Orientadores: Sonia Valeria P. Malheiros Marques Fernandes, Eneida de Paula / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T00:19:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Domingues_CleytonCrepaldi_M.pdf: 4439591 bytes, checksum: 806cbfd68fabc115f2daee1adf79c396 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: No processo de solubilização de lipídios e proteínas de membrana a escolha do surfatante é um passo fundamental. Um conhecimento detalhado das propriedades do surfatante se faz necessário na sua utilização em membranas biológicas. Neste trabalho determinamos algumas propriedades físico-químicas de dois novos surfatantes zwiteriônicos do tipo amidosulfobetaína, ASB-14 e ASB-16, e avaliamos seus efeitos sobre a solubilização de membranas eritrocitárias e suas proteínas. O ASB-16 por apresentar maior cauda hidrofóbica apresentou valor de CMC (concentração micelar crítica) cerca de 10 vezes menor que seu análogo ASB-14 nas condições estudadas (em água e em tampão PBS 5 mM, pH 7,4 a 25°C). Aplicando-se o tratamento clássico de Lichtenberg aos testes hemolíticos encontramos que o ASB-16 possui maior afinidade pelo ambiente membranar e seu efeito de solubulização sobre membranas eritrocitárias ocorre, portanto, em baixas razões surfatante/lipídio. O maior valor de partição e menor valor de CMC obtidos para o ASB-16 justificam seu efeito hemolítico superior. Além disso, ASB-14 e ASB-16 apresentaram efeitos hemolíticos superiores ao clássico Triton X-100. Dessa forma, esses resultados demonstraram que o comportamento agregativo e a interação hidrofóbica estão fortemente relacionados ao processo de solubilização. A solubilização das proteínas da membrana eritrocitária promovida pelo uso dos surfatantes ASB-14, ASB-16, CHAPS e Triton X-100 foi avaliada através da técnica de eletroforese bidimensional. Apesar do CHAPS solubilizar o maior número de proteínas que os demais surfatantes utilizados, o ASB-14 e ASB-16 mostraram-se capazes de solubilizar proteínas diferentes além de promoverem um aumento da solubilização de algumas proteínas. Portanto, nas condições experimentais utilizadas, a diferença entre o perfil de solubilização das proteínas e o efeito hemolítico induzido pelos surfatantes sugere que o fenômeno de hemólise não ocorre proporcionalmente à saída de proteínas da membrana. Os resultados obtidos nesse estudo sugerem que o uso de ASB-14 e ASB-16 em processos de solubilização de membranas e suas proteínas pode ser promissor e mais estudos sobre eles devem ser realizados / Abstract: The choice of a surfactant is one of the most important steps for lipid and membrane proteins solubilization. A detailed knowledge of the surfactant properties is very useful for its application into membrane studies. In this work, we determined physicochemical properties of two novel zwitterionic amidosulfobetaine surfactants, ASB14 and ASB-16, and their solubilization properties on erythrocyte membrane's lipids and proteins. For ASB-16, with a longer hydrophobic tail, the value of CMC (critica I micelle concentration) was about ten times smaller than that of ASB-14, both in water and in 5 mM PBS, pH 7.4, at 25°C. By applying a classical treatment for the interpretation of the hemolytic tests, we found that ASB-16 presents higher affinity for the membrane environment, 50 that, its effect on the erythrocyte membrane solubilization occurs at a small surfactant/lipid molar ratio. The higher partition coefficient value and lower CMC value obtained for ASB-16 explain its higher hemolytic effect, in comparison to ASB-14. Furthermore, ASB-14 and ASB-16 showed higher hemolytic activity than Triton X-100, a classic surfactant. These results showed that the aggregative phenomenon and hydrophobic interaction are strongly involved in the membrane solubilization process. The solubilization of erythrocyte membrane associated proteins, using ASB-14, ASB-16, CHAPS and Triton X-100, was evaluated through two-dimensional electrophoresis. Although CHAPS have solubilized more proteins than the others surfactants, ASB-14 and ASB-16 increased the solubilization of some proteins and different spots were observed. In the experimental conditions studied, the difference between the protein solubilization and the Iytic effect induced by surfactants suggest that the hemolytic phenomenon does not occur proportionally with the proteins release from the membrane. The results obtained in this study suggest that the use of ASB-14 and ASB-16 on biomembranes and their protein solubilization can be promising and further studies about them should be carried out / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Memoria para optar al Título Profesional de Médico Veterinario / Se caracterizó el metabolismo del hierro en el conejo doméstico utilizando como trazador un isótopo radioactivo de hierro. Se realizaron dos experimentos: el experimento 1 para determinar la velocidad y porcentaje de hierro incorporado al eritrocito posterior a una inyección endovenosa de 55Fe. El experimento 2 consistió en determinar el contenido de hierro, cobre y zinc en 3 cortes de carne de conejo (mano, lomo y muslo) y algunos otros tejidos y vísceras (cerebro, pulmones, riñones, hígado y bazo), junto con determinar la proporción de hierro-hemínico (Fe-hem) y hierro no-hemínico o inorgánico (Fe no-hem), además de la distribución de una marca isotópica de 55Fe en los mismos cortes. Para medir la radioactividad en la sangre, carne y tejidos de ambos experimentos se procesaron las muestras según la técnica doble isotópica de Eakins y Brown (1966), y fueron leídas en un contador de centelleo líquido. Para evaluar el contenido de hierro (Fe), cobre (Cu) y zinc (Zn) en carne y vísceras se realizó una digestión húmeda, posteriormente las muestras fueron leídas en un espectrofotómetro de absorción atómica (EAA). Para la determinación de Fe no-hem se realizó una digestión con ácido clorhídrico y las muestras fueron leídas en EEA de horno grafito. La cantidad de Fe-hem se obtuvo por diferencia entre el hierro total y el Fe no-hem. La máxima incorporación de hierro al eritrocito se produjo el día 14 post-inyección y el porcentaje máximo de 55Fe incorporado fue 69,7%. Los contenidos de hierro total fueron: 0,99±0,2mg/100g de carne en la mano, 0,83±0,24mg/100g en el muslo y 0,66±0,13mg/100g en el lomo. El bazo fue la víscera en la que se encontró mayor cantidad de hierro, con 82,8±9,2mg/100g, seguido por el hígado con 18,2±4,4mg/100g. El contenido de Zinc fue: 1,33±0, 12mg/100g de carne en la mano, 0,91±0,17mg/100g en el muslo y 0,61±0,04mg/100g en el lomo. La cantidad de cobre fue: 0,08±0,02mg/100g de carne en la mano, 0,08±0,02mg/100g en el muslo y 0,07±0,02mg/100gr en el lomo. La víscera que tuvo mayor cantidad de Zn fue el bazo con 3,49±0,63mg/100g y la que tuvo más Cu fue el hígado con 3,85±2,89mg/100g. La cantidad de Fe-hem superó ampliamente a la de Fe no-hem, siendo más de 65% del Fe total en los cortes de carne y entre 50% y 90% del Fe total en vísceras. El contenido de Fe promedio de la carne de conejo es 0,83±0,16mg/100g, correspondiendo a Fe-hem 0,56±0,11mg/100g y a Fe no-hem 0,27±0,05mg/100g. El contenido de Cu es 0,08±0,01mg/100g y el de Zn 0,95±0,35mg/100g. La mayor cantidad de isótopos se encontró en el bazo. La mano fue el corte en que se encontró mayor cantidad de isótopos, seguido por el muslo y por último el lomo

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-08-28Bitstream added on 2014-06-13T18:29:10Z : No. of bitstreams: 1 sabino_aj_me_araca.pdf: 203707 bytes, checksum: 2e1c3c45b12f8f08080a961981b5bb46 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Objetivou-se obter valores eritrocitários de referência para avestruzes criados em sistema comercial na Região de São José do Rio Preto, São Paulo, Brasil. Para tal foi padronizada a forma de colheita de sangue, comparando o efeito de dois diferentes anticoagulantes (ácido etilenodiaminotetracético sódico - EDTA e heparina sódica) na morfometria e integridade dos eritrócitos permitindo concluir que, para fins de análises quantitativa e morfométrica dos parâmetros eritrocitários de avestruzes, a heparina sódica (10 U/mL sangue) é um anticoagulante mais adequando do que o EDTA sódico (2 mg/ mL sangue). Foram analisadas 240 amostras de sangue heparinizadas de avestruzes de ambos sexos, divididos em três diferentes faixas etárias: 4├13meses; 13 ├ 22 meses e 22 ├ 30 meses. Utilizando-se método analítico padrão, verificou-se que os valores de eritrócitos, hemoglobina, hematócrito, volume corpuscular médio (VCM), hemoglobina corpuscular média (HCM), concentração da hemoglobina corpuscular média (CHCM), o diâmetro maior e menor dos eritrócitos sofrem influência do sexo (fêmeas) e faixa etária. Concluiu-se deste estudo que para adequada interpretação clínica dos valores eritrocitários dos avestruzes deve-se levar em consideração o tipo de anticoagulante utilizado para obtenção da amostra e valores de referência que considere as particularidades do sexo e da idade. / The aim of this study was to obtain the reference values of erythrocyte indices for ostriches raised in a commercial system in the region of São José do Rio Preto, São Paulo State, Brazil. To achieve the purpose of the study, we standardized a blood specimen collection comparing the effect of two different anticoagulants such as Ethylenediaminetetraacetic Acid sodium (EDTA) and Heparin sodium on the erythrocyte morphometry and integrity, which made possible to conclude that for the purposes of quantitative and morphometric analyses of the erythrocyte parameters of ostriches, the heparin sodium (10 U/mL of blood) is a much more appropriated anticoagulant than the EDTA sodium (2 mg/mL of blood). We analyzed 240 heparinized blood samples of both male and female ostriches divided into different age groups: 4 ├ 13 months; 13 ├ 22 months; and 22 ├ 30 months. Using a standard analytical method it was observed that the erythrocytes, hemoglobin, hematocrit, mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH); mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) values, and both the greater and the smaller diameters of the erythrocytes are under the influence of gender and age group. It was concluded that to have an appropriate clinical interpretation of the erythrocyte indices of the ostriches it should be taken into account the type of the anticoagulant used to obtain the sample and the reference values considering the peculiarities of ostriches’ gender and age.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:28Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-27Bitstream added on 2014-06-13T20:36:02Z : No. of bitstreams: 1 000747190.pdf: 1418817 bytes, checksum: b247c3f9bf3c90821dabe9c5f9e0cf21 (MD5) / Há discordância na literatura quanto à necessidade da realização da microscopia de fase para avaliação da origem da hematúria (glomerular ou não glomerular), isso mostra a necessidade de mais estudos para validar as modalidades de avaliação morfológica da hematúria. Os objetivos deste trabalho foram determinar o melhor ponto de corte da porcentagem dos diferentes padrões de células dismórficas na detecção da hematúria glomerular pelo microscópio óptico convencional e contraste de fase, verificar se a presença de proteinúria ou albuminúria pode auxiliar no diagnóstico da origem da hematúria e determinar o melhor ponto de corte para este parâmetro. Foram avaliadas de maneira cega 131 amostras de urina sendo 66 amostras de portadores de glomerulopatias e 65 amostras dos portadores de litíase renal da Faculdade de Medicina de Botucatu. Utilizaram-se amostras isoladas com densidade >1007 e com mais de 5 hemácias por campo de grande aumento. Verificou-se a presença e a porcentagem de codócitos e acantócitos tanto em microscópio óptico convencional com sedimento fresco e fixado submetidos à coloração de Papanicolaou e Panótico rápido LB e sedimento urinário fresco avaliado em microscópio de contraste de fase, além de determinar o índice de proteinúria e o índice de albuminúria. Os resultados desses métodos foram comparados entre si. Realizou-se regressão linear e diagrama de Bland-Altman das hemácias dismórficas para comparar os diferentes métodos. Curvas ROC foram traçadas para determinar a área sob a curva (ASC) e o melhor ponto de corte (PC) foi determinado pela maior soma de sensibilidade e especificidade. Nesse ponto foram calculadas a sensibilidade (S) e especificidade (Es), Valor Preditivo Positivo (VPP) e Valor Preditivo Negativo (VPN). No microscópio óptico convencional com sedimento urinário fresco, a ASC do dismorfismo eritrocitário total foi a que apresentou... / There is disagreement over the literature regarding the performance of phase microscopy to assess the origin f hematuria (glomerular or nonglomerular). This shows the need for further investigation in order to validate the best form of morphological evaluation of hematuria. The aims of this study were to determine the optimal cutoff point percentage for different patterns of dysmorphic cells in the detection of glomerular hematuria by conventional optical microscopy and phase contrast microscopy, to verify whether the presence of proteinuria or albuminuria may assist in the diagnosis of hematuria and also to establish an optimal cutoff point for this parameter. One hundred thirty-one urine samples were blinded evaluated at the Faculdade de Medicina de Botucatu, 66 samples of patients with glomerulopathies and 65 samples of patients with nephrolithiasis. Isolated samples with density greater than 1007 and with more than 5 erythrocytes per high-power field were used. The presence and percentage of codocytes and acanthocytes were verified by conventional optical microscopy using fresh and fixed urinary sediment subjected to Papanicolaou and Panótico Rápido LB staining and fresh urinary sediment was evaluated by phase contrast microscopy. Proteinuria and albuminuria rates were determined. The results of these methods were compared using linear regression analysis and Bland-Altman diagram of dysmorphic red blood cells. ROC curve plots were generated to determine the area under the ROC curve (AUC) and also an optimal cutoff point with the highest sum of sensitivity and specificity. At this point, it was possible to calculate sensitivity (TPR) and specificity (ES), positive predictive value (PPV) and negative predictive value (NPV). In conventional optical microscope with fresh urinary sediment, the AUC of total dysmorphic erythrocytes showed the best result for the diagnosis of hematuria with AUC (IC 95%) ...

Orientador: Elenice Deffune / Banca: Rosana Rossi Ferreira / Banca: André Filadelpho / Resumo: Trata-se de um trabalho do tipo coorte para avaliar a espoliação dos depósitos de ferro em doadores de sangue. Sabendo-se que um percentual expressivo da população brasileira é portadora de ferro deficiência, e tendo em vista as inovações tecnológicas envolvendo os processos hemoterápicos este projeto teve como objetivo a avaliação da dinâmica de ferro com o monitoramento de parâmetros tais como: hematócrito, hemoglobina, dosagem de ferro e ferritina pré transfusionais e quatro meses após a doação, em quatro diferentes grupos de estudo:A,C,Ce D. Foi feita pelo teste ANOVA simples e para as variáveis sem distribuição normal pelo teste não paramétrico de Mann-Whitney e o teste de Kruskal Wallis, teste T-Pareado e Wilcoxon. No primeiro momento de análise (M1), com análise intra-grupos, as variações estatísticas foram presentes apenas nos parâmetros de Hb (p. 0,017), onde as variações estiveram presentes quando comparados os grupos A x D (p. 0,034) e C x D (p. 0,028) e Ht (p. <0,01) onde as variações estiveram presentes quando comparados os grupos A x D (p. 0,034) e C x D (p. 0,028). No segundo momento de análise (M2) foi identificada diferença entre os grupos, entretanto, devido à baixa significância estatística não foi possível identificar a diferença exata por grupo. Quando comparado entre os momentos um e dois- (M1 x M2) foi identificado redução da média de todos os parâmetros para os grupos A, B e C, significância estatística para o parâmetro de hemoglobina para todos os gru... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: It is a work of the cohort to evaluate the plundering of iron deposits in blood donors. Knowing that a significant percentage of the population is disabled iron, and in view of the technological innovations involving haemotherapic processes this project aimed to evaluate the iron dynamics with the monitoring of parameters such as hematocrit, hemoglobin, iron dosing and pre transfusion ferritin months after the donation, in four different study groups: A, B, C and D. Statistical analyses was made by ANOVA and simple test for variables without normal distribution using the nonparametric Mann-Whitney and Kruskal Wallis test, Paired t-test and Wilcoxon. At first analysis (M1) and intra-group analysis, statistical variations were present only in Hb parameters (p. 0.017), where variations were present when comparing the x groups D (p. 0.034) and C x D (p. 0028) and HT (p. <0.01) in which variations were present when comparing the groups D x (p. 0.034) and C x D (p. 0028). In the second stage of analysis (M2) was identified differences between the groups, however, due to the low statistical significance was not possible to identify the exact difference per group. When compared between one and two- moments (M1 and M2) was identified reduction in the average of all parameters for groups A, B and C for the statistical significance hemoglobin parameter for all groups and significance for the parameter Ferritin except for the B group, which is the only one that showed improvement in optimization of parameters except hemoglobin. Blood donation decreases hemoglobin levels in the short and medium term blood donors when compared in two stages with 4 months apart; for the indicator hematocrit and determination of serum iron there was a decrease of the indices was statistically significant only for the group A (individuals who had never donated before); as the suggestion in... (Complete abstract electronic access below) / Mestre

Orientador: Paulo César Ciarlini / Banca: José Juradir Fagliari / Banca: Suely Regina Mogami Bomfim / Resumo: Objetivou-se obter valores eritrocitários de referência para avestruzes criados em sistema comercial na Região de São José do Rio Preto, São Paulo, Brasil. Para tal foi padronizada a forma de colheita de sangue, comparando o efeito de dois diferentes anticoagulantes (ácido etilenodiaminotetracético sódico - EDTA e heparina sódica) na morfometria e integridade dos eritrócitos permitindo concluir que, para fins de análises quantitativa e morfométrica dos parâmetros eritrocitários de avestruzes, a heparina sódica (10 U/mL sangue) é um anticoagulante mais adequando do que o EDTA sódico (2 mg/ mL sangue). Foram analisadas 240 amostras de sangue heparinizadas de avestruzes de ambos sexos, divididos em três diferentes faixas etárias: 4├13meses; 13 ├ 22 meses e 22 ├ 30 meses. Utilizando-se método analítico padrão, verificou-se que os valores de eritrócitos, hemoglobina, hematócrito, volume corpuscular médio (VCM), hemoglobina corpuscular média (HCM), concentração da hemoglobina corpuscular média (CHCM), o diâmetro maior e menor dos eritrócitos sofrem influência do sexo (fêmeas) e faixa etária. Concluiu-se deste estudo que para adequada interpretação clínica dos valores eritrocitários dos avestruzes deve-se levar em consideração o tipo de anticoagulante utilizado para obtenção da amostra e valores de referência que considere as particularidades do sexo e da idade. / Abstract: The aim of this study was to obtain the reference values of erythrocyte indices for ostriches raised in a commercial system in the region of São José do Rio Preto, São Paulo State, Brazil. To achieve the purpose of the study, we standardized a blood specimen collection comparing the effect of two different anticoagulants such as Ethylenediaminetetraacetic Acid sodium (EDTA) and Heparin sodium on the erythrocyte morphometry and integrity, which made possible to conclude that for the purposes of quantitative and morphometric analyses of the erythrocyte parameters of ostriches, the heparin sodium (10 U/mL of blood) is a much more appropriated anticoagulant than the EDTA sodium (2 mg/mL of blood). We analyzed 240 heparinized blood samples of both male and female ostriches divided into different age groups: 4 ├ 13 months; 13 ├ 22 months; and 22 ├ 30 months. Using a standard analytical method it was observed that the erythrocytes, hemoglobin, hematocrit, mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH); mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC) values, and both the greater and the smaller diameters of the erythrocytes are under the influence of gender and age group. It was concluded that to have an appropriate clinical interpretation of the erythrocyte indices of the ostriches it should be taken into account the type of the anticoagulant used to obtain the sample and the reference values considering the peculiarities of ostriches' gender and age. / Mestre

Determina la prevalencia, el grado de anemia y la clasificación según índices eritrocitarios en estudiantes de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Desarrolla una investigación descriptiva, comparativa, ex post-facto y de corte transversal. La población de estudio estuvo conformada por el registro de 21495 estudiantes universitarios de pregrado, que acudieron al examen médico en la Clínica Universitaria en el 2016, excluyéndose 150 datos por no cumplir con criterios de selección. Se recolectaron datos de hemoglobina, índices corpusculares (VCM, HCM), facultad, sexo, tiempo de permanencia universitaria. Se empleó la estadística descriptiva para determinar la prevalencia, y la prueba del Ji cuadrado (X2) para observar la significancia de la comparación de las variables. Ocho facultades presentaron la mayor prevalencia de anemia: la facultad de Ciencias Económicas (36,16 %), Farmacia y Bioquímica (33,4 %), Ciencias Biológicas (31,09 %), Medicina (28,44 %), Letras y Ciencias Humanas (27,48%), Ciencias Administrativas (26,94%), Ciencias Contables (26,6%) y Ciencias Matemáticas (26,6%), con diferencia estadísticamente significativa en todos ellos. El grado de anemia (según el nivel de hemoglobina) se presentó como leve con 68,71%, anemia moderada en 30,03% y anemia severa con un 1,26%. Y la clasificación de anemia según índice eritrocitarios, se presentó como anemia normocítica normocrómica con un 71,41%, anemia microcítica hipocrómica con un 9,29%, anemia macrocítica normocrómica con 4,14% y otros (grupo que no entran en ninguna clasificación) con 15,16%. Concluye que la prevalencia de anemia en estudiantes de la UNMSM fue baja, no siendo considerado como un problema de salud pública. El mayor grado de anemia fue la anemia leve y la clasificación de anemia según índices corpusculares que predominó fue la anemia normocítica normocrómica. / Tesis

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-12-05Bitstream added on 2014-06-13T19:41:09Z : No. of bitstreams: 1 pereira_wab_dr_jabo.pdf: 854556 bytes, checksum: 9d7af941da3e924cbf09a5ce3f63ef48 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Os ovinos possuem tendência a acumular cobre no organismo. Quando a capacidade de armazenagem hepática se esgota, o cobre é liberado para o sangue causando sinais clínicos da intoxicação. Para verificar as alterações presentes na bioquímica sérica, hemograma, morfologia eritrocitária, perfil de proteínas séricas e concentração de cobre sérico, durante as fases pré-hemolítica e hemolítica da intoxicação crônica por cobre, foram utilizados seis ovinos distribuídos aleatoriamente em dois grupos: G-1 (controle) e G-2 (experimentalmente intoxicados). Os três ovinos do G-2, além da dieta diária receberam 3mg de CuSO4. 5H2O/Kg PV, seguido de aumentos semanais de 3mg de CuSO4. 5H2O/ Kg PV na dose diária. Diariamente realizou-se o exame físico dos ovinos de ambos os grupos. Para obtenção do hemograma e dos componentes bioquímicos sanguíneos foram colhidas amostras com antes (M0 – M3), durante (M4) e após (M5 e M6) a crise hemolítica. Foram realizadas necropsias dos ovinos do G-2 que morreram e dos ovinos do G-1, submetidos à eutanásia ao fim do experimento e fragmentos do fígado desses animais foram colhidos para avaliação histopatológica. Durante a fase pré-hemolítica evidenciaram-se poucas alterações, entretanto durante a crise hemolítica os ovinos do G-2 apresentaram anemia macrocítica normocrômica, predomínio de hemácias com morfologia de acantócitos, leucocitose por neutrofilia, elevação nas atividades séricas de AST,GGT, CK e hipercupremia; Os teores séricos de ceruloplasmina apresentaram-se diminuídos e os teores de transferrina, proteína de 35.000 Da e IgG de cadeia leve apresentaramse aumentados no M2; os animais intoxicados apresentaram anorexia, membranas mucosas ictéricas, fezes amolecidas de coloração verde-escura e hemoglobinúria. À necropsia observou-se mucosas, fígado e demais tecidos de coloração amarelada... / Sheep have a tendency to accumulate copper in the body. When the liver storage capacity is exhausted, copper is released into the blood causing clinical signs of poisoning. Six lambs fed a basal diet were randomly assigned to 2 groups: G - 1 (control) and G-2 (experimentally intoxicated). The three sheep of the G-2, were drenched initially with 3 mg of CuSO4. 5H2O/ kg bw daily for a week. Every week an additional dose of 3mg CuSO4. 5H2O/ kg bw was included in the drench until signs of copper poisoning appeared. Every day, the lambs were monitored clinically. before (M0 – M3), during (M4) and after (M5 and M6) to hemolytic crisis, sample blood were obtained for biochemical analysis of AST, GGT and CK, blood count, serum proteins and serum concentration of copper. The lambs of the G-2 that died in the course of the experiment and the lambs of the G-1 euthanized at the end, were necropsied and fragments of liver, were obtained for histopathology. During the pre-hemolytic phase few changes were evidenced, however thought the hemolytic crisis the sheep of the G-2 were presented macrocytic normochromic anemia, a predominance of erythrocytes with acantocytes morphology, leukocytosis by neutrophilia, elevation in serum activities of AST, GGT and CK and hipercupremia; Serum levels of ceruloplasmin was presented reduced and the levels of transferrin, 35,000 of protein and IgG- light chain were increased in M2; the lambs of G-2 exhibited anorexia, jaundiced mucous membranes, soften and dark-green feces and hemoglobinuria. Gross examination of poisoned lambs revealed mucous membranes, liver and other tissues yellowish, dark kidneys and brownish urine. Histopathology of the liver showed megalocitose of hepatocytes, the disorganization of strands of hepatocytes, cholestasis and inflammatory infiltrate lymphocytic peri-portal.

Orientador: Mário Roberto Hatayde / Banca: Pierre Castro Soares / Banca: Humberto Eustáquio Coelho / Banca: José Jurandir Fagliari / Banca: Antônio Carlos Alessi / Resumo: Os ovinos possuem tendência a acumular cobre no organismo. Quando a capacidade de armazenagem hepática se esgota, o cobre é liberado para o sangue causando sinais clínicos da intoxicação. Para verificar as alterações presentes na bioquímica sérica, hemograma, morfologia eritrocitária, perfil de proteínas séricas e concentração de cobre sérico, durante as fases pré-hemolítica e hemolítica da intoxicação crônica por cobre, foram utilizados seis ovinos distribuídos aleatoriamente em dois grupos: G-1 (controle) e G-2 (experimentalmente intoxicados). Os três ovinos do G-2, além da dieta diária receberam 3mg de CuSO4. 5H2O/Kg PV, seguido de aumentos semanais de 3mg de CuSO4. 5H2O/ Kg PV na dose diária. Diariamente realizou-se o exame físico dos ovinos de ambos os grupos. Para obtenção do hemograma e dos componentes bioquímicos sanguíneos foram colhidas amostras com antes (M0 - M3), durante (M4) e após (M5 e M6) a crise hemolítica. Foram realizadas necropsias dos ovinos do G-2 que morreram e dos ovinos do G-1, submetidos à eutanásia ao fim do experimento e fragmentos do fígado desses animais foram colhidos para avaliação histopatológica. Durante a fase pré-hemolítica evidenciaram-se poucas alterações, entretanto durante a crise hemolítica os ovinos do G-2 apresentaram anemia macrocítica normocrômica, predomínio de hemácias com morfologia de acantócitos, leucocitose por neutrofilia, elevação nas atividades séricas de AST,GGT, CK e hipercupremia; Os teores séricos de ceruloplasmina apresentaram-se diminuídos e os teores de transferrina, proteína de 35.000 Da e IgG de cadeia leve apresentaramse aumentados no M2; os animais intoxicados apresentaram anorexia, membranas mucosas ictéricas, fezes amolecidas de coloração verde-escura e hemoglobinúria. À necropsia observou-se mucosas, fígado e demais tecidos de coloração amarelada... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Sheep have a tendency to accumulate copper in the body. When the liver storage capacity is exhausted, copper is released into the blood causing clinical signs of poisoning. Six lambs fed a basal diet were randomly assigned to 2 groups: G - 1 (control) and G-2 (experimentally intoxicated). The three sheep of the G-2, were drenched initially with 3 mg of CuSO4. 5H2O/ kg bw daily for a week. Every week an additional dose of 3mg CuSO4. 5H2O/ kg bw was included in the drench until signs of copper poisoning appeared. Every day, the lambs were monitored clinically. before (M0 - M3), during (M4) and after (M5 and M6) to hemolytic crisis, sample blood were obtained for biochemical analysis of AST, GGT and CK, blood count, serum proteins and serum concentration of copper. The lambs of the G-2 that died in the course of the experiment and the lambs of the G-1 euthanized at the end, were necropsied and fragments of liver, were obtained for histopathology. During the pre-hemolytic phase few changes were evidenced, however thought the hemolytic crisis the sheep of the G-2 were presented macrocytic normochromic anemia, a predominance of erythrocytes with acantocytes morphology, leukocytosis by neutrophilia, elevation in serum activities of AST, GGT and CK and hipercupremia; Serum levels of ceruloplasmin was presented reduced and the levels of transferrin, 35,000 of protein and IgG- light chain were increased in M2; the lambs of G-2 exhibited anorexia, jaundiced mucous membranes, soften and dark-green feces and hemoglobinuria. Gross examination of poisoned lambs revealed mucous membranes, liver and other tissues yellowish, dark kidneys and brownish urine. Histopathology of the liver showed megalocitose of hepatocytes, the disorganization of strands of hepatocytes, cholestasis and inflammatory infiltrate lymphocytic peri-portal. / Doutor

Orientador: Eneida de Paula / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-07T20:44:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Prete_PauloSergioCastilho_D.pdf: 3376950 bytes, checksum: fd06e65f64531668e35cf4a9cb817913 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Surfatantes ou detergentes são compostos anfifílicos que, na presença de água, têm a característica de formar agregados micelares. Surfatantes induzem a desestruturação de outros agregados como bicamadas sendo, por isso, usados para ruptura celular ou solubilização de lipídios e proteínas de membrana. A capacidade lítica dos surfatantes resulta de sua estrutura química, que determina o modo de interação dos mesmos com as membranas. Em concentrações mais altas (acima da concentração micelar crítica), os surfatantes desestabilizam as bicamadas lipídicas, levando à formação de micelas-mistas. Ensaios hemolíticos são bons modelos para estudo do efeito lítico de surfatantes em biomembranas. Aplicando em eritrócitos humanos o tratamento quantitativo proposto por Lichtenberg (1985) para estudo da solubilização de bicamadas lipídicas mensurou-se, neste trabalho, as concentrações para início (Csat) e 100% de hemólise (Csol), induzidas por 25 surfatantes clássicos, pertencentes a cinco diferentes famílias. A variação dos valores de Csat, Csol determinada com diferentes hematócritos permitiu o cálculo da constante de ligação surfatante/membrana e da razão surfatante/lipídio de membrana (Re) para início e 100% de hemólise. O parâmetro Re foi usado para classificar os detergentes como fortes, médios ou fracos agentes solubilizantes, com boa correlação com dados da literatura o que nos permitiu propor seu uso para descrever o efeito lítico de surfatantes, como uma alternativa simples e aplicável as membranas biológicas. As transições durante o processo hemolítico foram acompanhadas pela técnica de Ressonância Paramagnética Eletrônica, com uso marcador de spin 5 doxil-estearato (incorporado a 1 mol% nas membranas de eritrócito) e lise induzida pelo surfatante não iônico Triton X100. Concomitante ao aparecimento de hemoglobina e fosfato livres no sobrenadante - indicadores da ruptura da membrana, medidas do parâmetro de ordem daquele marcador de spin permitiram estudar as transições que acontecem durante (membrana:membrana mista) e após (membrana mista:micela mista) a hemólise / Abstract: Surfactants or detergents are amphiphilic compounds that form micellar aggregates in the presence of excess water. Surfactants are able to induce disruption of lamellar aggregates, justifying their use for cell lysis or in the extraction of membrane constituents such as lipids and proteins. The lytic capacity of a given surfactant is determined by its chemical structure, that rules its interaction with the membranes. At high concentration (above the critic micelle concentration), surfactants destabilize lipid bilayer leading to mixed micelle formation. Hemolytic assays are a good model to study the lytic effect of surfactants on biomembranes. In this study we have applied to human erythrocytes the quantitative treatment proposed by Lichtenberg (1985) to describe the solubilization of model lipid membranes. The concentration for onset (Csat) and complete (Csol) hemolysis induced by 25 classic surfactants from five different families were measured. Changes in Csat and Csol values at different hematocrits allowed the determination of the surfactant/membrane lipid molar ratio (Re) for beginning and 100% lysis. The Re arameter was used to classify the surfactants as strong, medium or weak membrane solubilizers. The classification was in good correlation with data in the literature, allowing us to recommend the use of Re parameter to describe the lyric effect of surfactants on biomembranes. The transitions in the hemolytic process were accompanied by Electron Paramagnetic Resonance, using the 5-doxyl-stearate spin-probe (1 mol%, incorporated in the erythrocyte membrane) and the non-ionic surfactant Triton X100. Simultaneously to the appearance of hemoglobin and phosphate released in the supernatant, measurements of the order parameter of the spin probe were used to characterize the transitions that take place during (membrane :mixed membrane) and after (mixed: membrane: mixed micelle) hemolysis / Doutorado / Bioquimica / Doutor em Biologia Funcional e Molecular