Orientador: Wilson Badiali Crocomo / Resumo: Com o objetivo de comparar a ocorrência de insetos relacionados à cultura do feijão cultivado no sistema orgânico e convencional, duas áreas de latossolo vermelho-amarelo, medindo 60x20m com 12000 plantas, foram cultivadas na Fazenda Experimental das Faculdades Integradas Cantareira, Mairiporã - SP, na época das águas e da seca. As comparações foram feitas através da geoestatística, dos índices faunísticos e do teste de Kruskal-Wallis. As áreas de cultivo orgânico receberam calagem, termofosfato, e adubação verde, (Avena strigosa e Lupinus albus, para a semeadura das águas e Cajanus cajan e Pennisetum glaucum para a semeadura da seca), semeada aos 150 dias, antes do plantio do feijão, incorporada ao solo na fase de florescimento, aos 120 dias. As áreas de cultivo convencional receberam calcário, herbicida pré-emergente, adubo na formulação 4-30-10, enxofre, boro granulado e adubação de cobertura com sulfato de amônio. Ambas as áreas foram conduzidas com capinas manuais, sem controle de pragas e doenças. Aos 15, 30 e 45 dias após a emergência das plântulas, foram avaliados o desenvolvimento vegetativo e a ocorrência de insetos; aos 30 e 45 dias o número de flores; aos 45 o de vagens; na colheita aos 90 dias, a matéria verde, o numero de grãos por planta e a produtividade. As avaliações foram feitas examinando-se uma planta de feijão em cada ponto de amostragem, demarcado através de grades amostrais, composta de 70 pontos espaçados de 4 x 3 m. Concluiu-se que 1. Os métodos estatísticos adotados possibilitam a comparação entre os sistemas de cultivo e épocas de semeadura; 2. Tanto o sistema de cultivo como a época de semeadura e o estágio de desenvolvimento das plantas interferem de maneira marcante na distribuição espacial e temporal dos insetos; 3. O feijão cultivado no sistema convencional... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: Aiming to compare the occurrence of insect species associated to bean crops in organic and conventional systems, two plots with 60m x 20m and 12,000 plants were established at the Experimental Farm of Faculdades Integradas Cantareira, Mairiporã - São Paulo, during the water and dry seasons. To the comparisons, geostatistic, faunistic index and Kruskal-Wallis test were used. The organic plots received calcareous term-phosphate and green fertilization (Avena strigosa and Lupinus albus to the water sowing and Cajanus cajan and Pennisetum glaucum to the dry sowing) 150 days before the bean sowing at the blooming time (about 120 days). The conventional plots received calcareous, herbicide before emergence, fertilization with 4-30-10 formulation, sulphur granulated boro and sulfate of ammonia. Both organic and conventional plots did not receive any pest or disease control but they had the weeds handily removed. At 15, 30 and 45 days after emergence, the vegetative development and the insect occurrence were evaluated; at 30 and 45 days the number of flowers; at 45 days the number of pods and, at the harvest time, 90 days, the green matter, the number of grain per plant and the yield productivity. The evaluations consisted in the examination of an only bean plant in each sampling point established by sampling grid composed by 70 points, distant 4m x 3m. It can be concluded that: 1- the adopted statistic methods can establish comparisons between the crop systems and sowing seasons; 2- the crop system, the sowing system as well as the fenological stage of plants can markedly interfere in the spatial and time distribution of insects; 3- during the water season, the conventional system showed larger number of insects from a few number of species and during the dry season, was the opposite; 4- the organic bean showed higher damage level caused by... (Complete abstract, click electronic address below). / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-05-06Bitstream added on 2014-06-13T19:59:33Z : No. of bitstreams: 1 rossi_r_me_ilha.pdf: 258420 bytes, checksum: 13f049e7df0e326e3eb030475ecbddb4 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O feijão é um alimento rico em proteínas, tendo o nitrogênio como o nutriente absorvido em maior quantidade. O manejo da adubação nitrogenada e de outras tecnologias, como a utilização de bioestimulantes, podem interferir na produtividade e na qualidade do feijão. Este trabalho teve como objetivo estudar o efeito de doses nitrogênio e de bioestimulante no desenvolvimento e produtividade do feijoeiro de inverno no sistema plantio direto. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados com 24 tratamentos e 4 repetições, constituído por quatro doses de nitrogênio em cobertura (zero, 35, 70 e 105 kg ha-1), utilizando como fonte a uréia, aplicadas na fase V3, três doses de bioestimulante utilizando um produto comercial contendo ácido índolbutírico - 0,005%, cinetina - 0,009% e ácido giberélico - 0,005% (zero, dose recomendada e 2 vezes a dose recomendada) aplicadas em dois modos distintos: aplicação única na fase V4-5 e parcelado nas fases V4-5 (1⁄2 da dose) e R5 (1⁄2 da dose). O estudo foi realizado em área experimental da Fazenda de Ensino, Pesquisa e Extensão pertencente à Faculdade de Engenharia - Campus de Ilha Solteira Unesp, localizada no município de Selvíria – MS, em experimentos nos anos de 2009 e 2010. O solo do local é um Latossolo Vermelho Distrófico, textura argilosa. O bioestimulante deve ser utilizado no feijoeiro de inverno irrigado na dose de 0,5 L ha-1 do produto comercial e a aplicação realizada de maneira parcelada com metade da dose no estádio V4-5 e o restante em R5 e, o feijoeiro irrigado responde a doses crescentes de nitrogênio em cobertura com aumento na produtividade de grãos até a dose utilizada de 105 kg ha-1 de nitrogênio / The bean is a food rich in protein, and nitrogen as the nutrient taken up in greater quantity. The management of nitrogen fertilization and other technologies, such as the use of plant growth regulators, may interfere on productivity and quality of common bean. This work aimed to study the effect of nitrogen and plant growth regulator in the development and grain yield of winter common bean in no till system. A randomized block design with 24 treatments and 4 replicates, consisting of four levels of nitrogen (zero, 35, 70 and 105 kg ha- 1 ), as urea, applied at V4-5 stage, three doses of growth regulators (zero, recommended level and 2 times the recommended dose) applied in two distinct modes: single application at the V4-5 stage and parceled out in phases being 1⁄2 level at V4-5 stage and the other 1⁄2 level at R5. The study was conducted at Experimental Station belonging to the Faculty of Engineering - UNESP Ilha Solteira Campus, located in Selvíria - MS, in experiments in the years 2009 and 2010. The soil is a Red Latosol. The average annual precipitation is 1,370 mm, the average annual temperature is 23.5 o C and relative humidity annual is around 70%. The plant growth regulator should be used in plants irrigated in winter, being 0.5 L ha-1 of the commercial product and the application performed in a split with half dose at stage V4-5 and the remainder in R5 and, the irrigated common bean responds levels of nitrogen with increasing in grain yield up to dose of 105 kg ha-1 of nitrogen

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2006. / Submitted by Érika Rayanne Carvalho (carvalho.erika@ymail.com) on 2009-12-01T01:14:58Z No. of bitstreams: 1 Janaina%20do%20Nascimento%20Lima%20Matias%20de%20Paula%20Dissertacao.pdf: 938650 bytes, checksum: ceb07c334e0caf8cec361835356eb0c4 (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2009-12-04T21:19:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Janaina%20do%20Nascimento%20Lima%20Matias%20de%20Paula%20Dissertacao.pdf: 938650 bytes, checksum: ceb07c334e0caf8cec361835356eb0c4 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-12-04T21:19:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Janaina%20do%20Nascimento%20Lima%20Matias%20de%20Paula%20Dissertacao.pdf: 938650 bytes, checksum: ceb07c334e0caf8cec361835356eb0c4 (MD5) Previous issue date: 2006-10-25 / Inibidores de α-amilase de plantas apresentam um grande potencial para uso biotecnológico, através de tranformação de plantas visando resistência a insetos- praga. Neste contexto, estudou-se o potencial inseticida do inibidor de α-amilase 0.53 sobre os insetos-praga de grãos armazenados de feijão, visando sua utilização em programas de melhoramento genético. Plantas de trigo foram escolhidas como fonte vegetal devido a presença de inúmeras isoformas de inibidores de α-amilases em suas sementes. Os inibidores de α-amilases, presentes em sementes de trigo (Triticum aestivum), foram purificados e caracterizados e o gene para o inibidor 0.53 foi isolado utilizando técnicas de RT-PCR, utilizando cDNAs como molde. A sequência para o inibidor 0.53 foi então subclonada no vetor de expressão pPICZαA (pFSP-pPICZαA-0.53) e a expressão da proteína recombinante foi realizada em células de levedura metilotrófica Pichia pastoris. Após estabelecimento das condições de expressão, a proteína recombinante, expressa e secretada no meio de cultura, foi purificada por HPLC (Cromatografia Líquida de Alta Performance). Ensaios in vitro utilizando as α-amilases dos insetos-praga: Acanthocelides obtectus, Zabrotes subfasciatus, Callosobruchus maculatus e a α-amilase pancreática de Porco (PPA), mostraram que a atividade desse inibidor é altamente dependente das condições de pH. Em pH 4,5, o inibidor 0.53 foi capaz de inibir unicamente as α-amilases dos diferentes insetos, não apresentando nenhuma atividade para a amilase de mamífero PPA. Porém, em pH 7,2, o inibidor recombinante 0.53 atuou unicamente sobre a PPA, inibindo cerca de 90% de sua atividade, não sendo ativo para α-amilases dos diferentes insetos alvo testados. Desta forma, o inibidor recombinante 0,53 poderá ser utilizado em diversos estudos de toxicidade em mamíferos, estudos complementares de interação molecular, a fim de verificar sua segurança alimentar e potencial uso biotecnológico. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / α-Amylase plant inhibitors exhibit a great potential for biotechnological use, using plants of transformation aiming resistance against insects-pest. This work studies the potential insecticidal effects of α-amylases inhibitor 0.53 against insects-pest in stored bean grains, and also the possibility of its use for the plant genetic improvement. Seeds from wheat plants were chosen as a vegetable source due to their presence of several α-amylases inhibitors isoforms. Firstly, the α-amylases inhibitors synthesized in wheat seeds (Triticum aestivum), were isolated, characterized and the gene encoding the 0.53 inhibitor isolated by RT-PCR techniques, using cDNAS as template. The 0.53 inhibitor coding sequence was then subcloned into the expression vector pPICZαA (pFSP-pPICZαA-0.53) and the recombinant protein expression was carried by metilotrofic yeast Pichia pastorisI cell. After the establishment expression conditions, the recombinant protein, secreted in the culture, medium was purified by HPLC (High Performance Liquid Chromatography). In vitro assays using α-amylases from the insect-pest: Acanthocelides obtectus, Zabrotes subfasciatus, Callosobruchus maculatus and α-amylase from pancreatic porcine (PPA), had shown that the activity of this inhibitor is highly dependent of the pH conditions. In pH 4,5, the 0.53 inhibitor was able capable to inhibit solely insects α-amylases, but showed no activity for PPA. Otherwise, in pH 7,2, 0.53 recombinant inhibitor act only against PPA, inhibiting about 90%, not being active for insects α-amylases tested. Due to the characteristics described above the 0.53 recombinant inhibitor could be used in several studies in mammals toxicity tests, complementary studies of molecular interaction, in order to verify its alimentary security and potential biotechnological use.

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-06-30T19:00:28Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_Tiago_Ribeiro_PPGBV_2012_final.pdf: 3752129 bytes, checksum: d31c37fe0117744549c86ef96e758fc6 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-30T19:00:28Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação_Tiago_Ribeiro_PPGBV_2012_final.pdf: 3752129 bytes, checksum: d31c37fe0117744549c86ef96e758fc6 (MD5) Previous issue date: 2012-02-27 / CNPQ / No gênero Phaseolus (Fabaceae) os estudos abordando a fração repetitiva de DNA do genoma ainda são poucos. A caracterização do DNA satélite khipu, inicialmente realizada no feijão comum (P. vulgaris), demonstrou que o mesmo poderia estar presente em outras espécies do gênero, provavelmente com bastante variação entre elas. Nesse trabalho, uma análise mais detalhada deste DNA satélite foi realizada, envolvendo o isolamento da sequência presente em diferentes espécies (P. leptostachyus, P. lunatus e P. microcarpus), mapeamento por hibridização in situ fluorescente (FISH) e Southern blot. Um coquetel de clones de khipu do feijão comum (khipu mix) hibridizados in situ sob 40% de estringência demonstrou a presença de sequências relacionadas a khipu na região subterminal dos cromossomos das outras espécies, com variação na quantidade e intensidade de terminais hibridizados. Fragmentos da sequência foram amplificados dos DNAs genômicos das três espécies utilizando primers específicos de regiões mais conservadas e ligados a vetores de clonagem. Quando mapeados por FISH, os clones obtidos demonstraram diferenças na marcação dependendo da espécie utilizada. O clone de P. lunatus (Plukhipu1), por exemplo, foi localizado em um par cromossômico em P. lunatus e P. leptostachyus, enquanto que em P. vulgaris o mesmo hibridizou em diversos pares. Análise baseada em máxima verossimilhança incluindo 68 clones de P. vulgaris, 30 de P. leptostachyus, nove de P. lunatus e 21 de P. microcarpus revelou um grande clado contendo a maioria dos clones de P. vulgaris e todos de P. lunatus. Enquanto as unidades de P. microcarpus e P. leptostachyus foram mais divergentes e ficaram separadas em diversos outros ramos. A hibridização Southern blot revelou uma unidade de repetição de 500 pb, com multímeros presentes em todas espécies. Em conjunto, os dados confirmam khipu como uma família diversa de DNA satélite subtelomérico presente em diversas espécies de Phaseolus. As diferenças observadas nos padrões de hibridização e tamanhos das unidades de repetição sugerem a presença de diferenças significativas desta sequência entre diferentes espécies do gênero. / In the genus Phaseolus (Fabaceae), studies about the repetitive fraction of its genome are still scarce. The characterization of the satellite DNA khipu, performed for the common bean (P. vulgaris), showed that it might be present in other species of the genus, probably with large variation among them. In the present work, a more detailed analysis of this satellite DNA was performed, including the isolation of this sequence from different species (P. leptostachyus, P. lunatus and P. microcarpus), localization by fluorescent in situ hybridization (FISH) and Southern blot hybridization. A mix of khipu clones from common bean hybridized in situ at low stringency (40%) showed the presence of khipu-like sequences on the subterminal region of the chromosomes from the three species, with variation in intensity and number of signals. Fragments of the sequence were amplified and cloned from P. leptostachyus, P. lunatus and P. microcarpus genomic DNAs using specific primers for more conserved regions. The obtained clones demonstrated differences in respect to their FISH patterns depending on the species. The clone from P. lunatus (khipuPlu1), for example, was only located on a chromosome pair in P. lunatus and P. leptostachyus, while in P. vulgaris the same clone hybridized to several chromosome pairs. Maximum likelihood unrooted dendogram including 68 clones from P. vulgaris, 30 from P. leptostachyus, nine from P. lunatus and 21 from P. microcarpus showed most of the clones from P. vulgaris and all from P. lunatus grouping in one larger clade. While those unit from P. microcarpus and P. leptostachyus were more divergent and split in several other branches. Southern blot pattern showed a khipu unit of ~ 500 bp, with presence of multimers in all species. Taken together, the present data confirm khipu as a diverse subtelomeric satellite DNA family present in several Phaseolus species. Differences in hybridization patterns and repeat unit sizes suggest the presence of relevant differences in this sequence among different species of the genus.

Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-07-31T22:22:37Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Nathália Gabrielle de Araújo Leite.pdf: 3449771 bytes, checksum: 57f0c1d013d2764d2dd9167e7a5ed56c (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-02T17:30:22Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Nathália Gabrielle de Araújo Leite.pdf: 3449771 bytes, checksum: 57f0c1d013d2764d2dd9167e7a5ed56c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-02T17:30:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Nathália Gabrielle de Araújo Leite.pdf: 3449771 bytes, checksum: 57f0c1d013d2764d2dd9167e7a5ed56c (MD5) Previous issue date: 2017-02-22 / FACEPE / feijão-caupi é amplamente cultivado em regiões áridas e semiáridas, locais onde a salinização dos solos constitui-se em um dos principais estresses à cultura. Dentre os métodos que visam reduzir os danos causados pela salinidade, a utilização de genótipos menos sensíveis se constitui como o melhor método para a solução do problema. Diante do exposto, o presente trabalho objetivou identificar as proteínas diferencialmente abundantes em genótipos de feijão-caupi durante o estresse salino, como ponto de partida para a identificação dos genes associados aos mecanismos de tolerância ao estresse, visando à obtenção de genótipos que associem características desejáveis com a menor sensibilidade à salinidade. Nesse sentido, sementes de cinquenta genótipos de feijão-caupi foram submetidas a tratamentos com diferentes concentrações de NaCl (0, 25, 50, 100 e 200 mM). Foram observadas alterações na taxa de germinação em função do aumento das concentrações de NaCl (sal). Dentre os genótipos avaliados, Maravilha, Paulistinha, Sempre Verde Baiano, e Sempre Verde Salgueiro demonstraram menor sensibilidade ao sal, enquanto BRS Pajeú, Mosqueado 383, Mut 300 gy, Mut 50 gy, e Pele de Moça foram os genótipos mais sensíveis ao sal. Esses genótipos, juntamente com o genótipo Pitiúba, foram novamente submetidos ao estresse salino nas cinco concentrações supracitadas, para realização da contagem de folhas, medição do comprimento caulinar, determinação da matéria seca e conteúdo iônico, assim como mensuração da condutividade elétrica do substrato, capacidade de troca catiônica e saturação de sódio. Os resultados indicam que o incremento na concentração de sal reduziu a quantidade de matéria seca, comprimento do caule e número de folhas em todos os genótipos avaliados, causando aumento no teor de íons, justificado pelos valores de condutividade elétrica do substrato, capacidade de troca catiônica e saturação de sódio. Sempre Verde Salgueiro foi o genótipo que demonstrou menor sensibilidade frente aos demais, enquanto que Mosqueado 383 foi selecionado como o genótipo de maior sensibilidade ao sal. Posteriormente, esses dois genótipos foram estressados com 100 mM de NaCl, para coleta das folhas, extração de proteínas totais, quantificação e identificação das proteínas diferencialmente abundantes, por cromatografia líquida acoplada ao espectrômetro de massas, seguido por comparação com o banco de dados disponível no NCBI (National Center for Biotechnology Information). A partir dessa avaliação, foi possível identificar 251 proteínas diferencialmente abundantes entre os tratamentos (0 mM - controle, e 100 mM de NaCl) e entre os genótipos avaliados. Dessa forma, é possível inferir sobre a participação direta de algumas dessas proteínas em vias metabólicas que possam estar relacionadas com os mecanismos de tolerância ao estresse salino em feijão-caupi. / Cowpea is widely cultivated in arid and semi-arid regions, places where salinization of soils is one of the major stresses for this culture. Among the methods utilized to reduce the damage caused by salinity, the use of less sensitive genotypes constitutes the best method to solve the problem. By the way, the present work aimed to identify differentially abundant proteins in cowpea genotypes during saline stress, as a starting point for the identification of genes associated with stress tolerance mechanisms, in order to obtain genotypes associating desirable traits with lowest sensitivity to salinity. In this sense, seeds of fifty cowpea genotypes were submitted to treatments with different concentrations of NaCl (0, 25, 50, 100 and 200 mM). Alterations in germination rates were observed due to the increasing of NaCl (salt) concentrations. Among the evaluated genotypes, Maravilha, Paulistinha, Sempre Verde Baiano, and Sempre Verde Salgueiro showed lower salt sensitivity, while BRS Pajeú, Mosqueado 383, Mut 300 gy, Mut 50 gy, and Pele de Moça were the most salt sensitive genotypes. Those genotypes, including Pitiúba genotype, were submitted again to saline stress using the five NaCl concentrations mentioned above, for leaf counting, measurement of stem length, determination of dry matter and ion content, as well as measurement of electrical conductivity of the substrate, cation exchange capacity and sodium saturation. The results indicate that the increase in salt concentration reduced the amount of dry matter, stem length and number of leaves in all evaluated genotypes, causing an increase in ion content, justified by the values of electrical conductivity of the substrate, cation exchange capacity and sodium saturation. Sempre Verde Salgueiro was the genotype that showed less sensitivity in relation to the others, while Mosqueado 383 was selected as the genotype of greater salt sensitivity. After, these two genotypes were stressed with 100 mM NaCl, to collect leaves, total protein extraction, quantification of proteins, and identification of differentially abundant proteins, by liquid chromatography coupled to the mass spectrometer, followed by comparison with the available database on NCBI (National Center for Biotechnology Information). Through this evaluation, it was possible to identify 251 differentially abundant proteins between the treatments (0 mM - control, and 100 mM NaCl) and among the evaluated genotypes. Thus, it is possible to infer about the direct participation of some of these proteins in metabolic pathways that may be related to the mechanisms of tolerance to saline stress in cowpea.

Orientador: Valdemiro Carlos Sgarbieri / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-21T04:31:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_MariaReginaBarbieriDe_D.pdf: 28183156 bytes, checksum: bf7a539a7aa882bc0e3dbf77dd91a0ab (MD5) Previous issue date: 1996 / Doutorado

Orientador: Jorge Vega / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-26T04:18:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rocha_AndreaBrondanida_D.pdf: 12961975 bytes, checksum: e6c9f9fee433398c749a5c14f022d096 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: As plantas podem ficar sistemicamente protegidas contra diversas moléstias através de uma inoculação prévia com patógenos causadores de necrose. Este fenômeno é conhecido como resistência sistêmica adquirida. O envolvimento de vários mecanismos na indução da resistência adquirida tem sido sugerido. Entre eles estão a resposta de hipersensibilidade, aumento na atividade da peroxidase, e o aumento no conteúdo de ácido salicílico nas folhas resistentes. Esta tese teve como objetivos caracterizar o fenômeno da resistência adquirida em plantas de feijoeiro Moruna nc inoculadas com o vírus VMFS-EUA, quanto à ocorrência da reação de hipersensibilidad e; efeito do número de lesões necróticas necessárias para a indução da resistência; efeito de condições ambientais (radiação e temperatura), duração do fenômeno e efeito da nodulação por Rhizobium tropici; avaliar os processos bioquímicos envolvidos na resistência adquirida, tais como peroxidação de lipídeos, atividade enzimáticas (catalase, peroxidase e fenilalanina amônia-liase) e o envolvimento do ácido salicílico; e estudar o efeito da aplicação de citocininas, ácido salicílico e benzotiadiazole sobre a resposta de hipersensibilidade e a expressão da resistência sistêmica adquirida. Para tanto, na maioria dos experimentos (exceção aos experimentos em que foi estudada a influência do número de lesões ocorridas na indução na expressão da resistência), o feijoeiro Moruna nc foi inoculado na folha primária com o vírus VMFS-EUA purificado, na concentração de 10 ~glmL. Geralmente a reação de hipersensibilidade ocorreu 72 horas após esta inoculação (inoculação de indução). A planta inoculada recebeu outra inoculação ( de desafio) com a mesma concentração de VMFS-EUA, na 23 folha trifoliolada. Quatro dias após esta última inoculação, foram realizados os ensaios enzimáticos e as outras determinações bioquímicas em ambas as folhas, induzi da e desafiada. Nos experimentos em que foi estudada a influência do número de lesões ocorridas na indução na expressão da resistência adquirida, verificou-se que o aumento na concentração viral de 1,7 para 20 JlglrnL durante a inoculação de indução resultou em menos lesões ocorridas no desafio, tanto nos experimentos realizados em casa de vegetação como em câmara de crescimento. As mudanças realizadas experimentalmente na radiação luminosa incidente não resultaram em alterações na expressão da resistência adquirida. No entanto, a aumento na temperatura de 20°C para 30°C causou uma redução no número e tamanho de lesões ocorridas no desafio. De um modo geral, a resistência adquirida teve duração de 13 a 22 dias após a indução da mesma. Não foi observado efeito da nodulação na expressão da resistência adquirida. Malondialdeído, um produto da peroxidação de lipídeos, esteve relacionado com a resposta de hipersensibilidade. Não foi observado aumento na atividade da enzima catalase em relação à ocorrência de resistência adquirida. A atividade da peroxidase aumentou de aproximadamente 3 para 15 unidades (expressas em Mbs4701min.g massa fresca) durante a expressão da resistência sistêmica adquirida. A enzima fenilalanina amônia-liase (P AL) também apresentou aumento de atividade nas plantas que estavam expressando resistência (uma média de 7 UA.2901h. g massa fresca x100. nas folhas não induzi das e 27 U.A.290/h.g massa fresca x 100 nas folhas com resistência adquirida). O conteúdo de ácido salicílico nasfolhas com resistência induzida aumentou mais de 30 vezes durante a ocorrência da resistência no feijoeiro Moruna nc. O tratamento de aplicação de citocinina permitiu maior replicação viral, monitorada pelo teste PT A-ELISA, tanto nas plantas de uma variedade que permite a invasão sistêmica (cultivar Jalo), como na variedade Moruna nc. Já as folhas tratadas com ácido salicílico apresentaram redução na replicação viral. A aplicação do ácido salicílico induziu resistência sistêmica a partir de doze horas após sua aplicação, evidenciada pela redução de 15lesõeslcm2 de folha, no controle, para 2 lesõeslcm2 de folha nas folhas tratadas. O benzotiadiazole (sob a forma do produto comercial BION), produto indutor de resistência análogo ao ácido salicílico, induziu resistência nos feijoeiros quando aplicado nas doses de 2,5 e 5 g/100L. Doses maiores do produto causaram sintomas de toxidez nas plantas. Peroxidase teve sua atividade aumentada nas plantas tratadas com o produto, mas a enzima P AL não apresentou tal comportamento. O produto conferiu resistência às plantas durante o período de nove dias. O trabalho permite concluir que o número e tamanho das lesões causadas pelo VMFS EUA na indução foram afetados pela temperatura, e foram fatores determinantes para a ocorrência da resistência adquirida. As enzimas peroxidase e P AL foram associadas aos processos bioquímicos que possibilitaram a ocorrência da resistência sistêmica. O ácido salicílico também esteve envolvido na expressão de resistência sistêmica adquirida em plantas de feijoeiro Moruna nc inoculadas com VMFS-EUA / Abstract: Plants can be systemically protected against diseases by prior inoculation with necrotizing pathogens or physiologicallbiochemical stresses. This phenomenon has been tenned systemic acquired resistance (SAR). Several mechanisms have been suggested to contribute to plant induced resistance. They inc1ude the hypersensitive response (HR), enhanced systemic extracellular peroxidase activity, and the involvement of salicylic acid. The purposes of this work were to characterize SAR in Moruna bean inoculated with Southern Bean Mosaic Vírus (SBMV) in relation to the HR occurrence; study the effect of lesion number necessary to induce SAR; study the effects of light radiation and temperature; evaluate time extension and effect of Rhizobium tropici nodulation; study biochemical processes involved with SAR, such as lipid peroxidation, enzymatic activities (catalase, peroxidase, and P AL) and the involvement of salicylic acid; and finally study the effects of cytokinin, salicily acid and benzothiadiazole application in the HR and SAR expression. In most of the experiments (except for those where the effect of lesion number necessary to induce SAR was studied) Moruna bean was inoculated on the primary leaves with purified SBMV at the concentration of 1 O ~g/rnL. lt usually showed HR 72 hours after this inoculation. Inoculated plants were challenged with the same concentration of SBMV on the second trifoliate leaf. Four days after challenge, enzymatic assays and other biochemical assays were performed on both induced and challenged leaves. In the experiments where the effect of lesion number necessary to induce SAR was studied, increasing SBMV concentration ftom 1.7 to 20 ~glmL as the inducing inoculum resulted in the development of fewer lesions at cha1lenge in both greenhouse and growth chamber experiments. Changes in incident light radiation did not modify the pattem of SAR expression, but increase of temperature ftom 20°C to 30°C caused a reduction in both number and lesion size at challenge. In general, SAR was expressed during 13 to 22 days. No nodulation etfects were observed on the expression of SAR. Malondialdehyde, a product oflipid peroxidation, was associated with HR. No changes in catalase activity were observed in relation to SAR. Peroxidase activity increased ftom approximately 3 to 15 units (expressed in ~AbS4701min.g ftesh weight) during SAR expression. Phenylalanine ammonia-Iyase (P AL) also showed enhanced activity in the induced leaves (an average of7 U.A.2901 h. g ftesh weight xl00 in non-induced leaves, and 27 U.A.2901 h. g ftesh weight x 100 in SAR expressing leaves). Salicylic acid content on the induced leaves increased up to 30 fold during SAR expression in Moruna bean. Leaves treated with cytokinin showed increased virus replication, measured by PT A ELISA, both for plants that permit systemic spread (Jalo) as for Moruna nc. On the other hand, leaves sprayed with salicylic acid presented less virus replication. Treatment with salicylic acid induced systemic resistance after 12 hours, showing a reduction ftom 15 lesions/cm2 (control) to 2lesionslcm2 (treated leaves). Benzothiadiazole (which commercial product is called BION), an analog of salicylic acid, induced resistance in bean when it was applied at 2.5 and 5 g/100 L. Higher amounts of this product were toxic to the plants. Peroxidase activity was higher in plants treated with BTH than in the control, but PAL did not show this increase in activity. Plants treated with BTH remained resistant to SBMV during 9 days. We conclude that number and lesion size caused by SBMV at induction were atfected by temperature, and were important for SAR occurrence. Extracellular peroxidase and P AL were associated with the biochemica1 processes leading to resistance. Salicylic acid was also related to induced resistance ofMoruna bean plants inoculated with SBMV / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal

Orientador: Sylvio Luis Honorio / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Agricola / Made available in DSpace on 2018-07-26T06:41:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Linares_JussaraBerthoFantinatti_M.pdf: 382992 bytes, checksum: be93e67d3f02ae20ea77d906dae46632 (MD5) Previous issue date: 1999 / Mestrado

Orientador: Sandra Cristina dos Santos Rocha / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-25T03:02:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_CarlosAlbertode_M.pdf: 4234836 bytes, checksum: f6dc8ded4491e6573e188a473cc93888 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: A secagem de grãos consiste em retirar parte da água existente no produto de modo a diminuir seu teor de umidade, reduzindo a atividade biológica, crescimento de fungos, ataque de microorganismos e insetos, e possibilitando o seu armazenamento por longos períodos de tempo. O feijão comum (Phaseolus vulgaris L.) é um grão de elevado teor nutritivo, principalmente com relação à quantidade de proteínas, ferro e potássio, além de ser uma fonte de carboidratos, lipídios, fibras e vitaminas hidrossolúveis. A umidade do feijão recém colhido é demasiadamente alta para boas condições de conservação e armazenamento, necessitando, passar por um processo de secagem, antes da embalagem. Este trabalho teve como objetivo estudar e analisar o processo de secagem do feijão em leito de jorro, escala laboratorial, com condições operacionais contínuas e intermitentes quanto ao aquecimento e ao regime fluidodinâmico, do ar de secagem. Os experimentos em regime intermitente contemplaram dois tipos de regime: leito de jorro/leito fixo e leito de jorro/descanso. Uma montagem em escala de laboratório e operada em batelada foi utilizada, contendo um secador construído em acrílico, com a base cônica e a coluna cilíndrica. Para a obtenção dos dados experimentais utilizou-se a técnica de planejamento fatorial a 2 níveis, sendo avaliadas as influências das seguintes variáveis de processo: temperatura do ar de secagem, com valores de 80 e 60°C, umidade inicial dos grãos, com valores de 30 e 20%b.s., e tempo de intermitência da fonte de aquecimento e/ou fornecimento de ar, com valores de 40 e 20 minutos. Foram realizados dezesseis experimentos de secagem intermitente e obtidas as curvas de secagem, as curvas de taxas de secagem, a cinética de secagem, a variação da temperatura do grão e a análise da eficiência energética do processo. Os resultados obtidos foram comparados com os resultados da secagem do mesmo material, em condições contínuas do ar, ou seja, em leito de jorro durante todo o período de secagem. A comparação demonstrou que o produto obtido com secagem intermitente atende ao nível exigido de qualidade quanto à umidade final e temperatura do grão, para a faixa experimental dos parâmetros de processo investigadas. A análise energética do processo indica resultados promissores de melhora na eficiência de secagem para as condições intermitentes, principalmente trabalhando-se com leito de jorro/descanso, ou seja, intermitência com interrupção no suprimento de ar ao leito / Abstract: The drying of grains consists on removing part of the water ITomthe product providing a decrease in its moisture content, and thus reducing biologica1 activity, groth of fungus, attacks by microorganisms and insects, with allows the grains storage for long periods. Beans, type Phaseo/us vu/garis L.,have a high nutrition value, specially with a relation to quantify of proteins, iron and potassium. This type of the grains is also a carbohidrate, lipids, fibers and vitamins source. The moisture content of the post harvest bean is toa high to good conditions of conservation and storage. The objective of this work was to study and analyse the drying ofbeans in a spouted bed, laboratory scale, in continuous and intermitent conditions of the drying air. Intermitence was applied in the heating supply to the bed and in the fluid-dynamic regime. The intermitent drying experiments were conducted in different conditions: spouted bed/fixed bed (intermitence in the dynamic regime) and spouted bed/"rest" (intermitence in the air supply). The dryer was made in plexyglass with a conical base and a cylindrical colunm. A 23 factorial planning technique was applied to the experimental data and the variables analysed were: air temperatures of 60°C and 80°C, initial moisture contents of 20 and 30% db, and intermitence of heating supply and/or air supply of20 and 40 minutes. For 16 experimental runs the drying curves, drying rates and grain temperature curves were obtained. And the drying kinetics and the energetic efficiency of the dryng processes were analysed. The results were compared to the ones obtained with continuos conditions of the drying air (spouted bed drying without intermitence). The results showed that the product obtained with intermitent drying attains the required quality for final moisture content and grains temperature, for the experimental conditions investigated. The energetic evaluation indicated satisfatory and improved results for the intermitent drying, mostly in the experiments of spouted bed/"rest" / Mestrado / Engenharia de Processos / Mestre em Engenharia Química

Orientadores: Luiz Gonzaga Santoro, Paulo Arruda / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-25T02:29:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lima_SuzanaTellesdaCunha_D.pdf: 1684860 bytes, checksum: 7f7eca120c793c7bfa6bd13bb0f72b16 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: A via de degradação da lisina em plantas é catalizada pela enzima bifuncional lisina cetoglutarato redutase (LKR) / sacaropina desidrogenase (SOH). A LKR condensa lisina e a-cetoglutarato em sacaropina usando NAOPH como cofator e a SOH converte a sacaropina em a-aminoadipato-õ-semialdeido e ácido glutâmico, usando NAO+ como cofator. No presente trabalho foi demonstrado, em Phaseo/us vu/garis, a participação desta enzima no catabolismo de lisina. A atividade foi medida em diferentes tecidos desta espécie. O hipocótilo apresentou maior atividade específica em plantas estioladas, seguidas pela folha, vagem e raiz, com valores muito inferiores. Sementes e cotilédones não demonstraram presença mensurável da enzima. A LKRlSOH também foi encontrada em plântulas de feijão carioca 80 crescidas in vitro à partir de sementes cujo cotilédone foi retirado previamente. Usando o sistema in vitro, a resposta enzimática à adição de lisina no meio de crescimento foi testada, demonstrando que o substrato não causa alterações na atividade. A precipitação de proteínas do tecido de hipocótilo em concentrações crescentes de PEG 8000 revelou dois platõs de atividade, levantando a hipótese de haver duas isoformas da enzima. Essa possibilidade foi reforçada posteriormente devido à respostas diferentes à inibidores de fosfatase, os quais revelaram que a LKRlSOH em feijão é uma fosfoproteína, assim como já foi observado em outras plantas. A enzima do hipocótilo foi isolada por métodos cromatográficos, indicando ser um polipeptídeo bifuncional. No entanto, dependendo do procedimento de purificação, a enzima pode eluir como um monõmero de 94kOa, contendo apenas a atividade da SOH, ou como um dímero de 190kOa, com ambas atividades eluindo conjuntamente. As condições de iluminação durante o crescimento da planta revelaram exercer influência na atividade da LKRlSOH / Abstract: The pathway of Iysine catabolism in plants is catalyzed by the bifunctional enzyme lysine ketogltutarate reductase (LKR) /saccharopine dehydrogenase (SOH). LKR condenses lysine and "alfa" ketoglutarate into saccharopine, using NAOPH as a cofactor and SOH converts saccharopine into a-aminoadipate õ-semialdehyde and glutamic acid, using NAO+ as a cofactor. In the present work it was demonstrated, in Phaseolus vulgaris , the participation of this enzyme in lysine catabolism. The activity was measured in different tissues from this species. The hipocotyl presented the highest specific activity in etiolated plants, followed by the leaf, pod and root, with much lower values. Seeds and cotyledons did not present any measurable activity. LKRlSOH was also found in carioca 80 seedlings grown, in vitro, from seeds whose cotyledon was previously removed. Using the in vitro system, the response to Iysine in the growing medium was tested revealing that the substrate didn't result in any change in enzyme activity. The precipitation of proteins from hipocotyl tissue with increasing concentrations of PEG 8000 revealed two p/atos of enzyme activity, raising the hypothesis that two isoforms of this enzyme are present. This possibility was subsequently reinforced due to different responses to phosphatase inhibitors, which revealed that LKRlSOH in P. vulgaris is a phosphoprotein, as observed with other plants. The hipocotyl enzyme was isolated by chromatographic methods, showing it to be a bifunctional polypeptide. However, depending on the purification procedure, it may elute as a monomer of 94 kOa containing only SOH activity, or as a dimer of 190 kOa where both activities elute together. Light conditions during plant growth were shown to influence the activity of LKRlSOH / Doutorado / Biologia Vegetal / Doutor em Ciências