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PECTINAMETILESTERASE EM EXTRATO DO ALBEDO DE MARACUJÁ-AMARELO (Passiflora edulis f. flavicarpa)Meneguzzo, Adeline Chaicouski 14 April 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-04-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The pectic substances, carbohydrates found in plant cell wall, are involved in the change of texture in the ripening process under action of pectinolytic enzymes, among which pectinmethylesterase. The production and consumption have increased the passion, also indicating an increase in the amount of waste generated, among which the albedo. The objective of this study was to evaluate the enzymatic activity of the crude extract obtained pectinametileserase albedo yellow passion fruit. The sequence of experiments was to determine the extraction protocol of the enzyme and characterization of the enzyme activity in the crude extract obtained from the albedo of yellow passion fruit, as the stage of maturation, NaCl concentration and substrate storage time, pH and temperature. When comparing the level of passion fruit in green and ripe, fresh and lyophilized maturation, the best result was found in green lyophilized samples. Among the five extraction methods used, two of them stood out and were adapted, and made the triple rinsing the material with cold water to remove soluble substances, followed by extraction with pectinmethylesterase PVPP and NaCl. The best salt concentration for higher activity obtained with NaCl 1,0 mol L- 1, both in the extraction, as in the determination of pectin methyl esterase activity. The best substrate concentration found was 1,0 % citrus pectin. The influence of the storage period of raw material showed that the freeze-dried fruit enzyme activity remained for a longer period, followed by the frozen sample and then refrigerated. The optimum pH was found to be 8 and the optimum temperature of 50 °C. The enzyme was heat-stable. The ideal range of precipitation with ammonium sulphate was 40-60 % of the salt. With the studies was possible to detect and study the pectinmethylesterase in extracts obtained from samples of albedo yellow passion fruit, with influence of various factors such as salt concentration and pH. / As substâncias pécticas, carboidratos presentes na parede celular de vegetais, estão envolvidas na mudança da textura no processo de amadurecimento, sob atuação das enzimas pectinolíticas, dentre as quais a pectinametilesterase. A produção e o consumo do maracujá têm aumentado, indicando também aumento na quantidade de resíduos gerados, dentre os quais o albedo. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade enzimática da pectinametileserase em extrato bruto obtido do albedo de maracujá-amarelo. A sequência dos experimentos foi determinação do protocolo de extração da enzima e caracterização da atividade enzimática em extrato bruto obtido do albedo de maracujá-amarelo, quanto ao estádio de maturação, concentração de NaCl e substrato, período de armazenamento, pH e temperatura. Quando comparados os maracujás em estádio de maturação verde e maduro, fresco e liofilizado, o melhor resultado foi encontrado em amostras verdes liofilizadas. Dentre os cinco métodos de extração utilizados, dois deles se destacaram e foram adaptados, sendo realizada a tripla lavagem do material com água gelada para remoção de substâncias solúveis, seguida da extração da pectinametilesterase com PVPP e NaCl. A melhor concentração salina para maior atividade foi obtida com NaCl 1,0 mol L-1, tanto na extração, quanto na determinação da atividade da pectinametilesterase. A melhor concentração de substrato encontrada foi 1,0 % de pectina cítrica. A influência do período de armazenamento da matéria-prima mostrou que o fruto liofilizado manteve a atividade enzimática por um período maior, seguido da amostra congelada e depois a refrigerada. O pH ótimo encontrado foi de 8 e a temperatura ótima de 50 ºC. A enzima mostrou-se termoestável. A faixa ideal de precipitação com sulfato de amônio foi de 40-60 % do sal. Com os estudos realizados foi possível detectar e estudar a pectinametilesterase em extratos obtidos de amostras de albedo de maracujá-amarelo, com influência de vários fatores tais como concentração de NaCl e pH do meio.
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Decomposição no solo da torta de filtro derivada do processamento da cana-de-açúcar: emissão de gases de efeito estufa e aspectos microbiológicos / Decomposition of the filter cake in the soil from the sugarcane processing: emission of greenhouse gases and microbiological aspectsRocha, Karina da 29 January 2014 (has links)
O Brasil é considerado o maior produtor mundial de cana-de-açúcar, voltada para a produção de açúcar, etanol e derivados. O aproveitamento de resíduos da usina, como torta de filtro e vinhaça no condicionamento do solo pode contribuir com a manutenção da sua fertilidade. Por outro lado, a cada operação agrícola necessária para o cultivo da cana-de-açúcar está associada uma emissão de GEE que deve ser contabilizada. O objetivo desta pesquisa foi estimar a emissão dos principais GEE (CO2, N2O e CH4) pela torta de filtro, e avaliar as alterações de alguns atributos das comunidades microbianas durante o processo de decomposição. Após avaliação de uma enquete sobre o modo de utilização da torta de filtro por diversas usinas, um estudo foi desenvolvido na Usina Costa Pinto localizada em Piracicaba (SP). A torta aplicada no sulco de plantio da cana foi monitorada quanto à emissão dos gases, sendo que as concentrações dos mesmos nas amostras foram determinadas por cromatografia gasosa. Os atributos microbiológicos examinados foram a biomassa, a atividade enzimática (fosfatase ácida, alcalina e ?-glicosidase) e a estrutura da comunidade através do polimorfismo de fragmento de restrição terminal (T-RFLP). Foi observada emissão significativa dos principais GEE predominantemente da torta quando aplicada nos sulcos de plantio, com destaque para o N2O, com uma proporção doze vezes maior em massa do que o CH4, em 56 dias de experimento. Quanto aos aspectos microbiológicos, o maior valor encontrado de carbono e nitrogênio da biomassa microbiana para a dose usualmente aplicada (25 Mg ha-1), foi com dois meses de experimento, com respectivamente 484,89 ?g C g solo seco-1 e 62,95 ?g N g solo seco-1, e correlacionado pelo coeficiente de Pearson com a atividade enzimática no material. Pela técnica de T-RFLP foi possível avaliar a estrutura dos Domínios de Archaea, Bacteria e Fungi na comunidade microbiana da torta de filtro. Não houve modificação dessa estrutura ao longo do tempo analisado. Os resultados obtidos reforçam a importância dos atributos microbiológicos aliados a fatores químicos e físicos e a influência dos mesmos sobre as emissões de GEE. / Brazil is the greatest worldwide producer of sugarcane with production of sugar, ethanol and derived. Usually applied to soil as fertirrigation, filter cake and vinasse on soil conditioning have contributed to the maintenance of fertility. On the contrary, each agricultural operation is associated to GHG emissions that must be accounted for the balance of products. This work aims evaluate GHG emissions (CO2, N2O and CH4) from the filter cake, as well as evaluate the main differences in the microbiological community available within the decomposition process. After evaluation of a survey about to use the filter cake by industries, the study has been developed at Usina Costa Pinto located in Piracicaba (SP). The filter cake applied to the row of sugarcane planting have been monitored by taking regular samples of the emissions. The concentration of the three gases in the samples has been determined by gas chromatography. The microbiological aspects has been evaluated by biomass, enzymatic activity (acid phosphatase, alkaline phosphatase, and beta-glycosidase) and the community structure through terminal restriction fragment length polymorphism (T-RFLP). Significant GHG emission has been observed; mainly from the filter cake applied to the row of sugarcane planting especially N2O, with ratio twelve times greater than CH4 in 56 days of experiment. For microbiological aspects, the maximum of carbon and nitrogen from the microbial biomass for the treatment usually applied (25 Mg ha-1), within two months of experimentation, with respectively 484,89 ?g C g dry soil-1 e 62,95 ?g N g dry soil-1, and correlated by the coefficient of Pearson with the enzymatic activity existent in the material. The T-RFLP analysis has allowed evaluate the community structures of Archaea, Bacteria e Fungi in the microbiological community of the filter cake. Modification in the community structures was not observed over this time examined. The results obtained reinforce the importance of microbiological aspects combined with chemical and physical factors and their influence on GHG emissions.
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Eficiência de indutores de resistência no controle da mancha-aquosa em meloeiroCabral, Clêidio da Paz 27 February 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009-02-27 / Bacterial fruit blotch caused by Acidovorax avenae subsp. citrulli (Schaad et al.) Willems et al. is an important melon (Cucumis melo L.) disease which causes fruit value reduction and high production losses reaching 100% in rainy season. At the present there are not effective methods of controlling this disease in Brazil, and therefore research for finding alternative control methods is essential. It was studied the effect of resistance inducers for controlling bacterial fruit blotch in ‘yellow’ melon (AF4945) and ‘Pele de Sapo’ (Nilo), evaluating different application periods (10 and 15 days after plant emergency), inducer dosages (acibenzolar-S-metil- ASM - 25; 50 and 75 mg a.i. L-1; Agro-Mos® - 0.5; 1.0 and 1.5 c.p. L-1; Ecolifeâ - 2; 3 and 4 mL c.p. L-1) and plant physiology in soil supplemented or not with NPK observing plant height, fresh and dry shoot biomass and enzymatic activity. The best period for inducers application was 10 days after plant emergency. For both genotypes, ASM (50 mg a.i. L-1) and Ecolifeâ (3 mL c.p. L-1) increased incubation period until 12 and 8 days; and reduced disease incidence by 87.5 and 60%; disease index by 95.7 and 88%; and area under disease progress curve by 93.7 and 74.5%. The two inducers independent of NPK level reduced plant height, fresh and dry shoot biomass until 24.5; 41.4 and 34.2%, respectively. Onlythe peroxidase activity was detected at 5, 10 and 45 days after inducer application. Although ASM (50 mg i.a. L-1) and Ecolifeâ (3 mL p.c. L-1) had affected plant development they significantly reduced bacterial fruit blotch in both melon types, ‘yellow’ and ‘Pele de Sapo’, and should be used for the integrated management of this disease. / A mancha-aquosa causada pela bactéria Acidovorax avenae subsp. citrulli (Schaad et al.) Willems et al. é uma importante doença para a cultura do meloeiro ocasionando depreciação do valor comercial do fruto e grandes perdas na produção, que podem atingir até 100% em períodos chuvosos. Não se dispõe até o momento de medidas efetivas de controle dessa doença no Brasil o que torna imprescindível à realização de pesquisas que visem à obtenção de métodos alternativos de controle. Foi estudado o efeito de indutores de resistência no controle da mancha-aquosa em meloeiros Amarelo (AF4945) e Pele de Sapo (Nilo), em diferentes épocas de aplicação (10 e 15 dias após a emergência das plântulas) e dosagens (acibenzolar-S-metil – ASM - 25; 50 e 75 mg i.a. L-1; Agro-Mos® - 0,5; 1,0 e 1,5 p.c. L-1; Ecolifeâ - 2; 3 e 4 mL p.c. L-1); e na fisiologia da planta em solo com ou sem NPK, avaliando-se altura (AL), biomassa fresca e seca da parte aérea (BFPA, BSPA), e atividade enzimática. A melhor época para aplicação dos indutores foi dez dias após a emergência das plântulas. Considerando os dois genótipos, ASM (50 mg i.a. L-1) e Ecolifeâ (3 mL p.c. L-1) elevaram o período de incubação em até 12,6 e 8 dias e reduziram a incidência da doença em 87,5 e 60%; índice de doença em 95,7 e 88%; e área abaixo da curva de progresso da doença em 93,7 e 74,5%, respectivamente. Esses dois indutores, independente do nível de NPK, reduziram a AL,BFPA e/ou BSPA em até 24,5; 41,4 e 34,2%, respectivamente. Apenas a atividade de peroxidase foi detectada aos 5, 10 e 45 dias após a aplicação dos indutores. ASM (50 mg i.a. L-1) e Ecolifeâ (3 mL p.c. L-1) mesmo tento afetado o desenvolvimento de plantas de meloeiro, apresentaram redução significativa da intensidade da mancha aquosa tanto em meloeiro tipo Amarelo quanto Pele de Sapo, podendo ser inseridos no manejo integrado da mancha-aquosa.
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Mudança no uso da terra e efeito na composição e atividade microbiana de solos arenosos no semiárido brasileiroBARROS, Jamilly Alves de 23 February 2016 (has links)
Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2017-03-10T14:09:02Z
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Previous issue date: 2016-02-23 / Natural ecosystems have suffered great human interventions and one of them is the conversion of forests into agricultural land, and the TDF (FTS) one of the most affected in the world. Changes in land use can be reflected by biological, biochemical, chemical and physical parameters, the first two being the fastest and most sensitive to changes in soil quality. This study evaluated how the conversion of FTS in pasture with different levels of conservation acts on the community and microbial activity in Neossolos Regolíticos. The characterization of the microbial community and enzymatic activities of sandy soils of the semiarid region of Pernambuco in areas of drought and forest disturbed. In the first chapter, the study was conducted in the city of Saint John and the selected areas were: FTS = dry tropical forest, PP = preserved and PD = degraded pasture pasture. In the second chapter were selected five cities of Pernambuco semiarid region, which were collected two composite soil samples, one in FTS and another in area with human intervention. For Chapter 1 were determined analysis of the microbial biomass carbon (MBC), total organic carbon (TOC), the fatty acid profiles of the microbial community (FAMEs) and absolute and specific enzymatic activities. In chapter 2 were determined profiles of fatty acids and enzymes absolute. FTS conversion to pasture with different levels of conservation affected the microbial community and enzymatic activities of Entisol. And the type of vegetation is shown as one of the main factors responsible for the variation of the microbial community. Quantification of FAMEs in different areas analyzed demonstrated that populations of fungi are sensitive to changes in land use that bacterial populations, because these showed a faster metabolism, ie, unable to adapt to disturbances in the ecosystem. The evaluation of specific enzymes showed how these are influenced by the TOC and MBC, where enzymes by CBM unit expressed higher values. / Os ecossistemas naturais vêm sofrendo grandes intervenções humanas e uma delas é a conversão de florestas em terras agrícolas, sendo as florestas tropicais secas (FTS) uma das mais afetadas no mundo. Alterações no uso do solo podem ser refletidas por parâmetros biológicos, bioquímicos, químicos e físicos, sendo os dois primeiros os mais rápidos e sensíveis a alterações na qualidade do solo. O presente trabalho avaliou como a conversão de FTS em pasto com diferentes níveis de conservação age sobre a comunidade e atividade microbianas em Neossolos Regolíticos. A Caracterização da comunidade microbiana e atividades enzimáticas de solos arenosos do Semiárido de Pernambuco em áreas de floresta seca e antropizada. No primeiro capítulo, o estudo foi realizado no município de São João e as áreas selecionadas foram: FTS=floresta tropical seca, PP= pasto preservado e PD= pasto degradado. No segundo capítulo foram selecionadas 5 cidades do semiárido pernambucano, onde foram coletadas duas amostras compostas de solo, uma em FTS e outra em área com intervenção antrópica. Para o capítulo 1 foram determinadas as análises do carbono da biomassa microbiano (CBM), o carbono orgânico total (COT), os perfis de ácidos graxos da comunidade microbiana (FAMEs) e atividades enzimáticas absolutas e específicas. No capítulo 2 foram determinados os perfis de ácidos graxos e as enzimas absolutas. A conversão de FTS em pasto com diferentes níveis de conservação afetou a comunidade microbiana e as atividades enzimáticas de Neossolo Regolítico. Sendo que o tipo de vegetação se mostrou como um dos principais fatores responsável pela variação da comunidade microbiana. A quantificação do FAMEs nas diferentes áreas analisadas demonstrou que as populações de fungos são mais sensíveis a alterações no uso do solo que as populações bacterianas, devido estas apresentaram um metabolismo mais rápido, ou seja, conseguirem se adaptar a perturbações no ecossistema. A avaliação das enzimas específicas mostrou o quanto estas são influenciadas pelo COT e CBM, onde as enzimas por unidade de CBM expressaram valores mais elevados.
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Indicadores da qualidade do solo em Sistemas AgrÃcolas anuais e perenes na Chapada do Apodi - CE / Indicators of the quality of the soil in annual and perennial agricultural systems of the Chapada do Apodi - CearÃ.Jamili Silva Fialho 16 March 2005 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Este trabalho se propÃs a avaliar as alteraÃÃes nas atividades microbiana, quÃmica e fÃsica em solo sob sistemas agrÃcolas anuais e perenes na regiÃo da Chapada do Apodi - CE. Procurou-se testar a hipÃtese de que o uso agrÃcola de Ãreas sob sistemas anuais e perenes causam alteraÃÃes ambientais que influenciam a biomassa e a atividade microbiana do solo, reduzindo-a em relaÃÃo a Ãreas sob vegetaÃÃo natural. Foram selecionadas duas Ãreas com respectivas testemunhas (vegetaÃÃo natural); a primeira sob cultivo de bananeiras (Fazenda Frutacor) e a outra sob cultivo de rotaÃÃo milho e soja (Fazenda Faedo). Coletaram-se amostras compostas de solo em trÃs profundidades (0-5, 5-15 e 15-25 cm) com quatro repetiÃÃes. Nas amostras coletadas foram realizadas anÃlises fÃsicas, quÃmicas e microbiolÃgicas. Fisicamente, observou-se uma elevaÃÃo no teor de argila, com o aumento da profundidade na Ãrea cultivada com banana e na mata natural pivot. Em relaÃÃo aos atributos quÃmicos do solo, os riscos potenciais de salinidade e de saturaÃÃo por sÃdio aparentemente sÃo desprezÃveis. As prÃticas de manejo reduziram o N e o carbono orgÃnico total nos solos das Ãreas sob cultivo. Quanto à microbiologia dos solos, o carbono da biomassa microbiana e a populaÃÃo de fungos micorrÃzicos arbusculares foram mais elevados na profundidade de 0-5cm do solo. A respiraÃÃo basal do solo mostrou que os solos das Ãreas avaliadas tÃm baixa atividade microbiana quando comparados a solos do Cerrado. A atividade e produÃÃo da arilsulfatase e da fosfatase Ãcida foram estimuladas possivelmente, pela competiÃÃo dos Ãnions H2PO4 - e SO4 - pelos mesmos sÃtios de adsorÃÃo nos colÃides do solo, nas Ãreas de banana e rotaÃÃo milho e soja. A maior atividade da enzima β-glucosidase ocorreu nas Ãreas cultivadas, influenciada pela quantidade e qualidade do resÃduo vegetal retornado ao solo. / This work had the proposed to evaluate the alterations in the microbial activities, chemistry and physics in soil under annual and perennial agricultural systems in the area of the Chapada do Apodi - CE. It tried to test the hypothesis that the agricultural use of areas under annual and perennial systems causes environmental alterations that they influence the biomass and the microbial activity of the soil, reducing it in relation to areas under natural vegetation. Two areas were selected with respective witness (natural vegetation); the first under cultivation of banana trees (Fazenda Frutacor) and the other under cultivation of rotation corn and soy (Fazenda Faedo). Samples composed of soil were collected in three depths (0-5, 5-15 and 15-25 cm) with four repetitions. In the collected samples physical analyses, chemistries and microbiological were accomplished. Physically, an elevation was observed in the clay text, with the increase of the depth in the area cultivated with banana and in the forest natural pivot. In relation to the chemical attributes of the soil, the potential risks of salinity and of saturation for sodium seemingly are worthless. The handling practices reduced N and the total organic carbon in the soils of the areas under cultivation. With relationship to the microbiology of the soils, the carbon of the microbial biomass and the population of arbuscular mycorrhizal fungi were more elevated in the depth of 0-5cm of the soil. The basal breathing of the soil identified that the soils of the appraised areas have microbial when compared low activity the soils of the Cerrado. The activity and production of the arylsulphatase and of the acid phosphatase were stimulated possibly, for the competition of the anions H2PO4- and SO4- for the same ranches of adsorption in the coloides of the soil, in the banana areas and rotation corn and soy. The largest activity of the enzyme β-glucosidase happened in the cultivated areas, influenced by the amount and quality of the vegetable residue come back to the soil.
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Avaliação do tratamento hidrotérmico, combinado ao cálcio e ao ácido giberélico, na resposta do tomate ao chilling / Evaluation of hydrothermal treatment, combined with calcium and gibberellic acid, in tomato response to the "chilling"Zachow, Karine 29 August 2011 (has links)
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Previous issue date: 2011-08-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Tomato (Lycopersicon esculentum Mill) is subject to chilling injury during cold storage. The application of calcium and plant growth regulators in post-harvest may help to reduce a number of physiological disorders on fruits. In this work were verified the influence of the application in post-harvest of the five treatments: control, without heat shock; only heat shock; heat shock + Ca 2 %; heat shock + GA3 100 mg L-1; and heat shock + Ca 2 % + GA3 100 mg L-1, associated with hydrothermal treatment (45 °C) for 12 min of immersion in the response of tomato to the "chilling" and check the physical and chemical composition, the bioactive compounds and enzyme activity of the fruit. The fruits were stored at 5 °C and relative humidity of 80 % for a period of ten days. The evaluations were made ten days after removal of the fruits of the cooling conditions. The design was completely randomized with five treatments and five repetitions, each repetition being characterized by a fruit. Was applied to the ANOVA results, and when the parameter was significant, the averages were compared by Tukey test, at 5 % probability. The use of heat shock treatment was effective in reducing pathogens in tomato fruits after cold storage. Treatment with heat shock + Ca 2 % + GA3 100 mg L-1 was the best among the rest, because it provided a higher concentration of ascorbic acid, as well as β-carotene and total phenols in the fruits treated and caused a reduction in the incidence of pathogens. The use of GA3 showed better results compared to Ca, when combined with heat shock, the fruits response to the effects of cold storage, requiring further investigation in this direction / O tomate (Lycopersicon esculentum Mill) está sujeito a danos causados pelo frio ( chilling ) durante o armazenamento refrigerado. A aplicação, em pós-colheita, de cálcio e reguladores vegetais, bem como do uso de tratamento hidrotérmico, pode contribuir para reduzir vários tipos de desordens fisiológicas nos frutos. Neste trabalho, verificou-se a influência da aplicação, pós-colheita, de cinco tratamentos, sendo eles: controle, sem choque térmico; apenas choque térmico; choque térmico + Ca 2 %; choque térmico + GA3 100 mg L-1; e choque térmico + Ca 2 % + GA3 100 mg L-1, associada ao tratamento hidrotérmico (45 ºC) por 12 min de imersão, na resposta do tomate ao chilling , verificando a composição físico-química, os compostos bioativos e atividade enzimática dos frutos. Os frutos foram armazenados a 5 ºC e umidade relativa de 80 % por um período de dez dias. As avaliações foram efetuadas dez dias após a retirada dos frutos das condições de refrigeração. O delineamento utilizado foi inteiramente casualizado, com cinco tratamentos e cinco repetições, sendo cada repetição caracterizada por um fruto. Aos resultados aplicou-se ANOVA, e quando o parâmetro foi significativo, suas médias foram comparadas pelo Teste de Tukey, ao nível de 5 % de probabilidade. O uso do tratamento com choque térmico foi eficiente na redução de patógenos nos frutos de tomate após o armazenamento com frio. O tratamento com choque térmico + Ca 2 % + GA3 100 mg L-1 foi o melhor entre os demais, pois proporcionou maior concentração de ácido ascórbico, bem como de β-caroteno e fenóis totais nos frutos tratados e proporcionou redução da incidência de patógenos. O uso do GA3 apresentou melhores resultados comparado ao Ca, quando combinados ao choque térmico, na resposta dos frutos aos efeitos do frio durante a armazenagem, necessitando de maiores investigações neste sentido
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Efeito do tratamento térmico e do ácido salicílico na atividade de polifenoloxidase, peroxidase e fenilalanina amônia-liase, nas características físico-químicas e na incidência de patógenos em morangos durante o armazenamento / Effect of heat treatment and salicylic acid on polyphenoloxidase, peroxidase and phenylalanine ammonia-liase activity, physical-chemistry characteristics and incidence of pathogens in strawberries during storageColtro, Sidiane 27 February 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-02-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The strawberry is a fruit that is highly perishable and are very susceptible to physical damage and fungal attack. The use of fungicides has been the primary method for reducing post-harvest diseases. Accordingly, alternative methods free of chemicals must be used in post-harvest to maintain the quality and prolong the life reduce the incidence of fungi. Therefore, this study aimed to evaluate the effect of heat treatment and post-harvest salicylic acid in the response of strawberry-related activities of the enzymes polyphenol oxidase and peroxidase, the contents of total phenols, anthocyanins and ascorbic acid and the incidence of pathogens during storage of fruits. This study was divided into two experiments. In the first experiment, Dover strawberries were treated thermally in an oven at 45°C for 3 hours and stored at 5°C for 1, 7 and 14 days and analyzed. After these periods, the fruit were removed and transferred to the cooling environment at 20°C for 2 days to be analyzed again. We used a completely randomized in factorial scheme (2x6), with 12 treatments and four replicates of 10 berries per tray. In the second experiment, strawberries Dover were heat treated in an oven with forced air at 45°C for 3 hours and after immersed in a solution of salicylic acid 2.0 mM L-1 for 5 minutes; then they were stored under refrigeration (5°C) and after 1,7 and 14 days and transferred to a room at 20°C for 2 days and the be analyzed. The design was completely randomized in factorial scheme (4x3), with 12 treatments and four replications. Were evaluated the activity of polyphenoloxidase, peroxidase, phenylalanine ammonia-lyase, the incidence of fungi, total phenols, anthocyanins, ascorbic acid, pH, titratable acidity, soluble solid and weight loss. It was found that the metabolism postharvest Dover cv. strawberry has been modified by application of heat treatment, because the results showed that the activity of polyphenoloxidase, peroxidase and phenylalanine ammonia-lyase and ascorbic acid, total phenols and anthocyanins, and the incidence of fungi were lower in heat-treated strawberries. The heat treatment resulted in higher acidity, higher soluble solids and lower mass loss. The heat treatment is not provided, according to the incidence of fungi and weight loss, increased shelf life of strawberries, being limited to seven days of storage. However, the addition of salicylic acid to heat treatment was less effective than other treatments for most variables, indicating that it is disadvantageous. However, heat shock alone was more effective in reducing the activity of peroxidase, polyphenoloxidase showed lower activity compared to the control at 7 +2 days and did not differ from other treatments at 14 +2 days, was effective in maintaining high levels phenolic compounds, anthocyanins and ascorbic acid up to 7 +2 days / O morango é um fruto que apresenta alta perecibilidade e, são bastante suscetíveis a danos físicos e ataque de fungos. O uso de fungicidas químicos tem sido o principal método para reduzir as doenças pós-colheita. Nesse sentido, métodos alternativos livres de produtos químicos devem ser utilizados em pós-colheita para manter a qualidade, prolongar a vida útil e diminuir a incidência de fungos. Assim, o presente trabalho teve por objetivo avaliar o efeito do tratamento térmico pós-colheita e do ácido salicílico na resposta do morango relacionada à atividade das enzimas polifenoloxidase e peroxidase, aos conteúdos de fenóis totais, antocianinas e ácido ascórbico e à incidência de patógenos durante o armazenamento dos frutos. Este estudo foi dividido em dois experimentos. No primeiro experimento, morangos cultivar Dover, foram tratados termicamente em estufa a 45°C por 3 horas e armazenados a 5 ºC por 1, 7 e 14 dias e analisados. Após esses períodos, os frutos foram retirados da refrigeração e transferidos para ambiente a 20 ºC por 2 dias para serem analisados novamente. Foi utilizado o delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial (2x6), com 12 tratamentos e quatro repetições com 10 morangos por bandeja. No segundo experimento, morangos cultivar Dover foram tratados termicamente em estufa com circulação forçada de ar com 45°C por 3 horas e depois imergidos em solução de ácido salicílico 2,0 mMol L-1 por 5 minutos, depois foram armazenados sob refrigeração (5°C) e após 1, 7 e 14 dias foram transferidos para ambiente a 20 ºC por 2 dias para então serem analisados. O delineamento foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial (4x3), com 12 tratamentos e quatro repetições. Foram avaliados a atividade de polifenoloxidase, peroxidase, fenilalanina amônia-liase, incidência de fungos, fenóis totais, antocianinas, ácido ascórbico, pH, acidez titulável, sólidos solúveis e perda de massa. Foi constatado que, o metabolismo pós-colheita de morangos cv. Dover foi modificado pela aplicação de tratamento térmico, pois os resultados mostraram que a atividade de polifenoloxidase, peroxidase e fenilalanina amônia-liase e os teores de ácido ascórbico, fenóis totais e antocianinas e a incidência de fungos foram inferiores em morangos tratados termicamente. O tratamento térmico resultou em maior acidez titulável, maior teor de sólidos solúveis e menor perda de massa. O tratamento térmico não proporcionou, segundo a incidência de fungos e a perda de massa, aumento da vida útil dos morangos, ficando limitado aos sete dias de armazenamento refrigerado. Entretanto, a adição de ácido salicílico ao tratamento térmico, se mostrou menos efetivo que os demais tratamentos para a maioria das variáveis analisadas, indicando ser desvantajoso. Porém, o choque térmico isolado mostrou-se mais efetivo em reduzir a atividade de peroxidase, apresentou atividade inferior de polifenoloxidase comparado ao controle aos 7+2 dias e não diferiu dos demais tratamentos aos 14+2 dias, se mostrou efetivo em manter níveis elevados de compostos fenólicos, antocianinas e ácido ascórbico até 7+2 dias
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Identificação de microrganismos do trato digestivo de pragas de cana-de-açúcar com atividade enzimática para degradação de substratos lignocelulósicos e potencial para bioconversão de D-xilose em xilitol / Identification of gut microorganisms in sugarcane pests, with enzymatic activity, for degradation of lignocelullosic substrates and bioconversion of D-xylose to xylitol potentialHeloíze de Souza Milano 29 August 2012 (has links)
A necessidade de economias sustentáveis tem aumentado o interesse no desenvolvimento de plataformas microbianas para novos processos, tanto para a produção de biocombustíveis quanto para a síntese de compostos que demandam alta capacidade energética e processamento químico em sua produção. O isolamento de microrganismos, capazes de degradação materiais lignocelulósicos, resistentes a diferentes inibidores e com rendimento elevado na biossíntese de moléculas específicas faz-se necessário para atender tais propósitos. Neste trabalho, microrganismos cultiváveis isolados do trato digestivo de larvas dos insetos pragas de cana-de-açúcar, besouro da raiz, Migdolus fryanus, bicudo da cana, Sphenophorus levis, broca-gigante da cana, Telchin licus licus e de broca-da-cana, Diatraea saccharalis, foram caracterizados quanto a atividade enzimática em fontes de carbono e identificados por técnicas moleculares. Larvas no terceiro ínstar de M. fryanus e S. levis e quinto ínstar de T. licus licus e D. saccharalis foram coletadas em plantios de cana-de-açúcar no interior de São Paulo. Um total de 341 microrganismos cultiváveis foram avaliados quanto a capacidade de degradação de substratos lignocelulósicos, como única fonte de carbono em meio sólido usando o índice de atividade enzimática (I.E.). Os isolados foram identificados por sequênciamento das regiões do 16S rRNA para bactérias, ITS rDNA para fungos e 26S rDNA para leveduras. Bactérias com atividade enzimática foram relacionadas aos gêneros do filo Firmicutes Bacillus, Enterobacter Serratia e Citrobacter. Os isolados relacionados à B. amyloliquefaciens destacaram-se na degradação da celulose. Entre fungos filamentosos, leveduras e leveduriformes, a atividade enzimática foi destacada para a degradação da hemicelulose. Fungos filamentosos e leveduras pertencem ao filo Ascomycota e os leveduriformes ao filo Chlorophyta. Fungos que apresentaram hidrólise de xilano foram relacionados aos gêneros Pyrenophora, Aspergillus e Penicillium. As leveduras relacionam-se a nove gêneros, majoitariamente aos gêneros Meryerozyma e Candida. Leveduras com capacidade hidrolítica destacada foram relacionadas à Meyerozyma guilliermondii, Cryptococcus laurentti, Candida pseudointermedia, C. parapsilosis, C. solani e Aureobasidium pullulans. Entre as leveduras, 40 isolados apresentam sequências que diferem em mais de 1% das sequências referência, podendo-se inferir a respeito de possíveis novas espécies. No ensaio cinético, realizado para a triagem de leveduras com capacidade de bioconversão da D-xilose em xilitol e etanol, o maior rendimento em xilitol foi demonstrado pelo microrganismo relacionado à Prototheca zopfi var. hydrocarbonea. A capacidade desse organismo de produzir xilitol não havia sido descrita. Os resultados obtidos nesse trabalho, revelaram que o trato digestivo das pragas de cana-de-açúcar como uma fonte de microrganismos que apresentam capacidade de degradação enzimática para celulose e xilano cujo potencial para utilização na biotecnologia industrial ainda precisa ser revelado / The pursuit for sustainable economies has increased the interest in development of microbial-based platforms for new processes, both for biofuel production and for the synthesis of compounds, which demands high energetic capacity and chemical processing in its production. The isolation of microorganisms capable of degradation of lignocellosic materials, resistant to different inhibitors and highly efficient in the biosynthesis of specific molecules is necessary to achieve such purposes. In this research, cultivable microorganisms isolated from the larval gut of sugarcane pests: sugarcane borer root Migdolus fryanus, sugarcane weevil Sphenophorous levis, giant sugarcane borer Telchin licus licus and sugarcane borer Diathrea saccharalis, were characterized according to their extracellular enzymatic activity in carbon sources and molecularly identified. Third-instar larvae of Migdolus fryanus and S. levis and fifth-instar larvae of T. licus licus and D. saccharalis were collected in sugarcane fields in São Paulo, Brazil. A total number of 341 strains were evaluated for their capacity of degradation of lignocelulitic substrates, as single carbon sources in solid medium. The enzymatic activities of the strains were estimated by Enzymatic Activity Index (EAI); further, the strains were molecularly identified by sequencing of the 16S rRNA region for bacterias; ITS rDNA region for filamentous fungi and 26S rDNA region for yeasts. Bacteria strains which presented enzymatic activity were related to Firmiculites genera Bacillus, Enterobacter, Serratia and Citrobacter. Strains related to B. amyloliquefaciens have demonstrated higher levels of cellulosic degradation. Among filamentous fungi, yeasts and yeast-like organisms higher activity was showed to degradation of hemicelluloses. Filamentous fungi and yeasts belong to phylum Ascomycota, and the yeast-like organisms to phylum Chlorophyta. Six filamentous fungi which presented higher hidrolisys of xylan were related to Pyrenophora, Aspergillus and Penicillium genera. Yeasts were related mostly to the Meryerozyma and Candida genera. Yeasts with higher hydrolysis cababilities were reated to Meyerozyma guilliermondii, Cryptococcus laurentti, Candida pseudointermedia, C. parapsilosis, C. solani e Aureobasidium pullulans. Among the yeasts, 40 strains showed sequences that differ by more than 1% from reference sequences, which allows infering about possible new species. In the kinetic assay carried out for screening for yeasts capable of bioconverting D-xylose into xylitol and ethanol, higher yields of xylitol were obtained for the yeast-like organism related to Prototheca zopfi var. hydrocarbonea. This microorganism\'s ability to produce xylitol had not been reported yet. The results obtained in this work have demonstrated the gut of sugarcane pests as source of microorganisms capable of enzymatic degradation of cellulose and xylan, whose potential for use in the industrial biotechnology has yet to be revealed.
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Effects of microbial community coalescence in lake water at ice break-off / Effekter av sammansmältning av mikrobsamhällen i sjövatten vid islossningMelhus, Christoffer January 2019 (has links)
The period of ice break-off in spring is a key event for many biogeochemical processes in lakes globallly. The biogeochemical processes occurring at ice break-off have the potential of influencing characteristics of lakes throughout spring and summer, including algal blooms and greenhouse gas emission. This makes it important to study lakes in the period of ice break-off. At ice break-off, soil bacteria from the catchment area usually enter the lake via spring floods and mix with the bacteria already occurring in the lake water. In this study, the effects of mixing soil- and lake microbial communities during ice break-off-like conditions were tested by performing an experiment under controlled conditions in the laboratory. In the experiment, light, microbial community composition and concentration of soil-derived organic matter were manipulated to simulate different conditions associated with ice break-off. The variables investigated were bacterial activity and functionality, measured as cell abundance and enzymatic activity, as well as primary production and concentration of dissolved organic matter. The results showed that a mix of soil and lake microbial communities had enzymatic activity patterns resembling lake communities, and then shifted to being more similar to soil communities. The experiment also showed that degradation of measured dissolved organic matter was not linked to biotic processes, and that the observed decrease was most likely due to photo degradation. Finally, the experiment showed that primary production, here measured as chlorophyll a, was only stimulated by the mixed community with light and added soil dissolved organic matter. The results found in this study are important as they show that microbial communities do alter their function and enzymatic activity based on composition. Furthermore, the result that primary production was only seen in the presence of light, soilderived organic matter and a mixed community of lake and soil bacteria may be seen as an indication that primary producers in lake ecosystems to some extent depend on the inflow of terrestrial microbes and organic matter. It also possible that the coalescence of microbial communities enables the communities to perform tasks they were unable to prior to coalescence (i.e. perform tasks that allows primary production to take place). These results give the basis for further, more detailed studies.
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Formulation et immobilisation de la Lipase de Yarrowia lipolyticaAlloué, Wazé Aimé Mireille 09 April 2008 (has links)
La lipase de Yarrowia lipolytica (EC 3.1.1.3) est une enzyme appartenant à la classe des hydrolases. La non pathogénicité et le caractère hyperproducteur en lipase de cette levure lui confèrent une place de choix au sein de lunité de Bio-industries du Centre Wallon de Biologie Industrielle.
Ce présent travail sinscrit dans le cadre général du développement industriel de la lipase de Yarrowia lipolytica et concerne plus
particulièrement le traitement post-culture de lenzyme afin de réaliser des formes liquides, poudres atomisées, immobilisées et enrobées à laide des polymères acryliques.
Latomisation de la lipase en présence ou en absence de poudre de lait a permis lacquisition de poudres fluentes, stables à 4 et 20°C et présentant des températures de transition vitreuse comprises entre 51 et 79°C. Lactivité deau de conservation des poudres était ≤ 0.4.
La stabilisation de lenzyme sous forme de liquide concentré réalisée avec le monopropylène glycol (MPG), les inhibiteurs de protéases et lirradiation aux rayons gamma ont révélé que le MPG à 50% et la technique dirradiation au rayon gamma permettaient la stérilisation et la préservation de lactivité enzymatique. Par ailleurs, limmobilisation de cette enzyme par trois techniques (adsorption, inclusion et liaison covalente) a révélé une amélioration de ses propriétés caractéristiques telles que la thermostabilté et la résistance aux solvants. La technique dimmobilisation par adsorption et par liaison covalente a permis une utilisation multiple de lenzyme.
Létude préliminaire de faisabilité des formes galéniques à base de la lipase de Y. lipolytica a montré la capacité de cette enzyme à être mise sous forme de comprimés et de poudres encapsulées. La comparaison réalisée in vitro entre le Créon 150mg (produit pharmaceutique) et les formes galéniques à base de la lipase a montré des temps de gastro-résistance et de délitage similaires.
Ces différentes formules de la lipase posent des jalons nécessaires pour leurs applications dans des secteurs agroalimentaires, environnementaux et pharmaceutiques.
Yarrowia lipolytica lipase (EC.3.1.1.3) is an enzyme which belongs to the class of hydrolases. Nonpathogenicity and the high-lipase producing character of this yeast have emphasised its use within the laboratory of Bio-industry of the Walloon Center of Industrial Biology.
The present work lies within the general scope of the industrial development of the lipase from Yarrowia lipolytica. More particularly it relates to the post-culture treatment of the enzyme in order to obtain liquid forms, atomized powders, immobilized and coated enzymes using acrylic polymers.
The atomization of lipase in presence or absence of milk powder allowed the achievement of flowing, stable powders at 4 and 20°C, with glass transition temperatures ranging between 51 and 79°C. The water activity of preservation of the powders was ≤ 0.4.
Stabilization of the enzyme under the form of concentrated liquid carried out with monopropylen glycol (MPG), proteases inhibitors and gamma irradiation revealed that MPG (50%) and gamma irradiation allowed sterilization and conservation of the enzymatic activity. In addition, the immobilization of the enzyme through three techniques (adsorption, inclusion and covalent bond) revealed an improvement of some properties such as thermostability and resistance to solvents. Immobilization by adsorption and covalent bond allowed multiple uses of the enzyme.
The preliminary study of feasibility of galenic forms containing the lipase from Y. lipolytica showed the capacity of this enzyme to be put under the form of tablets and encapsulated powders. The in vitro comparison of Creon 150mg (pharmaceutical product) and galenic forms containing the lipase, showed similar times of acid-resistance and of disintegration.
These various formulas of the lipase constitute milestones necessary for their applications in food, environmental and pharmaceutical industries.
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