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Efeitos da exposição pré-púbere ao herbicida glifosato no desenvolvimento reprodutivo de ratos Wistar machos / Effects of the prepubertal exposure to glyphosate herbicide on reproductive development of male Wistar rats

Romano, Renata Marino 14 December 2007 (has links)
O glifosato-Roundup é um herbicida amplamente utilizado em diversas culturas agrícolas. Sua toxicidade reprodutiva está relacionada com a inibição da proteína StAR e da enzima aromatase, causando in vitro redução significativa da produção de testosterona e estradiol. Este trabalho teve como objetivo verificar esse efeito in vivo, utilizando-se ratos Wistar machos pré-púberes como modelo experimental. Utilizou-se 68 machos tratados dos 23 aos 53 dias de idade com as doses de 0, 5, 50 e 250 mg/kg de peso vivo por gavagem uma vez ao dia. Foram avaliados a progressão da puberdade, o desenvolvimento corporal, a produção hormonal de testosterona, estradiol e corticosterona, morfologia testicular e da glândula adrenal, função renal e hepática e histopatologia renal e hepática. As análises estatísticas utilizadas foram a análise de variâncias de uma via ANOVA, de duas vias MANOVA ou Kruskall-Walis e pós-testes de Tukey-Kramer, Fisher ou de Dun. O herbicida glyphosate-Roundup alterou de forma significativa a progressão da puberdade de forma dose dependente, bem como se observou a redução na produção de testosterona e alterações na morfologia dos túbulos seminíferos. A morfologia da glândula adrenal e a produção de corticosterona não foram afetadas pelas doses utilizadas nesse estudo. Observou-se comprometimento da função renal e alterações patológicas nesse órgão. Não foram evidenciadas alterações hepáticas. O crescimento corporal dos animais não foi influenciado pelo tratamento. Pode-se concluir que esse herbicida é um potente disruptor endócrino in vivo, causando distúrbios no desenvolvimento reprodutivo e na produção hormonal dos animais. / The glyphosate-Roundup is a widely pesticide used in several culturas agrícolas. Its reproductive toxicity is associated to inhibition of StAR protein and aromatase enzime that cause in vitro significantly reduction in testosterone and estradiol production. The objective of this study was to evaluate the in vivo effects of inhibition of StAR protein and aromatase enzyme, using prepubertal male Wistar rats like experimental model. 68 animals were exposed once a day by gavage to glyphosate-Roundup in following doses: 0, 5, 50 or 250 mg/kg of body weight. The end points were puberty progression, body development, testosterone, estradiol and corticosterona productions and testicular and adrenal morphology, renal and liver function and histopatology. The statistical analysis used were one-way ANOVA, multi-way ANOVA or Kruskall-Walis and posthoc tests of Tukey-Kramer, Fisher or Dun. The herbicide glyphosate-Roundup changed significantly the puberty progression in dose-dependent manner, as well reduction in testosterone production and alterations in testicular morphology. There were not observed alterations in adrenal morphology or corticosterone production in the doses used in this study. The renal function and histopatology were altered in treated groups while liver function wasn\'t. The body development was not influenced by the exposure. In conclusion, glyphosate-Roundup is a potent endocrine disruptor in vivo that cause problems in reproductive development and hormonal synthesis in exposure animals.
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Efeitos da exposição pré-púbere ao herbicida glifosato no desenvolvimento reprodutivo de ratos Wistar machos / Effects of the prepubertal exposure to glyphosate herbicide on reproductive development of male Wistar rats

Renata Marino Romano 14 December 2007 (has links)
O glifosato-Roundup é um herbicida amplamente utilizado em diversas culturas agrícolas. Sua toxicidade reprodutiva está relacionada com a inibição da proteína StAR e da enzima aromatase, causando in vitro redução significativa da produção de testosterona e estradiol. Este trabalho teve como objetivo verificar esse efeito in vivo, utilizando-se ratos Wistar machos pré-púberes como modelo experimental. Utilizou-se 68 machos tratados dos 23 aos 53 dias de idade com as doses de 0, 5, 50 e 250 mg/kg de peso vivo por gavagem uma vez ao dia. Foram avaliados a progressão da puberdade, o desenvolvimento corporal, a produção hormonal de testosterona, estradiol e corticosterona, morfologia testicular e da glândula adrenal, função renal e hepática e histopatologia renal e hepática. As análises estatísticas utilizadas foram a análise de variâncias de uma via ANOVA, de duas vias MANOVA ou Kruskall-Walis e pós-testes de Tukey-Kramer, Fisher ou de Dun. O herbicida glyphosate-Roundup alterou de forma significativa a progressão da puberdade de forma dose dependente, bem como se observou a redução na produção de testosterona e alterações na morfologia dos túbulos seminíferos. A morfologia da glândula adrenal e a produção de corticosterona não foram afetadas pelas doses utilizadas nesse estudo. Observou-se comprometimento da função renal e alterações patológicas nesse órgão. Não foram evidenciadas alterações hepáticas. O crescimento corporal dos animais não foi influenciado pelo tratamento. Pode-se concluir que esse herbicida é um potente disruptor endócrino in vivo, causando distúrbios no desenvolvimento reprodutivo e na produção hormonal dos animais. / The glyphosate-Roundup is a widely pesticide used in several culturas agrícolas. Its reproductive toxicity is associated to inhibition of StAR protein and aromatase enzime that cause in vitro significantly reduction in testosterone and estradiol production. The objective of this study was to evaluate the in vivo effects of inhibition of StAR protein and aromatase enzyme, using prepubertal male Wistar rats like experimental model. 68 animals were exposed once a day by gavage to glyphosate-Roundup in following doses: 0, 5, 50 or 250 mg/kg of body weight. The end points were puberty progression, body development, testosterone, estradiol and corticosterona productions and testicular and adrenal morphology, renal and liver function and histopatology. The statistical analysis used were one-way ANOVA, multi-way ANOVA or Kruskall-Walis and posthoc tests of Tukey-Kramer, Fisher or Dun. The herbicide glyphosate-Roundup changed significantly the puberty progression in dose-dependent manner, as well reduction in testosterone production and alterations in testicular morphology. There were not observed alterations in adrenal morphology or corticosterone production in the doses used in this study. The renal function and histopatology were altered in treated groups while liver function wasn\'t. The body development was not influenced by the exposure. In conclusion, glyphosate-Roundup is a potent endocrine disruptor in vivo that cause problems in reproductive development and hormonal synthesis in exposure animals.
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Fotojornalismo disruptivo: espaços de disputa, processos de ruptura e a representação visual dos acontecimentos no World Press Photo

LEITÃO, Juliana Andrade 26 February 2016 (has links)
Submitted by Irene Nascimento (irene.kessia@ufpe.br) on 2016-07-15T18:20:31Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) teseJulianaAndradeLeitao.pdf: 13366276 bytes, checksum: f1956588e2ce094fd9a8343a999b1281 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-15T18:20:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) teseJulianaAndradeLeitao.pdf: 13366276 bytes, checksum: f1956588e2ce094fd9a8343a999b1281 (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / CAPES / Esta pesquisa se propõe a analisar qual olhar sobre o outro, sobre o mundo e sobre os acontecimentos tem sido premiado no fotojornalismo e quais rupturas são observáveis dentro das disputas éticas, estéticas, políticas e ideológicas nesse campo da fotografia/comunicação. A partir de um aprofundamento teórico e de uma observação empírica foi empreendido um processo que teve como meta traçar um panorama do que tem sido premiado em moldes pré-formatados; analisar imagens que causam desconforto, quando são escolhidas, porque não se relacionam com outras imagens já existentes; diagnosticar a potência que o fotojornalismo possui como linguagem visual de impacto que chega a tantos lugares no mundo e atinge pessoas de diferentes classes sociais, faixa etária etc.; diagnosticar e problematizar quais as rupturas dentro dos regimes éticos, estéticos, representativos da imagem que age dentro do jornalismo, possibilitando assim observar os espaços de disputa ideológica desse campo da comunicação e analisar a representação visual da realidade contemporânea a partir das imagens legitimadas pelos prêmios internacionais de fotojornalismo. Para tal, o corpus escolhido é o maior prêmio de fotojornalismo existente hoje no mundo, o World Press Photo. Para poder fazer uma separação que fosse viável e não deixasse de fora nenhuma área de conflito e disputa dentro da fotografia jornalística este trabalho se apropria do que propõe Rancière de regimes de imagem, os três grandes regimes permitiram entender que as categorias semânticas fazem mais sentido quando inseridas dentro do regime imagético a qual pertencem. A tese está dividida a partir da proposta do Regime Ético das Imagens, O Regime Poético ou Representativo das Artes e o Regime Estético. A partir disso, a tese propõe uma hipótese central a do fotojornalismo disruptivo pretendemos responder como poderia o fotojornalismo atual ser disruptivo, para tal utiliza-se os debates da teoria do jornalismo, os debates da fotografia, as questões da alteridade, das Representações e os debates sobre contemporaneidade e ruptura estética. / This research intends to analyze which kind of look and perception towards others, the world and its events has been awarded with prizes in photojournalism and which ruptures are perceptible within the ethical, aesthetical, political and ideological disputes in this field of photography and communication studies. From a deep theoretical framework and empirical observation, this research applied a process to properly trace a landscape of what sort of images have achieved awards; to analyze images that result in discomfort when chosen due to the absence of any relation to previously selected photos; to diagnose the strength of photojournalism as a visual language of impact that reaches so many places in the world and affects people from different social classes and ages; to diagnose and problematize which ruptures on the ethical and aesthetical imagery work within Journalism, making it possible to observe spaces of ideology dispute in this field of study in Communication and analyze the visual representation of the contemporary reality from legitimized images of international awards in photojournalism. For such task, the set of chosen data (corpus) is the biggest photojournalism award in the world, the World Press Photo. In order to properly chose a viable selection and avoid leaving aside any conflict or dispute within the journalistic photography, this research embraces Rancière's proposal of image regimes. The three great regimes allow us to understand which semantic categories make more sense when viewed from the image regimes from where they belong. This thesis is divided from the proposal of the Ethical Regime of Images, the Poetic Regime (or Arts Representative Regime) and the Aesthetical Regime. From this point forward, the research proposes a central hypothesis, the disruptive photojournalism, pretending to answer how the current photojournalism could be disruptive. For such, debates from the Journalism Theories, Photography debates and otherness questions are covered, including questions of representation and debates about contemporary issues and aesthetical rupture
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Inovação intraorganizacional: influência do intraempreendedorismo no fomento à disrupção digital de mercados

CARVALHO, Rafael Loureiro de 29 January 2016 (has links)
Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2016-08-05T15:22:56Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) msc-rlc-Final-BB.pdf: 1571813 bytes, checksum: 5798cb50511413addbcfba23f5dcd350 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-05T15:22:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) msc-rlc-Final-BB.pdf: 1571813 bytes, checksum: 5798cb50511413addbcfba23f5dcd350 (MD5) Previous issue date: 2016-01-29 / As grandes revoluções tecnológicas são cíclicas; ocorrem a cada 50 ou 60 anos. A cada iteração, tecnologias antes tidas como infalíveis e definitivas tornam-se obsoletas, dando lugar a novas formas de resolver problemas até então considerados intransponíveis. A revolução tecnológica em curso é a da Tecnologia da Informação e Comunicação, catalisada pela criação de um ambiente aberto e democrático: a Internet. Esta se transforma em uma plataforma ubíqua e permite que empreendedores repensem as dinâmicas sociais e econômicas. Um ecossistema baseado na Lei de Moore, que diz que a capacidade computacional dobra a cada 18 meses sob o mesmo custo, cria uma sensação de inexistência de limites à criatividade. O objetivo deste trabalho é analisar como corporações já estabelecidas, também chamadas de incumbentes, podem se comportar a fim de serem as catalisadoras de inovações nos mercados onde elas mesmas atuam, em vez de esperar que outras empresas o façam. Esta dissertação baseia-se nos princípios da pesquisa qualitativa, utilizando um método essencialmente prescritivo, com o objetivo principal de desenvolver recomendações. Para prover as diretivas, descreve-se a realidade, entendendo os fenômenos de inovação, empreendedorismo, intraempreendedorismo e disrupção digital, assim como as relações entre eventos que os geram ou os influenciam. Empresas incumbentes podem utilizar as recomendações descritas neste trabalho com o intuito de serem proativas na curva de disrupção de mercados, deixando de lado o papel de incumbentes disrompidos para serem protagonistas no processo de disrupção, mantendo a liderança nos mercados onde atuam e tornando-se capazes de vislumbrar novos fluxos de receitas estimulados pela inovação. / The great technological revolutions are cyclical; they take place every 50 or 60 years. During each iteration, technologies that were once deemed infallible and definitive become obsolete, giving way for new ways to solve problems once thought insurmountable. The current technological revolution is the Information and Communication one, which is empowered by the creation of an open and democratic environment: the Internet. The Internet is becoming a ubiquitous platform, allowing entrepreneurs to rethink social and economic dynamics. An ecosystem based on Moore’s Law, which states that the computing power doubles every 18 months at the same cost, creates a sensation of lack of limits to creativity. The goal of this work is to analyze how established companies, also called incumbents, should act in order to be the catalysts for innovation in the markets where they operate, rather than waiting for other companies to do so. This dissertation is based on the qualitative research approach and uses an essentially prescriptive method with the main objective to develop recommendations. In order to provide these guidelines, it describes the reality by understanding the phenomena of innovation, entrepreneurship, intrapreneurship and digital disruption, as well as the relationships among the events that generate or influence them. Incumbent companies may utilize the recommendations here described with the purpose of being proactive on the market disruption curve, leaving aside the disrupted incumbent role to become the protagonists on the disruption process, maintaining their market share leadership and also becoming capable of glimpse new revenue streams inspired by innovation.
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Disrupções e regulações em circuitos e circulações difusas: a construção do caso sobre o boato da bruxa de Guarujá

Behs, Micael Vier 16 June 2017 (has links)
Submitted by JOSIANE SANTOS DE OLIVEIRA (josianeso) on 2017-09-26T16:18:24Z No. of bitstreams: 1 Micael Vier Behs_.pdf: 3421843 bytes, checksum: 36f4165a69ed74d69d2c8fccf9a6aa91 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-26T16:18:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Micael Vier Behs_.pdf: 3421843 bytes, checksum: 36f4165a69ed74d69d2c8fccf9a6aa91 (MD5) Previous issue date: 2017-06-16 / Nenhuma / Essa tese está organizada em torno de um diagrama que relaciona três instâncias semiotécnicas – a página Guarujá Alerta no Facebook, o site jornalístico Folha.com e suas respectivas seções de comentários. Observamos e inferimos as construções de sentido quando essas instâncias estão em interações em torno do boato da Bruxa de Guarujá (2014). A perspectiva são as epistemologias da midiatização, em específico quando se abordam as redes digitais. A construção do caso acadêmico é um processo que relaciona aporte metodológico, inferências criativas e existenciais, analogias circulares e a definição de três proposições de pesquisa. A primeira delas sugere que as construções de sentido em torno do caso se desdobram a partir de interações entre os três meios em análise, em contato com meios tangenciais, dada a natureza relacional do ambiente midiático. A segunda proposição indica que a página e o site desenvolvem estratégias distintas de acesso dos interagentes ao seu sistema, situação que desencadeia experiências autorregulatórias, assim como contendas entre produção e recepção produtiva. A terceira proposição revela tentativas, manifestadas por atores sociais midiatizados, de encontrar culpados para a exacerbação do boato em morte. Identifica-se um objeto simbólico, denominado de “culpabilização”, que, entretanto, não se apresenta de forma estática e consensual ao longo do caso analisado, ganhando distintos contornos e perspectivas interpretativas a partir de sua associação a outros elementos postos em circulação no mercado discursivo. A análise centra-se nos conceitos de circulação, midiatização, boato, incerteza e disrupção, demonstrando o potencial degenerativo associado ao funcionamento das redes, ainda que delas também verta informação regulatória, reiterando-se o lugar mediador que segue reservado ao jornalismo canônico em tempos de indistinção entre produtores e receptores de meios semiotécnicos. / This dissertation is structured around a diagram that relates three semio-technical media, viz. the Guarujá Alerta Facebbok page, the Folha.com news site, and their respective sections of comments. It makes observations and inferences about the construction of meaning when these media are involved in interactions around the rumor about the so-called “Guarujá Witch” (2014). Its methodological perspective is the concept of mediatization, specifically when discussing digital media. The construction of the academic case is a process that relates methodological contributions, creative and existential inferences, circular analogies and the definition of three research propositions. The first proposition suggests that the constructions of meaning around that case develop based on interactions between the three media analyzed here, which are in contact with tangential media, given the relational nature of the media environment. The second proposition indicates that the Facebook page and the news site employ different strategies to enable web surfers to access their systems, which is a situation that gives rise to self-regulatory devices, as well as conflicts between production and productive reception. The third proposition reveals attempts by mediatized social actors at finding those who were guilty for the culmination of the rumors in a murder. The study identifies a symbolic object called “blaming”, which, however, does not present itself in a static and consensual manner throughout the case analyzed here, but acquires different contours and interpretive perspectives based on its association with other elements that are put into circulation in the discursive market. The analysis focuses on the concepts of circulation, mediatization, rumor, uncertainty and disruption and shows the degenerative potential associated with the way the media function, although the latter also provide regulatory information. This reiterates the mediating place that is still reserved for canonical journalism in a time of non-distinction between producers and receivers of semio-technical media.
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Manejo de Neoleucinodes elegantalis (Guenée) (Lepidoptera: Crambidae) em tomateiro no agreste do estado de Pernambuco: estudos comportamentais, uso de iscas tóxicas, inseticidas botânicos e sintéticos / Management of Neoleucinodes elegantalis (Guenée) (Lepidoptera: Crambidae) in tomato in the agrest region of the state of Pernambuco: behavioral studies, use of toxic baits and of botanical and synthetic insecticides

FRANÇA, Solange Maria de 04 February 2013 (has links)
Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-12-02T12:42:01Z No. of bitstreams: 1 Solange Maria de Franca.pdf: 466611 bytes, checksum: 4a705ea39b9d5a92efd855c9d94601d9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-02T12:42:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Solange Maria de Franca.pdf: 466611 bytes, checksum: 4a705ea39b9d5a92efd855c9d94601d9 (MD5) Previous issue date: 2013-02-04 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The tomato fruit borer, Neoleucinodes elegantalis (Guenée) (Lepidoptera: Crambidae), stands out as a key pest of tomato, the main vegetable cultivated in Brazil. Its control is accomplished through the use of synthetic chemical insecticides, commonly used improperly. Thus, researches that aim at proper use of these insecticides associated with other control techniques are of the utmost importance for the integrated management of this pest. In this study, it was evaluated the efficiency of the wax formulation (SPLAT), with and without the insecticide cypermethrin in the sexual disruption of N. elegantalis, and its effect in reducing injuries on tomato fruits. The effects of the insecticides used in the "Agreste" region of Pernambuco and neem based insecticides (Natuneem and Azamax) on eggs, pre-pupae and pupae of N. elegantalis were also evaluated. In the tests of repellent effect on oviposition it was used the insecticides methomyl, chlorpyrifos, lambda-cyhalothrin, beta-cypermethrin, deltamethrin, ethofenprox, chlorantraniliprole and Natuneem and Azamax. As toxic baits it was used lufenuron, deltamethrin and indoxocarb associated with sucrose at 2.5% as attractive for adults, applied over tomato plants. The SPLAT treatments significantly reduced the number of eggs and the injuries in tomato fruits. However, applications before and after flowering were more efficient for N. elegantalis sexual disruption. The insecticides methomyl and ethofenprox had the highest inviability of eggs, reduced larval survival and the number of entry and exit holes on the fruits. Ethofenprox had the highest average mortality, causing 50% mortality in pupae and 38% in pre-pupae. As for repellency, all insecticides tested except for Natuneem and chlorantraniliprole reduced significantly the number of eggs compared with control. Lufenuron and deltamethrin showed great potential for use in toxic bait, since reduced the number of eggs, while the indoxocarb stimulated oviposition, being not recommended for this purpose. / A broca-pequena, Neoleucinodes elegantalis (Guenée) (Lepidoptera: Crambidae), destacase como praga-chave da cultura do tomateiro, principal hortaliça cultivada no Brasil. Seu controle é realizado através do uso de inseticidas químicos sintéticos, comumente aplicados de forma inadequada. Assim, pesquisas que visem à utilização apropriada desses inseticidas, associados com outras táticas de controle são de suma importância para o manejo integrado dessa praga. No presente trabalho, avaliou-se a eficiência da formulação de cera (SPLAT), com e sem o inseticida cipermetrina, na disrupção sexual de N. elegantalis, e seu efeito na redução das injúrias nos frutos de tomate. Os efeitos dos inseticidas utilizados na região Agreste de Pernambuco e inseticidas a base de nim (Natuneem e Azamax) sobre ovos, pré-pupas e pupas de N. elegantalis, também foram avaliados. Nos testes sobre o efeito repelente na oviposição utilizaram-se os inseticidas metomil, clorpirifós, lambda-cialotrina, beta-cipermetrina, deltametrina, etofenproxi, clorantraniliprole, Natuneem e Azamax. Como iscas tóxicas, utilizaram-se lufenurom, deltametrina e indoxocarbe associados à sacarose a 2,5% como atraentes para adultos, aplicados sobre plantas de tomateiro. Os tratamentos SPLAT reduziram significativamente o número de ovos e as injúrias nos frutos de tomate. No entanto, aplicações antes e após o florescimento foram mais eficientes para a disrupção sexual de N. elegantalis. Os inseticidas etofenproxi e metomil proporcionaram as maiores inviabilidades de ovos e reduziram a sobrevivência das lagartas e o número de orifícios de entrada e saída nos frutos. Etofenproxi obteve mortalidade média de 38% em pré-pupas e 50% em pupas. Quanto à repelência, com exceção de Natuneem e clorantraniliprole, os inseticicidas reduziram, significativamente, o número de ovos, quando comparados com a testemunha. Lufenurom e deltametrina apresentaram grande potencial para serem utilizados em isca tóxica, pois reduziram o número de ovos, enquanto o indoxocarbe estimulou a oviposição, não sendo recomendado o seu uso para essa finalidade.
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Caracterização de Mutantes de Xanthomonas citri Gerados por Disrupção Gênica Randômica Usando Transposon / Characterization of Xanthomonas citri mutants generated by random gene disruption using transposon

Garcia, Julio Cesar Levano 06 February 2003 (has links)
Xanthomonas axonopodis pv citri (Xac), uma bactéria gram negativa, é a causadora da doença Cancro Cítrico que ocasiona enormes prejuizo na citricultura brasileira. Com o seqüenciamento do genoma deste patógeno foram encontradas inúmeras sequências codificadores com funções desconhecidas. Assim com a finalidade de estudos funcionais do genoma de Xac, foram gerados mutantes randômicos usando o transposon EZ::TN, que induziu disrupção aleatoria de seus genes com o intuito de avaliar que genes inativados afetam a patogenicidade da bactéria. Para o mapeamento do local de inserção do transposon foi desenvolvida uma metodologia baseada na técnica de PCR touchdown utizando oligonucleotídeos semidegenerados. A confiabilidade deste novo método foi comprovada através do mapeamento por Southem blot de alguns mutantes. Conseguiu-se mapear 90 mutantes randômicos com este método. Os testes de patogenicidade em citros mostraram mutantes com sua patogenicidade afetada observando-se variações nos sintomas da doença. Mutantes interessantes contendo uma ORF hipotética inativada ou tendo uma inserção num espaço intergênico foram achadas, sendo também detectados alguns mutantes com nocaute de genes nos seus plasmídeos pXac33 e pXac66. / Xanthomonas axonopodis pv citri (Xac), a gram-negative bacteria, is the causer of the Citrus Canker disease that produces enormous losses to the brazilian citrus sector. Many coding sequences with unknown functions were found in the genome sequence of this pathogen. Therefore, with the goal of functional studies of Xac\'s genome, random mutants using the EZ::TN transposon, have been generated, which carry aleatory disruptions of their genes, with the aim of evaluating inactived genes that potentially affect bacterial pathogenicity. A method based in the PCR touchdown technique using semidegenerate primers was developed for the mapping of the transposon insertion site. The reliability of this new method was tested by means of mapping some mutants using Southern blot. Ninety random mutants were mapped with this method. The pathogenicity tests in citrus showed mutants with their pathogenicity affected and variations in the disease symptoms were observed. Interesting mutants containing an inactive hypothetical ORF or with an insertion in intergenic regions have been found, and also some mutants with inactivated genes in their plasmids pXac33 and pXac66 were detected.
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Caracterização de Mutantes de Xanthomonas citri Gerados por Disrupção Gênica Randômica Usando Transposon / Characterization of Xanthomonas citri mutants generated by random gene disruption using transposon

Julio Cesar Levano Garcia 06 February 2003 (has links)
Xanthomonas axonopodis pv citri (Xac), uma bactéria gram negativa, é a causadora da doença Cancro Cítrico que ocasiona enormes prejuizo na citricultura brasileira. Com o seqüenciamento do genoma deste patógeno foram encontradas inúmeras sequências codificadores com funções desconhecidas. Assim com a finalidade de estudos funcionais do genoma de Xac, foram gerados mutantes randômicos usando o transposon EZ::TN, que induziu disrupção aleatoria de seus genes com o intuito de avaliar que genes inativados afetam a patogenicidade da bactéria. Para o mapeamento do local de inserção do transposon foi desenvolvida uma metodologia baseada na técnica de PCR touchdown utizando oligonucleotídeos semidegenerados. A confiabilidade deste novo método foi comprovada através do mapeamento por Southem blot de alguns mutantes. Conseguiu-se mapear 90 mutantes randômicos com este método. Os testes de patogenicidade em citros mostraram mutantes com sua patogenicidade afetada observando-se variações nos sintomas da doença. Mutantes interessantes contendo uma ORF hipotética inativada ou tendo uma inserção num espaço intergênico foram achadas, sendo também detectados alguns mutantes com nocaute de genes nos seus plasmídeos pXac33 e pXac66. / Xanthomonas axonopodis pv citri (Xac), a gram-negative bacteria, is the causer of the Citrus Canker disease that produces enormous losses to the brazilian citrus sector. Many coding sequences with unknown functions were found in the genome sequence of this pathogen. Therefore, with the goal of functional studies of Xac\'s genome, random mutants using the EZ::TN transposon, have been generated, which carry aleatory disruptions of their genes, with the aim of evaluating inactived genes that potentially affect bacterial pathogenicity. A method based in the PCR touchdown technique using semidegenerate primers was developed for the mapping of the transposon insertion site. The reliability of this new method was tested by means of mapping some mutants using Southern blot. Ninety random mutants were mapped with this method. The pathogenicity tests in citrus showed mutants with their pathogenicity affected and variations in the disease symptoms were observed. Interesting mutants containing an inactive hypothetical ORF or with an insertion in intergenic regions have been found, and also some mutants with inactivated genes in their plasmids pXac33 and pXac66 were detected.

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