Submitted by Ginamara Lima (ginaj@pucrs.br) on 2013-06-11T11:56:46Z No. of bitstreams: 1 448570.pdf: 1364329 bytes, checksum: 5593f748d6d81947aadd6c16a12bd266 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-06-11T11:56:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 448570.pdf: 1364329 bytes, checksum: 5593f748d6d81947aadd6c16a12bd266 (MD5) / A Endodontia tem como objetivo a prevenção e o tratamento das doenças da polpa e dos tecidos periapicais. Embora a manutenção da vitalidade pulpar seja de fundamental importância, tratamentos conservadores não são comumente indicados para dentes com polpa exposta por cárie. Nestas situações, o tratamento conservador costuma ser indicado somente para dentes jovens com ápice aberto. Para os demais casos indica-se o tratamento radical, a endodontia. A relutância em se realizar um tratamento conservador em um dente permanente com polpa exposta por cavidade profunda de cárie está na dificuldade de um diagnóstico preciso quanto à condição pulpar de inflamação reversível e irreversível e na falta de uma substância que possa fazer esse tecido retornar a homeostase. Neste sentido, o presente estudo avaliou histologicamente os efeitos do Emdogain® (EMD) e o seu veículo, propileno glicol alginato (PGA) em polpas dentárias infectadas de ratos. Para isto foram utilizados 24 molares inferiores de ratos Wistar machos com 8 semanas de idade. A câmara pulpar foi perfurada e as cavidades ficaram expostas à cavidade oral por um período de 24 h. Após, as superfícies pulpares foram capeadas utilizando Emdogain® (n=6) ou PGA (n=6) como controle, e em seguida foram restauradas com cimento de ionômero de vidro. Passados os tempos experimentais de 48 h e 30 dias, os animais foram eutanasiados e as mandíbulas foram dissecadas para avaliação histológica. Os resultados encontrados mostraram que não houve formação de barreira de tecido duro em nenhum dos grupos e tempos experimentais avaliados. No período experimental de 30 dias, o grupo EMD apresentou reduzido processo inflamatório, este sendo limitado ao sítio de exposição, e alterações degenerativas em toda a extensão do canal radicular foram predominantes neste grupo. Sendo assim, estes resultados sugerem que o EMD não foi efetivo em promover adequado reparo tecidual em polpas infectadas de ratos. / Endodontic aims to prevent and treat diseases of the pulp and periapical tissues. Although the maintenance of pulp vitality is of paramount importance, conservative treatments are not commonly recommended for teeth with pulp exposure by caries. In these situations, conservative treatment is usually indicated for young teeth with open apex. For all the other cases a radical treatment is indicated, the root canal treatment. The reluctance in performing a conservative treatment in a permanent tooth with exposed pulp by caries is due to the difficulty of an accurate diagnosis, as to the condition of pulp inflammation (reversible or irreversible) and in the absence of a compound that promote this tissue to return to homeostasis. Thus, the present study evaluated histologically the effects of Emdogain ® (EMD) and its vehicle, propylene glycol alginate (PGA), in rat infected dental pulp. For this, the pulp chambers of the right lower molars of 24 male Wistar rats were perforated and the cavities were left open to the oral environment for 24 h. Then, the exposed pulp surfaces were direct capped with either EMD or its carrier PGA (n=6), and the cavities were restored with glass-ionomer cement. After the experimental period of 48 hours and 30 days, the animals were euthanized and the dissected mandibles were histologically evaluated. The results showed that a hard tissue barrier was absent in the EMD and PGA groups in the two evaluation periods. At 48 h the groups exhibited similar pulp behavior. At 30 days, the group capped with EMD showed a reduced inflammatory process limited to the exposed area, and degenerative changes on the pulp tissue throughout the length of the root canals. Thus, our results suggest that EMD was not effective on the providing proper wound healing of infected rat molar pulp.

Submitted by Ginamara Lima (ginaj@pucrs.br) on 2013-06-19T13:08:40Z No. of bitstreams: 1 434616.pdf: 1582052 bytes, checksum: cc637f53364c5652d47a360c1e06850b (MD5) / Made available in DSpace on 2013-06-19T13:08:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 434616.pdf: 1582052 bytes, checksum: cc637f53364c5652d47a360c1e06850b (MD5) / Diferentes abordagens têm sido advogadas para implementação do tratamento conservador do tecido pulpar, usualmente empregando o controle da inflamação e a aplicação de compostos com potencial terapêutico sobre a polpa. A Resolvina E1 (RvE1) é um mediador lipídico capaz de regular rotas inflamatórias que não envolvem o bloqueio de intermediários enzimáticos. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito tópico da RvE1 sobre polpas dentais expostas ao meio oral. Para esta finalidade, 42 ratos machos Wistar (n = 6 por grupo/período), tiveram as polpas dos primeiros molares inferiores direitos acessadas e deixadas expostas ao meio oral por 24 horas. Após este período, medicação tópica com etanol 0.1% (veículo da RvE1), RvE1 ou corticosteróide foi aplicada sobre o tecido pulpar e os dentes foram selados com amálgama de prata. Os efeitos dos protocolos testados foram avaliados histologicamente após 24 e 72 horas. Dentes intactos foram utilizados como referência para análise das alterações verificadas nos grupos experimentais. RvE1 induziu significativa redução e contenção da inflamação com danos pulpares menos extensos em comparação ao etanol 0.1% ou corticosteróide (P<0.05). Nenhum dos fármacos testados promoveu características pulpares idênticas às observadas nos dentes intactos (P<0.01). Os resultados apresentados revelaram a função protetora da RvE1 na inflamação da polpa, sugerindo que ela possa ser candidata para uma nova estratégia terapêutica para a preservação de sua vitalidade. / Different approaches have been advocated for implementation of conservative treatment of the pulp tissue, usually employing inflammation control and the application of compounds with therapeutic potential on the pulp. The Resolvin E1 (RvE1) is a lipid mediator capable of regulating inflammatory routes that do not involve the blockage of enzymatic intermediates. The aim of this study was to evaluate the effect of the topical application of RvE1 on dental pulps exposed to the oral environment. To this end, 42 male Wistar rats (n=6 per group/period) had the pulps of the right mandibular first molars assessed and then left exposed to the oral environment for 24 hours. After this period, topical medication either with 0.1% ethanol (vehicle of RvE1), RvE1 or a corticosteroid was applied onto the pulp tissue, and the teeth were then sealed with silver amalgam. The effects of the tested protocols were assessed by histology after 24 and 72 hours. Untouched teeth were used as reference for relative analysis and grading of the alterations observed in test groups. RvE1 induced significant reduction and containment of pulp inflammation with less extensive damage compared to either 0.1% ethanol or corticosteroid (P<0.05). Within the conditions tested none of the tested drugs promoted identical pulp tissue features compared to the observed in untouched teeth (P<0.01). The results presented herein have uncovered protective roles for RvE1 in pulp inflammation, suggesting that it may be a candidate for a novel therapeutic strategy for preservation of its vitality.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:52:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000391820-Texto+Completo-0.pdf: 9013093 bytes, checksum: 13aec1de192575d351019f57237bbf3e (MD5) Previous issue date: 2007 / This research involved two groups of Education of young and adult students (EJA) of nocturnal education, in a public school. The activities in classroom had been developed as a unit of thematic study, in the ecology part of the Biology. The main objective was to evaluate the knowledge and previous ideas of the pupils regarding subjects as preservation of species threatened of extinguishing and ethical behavior wit the animals, as well as its modification in elapsing of the research. As instruments of acquisition of data regarding the opinions of the students, thematic questionnaires had been applied, with real situations, in which the pupils had been expressed their opinions on the subjects. The questionnaires had been applied in the initial and final phase of the project. In the course of the development of the activities, the pupils had read and argued selected texts and had later debated lesson, developing writings on the chosen subjects. For analysis of the collected data, a qualitative boarding was used, by means of discursive textual analysis, according to Moraes (2003). Using the analysis of the data, it can be noticed that certain attitudes are unacceptable, of the ethical point of view, for the pupils, as in serious cases of animal maltreatment. The subjects most controversial, as the cattle slaughter in frigorific, had greater division of opinions between the pupils. The thematic ones related to the ethical behaviors with animals, as the vivisection in university and centers of research and the cattle slaughter in frigorific, are acceptable for many of the students, since that the ethical norms for these practical are taken care.One observed that, even so the majority of the students express their preoccupation with the welfare dos animals, few have practical attitudes the respect, and, when they make it, generally they are the animals of its restricted relation. The results had shown that, with the study and debate of these subjects in class room, that are a problematic one lived deeply for the community, it is possible to promote a bigger reflection about of these questions. As result, development of the capacity of expression of the pupils was evidenced the respect of these subjects, with evolution in their writings arguments, although in the practical one has even not been evidenced changes in its action. / Esta pesquisa envolveu duas turmas de Educação de Jovens e Adultos (EJA) do Ensino Médio noturno, em uma escola da rede pública estadual. As atividades em sala de aula foram desenvolvidas como uma unidade de estudo temático, na parte de ecologia, na disciplina de Biologia. O objetivo principal foi avaliar os conhecimentos e idéias prévias dos alunos a respeito de temas como preservação de espécies ameaçadas de extinção e condutas éticas relativas aos animais, acompanhando possíveis modificações em suas idéias e condutas no decorrer da pesquisa. Como instrumentos de coleta de dados a respeito das opiniões dos educandos, foram aplicados questionários temáticos, com situações reais, nas quais os alunos posicionaram-se sobre os temas. Os questionários foram aplicados na fase inicial e final do projeto. Ao longo do desenvolvimento das atividades, os alunos leram e discutiram textos selecionados e debateram em aula, desenvolvendo posteriormente redações sobre os temas escolhidos, que foram também analisadas. Para análise dos dados coletados, foi utilizada uma abordagem qualitativa, por meio de análise textual discursiva, conforme proposto por Moraes (2003).Por meio da análise dos dados, pode-se notar que certas atitudes são inaceitáveis, do ponto de vista ético, para os alunos, como em casos graves de maus tratos a animais. Os temas mais polêmicos, como os abates em frigoríficos, tiveram maior divisão de opiniões entre os alunos. As temáticas relacionadas às condutas éticas com animais, como a vivissecção em universidades e centros de pesquisa e os abates em frigoríficos, são aceitáveis para muitos dos educandos, desde que sejam atendidas as normas éticas básicas para estas práticas. Notou-se que, embora a maioria dos alunos expresse preocupação relacionada ao bem-estar dos animais, poucos têm atitudes práticas a respeito, e, quando o fazem, geralmente são referentes a animais de sua relação restrita. Os resultados mostraram que, com a discussão desses temas, que fazem parte de uma problemática vivenciada pela comunidade, é possível promover uma maior reflexão acerca dessas questões. Como resultado, constatou-se desenvolvimento da capacidade de expressão dos alunos a respeito desses temas, com evolução na sua argumentação escrita, embora na prática não tenham sido constatadas mudanças em suas ações.

Orientador: Carlos Roberto Padovani / Coorientador: Antonio Carlos Cicogna / Banca: Antonio Sergio Ferraudo / Banca: Silvio Assis de Oliveira Junior / Resumo: Devido à falta de conhecimento estatístico, muitos pesquisadores utilizam métodos empíricos ou subjetivos para a tomada de decisão, ignorando o processo de casualização e, consequentemente, influenciando seus resultados, nomeadamente no processo de homogeneização de amostras, imprescindível para a randomização em pesquisas que envolvem animais como unidade experimental. esse processo, tem-se o hábito errôneo de fazê-lo de maneira fragmentada ou intencional, utilizando-se de apenas um parâmetro conveniente para classificar o grupo como homogêneo. Fato que, além de resultar numa homogeneização viesada e inadequada, favorece a possibilidade de descartar animais por um simples valor espúrio do que por semelhança ou dessemelhança biológica. Tendo em vista essa problemática, este trabalho sugere um critério estatístico multivariado elaborado com a finalidade de rescindir o paradigma biológico que avalia o animal (unidade experimental) de maneira fragmentada. Nesse critério, considera-se a situação biológica do animal como um todo, já que o organismo reage de maneira conjunta a qualquer intervenção ou tratamento, ou seja, analisam-se conjuntamente todos os parâmetros do animal, pois estes são correlacionados, e a melhor forma de entender o comportamento animal está expressa em um conjunto de informações numéricas que represente suas características biológicas. Esse modelo foi aplicado a um conjunto de dados de animais induzidos à estenose aórtica que possibilitou a identificação de seis espúrios ao grupo. Sua importante contribuição explica-se pelo melho!amento na qualidade de homogeneização e por assegurar com máxima acurácia a inclusão de animais semelhantes e pequena frequência de descartes, motivando maximizar o lote homogêneo para posterior submissão ao delineamento experimental por processo simples de casualização dos tratamentos / Abstract: Due to lack of statistical knowledge, many researchers use empirical or subjective methods to make a decision, ignoring the randomization process and thus influencing its results, particularly in the process of samples homogenization, essential for randomization in research involving animals as experimental unit. In this process, researchers have the erroneous habit of doing it in a fragmented or intentional manner, using only one convenient parameter to classify the group as homogeneous. Fact that besides resulting in inadequate homogenization, favors the possibility of discarding animals by simple spurious value than by bialogical similarity or dissimilarity. Considering this problem, this work suggests a multivariate statistical criterion of high accuracy developed in order to rescind the biological paradigm that evaluates the animal (experimental unit) in a fragmented manner. In this criterion, it is considered the animal biological condition as a whole, since the body reacts conjointly to any intervention ar treatment, in other words, all the parameters of the animal are analyzed together, as they are correlated, and the best way to understand animal behavior is expressed in a set of numerical information that faithfully represents its biological characteristics. This model was applied to a data set of animais with aortic stenosis and allowed the identification of six animais spurious to the group. It's remarkable contribution is explained by the improvement in the quality of homogenization and by ensuring with maximum accuracy the inclusion of similar animais and small frequency discards, motivating to maximize the homogeneous batch for subsequent submission to the experimental design by simple randomization process of the treatments / Mestre

Orientador: Natália Soares Janzantti / Banca: Agdamar Affini Suffredini / Banca: Andrea Carla da Silva Barretto / Banca: Ellen Silva Lago Vanzela / Banca: Tereza Cristina Bolzan Quaioti / Resumo: O Bioma Amazônia apresenta uma grande diversidade frutífera, aproximadamente 200 espécies, destas majoritariamente prevalencem a escassez de dados técnicos científicos principalmente de caracterização físico-química, potencial nutricional e de benefícios à saúde. Os objetivos deste trabalho foram avaliar as características físico-químicas das polpas das frutas de araçá-boi (Eugenia stipitata), abiu (Pouteria caimito) grande, araticum (Annona crassiflora), biri-biri (Averrhoa bilimbi L.) e mangostão amarelo (Garcinia xanthochymus), obtidas em diferentes safras, e os efeitos do consumo destas polpas sobre os parâmetros hematológicos, metabólicos, de toxicidade hepática e renal em ratos. As polpas das frutas foram procedentes da cidade de Cacoal, Rondônia (Amazônia Ocidental). Os parâmetros físico-químicos avaliados foram sólidos solúveis, acidez total titulável, pH, açúcares redutores, açúcares não redutores e totais, ácido ascórbico, umidade, cinzas, lipídios, proteína, cor, compostos fenólicos totais e atividade antioxidante total. Nos ensaios biológicos foram utilizados 60 ratos machos Wistar albinos, adultos, que receberam doses diárias de 0,3214 mL de polpa/100 g de massa corpóreo durante 30 dias (efeito sub-crônico) por intubação gástrica e após este período realizadas as análises de hematócrito total, leucócitos totais, glicemia, triacilglicerois e colesterol total, transaminase glutâmica oxalacética citoplasmática (TGO) e transaminase glutâmica pirúvica citoplasmática... / Abstract: The Amazon Biome shows a great fructiferous diversity, approximately 200 species, and there is a lack of technical scientific data mainly of psychochemical, nutritional potential and health benefits description of those.The aims of the this study was to evaluate thepsychochemical description of the fruit pulps of araça-boi (Eugenia stipitata), abiu (Pouteria caimito), araticum (Annona crassiflora), biri-biri (Averrhoa bilimbi L.) and yellow mangosteen (Garcinia xanthochymus), obtained in different crops, and the effects of consuming these fruit pulps on hematologic, metabolic, renal and hepatic toxicity parameter in rats.The pulps of the fruits, coming from the city of Cacoal, Rondônia (Western Amazon). The physical-chemical parameters are: solid, acid, total titratable, pH, reducing sugars, non-reducing and total sugars, ascorbic acid, moisture, ashes, lipids, protein, color, total phenolic compounds and total antioxidant activity.In the biological assays, 60 adult male albino Wistar rats were given daily doses of 0.3214 mL of pulp / 100 g of body mass for 30 days (sub-chronic effect) by gastric intubation and after that period the analyzes of total hematocrit, total leukocytes, glycemia, triacylglycerols and total cholesterol, cytoplasmic glutamic oxaloacetic transaminase (GOT) and cytoplasmic glutamic piruvic transaminase (GTP), urea and creatine.The physical-chemical parameters of the araçá-boi, abiu grande, araticum, biri-biri and yellow mangosteen differed (p ≤ 0.05) ... / Doutor

Orientador: Vânia Nieto Brito de Souza / Resumo: A infecção por Mycobacterium leprae (M. leprae) desencadeia alterações no status funcional das células de Schwann (SCs), responsáveis pela produção da bainha de mielina e homeostasia neural. Estudos prévios indicam que lesões nos nervos periféricos modulam a expressão de fatores-chave envolvidos na diferenciação e maturação das SCs. Na hanseníase, alterações funcionais nessas células podem estar envolvidas na patogênese do dano neural. O presente estudo buscou determinar a expressão dos fatores de transcrição KROX-20, SOX-10, JUN e do receptor p75NTR, envolvidos nos processos de diferenciação e maturação de SCs. Os dados foram obtidos a partir de cultura primária de SCs murinas expostas ao M. leprae durante sete e 14 dias, com diferentes multiplicidades de infecção (MOI 100:1, MOI 50:1). Os mesmos fatores foram avaliados in vivo, em nervos ciáticos de camundongos nude (NUFoxn1nu), após seis e nove meses de infecção. Comparando-se grupos experimentais em relação aos controles, nossos resultados em cultura de SCs demonstram redução significativa de KROX-20 e SOX-10, bem como elevação na frequência de células imunomarcadas por p75NTR. Paralelamente, nervos ciáticos de camundongos nude infectados por M. leprae apresentaram queda de KROX-20 e aumento de p75NTR, quando comparados aos animais não infectados. Em conjunto, nossos resultados corroboram achados prévios sobre a interferência de M. leprae na expressão de fatores-chave envolvidos na maturação celular, favorecendo a manuten... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Mycobacterium leprae infection (M. leprae) triggers changes in the functional status of Schwann cells (SCs), which are responsible for the production of myelin sheath and neural homeostasis. Previous studies indicate that peripheral nerve injury modulates the expression of key factors involved in the differentiation and maturation of SCs. In leprosy, functional changes in these cells may be involved in the pathogenesis of neural damage. The present study sought to determine the expression of the transcription factors KROX-20, SOX-10, JUN and the neurotrophic receptor p75NTR, involved in the differentiation and maturation processes of SCs. Data were obtained from primary murine SCs culture exposed to M. leprae for seven and 14 days, with different multiplicities of infection (MOI 100:1, MOI 50:1). The same factors were evaluated in vivo on sciatic nerve of nude mice (NU-Foxn1nu), after six and nine months of infection. By comparing experimental groups versus controls, our SC culture results demonstrate significant reduction of KROX-20 and SOX-10, as well as elevation in the frequency of cells immunolabelled by p75NTR. In parallel, sciatic nerves of nude mice infected with M. leprae showed a decrease in KROX-20 and an increase of p75NTR when compared to uninfected animals. Our results corroborate previous findings on M. leprae interference in the expression of key factors involved in cell maturation, favoring the maintenance of a non-myelinating phenotype in SCs, with possible ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:03:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000438172-Texto+Completo-0.pdf: 1191521 bytes, checksum: 237c9b927e3f38af88fb5e0c217da2cf (MD5) Previous issue date: 2012 / Wound healing represents a dynamic physiological process initiated and influenced by many factors. Nanocrystalline silver have been demonstrated to have antimicrobial and anti-inflammatory properties, whereas papain is a proteolytic enzyme, which has been used in different formulations for wound treatment in clinics. Objectives This study was conducted to further evaluate the wound healing activity of nanocrystalline silver dressings as compared to that obtained with 2% papain gel, for the treatment of acute wounds in rats and the impact on VEGF expression. Forty-eight male Wistar rats were randomly divided into four groups. Group 1: treated with saline solution (NaCl 0. 9%); group 2: treated with nanocrystalline silver; group 3: treated with the excipient gel; group 4: treated with 2% papain gel. A full-thickness wound of 1. 5 x 1. 5 cm² was excised from the back of the rats, under aseptic conditions and were anesthetized by a mixture of ketamine and xylazine. All the animals were evaluated on the 3rd, 6th, 9th, 12th and 15th days for wound-healing rating and histological evaluation and imunohistochemistry for VEGF.The statistical analysis was performed ANOVA, followed by Bonferroni’s test. The group treated with the nanocrystalline silver dressing, showed a healing ratio superior, in all periods, when compared to control group and was the unique showing complete wound healing at 15 days of evaluation. The 2% papain gel group, a significantly higher wound healing rate was observed only at the 3th and the 6th days, but the wound showed a bleeding and decrease of wound healing ratio from the 9th day on. Histological evaluation showed a fully matured and compact granulation tissue on the nanocristaline silver group. The others groups displayed thickned epidermis, with extensive areas of inflammation. Evident immunopositivity for VEGF was also seen in the granulation tissue layer at the 9th day, the nanocrystalline silver group showed a higher VEGF expression in blood vessels, epidermal cells and granulation tissue. In this work, based on both the qualitative and the quantitative analysis, the nanocrystalline silver group showed a better wound healing effect in view of a rapid contraction of wound, compared with the others groups. Furthermore, we show for the first time that pro-healing activities of nanocrystalline silver dressings are likely associated to the modulation of VEGF expression. / O processo de cicatrização representa uma cascata de eventos dinâmicos iniciados e influenciados por diversos fatores. A prata nanocristalina tem demonstrado uma ação antimicrobiana e anti-inflamatória em diversos estudos, enquanto a papaína, além da ação anti-inflamatória, é usada no desbridamento de feridas, por ser uma enzima proteolítica. A ação da papaína depende da sua concentração que varia de 1% a 10%. Esse estudo foi conduzido com o objetivo de avaliar a ação da prata nanocristalina e da papaína gel 2% sobre o processo de cicatrização em ratos e o impacto dessas substâncias sobre a expressão de VEGF. Foram randomizados 48 ratos Wistar em 4 grupos. Grupo 1: tratado com solução salina; grupo 2: tratado com prata nanocristalina; grupo 3: tratado com gel excipiente; grupo 4: tratado com papaína gel a 2%. Foi realizado uma excisão de espessura total no dorso do animal, medindo de 1,5 x 1,5 mm. Foi respeitada técnica asséptica rigorosa e o animal foi anestesiado com xilazina e quetamina por via intraperitoneal. Todos os animais foram avaliados no 3º, 6º, 9º, 12º e 15º dia. As lesões foram fotografadas e analisadas pelo Programa Image J para estimar a área. Foram recolhidas amostras das lesões nos diferentes períodos de avaliação para análise histológica e imuno-histoquimica para VEGF.A análise estatística foi feita pelo teste de análise de variância (ANOVA), seguido pelo Teste de Bonferroni, utilizando programa Graphped 4. O grupo tratado com a prata nanocristalina, apresentou cicatrização completa ao final de 15 dias, diferente dos outros grupos. O grupo tratado com papaína gel 2% apresentou uma maior taxa de cicatrização no 3º e 6º dia, que se manteve estável a partir do 9º dia. A avaliação histológica mostrou um tecido de granulação maduro no grupo da prata nanocristalina. Os outros grupos apresentaram uma epiderme espessa com extenso infliltrado inflamatório. Foi evidente a imunopositividade para VEGF no grupo da prata nanocristalina, principalmente no 9º dia de tratamento. Nesse trabalho, baseado tanto na análise quantitativa como qualitativa, o grupo tratado com prata nanocristalina mostrou uma melhor taxa de cicatrização, evidenciado por uma mais rápida contração da ferida, comparada com os outros grupos. Além disso, evidenciamos que a ação pró cicatrização da prata nanocristalina está associada com a modulação da expressão de VEGF.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:04:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000425136-Texto+Completo-0.pdf: 6824100 bytes, checksum: a0f00fc5697ef7ef0055b9577b7dbbbe (MD5) Previous issue date: 2010 / Type I diabetes mellitus (DM1) is an organ-specific autoimmune syndrome characterized by the selective destruction of insulin-producing β cells in the pancreatic islets. The search for therapeutic alternatives for DM1, the β cell mass and consequently the reconstitution of physiological secretion of insulin have been extensively done. Among different treatments strategies studied, cell therapy based on mesenchymal stem cells is one of the most extensively studied. Searching for a product that mimics qualitative and quantitatively the characteristics of pancreatic β cells, protocols must be improved and the capacity of (trans) differentiation of new sources of tissue-specific must be explored. In this way, the aim of this work was to compare the capacity of expansion and differentiation in vitro of murine mesenchymal stem cells, isolated from kidney, pancreas and bone marrow, evaluating its capacity of differentiation into insulin-producing cells (IPCs). From the results, it was evident that these cell populations were able to (trans) differentiate into the pancreatic endocrine cell-like phenotype. When cultured in vitro in a rich inducing-media, cells were characerized by cluster formation with spherical morphology, positive dithizone staining and expression of insulin-1 at the mRNA and protein level. Moreover, IPCs derived from mesenchymal stem cells reversed the pancreatic hyperglycemic state when transplanted into the kidney capsule of chemically induced diabetic mice, indicating that in vitro they are able to differentiate into functional IPCs. / O diabetes mellitus tipo 1 (DM1) é uma síndrome auto-imune órgão-específica caracterizada pela destruição seletiva de células β produtoras de insulina nas ilhotas pancreáticas. A busca por alternativas terapêuticas para o DM1, voltadas à preservação e/ou regeneração da massa de células β e, consequentemente, à reconstituição do padrão fisiológico de secreção de insulina, tem sido exaustivamente realizada. Dentre as estratégias de tratamento estudadas, destaca-se a terapia celular baseada na utilização de células-tronco mesenquimais. Na busca por um produto que mimetize qualitativamente e quantitativamente as características das células β pancreáticas, protocolos devem ser aperfeiçoados e a capacidade de (trans)diferenciação de novas fontes celulares tecido-específicas devem ser exploradas. Assim, o objetivo deste trabalho foi comparar a capacidade de expansão e diferenciação in vitro de células-tronco mesenquimais murinas, isoladas do rim, pâncreas e medula óssea, avaliando sua capacidade de diferenciação em células produtoras de insulina. Evidenciou-se que estas populações celulares são capazes de se (trans) diferenciar em células com fenótipo pancreático endócrino, quando cultivadas em meio rico em indutores, incluindo morfologia esférica, formação de clusters, secreção de insulina (com a conseqüente coloração positiva para ditizona) e expressão in vitro do gene e da proteína da insulina-1. Além disso, células produtoras de insulina (CPIs) derivadas de células-tronco mesenquimais pancreáticas reverteram o estado hiperglicêmico quando transplantadas em cápsula renal de camundongos diabéticos, indicando que são capazes de diferenciarem-se in vitro em CPIs funcionais e de manterem esta funcionalidade in vivo.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:05:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000433931-Texto+Completo-0.pdf: 2326091 bytes, checksum: 440c15a6896a635a762bbff20a3d5cf0 (MD5) Previous issue date: 2011 / Objective: The objective of this study is to assess the minimum time of adhesion of the Porous Polyethylene in the corneal stroma of pigs as an alternative to prosthetic haptic portion of the cornea. Methods; Animal intervention studies with implantation of porous polyethylene five discs in the corneal stroma of five eyes of pigs with different analysis of adherence to time in refereed 30/45/60/75 and 90 days exposed. We analyzed the respective areas and fractal dimension images of scanning electron from one end of the midsection of the five disks and compared. Results: The ratio of sectional area of the periphery of the whole stroma / polyethylene 53835/29374 analysis was 30 days (P1OC) 53585/24758 in 45 days (P2OC) 115119/117455 60 days (P3OC) 94771/91579 in 75 days (P4OC) and 85860/81742 in 90 days (P5OC), p = 0. 041. The relationship between the Fractal Dimension set stroma / polyethylene was 1. 0534 / 1. 1397 at 30 days (P1OC) 1, 0544 / 1. 1127 in 45 days (P2OC) 1. 0370 / 1. 0410 in 60 days (P3OC) 1. 0471 / 1. 1016 at 75 days (P4OC) and 1. 066 / 1. 1154 in 90 days (P5OC ), p = 0. 019. Being the smallest difference of 0. 004 Fractal Dimension to 60 days and a lower percentage difference of area of 3. 36 at 75 days. Conclusion: Image analysis showed tendency of adhesion between the stroma and the polyethylene from the 60th day of exposure, despite the small number of extrusion amostra. There was no extrusion evidenced in any of the periods analysed. Should it say that the biocompatible porous polyethylene is maintained in time noted, however further study is needed to verify its longterm behavior. / OBJETIVO : O objetivo deste estudo é verificar o tempo mínimo de adesão do polietileno poroso no estroma corneano de porcos como alternativa para porção háptica de prótese de córnea.MÉTODOS : Foi realizado estudo de intervenção animal com implante de cinco discos de polietileno poroso em estroma corneano de cinco olhos de diferentes porcos com análise de adesão em tempos arbitrados em 30/45/60/75 e 90 dias de exposição. Foram analisados as áreas e dimensões fractais das imagens de Microscocopia Eletrônica de Varredura de uma das extremidades da secção central dos cinco discos e comparados entre si. RESULTADOS : A relação da área da secção da periferia do conjunto estroma/polietileno foi de 53835/29374 na análise de 30 dias (P1OC); 53585/24758 em 45 dias (P2OC); 115119/117455 em 60 dias (P3OC); 94771/91579 em 75 dias (P4OC) e 85860/81742 em 90 dias (P5OC), p= 0,041. A relação da Dimensão Fractal entre o conjunto estroma/polietileno foi de 1,0534/1,1397 em 30 dias (P1OC); 1,0544/1,1127 em 45 dias (P2OC); 1,0370/1,0410 em 60 dias (P3OC); 1,0471/1,1016 em 75 dias (P4OC) e 1,066/1,1154 em 90 dias (P5OC), p= 0,019. Sendo a menor diferença de Dimensão Fractal 0,004 aos 60 dias e menor diferença percentual de área de 3,36 aos 75 dias. CONCLUSÃO : A análise das imagens demonstraram melhor adesão entre o estroma e o polietileno a partir do 60º dia de exposição, apesar do número pequeno da amostra. Não foi evidenciado extrusão em nenhum dos períodos analisados. Pode se afirmar que o polietileno poroso se manteve biocompatível no tempo observado, no entanto sendo necessário futuro estudo para verificar seu comportamento a longo prazo.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:05:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000443581-Texto+Parcial-0.pdf: 2098354 bytes, checksum: 0b5ec85f1b50d0c42f83f9793d9e1af5 (MD5) Previous issue date: 2012 / Lateral amyotrophic sclerosis (ALS) is a neurodegenerative disease characterized by the selective loss of both lower and upper motoneurons in the spinal cord, brain stem and motor cortex. Loss of motoneurons leads to progressive paralysis, and death in 2 to 5 years. Treatment is based on symptomatic measures and pharmacological therapy available is not curative. Thus, it is of great importance to develop new therapeutic strategies to manage this disease. Alternatively, stem cells to replace could be used to replace degenerating neurons or to stop/delay neuronal death. The aim of this study was to verify if bone marrow mononuclear cells (BMMC) have therapeutic potential in transgenic mice superexpressing SOD1G93A. These animals’ phenotypic and physiopathological characteristics mimic those of ALS. Seventy-day-old or 110-day-old mice were administered with 107 BMMC in the tail vein. BMMC were obtained from C57BL/6-EGFP or SOD1G93A donors. Control animals received saline. In order to determine disease onset and progression, animals were evaluated in the Rotarod test, by electromyography and had their body weight measured. Survival was also evaluated. Tissue samples were collected for PCR analysis of cell migration. Additional groups of animals were euthanized at 120-days-old for histological analysis and the alkaline comet assay. Our results indicate that EGFPBMMC transplantation in 70-day-old mice (pre-symptomatic) mice prolong survival, preserve motor function and preserve motoneurons in the ventral horn of the spinal cord. However, for mSOD1BMMC the observed effect is intermediary. Furthermore, in 110-day-old (symptomatic) mice, only EGFPBMMC prolonged survival. This effect was more discrete than the one observed for pre-symptomatic-treated animals. Finally, systemically administered BMMC migrate into the spinal cord where fragments of their DNA were identified by PCR. There were no differences between the experimental groups in the electromyographical evaluation or DNA integrity measured by the alkaline comet assay. Our results suggest that BMMC have therapeutic potential in ALS since we observed improved motor performance and prolonged survival in animals that received the transplant. Nonetheless, outcomes were better when intervention was early and the transplanted cells did not express the mutated SOD1. Thus, our data represent a step forward in making cell-based therapy available for ALS patients. However, questions associated to the time of intervention and the source of the cells should be carefully addressed. / A esclerose lateral amiotrófica (ELA) é uma doença neurodegenerativa caracterizada por uma perda seletiva de neurônios motores na medula espinhal, tronco encefálico e córtex motor. A perda de motoneurônios dá início a uma paralisia progressiva, levando o paciente a óbito em 2 a 5 anos. O tratamento se baseia principalmente em medidas sintomáticas e a terapia farmacológica existente não é curativa. Assim, é de máxima importância o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas. Como alternativa, existe a perspectiva do uso de células-tronco para substituir neurônios em degeneração, ou impedir/retardar o processo de morte neuronal. O objetivo deste estudo foi verificar se as células mononucleares da medula óssea (CMMO) apresentam potencial terapêutico em camundongos transgênicos que superexpressam SOD1G93A. Estes animais apresentam características fisiopatológicas e fenotípicas que se assemelham à ELA. Aos 70 dias (pré-sintomático) ou 110 dias (sintomático) de vida os animais receberam 107 CMMO pela veia da cauda. Camundongos C57BL/6-EGFP ou SOD1G93A foram utilizados como doadores. Animais controle receberam solução salina. Para determinar a idade em que os animais passam a apresentar sintomas da doença e diferenças na progressão, foram utilizados o teste motor do Rotarod, eletroneuromiografia e o peso corporal dos animais. A sobrevida dos animais também foi analisada. Após a eutanásia foram coletadas amostras para avaliação da migração celular por PCR. Grupos adicionais de animais foram tratados conforme previamente descrito e eutanasiados aos 120 dias de vida para avaliação histológica e ensaio do cometa alcalino. Nossos resultados indicam que o transplante intravenoso de EGFPCMMO aumenta a sobrevida de animais tratados aos 70 ou aos 110 dias de vida. Quando a intervenção é feita no período pré-sintomático, o aumento da sobrevida é acompanhado de preservação da função motora e de motoneurônios do corno ventral da medula espinhal. Entretanto, quando as células transplantadas são mSOD1CMMO, o efeito observado nos mesmos parâmetros é apenas intermediário. Além disso, quando o transplante ocorre no período sintomático, somente as EGFPCMMO promovem aumento na sobrevida, embora discreto. A perda de função motora e a progressão não se modificam. Finalmente, embora as células tenham sido administradas sistemicamente, migram para a medula espinhal, onde foram identificados fragmentos de seu DNA.Não foram identificadas diferenças entre os grupos na avaliação por eletroneuromiografia, nem da integridade de do DNA avaliada pelo ensaio do cometa alcalino. Nossos resultados até o momento sugerem que a fração mononuclear da medula óssea tem potencial terapêutico no tratamento da ELA, uma vez que verificamos melhora de desempenho motor e aumento de sobrevida em animais submetidos ao transplante. Apesar disso, os desfechos são mais favoráveis quando o tratamento é precoce e as células não expressam a mutação da SOD1 desencadeadora da ELA. Assim, nossos dados representam avanço na disponibilização do tratamento com células-tronco para pacientes com ELA, mas questões relacionadas ao período de intervenção e fonte das células devem ser cuidadosamente avaliadas.