa, SP, Brasil de maio a julho de 2008. O delineamento experimental foi em blocos casualizados com parcelas subdivididas e quatro repetições. Os 14 tratamentos principais foram testemunha; glifosato; Moddus; Curavial; fosfito de potássio; sugar plus e sugar super plus, em suas doses e misturas aplicados no dia 21/05/2008. As subparcelas constituíram-se em seis épocas de amostragens para análises tecnológicas (-1; 14, 28, 42, 56 e 70 dias após a aplicação - d.a.a.) e duas épocas para avaliação do teor de nutrientes nas lâminas foliares (LF) obtidas das folhas +1 e caldo de cana (28 e 56 d.a.a.). O uso de glifosato como maturador e em mistura com Moddus, fosfito de potássio e sugar pus apresentaram os melhores resultados tecnológicos, o mesmo observado com o uso do Curavial. Em função da maturação a quantidade de nutrientes na segunda época de avaliação foi significativamente menor principalmente no caldo. O uso do fosfito de potássio e do sugar super plus, nas dosagens de 2,0 L ha-1 e 2,5 L ha-1, respectivamente, não incrementaram a qualidade. No geral, os maturadores utilizados não alteraram a composição nutricional da cultivar SP83-2847, exceto para Mn e Fe nas lâminas foliares e de Fe e Cu no caldo / Abstract: This study aimed evaluate the use of chemical ripeners at different doses and blends in technological quality as well to quantify the sugarcane SP83-2847 leaves and juice mineral levels. The experiment was installed during the 2008/2009 season (May - July 2008) and carried out at "Fazenda São Francisco do Itaquerê" (farm), "Usina Santa Fé" (Sugar Mill), Nova Europa, SP, Brazil under a split-plot. The experiment design was the randomized blocks, in split-plot, with four replications. The 14 main treatments were control (only water); glyphosate; Moddus; Curavial; potassium phosphite; sugar plus, and sugar super plus. Their doses and mixtures were applied at 21st May 2008. The subplots were the sampling dates: -1; 14, 28, 42, 56 and 70 days after application (d.a.a.) and two samples to quantify mineral levels in the leaves and juice (28 and 56 days). The use of glyphosate as ripper and its blends with Moddus, potassium phosphite and sugar plus resulted in raw material technological quality improvement. The same effect was observed using Curavial. According to the ripening the nutrients amount at the second sampling date was significantly lower mainly in the juice. The potassium phosphite and sugar super plus use at 2.0 L ha-1 and 2.5 L ha-1, respectively, did not improve the technological quality. In general, the ripeners did not change the SP83-2847 sugarcane nutrition levels, except for Mn and Fe in the leaves and Fe and Cu in the juice / Orientador: Miguel Angelo Mutton / Coorientadora: Márcia Justino Rossini Mutton / Banca: Marcelo de Almeida Silva / Banca: Durvalina Maria Mathias dos Santos / Mestre

Orientador: Cláudia Maria Navarro / Banca: Marco Antonio Compagnoni / Banca: Éder Ricardo Biasoli / Resumo: O tratamento do câncer bucal geralmente resulta em deficiências funcionais que afetam a qualidade de vida (QV). O objetivo deste estudo foi avaliar o impacto do tratamento do câncer bucal na QV, além de investigar as alterações funcionais e as perspectivas para a reabilitação oral. Cinqüenta pacientes foram recrutados entre abril e dezembro de 2008. O questionário da Universidade de Washington para portadores de câncer em cabeça e pescoço (UW-QOL) foi utilizado, e exames clínicos foram realizados. Os resultados foram comparados de acordo com idade, gênero, estadiamento TNM do tumor, localização, tratamento cirúrgico ou terapia combinada (cirurgia e radioterapia/ quimioterapia - Rt/Qt) dos pacientes. A amostra possuía 42 homens e 8 mulheres, com idade média de 60,5 anos, submetidos ao tratamento cirúrgico, sendo que 29 destes realizaram Rt/Qt adjuvante. O tratamento combinado foi associado à pior QV com relação aos domínios dor, deglutição, mastigação, paladar e saliva. A localização anatômica e o tamanho do tumor (estadiamento T) não influenciaram no tipo de tratamento. Problemas com a mobilidade da língua revelou baixos escores para a fala e para a mastigação. Câncer em rebordo alveolar demonstrou maior complexidade do ponto de vista reabilitador. Pacientes que desejavam tratamento reabilitador apresentaram problemas com mastigação, fala e paladar. Compreendendo os efeitos adversos, principalmente do tratamento combinado na QV e na função do paciente, torna-se importante avaliar as implicações de cada modalidade terapêutica e informar ao paciente sobre esses efeitos, para que ele possa exercer o direito de aceitar ou não determinada terapia. Considerando a mastigação e a deglutição como os principais problemas após o tratamento do câncer bucal, é possível concluir a importância do Cirurgião-Dentista no acompanhamento e reabilitação... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The treatment of oral cancer generally results in functional disorders and can affect the quality of life (QOL). The purpose of this study was to investigate the impact of the oral cancer treatment in the QOL and functional status, and to assess the perspectives for oral rehabilitation. Fifty patients treated for oral cancer were recruited between April to December 2008. The University of Washington Head and Neck Questionnaire (UW-QOL) and clinical examination were used, and the outcome was compared against patient‟s age, gender, TNM stage, anatomical site, surgical and adjuvant therapy. Fifty patients (42 men and 8 women), with mean age 60.5 years underwent surgery. Of 50 patients, 29 underwent adjuvant radiotherapy or chemotherapy (Rt/Ct). Adjuvant Rt/Ct was associated to worse QOL related to pain, swallowing, chewing, taste and saliva. The anatomical site and the size (T stage) of the tumour did not influence the type of treatment. Tongue mobility changes reflected in low scores for speech and chewing domains. Cancer on alveolar ridge will require more complex rehabilitation. Patients who wish the rehabilitation showed low scores in chewing, speech and taste. Understanding the side effects mainly of the combined treatments and how patients experience them as well as the functional and QOL implications is important to treatment evaluation and patient decision making. Considering the chewing and swallowing as the major complains after the oral cancer treatment is possible to conclude the importance of dentists on the follow up and rehabilitation of these patients. Yet oral rehabilitation of oral cancer patients has not been explored by dentists, who could work on the improvement of patient‟s QOL with the prosthodontic rehabilitation and maintenance of oral health. The real impact of oral rehabilitation in the QOL of patients after the oral cancer treatment has not been properly investigated. / Mestre

Orientador: Roberto Calderon Gonçalves / Banca: Alice Maria Melville Paiva / Banca: Simone Biagio Chiacchio / Resumo: Os estudos das secreções traqueobrônquicas são amplamente utilizados nas pesquisas de condições patológicas pulmonares nas diversas espécies animais, inclusive no homem. Os objetivos desta pesquisa foram a viabilização da técnica de colheita de lavado traqueobrônquico na espécie ovina e o estudo da relação clínico-citológica do lavado de ovinos portadores de afecções respiratórias e clinicamente sadios. Foram utilizados neste estudo 19 ovinos sem sintomatologia respiratória e 23 portadores de enfermidade respiratória com sinais clínicos e envolvimento de vias aéreas, divididos nos respectivos grupos. Após o exame físico foi realizado o lavado traqueobrônquico por via nasotraqueal. A colheita do lavado foi feita com a inoculação e aspiração de solução fisiológica estéril. As amostras foram processadas citologicamente através de citocentrifugação e coradas pelos métodos Giemsa, Shorr e Gram. Nos animais sadios notou-se predomínio de macrófagos, seguido por células epiteliais cilíndricas, neutrófilos e linfócitos. No grupo de animais doentes notou-se redução no número de macrófagos e aumento da freqüência cardíaca. Embora não tenha ocorrido diferença estatística significativa entre os grupos avaliados, notou-se tendência ao aumento de neutrófilos nos animais doentes. A técnica estudada mostrou-se eficaz na obtenção de fluidos traqueobrônquicos, por ser de fácil realização por médicos veterinários no campo, pouco dispendiosa, e obter material representativo da região traqueobrônquica. / Abstract: The studies of the tracheobrochial secretions are very useful in the research of the lung pathological conditions in different animal's species and in humans. The purposes of this research are to enable the collection technique of the tracheobronchial lavage in ovine and the study of the clinical cytology relationship of the lavage in ovines with respiratory disease and clinically healthy. In this study there were used 19 ovines without respiratory symptoms and 23 with respiratory disease with symptoms and airway involvement, separated in respective groups. After physical examination the tracheobronchial lavage was performed by nasotracheal via. The tracheobronchial lavage was performed by injection and aspiration of sterile saline. Cytology of the samples was proceeding by centrifugation and collored by Giemsa, Shorr and Gram methods. In the healthy animals was noted prevalence of macrophages, followed by cylindric epithelial cells, neutrophils and lymphocytes. In the ill animals group there was reduction in the macrophages and higher heart rate. Despite there was no considerable statistic difference between the analyzed groups, a tendency in the increase of the neutrophils number in the ill group was noted. The evaluated technical showed itself to be efficient to obtain tracheobronchial fluid, considering its easy proceeding by veterinarians in the field, no expensive and obtaining representative volume of the samples from the tracheobronchial region. / Mestre

Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar a efetividade de métodos empregados na detecção e na avaliação da atividade de lesões de cárie primárias e secundárias em superfícies oclusais de dentes decíduos e permanentes. Para tanto, foram realizadas quatro pesquisas. (1) O objetivo desta pesquisa foi avaliar in vitro a influência de métodos de profilaxia profissional nas medidas de fluorescência e no desempenho de três aparelhos baseados na captação da fluorescência induzida por luz na detecção de lesões de cárie oclusal em dentes permanentes. Os exames foram realizados em 110 dentes permanentes por dois examinadores no início, após a profilaxia profissional e lavagem e após uma segunda lavagem. Foram utilizados os aparelhos DD (DIAGNOdent 2095, KaVo, Alemanha), DDpen (DIAGNOdent 2190, KaVo, Alemanha) e VP (VistaProof, Dürr Dental, Alemanha). Os dentes foram aleatoriamente distribuídos de acordo com o método de profilaxia profissional empregado: jato de bicarbonato de sódio ou pasta profilática. Pode-se concluir que a escolha do método de profilaxia professional pode influenciar significativamente as medidas de fluorescência e o desempenho de métodos baseados na captação da fluorescência induzida por luz na detecção de lesões de cárie oclusal. (2) O objetivo deste estudo in vivo foi determinar os pontos de corte ideais para o DD, o DDpen e a VP, e avaliar a validade clínica de métodos convencionais e de métodos baseados na captação da fluorescência induzida por luz na detecção de lesões de cárie oclusal em dentes permanentes. Foram selecionados 105 dentes permanentes posteriores indicados para extração em 88 pacientes adultos. Um examinador experiente avaliou os dentes usando métodos baseados na captação da fluorescência induzida por luz (DD, DDpen e VP), ICDAS e exame radiográfico (Rx). Pode ser concluído que o ICDAS... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to evaluate the effectiveness of methods for caries detection and caries activity assessment on occlusal surfaces of primary and secondary caries in deciduous and permanent teeth. For this reason, four studies were carried out: (1) The aim of this study was to evaluate the effects of professional prophylaxis procedures on fluorescence measurements and on three fluorescence-based devices in detecting occlusal caries in permanent teeth. All assessments were performed in 110 permanent teeth by two examiners at baseline, after professional prophylaxis and rinsing, and after a second rinsing. The devices LF (DIAGNOdent 2095, KaVo, Germany), LFpen (DIAGNOdent 2190, KaVo, Germany) and FC (VistaProof, Dürr Dental, Germany) were used. The teeth were randomly divided according to the professional prophylaxis used: sodium bicarbonate jet or prophylaxis paste. It can be concluded that the choice of professional prophylaxis method can significantly influence the fluorescence measurements and the performance of fluorescence-based methods for detection of occlusal caries. (2) This in vivo study proposed clinical cut-off limits for three fluorescence based methods and evaluated the validity of conventional and fluorescencebased methods for occlusal caries detection in permanent teeth. A total of 105 posterior permanent teeth with an indication for extraction were selected in 88 adult patients. One experienced examiner assessed the teeth using fluorescence-based methods (LF, LFpen and FC), ICDAS and bitewing radiographs (BW). It can be concluded that ICDAS, LF and LFpen demonstrated good validity in detecting occlusal caries in vivo. However, BW and FC showed the lowest validity to detect all lesions and dentin lesions, respectively. Besides, the fluorescence-based methods cut-off limits should not be considered as exact thresholds for dentists'... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Rita de Cássia Loiola Cordeiro / Coorientador: Andréa Gonçalves Ferreira Zandoná / Banca: Fausto Medeiros Mendes / Banca: Jonas de Almeida Rodrigues / Banca: Josimeri Hebling / Banca: Lourdes Aparecida Martins dos Santos Pinto / Doutor

Resumo: Neste trabalho se apresenta uma técnica de redução de dados para monitoração e diagnóstico automático de grupos geradores hidroelétricos com base na análise de vibrações, utilizando redes neurais artificiais. Os sinais de vibração são processados numericamente para se obter um espectro normalizado com no máximo doze freqüências, especialmente determinadas para cada máquina em particular, de tal forma a torná-lo representativo da condição da máquina. A definição das bandas de freqüência a serem usadas no processamento desse espectro especial é feita para cada equipamento a ser monitorado com auxílio de um ambiente computacional desenvolvido e apresentado neste trabalho. Um programa protótipo de monitoração baseado nestas técnicas foi desenvolvido e é apresentado com uso de exemplos de aplicação. / Abstract: In this work a data reduction technique based on vibration analysis that can be applied to both monitoring and automatic diagnosis of rotating machineries together with use of neural networks is presented. Vibration signals are processed to obtain a normalized spectrum with up to 12 frequency bands that should be defined for each particular machine. In this manner this special spectrum can become representative of the machine's working condition. The definition of the spectrum's bands that will be used in data processing is carried out for each machine by use of a computational environment that has been developed. This environment is also shown in this work. A prototype monitoring program based in this technique also has been developed and its application is highlighted with examples. / Orientador: João Antonio Pereira / Coorientador: Adyles Arato Júnior / Banca: Alberto Tamagna / Banca: Luiz de Paula do Nascimento / Mestre

Orientador: Hélio José Montassier / Banca: Liana Brentano / Banca: Maria da Glória Buzinaro / Resumo: Nesse estudo foi desenvolvido e aplicado o procedimento de imunocaptura para realizar a reação de transcrição reversa seguida pela reação em cadeia da polimerase (IC-RT-PCR) a fim de ser amplificada uma região 5'_ proximal do gene 81 do vírus da bronquite infecciosa (VBI) com 228 pb e de forma a fazer a detecção e a diferenciação desse vírus, comparando-se os resultados dessa metodologia com os obtidos na técnica convencional de RT-PCR. Todas as 11 estirpes do VBI testadas foram amplificadas pelas duas técnicas moleculares, enquanto que nenhum dos vírus heterólogos (Pneumovírus Aviário do grupo A e B, Vírus da Doença de Gumboro e o Vírus da Doença de Newcastle) ensaiados levaram a amplificação específica do gene 81. O limiar de detecção para a técnica de IC-RT-PCR foi idêntico ao do método de RT-PCR e correspondeu a 102.8 Doses Infectantes Embrionárias 50%. Para um total de 35 amostras de tecidos do trato respiratório testadas e provenientes de aves infectadas experimentalmente, 32 foram positivas pela técnica de IC-RT-PCR e também pela RT-PCR convencional, enquanto que o isolamento viral foi obtido para 22 dessas amostras. A análise do produto amplificado do gene 81 na IC-RT-PCR através da técnica de RFLP (restriction fragment length polymorphism), com as enzimas Alul e Mboll, permitiu a diferenciação das 5 estirpes de referências e dos 6 isolados de campo analisados em 4 diferentes genótipos, correspondentes às estirpes de referência M41, Connecticut, ou 8E-17, ou a um isolado de campo. Portanto, a técnica de IC¬RT -PCR demonstrou um grande potencial para ser aplicada no diagnóstico direto do VBI, apresentando vantagens sobre a técnica convencional de RT-PCR, as quais foram derivadas da combinação da especificidade da imunocaptura em fase sólida com a sensibilidade da reação de PCR, o que pode proporcionar ganho de tempo e menor custo para a manipulação de um maior número de amostras. / Abstract: In this study, the immunocapture procedure followed by reverse transcription and polymerase chain reaction (IC-RT-PCR) technique was standardized and applied for the amplification of 5'- proximal pari of 81 gene of infectious bronchitis virus (IBV) in infected f1uid or tissue samples, which were collected from embryonating chicken eggs or experimentally infected birds. The results of this technique were compared with those obtained in conventional RT-PCR. Ali eleven IBV strains tested were amplified, while none of the heterologous avian viral pathogens (Groups A and B Avian Pneumovirus, Newcastle Disease Virus and Gumboro Disease Vírus) gave positive results. The limit of detection for IC-RT¬PCR was identical to the common RT-PCR and corresponded to 102.8 50% embryonic infectious doses. Thirty two out of thirty five respiratory tissue samples collected from experimentally infected chickens were positive by both molecular techniques (IC-RT-PCR I common RT-PCR), whereas the vírus isolation test detected IBV in twenty two of these samples. The AluL and Mobll RFLP analysis of the 228 bp amplicon generated from IC-RT-PCR led to the discrimination of the 5 reference strains and 6 field IBV isolates in four genotypes; which were associated to the M41, to Connecticut, ar to 8E-17 strain, or to a field isolate. Therefore, the IC-RT-PCR demonstrated in this study a high potential for the application in the direct diagnosis of IBV and has relevant advantages over the conventional RT¬PCR, because it combines the specificity of the immunocapture in a solid phase with the sensitivity of the PCR, providing simplicity, rapidity and low cost for the manipulation of a high number of samples. / Mestre

Orientador: Armando Garms / Banca: Claudemira Azevedo Ito / Banca: Alba Regina Azevedo Arana / Resumo: Esta pesquisa foi sobre o diagnóstico turístico rural utilizando o Geoprocessamento na estrada do Cardoso localizada no município de Bela Vista do Paraíso - PR. Por estar situada próxima a área urbana, é uma região rural de fácil acesso e de propriedades com algumas vocações turísticas, possuindo pequenas quedas d'água, criação de animais, pomares, fragmentos de matas e cultura caipira, dentre outros. Procurou-se como objetivo, fornecer subsídios para o desenvolvimento turístico da região utilizando como ferramenta o Geoprocessamento. Foram feitos trabalhos de campo para inventariar os atrativos de 26 propriedades sendo todos georreferenciados através do Sistema de Posicionamento Global - GPS. Utilizou-se a cartografia digital para a elaboração das cartas temáticas, para no final, analisar a vocação turística. Existem três grandes atrativos já em operação: a chácara Vale do Lago, o sítio Bom Jardim e a festa da capela Santo Antônio; estes atrativos turísticos aliados à cultura rural possibilitam a implantação do turismo na região. Analisando os aspectos negativos e positivos para a implantação turística, sobressaem os positivos, sabendo-se que a atividade não possibilitará, num primeiro momento, o saneamento de dívidas e enriquecimento dos proprietários, mas poderá gerar renda e alguns empregos / Abstract: This research was on the rural tourist diagnosis using Geoprocessing in located Cardoso's highway in the municipal district of Beautiful View of the Paradise - PR. For being placed close the urban area, is a rural area of easy access and of properties with some tourist vocations, possessing small falls of water, creation of animals, orchards, fragments of forests and tacky culture, among others. It was sought as objective, to supply subsidies for the tourist development of the area using as tool Geoprocessing. They were made field works to inventory the attractions of 26 properties being all georeferenced through the System of Global Positioning - GPS. The digital cartography was used for the elaboration of the thematic letters, for in the end, to analyze the tourist vocation. Three great attractions already exist in operation: the small farm is Worth of the Lake, the ranch Good Garden and the party of the chapel Saint Anthony; these attractions tourist allies to the rural culture make possible the implantation of the tourism in the area. Analyzing the negative and positive aspects for the tourist implantation, they stand out the positive ones, being known that the activity won't make possible, in a first moment, the sanitation of debts and the proprietors' enrichment, but it can generate income and some jobs / Mestre

Orientador: Tereza Cristina Cardoso Silva / Banca: Maria Cecília Rui Luvizotto / Banca: Edviges Maristela Pituco / Resumo: A língua azul é uma doença viral, cujo agente etiológico pertence à família Reoviridae, gênero Orbivírus, transmitida por um vetor (artrópode) hematófago, do gênero Culicoides. Por se tratar de doença confundível com Febre Aftosa está incluída na lista de diagnóstico diferencial juntamente com Estomatite Vesicular, Varíola Ovina, Ectima Contagioso. O estudo teve como objetivo detectar a presença de anticorpos para língua azul em ovinos da região de Araçatuba, por ser esta uma região com rebanho expressivo e condições climáticas favoráveis à multiplicação de insetos. As amostras foram colhidas ao longo do ano de 2006, de ovinos adultos, em fase reprodutiva, (acima de 12 meses e com pelo menos uma parição, ou em caso de machos sexualmente maduros) e sem sintomas característicos da doença, de ambos os sexos, cadastrados no Núcleo de Produtores de Ovinos da Região de Araçatuba, distribuídas nos municípios da Região administrativa de Araçatuba. O tamanho da amostras foi calculado, considerando-se distribuição normal, prevalência de 50%, nível de confiança de 95% e precisão absoluta de 3%. Foram analisadas 1002 amostras de soros ovinos adultos, provenientes de 31 cabanhas, pelas provas de imunodifusão dupla em gel de agar (IDGA) e ELISA (Enzyme Linked immunosorbent Assay) de competição da fase sólida (ELISA CFS), provenientes do Centro Panamericano de Febre aftosa. Dessas amostras, 744 (74,3%) foram reagentes ao vírus da língua azul , pelo teste de ELISA-CFS e 651 (65,1%), pela técnica de IDGA. Não houve associação significante entre prevalência da doença e o sexo dos animais. Esses resultados revelam que o Vírus da Língua Azul encontra-se disseminado nessas regiões, sugerindo a ocorrência de infecções inaparente. / Abstract: Bluetongue (BT) is an infectious, non-contagious, insect-born viral disease of Ruminants. The causative agent of BT is bluetongue virus (BTV) that belongs to the family Reoviridae genus Orbivirus. Insect vectors in the genus Culicoides transmit this virus. BT affects domestic and wild ruminants, however small ruminants are considered the most affected specie. BT is included in the OIE list based on the differential diagnosis with Foot and Mouth Disease (FMDV), Vesicular Stomatitis Virus (VSV) and Sheep Pox Virus (SPV). The aim of the study was to detect antibodies against BTV in commercial sheep farms, of the Northeastern region of Sao Paulo State, Brazil. The size of the samples was calculated, considering normal distribution, prevalence of 50%, confidence level of 95% and absolute precision of 3%.A total of 1002 sera samples collected from adult sheep (above 1 year-old), comprising a total of 31 farms, were screened for the presence of BTV antibodies, by agar gel immunodiffusion test (AGID) and ELISA-CFS (Enzyme Linked Immunosorbent Assay - competitive solid phase), both produced by Pan American Center of FMDV. From a total of 744 samples 74,3% were positive by ELISA - CFS and 651 (65,1%) were positive by AGID. There was no significant association between prevalence of the disease and sex of animals.These results suggest that the BTV is widespread among farms, probably causing subclinical infections, with high level of antibodies. / Mestre

Orientador: Hélio José Montassier / Banca: José Moacir Marin / Banca: Liana Brentano / Resumo: Um método de diagnóstico baseado na associação entre as técnicas de RT-PCR e ELISA foi desenvolvido para a detecção do vírus da bronquite infecciosa das aves (VBI). Inicialmente, a especificidade e a sensibilidade analíticas dessa técnica, bem como dos métodos de RT-PCR e Nested-RT-PCR, foram determinadas, tendo-se demonstrado, para o primeiro parâmetro, apenas a detecção do VBI, enquanto que outros vírus heterólogos aviários testados, tais como pneumovírus aviário (APV / estirpe do grupo B), vírus da doença de Newcastle (NDV / estirpe La Sota) e vírus da doença de Gumboro (GDV - estirpe Lukert), não foram detectados. Quanto à avaliação da sensibilidade analítica dos métodos empregados neste estudo foi constatado que o RT-PCR-ELISA demonstrou ser 10 vezes mais sensível do que a RT-PCR, enquanto que a reação de Nested-PCR foi 100 vezes mais sensível que a RT-PCR e 10 vezes mais sensível que o RT-PCR-ELISA. A técnica de RT-PCR-ELISA, juntamente com os outros dois métodos de biologia molecular, foram aplicadas para a detecção das estirpes H-120 e A034 do VBI, em amostras de pulmão e traquéia obtidas de aves experimentalmente infectadas com essas duas estirpes virais. Os resultados obtidos nos diferentes métodos de biologia molecular foram comparados entre si e com a técnica padrão de isolamento viral em ovos embrionados, verificando-se que o RT-PCR-ELISA revelou-se tão específico quanto as técnicas de isolamento viral e Nested-PCR, porém foi menos sensível do que esses mesmos métodos na detecção do VBI. A técnica de RT-PCR-ELISA, utilizada pela primeira vez para o VBI, demonstrou o potencial de se constituir uma alternativa viável para um diagnóstico direto mais rápido e específico do VBI. / Abstract: A molecular biology method for the detection of avian infectious bronchitis virus (IBV) was developed combining the reverse transcription and polymerase chain reaction (RT-PCR) with the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Firstly, the analytical specificity and sensitivity of RT-PCR-ELISA, RT-PCR and Nested-RT-PCR were assessed. The specificity of these methods were confirmed since only IBV was detected, while other heterologous avian viral pathogens such as pneumovirus (Group B), Newcastle disease virus (LaSota strain) and gumboro disease virus (Lukert strain) were not detected by these techniques. The sensitivity of these methods was established, indicating that the RT-PCR-ELISA was about ten times more sensitive than conventional RT-PCR, while Nested-PCR was a hundred more sensitive than RT-PCR and ten times more sensitive than PCR-ELISA. The RT-PCR-ELISA and the two molecular biology methods were also applied for the detection of IBV strains H-120 and A034, in lung and tracheal tissue samples collected from experimentally infected chickens. The results of these different methods were also compared with the standard diagnostic technique, the virus isolation in chicken embryonated eggs, showing that RT-PCR-ELISA was as specific as virus isolation and Nested-PCR, however it was less sensitive than these methods for the IBV detection. The RT-PCR-ELISA, applied for the first time for IBV detection and direct diagnosis in tissue samples, can be potentially applied as an useful alternative for the rapid and specific diagnosis of IBV. / Mestre

Orientador: Rita de Cássia Loiola Cordeiro / Banca: Fausto Medeires Mendes / Banca: Lourdes Aparecida Martins dos Santos Pinto / Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar a efetividade da fluorescência a laser (KaVo DIAGNOdent) para a determinação da severidade de lesões de cárie oclusal em dentes permanentes in vivo e para determinação da remineralização in vitro de lesões de cárie induzidas artificialmente em esmalte de dentes bovinos. No estudo in vitro, 78 blocos de esmalte com lesões de cárie artificial (mancha branca) com valores de dureza Vickers de 38,48 l 0,85 foram submetidos ao tratamento com dentifrício fluoretado durante a ciclagem de pH, para promover a remineralização. Antes do início do experimento, após a desmineralização e após a remineralização foram realizadas análises com a fluorescência a laser e análises de microdureza superficial do esmalte. Foram encontradas diferenças significantes nas medidas de microdureza superficial (p < 0,0001) nas 3 etapas. Os valores encontrados nas leituras com a fluorescência a laser foram extremamente baixos (entre 0-5), apresentando diferença estaticamente significante somente após a remineralização. No estudo in vivo, foram selecionados 130 sítios de primeiros molares permanentes hígidos ou com presença de lesões de cárie incipientes na superfície oclusal, em crianças com idade entre 7 a 12 anos. Após profilaxia, foi realizada a inspeção visual pelo Examinador A e 23 o exame com o DIAGNOdent pelo Examinador B. Apenas os sítios com sinais sugerindo lesão de cárie foram abertos com equipamentos que permitiram preparos conservadores e a extensão da lesão (padrão-ouro) foi determinada pelo Examinador C. De acordo com os pontos de corte propostos pela KaVo (1999) e com os novos pontos de corte estabelecidos pela curva ROC, observamos uma diferença na especificidade, 0,31 e 0,85 respectivamente, considerando todas as lesões como cariadas, e um equilíbrio entre sensibilidade ...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: The purpose of this study was to evaluate the effectiveness of laser fluorescence device (DIAGNOdent) in detecting in vivo depth of occlusal caries lesions in permanent teeth and detecting in vitro remineralization of artificial caries lesions in enamel bovine teeth. On in vitro study, 78 enamel blocks with artificial caries lesions (white spot lesions) with Vickers microhardness number of 38.48 l 0.85 were submitted to dentifrice treatment during the pH-cycling, to promote remineralization. At baseline, after demineralization and after remineralization analyses were carried through with laser fluorescence device and enamel superficial microhardness analyses. Significant differences in superficial microhardness measures were found in the 3 stages (p < 0.0001). Values found in laser fluorescence readings were extremely low (between 0-5), presenting difference statistically significant only after remineralization. On in vivo study, one hundred and third sites from occlusal surfaces of sound or carious first permanent molars were selected in children, aged between 7 and 12 years. After professional cleaning, visual inspection was performed by Examiner A and laser fluorescence (DIAGNOdent) assessment by Examiner B. Only the sites presenting signals suggesting caries lesions were opened that resulted from minimal intervention and the 26 lesion extension (gold-standard) was determined by Examiner C. In accordance with cut-off points proposed by KaVo (1999) and with the new cut-off points established by ROC curves, we observe a difference in specificity, 0.31 and 0.85 respectively, considering all lesions as caries, and a balance between sensitivity (0.70) and specificity (0.87) for the new cut-off points considering dentine lesions only. Accuracy for visual inspection was ...(Complete abstract, click electronic address below). / Mestre