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Avaliação do estado redox no sêmen humano e sua correlação com os parâmetros do espermograma / Evaluation of redox state in human semen and its correlation with semen parametersCoelho, Adriana Patricia Laurenti 03 November 2014 (has links)
As espécies reativas de oxigênio (ERO) em baixos níveis são necessárias para as funções normais do espermatozoide, as quais estão envolvidas com a capacidade de fertilização. Entretanto, várias evidências demonstram que a produção excessiva de ERO leva ao estresse oxidativo, que por sua vez está relacionado à infertilidade masculina. Uma correlação positiva entre os níveis excessivos de ERO e concentrações anormais de espermatozoides, motilidade e morfologia tem sido descrita. Além disso, a capacidade antioxidante total do sêmen tem sido significativamente menor em casos de infertilidade comparado com casos férteis. O estresse oxidativo também tem sido relacionado ao envelhecimento e há evidências de que o acúmulo de radicais livres danifica o DNA do espermatozoide e prejudica a fertilização. A Organização Mundial da Saúde tem enfatizado a importância da avaliação do estresse oxidativo seminal e recomendado que cada laboratório estabeleça os valores de referência para os parâmetros do sêmen em sua população. O objetivo deste estudo foi avaliar o estado redox no sêmen humano e sua correlação com os parâmetros do espermograma. Para tanto, avaliou-se a medida de ERO (quimioluminescência, QL), a atividade antioxidante (QL e catalase), a peroxidação lipídica (malondialdeído, MDA), a medida dos produtos avançados de oxidação proteica (AOPP) e apoptose/necrose (anexina/iodeto de propídeo, citometria de fluxo) no sêmen humano de homens saudáveis e férteis (Controles; n=7). As metodologias foram padronizadas para aplicá-las à análise do sêmen de homens que estavam em investigação de infertilidade (Pacientes; n=23), e correlacionar os resultados com os parâmetros do espermograma. Os principais resultados mostraram 1) a medida de ERO no sêmen de Pacientes sem alterações no espermograma (Pacientesa; n=9) foi maior do aquela para sêmen dos Pacientes com alterações no espermograma (Pacientesb; n=14) e dos Controles, sugerindo comprometimento da qualidade do sêmen pelo aumento de ERO, mesmo com espermograma normal; 2) não houve diferenças entre os grupos quanto à peroxidação lipídica (MDA), aos AOPP, catalase e apoptose/necrose; 3) quanto às correlações entre os parâmetros analisados, observou-se: correlação positiva entre a medida de ERO no sêmen in natura e no sêmen lavado do grupo Pacientes, validando a utilização do sêmen in natura para esta metodologia; correlação positiva entre a medida de ERO in natura e a apoptose, número de espermatozoides e número de leucócitos somente para o grupo Pacientesb; correlação entre a medida de ERO in natura e a motilidade progressiva somente para o grupo Controle; correlação entre apoptose e número de espermatozoides nos grupos Pacientes e Pacientesa; estes resultados mostram correlações particulares em cada grupo e correlações compartilhadas, que caracterizam Controles e Pacientes. O perfil da presença e da ausência destas correlações no grupo Controle pode estabelecer um padrão de referência para as análises do estresse oxidativo no sêmen. Os resultados poderão contribuir para a aplicação da medida das ERO e das suas correlações com parâmetros do espermograma na análise de rotina do sêmen humano, para a investigação da infertilidade e de patologias do sistema reprodutor masculino. / Reactive oxygen species (ROS) at low levels are required for normal function of sperm, which are involved in fertilization capacity. However, evidences show that the excessive production of ROS leads to oxidative stress, which in turn is related to male infertility. A positive correlation between excessive levels of ROS and abnormal sperm concentration, motility and morphology has been described. Moreover, the total antioxidant capacity of the semen has been significantly lower in cases of infertility compared with fertile cases. Oxidative stress has also been associated with aging and there is evidence that the excess of free radicals damages the DNA of sperm and impairs fertilization. The World Health Organization has emphasized the importance of the evaluation of seminal oxidative stress and recommended that each laboratory establish reference values for the parameters of semen in their population. The aim of this study was to evaluate the redox state in human semen and its correlation with semen parameters. For this purpose, we evaluated the measurement of ROS (chemiluminescence, CL), the antioxidant activity (CL and catalase), lipid peroxidation (malondialdehyde, MDA), the advanced oxidation protein products (AOPP) and apoptosis / necrosis (annexin / propidium iodide flow cytometry) in semen of healthy, fertile men (Controls, n = 7). The methods were standardized to apply them to the analysis of semen of men who were in infertility investigation (Patients, n = 23), and to correlate the results with the parameters of sperm. The main results showed: 1) the measurement of ROS in the semen of patients with normal semen (Patientsa, n = 9) was higher than that for semen of patients with abnormal semen analysis (Patientsb, n = 14) and Controls, suggesting impairment of the quality semen by increasing ROS, despite normal semen; 2) no differences were found among the groups regarding to lipid peroxidation (MDA), the AOPP, catalase and apoptosis / necrosis; 3) concerning the correlations among the parameters analyzed, we observed: positive correlation between the measurement of ROS in semen in natura and washed semen of Patients group, validating the use of semen in natura for this method; positive correlation between the measurement of ROS in semen in natura and apoptosis, number of spermatozoa and leukocytes only for the Patientsb group; correlation between the measurement of ROS in semen in natura and progressive motility only for the Control group; correlation between apoptosis and number of spermatozoa in the groups Patients and Patientsa; these results show particular and shared correlations in each group, which characterize Controls and Patients. The profile of the presence and absence of these correlations in the Control group may establish a reference standard for the analysis of oxidative stress in the semen. These results may contribute to the use of the measurement of ROS and their correlations with semen parameters in routine analysis of human semen, for the investigation of infertility and disorders of the male reproductive system.
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Dieta de cafeteria desde a lactac?o promove s?ndrome metab?lica e alterac?o na ac?o da risperidona sobre a ansiedade, locomoc?o, mem?ria e interac?o social de ratos WistarTeixeira, Amanda Escobar 23 May 2018 (has links)
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Previous issue date: 2018 / Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM) / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da dieta de cafeteria desde a lacta??o nos
par?metros nutricionais e na a??o da risperidona nos comportamentos de ansiedade,
locomo??o, mem?ria e intera??o social. Foram utilizadas 14 ninhadas de ratos da linhagem
Wistar (Rattus novergicus) alojados em gaiolas individuais, sob condi??es padr?o. Os ratos
machos de cada ninhada formaram, da lacta??o at? a fase adulta, os grupos: Controle (CTRL)
? receberam ra??o padr?o e ?gua ad libitum (n = 42); Cafeteria (CAF) ? receberam dieta de
cafeteria e ?gua ad libitum (n = 42). Entre o 114? e o 119? dia de vida, os animais foram
subdividos (n = 21) para receberem o tratamento com salina (CTRL-S e CAF-S) ou
risperidona (CTRL-R e CAF-R). Nesse per?odo foram realizados os testes comportamentais
do labirinto em cruz elevado, campo aberto, teste de reconhecimento de objetos e intera??o
social. No 119? os animais foram colocados em jejum, para que, no 120? dia fossem
anestesiados e eutanasiados por exsanguina??o. Foram avaliados: consumo de ra??o, ingest?o
cal?rica, peso corporal, ganho de peso, coeficiente de efici?ncia alimentar (CEA),
comprimento naso-anal e ?ndice de massa corporal (IMC); peso dos ?rg?os e do tecido
adiposo abdominal; teores de colesterol total e fra??es, triacilglicerol e glicemia do soro; teor
de lip?dios, colesterol total e triacilglicerol do f?gado e das fezes; estado redox do f?gado e de
diferentes por??es do enc?falo (c?rtex pr?-frontal e hipocampo). Foi utilizada an?lide de
vari?ncia (ANOVA) seguida de Newman Keuls quando necess?rio (P<0,05). O grupo CAF
demonstrou menor ingest?o alimentar e maior ingest?o cal?rica, devido ? densidade
energ?tica da dieta. O maior consumo cal?rico se configurou em maior ganho de peso, CEA,
IMC e ac?mulo de tecido adiposo abdominal. O grupo CAF tamb?m obteve eleva??o dos
n?veis de triacilglicerol plasm?ticoa, al?m de lip?dios e triacilglicerol hep?tico, que foram
classificados em esteatose hep?tica. Ao mesmo tempo, houve uma rela??o ruim entre as
fra??es do colesterol plasm?tico (HDL-c, LDL-c e VLDL-c), com aumento do risco de
doen?as aterog?nicas. Portanto, a dieta de cafeteria foi capaz de reproduzir um modelo de
obesidade humana e de s?ndrome metab?lica. Os animais do grupo de cafeteria apresentaram
caracter?sticas de estresse oxidativo no hipocampo, o que pode comprometer a fun??o dessa
estrutura e promover altera??es comportamentais. O grupo CAF - S obteve efeito ansiol?tico
devido ao maior n?mero de entradas e tempo gasto no centro do campo aberto, al?m de maior
locomo??o atrav?s do maior n?mero de quadrantes percorridos. CAF - S ainda demonstrou
preju?zos na mem?ria avaliados atrav?s do teste de reconhecimento de objetos e diminui??o
da intera??o social. Tais efeitos podem estar associados a altera??es no sistema
serotonin?rgico desses animais. CAF - R demonstrou efeito ansiog?nico e diminui??o na
locomo??o no campo aberto. No teste de reconhecimento de objetos, houve diminui??o na
intera??o com os objetos, sem, no entanto, melhorar o ?ndice de discrimina??o em rela??o a
CAF - S. No teste de intera??o social, CAF - R obteve maior sociabilidade. Os resultados da
administra??o da risperidona indicam que esta droga possui um efeito diferente quando
aplicada em animais que foram tratados com dieta de cafeteria desde a lacta??o. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-gradua??o em Ci?ncias Farmac?uticas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2018. / The objective of this work was to evaluate the effects of the cafeteria diet from lactation on
the nutritional parameters and the action of risperidone on the behaviors of anxiety,
locomotion, memory and social interaction. Fourteen litters of Wistar rats (Rattus novergicus)
housed in individual cages were used under standard conditions. The male rats from each
litter formed from the lactation to the adult phase, the groups: Control (CTRL) - received
standard chow and water ad libitum (n = 42); Cafeteria (CAF) - received cafeteria diet and
water ad libitum (n = 42). Between days 114 and 119, animals were subdivided (n = 21) to
receive treatment with saline (CTRL-S, CAF-S) or risperidone (CTRL-R and CAF-R). During
this period, the behavioral tests of the plus maze size, open field, test of object recognition and
social interaction were performed. At 119? the animals were fasted, so that on the 120? day
they were anesthetized and euthanized by exsanguination. The following were evaluated: feed
intake, caloric intake, body weight, weight gain, food efficiency coefficient (FEC), naso-anal
length and body mass index (BMI); weight of organs and abdominal adipose tissue; levels of
total cholesterol and fractions, triacylglycerol and serum glycemia; lipid content, total
cholesterol, and triacylglycerol of liver and faeces; redox status of the liver and different
portions of the encephalon (prefrontal cortex and hippocampus). Variance analysis (ANOVA)
was used followed by Newman Keuls when necessary (p<0,05). The CAF group
demonstrated lower dietary intake and higher caloric intake, due to the energy density of the
diet. The highest caloric intake was in greater weight gain, FEC, BMI and abdominal adipose
tissue accumulation. The CAF group also achieved elevations in plasma triglyceride levels,
besides lipids and hepatic triacylglycerol, which were classified as hepatic steatosis. At the
same time, there was a poor relationship between fractions of plasma cholesterol (HDL-c,
LDL-c and VLDL-c), with increased risk of atherogenic diseases. Therefore, the cafeteria diet
was able to reproduce a model of human obesity and metabolic syndrome. The animals in the
cafeteria group presented oxidative stress characteristics in the hippocampus, which may
compromise the function of this structure and promote behavioral changes. The CAF - S
group had an anxiolytic effect due to the greater number of entrances and time spent in the
center of the open field, besides greater locomotion through the greater number of quadrants
traveled. CAF - S also demonstrated memory impairments assessed through the object
recognition test and decreased social interaction. Such effects may be associated with changes
in the serotonergic system of these animals. CAF - R demonstrated an anxiogenic effect and
decreased locomotion in the open field. In the object recognition test, there was a decrease in the interaction with the objects, without, however, improving the discrimination index in relation to CAF - S. In the social interaction test, CAF - R obtained greater sociability. The results of the administration of risperidone indicate that this drug has a different effect when applied in animals that have been treated with cafeteria diet since lactation.
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Efeito do treinamento intervalado de alta intensidade sobre o hipocampo e c?rtex cerebral de ratos Wistar: an?lise de par?metros neuroinflamat?rios, status redox, neurotr?fico e em tarefas de mem?riaFreitas, Daniel Almeida 26 May 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017 / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do estado de Minas Gerais (FAPEMIG) / O treinamento f?sico de intensidade leve e moderada est?o associados a efeitos neurais ben?ficos, contudo o exerc?cio de alta intensidade cont?nuo a efeitos neurais mal?ficos, pouco ? conhecido sobre os efeitos do treinamento intervalado de alta intensidade em ingl?s high intensity interval training (HIIT) em par?metros neuroqu?micos e de mem?ria. O presente estudo avaliou em ratos da linhagem Wistar os efeitos de 6 semanas de HIIT sobre o estado redox, concentra??o de mediadores inflamat?rios fator de necrose tumoral alfa (TNF-?), interleucina 1-beta (IL-1?), interleucina 6 (IL-6) e interleucina 10 (IL-10) e do fator neurotr?fico derivado c?rebro, do ingl?s brain derived neurothrophic factor (BDNF) no hipocampo e c?rtex cerebral. Al?m disso, foi avaliado o desempenho nas tarefas de reconhecimento espacial de objeto (hipocampo-dependente) e tarefa de reconhecimento de novo objeto (c?rtex-dependente). O presente estudo aprovado pela Comiss?o de Experimenta??o Animal (CEUA-UFVJM) sob n?mero de protocolo (031/2015). Ap?s 6 semanas de HIIT, os animais apresentaram redu??o de 28,57% do conte?do de esp?cies reativas ao ?cido tiobarbit?rico (TBARS) e aumento de 75% da atividade da enzima super?xido dismutase (SOD) e de 50,83% da capacidade antioxidante total pelo m?todo de redu??o do ferro (FRAP - ?Ferric reducing ability of plasma).no hipocampo. Al?m disso, o HIIT reduziu a concentra??o de mediadores neuroimunes no hipocampo (TNF-?, IL-1?, IL-6 e IL-10) respectivamente em (24,8%;13,9%; 33,93% e 16,33%), aumentou a concentra??o de BDNF em 60,21% e n?o interferiu no desempenho dos animais nas tarefas de reconhecimento espacial de objeto e reconhecimento de novo objeto. Nenhum dos par?metros investigados foram alterados no c?rtex cerebral. O presente estudo mostrou efeito positivo de 6 semanas de HIIT espec?fico por regi?o cerebral, sendo que tais modifica??es resultaram em efeitos neurais ben?ficos no hipocampo de animais submetidos a um treinamento for?ado. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa Multic?ntrico de P?s-gradua??o em Ci?ncias Fisiol?gicas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2017. / Although High Intensity Interval Training (HIIT) is associated with neuroprotection, there is no information available on the balance of pro and anti-inflammatory cytokines, as well as redox status, expression of neurotrophins and their impacts on different neural substrates and cognitive function. The present study evaluated the effects of a 6 weeks HIIT protocol on redox homeostasis, concentration of tumor necrosis factor alpha (TNF-?), interleukin 1-beta (IL-1?), interleukin 6 (IL -6) and interleukin 10 (IL-10) and brain derived neurotrophic factor (BDNF) in the hippocampus and cerebral cortex of Wistar rats.In addition, we evaluated the performance in the object spatial recognition tasks (hippocampus-dependent) and the new object recognition task (cortex-dependent). After 6 weeks of the HIIT protocol, the animals showed a reduction in the content of thiobarbituric acid reactive species (TBARS) and an increase in the activity of the enzyme superoxide dismutase (SOD) and in the total antioxidant capacity evaluated by the iron reduction method (FRAP - Ferric reducing ability of plasma) in the hippocampus. In addition, HIIT reduced the concentration of neuroimmune mediators in the hippocampus (TNF-?, IL-1?, IL-6 and IL-10), increased BDNF concentration and did not interfere in the performance of animals in the object recognition task. None of the investigated parameters were altered in the cerebral cortex. The present study was the first to show positive effect of 6 weeks of HIIT on specific brain-region, and such modifications result in a neuroprotective effect in the hippocampus of animals submitted to the stress of forced training.
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Avaliação da bioenergética mitocondrial e estado redox em tecido hepático de ratos adultos submetidos à restrição proteica perinatalSILVA FILHO, Reginaldo Correia da 24 February 2017 (has links)
Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-04-12T21:58:30Z
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Previous issue date: 2017-02-24 / Plasticidade fenotípica pode ser definida como a propriedade de um genótipo individual gerar diferentes fenótipos, quando exposto a diferentes condições ambientais. O desenvolvimento fetal em mamíferos ocorre de forma complexa e envolve diferentes processos que são regulados por vias de sinalização. No entanto, essas vias de sinalização podem ser influenciadas pela interação entre fatores fetais intrínsecos (por exemplo, genética) e fatores ambientais extrínsecos (por exemplo, nutrição placentária e peso materno antes da gestação), podendo culminar em desenvolvimento anormal de órgãos. Apesar disso, um ambiente fetal inadequado não necessariamente resultará num desenvolvimento deletério e poucos estudos têm mostrado os mecanismos envolvidos na plasticidade do fígado frente ao insulto da restrição proteica perinatal. Este órgão atua como sensor inicial de nutrientes e tem um papel fundamental no metabolismo de carboidratos e lipídeos, além de apresentar uma alta capacidade plástica. Todas as etapas da oxidação de carboidratos, ácidos graxos e aminoácidos convergem no estágio final da respiração celular, em que a energia da oxidação dirige a síntese de ATP nas mitocôndrias. Além da produção de energia, esta organela tem emergido como mecanismo de sinalização, injúria e morte celular. Neste trabalho, objetivamos avaliar o efeito da restrição proteica materna (na gestação e lactação) na bioenergética mitocondrial e estado redox hepático de ratos machos aos 100 dias de vida. Observamos que em animais desnutridos, as mitocôndrias respiram mais rápido, são mais resistentes ao íon Ca2+, produzem menos EROs e mantêm a integridade de suas membranas. Essas mitocôndrias também apresentaram estrutura fusionada, alongadas, o que confere maior resistência e otimização da homeostase energética. Além do mais, o fígado desses animais possui maior expressão do gene PGC-1α e da proteína PPAR-γ e metaboliza mais ácidos graxos, poupando glicogênio para órgãos glicolíticos. Por fim, o fígado de animais desnutridos possui estado redox positivo e não apresenta estresse oxidativo. Nossos dados permitem sugerir que a plasticidade do fígado de animais cujas mães receberam dieta hipoprotéica durante a gestação e lactação parece estar associada a um mecanismo sinalizado pela maior eficiência das mitocôndrias para manter a homeostase energética e consequentemente a homeostase redox celular hepática. / Phenotypic plasticity can be defined as the property of an individual genotype generates different phenotypes when exposed to different environmental conditions. Fetal development in mammals occurs in complex ways and involves different processes that are regulated by signaling pathways. However, these signaling pathways may be influenced by the interaction between intrinsic fetal factors (e.g. genetics) and extrinsic environmental factors (e.g. placental nutrition and maternal weight before gestation), which may culminate in abnormal organ development. However, an inadequate fetal environment will not necessarily result in deleterious development and few studies have shown the mechanisms involved in the liver plasticity versus the insult of perinatal protein restriction. This organ acts as initial nutrient sensor and plays a key role on the metabolism of carbohydrates and lipids, besides presenting a high plastic capacity. All steps of the oxidation of carbohydrates, fatty acids and amino acids converge in the final stage of cellular respiration, in which the energy of oxidation directs the ATP synthesis in the mitochondria. In addition to energy production, this organelle has emerged as a mechanism of signaling, injury and cell death. In this work, we aimed to evaluate the effect of maternal protein restriction (in gestation and lactation) on mitochondrial bioenergetics and hepatic redox status of male rats at 100 days of life. We observed that in low protein animals, mitochondria breathe faster, are more resistant to the Ca2+ ion, produce fewer ROS and maintain the integrity of their membranes. These mitochondria also presented a fused structure, elongated, which confers greater resistance and optimizes energy homeostasis. Moreover, the liver of these animals has greater expression of the PGC-1α gene and the PPAR-γ protein and metabolizes more fatty acids, stores glycogen to glycolytic organs. Finally, the liver of low protein animals has a positive redox state and does not present oxidative stress. Our data suggest that liver plasticity of animals whose mothers received low protein diet during pregnancy and lactation seems to be associated with a mechanism signaled by the greater efficiency of mitochondria to maintaining energy homeostasis and consequently hepatic cellular redox homeostasis.
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Efeito da progesterona na expressão de genes envolvidos no estresse oxidativo e defesa antioxidante em células beta pancreáticas: uma abordagem in vitro para o estudo do diabetes gestacional / Progesterone effect on the genes expression involved on oxidative stress and antioxidant defense in pancreatic beta cells: an in vitro approach to the study of gestational diabetesBorçari, Nathalia Ruder 16 March 2018 (has links)
O diabetes gestacional (DG) é uma condição definida como intolerância a carboidratos e hiperglicemia, com início no segundo trimestre da gravidez. Trabalhos desenvolvidos por nosso grupo mostraram que a progesterona (PG) é capaz de causar a morte de células pancreáticas, por um mecanismo dependente da geração de radicais livres, o que poderia contribuir para o desenvolvimento do DG. O objetivo desse trabalho foi estudar o efeito da PG, na presença ou não de antioxidantes, na expressão de genes relacionados ao estresse oxidativo e na defesa oxidante em células pancreáticas da linhagem RINm5F. As células foram incubadas com PG 0,1, 1,0 e 100 µM por 6 ou 24 h, na presença ou não dos antioxidantes vitamina E e C. Após a incubação, foram realizados ensaios de viabilidade celular e fragmentação do DNA. A PG, não causou perda da integridade da membrana das células RINm5F, porém, ela promoveu fragmentação do DNA em, aproximadamente, 40% das células RINm5F e MCF-7 (controle positivo), enquanto que os antioxidantes vitamina E e C reduziram tal fragmentação. A partir da extração do RNA e síntese de cDNA foi investigada a expressão de 84 genes envolvidos no estresse oxidativo e defesa antioxidante. Dos 84 genes, cinco deles tiveram sua expressão aumentada em no mínimo, duas vezes em, pelo menos, duas concentrações diferentes, independentemente do tempo de incubação, ou nas mesmas concentrações em tempos diferentes, como os que codificam para a proteína de choque térmico a1a (Hspa1a), glutationa peroxidase 6 (Gpx6), dual oxidase 1 (Duox1), heme oxigenase 1(Hmox1) e estearoil-CoA desaturase 1 (Scd1). Esses genes, juntamente com a peroxirredoxina 4 (Prdx4), desempenham importante papel na fisiologia da célula pancreática e/ou DG. A expressão desses genes também foi estudada na pré-incubação das células RINm5F com as vitaminas E e C. Tais antioxidantes, de forma geral, foram capazes de aumentar a expressão de Hmox1 e Prdx4, genes com funções antioxidantes, e de diminuir de Scd1, um gene com função pró- oxidante. Ao nível citoplasmático, verificou-se que as quantidades das proteínas Hmox1 e Prdx4 também foram moduladas pela da PG e/ou vitamina E e C. Os resultados sugerem que esses antioxidantes apresentam importante papel na proteção da células RINm5F contra o dano oxidativo induzido pela PG. Desta forma, os resultados obtidos nesse projeto, em conjunto, devem colaborar para melhor compreensão da patogênese do DG, abrindo novas perspectivas não só para elucidação do mecanismo molecular envolvido na ação da PG sobre células pancreáticas e sua relação com o DG, mas para o desenvolvimento de estratégias de prevenção e tratamento dessa doença baseadas na terapia com antioxidantes / Gestational diabetes (GD) is a condition defined as carbohydrate intolerance and hyperglycemia, beginning in the second trimester of pregnancy. Studies developed by our group have shown that progesterone (PG) is able to cause pancreatic cells death, by a mechanism dependent on the generation of free radicals, which could contribute to the development of GD. The aim of this work was to study the effect of PG, in the presence or absence of antioxidants, on the expression of genes related to oxidative stress and oxidant defense in pancreatic cells of the RINm5F lineage. Cells were incubated with 0.1, 1.0 and 100 µM PG for 6 or 24 h, in the presence or absence of vitamin E and C antioxidants. PG did not cause loss of membrane integrity of RINm5F cells, however, it promoted DNA fragmentation in approximately 40% of the RINm5F and MCF-7 cells (positive control), whereas vitamin E and C antioxidants reduced such fragmentation. From the RNA extraction and cDNA synthesis was investigated the expression of 84 genes involved in oxidative stress and antioxidant defense. Among of 84 investigated genes, five of them had their expression increased, in the minimum 2-fold in, at least, two different concentrations independent of incubation time (6 or 24 h), or at the same concentrations at different times, such as those that encoding for heat shock protein a1a (Hspa1a), glutathione peroxidase 6 (Gpx6), dual oxidase 1 (Duox1), heme oxygenase 1 (Hmox1) and stearoyl-CoA denaturase 1 (Scd1). These genes, together with the peroxiredoxin 4 (Prdx4), play an important role in pancreatic cell physiology and/or DG. The gene expression was also studied in the preincubation of RINm5F cells with vitamin E and C. These antioxidants were generally able to increase the Hmox1 and Prdx4 expression, genes with antioxidant functions, and decrease the Scd1 expression, a gene with pro-oxidant function. At the cytoplasmic level, it was found that the amounts of Hmox1 and Prdx4 proteins were also modulated by PG and / or vitamin E and C. The results suggest that these antioxidants play an important role in the RINm5F protection cells against the oxidative damage induced by PG. Thus, the results obtained in this project, together, should contribute to a better understanding of the pathogenesis of DG, opening new perspectives not only to elucidate the molecular mechanism involved in the action of PG on pancreatic cells and its relationship with DG, but for the development of strategies for the prevention and treatment of this disease based on antioxidant therapy
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Modulação do estado redox em ilhotas pancreáticas e sua implicação na secreção de insulina. / Redox modulation in pancreatic islets and its implication for insulin secretion.Oliveira, Eduardo Rebelato Lopes de 24 June 2010 (has links)
O efeito de alterações no estado de óxido-redução (redox), tanto pelo aumento no estado oxidativo quanto pelo aumento no estado redutor, foi avaliado sobre a funcionalidade de ilhotas pancreáticas, através da análise da secreção de insulina estimulada pela glicose (GSIS), metabolismo da glicose e oscilações intracelulares de cálcio. O aumento no estado oxidativo inibiu a funcionalidade da célula pancreática. Entretanto, diminuição no estado oxidativo pela adição de antioxidantes exerceu efeito dual sobre a funcionalidade da célula <font face=\"Symbol\">β pancreática, na qual pequenas alterações no estado redox estimularam a GSIS, enquanto alterações maiores suprimiram este efeito positivo. Adicionalmente, o conteúdo das espécies reativas de oxigênio (EROs) foi modulado por mudanças na concentração de glicose. Agudamente, o aumento na concentração de glicose suprimiu o conteúdo de EROs, que pôde ser correlacionada com o aumento na atividade da via de formação de NADPH, a via das pentoses-fosfato. Sob estes aspectos, alterações no estado redox podem ser parte do processo da GSIS. / The effect of changes in the oxidation/reduction (redox) state over pancreatic islet function was analyzed by shifts toward oxidative or reducing environments. Pancreatic cell function was analyzed by glucose-stimulated insulin secretion (GSIS), glucose metabolism and intracellular calcium oscillations. Redox modulation favoring the oxidative state inhibited pancreatic cell function. However, the suppression of the oxidative state by antioxidant treatment exerted a dual effect on pancreatic <font face=\"Symbol\">β cell function, where small changes were positively correlated with an increase in insulin secretion, while higher changes suppressed GSIS. Additionally, the reactive oxygen species (ROS) content was modulated by changes in glucose concentration. Increasing concentrations of glucose acutely suppressed ROS content, what was correlated with the activation of the NADPH source, the pentose-phosphate pathway. Thus, the intracellular adjustment of ROS content may be part of the insulin secretion mechanism in response to glucose.
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Efeito da progesterona na expressão de genes envolvidos no estresse oxidativo e defesa antioxidante em células beta pancreáticas: uma abordagem in vitro para o estudo do diabetes gestacional / Progesterone effect on the genes expression involved on oxidative stress and antioxidant defense in pancreatic beta cells: an in vitro approach to the study of gestational diabetesNathalia Ruder Borçari 16 March 2018 (has links)
O diabetes gestacional (DG) é uma condição definida como intolerância a carboidratos e hiperglicemia, com início no segundo trimestre da gravidez. Trabalhos desenvolvidos por nosso grupo mostraram que a progesterona (PG) é capaz de causar a morte de células pancreáticas, por um mecanismo dependente da geração de radicais livres, o que poderia contribuir para o desenvolvimento do DG. O objetivo desse trabalho foi estudar o efeito da PG, na presença ou não de antioxidantes, na expressão de genes relacionados ao estresse oxidativo e na defesa oxidante em células pancreáticas da linhagem RINm5F. As células foram incubadas com PG 0,1, 1,0 e 100 µM por 6 ou 24 h, na presença ou não dos antioxidantes vitamina E e C. Após a incubação, foram realizados ensaios de viabilidade celular e fragmentação do DNA. A PG, não causou perda da integridade da membrana das células RINm5F, porém, ela promoveu fragmentação do DNA em, aproximadamente, 40% das células RINm5F e MCF-7 (controle positivo), enquanto que os antioxidantes vitamina E e C reduziram tal fragmentação. A partir da extração do RNA e síntese de cDNA foi investigada a expressão de 84 genes envolvidos no estresse oxidativo e defesa antioxidante. Dos 84 genes, cinco deles tiveram sua expressão aumentada em no mínimo, duas vezes em, pelo menos, duas concentrações diferentes, independentemente do tempo de incubação, ou nas mesmas concentrações em tempos diferentes, como os que codificam para a proteína de choque térmico a1a (Hspa1a), glutationa peroxidase 6 (Gpx6), dual oxidase 1 (Duox1), heme oxigenase 1(Hmox1) e estearoil-CoA desaturase 1 (Scd1). Esses genes, juntamente com a peroxirredoxina 4 (Prdx4), desempenham importante papel na fisiologia da célula pancreática e/ou DG. A expressão desses genes também foi estudada na pré-incubação das células RINm5F com as vitaminas E e C. Tais antioxidantes, de forma geral, foram capazes de aumentar a expressão de Hmox1 e Prdx4, genes com funções antioxidantes, e de diminuir de Scd1, um gene com função pró- oxidante. Ao nível citoplasmático, verificou-se que as quantidades das proteínas Hmox1 e Prdx4 também foram moduladas pela da PG e/ou vitamina E e C. Os resultados sugerem que esses antioxidantes apresentam importante papel na proteção da células RINm5F contra o dano oxidativo induzido pela PG. Desta forma, os resultados obtidos nesse projeto, em conjunto, devem colaborar para melhor compreensão da patogênese do DG, abrindo novas perspectivas não só para elucidação do mecanismo molecular envolvido na ação da PG sobre células pancreáticas e sua relação com o DG, mas para o desenvolvimento de estratégias de prevenção e tratamento dessa doença baseadas na terapia com antioxidantes / Gestational diabetes (GD) is a condition defined as carbohydrate intolerance and hyperglycemia, beginning in the second trimester of pregnancy. Studies developed by our group have shown that progesterone (PG) is able to cause pancreatic cells death, by a mechanism dependent on the generation of free radicals, which could contribute to the development of GD. The aim of this work was to study the effect of PG, in the presence or absence of antioxidants, on the expression of genes related to oxidative stress and oxidant defense in pancreatic cells of the RINm5F lineage. Cells were incubated with 0.1, 1.0 and 100 µM PG for 6 or 24 h, in the presence or absence of vitamin E and C antioxidants. PG did not cause loss of membrane integrity of RINm5F cells, however, it promoted DNA fragmentation in approximately 40% of the RINm5F and MCF-7 cells (positive control), whereas vitamin E and C antioxidants reduced such fragmentation. From the RNA extraction and cDNA synthesis was investigated the expression of 84 genes involved in oxidative stress and antioxidant defense. Among of 84 investigated genes, five of them had their expression increased, in the minimum 2-fold in, at least, two different concentrations independent of incubation time (6 or 24 h), or at the same concentrations at different times, such as those that encoding for heat shock protein a1a (Hspa1a), glutathione peroxidase 6 (Gpx6), dual oxidase 1 (Duox1), heme oxygenase 1 (Hmox1) and stearoyl-CoA denaturase 1 (Scd1). These genes, together with the peroxiredoxin 4 (Prdx4), play an important role in pancreatic cell physiology and/or DG. The gene expression was also studied in the preincubation of RINm5F cells with vitamin E and C. These antioxidants were generally able to increase the Hmox1 and Prdx4 expression, genes with antioxidant functions, and decrease the Scd1 expression, a gene with pro-oxidant function. At the cytoplasmic level, it was found that the amounts of Hmox1 and Prdx4 proteins were also modulated by PG and / or vitamin E and C. The results suggest that these antioxidants play an important role in the RINm5F protection cells against the oxidative damage induced by PG. Thus, the results obtained in this project, together, should contribute to a better understanding of the pathogenesis of DG, opening new perspectives not only to elucidate the molecular mechanism involved in the action of PG on pancreatic cells and its relationship with DG, but for the development of strategies for the prevention and treatment of this disease based on antioxidant therapy
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Modulação do estado redox em ilhotas pancreáticas e sua implicação na secreção de insulina. / Redox modulation in pancreatic islets and its implication for insulin secretion.Eduardo Rebelato Lopes de Oliveira 24 June 2010 (has links)
O efeito de alterações no estado de óxido-redução (redox), tanto pelo aumento no estado oxidativo quanto pelo aumento no estado redutor, foi avaliado sobre a funcionalidade de ilhotas pancreáticas, através da análise da secreção de insulina estimulada pela glicose (GSIS), metabolismo da glicose e oscilações intracelulares de cálcio. O aumento no estado oxidativo inibiu a funcionalidade da célula pancreática. Entretanto, diminuição no estado oxidativo pela adição de antioxidantes exerceu efeito dual sobre a funcionalidade da célula <font face=\"Symbol\">β pancreática, na qual pequenas alterações no estado redox estimularam a GSIS, enquanto alterações maiores suprimiram este efeito positivo. Adicionalmente, o conteúdo das espécies reativas de oxigênio (EROs) foi modulado por mudanças na concentração de glicose. Agudamente, o aumento na concentração de glicose suprimiu o conteúdo de EROs, que pôde ser correlacionada com o aumento na atividade da via de formação de NADPH, a via das pentoses-fosfato. Sob estes aspectos, alterações no estado redox podem ser parte do processo da GSIS. / The effect of changes in the oxidation/reduction (redox) state over pancreatic islet function was analyzed by shifts toward oxidative or reducing environments. Pancreatic cell function was analyzed by glucose-stimulated insulin secretion (GSIS), glucose metabolism and intracellular calcium oscillations. Redox modulation favoring the oxidative state inhibited pancreatic cell function. However, the suppression of the oxidative state by antioxidant treatment exerted a dual effect on pancreatic <font face=\"Symbol\">β cell function, where small changes were positively correlated with an increase in insulin secretion, while higher changes suppressed GSIS. Additionally, the reactive oxygen species (ROS) content was modulated by changes in glucose concentration. Increasing concentrations of glucose acutely suppressed ROS content, what was correlated with the activation of the NADPH source, the pentose-phosphate pathway. Thus, the intracellular adjustment of ROS content may be part of the insulin secretion mechanism in response to glucose.
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Metabolismo oxidativo e estado redox tecidual dependente da função e do estado nutricional de operárias de Apis mellifera L. / Oxidative metabolism and redox state dependent on the function and nutritional status of Apis mellifera L. workersCervoni, Mário Sergio 03 December 2018 (has links)
As operárias de Apis mellifera realizam diferentes tarefas de acordo com a sua idade (polietismo etário), sendo que operárias jovens cuidam da cria e quando mais velhas forrageiam. Entretanto, tal transição não segue uma cronologia fixa, mas se ajusta às necessidades da colônia, especialmente as condições nutricionais, tanto da colônia quanto dos indivíduos. Nesse sentido, abordamos a questão de como o metabolismo oxidativo no corpo gorduroso das operárias, i.e., o centro do metabolismo intermediário destes insetos, está relacionado com alterações da função das operárias na colônia e como o mesmo responde a um estresse nutritivo imposto individualmente em duas fases, na fase larval e na fase adulta. Como métodos para avaliar a atividade mitocondrial e o estado redox das células do corpo gorduroso utilizamos um sistema de respirometria de alta resolução para medir o consumo de O2, e realizamos ensaios bioquímicos para quantificar a geração de espécies reativas de oxigênio (EROs), os níveis de óxido nítrico, o número de unidades mitocondriais, e eventuais danos oxidativos resultantes. Ademais, por meio de PCR quantitativa medimos a expressão relativa de genes ligados à biogênese mitocondrial, ao sistema antioxidante e à via de sinalização por hipóxia. Na comparação destes parâmetros entre operárias nutridoras e forrageiras avaliamos separadamente os três principais compartimentos do corpo (cabeça, tórax e abdômen) uma vez que esses estão diferencialmente relacionados a tais funções. Para os tecidos da cabeça observamos que as amostras de nutridoras apresentaram maior consumo de O2, associado a uma maior produção de EROs e expressão elevada dos genes da via de hipóxia, enquanto forrageiras apresentaram maiores quantidades de transcritos dos genes do sistema antioxidantes e menores níveis de danos oxidativos. Para os tecidos do tórax observamos nas forrageiras uma maior capacidade de produção de ATP, acompanhada de uma elevada expressão de genes codificadores de enzimas do sistema antioxidante e menores níveis de danos oxidativos. Com relação aos tecidos abdominais, as abelhas nutridoras apresentaram maior atividade mitocondrial, enquanto as amostras de forrageiras apresentaram maior número de unidades mitocondriais, elevados níveis EROs e também uma expressão elevada dos genes do sistema antioxidante e da via de hipóxia. Assim, os dados revelaram uma clara mudança na atividade mitocondrial e nos padrões redox teciduais associados a esta transição de polietismo etário. Também notamos diferenças nestes parâmetros para cada compartimento do corpo analisado, refletindo uma demanda energética diferencial em cada tecido. A segunda parte do projeto teve como objetivo avaliar os mesmos parâmetros redox em uma situação de restrição alimentar em três situações distintas. O primeiro grupo experimental foi constituído de larvas que sofreram restrição calórica por umperíodo de 10 horas. O segundo grupo foi composto por abelhas recém emergidas que sofreram ou não tal restrição calórica no período larval. O terceiro grupo consistiu de abelhas que sofreram ou não restrição calórica no período larval, e após emergirem foram mantidas em caixas até atingirem a idade de 7 dias, quando foram submetidos novamente a uma restrição calórica. Para o primeiro grupo, as larvas, verificamos que após o período de restrição calórica os genes relacionados com a biogênese mitocondrial e o sistema antioxidante apresentaram níveis de expressão menores comparadas com larvas controle. Observamos também que larvas que sofreram restrição calórica apresentaram menor consumo de O2 e menores níveis de EROs. Para o segundo grupo, as abelhas recém emergidas, não observamos nenhuma diferença na expressão de genes mitocondriais e do sistema antioxidante entre as que sofreram ou não restrição calórica na fase larval, demostrando uma recuperação nestes parâmetros após o período de metamorfose. No terceiro grupo, as abelhas de 7 dias foram submetidas a uma nova restrição calórica para observar se indivíduos que passaram por a situação de estresse no período larval apresentariam uma resposta mais imediata a um estresse nutricional na fase adulta. Os resultados do terceiro grupo revelaram que abelhas que haviam sido expostas a uma situação prévia de restrição calórica, apresentaram uma redução dos transcritos de genes ligados a biogênese mitocondrial e do sistema antioxidante quando comparados ao grupo que sofreu restrição calórica apenas na fase adulta. Em conjunto nossos dados sugerem que a restrição calórica é capaz de diminuir o metabolismo oxidativo e que existe uma resposta aparentemente adaptativa em indivíduos adultos que passaram por essa situação previamente durante o desenvolvimento larval. Assim, esses resultados podem servir para direcionar estudos futuros sobre a relação entre restrição calórica, metabolismo oxidativo e longevidade nesses insetos sociais. / Apis mellifera workers perform different tasks according to their age (age polyethism), where young workers care for the brood and older ones become foragers. However, this a transition does not follow a fixed chronology, but is fitted to the needs of the colony, especially the nutritional conditions of both, the colony and the individual bee. In this sense, we address the question of how oxidative metabolism in the fat body of the workers, e.g., the center of the intermediary metabolism of these insects, is related to changes in the function of the workers in the colony, and how these parameters responds to a nutritional stress imposed individually in two stages, in the larval and adult phase. For evaluating mitochondrial activity and the redox status of fat body cells we used a high resolution respirometry system to measure O2 consumption, and we performed biochemical assays to measure the generation of reactive oxygen species (ROS), levels of nitric oxide, the number of mitochondrial units, and eventual oxidative damages. Furthermore, using quantitative PCR, we measured the relative expression of genes linked to mitochondrial biogenesis, to the antioxidant system, and to the hypoxia signaling pathway. In the comparison of these parameters between nurse and forager workers, we evaluated separately the three main body compartments (head, thorax and abdomen), since these are differentially related to these functions. For the head tissues, we observed that nurses showed higher O2 consumption, associated with higher ROS production and elevated expression of hypoxia pathway genes, while foragers presented higher amounts of transcripts of the antioxidant system genes and lower levels of oxidative damages. For the thorax tissues we found in the foragers a greater capacity of ATP production, accompanied by a higher expression of genes encoding enzymes of the antioxidant system and lower levels of oxidative damage. With respect to the abdominal tissues, nurse bees presented higher mitochondrial activity, while foragers had a higher number of mitochondrial units, elevated ROS levels, and also a higher expression of genes related to the antioxidant system and hypoxia pathway. Thus, these data revealed a clear change in mitochondrial activity and redox tissue patterns associated with this transition of age polyethism. We also noticed differences in these parameters for each of the analyzed body compartment, reflecting a differential energy demand in each tissue. The second part of the project aimed to evaluate the same redox parameters in a food restriction condition in three distinct situations. The first experimental group consisted of larvae that experienced caloric restriction for a 10 hour period. The second group consisted of newly emerged bees that had or not experienced such a caloric restriction in the larval period. The third group consisted of bees that had experienced or not caloric restriction during the larval period, and after emergence were kept in boxes until reaching 7 days old, when they were resubmitted to another caloricrestriction. For the first group, the larvae, we found that after the period of caloric restriction, genes related to mitochondrial biogenesis and the antioxidant system presented lower levels of expression compared to control larvae. We also observed that larvae that had experienced caloric restriction presented lower O2 consumption and lower ROS levels. For the second group, newly emerged bees, we did not observe any differences in the expression of mitochondrial genes and the antioxidant system among those individuals that had experienced or not caloric restriction in the larval phase, indicating a recovery in these parameters after the period of metamorphosis. In the third group, the 7-day-old bees had experienced a new caloric restriction to see whether individuals that had been in a stressful situation during larval period would respond more readily to nutritional stress in adulthood. The results for this group showed that bees that had been exposed to a previous caloric restriction presented a reduction in the transcript levels of genes related to mitochondrial biogenesis and the antioxidant system when compared to the group that experienced caloric restriction only in adulthood. Taken together, our data suggest that caloric restriction is able to diminish the oxidative metabolism, and that there is a seemingly adaptive response in adult individuals that had previously experienced this situation during larval development. Thus, these results can serve to direct future studies on the relationship between caloric restriction, oxidative metabolism and longevity in these social insects.
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Efeitos biol?gicos da associa??o da ingest?o da polpa de pequi (Caryocar brasiliense) ao exerc?cio f?sico aer?bio regular em ratosMoreno, Lauane Gomes 06 June 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014 / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do estado de Minas Gerais (FAPEMIG) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (Capes) / Dado o crescente n?mero de doen?as cr?nicas n?o transmiss?veis (DCNT) que afetam a sa?de e a economia dos pa?ses, alternativas que visem ? diminui??o dos fatores de risco para essas doen?as s?o imprescind?veis. A ado??o de uma dieta equilibrada, que inclua alimentos com potencialidades funcionais, associada ? pr?tica de atividade f?sica regular s?o alternativas atualmente preconizadas. Dentre os alimentos com potencialidades funcionais est? o pequi (Caryocar brasiliense), muito utilizado no Brasil para fins aliment?cios, terap?uticos e cosm?ticos, e que apresenta como componentes majorit?rios lip?deos ricos em ?cidos graxos monoinsaturados, fibras e carotenoides. Estes componentes isoladamente, apresentam alguns efeitos semelhantes ao exerc?cio f?sico aer?bio sobre a redu??o de diversos fatores de risco para DCNT, de forma que associados podem fornecer efeitos potencializadores sobre a redu??o desses fatores de risco. Assim, este estudo teve como objetivo avaliar, em ratos, efeitos biol?gicos advindos da ingest?o da polpa de pequi associada ? pr?tica de exerc?cio f?sico aer?bio regular (EFAR), especificamente sobre vari?veis relacionadas ao crescimento, par?metros cardiovasculares, do metabolismo glic?dico e lip?dico, sobre a histomorfometria duodenal e o estado redox celular. O protocolo experimental consistiu de quatro grupos (n=8) de ratos Wistar machos: CS - animais que receberam ra??o; CT - receberam ra??o e EFAR; PS - receberam ra??o suplementada com polpa de pequi (3,26/100g = +50% do conte?do lip?dico da ra??o) e PT - receberam ra??o suplementada com polpa de pequi e EFAR. O EFAR foi realizado em piscina, em intensidades e cargas progressivas, e a dieta fornecida ad libitum durante quinze semanas. A ingest?o alimentar e o peso corporal foram monitorados durante o per?odo experimental para os c?lculos da ingest?o alimentar e cal?rica, do ganho de peso e dos coeficientes de efici?ncia alimentar (CEA) e energ?tica (CEE). As fezes foram coletadas nas ?ltimas 72 horas do experimento. A press?o arterial sist?lica (PAS) e a frequ?ncia card?aca (FC) foram aferidas no in?cio e na ?ltima semana do experimento. No ?ltimo dia do protocolo, os animais foram eutanasiados e foram determinados: (a) o comprimento da t?bia esquerda; (b) o peso absoluto e relativo do f?gado, p?ncreas e cora??o e da gordura das regi?es epididimal e retroperitoneal; (c) a concentra??o plasm?tica de colesterol total (COL), lipoprote?na de alta densidade (HDL), triglicer?deos (TG), glicose, insulina, o ?ndice HOMA-IR e o ?ndice aterog?nico; (d) a concentra??o hep?tica e fecal de COL e TG; (e) a umidade e o pH fecais; (f) a capacidade antioxidante total ? Ferring Reducing Antioxidant Power plasm?tica, e dos tecidos muscular (s?leo), hep?tico e card?aco; (g) os n?veis de peroxida??o lip?dica - Thiobarbituric acid reactive substances nos tecidos hep?tico, muscular e card?aco; (h) a atividade da enzima super?xido dismutase nos tecidos hep?tico e muscular; (i) a atividade da enzima catalase nos tecidos hep?tico, muscular e card?aco. Foram coletadas amostras de tecido duodenal para an?lises histomorfom?tricas. Observou-se que a associa??o da ingest?o da polpa de pequi ao EFAR n?o influenciou de maneira significativa no crescimento (ingest?o alimentar e cal?rica, peso corporal, CEA, CEE, peso de ?rg?os, comprimento da t?bia), na PAS e FC, na glicemia, na insulinemia ou no ?ndice HOMA-IR. Contudo, reduziu a deposi??o de gordura visceral (epididimal e retroperitoneal). Tamb?m n?o houve diferen?as entre os tratamentos para as concentra??es plasm?ticas de COL, HDL e TG. Contudo, a associa??o da ingest?o da polpa de pequi ao EFAR promoveu menor deposi??o hep?tica e maior excre??o fecal de lip?deos, al?m de preservar melhor a altura das vilosidades intestinais e promover aumento da profundidade das criptas. N?o houve impactos significativos dos tratamentos sobre as vari?veis relacionadas ao estado redox celular, somente a atividade da catalase foi aumentada pela associa??o entre EFAR e polpa de pequi no f?gado. Os efeitos fisiol?gicos advindos da ingest?o da polpa de pequi associada ao EFAR relacionados ao menor ac?mulo de lip?deos na regi?o visceral e f?gado, com a maior excre??o desses lip?deos, aumento da profundidade das criptas sem preju?zos ? estrutura do intestino e aumento da atividade antioxidante end?gena, bem como a aus?ncia de efeitos prejudiciais sobre as demais vari?veis analisadas, faz dessa associa??o uma poss?vel estrat?gia para redu??o do risco para DCNT e manuten??o da sa?de. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa Multic?ntrico de P?s-gradua??o em Ci?ncias Fisiol?gicas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2014 / ABSTRACT
Given the increasing number of chronic non-communicable diseases (NCDs) affecting health and economy of countries, alternatives on reducing risk factors for these diseases are urged. A balanced diet that includes foods with functional properties associated with regular physical exercise is currently recommended. Among foods with functional potential, is pequi (Caryocar brasiliense), wich is widely used in Brazil for food, cosmetic and therapeutic purposes. It has as its major components, lipids high in monounsaturated fatty acids, fiber and carotenoids. These components have some similar effects as aerobic exercise on the reduction of several risk factors for NCDs, turning its association into a potential strategy for fighting NCDs risk factors. Therefore, this study aimed to evaluate, in rats, biological effects from the intake of pequi pulp associated to regular aerobic exercise (RAE), specifically on growth-related, glucose and lipid metabolism and cardiovascular variables, on duodenal histomorphometry and cellular redox state. The experimental protocol consisted of four groups (n = 8 ) of male Wistar rats: CS - animals fed chow; CT - animals feed chow and RAE; PS - animals feed chow plus pequi pulp (3.26/100g = +50 % of the lipid content of chow) and PT - animals feed chow plus pequi pulp and RAE. The RAE was held in pool at intensities and progressive loadings, and the animals were fed ad libitum for fifteen weeks. Food intake and body weight were monitored throughout the experimental period for calculation of food and energy intakes, weight gain, feed (FE) and energy efficiencies (EE). Feces were collected in last 72 hours of the experiment. Tail systolic blood pressure (SBP) and heart rate (HR) were measured at the beginning and in the last week of the experiment. On the last day, the animals were euthanized; the abdominal and thoracic cavities were opened for sampling. It was determined: (a) The left tibia length; (b) the absolute and relative liver, pancreas and hearts weights and all the retroperitoneal and epididymal fat pads; (c) plasma concentrations of cholesterol (COL), high density lipoprotein (HDL), triglycerides (TG), glucose, insulin, HOMA-IR index and atherogenic index; (d) the liver and fecal concentrations of COL and TG; (e) fecal moisture and pH; (f) plasma, muscle (soleus), liver and heart total antioxidant capacity - Ferring Reducing Antioxidant Power (FRAP); (g) liver, muscle and heart levels of lipid peroxidation - Thiobarbituric acid reactive substances (TBARS); (h) liver and muscle activity of superoxide dismutase (SOD); (i) liver, muscle and heart activity of catalase (CAT). Duodenal tissue samples were collected for histomorphometric analyses. It was observed the intake of pequi pulp associated to RAE did not influence significantly animal?s growth (food and caloric intake, body weight, FE, EE, organ weights, tibia length), SBP and HR, plasma glucose and insulin, HOMA-IR and atherogenic indexes. However, this association reduced visceral fat pad weights. There were no differences among treatments for plasma COL, HDL and TG. However, the intake of pequi pulp associated to RAE led to lower hepatic deposition and increased fecal output of lipids, in addition to better preserve the intestinal villi height and to promote increased crypt depth. There were no significant effects regarding redox state of all variables, although CAT activity was increased in the liver of the animals fed pequi pulp plus RAE. The reduction of visceral fat and hepatic lipid deposition with increased excretion, the increased cell renewal without damaging the structure of the intestine, the increased endogenous antioxidant activity, and the absence of harmful effects on other variables, point out that the intake of pequi pulp associated to RAE is a possible strategy for reducing the risk of non-communicable diseases and for health maintenance.
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