Dissertação (mestrado) - Univesidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-graduação em Farmácia / Made available in DSpace on 2012-10-23T09:46:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 245165.pdf: 3513206 bytes, checksum: 61c63882ef33006b9918d606992b1f38 (MD5) / As chalconas são compostos intermediários essenciais na biossíntese dos flavonóides. São amplamente distribuídas no reino vegetal e encontradas em pequenas e grandes plantas. Muitos trabalhos demonstraram efeitos biológicos para as chalconas, incluindo efeito antiinflamatório, antioxidante, antimalárico e antitumoral. Diferentes substituintes nos anéis das chalconas podem resultar em compostos com diferentes atividades biológicas. O objetivo deste trabalho foi estudar a atividade antitumoral de dez chalconas derivadas quimicamente do 3,4-metilenodioxibenzaldeído nas células leucêmicas linfoblásticas L1210. Foram analisadas a viabilidade celular, o mecanismo de morte celular, as concentrações intracelulares de GSH e ATP e a toxicidade in vitro das chalconas em células progenitoras da medula óssea. Foi observado que as chalconas 5, 7 e 11 reduziram fortemente o número de células viáveis em 90.5 ± 1.2%, 87.1 ± 1.1% e 86.3 ± 2.2%, respectivamente, quando comparadas com o controle, e induziram a fragmentação do DNA na concentração de 100 µM. Dentre as dez chalconas testadas somente a 5, a 7 e a 11 apresentaram efeito citotóxico acentuado. A chalcona 5 mostrou o menor valor de IC50 em 24h e em 48h, nas concentrações de 45 e 22 µM, respectivamente. Os grupos metóxi que aumentam a densidade eletrônica do anel A, presentes nos compostos 5, 7, e 11, parecem aumentar sua citotoxicidade. A depleção de GSH mostrou-se proporcional à morte celular. As concentrações intracelulares de ATP foram esgotadas de maneira concentração-dependente, sugerindo que os compostos podem interferir no potencial de membrana mitocondrial e na síntese do ATP. A chalcona 7 foi o composto menos tóxico para células normais da medula óssea. Nossos resultados mostraram que as chalconas 5, 7 e 11 induziram à apoptose células L1210 e apresentam a chalcona 7 como a mais promissora para dar continuidade às investigações.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia / Made available in DSpace on 2012-10-23T12:22:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 241095.pdf: 2185966 bytes, checksum: 7e64cb9723ad13136833f478365fafc9 (MD5)

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia / Made available in DSpace on 2012-10-23T12:44:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 259535.pdf: 1515828 bytes, checksum: 9e9db4dc13d0fa48ba892daa2d31a430 (MD5) / A camptotecina (CPT), um alcalóide proveniente do arbusto Camptotheca acuminata (Descaisne, Nyssaceae), é um fármaco que apresenta elevada atividade antitumoral, cujo mecanismo envolve a inibição da Topoisomerase I, uma enzima altamente expressa nos tumores. Entretanto, a utilização deste fármaco na terapêutica foi limitada, durante anos, em virtude de suas características de baixa solubilidade aquosa, elevada instabilidade em meio fisiológico, e elevada toxicidade. Com o intuito de contornar os inconvenientes da administração deste fármaco e melhorar a sua eficácia terapêutica, estudos da encapsulação da CPT em nanocápsulas poliméricas foram realizados, empregando o poli (D,L-ácido lático) (PLA) e copolímeros em bloco do poli (D,L-ácido lático) e polietilenoglicol (PLA-PEG 49 e 66,6 kD). Estes últimos foram empregados com o intuito de obter nanopartículas furtivas, ou seja, que escapam do reconhecimento e captura pelos macrófagos. As suspensões de nanocápsulas foram preparadas pela técnica de deposição interfacial do polímero pré-formado (nanoprecipitação) e caracterizadas quanto ao diâmetro médio das partículas e potencial zeta. A viabilidade da preparação das nanocápsulas em diferentes condições foi avaliada. A eficiência de encapsulação e o teor de fármaco foram determinados por meio de uma metodologia analítica de cromatografia liquida de alta eficiência previamente validada. Um delineamento estatístico fatorial foi aplicado para determinar a influência de duas variáveis independentes (tipo de óleo e tipo do polímero) sobre o teor de camptotecina nas suspensões coloidais. Suspensões coloidais monodispersas, apresentando partículas com diâmetro médio entre 140 e 200 nm e potencial zeta entre -25 e -42 mV, foram obtidas pela técnica de nanoprecipitação. Elevados valores de eficiência de encapsulação foram obtidos em todas formulações testadas. Ambos, tipo de polímero e tipo de óleo afetaram significativamente o teor de fármaco das formulações. Ensaios de liberação foram realizados empregando a técnica de difusão através de membrana e tampão fosfato pH 7,4 contendo Tween 2% como meio de liberação. A concentração de CPT no meio de liberação foi determinada por uma metodologia de espectrofluorimetria. Após 96 horas de ensaio, cerca de 40 a 60% do fármaco foi liberado, dependendo da formulação testada. Estudos de citotoxicidade in vitro da CPT livre e encapsulada foram conduzidos usando linhagens de células de leucemia linfoblástica aguda murina L1210 e de leucemia mielomonocítica murina WEHI-3B. Na concentração de 0,1 µg/mL, tanto a CPT livre como encapsulada reduziram significativamente o número de células leucêmicas L1210 viáveis(P<0,005 versus grupo controle), mas não foi observada diferença significativa quando o grupo tratado com as nanocápsulas foi comparado com o tratado com o fármaco livre. Na mesma concentração, quando as células leucêmicas WeHi-3B foram testadas, somente as nanocápsulas de PLA contendo CPT reduziram significativamente o número de células viáveis (P<0,005). Estudos in vivo necessitam ainda ser conduzidos para demonstrar o interesse da utilização de nanocápsulas no tratamento das leucemias. Camptothecin (CPT), an alkaloid obtained from Camptotheca acuminata (Descaine, Nyssaceae), is a drug that displays high antitumor activity, and its mechanism entails the inhibition of the Topoisomerase I, an enzyme highly expressed in the tumors. Neverthless, camptothecin's use in therapeutics has been limited by its low water solubility, low stability in physiological medium, and high toxicity. In order to overcome these drug drawbacks and to improve the therapeutic efficacy, encapsulation studies of CPT in nanocapsules was done using poly (D,L-lactide) (PLA) and poly (D,L lactide)-poly(ethyleneglycol) diblock copolymers (PLA-PEG 49 e 66.6 kD). These polymers were used in order to obtain stealth nanocapsules, which are able to escape from macrophage uptake. The nanocapsule suspensions were prepared by interfacial deposition of preformed polymer (nanoprecipitation) and were physicochemically characterized. The feasibility of the nanocapsule preparation using diferent conditions was evaluated. The encapsulation efficiency and CPT content in the nanocapsules were estimated by a validated high performance liquid cromatography method. A factorial design was employed to investigate the effect of two independent variables (oil and polymer type) on CPT content. The nanoparticles dysplayed mean diameter varying from 140 to 200 nm and zeta potencial from -25 to -40 mV. The encapsulation efficiency values were high for all tested formulations. Both type of the polymer and oil affected significantly the CPT content in the nanocapsule suspensions. In vitro release studies were done using the membrane difusion method and phosphate buffer solution pH 7.4, containing 2% Tween 80, as releasing medium. The release of CPT varied from 40 to 60% after 96 hours. The cytotoxicity of the free drug and CPT-loaded nanocapsule suspensios was evaluated by MTT method against a mouse lymphocytic leukemia cell line (L1210) and a myelomonocytic leukemia cell line (WeHi-3B). The free drug and CPT-loaded nanocapsules caused significant L1210 cell death in the concentration of 0.1 µg/mL (P<0.005 versus control group). However, statistical significant difference was not observed when cells were treated with the CPT-loaded nanocapsules or free drug. On the other hand, only CPT-loaded PLA nanocapsules reduced significantly the number of WeHi 3B viable cells (P<0.005 versus control group). In vivo studies are still need to evaluated the effect of CPT-loaded nanocapsules on leukemia.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2008. / Made available in DSpace on 2012-10-23T23:52:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 272509.pdf: 556688 bytes, checksum: ac7a550cf59cbc96f664ae9354e36c16 (MD5) / Alternanthera tenella Colla, conhecida como apaga-fogo e joyweed, é uma planta daninha, encontrada em terrenos baldios e lavouras, sendo muito utilizada popularmente para alívio de processos inflamatórios. Tendo em vista que os radicais livres têm importante papel no processo inflamatório, o presente trabalho objetivou avaliar a atividade antioxidante desta planta, bem como correlacionar os dados obtidos com a sua atividade antiinflamatória. Para tal foram preparados o extrato bruto etanólico (EEtOH), fração metanólica (FMeOH), fração acetato de etila (FAcoEt) e fração clorofórmica (FCHCl3) das partes aéreas de A. tenella para avaliação do potencial antioxidante utilizando modelos experimentais in vivo e in vitro. Os padrões utilizados para os ensaios in vitro foram a quercetina (QUE) e a rutina (RUT). Para avaliação preliminar da atividade antiinflamatória foi utilizado modelo in vivo do edema de pata induzido pela carragenina. As metodologias utilizadas in vitro foram determinações da captação dos radicais livres DPPH, HO, O2-, NO e proteção contra a lipoperoxidação, além do conteúdo de polifenóis totais. O modelo estabelecido para geração de estresse oxidativo in vivo foi o do CCl4, onde foi determinado o índice de dano ao DNA, o conteúdo de glutationa reduzida (GSH) e proteína carbonilada (PC), além do potencial antioxidante total do plasma (FRAP) e a atividade das enzimas catalase (CAT) e superóxido dismutase (SOD). Os ensaios realizados destacaram FMeOH e EEtOH, que obtiveram os melhores resultados, expressos em CE50, em praticamente todos as análises, mostrando-se eficazes no seqüestro de radicais como o DPPH (FMeOH = 77,12 0,66 g/mL, EEtOH = 78,14 1,80 g/mL e QUE = 2,48 0,80 g/mL), espécies reativas de oxigênio como o HO" (FMeOH = 11,28 1,66 g/mL, EEtOH = 24,96 3,40 g/mL e QUE = 22,54 2,06 g/mL) e O2"- (FMeOH = 109,49 3,48 g/mL, EEtOH = 139,19 4,03 g/mL e RUT = 358,64 0,83 g/mL) e de espécies reativas de nitrogênio, como o "NO (FMeOH = 1.000 g/mL e EEtOH = 62,50 g/mL) e na proteção contra a lipoperoxidação in vitro (FMeOH = 28,82 5,69 g/mL, EEtOH = 46,90 8,47 g/mL e RUT = 203,83 1,44 g/mL). Os resultados dos ensaios in vivo como a proteção contra a lipoperoxidação in vivo (FMeOH = 87,18 15,97 g/mL, EEtOH = 76,82 3,6 g/mL, RUT = 79,01 10,0 g/mL e CP = 185,12 10,01 g/mL), a prevenção contra a carbonilação protéica (FMeOH = 62,21 8,27 nmol.mg-1, EEtOH = 62,48 2,92 nmol.mg-1, RUT = 52,69 10,02 nmol.mg-1 e CP = 371,66 20,5 nmol.mg-1), os níveis de GSH (FMeOH = 0,1228 0,01 mmol.g-1, EEtOH = 0,1240 0,01 mmol.g-1, RUT = 0,4000 0,10 e CP = 0,1467 0,01 mmol.g-1), a prevenção de danos causados ao DNA (Índice de Dano ao DNA - IDD) (FMeOH = 121, EEtOH = 113, RUT = 82 e CP = 211), a atividade enzimática da CAT (FMeOH = 39,38 2,12 mmol.min-1.g-1, EEtOH = 33,88 2,99 mmol.min-1.g-1, RUT = 20,00 5,00 mmol.min-1.g-1 e CP = 48,01 10,01 mmol.min-1.g-1) e da SOD (FMeOH = 262,06 41,18 U SOD.g-1, EEtOH = 243, 99 56,68 U SOD.g-1, RUT = 275,00 25,01 U SOD.g-1 e CP = 385,56 20,27 U SOD.g-1) também demonstraram um perfil antioxidante. O ensaio de verificação da redução do edema de pata induzido pela carragenina demonstrou uma atividade antiedematogênica discreta (EEtOH, ?GC= 0,016 0,003 e ?GT= 0,025 0,003). Os resultados também evidenciam uma correlação entre atividade antioxidante e antiinflamatória e o conteúdo de polifenóis totais (FMeOH = 85,15 2,94 GAE mg/L e EEtOH = 83,15 3,66 GAE mg/L) e potencial antioxidante total (FMeOH = 2.045,04 205,76 mmol/L, EEtOH = 1.924, 10 137,17 mmol/L, RUT = 2.131,23 214,12 mmol/L) das frações analisadas. Em conclusão, a fração metanólica (FMeOH) e o extrato etanólico (EEtOH) mostraram-se promissores para futuras análises para elucidar mecanismos de ação dos processos avaliados neste trabalho, sendo necessárias maiores análises para a demonstração de real potencial antiinflamatório e hepatoprotetor desta planta.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia. / Made available in DSpace on 2013-07-16T01:51:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 220873.pdf: 1127171 bytes, checksum: 4ccc0d3cf18833207ebf957bd60a3196 (MD5) / A oxidação de lipoproteínas de baixa densidade (LDL) através de agentes oxidantes, na forma de radicais livres, está correlacionada ao grau de evolução da aterosclerose. Neste sentido, o presente trabalho se propôs avaliar o potencial antioxidante e hipotrigliceridêmico de oito (8) análogos sintéticos da acetofenona, utilizando modelos in vivo e in vitro. A avaliação in vitro do potencial antioxidante foi investigada pelos métodos de captação do radical DPPH, O2·- e ·OH, além da lipoperoxidação. A avaliação in vivo do estresse oxidativo (fragmentação do DNA, lipoperoxidação de membranas e carbonilação de proteínas) e as defesas antioxidantes (concentração de GSH, atividades da CAT e GST) foi realizada em camundongos pré-tratados com os análogos THA e Gala e, posteriormente, expostos a CCl4. Com o intuito de avaliar o potencial hipotrigliceridêmico, foram utilizados modelos de hiperlipidemia induzida pela dieta hipercalórica de 30 dias em ratos e ensaios de inibição da absorção intestinal de triglicerídeos e da atividade da lipase intestinal em camundongos. Os análogos sintéticos da acetofenona apresentaram significativa atividade antioxidante in vitro, destacando-se a THA e Gala, pois apresentaram atividade "scavenger" de radicais DPPH, O2·- e ·OH em concentrações muitas vezes menor ou similar à rutina, reconhecido agente antioxidante. O CCl4 causou estresse oxidativo e dano celular no fígado dos camundongos, onde a rutina, THA e Gala, apresentaram importante atividade antioxidante na proteção tecidual através de diminuições de TBARS, FOX, dano ao DNA, oxidação protéica, além de diminuição da GSH e elevação da AST, CAT, GST e ALT (exceto THA). O efeito hipotrigliceridêmico foi verificado para THA, fazendo com que as concentrações séricas de triglicerídeos, fossem menores que no grupo controle, causando uma forte redução na absorção de triglicerídeos e uma forte inibição da atividade da lipase intestinal, após administração do azeite de oliva. Estes resultados demonstram que a THA e Gala apresentaram uma importante atividade antioxidante tanto in vitro como em in vivo e também manifestando um o efeito hipotrigliceridêmico da THA. Os dados obtidos nos permite concluir que a Gala e, particularmente, a THA, poderiam constituir moléculas protótipos para o desenvolvimento de novas alternativas terapêuticas para o tratamento de doenças vasculares obstrutivas.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2005. / Made available in DSpace on 2013-07-16T02:31:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 274150.pdf: 2996266 bytes, checksum: 6053a0575c295e6be79fbb0562086daf (MD5) / Lippia alba é uma espécie medicinal que ocorre em todas as regiões do Brasil. Caracteriza-se pela sua ampla utilização na medicina popular, sendo utilizada, sobretudo, como tranquilizante. Trata-se de uma espécie que requer estudos científicos sobre isolamento e identificação de seus constituintes. Em estudos anteriores, a fração n-butanólica, obtida por partição do extrato hidroetanólico apresentou efeitos sedativo e anticonvulsivante. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi o estudo desta mesma fração, buscando o isolamento e a identificação de seus constituintes químicos, o acompanhamento sazonal qualitativo destas substâncias e a realização de ensaios farmacológicos (verificação da temperatura corporal e da atividade hipno-sedativa, através da indução com pentobarbital e com éter etílico). Assim, partindo-se de um extrato hidroalcoólico das folhas do material vegetal, seguido de partição com solventes de polaridade crescente, obteve-se a fração n-butanólica. Após purificação das subfrações, foi possível isolar as substâncias LA-1 (verbascosideo), LA-2, LA-3 (ácido 3 , 16 , 23 trihidroxiolean-12-en-28-óico bidesmosídico) e LA-4. Para a substância LA-2 estão sendo aguardados os espectros de RMN para sua elucidação estrutural; para a substância LA-4 deve-se primeiramente purificá-la por CLAE para que seja então igualmente elucidada. Em relação aos testes farmacológicos, não é possível afirmar que a fração n-butanólica apresenta atividade hipno-sedativa, uma vez que prolongou o tempo de sono induzido por barbitúrico (na dose de 300 mg/kg, no tempo de 1 h, v. o.) mas não potencializou o sono induzido por éter, na mesma dose e tempo anteriores; não alterou significativamente a latência do sono, inclusive no grupo diazepam; reduziu a temperatura corporal nas doses de 100 e 300 mg/kg significativamente nos tempos de 1 e 2 h, mas não é possível afirmar que seja devido a um mecanismo de ação central. Dessa forma, constatou-se que L. alba é uma espécie promissora para a obtenção de metabólitos secundários. Os constituintes químicos analisados neste trabalho puderam ser encontrados na espécie em todas as coletas realizadas, não havendo variação sazonal qualitativa. Sugere-se que estudos posteriores realizem pesquisas mais aprofundadas em relação às atividades farmacológicas da fração n-butanólica, bem como de seus constituintes químicos isolados e do infuso. Além disso, devem ser elucidadas as estruturas ainda não identificadas. / Lippia alba is a medicinal plant wich is find in all regions of Brazil. This especie is largely used in the folk medicine, especially as a tranquilizer. It needs cientific studies about isolation and identification of its constituents. In previous studies, the n-butanolic fraction, obtained from a hidroalcoolic extract showed sedative and anticonvulsant effects. The objective of this work was the study of the same fraction, searching the isolation and identification from its chemical constituents, the qualitative seasonal accompaniment of this substances and the achievement from pharmacological experiments (verification of the body temperature and sedative activity, through the induction with pentobarbital and ether). Thus, from a hidroalcoolic extract of the leaves from the vegetable material, followed by partition with solvents of increasing polarity, the n-butanolic fraction was obtained. After purification of subfractions, was possible to isolate the substances LA-1 (verbascoside), LA-2, LA-3 (3 , 16 , 23 trihydroxiolean-12-en-28 oic acid bidesmosidic) and LA-4. To the elucidation of the substance LA-2, is necessary wait for the NMR spectrum; to the substance LA-4, is necessary the purification from CLAE to its elucidation. About the pharmacological trials, it is no possible to assure that the n-butanolic fraction shows sedative activity; it increased the barbiturate sleeping time (300 mg/ Kg body wt., 1 h after the treatment v.o.) but not increased the ether sleeping time, at the same previously dose and time; not modified significative the latency of the sleep, including the control group; decreased the body temperature (100 and 300 mg/ Kg wt., 1 and 2 h after the treatment v.o.) but it is no possible to say that is because a central effect. In that way, L. alba is shown as a viable source of potentially active secondary metabolites. The chemical constituents analysed in this work could be find in all assessments, so there is no qualitative seasonal variation. Posterior studies could achieve more researches about the pharmacological activities from the n-butanolic fraction and from its chemical constituents isolated and from the infusion. Furthermore, could elucidate the structures not yet identified.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia. / Made available in DSpace on 2013-07-16T02:49:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 239608.pdf: 5512255 bytes, checksum: 00cceccb4c52d8e338294b7c847232be (MD5) / Sorocea bonplandii (Baillon) Burger, Lanjow e Boer, devido à sua similaridade morfológica com Maytenus spp., é utilizada pela população com os mesmos fins medicinais desta. Ao contrário das espécies de Maytenus, que possuem inúmeros estudos químicos farmacológicos, as informações a respeito da espécie Sorocea bonplandii ainda são incipientes. Neste trabalho foram analisadas as frações éter de petróleo, clorofórmio e acetato de etila - obtidas de um extrato clorofórmico das folhas de S. bonplandii - quanto às suas atividades no bioensaio de letalidade para larvas de Artemia salina Leach. A fração com maior bioatividade neste ensaio foi a clorofórmica, da qual foram isolados e identificados, por ressonância magnética nuclear de 1H e 13C, um álcool primário saturado, o diterpeno fitol, um álcool vinílico de cadeia isoprenílica, uma mistura dos esteróides sitosterol e estigmasterol (sendo o primeiro a substância majoritária). Em outra etapa, após deslipidificação das folhas com éter de petróleo, foram preparados os extratos acetônico e metanólico. Deste foi isolado e identificado por espectrometria de massas e espectroscopia de infravermelho, o dissacarídeo sacarose. Os extratos metanólico e acetônico foram avaliados quanto a sua atividade anticoagulante in vitro. O extrato acetônico apresentou atividade anticoagulante nos testes de tempo de protrombina (TP) e tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPa). O mesmo extrato não apresentou atividade sobre a agregação plaquetária induzida por ADP assim como, no teste de tempo de trombina (TT). O extrato metanólico não demonstrou atividade em nenhum dos ensaios anteriores. O efeito anticoagulante evidenciado neste trabalho, nunca descrito para esta espécie, abre novas perspectivas para futuras investigações químico-biológicas, visando o isolamento e identificação da(s) substância(s) responsável(eis) por esta bioatividade.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-graduação em Farmácia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T05:42:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 296886.pdf: 3034171 bytes, checksum: 894126fb37dcb33fcc407cb583fba889 (MD5) / Hedyosmum brasiliense é um arbusto aromático que pertence à família Chloranthaceae e é popularmente usado como calmante e antiinflamatório, para tratar frieiras, enxaquecas e doenças de ovário. Este trabalho visou continuar a análise fitoquímica desta espécie que é conhecida popularmente como "Cidrão". Foi possível isolar e identificar treze substâncias oriundas só das frações hexano e diclorometano do extrato etanólico. Dessas substâncias, quatro são inéditas na literatura e pertencem à classe das lactonas sesquiterpênicas 15-acetilisogermafurenolídeo (H622), 1-hidroxi-10,15-metilenopodoandina (HB 212), 15-hidroxi-isogermafurenolídeo (HB 21) e brasiliensolídeo (HL 33) que é uma lactona sesquiterpênica dimérica. Seis estão sendo descritas pela primeira vez para a espécie (monoglicerídeo de ácido esteárico, éster etílico do ácido linolênico, éster etílico do ácido linoléico, ácido 3-metoxi-4-hidroxibenzoico, escopoletina e vanilina), e três (podoandina, 13-hidroxi-8,9-diidroshizukanolídeo (13HDS) e ß- sitosterol) já foram descritas previamente para H. brasiliense. Quanto aos estudos farmacológicos, a podoandina mostrou atividade antidepressiva agindo sobre as vias adrenérgicas, dopaminérgicas e serotonérgicas; o extrato bruto e as lactonas, podoandina e 13HDS exibiram a atividade vasodilatadora e as lactonas sesquiterpênicas (H622, HB 212 e HB 21) não tiveram atividade antimicrobiana contra Mycobacterium tuberculosis. As substâncias foram identificadas pela espectroscopia de ressonância magnética nuclear de 1D, 2D, espectrometria de massas e dados da literatura. / Hedyosmum brasiliense is an aromatic shrub that belongs to the Chloranthaceae family and is popularly used as a calmative and ntiinflammatory, for treating athlete's foot, migraines and diseases of the ovary. This work was done to continue the phytochemical analysis of this species which is popularly known as "Cidrão". It was possible to isolate and identify thirteen substances which were obtained from the hexane and dichloromethane fractions of the ethanol extract. Out of these substances, four are new and belong to the class of sesquiterpene lactones: 15-acetyl-isogermafurenolide (H622), 1-hydroxy-10 ,15-methylenepodoandin (HB 212), 15-hydroxy-isogermafurenolide (HB21) and brasiliensolide (HL 33) which is a dimeric sesquiterpene lactone. Six are being described for the first time for this species (stearic acid monoglyceride, linolenic acid ethyl ester, linoleic acid ethyl ester, 3-methoxy-4- hydroxybenzoic acid, scopoletin and vanillin), and three (podoandin, 13-hydroxy-8,9-dehydroshizukanolide (13HDS) and ß-sitosterol) were previously described for H. brasiliense. With regards to pharmacological studies, podoandin exhibited antidepressant activity by acting on adrenergic, dopaminergic and serotonergic pathways; the crude extract and the lactones podoandin and 13HDS exhibited vasodilator activity and the sesquiterpene lactones (H622, HB 212 and HB 21) showed no antimicrobial activity against Mycobacterium tuberculosis. The substances were identified by Nuclear magnetic resonance spectroscopy 1D, 2D, mass spectrometry and already published data.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T07:14:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 288983.pdf: 2515716 bytes, checksum: c5d31b0c7e25f6fc3c18ffeeecaa8458 (MD5) / As leucemias agudas (LAs) constituem um grupo de neoplasias malignas caracterizadas pela proliferação descontrolada de células hematopoiéticas, proveniente de mutações que podem ocorrer em diferentes fases da diferenciação de células precursoras, o que a caracteriza como uma doença altamente heterogênea. De acordo com a classificação da Organização Mundial da Saúde (OMS) para neoplasias do sistema hematopoiético e linfoide, publicada em 2008, para um diagnóstico mais preciso e estratificação de prognóstico de pacientes com LA, devem-se pesquisar mutações nos genes FLT3. Fisiologicamente, o receptor FLT3 participa da regulação da apoptose, da proliferação, de sobrevivência e da diferenciação celular. Quando o gene FLT3 sofre mutação, dá origem a um produto final modificado, ou seja, gera um receptor com alterações estruturais. A presença de mutações nesse gene é de prognóstico desfavorável, e a análise das mutações no gene FLT3 tem sido considerada como um fator de prognóstico relevante na decisão terapêutica de pacientes com LA. Dessa forma, é de extrema importância a análise das mutações no gene FLT3 (duplicação interna em tandem DIT e mutação pontual D835) como marcadores moleculares de prognóstico em pacientes com LA. Assim, o objetivo desse trabalho foi investigar a importância das mutações no gene FLT3 (DIT e D835) como marcadores moleculares para no prognóstico de pacientes com suspeita clínica de LA, antes da primeira terapia, atendidos, no período de janeiro de 2009 a dezembro de 2010, pelo Serviço de Hematologia do Hospital Universitário da Universidade Federal de Santa Catarina (HU-UFSC) e pelo Serviço de Oncologia do Hospital Infantil Joana de Gusmão (HIJG), ambos situados em Florianópolis, Santa Catarina. Para tanto, encaminharam-se as amostras de medula óssea (MO) ou de sangue periférico (SP) ao Laboratório de Oncologia Experimental e Hemopatias (LOEH) para investigação das mutações no gene FLT3 utilizando-se a reação em cadeia da polimerase (PCR). Dividiram-se os pacientes em dois grupos: pacientes com idade superior a 16 anos e pacientes com idade igual ou inferior a 16 anos. Para a análise estatística das variáveis numéricas, utilizou-se o teste t de Student e, para as variáveis nominais, o teste do qui quadrado. Para os dois tipos de variáveis analisados, o nível de significância determinado foi de 5% (P < 0,05). Os resultados mostraram que a mutação FLT3-DIT foi mais incidente em indivíduos com LMA com idade igual ou inferior a 16 anos, enquanto nos 10 indivíduos com LLA com idade superior a 16 anos a mutação FLT3- DIT foi rara. Quanto à mutação FLT3-D835, foi rara em indivíduos com idade superior a 16 anos. Constatou-se que as mutações no gene FLT3 (DIT e D835) não têm associação com os seguintes fatores prognósticos: idade, leucometria, níveis de LDH e marcação para CD34, como também para o gênero. A DIT no gene FLT3 parece anular o efeito de prognóstico favorável da t(15;17), além de parecer ter associação com vantagem de proliferação celular, mesmo em indivíduos com LPA. Houve uma associação estatisticamente significante entre a DIT no gene FLT3 e a ausência de remissão e óbito em pacientes com idade igual ou inferior a 16 anos. Esses resultados sugerem que a presença de FLT3-DIT é um fator de prognóstico desfavorável e independente, pois não possuiu relação com outros fatores prognósticos, devendo ser considerado como um marcador molecular no prognóstico de pacientes com suspeita clínica de LA e importante para a decisão terapêutica. / Acute leukemias (ALs) are a group of malignancies characterized by uncontrolled proliferation of hematopoietic cells, which are originated from mutations that can occur at different stages of differentiation of precursor cells, characterizing it as a highly heterogeneous disease. According to the classification of the World Health Organization (WHO) for malignancies of lymphoid and hematopoietic system, published in 2008, for a more precise diagnosis and prognostic stratification of patients with AL, the mutations in FLT3 gene should be investigated. Physiologically, the FLT3 receptor participates in the regulation of apoptosis, proliferation, survival and cell differentiation. When the FLT3 gene is mutated, it originates a modified final product, which means it generates a receptor with structural changes. The presence of mutations in this gene is an unfavorable prognosis, and the analysis of mutations in FLT3 gene has been considered an important prognostic factor in deciding the treatment of patients with AL. Thus, the analysis of mutations in FLT3 (internal tandem duplication - ITD - and D835 point mutation) is extremely important as molecular markers in the prognosis of patients with AL. Therefore, the purpose of this study was to investigate the importance of mutations in FLT3 gene (D835 and ITD) as molecular markers for prognosis of patients with clinical suspicion of AL, before the first therapy, who attended the Serviço de Hematologia do Hospital Universitário da Universidade Federal de Santa Catarina (HU-UFSC) and the Serviço de Oncologia do Hospital Infantil Joana de Gusmão (HIJG), both located in Florianópolis, Santa Catarina, in the period from January 2009 to December 2010. To this end, the samples of bone marrow (BM) or peripheral blood (PB) were forwarded to the Laboratório de Oncologia Experimental e Hemopatias (LOEH) for the investigation of FLT3 gene mutations using the polymerase chain reaction (PCR). The patients were divided into two groups: patients aged more than 16 years and patients aged 16 years or less. For statistical analysis of numerical variables, we used the Student t-test and for nominal variables, the chi square. For both types of variables analyzed, the level of significance was set at 5% (P < 0.05). The results showed that the mutation FLT3-ITD was more common in patients with AML aged 16 years or less, while in patients 12 with ALL aged more than 16 years, FLT3 mutation-ITD was rare. In the same way, the FLT3-D835 mutation was rare in individuals older than 16 years. It was found that mutations in the FLT3 gene (ITD and D835) are not associated with the following prognostic factors: age, WBC count, LDH levels and marking for CD34 and sex. The ITD in the FLT3 gene seems to nullify the effect of favorable prognosis of t(15;17) and seems to be associated with cell proliferation advantage, even in patients with ALL. There was a statistically significant association between the ITD in the FLT3 gene and the absence of remission and death of patients aged 16 years or less. These results suggest that the presence of FLT3-ITD is an unfavorable and independent prognostic factor since it did not seem to have a relationship with other prognostic factors. For this reason, it should be considered as a molecular marker for the prognosis of patients with clinical suspicion of AL and as an important factor in therapeutic decision.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Farmácia / Made available in DSpace on 2012-10-22T09:26:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 241453.pdf: 4399366 bytes, checksum: 63b09a17f59f70589c4547edbf37f5dc (MD5) / Polihidroxialcanoatos (PHAs) são poliésteres de hidroxiácidos estereoregulares encontrados em uma ampla variedade de bactérias, constituindo reserva de carbono e poder redutor para estes microorganismos. As suas características de biodegradabilidade e biocompatibilidade os tornam materiais promissores para o desenvolvimento de sistemas de liberação controlada de fármacos. Ibuprofeno (IBF) é um antiinflamatório não esteroidal (AINES) utilizado para o tratamento da osteoartrite e artrite reumatóide aguda e crônica. Este fármaco apresenta baixa meia vida biológica, necessitando de várias administrações e, portanto, é um bom candidato para a microencapsulação. Neste contexto, o objetivo deste trabalho foi desenvolver microesferas de IBF de liberação prolongada para a administração parenteral a partir dos PHAs, como o poli(3-hidroxibutirato) (P(3HB)) e seu copolímero poli(3-hidroxibutirato-co-3-hidroxivalerato) (P(3HB-co-3HV)). O perfil de liberação do IBF a partir das microesferas de P(3HB) e P(3HB-co-3HV) e de degradação das partículas foram avaliados e comparados com aqueles obtidos com as formulações de microesferas preparadas a partir do poli(ácido lático-co-glicólico) (PLAGA). A técnica de emulsão/evaporação do solvente foi utilizada para a preparação de microesferas, empregando-se o diclorometano e água como fase interna e externa, respectivamente. A proporção fármaco para polímero foi de 1:4 e 1:2. A eficiência de encapsulação e teor do IBF nas microesferas foi estimada após determinação da concentração do fármaco por espectrofotometria de absorção no ultravioleta a 265 nm. As microesferas foram caracterizadas quanto à morfologia das partículas, tamanho e distribuição granulométrica, porosidade, área superficial, tamanho e volume de poros. Partículas esféricas foram obtidas para todas as formulações testadas. Em contraste à superfície lisa das microesferas de PLAGA, as microesferas de PHAs apresentaram-se porosas. Igualmente, maiores valores de eficiência de encapsulação foram obtidos para as microesferas de PHAs, quando comparado com aqueles das microesferas de PLAGA. Os resultados obtidos por DSC e raio-x indicaram que o IBF encontra-se parcialmente disperso na forma molecular na matriz polimérica, quando a proporção de fármaco:polímero 1:4 foi empregada. Entretanto, as microesferas de PLAGA demonstraram ser amorfas, enquanto a natureza semicristalina foi verificada na matriz de PHAs. A liberação do IBF a partir das microesferas de P(3HB) e P(3HB-co-3HV) foi cerca de 69 e 58%, respectivamente, nas primeiras horas. O maior controle de liberação foi obtido com o uso do PLAGA. A porosidade e a localização do fármaco nas partículas pareceram ser os fatores responsáveis pela rápida liberação do IBF, a partir das microesferas de PHAs. Finalmente, a degradação in vitro das microesferas foi realizada em condições fisiológicas (pH 7,4) por 90 dias. O conjunto dos resultados obtidos no estudo de degradação indicou, sobretudo a partir da análise morfológica, DSC e medidas de pH do meio após incubação, que as microesferas de PLAGA sofreram maior degradação hidrolítica, sendo que a mesma foi acelerada pela presença do IBF. Apesar da CLAE ter indicado a formação de produtos de degradação do P(3HB) e P(3HB-co-3HV) em temperatura elevada, estes produtos não foram identificados após 90 dias de incubação das microesferas em tampão fosfato pH 7,4 a 37 oC, mesmo na presença do fármaco. Por outro lado, estudos de MEV sugeriram que regiões amorfas das microesferas de P(3HB) sofreram degradação, uma vez que grandes poros foram visualizados nas partículas. A incorporação de 5% de HV no copolímero não pareceu alterar o perfil de degradação das microesferas.