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Celulases de fungos endofíticos: estudo da produção por fermentação submersa e aplicação na sacarificação da palha de cana-de-açúcar / Endophytic fungal cellulases: study of the production by submerged fermentation and application in saccharification of sugarcane strawTartarine, Naiani 30 July 2018 (has links)
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Dissertação Naiani Tartarine. Versão Final. 08-08-2018.pdf: 1927524 bytes, checksum: 255d76b50d4bdc679889756ec1ed3f76 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Carolina Gonçalves Bet null (abet@iq.unesp.br) on 2018-08-09T17:51:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2018-07-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Celulases microbianas têm sido empregadas na sacarificação de materiais lignocelulósicos para a obtenção de glicose, visando a produção de etanol celulósico. Entretanto, o custo dessas enzimas encarece o processo, e por isso a produção das mesmas a partir de fungos filamentosos cultivados em materiais lignocelulósicos, substratos de baixo custo, amplamente disponíveis e indutores da síntese enzimática, torna-se uma boa opção. Neste trabalho, com o objetivo de melhorar a produção de celulases através de metodologias de planejamento de experimentos, foram utilizados dois fungos endofíticos, cultivados por fermentação submersa (FSbm), usando como substratos o farelo de soja e a palha de cana de açúcar pré-tratada hidrotermicamente, cedida pela empresa GranBio, em cultivos isolados e co-cultivos, agitados. As atividades máximas obtidas nos extratos enzimáticos produzidos por planejamento experimental foram de 3,77 U/mL e 3,66 U/mL de endoglucanase, e 18,8 U/mL e 17,5 U/mL de β-glicosidase, no co-cultivo dos fungos Botryosphaeria sp. AM01 e Saccharicola sp. EJC04, e no cultivo isolado de Botryosphaeria sp. AM01, respectivamente. As condições ótimas de atividade das enzimas endoglucanase e β-glicosidase do melhor extrato foram pH 5,5 e 60 ºC. Estas enzimas foram estáveis quando incubadas por 24 horas em pH 5,0 e 5,5, e menos de 20% da atividade de ambas foi perdida entre 35 e 55 ºC. Os ensaios de inibição por glicose mostraram que a β-glicosidase tem sua atividade reduzida proporcionalmente ao fornecimento deste açúcar, porém, mesmo com a máxima quantidade de glicose fornecida (12 mmol/L), a atividade relativa mostrou-se mediana (64 %). Em relação à influência do etanol, a presença de 5 e 10% deste álcool aumentou em 4 e 5 %, respectivamente, a atividade enzimática de β-glicosidase, ocorrendo inibição em concentrações superiores. Em relação à sacarificação das palhas de cana, as maiores concentrações de glicose foram obtidas quando utilizaram-se a palha submetida a pré-tratamento hidrotérmico ácido seguido de alcalino (3,29 mg/mL) e a palha pré-tratada hidrotermicamente cedida pela empresa GranBio (2,66 mg/mL). / Microbial cellulases have been used in the saccharification of lignocellulosic materials to obtain glucose, aiming to produce cellulosic ethanol. However, the cost of these enzymes makes the process expensive, so their production from filamentous fungi grown in lignocellulosic materials, low-cost and widely available substrates and inducers of enzymatic synthesis, is a good option. In order to improve cellulase production through experiment planning methodologies, two endophytic fungi, were cultivated by submerged fermentation (FSbm). Soybean meal and hydrothermally pretreated sugarcane straw, provided by GranBio, were used as substrate, in agitated isolated cultures and co-cultivations. The maximal activities obtained in the enzymatic extracts produced by the experimental design were 3.77 U/mL and 3.66 U/mL endoglucanase and 18.8 U/mL and 17.5 U/mL β-glycosidase in the co-cultivation of the fungi Botryosphaeria sp. AM01 and Saccharicola sp. EJC04, and in the isolated cultivation of Botryosphaeria sp. AM01, respectively.. The optimal activity conditions of the endoglucanase and β-glucosidase enzymes from the best selected extract were pH 5.5 and 60 ° C. These enzymes were stable when incubated for 24 hours at pH 5.0 and 5.5, and less than 20% of the activity of both of them was lost at 35-55 °C. The glucose-inhibition assays showed that β-glucosidase activity was reduced proportionally to the supply of this sugar, but even with the maximum amount of glucose supply (12 mmol/L), the relative activity was shown to be median (64 %). Regarding the influence of ethanol, the presence of 5 and 10% of this alcohol increased in 4 and 5%, respectively, the enzymatic activity of β-glucosidase, occurring inhibition in higher concentrations. Regarding the saccharification of sugarcane straw, the highest glucose concentrations were obtained with the straws that were submitted to the acid hydrothermal treatment followed by the alkaline treatment (3.29 mg/mL) and the hydrothermally pretreated straw provided by the company GranBio (2.66 mg/mL).
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Capacidade de linhagens de Saccharomyces cerevisae em inibir a ação de Brettanomyces custersianus durante o processo de elaboração de vinho / Capacity strains of Saccharomyces cerevisiae to inhibit the activity Brettanomyces custersianus during the winemakingPoletto, Carolina Madalozzo January 2009 (has links)
Leveduras do gênero Dekkera/Brettanomyces causam sérios problemas ao vinho, afetando as propriedades sensoriais do produto final. O objetivo deste trabalho foi investigar a capacidade de duas linhagens de Saccharomyces cerevisiae em inibir a atividade de Brettanomyces custersianus na vinificação em tinto e durante a fase inicial de envelhecimento, assim como investigar a capacidade deste microrganismo (Br. custersianus) em inibir a atividade metabólica de Sacch. cerevisiae. Foram realizadas vinificações com 4 inoculações diferentes. O tratamento 1 (T1) foi inoculado com a linhagem neutra Sacch. cerevisiae EMBRAPA 1vvt/97, T2-Sacch. cerevisiae EMBRAPA 91B/84 killer, T3-EMBRAPA 1vvt/97 e Br. custersianus, T4-EMBRAPA 91B/84 killer e Br. custersianus e T5-Br. custersianus. Também foram realizados, testes de velocidade fermentação, inibição ou estímulo do metabolismo e tolerância ao SO2. Durante a fase tumultuosa realizaram-se análises de açúcares redutores totais e etanol. Observou-se que durante todo o período da fermentação, o consumo de substrato de T1 e T2 foi mais rápido, do que em T3 e T4. A velocidade de fermentação da Br. custersianus (T5) foi muito inferior às demais linhagens. Mesmo com uma velocidade de crescimento baixa, a linhagem contaminante quando inoculada juntamente com Sacch. cerevisiae retarda a fermentação tumultuosa, podendo comprometer o processo de vinificação. Br. custersianus (T5) não teve sua atividade metabólica afetada na presença de 125 mg/L de SO2, logo conclui-se que as concentrações normalmente utilizadas no processo de vinificação, 30 a 70 mg/L, não seriam suficientes para impedir sua atividade. / Dekkera/Brettanomyces yeasts cause serious problems to the wine, affecting the sensorial properties of the final product. The objective of this work was to investigate the capacity of two strains of Saccharomyces cerevisiae in inhibiting the activity of Brettanomyces custersianus in the vinification in red wine and during the early stage of aging of the wine, as well as to investigate the ability of this microorganism (Br. custersianus) to inhibit metabolic activity of Saccharomyces cerevisiae. Vinifications were performed with 4 different inoculations. Treatment 1 (T1) was inoculated with the neutral strain Sacch. cerevisiae EMBRAPA 1vvt/97, T2-killer Sacch. cerevisiae EMBRAPA 91B/84, T3-EMBRAPA 1vvt/97 and Br. custersianus, T4-EMBRAPA 91B/84 and Br. custersianus and T5-Br. custersianus. There were also carried out tests of speed fermentation, inhibition or stimulation of metabolism and tolerance to SO2. During the tumultuous phase analysis was performed of total reducing sugars and ethanol. It was observed that throughout the period of fermentation, the substrate consumption in T1 and T2 was faster than in T3 and T4. The speed of fermentation of Br custersianus (T5) was much lower than the other strains. Even with a low rate of growth, the strain contaminant when inoculated with Saccharomyces cerevisiae. delays the tumultuous fermentation, being able to compromise the vinification process. Br. custersianus (T5) did not have its metabolic activity affected in the presence of 125 mg/L of SO2, then it was concluded that the concentrations normally used in the vinification process, 30 to 70 mg/L, would not be enough to prevent their activity.
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Avaliação do padrão de identidade e qualidade de leites fermentados probióticosLago, Andrea Marta de Sena 05 March 2013 (has links)
76 f. / Submitted by Cynthia Nascimento (cyngabe@ufba.br) on 2013-03-05T11:00:02Z
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Andrea Marta de Sena Lago.pdf: 658157 bytes, checksum: 9ddf5fd0a8d857f2e11b4a3a36e1ca53 (MD5) / Approved for entry into archive by Alda Lima da Silva(sivalda@ufba.br) on 2013-03-05T21:02:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1
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Andrea Marta de Sena Lago.pdf: 658157 bytes, checksum: 9ddf5fd0a8d857f2e11b4a3a36e1ca53 (MD5) / O presente estudo objetivou a avaliação de cinco diferentes marcas de leites
fermentados comerciais, com e sem alegação funcional, em duas mensurações (no
início e no final do prazo de validade). Foram avaliados os efeitos do
armazenamento sobre os Lactobacilos, pH, acidez e a presença de contaminantes.
Foram avaliados ainda, os rótulos dos produtos e comparados quanto aos
parâmetros das legislações brasileiras. As determinações físico-químicas realizadas
foram: gordura, proteína, acidez e pH. Em relação às análises microbiológicas foi
realizada a contagem de coliformes totais e termotolerantes, lactobacilos, bolores e
leveduras. Os resultados obtidos demonstraram que, durante o armazenamento,
houve alterações físico-químicas e microbiológicas dos produtos. Observou-se
redução de até um ciclo logarítmico na população de lactobacilos, provavelmente
devido as condições de armazenamento (tempo e temperatura) e as variações de
pH e acidez. Ainda assim, todas as contagens mantiveram-se dentro dos padrões
estabelecidos. Os rótulos dos leites fermentados investigados ainda não se
adequaram as exigências da ANVISA (Agência Nacional de Vigilância Sanitária). / Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Farmácia. Salvador-Ba, 2012.
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Produção de β-galactosidase por kluyveromyces lactis NRRL Y1564 em soro de leite e imobilização em quitosana / Production of β-galactosidase from kluyveromyces lactis NRRL Y1564 in whey and immobilization in chitosanFreitas, Maria de Fátima Matos de 28 February 2013 (has links)
FREITAS, M. F. M. de. Produção de β-galactosidase por Kluyveromyces lactis NRRL Y1564 em soro de leite e imobilização em quitosana. 2013. 100 f. Dissertação (Mestrado em Engenharia Química) - Centro de Tecnologia, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by Marlene Sousa (mmarlene@ufc.br) on 2013-04-29T13:54:25Z
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Previous issue date: 2013-02-28 / In this work, the enzyme β-galactosidase which catalyzes the hydrolysis of lactose to glucose and galactose, was produced by cultivating the micro-organism Kluyveromyces lactis NRRL Y1564 in whey supplemented with yeast extract. The enzyme is an intracellular metabolite, the release enzyme is very important, therefore were studied various chemical and mechanical methods of extraction and stirring with glass beads, sonication, addition of ethanol and toluene, noting also their effects on enzymatic activity. Subsequently, trials were carried out to study the influence of temperature (30, 34, 37 and 40 ° C) in the production of the enzyme from the cheese whey. In the enzyme extraction, using glass beads by a vórtex was more efficient method compared to others evaluated. The enzyme not presented inhibited or denatured when incubated with ethanol, toluene or ethanol-toluene. The optimum temperature for enzyme production by K. lactis NRRL Y1564 was 30 °C with enzymatic activity of 4418.37 U/g of cells at 12 h of fermentation. The enzyme produced was immobilized on chitosan 2.0% w/v. Different activation protocols using glutaraldehyde, epichlorohydrin or glycidol were evaluated. Was also studied, the contact time the enzyme-carrier (3, 5, and 10 hours) to obtain a biocatalyst to produce high yield, recovered activity and half-life in order to hydrolysis of lactose in batch reactor and fixed bed. The influence of temperature and pH on the hydrolysis of lactose was evaluated using as substrate a synthetic solution (lactose 5.0% (w/v) in potassium phosphate buffer 100 mM with 0.1 mM MnCl2) and skimmed milk containing 4.3% w/v lactose. The support shows better results in the parameters of immobilization was chitosan 2% actived with glutaraldehyde and contact time of 5 hours. The biocatalyst produced in this study showed a stability factor of 17.37 and a storage stability of 100% when stored at 4 °C for 90 days. Temperature optimum hydrolysis of lactose was 40 °C and the optimal pH 7.0. The conversion of lactose to 40 °C for this derivative (3.0 U/g) was on average 53% in 10 cycles (consecutive batches). In batch reactor, the conversion to glucose by the hydrolysis of lactose using synthetic solution was approximately 86% for the soluble enzyme (3.8 U/mL) and 83% of the immobilized enzyme (3.8 U/g). The conversion obtained in the hydrolysis of skim milk was 17% for the soluble enzyme and 20% for the immobilized enzyme. / Neste trabalho, a enzima β-galactosidase, que catalisa a hidrólise da lactose em glicose e galactose, foi produzida pelo cultivo do micro-organismo Kluyveromyces lactis NRRL Y1564 em soro de leite suplementado com extrato de levedura. A enzima é um metabólito intracelular, sendo a liberação da enzima para o meio uma condição essencial, por isso estudaram-se diferentes métodos químicos e mecânicos de extração como, agitação com pérolas de vidro, ruptura em ultrassom com pérolas de vidro, adição de etanol e tolueno, observando também, seus efeitos na atividade enzimática. Posteriormente, realizaram-se ensaios para estudar a influência da temperatura (30, 34, 37 e 40 °C) na produção da enzima a partir do soro de queijo. Na extração da enzima, o uso de esferas de vidro em vórtex foi o método mais eficiente quando comparado com os outros avaliados. A enzima, não sofreu inibição ou desnaturação quando incubadas com etanol, tolueno ou etanol-tolueno. A temperatura ótima de produção da enzima por K. lactis NRRL Y1564 foi 30 °C, com atividade enzimática de 4418,37 U/g de células em 12 h de fermentação. A enzima produzida foi imobilizada em quitosana 2,0% m/v. Diferentes protocolos de ativação usando glutaraldeído, epicloridrina ou glicidol foram avaliados. Estudou-se também, o tempo de contato enzima-suporte (3, 5 e 10 horas) a fim de se obter um biocatalisador que apresentasse alto rendimento, atividade recuperada e tempo de meia-vida, visando a hidrólise da lactose em reator batelada e leito fixo. A influência da temperatura e do pH na hidrólise da lactose foi avaliada, usando como substrato uma solução sintética (lactose 5,0% (m/v) e leite desnatado, contendo 4,3% m/v de lactose. O suporte que apresentou melhores resultados nos parâmetros de imobilização foi a quitosana 2% reticulada com glutaraldeído no tempo de imobilização de 5 horas. O biocatalisador produzido nesse estudo apresentou um fator de estabilidade de 17,37 vezes maior que a enzima solúvel, com uma estabilidade de armazenamento de 100% quando armazenada a 4 °C por 90 dias. A temperatura ótima de hidrólise da lactose foi de 40 °C e o pH ótimo foi 7,0 . A conversão da lactose a 40 °C para este derivado (3,0 U/g) foi em média 53% em 10 ciclos (bateladas consecutivas). Em reator batelada, a conversão em glicose a partir da hidrólise da lactose, usando solução sintética, foi aproximadamente 86 % para a enzima solúvel (3,8 U/mL) e 83 % para a enzima imobilizada (3,8 U/g). A conversão obtida na hidrólise do leite desnatado foi de 17 % para a enzima solúvel e 20 % para a enzima imobilizada.
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Desenvolvimento de fermento para produção de hidromel / Leaven development for mead productionSilva, Mayara Salgado 01 November 2016 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-03-24T18:27:50Z
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Previous issue date: 2016-11-01 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / O objetivo deste trabalho foi o isolamento de linhagens de leveduras a partir de produtos de abelhas nativas e exóticas, para tanto linhagens de leveduras foram isoladas a partir de méis e pólen apícola de abelhas Tetragonisca angustula (Jataí), Nannotrigona testaceicornis (Iraí) e Apis mellifera. Ao todo 19 leveduras foram isoladas, das quais 9 foram identificadas como Starmerella meliponinorum, 1 Papiliotrema flavescens, 2 Rhodotorula mucilaginosa, duas Candida apícola e 5 como Saccharomyces cerevisiae. Estas linhagens foram submetidas a estresse de 5% (v/v) de etanol e 20% (m/v) de glicose. Sete linhagens foram selecionadas e testadas quanto à tolerância a diferentes concentrações de glicose, etanol e metabissulfito de sódio, das quais selecionou-se JP14, IM8 e IP9, identificadas como S. cerevisiae, para produção de bebidas. Estas linhagens foram testadas em temperaturas de 15, 20, 25 e 30 oC, onde JP14 mostrou-se aptas para fermentações em temperaturas inferiores, e a temperatura de 20 oC foi caracterizada como ideal e comum às três linhagens, proporcionando um hidromel de menor acidez volátil, maior consumo de açúcares e maior teor alcoólico. Com a temperatura definida, iniciou-se a fermentação do mosto que durou 35 dias seguidos por 35 dias de maturação, onde determinou-se consumo de açúcares, contagem de leveduras, turbidez, teor alcoólico, acidez total, volátil e fixa, e compostos voláteis. O melhor tempo de maturação foi de 28 dias. Os 3 hidroméis apresentaram perfil de compostos voláteis diferentes, e após a análise sensorial exibiram pontuações que variaram entre “gostei ligeiramente” e “gostei moderadamente”, entretanto os provadores não identificaram diferença entre eles. Assim foi possível desenvolver com sucesso fermentos a partir de linhagens de S. cerevisiae isoladas de produtos de abelhas sem ferrão para produção de hidromel, consideradas seguras na produção de bebidas. / The objective of this study is isolation of yeast strains from products of exotic and native bees. Yeast strains have been isolated from honey and bee bread of Tetragonisca angustula (Jataí), Nannotrigona testaceicornis (Iraí) and Apis mellifera bees. In total, 19 strains were isolated, 9 of which were identified by sequencing as Starmerella meliponinorum, 1 as Papiliotrema flavescens, 2 as Rhodotorula mucilaginosa, 2 as Candida apícola and 5 as Saccharomyces cerevisiae, being subjected to stress at 5% (v / v ) ethanol and 20% (w / v) glucose. Seven strains were selected and tested by tolerance for different concentrations of glucose, ethanol and sodium metabisulphite. S. cerevisiae JP14, IM8 and IP9 strains were selected as for the production of drinks. These strains were tested at temperatures of 15, 20, 25 and 30 ° C, JP14 and IM8 have proved being suitable for adaptation and fermentation at lower temperatures, the temperature of 20 ° C was characterized as ideal and common to all, providing mead with less acidity volatile , higher consumption of sugars and higher alcohol content. With the fixed temperature, the fermentation was begun during 35 days followed by 35 days of maturation, during this time, consumption of sugars, yeast count, turbidity, alcohol content, total acidity, volatile acidity, fixed acidity and volatile compounds were quantified. The best maturation time was 28 days under the conditions tested. The meads showed different profile of volatile compounds, and scores ranging from "I liked it slightly" and "I liked it moderately", however after the sensory analysis, testers didn't identified difference between them. Thus it was possible to develop with success ferments from isolated S. cerevisiae strains of stingless bee products for mead production, considered safe and unrestricted use in beverage production.
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Influência de lipídios, monensina e níveis de concentrado sobre a fermentação ruminal e desempenho em bovinos / Influence of Rumensin, soybean oil and levels of concentrate on the consumption and parameters of rumen fermentation in bovinesVargas, Luiz Henrique 22 March 2000 (has links)
Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-06T11:22:16Z
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Previous issue date: 2000-03-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O trabalho foi composto por dois experimentos, realizados no Departamento de Zootecnia da Universidade Federal de Viçosa. O primeiro teve o objetivo de avaliar o efeito de dois níveis de lipídios (3 e 7%) na dieta de vacas em lactação e, dentro do nível de 7%, o de duas de fontes de lipídios (grão de soja moído e óleo de soja) sobre a produção e composição do leite, os parâmetros ruminais, como ácidos graxos voláteis (AGV), pH ruminal e amônia, a atividade de produção de amônia pela população microbiana ruminal e o consumo de MS. Foram usadas seis vacas multíparas com grau de sangue variando de 1⁄2 holandês- zebu até HPC, com aproximadamente 30 dias pós-parto, peso vivo médio de 500 kg e produção média de 20 litros de leite/dia, distribuídas em dois quadrados latinos 3 x 3. Cada período experimental teve duração de 23 dias, e as vacas tiveram 16 dias para adaptação à dieta e sete para coleta de amostras ruminais. A produção de leite foi medida diariamente duas vezes, durante os períodos de coleta do 15 0 ao 23 0 dia de cada período experimental, fazendo-se uma amostragem do leite para análises de proteína e gordura. Para determinação da concentração de amônia, pH e AGV do líquido ruminal, as amostras foram coletadas manualmente, através de sonda esofágica, e filtradas em gaze. O pH foi determinado através de potenciômetro, as análises de amônia foram analisadas por colorimetria e os ácidos graxos voláteis por cromatografia gasosa. As produções de leite e leite corrigido para 4%, proteína, gordura, lactose, sólidos totais, sólidos desengordurados e densidade não foram afetadas pelo aumento de lipídios na dieta e nem pelas diferentes fontes de lipídios. Houve efeito depressivo do aumento de lipídios sobre a porcentagem de butirato e o consumo de MS, sendo o óleo de soja o que causou maior efeito. O pH sofreu acréscimo somente com a inclusão de grão de soja moído na dieta. Os níveis de acetato, propionato, A:P, isobutirato, isovalerato, amônia e atividade de produção de amônia também não sofreram efeito dos lipídios na dieta. O segundo experimento buscou avaliar a inclusão de óleo de soja (500 m l/animal/dia) e Rumensin ® (3 g/animal/dia) na dieta de animais que receberam níveis crescentes de concentrado (0, 25, 50 e 75%), tendo cana-de-açúcar como volumoso. Foram avaliados os efeitos sobre os parâmetros ruminais, como ácidos graxos voláteis (AGV), pH ruminal e amônia, a atividade de produção de amônia e o consumo de MS. Foram utilizados quatro bovinos 7/8 holandês-zebu, com peso vivo médio de 400 kg, fistulados no rúmen. Cada um dos quatro períodos teve duração de 15 dias, sendo 12 para adaptação à dieta e três para coletas de amostras. A determinação do consumo foi feita pesando-se as dietas fornecidas e as sobras no dia seguinte. A determinação da concentração de amônia, pH e AGV do líquido ruminal foi feita em amostras coletadas através da fístula e filtradas em gaze, nos tempos de 0, 3 e 6 horas após a alimentação. A leitura do pH foi feita com potenciômetro, as análises de amônia foram feitas por colorimetria, e as de ácidos graxos voláteis, por cromatografia gasosa. O teor de acetato decresceu, mas os teores de isobutirato, isovalerato e amônia e o consumo de matéria seca aumentaram com o aumento do nível de concentrado. O propionato aumentou e a relação acetato:propionato diminuiu com a presença de monensina. O óleo aumentou o butirato quando a dieta continha somente volumoso e diminuiu com o aumento de concentrado. O pH diminuiu com o tempo de coleta, e a atividade de produção de amônia decresceu com o aumento do nível de concentrado e aumentou na presença de óleo. / The experiment performed in the Departament of Zootechny at the Universidade Federal de Viçosa. The objective is evaluate the effect of two levels of lipids (3% and 7%) on the diet of cows in lactation, and within the level evaluate two the lipids sources (ground soybeans grain and soybean oil), on the production and composition of milk, the rumen parameters, such as, volatile fatty acids (VFA), rumen pH and ammonia, The ammonia production activity by the rumen microbial population and the comsumption of DM. Six multiparous cows were used, having blood degreesvarying from 1⁄2 Holstein-Zebu to HPC, at approximately 30 days after giving birth, with average live weight of 500kg and average production of 20 litres of milk/day, distributed in two 3x3 latin square. Each experimental period was of a 23-day duration, such that the cow had 16 days for adaptation to the diet and seven days for the collection of rumen samples. Milk production was measured twice daily during the collection periods from the 15 th to the 23 rd day of each experimental period, with samples taken for protein and fat analyses. To determine the ammonia, pH and VFA concentration of the rumen liquid, the samples were collected manually, through esophageal xfistula and filtered through gauze. The ph was determined using a potentiometer, the ammonia analyses were analyzed through colourimetry and the volatile fatty acid by gas chromatography. Milk production and milk corrected to 4%, proteins, fats, lactose, total solids, non-fatty solids and density were not affected by the increase of lipids in the diet and neither by the different lipid sources. There was a depressive effect of the lipids increase upon the butyrate porcentage and consumption of DM, with the soybean oil causing the greater effect. The pH showed na increase only with the inclusion of the ground soybeans grains in the diet. The levels of acetate, propionate, A:P, isobutyrate, isovalerate, ammonia and ammonia production activity also revealed no effect from the lipids in the diet.
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Seleção e identificação de leveduras para fermentação direta de amido de mandioca tipo industrial / Yeast selection to production of ethanol from industrial cassava’s starchDíaz Ramírez, María Ximena 18 May 2017 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-09-20T17:00:11Z
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Previous issue date: 2017-05-18 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O objetivo deste trabalho foi o isolamento de leveduras para produção de etanol a partir de amido de mandioca industrial, uma variedade adaptável a diversas condições climáticas e, portanto, cultivável em locais onde outros alimentos não poderiam ser produzidos. Para tanto, 62 isolados foram obtidos a partir de inhame, milho, batata inglesa e mandioca industrial e avaliados quanto á sua capacidade de produção de etanol em um meio contendo amido. O isolado N43, obtido de inhame, apresentou maior capacidade de conversão (> 6 g.L -1 de etanol), enquanto o isolado BB4, obtido de batata inglesa, foi o mais produtivo (0,78 g.L -1 .h -1 de etanol), seguido por MB9, obtido de mandioca. Eles foram identificados por sequenciamento do gene 26S como Cândida quercitrusa (N43), Pichia kudriavzevii (BB4) e Hanseniaspora opuntiae (MB9) e avaliados quanto à tolerância a meios contendo etanol. Nesse contexto, a levedura BB4 foi selecionada e utilizada para a definição de condições de processo visando a maiores rendimentos em etanol. Em geral, menores concentrações de amido no meio induziram maior produção de etanol (até 3,4 g.L -1 de etanol em 30 g.L -1 de amido). A modalidade de sacarificação e fermentação separadas (SHF) foi a que gerou maior quantidade de etanol após 96 h de processo, seguida pelo bioprocesso consolidado (CBP) e então sacarificação e fermentação simultâneas (SSF), mostrando a importância das condições de fermentação na produtividade dessa levedura e o potencial da BB4 em produzir enzimas amilolíticas. Os resultados evidenciam o potencial das matérias-primas amiláceas como fontes de leveduras para processos fermentativos, o que pode levar ao desenvolvimento de uma nova estratégia de baixo custo para a produção de biocombustíveis no Brasil. / The objective of this investigation was the yeast’s isolation for production of ethanol from industrial cassava’s starch, which is adapted to several climate conditions and, therefore, possible to cultivate where other kinds of food cannot. To do so, 62 isolates were obtained from yam, corn, England potato and industrial cassava and analyzed by their capacity of ethanol’s production in a medium containing starch. The isolate N43, obtained from yam, presented the highest capacity of conversion, while the isolates BB4 and MB9, obtained from England potato and cassava, respectively, were the most productive. The yeasts in these isolates were identified using a sequence of the gene 26S as Cândida quercitrusa (N43), Pichia kudriavzevii (BB4) and Hanseniaspora opuntiae (MB9) and then evaluated by their tolerance to media containing ethanol. In this sense, the BB4 yeast was selected and used to define the process conditions aiming a higher efficiency on ethanol production. In general, smaller concentrations of starch resulted in better yields. The Separated Hydrolysis & Fermentation (SHF) had the best yield in ethanol after 96 hours of process, followed by the Consolidated Bio-processing (CBP) and the Simultaneous Saccharification and Fermentation (SSF), respectively, showing the importance of the fermentation’s conditions in the yeast productivity and the BB4 potential to produce amylolitic enzymes. The results shows the starchy raw materials’ potential as yeast’s sources to fermentation process. The optimization of the conditions is essential to simplify the ethanol production from this yeast, which can help the developing of a new low cost process to produce biofuel in Brazil.
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Aproveitamento da casca do coco verde (Cocos Nucifera, L.) para produção de celulases / Utilization of green coconut shell (Cocos nucifera L.) for cellulase productionOliveira, Simone Lopes do Rêgo de January 2010 (has links)
OLIVEIRA, Simone Lopes do Rêgo de. Aproveitamento da casca do coco verde (Cocos Nucifera, L.) para produção de celulases. 67 f. : Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Ceará, Centro de Ciências Agrárias, Departamento de Tecnologia de Alimentos,Fortaleza-CE, 2010 / Submitted by Nádja Goes (nmoraissoares@gmail.com) on 2016-06-27T14:54:00Z
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Previous issue date: 2010 / Enzyme production by fermentative process is a broad field of biotechnology. In recent decades, there has been an increasing trend in the use of solid-state fermentation (SSF) for the production of some enzymes, especially those involved in the degradation of vegetables complex macromolecules. Regarding the enzyme market Brazil is consumer of imported products. In this scenario, the coconut shell emerges as a strategic raw material to reach the production of enzymes in the country. Thus, it is important to further on the use of coconut green shell powder as substrate for cellulolytic enzymes of interest in the food industry. Cellulase producing fungi used in this study were isolated from coconut shell. The results of enzyme activity obtained with the isolated strains from coconut shell were compared in terms of production capacity of cellulases with strains of Trichoderma polysporum, T. viride, T. reesei NRRL 11460 and Aspergillus niger NRRL 2001. From the results, the coconut shell waste can be considered a good inducer for cellulase production . The strain isolated from coconut shell (CZ01) is a good producer under solid-state fermentation because higher enzyme activity was obtained with its crude enzyme extract when compared with other enzyme producers, including a patented strain of T. reesei Rut C-30 (NRRL 11460), using the same inducer substrate. It is also worth mentioning that the majority of cellulase reported in the scientific literature are obtained under conditions of acidic pH and in this study the maximum enzyme activity was obtained at pH close to neutral (range 6.0 to 6.5). Therefore, the isolated and selected strain from the coconut shell (CZ01) showed good enzyme activity when compared with results obtained by other strains reported in the scientific literature, being therefore a very promising strain for the cellulase production enabling the use of this agroindustrial wastes. / A produção de enzimas por processos fermentativos é um vasto campo da biotecnologia. Nas últimas décadas tem-se observado um aumento na tendência do uso da fermentação semi-sólida para a produção de algumas enzimas, em especial aquelas envolvidas na degradação de macromoléculas vegetais complexas. No campo da comercialização de enzimas, o Brasil é consumidor de produtos importados. Neste cenário, a casca do coco verde surge como uma matéria-prima estratégica para alavancar a produção de enzimas em território nacional. Deste modo, torna-se importante um estudo mais aprofundado sobre o uso do pó da casca do coco verde como substrato para a obtenção de enzimas celulolíticas, sobretudo de interesse da indústria de alimentos. Os fungos produtores de celulases utilizados neste trabalho foram isolados da casca de coco. Os resultados de atividade enzimática obtidos com as cepas isoladas da casca do coco foram comparados quanto à capacidade de produção de celulases com linhagens de Trichoderma polysporum, T. viride, T. reesei NRRL 11460 e Aspergillus niger NRRL 2001. O resíduo da casca de coco verde como fonte alternativa para a produção de celulases se revelou como um ótimo substrato indutor, pois de acordo com os resultados obtidos, pode-se afirmar que a linhagem CZ01 (isolada da casca do coco) é boa produtora de celulases, pois cresceu facilmente em substrato semi-sólido lignificado, além de apresentar elevada atividade no extrato enzimático bruto, quando comparada com outros produtores enzimáticos, incluindo uma linhagem patenteada de T. reesei Rut C-30 (NRRL 11460), utilizando o mesmo substrato indutor. Vale ressaltar também, que a grande maioria das celulases reportadas na literatura científica são obtidas em condições de pH ácido e neste estudo a máxima atividade enzimática foi obtida na faixa de pH muito próximo da neutralidade (faixa de 6.0 a 6.5). Portanto, a linhagem selecionada e isolada da casca do coco (CZ01) apresentou boa atividade enzimática quando comparada com resultados obtidos por outras linhagens reportadas na literatura científica, tratando-se, portanto, de uma linhagem bastante promissora para a produção de celulases viabilizando o aproveitamento deste resíduo agroindustrial.
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Composição química, perfil fermentativo e populações microbianas em silagem de cana-de-açúcar tratada com inoculantes bacterianos / Chemical composition, fermentation profile and population of microorganisms in silage of sugarcane treated with bacterial inoculantsMoraes, Rodrigo Lopes de 09 July 2015 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-01-21T10:19:18Z
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Previous issue date: 2015-07-09 / O objetivo desse experimento foi avaliar a composição química, a população de microrganismos, o perfil fermentativo e a recuperação de matéria seca. A cana-de-açúcar foi submetida aos seguintes tratamentos antes da ensilagem: cana-de-açúcar sem inoculante (Controle); cana-de-açúcar com Lactobacillus buchneri (LB); cana-de-açúcar com Propionibacterium acidipropionici (PA); cana-de-açúcar com Propionibacterium acidipropionici e Lactobacillus plantarum (PALP); cana-de-açúcar com Lactobacillus buchneri e Propionibacterium acidipropionici (LBPA); cana-de-açúcar com Lactobacillus buchneri, Propionibacterium acidipropionici e Lactobacillus plantarum (LBPALP). Foi utilizado o delineamento inteiramente casualizado, com seis tratamentos e três repetições, totalizando 18 unidades experimentais. A cana-de-açúcar foi picada e ensilada em baldes de 20 kg, contendo válvulas de Bunsen, os quais foram abertos 90 dias após a ensilagem. Verificou-se que apenas o tratamento com L. buchneri proporcionou teor de MS semelhante ao da silagem controle (23,2%), que foi reduzido pelos demais tratamentos. Todos os tratamentos resultaram em teores de PB e NIDA/N-Total semelhantes aos da silagem controle, que foram 4,1% e 9,3%, respectivamente, e não afetaram os teores de fibra, cujas médias foram 61,4% de FDN e 38,6% de FDA. Não houve efeito de inoculante sobre a produção de efluente, cuja média foi 104,31 kg/t MN. Os tratamentos com PALP e LBPALP resultaram em menor recuperação de matéria seca que a silagem controle. Os teores de amônia e o pH foram incrementados pelos tratamentos com LBPA e LBPALP em relação à silagem controle (9,6% de amônia e pH de 3,28). Não houve diferença entre os tratamentos para as populações de bactérias do ácido lático e leveduras, cujos valores médios foram 9,06 e 4,27 log ufc/g, respectivamente. Foi observada maior população de mofos na silagem controle (2,88 log ufc/g), em relação a todas as silagens, porém, foi semelhante à tratada com LBPA. Foi verificado maior teor de ácido lático na silagem LBPALP em relação a controle (2,24%), que não diferiu das demais. Menor teor de ácido acético foi verificado na silagem controle (1,85%), que não diferiu da tratada com LB, sendo maiores valores obtidos com LBPA e LBPALP. Não verificou-se diferença para os teores de ácido butírico entre os tratamentos, cuja média foi 0,01%. A silagem com LBPA apresentou maior teor de etanol (6,15%) em relação à silagem controle e com PA e não diferiu das demais. Assim, conclui-se que os inoculantes e suas misturas não proporcionam resultados promissores em relação à composição química, perfil de fermentação e recuperação de matéria seca da silagem de cana- de-açúcar. / The objective of this study was to evaluate the chemical composition, the population of microorganisms, the fermentation profile and recovery of dry matter. The following additives was applied onto the fresh forage before ensiling: sugarcane chopped no additives (Control Treatment); Silage of sugarcane with Lactobacillus buchneri (LB); Silage of sugarcane with Propionibacterium acidipropionici (PA); Silage of sugarcane with Propionibacterium acidipropionici and Lactobacillus plantarum (PALP); Silage of sugarcane with Lactobacillus buchneri and Propionibacterium acidipropionici (LBPA); Silage of sugarcane with Lactobacillus buchneri, Lactobacillus plantarum and Propionibacterium acidipropionici (LBPALP). It was used a completely randomized design with six treatments and three repetitions, totaling 18 experimental units. The sugarcane was chopped and ensiled to 20 kg buckets, containing Bunsen valves and opened 90 days after ensiling. It was verified that only the treatment with L. buchneri provided DM content similar to the control silage (23.2%), which was reduced by others treatments. All treatments provided PB and NIDA levels similar to the control silage, which were 4.1% and 9.3%, respectively, and did not affect the fiber content, which averages 61.4% FDN and 38.6 % of FDA. There was no treatment effect on the production of effluent with an average 104.31 kg / t MN. The treatments with and PALP LBPALP provided lower dry matter recovery than the control silage (82.1%). The ammonia concentrations and pH were increased by treatments with LBPA and LBPALP relative to control silage (9.6% of ammonia and pH 3.28). There was no difference between treatments for the lactic acid bacteria and yeast, whose values were 9.06 and 4.27 log cfu / g, respectively. During this experiment, was observed greater population of molds in the control treatment (2.88 cfu / g log) than the others treatments, however, was similar to that treated with LBPA. It was found higher lactic acid content in silage LBPALP relative to control (2.24%), which did not differ from the others. The lowest acetic acid content was observed in the control silage (1.85%), which did not differ from untreated LB, greater value was obtained from LBPA and LBPALP. No difference was observed for butyric acid content between treatments, with an average 0.01%. The silage with LBPA showed higher ethanol content (6.15%) compared to the control silage and with PA and did not differ from others. Thus, it is concluded that inoculants and their mixtures did not provide promising results regarding the chemical composition, profile fermentation and recovery of silage dry matter sugarcane. / Sem lattes e agência de fomemento
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Produção de celulases por fermentação em estado sólido a partir de Melanoporia sp. e Mucor circinelloides utilizando bagaço de cana-de-açúcar como substrato / Celullase production by solid state fermentation from Melanoporia sp. and Mucor circinelloides using sugarcane bagasse as substrateMaciel, Tatiane Cavalcante 22 February 2013 (has links)
MACIEL, T. C. Produção de celulases por fermentação em estado sólido a partir de Melanoporia sp. e Mucor circinelloides utilizando bagaço de cana-de-açúcar como substrato. 2013. 91 f. Dissertação (Mestrado em Engenharia Química) - Centro de Tecnologia, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by Marlene Sousa (mmarlene@ufc.br) on 2014-01-02T14:22:28Z
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Previous issue date: 2013-02-22 / Sugarcane bagasse is a lignocellulosic residue obtained from sugarcane mechanical pressing for juice extraction. This biomass is abundant in Brazil because the country is the world’s largest manufacturer of sugar and ethanol. The use of sugarcane waste as substrate for enzymes production, such as cellulases, is an interesting and viable option since the production costs of these enzymes are high, which limits its industrial use. In this context, potential cellulase-producing strains have been extensively studied in order to develop less costly cellulolytic enzymes complexes. In this study, the production of cellulases by Mucor circinelloides. and Melanoporia sp through solid state fermentation of sugarcane bagasse and the effects of selected parameters for enzyme production were evaluated. The investigated physicochemical parameters associated with the growth of the microorganisms and enzyme production were: initial pH of the growth medium, temperature and time of enzyme production. Regarding nutritional parameters, the effect of Tween 80 and different sources of mineral salts and organic nitrogen and were studied. In addition, tests were performed in order to define the best combination of pH and temperature for the determination of enzyme activity. For M. circinelloides, the maximal enzyme activity (15.87 FPU / g) was achieved with a fermentation medium composed of 3g of sugarcane bagasse, 2mL of saline solution containing 0.1 g/L of CuSO4, 9.0 g/L of (NH4)2SO4 e 1.0 g/ L of KH2PO4 and 0.8% Tween 80 (v/v) at pH 5.48 incubated at 34.4 °C for 48 hours. The optimum combination of pH and temperature was at pH 6.5 and 60 °C. For Melanoporia sp. the higher enzymatic activity obtained was 14.21 FPU / g as a result of using 3g of sugarcane bagasse with the addition of 2mL of saline solution containing 9.0 g/L of (NH4)2SO4, 1.0 g/ L of KH2PO4 and 0.2% Tween 80 (v/v) at pH 6.28 and incubated at 30°C for 48 hours. The optimized conditions of pH and temperature for enzymatic activity determination were pH 7.0 and 60°C. The results demonstrated the high potential of the two strains under investigation, which presented the higher enzyme activity at pH in the neutral range. This result represents a technical advantage from the industrial viewpoint. / O bagaço de cana-de-açúcar é um resíduo lignocelulósico obtido a partir do esmagamento e moagem da cana-de-açúcar para extração do seu caldo. Esta biomassa é abundante no Brasil pois, o país é o maior produtor mundial de açúcar e etanol. O emprego deste resíduo como substrato, em processos fermentativos, para a produção de enzimas microbianas, como as celulases é uma opção viável e interessante, uma vez que o custo destas enzimas ainda é alto, o que tem limitado sua utilização industrial. O potencial produtor de celulases de diversos micro-organismos tem sido extensivamente estudado, a fim de desenvolver novos bioprocessos menos onerosos na produção de enzimas celulolíticas. No presente trabalho foram avaliadas a capacidade de produção de celulases, pelos micro-organismos Mucor circinelloides e Melanoporia sp., a partir da fermentação em estado sólido do bagaço de cana-de-açúcar e a influência de alguns parâmetros na produção da enzima. Foram investigados os seguintes parâmetros físico-químicos, relacionados com o crescimento do micro-organismo e produção da enzima: pH inicial do meio de crescimento, tempo e temperatura de produção da enzima. Quanto aos parâmetros nutricionais, o efeito do Tween 80 e de diferentes fontes de sais minerais e nitrogênio orgânico foram estudados. Além disto, foram realizados ensaios no intuito de definir a melhor combinação de pH e temperatura para a determinação da atividade enzimática. Para M. circinelloides, a atividade enzimática máxima (15,87 FPU/g) foi obtida utilizando-se 3 g de bagaço, com adição de 2,0 mL de uma solução contendo 0,1 g/L de CuSO4, 9,0 g/L de (NH4)2SO4, 1,0 g/L de KH2PO4 e Tween 80 a 0,8% (v/v) em pH 5,48. A temperatura e o tempo que resultaram na maior produção da enzima foram 34,4 °C e 48 horas, respectivamente. A maior atividade enzimática foi quantificada em pH 6,5 e 60 °C. Em relação ao Melanoporia sp., a atividade enzimática máxima alcançada foi 14,21 FPU/g como resultado da produção utilizando 3 g de bagaço, com adição de 2,0 mL de uma solução contendo 9,0 g/L de (NH4)2SO4, 1,0 g/L de KH2PO4 e Tween 80 a 0,2% (v/v) em pH 6,28. A produção máxima da enzima foi observada após 48 horas de fermentação a 30 °C. A maior atividade enzimática foi quantificada em pH 7,0 e 60 °C. Os resultados demonstraram o elevado potencial produtor de celulases pelas duas cepas fúngicas num curto período de tempo, apresentando maior atividade enzimática em pH próximo da neutralidade, consistindo num diferencial atrativo do ponto de vista industrial.
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