Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Se estima que la enfermedad de Chagas, producida por Trypanosoma cruzi, afecta a más de ocho millones de personas en la actualidad, principalmente en Latinoamérica. En Chile, el área endémica se extiende desde la Región de Arica hasta la Región de O’Higgins, resaltando la Región de Coquimbo por un alto reporte de triatominos. El parásito infecta a mamíferos, destacándose como reservorio doméstico el perro (Canis lupus familiaris). En Chile existen pocos estudios recientes sobre prevalencia en perros y ninguno en carga parasitaria, por lo tanto, el objetivo de este estudio fue evaluar la infección por T. cruzi en perros de sectores rurales de la Región de Coquimbo, Chile, utilizando PCR en tiempo real para su cuantificación. Se dispuso de 380 muestras de sangre de perros muestreados en el año 2015 de ocho poblados rurales de la Región de Coquimbo. El parásito fue detectado en 29 de las 380 muestras (7,6% de infección) y dentro de las muestras positivas, todas tuvieron menos de 1 parásito equivalente/mL. Si bien las cargas parasitarias fueron bajas, el nivel de positividad en los perros indica que T. cruzi circula en sectores rurales cercanos al hombre. No se encontraron diferencias según edad, condición corporal, provincia o sexo respecto al estatus de infección. Respecto a las cargas parasitarias se encontró lo mismo, a excepción del sexo donde si hubo diferencias indicando que las cargas parasitarias en hembras fueron mayores. Los perros de este estudio fueron infectados después de la interrupción vectorial declarada en 1999, y existe cierto riesgo de que la transmisión haya sido vectorial. Es por esto, que se recomienda mantener a los perros dentro o fuera del hogar, pero no en ambos espacios. / It is estimated that Chagas disease, produced by Trypanosoma cruzi, affects more than eight million people today, mainly in Latin America. In Chile, the endemic area extends from the Arica Region to the O'Higgins Region, highlighting the Coquimbo Region due to a high report of triatomines. The parasite infects mammals, with the dog (Canis lupus familiaris) standing out as a domestic reservoir. In Chile there are few recent studies on prevalence in dogs and none in parasite load, therefore, the objective of this study was to evaluate T. cruzi infection in dogs from rural areas of the Region of Coquimbo, Chile, using real time PCR for its quantification. There were 380 blood samples of canines sampled in 2015 from eight rural villages in the Coquimbo Region. Of the 380 samples, the parasite was detected in 29 (7.6% of infection) and within the positive samples, all had less than 1 equivalent parasite / mL. Although parasitic loads were low, the level of positivity in dogs indicates that T. cruzi circulates in rural areas near human settlements. No differences were found according to age, body condition, province or sex concerning the infection status. Regarding parasitic loads, the same was found, except for sex where there were differences indicating that parasitic loads in females were higher. The dogs in this study were infected after the vectorial interruption declared in 1999, and there is some risk that the transmission has been vectorial. This is why it is recommended to keep dogs inside or outside the home, but not in both spaces. / CONICYT-FONDECYT 1140650, 1180940, 3170799

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Existen numerosas patologías que pueden afectar al intestino grueso de los animales de compañía, que si bien no son frecuentes en la clínica diaria, son relevantes, ya que su solución nos obliga a hacer frente a una gran complejidad como lo es el contenido séptico que se encuentra en dicha zona. Estas alteraciones son; obstrucción por cuerpo extraño, neoplasias, impactación cecal, inversión cecal, megacolon y prolapso rectal, siendo la solución a estas, procedimientos como la tiflectomía, colotomía, colectomía, colopexia y resección rectal. En relación a la síntesis de la pared del colon, existen variaciones en los rangos, puntos y material de sutura utilizados, demostrando cada técnica ciertas ventajas y desventajas, las cuales fueron evaluadas de manera experimental por los autores citados, en estudios donde los pacientes se encontraban sanos o bien eran casos aislados, con bajo número en la población de experimentación. Por lo que la elección tomada por el cirujano, no estará dada por la bibliografía que existe, sino más bien, por la experiencia que éste posea. En la implementación de nuevas tecnologías, se encuentra la utilización de grapadoras como material de sutura y la cirugía de mínima invasión. Ambas orientadas a disminuir el tiempo empleado y las complicaciones que se presenten en estos tipos de procedimientos. A pesar de esto, no existe evidencia que justifique la utilización de esta tecnología, que es de un costo mayor, en sustitución de la cirugía tradicional y sutura manual / There are a variety of pathologies that can affect companion animals’ large intestine, although they are not frequent in the daily clinic, they are important because solving them forces us to deal with a very complex issue, the septic content stored in this area. Some of these abnormalities are: intestinal obstruction by foreign objects, neoplasms, cecal impaction, cecal inversion, megacolon, and rectal prolapse; being tiflectomy, colostomy, colectomy, coloplexy, and rectal resection some solutions. Regarding the colon wall synthesis, there are variations in the ranges, stitches, and suture materials used. Each technique shows adventages and disadventages, which were tested experimentally by the authors in studies with small groups of healthy patients and isolated cases. The choice made by the surgeon would not be determined by bibliography but by the experience the surgeon has. In the implementation of new technologies, we find the use of staplers as suture materials and minimal incision surgery. Both of them orientated to lessen the time and the complications that may appear. Nevertheless, there is no evidence that justifies the usage of these technologies, which are more expensive, instead of traditional surgery and handsewn

Memoria-para-optar-al-Título-Profesional-de-Médico-Veterinario / La resistencia antimicrobiana corresponde a uno de los principales desafíos que presenta actualmente la salud pública. La incidencia de bacterias multirresistentes se ha incrementado rápidamente a nivel mundial en la última década, particularmente la resistencia a meticilina en cepas de Staphylococcus coagulasa positivas (SCP) tanto de origen humano como animal. Si bien en Chile existe una vigilancia activa de Staphylococcus spp. resistente a meticilina en humanos, en medicina veterinaria no ocurre lo mismo, aun reconociendo que este patógeno en particular es zoonótico, donde las mascotas podrían jugar un rol importante como reservorios. El objetivo de este estudio fue cuantificar la resistencia a meticilina en cepas SCP aisladas desde perros sanos y con patología dermatológica. Para esto, se utilizaron 106 cepas obtenidas en un estudio previo, a las cuales se les determinó su resistencia a meticilina por Kirby-Bauer (K-B) y mediante concentración mínima inhibitoria (CIM). Se realizó un análisis de concordancia entre ambos métodos. La prueba de K-B detectó un 7,5% de cepas resistentes a meticilina (8 cepas), mientras que CIM reveló un 30,2% de cepas meticilino resistentes (32 cepas), tanto en perros sanos (18,8% de ellos) como en dermópatas (50% de ellos). De las 32 cepas resistentes, un 71,9% presentaron valores de CIM denominados border line (0,5 – 4 μg/mL) y un 28,1% revelaron elevados niveles de resistencia (≥ 8 μg/mL) asociados a la presencia del gen mecA. La mayoría de las cepas correspondieron a S. pseudointermedius resistente a meticilina y ninguna de las cinco cepas de S. aureus fue resistente. La concordancia entre ambos métodos fue de “moderada” a “aceptable”, en las cepas provenientes de ambos grupos de perros. El presente estudio da cuenta de una elevada frecuencia de resistencia a meticilina revelando la importancia de cuantificar, mediante el método de CIM, la resistencia en cepas de Staphylococcus spp. aisladas desde perros. Por lo anterior, se sugiere incorporar a esta especie animal en los sistemas de vigilancia de salud pública, abordando el problema desde la perspectiva de Una Salud. / Antimicrobial resistance represents one of the main challenges for public health today. The emergence of multiresistant bacteria has increased rapidly worldwide in the last decade, particularly the resistance to methicillin in coagulase positive Staphylococcus (CoPS) isolated from both human and animal origin. Although in Chile there is an active monitoring of Staphylococcus spp. resistant to methicillin in humans, this is not the case in animals, notoriously in pets, which are considered reservoirs of this zoonotic pathogen. The objective of this study was to quantify the resistance to methicillin in SCP strains isolated from healthy dogs and from dogs with dermatological pathology. For this purpose, 106 strains obtained in a previous study were used, to which their resistance to methicillin was determined through Kirby-Bauer (K-B) and the minimum inhibitory concentration (MIC). A concordance analysis between both methods was carried out. While the K-B test detected 7.5% of methicillin-resistant strains (8 strains), the MIC revealed 30.2% of methicillin-resistant strains (32 strains), both in healthy (18.8%) and in dermopath (50%) dogs. Of the 32 resistant strains, 71.9% presented MIC values considered as “borderline” (0.5 – 4 μg/mL), and 28.1% revealed high levels of resistance (≥ 8 μg/mL) associated with the presence of the mecA gene. The majority of the strains corresponded to methicillin resistant S. pseudintermedius, and none of the five strains of S. aureus was resistant. The agreement between both methods was between "moderate" to "acceptable" in the strains from both groups of dogs. This study shows a high frequency in the resistance to methicillin, revealing the importance of quantifying, through the MIC method, the resistance in strains of Staphylococcus spp. isolated from dogs. Therefore, it is suggested to incorporate this animal species into the public health surveillance systems, addressing the problem from a One Health perspective.

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Una de las enfermedades más frecuentes en la hembra canina es la neoplasia mama-ria. Los tratamientos más utilizados son la cirugía y la quimioterapia adyuvante, las cuales en muchas ocasiones pueden resultar insuficientes debido probablemente a la existencia dentro del tumor de un subgrupo de células llamadas células neoplásicas iniciadoras de tumores (CNT), que presentan características de troncalidad favoreciendo la reaparición tumoral y metástasis. Estas células exhiben quimioresistencia, por lo cual es fundamental buscar nuevas alternativas citotóxicas para este tipo de células. Metformina, droga utilizada en humanos para el tratamiento de la diabetes mellitus tipo II, ha demostrado modular la actividad proliferativa de CNT, no obstante en caninos hay muy pocos datos pertinentes. En este estudio se evaluó el efecto de metformina sobre la viabilidad y capacidad de formación de esferas celulares (estructuras ricas en CNT) derivadas de células de carcino-ma mamario canino CF41.Mg. Metformina indujo una disminución tanto del número como del tamaño de esferas celulares a 10 y 20 mM (p<0,0001). Sin embargo, la droga no gatilló reducción en la viabilidad de estas células a las 48 horas de incubación respecto al grupo control. Por otro lado, en células CF41.Mg parentales, la viabilidad en presencia de la droga (10 y 20 mM por 48 horas) disminuyó (p<0,0001), lo cual implica que estas células presen-tan mayor sensibilidad a la metformina en comparación con las esferas celulares. Estos resultados sugieren que metformina ejercería actividad citotóxica en esferas derivadas de células de carcinoma mamario canino CF41.Mg, siendo este efecto dependien-te del tiempo de exposición a la droga. Metformina podría ser considerada como una droga que afecta a CNT, lo cual sustenta futuros estudios para esclarecer el potencial rol terapéu-tico de esta droga en la neoplasia mamaria canina. / Mammary neoplasia is one of the most frequent diseases in female dogs. The most common treatment used is surgery and adyuvant chemotherapy, which may often be insuf-ficient due to the existence of a subset of cells called tumor initiating neoplastic cells (CSC) within the tumor, that exhibit stemness characteristics, favoring tumor relapse and metastasis. These cells display chemoresistance, which supports the search for new citotox-ic alternatives. Metformin, a drug used in human diabetes mellitus type II treatment, modu-lates the proliferative activity on CSC, however there are scarce data about this effect in dogs. In this study, the effect of metformin on cell viability and spheres forming ability (structures rich in CSC) derived from canine mammary carcinoma cells CF41.Mg were evaluated. Metformin induced a decrease in number and sized of spheres at 10 and 20 mM (p<0.0001). However, the drug did not reduce viability of these cells at 48 hours of incuba-tion respect to the control group. On the other hand, viability on CF41.Mg parental cells in presence of the drug (10 and 20 mM for 48 hours) decreased, which implies greater sensi-tivity to metformin in relation to spheres. These results suggest that metformin exert cytotoxic activity in spheres derived from CF41.Mg canine mammary carcinoma cells. These effects are dependent on the expo-sure time to the drug. Metformin may be considered a drug that affects CSC, which sup-ports future studies to clarify its potential therapeutic role in canine mammary neoplasia. / Financiamiento: Proyecto Fondecyt 11110148.

El carcinoma de células escamosas (CCE) canino está entre las neoplasias malignas más frecuentes en la piel (CCE-P), los dedos (CCE-D) y la cavidad oral (CCE-O). El CCE-P tanto patológico como clínicamente se considera menos agresivo y de mejor pronóstico que los CCE-D y los CCE-O. En el presente estudio con el fin de encontrar una respuesta biológica a lo anterior, se realizó un perfil de expresión de moléculas asociadas a proliferación, mediante el índice proliferativo (IP) y expresión de receptores tirosina quinasa (RTK); y asociadas a angiogénesis, mediante la densidad microvascular (MVD). Para estos perfiles se utilizaron los marcadores Ki-67 (IP), EGFR (RTK), VEGFR-2 (RTK) y CD31 (MVD) mediante inmunohistoquímica (IHQ) en CCE-P (n=20), CCE-D (n=9) y CCE-O (n=10) caninos, fijados en formalina y embebidos en parafina. Las tres localizaciones anatómicas de CCE canino presentaron expresiones IHQ estadísticamente similares para IP (P=0,79), expresión de EGFR (P=0,57), expresión de VEGFR-2 (P=0,47) y MVD (P=0,20). Estos resultados sugieren que las diferencias en agresividad y pronóstico entre las distintas localizaciones de CCE canino, no serían explicados por los niveles de proliferación y angiogénesis. / Squamous cell carcinoma (CCE) is among the most frequent malignancies in the skin (CCE- P), digital (CCE-D) and oral cavity (CCE-O). CCE-P is pathologically and clinically less agressive and better prognostic than CCE-D and CCE-O. In the present study, in order to find a biological answer to former statement, a proliferation and angiogenesis associated molecules expression profile was made; in the first by proliferative index (IP) and expression of tyrosine kinase receptors (RTK) and second by microvessel density (MVD). For these profiles, we asseseed immunohistochemistry (IHQ) markers for Ki-67 (IP), EGFR (RTK), VEGFR-2 (RTK) and CD31 (MVD) in canine formalin fixed and paraffin embedded CCE-P (n = 20), CCE-D (n = 9) and CCE-O (n = 10). The IHQ expressions of the three anatomical locations of canine CCE were statistically similar for IP (P = 0.79), EGFR (P = 0.57), VEGFR-2 (P = 0.47) and MVD (P = 0.20). These results suggest that the differences in aggressiveness and prognosis between the different locations of canine CCE, would not be explained by the levels of proliferation and angiogenesis.

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / El cáncer mamario es la neoplasia que se presenta con mayor frecuencia en la hembra canina reproductivamente entera. Diversos investigadores han demostrado que lovastatina exhibe un efecto antitumoral in vitro sobre diversas líneas celulares neoplásicas humanas, sin embargo, su potencial efecto aún no ha sido evaluado sobre células de carcinoma mamario canino. Lovastatina inhibe a la enzima hidroxi-metil-glutaril coenzima A (HMG-CoA) reductasa, bloqueando la biosíntesis de colesterol y de sus isoprenoides farnesil pirofosfato (FPP) y geranil-geranil pirofosfato (GGPP), importantes mediadores de algunas vías de transducción de señales asociadas a sobrevida celular. El objetivo de este estudio fue determinar los efectos de lovastatina sobre la proliferación, invasión y apoptosis de células de carcinoma mamario canino CF41.Mg. Se cultivaron células CF41.Mg y se trataron con lovastatina (0-20 μM) por diferentes tiempos. Luego, se evaluó viabilidad celular (método de reducción de MTS), invasión celular (método Transwell) y apoptosis (ensayo de Anexina V/Yoduro de Propidio). Lovastatina indujo una disminución significativa en la viabilidad celular (p ≤ 0.05), efecto que fue dependiente de su concentración y el tiempo. La invasión celular fue inhibida en respuesta a concentraciones no citotóxicas de lovastatina (p ≤ 0.05). Además, esta droga ejerció un efecto pro-apoptótico dependiente del tiempo (p ≤ 0.05). Estos resultados demuestran que lovastatina cumpliría un importante papel sobre la proliferación y capacidad invasiva de células de carcinoma mamario canino CF41.Mg, lo cual sustenta futuros estudios clínicos con esta droga / Mammary cancer is the tumor that occurs most frequently in the reproductively intact female dog. Several researchers have shown that lovastatin exhibits an in vitro antitumor effect on various human neoplastic cell lines, however, its potential effect has not yet been evaluated in canine mammary carcinoma cells. Lovastatin inhibits HMG-CoA reductase, blocking the biosynthesis of cholesterol and its isoprenoids FPP and GGPP, important mediators of some signal transduction pathways associated with cell survival. The aims of this study were to determine the effects of lovastatin on the proliferation, invasion and apoptosis of canine mammary carcinoma cells CF41.Mg. CF41.Mg cells were cultured and treated with lovastatin (0-20 μM) for different times. Then, cell viability (MTS reduction method), cell invasion (Transwell method) and apoptosis (Annexin V/Propidium Iodide assay) were evaluated. Lovastatin induced a significant decrease in cell viability (p ≤ 0.05), an effect that was dependent on its concentration and time. Cell invasion was inhibited in response to non-cytotoxic concentrations of lovastatin (p ≤ 0.05). In addition, lovastatin exerted a pro-apoptotic effect dependent on time (p ≤ 0.05). These results demonstrate that lovastatin would play an important role in the proliferation and invasive capacity of canine mammary carcinoma cells CF41.Mg, which supports future clinical studies with this drug / Proyecto Fondecyt 11110148

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / El diagnóstico definitivo y específico de la brucelosis en caninos, causada por Brucella canis (B. canis), se realiza mediante el aislamiento de la bacteria desde muestras patológicas o fluidos. Sin embargo, como la enfermedad se caracteriza por presentar periodos abacterémicos, un cultivo negativo no excluye la posibilidad de infección. Debido a que se utiliza ampliamente la detección de anticuerpos frente a la infección y que tanto B. ovis y B. canis comparten componentes antigénicos con la cepa vacuna Brucella abortus RB51 (B. abortus CRB51), ésta podría ser usada como antígeno en el diagnóstico serológico de la enfermedad. En el presente estudio, se describe un enzimoinmunoensayo indirecto (ELISA-I) para el serodiagnóstico de brucelosis canina utilizando un extracto altamente purificado de lipopolisacárido rugoso (LPS-R) de Brucella abortus CRB51, cuyos resultados fueron comparados con la técnica contrainmunoelectroforesis (CIEF) que utiliza un antígeno extraído de una cepa rugosa de B. ovis, con diferentes componentes, incluyendo al LPS-R. En este estudio se incluyeron 156 sueros de perro, muestras para diagnóstico de brucelosis canina mediante CIEF, que fueron recibidas en el laboratorio de Microbiología de FAVET. El análisis de los resultados indicó asociación estadística entre ambas pruebas (p>0,05) para el diagnóstico de brucelosis canina. Además, ambas pruebas obtuvieron un alto índice de concordancia (K= 0,961). Estos resultados hacen del ELISA-I propuesto una prueba promisoria al utilizar un antígeno más purificado y entregar resultados cuantitativos

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Actualmente los antimicrobianos disponibles para el tratamiento de cuadros respiratorios en perros son limitados y requieren terapias prolongadas. En el presente estudio se estudiaron distintos parámetros farmacocinéticos de florfenicol y florfenicol amina en perros, luego de la administración de 10 mg/Kg del fármaco por vía subcutánea. Los resultados obtenidos para florfenicol fueron los siguientes: concentración máxima (Cmax) de 1,58 ± 0,38μg/mL, tiempo en que se alcanzó la concentración máxima (Tmax) 3 ± 1,15 h, clearance (Cl) 1,01 ± 0,13 L/Kg/h, vida media (t½) 13,12 ± 3,10 h y volumen de distribución (Vd) 19,02 ± 3,87L/Kg entre otros valores. En cuanto a los parámetros registrados para florfenicol amina son los siguientes: concentración máxima (Cmax) de 1,57 ± 0,36μg/mL, tiempo en que se alcanzó la concentración máxima (Tmax) 3 ± 1,15 h, clearance (Cl) 0,50 ± 0,21L/Kg/h, vida media (t½) 5,35 ± 1,82h y volumen de distribución (Vd) 4,22 ± 2,97L/Kg entre otros. Debido a que las concentraciones de florfenicol obtenidas en este estudio son más altas que las Concentraciones Mínimas Inhibitorias de las bacterias que afectan al sistema respiratorio de los animales, florfenicol podría ser una herramienta terapéutica para el tratamiento de patologías en perros. / Currently antimicrobials available for the treatment of respiratory tract diseases in dogs are limited and require prolonged therapy. In the present study, we examined various pharmacokinetic parameters of florfenicol and florfenicol amine in dogs after administration of 10 mg / kg of the drug for subcutaneous via.The results obtained for florfenicol were: maximum concentration (Cmax) 1.58 ± 0.38 μg/mL,peak concentration time (Tmax) was 3 ± 1.15 h, clearance (Cl)1.01 ± 0.13 L/Kg/h, half-life (t½)13.12 ± 3.10 h and volume of distribution (Vd) 19.02 ± 3.87L/Kg betweenother values. Regarding the parameters recorded for florfenicol amine are: maximum concentration (Cmax) 1.57 ± 0.36 μg/mL,peak concentration time (Tmax) was 3 ± 1.15 h, clearance (Cl) 0.50 ± 0.21 L/Kg/h, half-life (t½) 5.35 ± 1.82h and volume of distribution (Vd) 4.22 ± 2.97 L/Kg. Because florfenicol concentrations obtained in this study are higher than the minimum inhibitory concentration of bacteria that affect the respiratory system of animals, florfenicol could be a therapeutic tool for the treatment of these pathologies in dog.

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / La demodicosis generalizada canina es considerada una de las patologías dermatológicas más severas y frustrantes de tratar. La terapia de elección en Chile, consiste en la administración oral (p.o.) de Ivermectina (IVM). Al igual que en otros países del mundo, su utilización en perros con esta patología es extra-etiqueta, hecho que ha sido asociado a la presentación de diversas reacciones adversas y variables porcentajes de eficacia. En este estudio, un esquema terapéutico de 0,4 mg/kg/día p.o. de IVM 1% (Ivomec®) fue administrado a 8 perros con demodicosis generalizada, con la finalidad de evaluar la eficacia de un esquema de dosificación inferior al tradicional (0,6 mg/kg/día p.o.). No hubo reacciones adversas al tratamiento. El 50% de los individuos presentó demodicosis canina juvenil generalizada y logró la cura clínica (4-33 semanas) y parasitológica (10 y 38 semanas). El 50% restante presentó demodicosis canina adulta generalizada y al no evolucionar favorablemente debió recibir el tratamiento tradicional, entre las 9 y 30 semanas. Tres de estos animales presentaban además patologías preexistentes o que comprometían su estado general de salud. Los resultados sugieren que la dosis a administrar dependerá de la edad, estado de salud y raza del animal a tratar

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / El objetivo del presente estudio fue relacionar el diagnóstico ecográfico de atrofia/hipoplasia adrenal con el diagnóstico confirmatorio de la enfermedad de Addison vía prueba de estimulación con ACTH, o bien, relación Sodio/Potasio (Na:K) plasmático. Para esto se buscó perros con diagnóstico ecográfico de atrofia/hipoplasia adrenal y, posteriormente, se seleccionó a aquellos que fueron sometidos a una prueba de estimulación con ACTH o que tuvieron una medición de electrolitos (Na, K). Como resultado se encontró que no existía asociación entre el diagnóstico de la enfermedad de Addison y el diagnóstico ecográfico de atrofia/hipoplasia adrenal. Sin embargo, se observó que las glándulas de los perros diagnosticados con enfermedad de Addison fueron significativamente más pequeñas en su diámetro que las de perros sanos, aún cuando en el estudio sólo se incluyó a perros con glándulas atróficas/hipoplásicas. Esto confirmaría los resultados obtenidos en estudios previos (Wenger et al., 2010; Hoerauf y Reush, 1999) que indican que existe una diferencia significativa en el grosor de las glándulas adrenales de perros con enfermedad de Addison en comparación con las glándulas de perros sanos